Инструкция о медицинском освидетельствовании, учете и порядке получения крови от доноров службы крови, от доноров службы переливания крови и сети противокоревых пунктов
Актуально на 10.11.2026.
Как цитировать: "Инструкция о медицинском освидетельствовании, учете и порядке получения крови от доноров службы крови, от доноров службы переливания крови и сети противокоревых пунктов". https://bukva.ai/docs/instruktsiya-o-meditsinskom-osvidetelstvovanii
(утв. Минздравом СССР 03.05.1956)
Внимание
Документ утратил силу на территории Российской Федерации с 01.01.2021 в связи с изданием Постановления Правительства РФ от 04.07.2020 № 986.
ИНСТРУКЦИЯ
О МЕДИЦИНСКОМ ОСВИДЕТЕЛЬСТВОВАНИИ, УЧЕТЕ И ПОРЯДКЕ ПОЛУЧЕНИЯ КРОВИ ОТ ДОНОРОВ СЛУЖБЫ КРОВИ, ОТ ДОНОРОВ СЛУЖБЫ ПЕРЕЛИВАНИЯ КРОВИ И СЕТИ ПРОТИВОКОРЕВЫХ ПУНКТОВ
1. В донорские кадры зачисляются лица, изъявившие на то добровольное согласие. Донором может быть лицо не моложе 18 лет, при условии полного физического развития организма.
2. Лица, давшие добровольное согласие быть донорами, подвергаются детальному медицинскому освидетельствованию, производимому в учреждениях службы переливания крови, городских, районных донорских пунктах и на противокоревых донорских пунктах, а также в городских, районных поликлиниках или амбулаториях.
3. Лица, зачисленные в доноры, выдают расписку установленной формы в том, что они знают об ответственности за сокрытие заболевания сифилисом.
Форма подписки донора: «Даю подписку в том, что я не болел и не болею сифилисом. В случае заболевания указанной болезнью обязуюсь немедленно сообщить о том. Мне известно, что за сокрытие данного заболевания подлежу ответственности».
Зачисление в доноры производится на основании данных углубленного медицинского освидетельствования, результаты которого вносятся в «Индивидуальную донорскую карту» (журнал).
4. На каждого освидетельствуемого донора должна быть заведена «Индивидуальная донорская карта» (журнал) с фотокарточкой.
В журнал заносятся все данные медицинского освидетельствования и лабораторных анализов, которые регистрируются в книге для записи произведенных анализов. Кроме того, результаты анализов должны выдаваться на лабораторных бланках; они прилагаются к журналу и находятся в течение одного года при донорском журнале, затем могут быть переданы в архив отделения для постоянного хранения.
Все доноры должны являться на обследование и дачу крови с паспортом.
«Индивидуальная донорская карта» (журнал) является документом персонального учета доноров и хранится в учреждении, на учете которого состоят доноры.
При медицинском освидетельствовании первичных доноров в учреждениях службы переливания крови производится:
1. Полное клиническое обследование терапевтом и венерологом.
Собирается подробный анамнез и производится тщательный медицинский осмотр, причем особое внимание уделяется выявлению признаков сифилиса и начальной безжелтушной фазы эпидемического гепатита — болезни Боткина (поражение желудочно-кишечного тракта, увеличение печени и другие симптомы), а также выявлению бруцеллеза с учетом полиморфизма клиники этого заболевания.
а) В случае необходимости доноры направляются врачами, производящими осмотр, на консультацию к другим врачам-специалистам <1>.
<1> Доноры старше 55 лет подвергаются подробному обследованию по назначению врача.
2. Измерение артериального давления. При гипотензии с максимальным давлением ниже 90 мм взятие крови временно запрещается.
3. Полный клинический анализ крови. Количество гемоглобина у женщин должно быть не ниже 60% и у мужчин — не ниже 63%. При исчислении гемоглобина по новому гемометру ГС-2 нормы гемоглобина для доноров соответственно будут следующие: для женщин не ниже 11,8 г% (72% в условных единицах Hb) и для мужчин — 12,3 г% (75% в условных единицах Hb).
В зависимости от исчислений Hb по новому гемоглобинометру ГС-2, цветной показатель также будет выражаться в других цифрах, а именно может колебаться от 0,9 до 1,1. Количество эритроцитов не менее 4000000 у женщин, и 4250000 у мужчин.
