--- title: "\"Методические указания к токсиколого-гигиеническому исследованию медицинских клеев, предназначенных для соединения мягких и костной тканей организма\"" issuer: "Министерство здравоохранения СССР" status: действует canonical: "https://bukva.ai/docs/metodicheskie-ukazaniya-k-toksikologo-minzdrav-sssr-ministerstvo" --- ## "Методические указания к токсиколого-гигиеническому исследованию медицинских клеев, предназначенных для соединения мягких и костной тканей организма" # "Методические указания к токсиколого-гигиеническому исследованию медицинских клеев, предназначенных для соединения мягких и костной тканей организма" (утв. Минздравом СССР 27.11.1985) > [!IMPORTANT] > Взамен Методических указаний, утв. 26 марта 1979 года.
Утверждены
Начальником Управления
по внедрению новых
лекарственных средств
и медицинской техники **Э.А.БАБАЯНОМ** 27 ноября 1985 года **МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**К ТОКСИКОЛОГО-ГИГИЕНИЧЕСКОМУ ИССЛЕДОВАНИЮ**
**МЕДИЦИНСКИХ КЛЕЕВ, ПРЕДНАЗНАЧЕННЫХ ДЛЯ СОЕДИНЕНИЯ**
**МЯГКИХ И КОСТНОЙ ТКАНЕЙ ОРГАНИЗМА**
Вводятся взамен утвержденных 26 марта 1979 года ## 1. ГИГИЕНИЧЕСКИЕ ТРЕБОВАНИЯ К КЛЕЯМ ДЛЯ СОЕДИНЕНИЯ ТКАНЕЙ ОРГАНИЗМА 1.1. Клей не должен оказывать раздражающего действия на месте введения и вызывать задержку репаративных процессов в тканях. 1.2. Клей не должен оказывать аллергенное и общетоксическое действие на организм. 1.3. Клей не должен оказывать токсическое действие на организм после стерилизации (если таковая предусматривается условиями применения). ## 2. ЭТАПЫ ИССЛЕДОВАНИЯ, ИХ ПОСЛЕДОВАТЕЛЬНОСТЬ #### 2.1 Санитарно-химические [исследования](#p100014). #### 2.2 Токсикологические исследования: - [исследования](#p100030) реакции окружающей ткани на имплантацию клея, исследование раздражающего действия и влияния на заживление ран; - [изучение](#p100044) аллергенного действия клеевой композиции; - [изучение](#p100053) общетоксического действия на организм. ## 3. САНИТАРНО-ХИМИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ КЛЕЕВЫХ КОМПОЗИЦИЙ ### 3.1. Определяемые химические соединения и используемые методы В модельной среде определяют наличие органических соединений интегральными методами по количеству окисляющихся и бромирующихся веществ, pH, остаточные количества исходных продуктов синтеза, технологических добавок. В случае если известны (либо предполагаются) продукты деструкции, проводится их определение (например, для клеев на основе эфиров цианакриловой кислоты определяются формальдегид, муравьиная кислота). Для определения мигрирующих в модельные среды веществ используются спектроскопические, хроматографические, колориметрические, полярографические, титрометрические и другие методы исследования. Конкретные методики определения веществ описаны в ряде руководств, приведенных в приложении к настоящему сборнику (не приводится). ### 3.2. Условия приготовления вытяжек из клеевых композиций Модельная среда - дистиллированная вода.
Соотношение веса образца к объему модельной среды 1:10 и 1:100 г/мл.
Примечание: второе разведение применяется при выраженной способности клея к набуханию и невозможности получения вытяжек при первом соотношении.
Экспозиция: 7, 14, 21, 30, 60 суток.
Температурный режим экстракции: 40 °C +/- 1,0 °C.
