Инструкция по мерам профилактики распространения инфекционных заболеваний при работе в клинико-диагностических лабораториях лечебно-профилактических учреждений

(утв. Минздравом СССР 17.01.1991)

Общие положения

С целью профилактики инфицирования медицинского персонала лечебно-профилактических учреждений особое значение имеет выполнение требований противоэпидемического режима.

Ответственность за организацию и соблюдение противоэпидемического режима при работе с потенциально опасным материалом возлагается на руководителя клинико-диагностической лаборатории (КДЛ).

Инструктаж среднего и младшего медицинского персонала проводится ответственным за технику безопасности не реже одного раза в квартал.

Инструкция составлена в соответствии с ОСТом 42-21-2-85 «Стерилизация и дезинфекция изделий медицинского назначения. Методы, средства и режимы», а также приказом Минздрава СССР (1989 г.) «О мерах по снижению заболеваемости вирусным гепатитом в стране».

I. Основные правила работы в КДЛ

Медицинскому персоналу КДЛ следует избегать контактов кожи и слизистых оболочек с кровью и другими биологическими жидкостями, для чего необходимо:

1. Работать в медицинских халатах, шапочках, сменной обуви, а при угрозе забрызгивания кровью или другими биологическими жидкостями — в масках, очках, клеенчатом фартуке.

2. Работать с исследуемым материалом в резиновых перчатках, все повреждения кожи на руках должны быть закрыты лейкопластырем или напальчником. Избегать уколов и порезов.

3. Проводить разборку, мойку, прополаскивание лабораторного инструментария, посуды после предварительной дезинфекции в резиновых перчатках.

4. В случае загрязнения кожных покровов кровью или другими биологическими жидкостями следует немедленно обработать их в течение 2 мин. тампоном, обильно смоченным 70% спиртом, вымыть под проточной водой с мылом и вытереть индивидуальным тампоном. При загрязнении перчаток кровью их протирают тампоном, смоченным 3% раствором хлорамина, 6% раствором перекиси водорода.

При подозрении на попадание крови на слизистые оболочки, их немедленно обрабатывают струей воды, 1% раствором протаргола; рот и горло прополаскивают 70% спиртом или 1% раствором борной кислоты или 0,05% раствором перманганата калия.

5. Запрещается есть, пить, курить и пользоваться косметикой на рабочем месте.

6. Запрещается пипетирование крови ртом; следует использовать автоматические пипетки, а при их отсутствии — резиновые груши.

7. Поверхность рабочих столов в конце каждого рабочего дня подвергается дезинфекции, а в случае загрязнения биологическим материалом — немедленно.

II. Способы взятия крови

Взятие крови следует проводить в резиновых перчатках, соблюдая правила асептики, обрабатывая перчатки 70% спиртом перед каждым взятием. Перед проколом кожу пальца обследуемого обрабатывают стерильным тампоном (шариком из ваты), смоченным 70% спиртом. После взятия крови к раневой поверхности прикладывают новый стерильный тампон, смоченный 70% спиртом. Извлекать скарификаторы следует только с помощью пинцета, хранящегося в растворе дезинфекционного средства.

Стерильные тампоны хранятся в упаковке из бумаги, указанной в ГОСТе 42-21-2-85, в количестве не более 20 штук. Стерильные лабораторные инструменты хранятся в той же упаковке, в которой проводилась их стерилизация. Существует несколько вариантов взятия крови для гематологического исследования.

I вариант. После прокола пальца несколько капель крови (не менее 3 — 4) спускают на индивидуальное предметное (часовое) стекло, перемешивают и используют для работы.

II вариант. Кровь набирают в индивидуальные, стерильные, предварительно выверенные капилляры объемом 20 мкл и капилляры Панченко непосредственно с поверхности кожи проколотого индивидуальным копьем пальца пациента.

III вариант. Кровь в количестве 40 мкл набирают стерильным индивидуальным капилляром Панченко, предварительно смоченным цитратом в соотношении цитрата и крови 1:4 по объему.