Количество лейкоцитов от 4500 до 8500 в 1 куб. см.
Сегментоядерные нейтрофилы от 50 до 70% Палочкоядерные " 4% Эозинофилы " 4% Базофилы не более 1% Моноциты до 8% Лимфоциты от 20 до 30%
4. Определение групповой принадлежности крови с обозначением по Янскому, при помощи стандартных сывороток О(I), А(II), В(III) групп, двумя сериями каждой группы и стандартными эритроцитами.
5. Реакция оседания эритроцитов (РОЭ) для женщин должна быть в пределах 15 мм, для мужчин — 12 мм в течение одного часа по Панченкову.
Примечание. При повышении РОЭ, а также при других отклонениях от нормальных показателей картины крови, разрешается проведение повторного анализа через несколько дней (по указанию врача) и при нормальных данных донор допускается к даче крови.
6. Исследование крови на малярию в толстой капле (по эпидемическим показаниям).
7. Серологические реакции на сифилис — реакция Вассермана и две осадочные — производятся однократно не ранее чем за 12 дней до взятия крови. При заготовке противокоревой сыворотки серологические реакции производятся также однократно не ранее чем за 12 дней до взятия крови.
Наличие положительной, слабо положительной или сомнительной, хотя бы одной из серологических реакций является противопоказанием к донорству.
Примечание. В тех случаях, когда по техническим условиям срочное выполнение серологических реакций не всегда может быть произведено, взятие крови у донора без реакции Вассермана и двух осадочных реакций допускается при наличии жизненных показаний для срочного переливания крови с последующим анализом крови на реакцию Вассермана и две осадочные реакции. Врач обязан об этом поставить в известность больного или его родственников. В случае отсутствия родственников или невменяемости больного вопрос о необходимости переливания крови решает лечащий врач.
9. Рентгеноскопия грудной клетки.
10. Исследование крови на билирубин в пределах 5 дней до взятия крови.
Примечание. При исследовании крови на билирубин производится качественная реакция и количественное определение по видоизмененному методу Бакальчука (видоизмененная Центральным ордена Ленина институтом переливания крови и Ленинградским институтом переливания крови методика Бакальчука приложена к настоящей инструкции).
Содержание билирубина в сыворотке крови не должно превышать 0,64 мг% по видоизмененному методу Бакальчука или 0,8 мг% по методу ван ден Берга.
При наличии повышенного количества билирубина или при прямой реакции донор от дачи крови временно отстраняется. Такой донор должен быть подвергнут клиническому обследованию с повторным определением билирубина и находиться под наблюдением врача. Повторная проверка билирубина в сыворотке крови такого донора производится дважды с интервалами в 5 — 8 дней.
Если при двукратной проверке количество билирубина не превышает нормы и реакция прямая оказывается отрицательной, то донор допускается к даче крови на общих основаниях. В случае же, когда при повторной проверке количество билирубина остается повышенным или реакция остается прямой, донор отстраняется от дачи крови. При повышенном содержании билирубина в пределах 1,28 мг% по Бакальчуку или 1 мг% по ван ден Бергу, но при отрицательной прямой реакции допустимо использование донора, если при наблюдении за ним в течение месяца с двукратным врачебным осмотром и исследованием билирубина не будут выявлены клинические признаки заболевания печени и количество билирубина снизится до нормы.
11. В местностях, где по эпидемическим показаниям местные органы здравоохранения считают это необходимым, производится обследование доноров на бруцеллез: серологические реакции Райта или Хеддльсона и кожная проба Бюрне. Доноры, положительно реагирующие на пробы, к даче крови не допускаются.
Лица, ранее переболевшие бруцеллезом, к донорству допускаются после полного угасания сероаллергических реакций, при отсутствии клинических явлений.
Лица, вакцинированные и ревакцинированные, которые давали до вакцинации отрицательные реакции на бруцеллез, не могут быть донорами в первый месяц после вакцинации. В дальнейшем положительные реакции на бруцеллез не являются у них противопоказанием для взятия крови при условии предъявления справки о сроке прививки против бруцеллеза. Срок давности справки должен быть не свыше года.
При обследовании на бруцеллез доноры, положительно реагирующие на реакцию агглютинации (реакция Хеддльсона в разведении 1:200 и выше), при всех других отрицательных реакциях и отсутствии клинических данных должны быть повторно обследованы через один месяц только по реакциям агглютинации.