Режим приготовления вытяжек динамический: на каждом сроке вытяжки сливаются и анализируются. Тот же образец клеевой композиции заливается новой порцией модельной среды. ### 3.3. Оценка результатов санитарно-химических исследований При обнаружении миграции в модельную среду веществ, токсикологические характеристики которых известны, в количествах выше порога хронического действия при пероральном введении (либо выше ДКМ веществ, мигрирующих из пластмасс, контактирующих с пищевыми продуктами) делается вывод о несоответствии клея гигиеническим требованиям, а дальнейшее исследование его не проводится. Во всех остальных случаях (обнаружение уровней миграции ниже порога хронического действия веществ либо отсутствие достаточных данных о характере веществ, мигрирующих в модельную среду) проводятся токсикологические исследования. ## 4. ТОКСИКОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ### 4.1. Исследование реакции окружающей ткани на имплантацию клеевой композиции (исследование раздражающего действия и влияния на заживление ран) ##### 4.1.1 Условия проведения экспериментов. Опыты проводятся на белых крысах (самцах или самках). Используются три группы животных: опытная, первая контрольная - ложная операция с введением клея МК-7, вторая контрольная - ложная операция. В каждой группе по 15 животных при изучении клеевой композиции для мягких тканей и по 27 животных при исследовании костных клеев (по 3 животных на каждый срок наблюдения). Сроки наблюдений: 3, 7, 14, 21, 30 суток, для костного клея дополнительно 60, 90, 150, 180 суток. Доза клея: 100 мг/кг веса тела. Наркоз: нембуталовый, доза 40 мг/кг. Техника операции: подопытным крысам в области шеи делается продольный разрез кожи и мышц. В рану вводится клей, края мышечной раны смыкаются и зашиваются одним шелковым швом. Кожа зашивается также шелковой нитью. Контрольным животным первой группы проводится та же операция с введением клея МК-7. Во второй группе проводится та же операция без введения клея. В указанные выше сроки эфиром умерщвляется по три крысы из каждой группы. На исследование берут кусочек мышечной ткани в области, непосредственно прилежащей к имплантированному клею. Проводится гистологическое изучение тканей, при котором определяют наличие раздражающего действия, характер репаративных процессов (скорость, наличие клеточных элементов, развитие гранулом инородного тела), скорость рассасывания клея. Обязательными являются окраски гематоксилин-эозином (контроль общей реакции ткани) и окраска пикрофуксином по Ван-Гизону (контроль процесса развития коллагеновых волокон). 4.1.2. Оценка результатов изучения тканевой реакции на имплантацию клея. При обнаружении значительного воспаления, замедления репаративных процессов в сравнении с контролями, развития обширных гранулом инородного тела применение клеевой композиции запрещается, а дальнейшие исследования не проводятся. ### 4.2. Изучение аллергенного действия клеевой композиции ##### 4.2.1 Условия проведения экспериментов. Опыты проводятся на морских свинках. Используются две группы животных: опытная и контрольная. В каждой группе не менее 7 животных. Клеевая композиция оперативным путем в дозе 100 мг/кг веса тела вводится в мышцу левого бедра (техника операции описана в [разделе 4.1.1](#p100031)). Контрольным животным проводится ложная операция. Через 14 дней повторяется та же процедура, но клеевая композиция имплантируется в мышцу правого бедра. У животных до опыта, после первого и второго введения клеевой композиции исследуется реакция агломерации лейкоцитов. 4.2.2. Оценка результатов изучения аллергической реакции на имплантацию клея. При обнаружении аллергической реакции у подопытных животных применение клеевой композиции в медицинской практике запрещается, а дальнейшие исследования не проводятся. ### 4.3. Изучение общетоксического действия клеевой композиции ##### 4.3.1 Условия проведения экспериментов. Вид животных: I - подопытная, II - контрольная с введением клея МК-7, III - контрольная "ложная операция".
Количество животных в группе - 10 голов.
Продолжительность экспериментов:
для клеев, соединяющих мягкие ткани, - 4 месяца,
для костных клеев - 8 месяцев.
Сроки наблюдения: до операции, через 2 недели, 1, 2, 4, а для костных клеев 8 месяцев и 6 месяцев после имплантации.
Клеи для соединения мягких тканей имплантируются внутрибрюшинно, клеи для костных тканей внутримышечно. Техника операции при внутримышечной имплантации описана в [разделе 4.1.1](#p100031).
Техника внутрибрюшинной имплантации: под таким же наркозом [(п. 4.1.1)](#p100031) крысам делается послойный разрез кожи, брюшных мышц и брюшины величиной в 1,5 см. По стенке брюшины вводится клеевая композиция. С правой стороны под визуальным наблюдением прослеживается процесс полимеризации (5 мин.). По окончании полимеризации рана послойно зашивается шелковыми швами.
I контрольной группе животных вводится клей МК-7.
Контрольным - проводится оперативное вмешательство без введения клея.
У животных изучаются показатели состояния организма, характеризующие функции основных систем и органов: поведенческие реакции, общая реактивность, функции ЦНС, сердечно-сосудистой системы, белковый, углеводный, жировой обмен, состояние эндокринной системы, печени и почек. Рекомендуется использовать функциональные нагрузки для выявления скрытого периода развития интоксикации.
При наличии данных о миграции в модельную среду определенных химических соединений с известными токсическими свойствами, помимо перечисленных, исследуются те функции систем и органов, которые являются преимущественными точками приложения действия яда.
По окончании эксперимента проводятся макро- и микроскопические исследования следующих внутренних органов и тканей: печени, почек, сердца, селезенки, надпочечников, брюшины (для клеев, соединяющих мягкие ткани).
Оценивается общая гистоархитектоника внутренних органов (окраска гематоксилин-эозином), наличие жировой дистрофии (окраска Суданом-III), состояние волокнистых структур (окраска по Ван-Гизону).
##### 4.3.2 Оценка результатов.
Оценка результатов исследований проводится аналогично материалам для имплантации (методические указания, [п. 5](https://bukva.ai/docs/metodicheskie-ukazaniya-k-toksikologo#p100073)).
---