IV вариант. После прокола кожи пальца 6 — 8 капель крови спускают в пластиковую пробирку, в которую предварительно внесено небольшое (на кончике глазной лопаточки) количество трилона Б. Пробирку с кровью тщательно перемешивают, вращая ее между ладонями. Разлив крови пипетками по пробиркам осуществляется в лаборатории.

Компонент	Количество компонентов для приготовления 1 л моющего р-ра	Применение
1	2	3
Моющее средство «Биолот», г	3	При механизированной очистке (струйный метод)
Вода питьевая, мл	997,0
Моющее средство «Биолот», г	5
Вода питьевая, мл	995,0	При ручной очистке
Раствор перекиси водорода:		При механизированной очистке (струйный метод, использование ультразвука) и ручной очистке
27,5%	17 (978)
30,0%	16 (979)
33,0%
3,0%	160 (835)
Моющее средство «Прогресс», «Айна», «Астра», «Лотос», «Лотос-автомат», «Маричка», г
Моющее средство «Лотос», «Астра», «Прогресс», г	5	При механизированной очистке с использованием ультразвука
Вода питьевая, мл (куб. см)	995,0

Примечание: При использовании моющего средства, содержащего 0,5% перекиси водорода и 0,5% синтетического моющего средства и «Лотос» и «Лотос-автомат», применяют ингибитор коррозии — 0,14% олеат натрия (1,4 г на 1 л раствора). В скобках указано количество питьевой воды в мл.

Процесс при проведении очистки	Режим очистки				Применяемое оборудование
	температура град. C		время выдержки, мин.
	номинальное значение	предельное отклонение	номинальное значение	предельное отклонение
1	2	3	4	5	6
Замачивание в моющем растворе при полном погружении изделия при применении моющего средства «Биолот»	40	+5	15,0	1,0	Бачок, ванна, раковина
То же при применении моющего средства «Прогресс», «Астра», «Лотос», «Лотос-автомат», «Айна», «Маричка»	50	+5	15,0	+1,0	То же
Мойка каждого изделия в моющем растворе при помощи ерша и ватно-марлевого тампона		0,5	+0,1
Ополаскивание проточной водой:					Ванна, раковина с устройством для струйной подачи воды
- при применении моющего средства «Биолот»			3,0
- при применении моющего средства «Маричка», «Прогресс»			5,0	+1,0	То же
Ополаскивание проточной водой:
- при применении средств «Астра», «Лотос», «Айна», «Лотос-автомат»					10,0
Ополаскивание дистиллированной водой			0,5	+0,1	Бак, ванна
Сушка горячим воздухом	85	+2 -10	До полного исчезновения влаги		Сушильный шкаф

Примечания.

1. Температура раствора в процессе мойки не поддерживается.

2. Моющий раствор перекиси водорода с синтетическими моющими средствами, в том числе «Лотос», «Лотос-автомат», с ингибитором коррозии можно использовать в течение суток с момента изготовления, если цвет раствора не изменился. Неизмененный раствор можно подогревать до 6 раз, в процессе подогрева концентрация перекиси водорода существенно не изменяется.

3. Раствор моющего средства «Биолот», применяемый как при ручном, так и при механическом способе, используется однократно, так как при повторном использовании фермент, входящий в состав моющего средства, разрушается в процессе очистки.

III. Дезинфекция лабораторного инструментария, посуды, спецодежды, биоматериала, оборудования

Лабораторные инструменты, иглы, капилляры, предметные стекла, пробирки, меланжеры, счетные камеры, кюветы фотоэлектроколориметра, пипетки, наконечники, резиновые груши, баллоны и т.д., посуда после каждого использования должны подвергаться дезинфекции.

1. Использованные изделия промывают в емкости с водой. Промывные воды обеззараживают кипячением в течение 30 мин. или засыпают сухой хлорной известью, известью белильной термостойкой, нейтральным гипохлоритом кальция (НГК) в соотношении 200 г на 1 л, перемешивают и обеззараживают в течение 60 мин. Промытые изделия кипятят в закрытой емкости в воде в течение 30 мин. или в 2% растворе соды в течение 15 мин. (В случае кипячения изделий в 2% растворе соды дальнейшая предстерилизационная очистка не проводится.).