В случаях, когда при повторном обследовании титры реакции агглютинации повышаются или остаются не ниже 1:200, доноры не допускаются к взятию крови.
Титры реакции агглютинации 1:50 и 1:100 при всех других отрицательных реакциях и отсутствии клинических проявлений бруцеллеза не являются противопоказанием для взятия крови у донора.
В учреждениях службы переливания крови и сети противокоревых пунктов перед каждой дачей крови в пределах 12 дней производятся:
1. Обследование терапевтом и венерологом.
2. Измерение артериального давления (по назначению врача).
3. Определение содержания гемоглобина.
4. Реакция оседания эритроцитов.
5. В учреждениях службы переливания крови — серологические реакции на сифилис (реакция Вассермана и две осадочные).
6. Определение билирубина в крови в пределах 5 дней до взятия крови.
7. В местностях, где по эпидемическим показаниям донор обследуется на бруцеллез, перед каждой дачей крови производится реакция Райта или Хеддльсона. Реакция Бюрне производится один раз в год.
Противопоказаниями к зачислению в доноры службы переливания крови и сети противокоревых пунктов являются нижеследующие заболевания:
1. Сифилис врожденный и приобретенный, независимо от давности заболевания и результатов лечения.
Примечание. При наличии в анамнезе привычных выкидышей во второй половине беременности, мертворожденных необходимо заключение венеролога и гинеколога для решения вопроса о годности к донорству. Дополнительные исследования (клинические и лабораторные) проводятся по назначению врача, производящего осмотр донора.
4. Малярия при имевшихся лихорадочных приступах за последние два года.
а) Увеличение селезенки, определяемое пальпацией или перкуссией, служит противопоказанием даже при отсутствии каких-либо других признаков малярии. При медицинском освидетельствовании на станциях переливания крови лиц, страдавших малярией в прошлом или проживавших ранее в малярийной местности, производится в обязательном порядке двукратное исследование крови на малярию и полный морфологический анализ крови.
б) Кровь от доноров, прибывших из мест, пораженных малярией, а также указывающих на малярию в анамнезе, при условии отсутствия проявлений этого заболевания за последние два года, может быть применена для заготовки противокоревой сыворотки, а для переливания — только консервированная кровь со сроком хранения не менее 7 суток.
в) В местностях со значительным распространением малярии от всех доноров разрешается применять для целей переливания только консервированную кровь со сроком хранения не менее 7 суток.
г) В детской практике переливания свежезаготовленной крови разрешается переливать от одного донора только одному ребенку. Нескольким детям разрешается переливать от одного донора только по истечении 5 суток ее консервации.
5. Эпидемический гепатит (болезнь Боткина) независимо от давности перенесенного заболевания.
а) Лица, имевшие контакт в семье или в квартире с больным эпидемическим гепатитом, к донорству не допускаются в течение 3 месяцев и обследуются через 1 1/2 — 2 месяца со времени установления контакта (обследование проводится терапевтом с проверкой крови на билирубин).
б) При заготовке противокоревой сыворотки, полученной от доноров, находившихся в контакте с больными эпидемическим гепатитом, сыворотка хранится в течение 3 месяцев, пока наблюдается донор. Если донор остается здоровым и количество билирубина при проверке не превышает норму, сыворотка пускается в производство.
в) Технологический цикл приготовления противокоревой сыворотки занимает 40 — 45 дней (см. Инструкцию по приготовлению противокоревой сыворотки). Если донор, сыворотка которого входит в данную серию, заболевает острым гепатитом (болезнью Боткина) в течение одного месяца после дачи крови, серия сыворотки бракуется.
6. Резко выраженный упадок питания, витаминная недостаточность.
7. Гипертоническая болезнь в III стадии или с явлениями нарушения мозгового кровообращения. Грудная жаба, распространенный артериосклероз, кардиосклероз.
8. Эндокардиты, миокардиты, пороки сердца в стадии субкомпенсации и декомпенсации.
9. Злокачественные опухоли (при возникновении сомнении в диагнозе больной направляется на консультацию к специалистам).
10. Остеомиэлиты как острые, так и хронические. Деформация костей, подозрительная на сифилис или туберкулез.
