---
title: "\"Инструкция по применению набора для серологической диагностики лейкоза крупного рогатого скота\""
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/instruktsiya-po-primeneniyu-nabora-dlya"
---

## "Инструкция по применению набора для серологической диагностики лейкоза крупного рогатого скота"

# "Инструкция по применению набора для серологической диагностики лейкоза крупного рогатого скота"

(утв. Минсельхозом России, Россельхознадзором 07.05.2010)

(ред. от 21.06.2011)

> [!NOTE]
> ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

```mermaid
flowchart LR
  n0["Наставление по применению набора... (от 03.02.1997 N 13-7-2/846)"]:::rst
  click n0 "https://bukva.ai/docs/nastavlenie-13-7-2846" "Наставление по применению набора для серологической диагностики лейкоза крупного рогатого скота (утв. Минсельхозпродом России 03.02.1997 N 13-7-2/846)"
  n1["Инструкция по применению набора... (от 07.05.2010)"]:::doc
  click n1 "https://bukva.ai/docs/instruktsiya-po-primeneniyu-nabora-dlya" "Инструкция по применению набора для серологической диагностики лейкоза крупного рогатого скота (утв. Минсельхозом России, Россельхознадзором 07.05.2010)"
  n0 --> n1
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;
```


<a id="p100001"></a>Утверждена
7 мая 2010 года

<a id="p100002"></a>**ИНСТРУКЦИЯ**
**ПО ПРИМЕНЕНИЮ НАБОРА ДЛЯ СЕРОЛОГИЧЕСКОЙ**
**ДИАГНОСТИКИ ЛЕЙКОЗА КРУПНОГО РОГАТОГО СКОТА**


## <a id="p100003"></a>I. ОБЩИЕ СВЕДЕНИЯ


1. <a id="p100004"></a>Набор для серологической диагностики лейкоза крупного рогатого скота (КРС).
2. <a id="p100005"></a>Состав набора.


<table>
<colgroup><col width="45%"><col width="20%"><col width="9%"><col width="9%"><col width="9%"><col width="9%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100006"></a>Наименование компонентов</td><td rowspan="2"><a id="p100007"></a>Содержание ингредиента в единице упаковки</td><td colspan="4"><a id="p100008"></a>Количество единиц препарата в одном наборе, варианты</td></tr>
<tr><td><a id="p100009"></a>1-й</td><td><a id="p100010"></a>2-й</td><td><a id="p100011"></a>3-й</td><td><a id="p100012"></a>4-й</td></tr>
<tr><td><a id="p100013"></a>1. Антиген ВЛ</td><td><a id="p100014"></a>5,0 см3</td><td><a id="p100015"></a>4</td><td><a id="p100016"></a>1</td><td><a id="p100017"></a>4</td><td><a id="p100018"></a>16</td></tr>
<tr><td><a id="p100019"></a>2. Разбавитель антигена ВЛ</td><td><a id="p100020"></a>5,0 см3</td><td><a id="p100021"></a>4</td><td><a id="p100022"></a>1</td><td><a id="p100023"></a>4</td><td><a id="p100024"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100025"></a>3. Специфическая преципитирующая сыворотка - СПС</td><td><a id="p100026"></a>10,0 см3</td><td><a id="p100027"></a>4</td><td><a id="p100028"></a>1</td><td><a id="p100029"></a>4</td><td><a id="p100030"></a>4</td></tr>
<tr><td><a id="p100031"></a>4. Отрицательная контрольная сыворотка - ОКС</td><td><a id="p100032"></a>0,5 см3</td><td><a id="p100033"></a>1</td><td><a id="p100034"></a>1</td><td><a id="p100035"></a>-</td><td><a id="p100036"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100037"></a>5. Положительная контрольная сыворотка - ПКС</td><td><a id="p100038"></a>0,5 см3</td><td><a id="p100039"></a>1</td><td><a id="p100040"></a>1</td><td><a id="p100041"></a>-</td><td><a id="p100042"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100043"></a>6. Слабоположительная контрольная сыворотка - СПКС</td><td><a id="p100044"></a>0,5 см3</td><td><a id="p100045"></a>1</td><td><a id="p100046"></a>1</td><td><a id="p100047"></a>-</td><td><a id="p100048"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100049"></a>7. Положительная контрольная сыворотка с антителами к р-24 антигену - ВЛ-ПКСр24</td><td><a id="p100050"></a>0,5 см3</td><td><a id="p100051"></a>1</td><td><a id="p100052"></a>1</td><td><a id="p100053"></a>-</td><td><a id="p100054"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100055"></a>8. Смесь солевая агаровая - ССА</td><td><a id="p100056"></a>18,6 г</td><td><a id="p100057"></a>4</td><td><a id="p100058"></a>1</td><td><a id="p100059"></a>4</td><td><a id="p100060"></a>-</td></tr>
<tr><td><a id="p100061"></a>9. Разбавитель ССА</td><td><a id="p100062"></a>20,0 см3</td><td><a id="p100063"></a>4</td><td><a id="p100064"></a>1</td><td><a id="p100065"></a>4</td><td><a id="p100066"></a>-</td></tr>
</table>