2. Лабораторные инструменты могут быть обеззаражены погружением в раствор с дезинфицирующим раствором.

В качестве дезинфицирующих используются следующие растворы: 3% раствор хлорамин, 6% перекись водорода, 6% перекись водорода с 0,5% моющего средства («Прогресс», «Астра», «Айна», «Лотос», «Лотос-автомат»), 4% формалин, 0,5% НГК, 0,5% сульфохлорантин; время обеззараживания 60 мин.

Дезинфицирующие растворы используются однократно.

Емкости для проведения дезинфекции должны быть четко маркированы, иметь крышки.

При дезинфекции изделий, имеющих внутренние каналы, растворы дезинфекционного средства в объеме 5 — 10 мл пропускают через канал с помощью груши для удаления остатков крови, сыворотки и пр., после чего изделия полностью погружают в дезинфицирующий раствор во вторую емкость.

При погружении инструментов в горизонтальном положении полости каждого инструмента должны быть заполнены дезинфицирующим раствором.

3. Каждая партия сухих хлорсодержащих дезинфектантов перед использованием должна подвергаться контролю на содержание активного хлора.

4. Посуду, соприкасающуюся с кровью или сывороткой и не предназначенную для последующего контакта с обследуемым, после дезинфекции промывают проточной водой для полного удаления дезинфектанта и проводят необходимую технологическую обработку.

5. Блоки кювет анализатора ФП, кюветы измерительной аппаратуры, пластиковые пробирки и т.д. обеззараживают только 6% раствором перекиси водорода и промывают проточной водой.

6. С предметных стекол с фиксированным и окрашенным мазком крови после проведения микроскопии удаляют остатки иммерсионного масла, стекла кипятят в мыльном растворе не менее 15 мин. до полного отхождения краски, затем промывают проточной водой, подсушивают на воздухе и протирают.

7. Остатки крови, мочи, спинномозговой жидкости и т.д., пробы, содержащие разведенную сыворотку без добавления кислот, щелочей сливают в специальную тару и обеззараживают сухой хлорной известью, известью белильной термостойкой, НГК в соотношении 1:5 в течение 1 ч. При удалении сгустков следует предварительно отделить материал металлическим шпателем, который затем обеззараживают. Посуду из-под мочи, кала обрабатывают по описанной выше методике, но ее можно не подвергать стерилизации.

8. При загрязнении кровью или секретами мебели, инвентаря, приборов, их следует немедленно дважды протереть ветошью, ватными или марлевыми тампонами, обильно смоченными дезинфицирующими растворами.

Использованную ветошь сбрасывают в специально выделенную емкость с дезинфицирующим раствором, маркированную «Для дезинфекции использованной ветоши».

9. При загрязнении кровью или секретами спецодежды ее снимают, предварительно обработав дезинфицирующим раствором участок загрязнения.

Стирка спецодежды на дому категорически запрещается. Смена спецодежды должна осуществляться не менее 2 раз в неделю.

10. Перчатки после окончания работы обеззараживают погружением в 3% раствор хлорамина или 6% раствор перекиси водорода на 1 ч. или кипячением в течение 30 мин.

11. Одноразовый инструментарий (плашки, наконечники, автоматических пипеток и т.д.) обеззараживают и утилизируют в паровом стерилизаторе при 2,0 кг/2 (132 град. C) в течение 60 мин.

IV. Предстерилизационная очистка

После дезинфекции лабораторный инструментарий, соприкасающийся с раневой поверхностью или слизистыми оболочками обследуемого, подлежит обязательной предстерилизационной очистке и стерилизации. Предстерилизационную очистку проводят с применением моющих растворов (табл. 1 и 2).

Количество предстерилизационной очистки изделий оценивают на наличие крови путем постановки бензидиновой или амидопириновой пробы, на наличие остаточных количеств щелочных компонентов моющего вещества — путем фенолфталеиновой пробы.