11. Язвенная болезнь желудка и двенадцатиперстной кишки. Острый и хронический холецистит. Острый и хронический гепатит. Нефрозы, все диффузные поражения почек.
12. Инфекционные болезни. Взятие крови разрешается через 6 месяцев после выздоровления, а после брюшного тифа — по прошествии года при условии, что после полного клинического обследования не обнаруживается явно выраженных функциональных расстройств.
Примечание. После ангины и гриппа взятие крови возможно через месяц при условии отсутствия объективных клинических данных и при наличии нормального состава крови.
13. Перенесенные операции в виде удаления какого-нибудь органа (желудок, почка, желчный пузырь, селезенка, оба яичника, матка, рука, нога, оба глаза), а также по поводу злокачественных опухолей и эхинококка.
Примечание. Лица, перенесшие прочие операции, допускаются к донорству не ранее как через три месяца после операции при условии тщательного клинического контроля и представления справки о дате и характере операции из того лечебного учреждения, где она была произведена.
14. Наличие острых и хронических воспалительных процессов, независимо от их локализации.
15. Выраженное нарушение функции желез внутренней секреции и явные нарушения обмена веществ.
16. Органические поражения центральной нервной системы и психические болезни.
17. Отосклероз, эмпиемы придаточных пазух носа, озена.
18. Остатки ирита, иридоциклита, хореоидита, хореоретинита, аномалии развития, могущие иметь в основе врожденный сифилис, резкие изменения на дне глаза при миопии, паренхиматозный кератит.
19. Распространенное поражение кожи воспалительного, особенно инфекционного и аллергического характера, как-то: генерализованный псориаз, эритродермия, экземы, пиодермия, сикоз, красная волчанка, пузырчатые дерматозы, глубокие формы трихофитии и микроспории, фавус, распространенные и осложненные эпидермофитии.
21. Период беременности и лактации.
Через три месяца после окончания периода лактации женщина может быть донором.
В период менструации доноры не могут допускаться для дачи крови и подвергаться анализам крови. После менструального периода взятие крови может допускаться по истечении пяти дней.
22. При проведении профилактических прививок убитыми вакцинами взятие крови у доноров разрешается по истечении 10 дней после окончания прививок.
При профилактических прививках живыми вакцинами (бруцеллез, чума, туляремия, оспа, бешенство) взятие крови разрешается по истечении месяца после окончания прививок.
Все доноры, получившие профилактические прививки, должны представить справки из лечебных учреждений, по какому поводу были произведены прививки, с указанием даты прививки.
В каждом отдельном случае прививки против бешенства донор от дачи крови отстраняется на год.
V. ОБЩИЕ УКАЗАНИЯ
1. Для учета случаев отвода донора и во избежание одновременной дачи крови в нескольких пунктах в больших городах, где имеются две и больше станций переливания крови и противокоревых пунктов, следует создать при одном из этих учреждений централизованную картотеку для всех доноров города и завести единую донорскую книжку, в которой производить отметки станций переливания крови или противокоревых пунктов, где донор дает кровь.
2. В учреждениях службы переливания крови и сети противокоревых пунктов в день дачи крови производится измерение температуры и общий осмотр врачом донора.
Доноры, направляемые после обследования на дачу крови, регистрируются в книге регистрации доноров. При температуре 37° и выше взятие крови не допускается.
3. Перед взятием крови донор получает бесплатный завтрак, состоящий из сладкого чая и 150 г хлеба. После взятия крови донору предоставляется бесплатно высококалорийный обед из трех блюд.
4. При назначении взятия крови у доноров необходимо учитывать исходные данные картины крови.
У доноров женщин при гемоглобине до 64%, у мужчин до 65% запрещается брать более 300 мл крови. При гемоглобине у женщин 64% и выше, у мужчин 65% и выше разрешается брать 450 мл крови <1>. У первичных доноров во всех случаях брать не более 250 мл крови.
<1> При исчислении гемоглобина по новому гемометру ГС-2 это соответствует следующему: для доноров женщин — 12,5 г% (76% в условных единицах Hb), а для мужчин — 12,7 г% (77% в условных единицах Hb).
5. Последующее взятие крови у доноров допускается по истечении шести недель со дня последней дачи крови при условии ее восстановления. У доноров кровь может быть взята не более шести раз в год, после чего необходим трехмесячный перерыв в кроводаче.
