## 1. Общие положения.
1.1. Некробактериоз - острая контагиозная болезнь всех видов животных и птиц, проявляющаяся гнойно-некротическим распадом соединительной и мышечной тканей.
1.2. Возбудитель болезни Fusobacterium necrophorum - строгий анаэроб, представляет собой грамотрицательную неподвижную, не образующую спор полиморфную палочку.
1.3. Диагноз на некробактериоз ставят на основании клинических, эпизоотологических, патологоанатомических данных и результатов лабораторных исследований.
1.4. Для исследования в лабораторию направляют трупы мелких животных целиком, от крупных животных - пораженные ткани и части паренхиматозных органов с некротическими очагами.
Для прижизненного исследования из мест поражения берут соскобы на границе здоровой и некротизированной тканей. Материал направляют в свежем виде или консервируют 30%-ным раствором глицерина.
1.5. Исследование на некробактериоз включает микроскопию мазков из патологического материала, посевы на питательные среды и заражение лабораторных животных.
## 2. Микроскопическое исследование.
2.1. Из некротизированных тканей делают мазки и окрашивают по Муромцеву, Романовскому-Гимзе или синькой Леффлера, а также по Граму.
2.2. В мазках из патологического материала, взятого на границе здоровой и некротизированной тканей, возбудитель имеет вид грамотрицательных, а при окраске специальными методами - зернистоокрашенных нитей различной длины, в старых очагах - коротких палочек и даже кокков.
## 3. Бактериологическое исследование.
3.1. Высевы из патологического материала делают в среду Китта-Тароцци, МПБ и на МПА. Кроме того, можно использовать сывороточно-глюкозный агар (чашки с агаром помещают в анаэробные условия, которые создают одним из общепринятых методов).
Среду Китта-Тароцци перед посевом регенерируют - прогревают в кипящей водяной бане в течение 20 - 30 мин, после чего быстро охлаждают до 45 - 50 °C.
Посевы инкубируют при 37 - 38 °C до 5 сут, просматривая ежедневно.
3.2. На среде Китта-Тароцци F. necrophorum через 13 - 24 ч образует интенсивную муть вначале в нижних слоях среды, а позднее - и в верхних, газообразование очень слабое. Просветление бульона наступает на 5 - 8-е сут, при этом на дно пробирки выпадает крошковатый осадок.
При микроскопии мазков из культуры обнаруживают зернистоокрашенные длинные переплетающиеся нити, местами в них могут быть колбовидные расширения.
3.3. На чашках с сывороточно-глюкозным агаром в строго анаэробных условиях через 48 - 72 ч появляются мелкие росинчатые колонии, в дальнейшем колонии увеличиваются в размерах и принимают более очерченную круглую или продолговатую форму с зоной гемолиза.
В связи с тем, что получение чистой культуры F. necrophorum из первичного материала на плотных средах затруднительно, выделение ее целесообразно проводить биологическим методом.
## 4. Биологическое исследование.
4.1. Одновременно с посевами проводят заражение кролика. Из патологического материала готовят суспензию на физиологическом растворе 1:10. Полученную суспензию в дозе 0,5 - 1 мл вводят под кожу средней трети наружной поверхности уха. Для заражения можно использовать суточную бульонную культуру возбудителя в тех же дозах.
Наблюдение за зараженными животными ведут в течение 10 сут.
4.2. При наличии в патологическом материале или исследуемой культуре F. necrophorum у кролика на месте инъекции через 3 - 4 дня развивается некроз. Из очага некроза делают мазки и окрашивают, как описано в [п. 2.1](#p100011). При обнаружении в мазках зернистоокрашенных нитей, характерных для возбудителя некробактериоза, биопроба считается положительной.
5. Диагноз на некробактериоз считают установленным в случаях:
выделения из патологического материала культуры со свойствами, характерными для возбудителя некробактериоза, и развития некротического очага у кролика на месте введения суспензии исходного материала или культуры с последующим обнаружением в мазках из этого очага типичных микроорганизмов;
развития у зараженного кролика некротического очага на месте введения материала и обнаружения в мазках из него типичных микробов, даже при отсутствии роста возбудителя в посевах из исходного материала.
6. Срок исследования - до 10 дн.
---