Самоконтроль в КДЛ проводят ежедневно, контролю подвергают не менее 1% от одновременно обработанных изделий одного наименования, но не менее 3 — 5 единиц.

При положительной пробе на кровь или моющее средство всю группу контролируемых изделий подвергают повторной обработке до получения отрицательных результатов.

После дезинфекции и предстерилизационной очистки проводят стерилизацию игл, шприцев, пробирок, пипеток, стеклянных палочек, стекол, меланжеров и т.д.

V. Режимы и условия стерилизации указаны в таблицах 3 — 5

Режим стерилизации. Рабочая температура в стерил. камере, град. C		Время выдержки мин.		Применяемость	Условия проведения стерилизации	Срок сохранения стерильности	Применяемое оборудование
номинальное значение	предельное отклонение	номинальное значение	предельное отклонение
1	2	3	4	5	6	7	8
180	от +2	60	+5	Для изделий из металла, стекла, силиконовой резины	Стерилизации подвергают сухие изделия. Стерилизацию проводят в упаковке из бумаги мешочной непропитанной и бумаги непропитанной и влагопрочной, бумаги для упаковки продуктов на автоматах марки Е, бумаги упаковочной высокопрочной, бумаги двухслойной крепированной или без упаковки в открытых емкостях	Изделия, простерилизованные в бумаге, могут храниться 3 сут. Изделия, простерилизованные без упаковки, должны быть использованы непосредственно после стерилизации	Воздушный стерилизатор

Примечания.

1. Капилляры, микропипетки, иглы-копья, предметные стекла помещают в бумажную упаковку в количестве не более 5 — 10 штук. Бумажная упаковка может быть использована не более 5 раз.

2. Иглы-копья можно стерилизовать в конических пробирках в количестве 5 — 10 штук. Копья укладывают острием вниз, пробирку закрывают сверху упаковочной бумагой.

3. Эффективность воздушной стерилизации зависит от равномерного распределения горячего воздуха в стерилизационной камере. При стерилизации изделий в воздушных стерилизаторах, не имеющих принудительной вентиляции (СС-200, СС-200М, ШСС-80), плотность загрузки не должна превышать 50% площади полок.

4. Стерилизуемые изделия необходимо укладывать горизонтально поперек пазов кассет, полок.

5. Загрузка стерилизатора навалом запрещена.

6. Режим работы стерилизатора контролируется ежедневно одним из химических индикаторов (винная кислота, гидрохинон, тиомочевина), индикаторы размещают на каждой полке в 5 точках: 1 — в центре, остальные — слева и справа у двери и задней стенки.

Давление пара в стерилизационной камере, кгс/кв. см		Рабочая температура в стерилизационной камере, град. C		Время стерилизационной выдержки, мин.			Применяемость	Условия проведения стерилизации	Срок сохранения стерильности	Применяемое оборудование
				При ручном	При автоматическом управлении
Номинальное значение	Предельное отклонение	Номинальное значение	Предельное отклонение	и полуавтоматическом управлении не менее	номинальное значение	предельное отклонение
0,20 (2,0) 0,11 (1,1)	+/-0,02 (+0,2) +/-0,02 (+0,2)	132 120	+/-2,0 +2	20 45	20 45	+2 +3	Для изделий из коррозионноустойчивого металла, стекла, изделий из текстильных материалов, резины. Для изделий из резины, латекса и отдельных полимерных материалов.	Стерилизацию производят в стерилизационных коробках без фильтров или с фильтрами, в двойной мягкой упаковке из бязи, в пергаменте, бумаге мешочной, непропитанной, бумаге мешочной влагопрочной, бумаге для упаковки продуктов на автоматах марки Е, бумаге упаковочной высокопрочной, бумаге двухслойной крепированной	Изделия, простерилизованные в стерилизационных коробках без фильтров, в двойной мягкой упаковке из бязи или пергаменте, в бумаге непропитанной и т.д. могут храниться 3 сут., в стерилизационных коробках с фильтром — 20 сут.	Паровой стерилизатор

Примечание к таблице 4. Режим работы стерилизатора контролируется химическими индикаторами (Д-манноза, никотинамид, бензойная кислота), запаянные в трубочки индикаторы укладывают в каждый бикс.