Повторное подробное обследование доноров по типу первичного обследования (см. раздел II) должно производиться после шести дач крови и трехмесячного перерыва в кроводаче, но не реже одного раза в год.
6. Взятие крови у доноров в возрасте до 20 лет и выше 55 лет разрешается в дозе не более 350 мл.
7. При умеренной гипертонии взятие крови не более 250 мл.
8. При заготовке крови для фракционирования белков, получения эритроцитной массы, альбумина, гамма-глобулина, противокоревой сыворотки, тромбина, фибринных пленок и других препаратов крови к обследованию доноров предъявляются все требования, указанные в данной инструкции.
9. Все ранее утвержденные инструкции и циркулярные письма о порядке медицинского освидетельствования и использования доноров отменяются.
МЕТОДИКА БЫСТРОЙ СЕРОЛОГИЧЕСКОЙ ДИАГНОСТИКИ
Реакция Хеддльсона специфична. Она появляется одновременно с реакцией Райта уже в первые дни заболевания и сохраняется дольше последней. Преимущество реакции Хеддльсона перед реакцией Райта заключается в большей чувствительности ее, в простоте постановки и в быстроте получения ответа.
1. Кровь берется из локтевой вены или из пальца.
2. Испытуемая сыворотка должна быть совершенно прозрачна (без эритроцитов) и применяется не позднее 3 — 4 дней после взятия крови.
3. Реакция ставится на обычном тщательно вымытом, совершенно сухом, вытертом фильтровальной бумагой стекле.
4. В качестве антигена для реакции применяется специально приготовленный антиген Хеддльсона.
5. Реакция Хеддльсона ставится всегда с двумя контролями:
а) контроль сыворотки ставится с каждой испытуемой сывороткой для исключения спонтанного образования хлопьев из сыворотки;
б) контроль антигена ставится один при любом числе испытуемых сывороток для исключения спонтанной агглютинации применяемого антигена.
Схема постановки реакции Хеддльсона следующая: стекло, на котором производится реакция, расчерчивается в длину на 7 квадратов величиной примерно 4 см каждый. На первом квадрате слева записывается номер испытуемой сыворотки, а последующие квадраты разливается микропипеткой или градуированной пипеткой объемом в 1 мл) испытуемая сыворотка в следующих количествах: 0,08, 0,04, 0,02, 0,01 и 0,02 мл (контроль сыворотки). К первым четырем дозам сыворотки добавляется пипеткой (объемом в 1 мл) по одной капле антигена Хеддльсона (что составляет примерно 0,03 мл антигена). К последней дозе сыворотки добавляется одна капля физиологического раствора. Сыворотка осторожно смешивается с антигеном стеклянной палочкой, начиная с минимальной дозы сыворотки. Контроль антигена ставится с добавлением 0,03 мл физиологического раствора и 0,03 мл антигена. Затем стекло равномерно подогревается над пламенем спиртовки, так, чтобы происходило нагревание всей поверхности стекла примерно до 37° (около 2 минут). В случаях положительной реакции в первые же минуты появляются ясные хлопья. Максимальный срок наблюдения 8 минут.
При сопоставлении результатов реакции Хеддльсона и реакции Райта дозировка сыворотки по реакции Хеддльсона 0,08, 0,04, 0,02, 0,01 мл условно приравнивается к следующим разведениям по реакции Райта 1:50, 1:100, 1:400.
Основанием для этого послужило то, что положительная агглютинация по Хеддльсону при дозе сыворотки 0,08 мл появляется обычно тогда, когда титр реакции Райта равен 1:50.
МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ БИЛИРУБИНА В КРОВИ ДОНОРОВ
Миниметрический метод Бакальчука в модификации,
разработанной Центральным ордена Ленина институтом
гематологии и переливания крови и Ленинградским
институтом переливания крови
При отборе доноров необходимо качественное и количественное определение билирубина крови.
Инактивация сыворотки не влияет на реакцию определения билирубина, поэтому после постановки комплекса серореакций на сифилис остатки инактивированной сыворотки (прогретой в течение 30 минут при 56°) могут быть использованы для определения билирубина. В случае невозможности сделать реакцию в этот же день сыворотку следует оставлять на ночь не в термостате, а в холодильнике. Наличие гемолиза в сыворотке затрудняет оценку результатов реакции определения билирубина, поэтому в случае гемолиза (при отсутствии соответствующего опыта) лучше употреблять другую порцию сыворотки.