<a id="p100067"></a>Набор выпускают в четырех вариантах комплектации. Варианты I и III рассчитаны на проведение 1000 исследований, вариант II на 250 исследований, вариант IV рассчитан на 4000 исследований. Комплектация наборов по вариантам осуществляется по согласованию с потребителем.
3. <a id="p100068"></a>Антиген вируса лейкоза - лиофилизированная гомогенная аморфная масса светло-коричневого цвета с красноватым оттенком. При добавлении разбавителя в объеме, соответствующем объему антигена до высушивания, содержимое флакона полностью растворяется в течение 10 мин без хлопьев и осадка и представляет собой опалесцирующую жидкость темно-красного цвета.
<a id="p100069"></a>Специфическая преципитирующая сыворотка (СПС) - прозрачная слегка опалесцирующая жидкость светло-желтого цвета или с розоватым оттенком. Допускается наличие небольшого осадка белка, легко разбивающегося при встряхивании.
<a id="p100070"></a>Разбавитель антигена вируса лейкоза КРС - прозрачная бесцветная жидкость без механических примесей.
<a id="p100071"></a>Контрольные сыворотки: ОКС, ПКС, СПКС и ПКСр24 представляют собой прозрачные жидкости светло-желтого цвета или бесцветные, образующие пену при встряхивании.
<a id="p100072"></a>Смесь солевая агаровая (ССА) представляет собой сухую смесь, содержащую два типа частичек: порошок агара и кристаллы хлористого натрия.
<a id="p100073"></a>Разбавитель ССА - прозрачная бесцветная жидкость.
4. <a id="p100074"></a>Антиген вируса лейкоза КРС и разбавитель антигена вируса лейкоза расфасовывают по 5 см3, а СПС - по 10 см3 во флаконы вместимостью 10 см3. Смесь солевую агаровую и разбавитель смеси солевой агаровой расфасовывают соответственно по 18,6 г и по 20 см3 во флаконы вместимостью 20 см3. Флаконы плотно закрывают резиновыми пробками и обкатывают алюминиевыми колпачками.
<a id="p100075"></a>Контрольные сыворотки (ОКС, ПКС, СПКС и ПКСр24) расфасовывают по 0,5 см3 во флаконы вместимостью 10 см3 или в ампулы вместимостью 2 см3. Ампулы запаивают, флаконы укупоривают резиновыми пробками и обкатывают колпачками.
5. <a id="p100076"></a>Маркированные флаконы устанавливают в маркированные картонные коробки с разделительными перегородками или любые другие, обеспечивающие их целостность.
<a id="p100077"></a>Срок годности набора - 2 года с даты выпуска при соблюдении условий хранения.
<a id="p100078"></a>Хранить набор в сухих, закрытых и темных помещениях при температуре от 2 до 8 °C.
<a id="p100079"></a>Транспортируют набор всеми видами крытого транспорта в условиях, исключающих замораживание и перегрев выше 25 °C.
<a id="p100080"></a>В каждую коробку вкладывают инструкцию по применению набора.
<a id="p100081"></a>По истечении срока годности препарат не должен применяться.


## <a id="p100082"></a>II. ПРИНЦИП МЕТОДА


6. <a id="p100083"></a>Принцип реакции иммунодиффузии заключается в том, что антигены и антитела, помещенные в лунки, диффундируют в геле агара и при взаимодействии образуют комплекс, который проявляется в виде линии преципитации.