Стерилизующий агент	Режим стерилизации				Вид материала	Способ обработки	Применяемое оборудование
	Температура, град. C		Время выдержки, мин.
	Номинальное значение	Предельное отклонение	Номинальное значение	Предельное отклонение
Перекись водорода 6% (по активно действующему веществу)	Не менее 18 50	- +/-2	360 180	+/-5 +/-5	Для изделий из полимерных материалов, резины, стекла, коррозийно-устойчивых металлов	Стерилизация должна проводиться при полном погружении изделия в раствор на время стерилизационной выдержки, после чего изделие промывают стерильной водой двукратно. Срок хранения простерилизованного изделия в стерильной емкости (стерилизационная коробка), выложенной стерильной простыней, 3 сут.	Закрытые емкости из стекла, пластмассы или покрытые эмалью (эмаль без повреждений)
Раствор «Дезоксон» № 1 (по надуксусной кислоте)	Не менее 18	-	45	+/-5
Глютаровый альдегид фирмы «Реанал» (Венгрия), 2,5% (по активнодействующему веществу) pH 7,0 — 8,5	21	+/-1	360

Примечание к табл. 5: 1. 6% раствор перекиси водорода и 1% раствор «Дезоксон» № 1 повторно использовать для стерилизации изделий медицинского назначения нельзя. 2. Температура в процессе стерилизации не поддерживается. 3. Стерилизацию и промывание проводят в асептических условиях, соответствующих требованиям, предъявляемым к чистым операционным.

VI. Санитарное содержание помещений

1. Все помещения, оборудование, инвентарь должны содержаться в идеальной чистоте.

2. Влажная уборка помещений должна осуществляться с применением моющих и дезинфекционных средств не менее 1 раза в сутки, а при необходимости чаще.

3. Один раз в месяц в помещениях, где проводится работа с нативной кровью, сывороткой, делают генеральную работу с использованием 3% раствора хлорамина, хлорной извести, извести белильной термостойкой.

Во время генеральной уборки тщательно моют стены, оборудование, мебель, проводят очистку полов от наслоений, пятен и т.д.

Генеральные уборки проводят по утвержденному графику.

VII. Транспортировка и хранение биоматериала

1. При транспортировке биоматериал помещают в пробирки, закрывающиеся резиновыми пробками, сопроводительную документацию — в упаковку, исключающую возможность ее загрязнения биоматериалом. Бланки направлений помещать в пробирку с кровью запрещается.

2. Транспортировка биоматериала осуществляется в закрытых контейнерах, подвергающихся дезинфекционной обработке.

3. При открывании пробок бутылок, флаконов, пробирок с кровью, плазмой или другими секретами следует не допускать разбрызгивания содержимого.

4. При хранении потенциально инфицированных материалов в холодильнике необходимо поместить их в полиэтиленовый пакет.

В случае подтверждения зараженности биоматериала размораживание холодильника совмещают с его дезинфекцией.

5. При аварии (разбрызгивании зараженного биоматериала и т.д.) помещение, где произошла авария, тщательно дезинфицируют.

Объем и вид дезинфекции определяет руководитель КДЛ.

Если авария произошла на центрифуге, то дезинфекционные мероприятия начинают проводить не ранее чем через 30 — 40 мин., т.е. после осаждения аэрозоля. Все случаи аварий и принятые в связи с этим меры подлежат обязательной регистрации во внутрилабораторном журнале по технике безопасности.

6. Для ликвидации последствий аварии в лаборатории необходимо наличие аптечки, содержащей стерильные ватные и марлевые тампоны, 70% спирт, 1% раствор нитрата серебра, 1% раствор протаргола, 0,05% раствор перманганата калия, 1% спиртовой раствор йода, лейкопластырь.

---