## <a id="p100084"></a>III. ПОРЯДОК ПРИМЕНЕНИЯ


7. <a id="p100085"></a>Набор для серологической диагностики лейкоза крупного рогатого скота применяется для исследования сывороток крови в реакции иммунодиффузии (РИД) в геле агара с целью выявления антител против гликопротеидного антигена вируса лейкоза (ВЛ) крупного рогатого скота.
8. <a id="p100086"></a>Для постановки РИД необходимо смесь солевую агаровую, содержащуюся в одном флаконе, перенести в стеклянную колбу вместимостью 500 см3, прилить 20 см3 разбавителя смеси солевой агаровой (содержимое одного флакона) и 180 см3 дистиллированной воды (или воды очищенной). Колбу поставить на кипящую водяную баню и выдержать до полного расплавления агара. В каждую чашку Петри внести по 12,5 см3 расплавленного агара. При комплектации наборов по IV варианту реакцию иммунодиффузии проводить в 1%-ном агаровом геле, приготовленном на фосфатно-буферном растворе с pH 7,2 ... 7,6. Чашки оставить в течение часа с приоткрытыми крышками. При помощи штампа сделать отверстия (лунки) в геле агара, не допуская отслоения геля от дна чашки.
9. <a id="p100087"></a>В каждой чашке прорезать по 4 фигуры, каждая из которых состоит из 7 лунок (одна в центре, остальные 6 - по периферии). Диаметр каждой лунки 7 мм, расстояние между центральной и периферическими лунками - 3 мм. Образовавшиеся диски геля удалить из лунок канюлей, соединенной с вакуумным насосом (или любым другим способом).
10. <a id="p100088"></a>Лиофилизированный антиген ВЛКРС во флаконе растворить в 5,0 см3 соответствующего разбавителя (или 0,85% раствор натрия хлорида). Антиген растворяется в течение 10 мин без хлопьев и осадка. Растворенный антиген вносят в центральные лунки каждой фигуры.
11. <a id="p100089"></a>Заполнение периферических лунок СПС можно проводить по одной из схем, приведенных на [рисунках 17](#p100092) и 18. СПС вносят в две диаметрально расположенные периферические лунки (1-й вариант постановки РИД - [рис. 17](#p100092)) или в 3 периферические лунки, расположенные через одну (2-й вариант постановки РИД - [рис. 18](#p100093)). При выборе заполнения периферических лунок следует учитывать, что 2-й вариант расположения лунок облегчает выявление слабоположительных испытуемых сывороток, однако количество исследований одним и тем же объемом антигена сокращается на 25% по сравнению с 1-м вариантом.


| <a id="p100090"></a>![III. Порядок применения](https://i.bukva.ai/ZgVOHk4S/img_0.png) | <a id="p100091"></a>![III. Порядок применения](https://i.bukva.ai/ZgVOHk4S/img_1.png) |
| --- | --- |
| <a id="p100092"></a>Рис. 17 | <a id="p100093"></a>Рис. 18 |


12. <a id="p100094"></a>Чашки закрыть крышками и инкубировать при температуре (20 ... 26) °C. Через 48 ч осуществить учет реакции.
13. <a id="p100095"></a>При оценке результатов реакции с испытуемыми сыворотками прежде всего устанавливают специфичность образовавшихся линий преципитации. Специфической считают линию преципитации, которая образуется между лункой с испытуемой сывороткой и антигеном и плавно сливается с контрольной линией, т.е. идентична ей [(рис. 19)](#p100098). Неспецифической считают линию преципитации, которая формируется между лунками с испытуемой сывороткой и антигеном, но не сливается с контрольной линией преципитации, а пересекает ее или упирается в нее, образуя иногда шпору [(рис. 20)](#p100099) (реакция неидентичности).


| <a id="p100096"></a>![III. Порядок применения](https://i.bukva.ai/ZgVOHk4S/img_2.png) | <a id="p100097"></a>![III. Порядок применения](https://i.bukva.ai/ZgVOHk4S/img_3.png) |
| --- | --- |
| <a id="p100098"></a>Рис. 19 | <a id="p100099"></a>Рис. 20 |


<a id="p100100"></a>В зависимости от наличия в испытуемых сыворотках специфических антител против вируса лейкоза крупного рогатого скота и формой образовавшихся линий преципитации реакцию оценивают как отрицательную или как положительную.


## <a id="p100101"></a>IV. МЕРЫ ЛИЧНОЙ ПРОФИЛАКТИКИ


14. <a id="p100102"></a>Использование препарата не требует специальных мер предосторожности и не представляет опасности для здоровья человека.
15. <a id="p100103"></a>Препарат следует хранить в местах, не доступных для детей.


## <a id="p100104"></a>V. ПОРЯДОК ПРЕДЪЯВЛЕНИЯ РЕКЛАМАЦИЙ


<a id="p100105"></a>Контроль набора, поступившего с рекламацией, проводит организация-производитель, а при разногласиях в оценке качества набора между потребителем и производителем контроль проводит профильный отдел ФГУ "Всероссийский государственный Центр качества и стандартизации лекарственных средств для животных и кормов".
<a id="p100106"></a>Организация-производитель - Федеральное государственное унитарное предприятие "Курская биофабрика - фирма БИОК".
<a id="p100107"></a>Инструкция по применению набора для серологической диагностики лейкоза крупного рогатого скота разработана ФГУП "Курская биофабрика" (г. Курск, ул. Разина, 5).
<a id="p100108"></a>Рекомендовано к регистрации в Российской Федерации ФГУ "ВГНКИ". Регистрационный номер ПВР-1-1.2/00966.



<a id="p100109"></a>

---