Для массового определения билирубина у доноров удобно пользоваться штативами, рассчитанными на 10 сывороток, от 10 доноров, по 5 гнезд на каждую сыворотку, составляющих одну серию исследований (5 x 10 = 50 отверстий в каждом штативе).
Пробирки первого ряда (каждая первая пробирка в серии) предназначаются для качественного определения билирубина; в них производится прямая реакция, другими словами, определяется застойный билирубин. В последующих пробирках, т.е. второй, третьей и четвертой, производится количественное определение общего билирубина, т.е. билирубина, дающего прямую и непрямую реакцию обоих вместе (застойного и гемолитического). Во все пробирки наливают физиологический раствор: в пробирки первого ряда по 1 мл, во все остальные по 0,5 мл.
Разливка сывороток производится одной пипеткой в следующем порядке: градуированной пипеткой (емкостью 1 — 2 мл) набирают 1 мл исследуемой сыворотки и разливают в первую и вторую пробирки по 0,5 мл (при недостаточном количестве сыворотки в пробирки первого ряда можно брать несколько меньше, чем 0,5 мл, что почти не отражается на дальнейшем ходе реакции). После добавления сыворотки в первую и вторую пробирки содержимое второй пробирки перемешивают повторным насасыванием жидкости в пипетку и переносят 0,5 мл в третью пробирку, размешивают и т.д. до последней, пятой, где остается 1 мл смеси. Затем пипетку дважды ополаскивают физиологическим раствором и описанным образом той же пипеткой производят разливку следующих сывороток.
После разлива сывороток во все пробирки, кроме пятого ряда, добавляют по 0,3 мл диазореактива Эрлиха и содержимое пробирок перемешивают сильным встряхиванием штатива. Затем в пробирки второго, третьего и четвертого ряда наливают по 0,5 мл спирта для выявления непрямого билирубина и пробирки сильно и продолжительно встряхивают; при этом выпадает осадок или муть от свертывающихся белков. В последний, пятый ряд не добавляется ни спирта, ни диазореактива (экономия реактивов). Этот ряд пробирок с наибольшим разведением сыворотки используется в случае необходимости продолжать разведение при высоком содержании билирубина.
Оценка результатов реакции производится дважды — через 3 минуты и через 10 минут после добавления диазореактива и спирта.
Результаты качественной реакции определяются по пробиркам первого ряда. Изменение цвета в этих пробирках на розовато-лиловатое окрашивание указывает на прямую реакцию. Прямая реакция различается по скорости появления характерного окрашивания: прямая реакция обозначается как быстрая, если изменение окраски наступает до 3 минут (обычно в первые 30 секунд), и замедленная, если изменения окраски наблюдаются по истечении 3 минут, до 10 минут, но не дольше. Окраска, появляющаяся после 10 минут, например к 30 минутам, во внимание не принимается.
Результаты количественной реакции определяются по изменению цвета во втором, третьем и четвертом рядах от 3 до 10 минут после добавления спирта.
В каждой серии пробирок, относящихся к одной сыворотке, просмотр ведут, начиная со второй пробирки. Замечают пограничную пробирку в смысле появления в ней розовой окраски, т.е. ту пробирку, содержимое которой еще окрашено в розовый цвет, и в следующей, за которой уже не замечается окраски (т.е. осадок белка, муть или прозрачный раствор не окрашены в розовый цвет). Обычно это пограничное розовое окрашивание бывает во второй или третьей пробирке, порядковый номер этой пробирки в серии указывает на разведение крови в ней: вторая — вдвое, третья — в 4 раза, четвертая — в 8 раз (см. таблицу).
ВЫЧИСЛЕНИЕ КОЛИЧЕСТВА БИЛИРУБИНА В СЫВОРОТКЕ
КРОВИ ПРИ УСЛОВИИ, ЧТО ДАННАЯ ПРОБИРКА
ПОСЛЕДНЯЯ, ОКРАШЕННАЯ В СЕРИИ
| № пробирки | Разведено | Содержание билирубина в неразделенной сыворотке в мг% | |
| Первая Вторая | - 2 | 0,16 0,42 | |
| Третья Четвертая | 4 8 | 0,64 1,28 | |
| Пятая | 16 | 2,56 | |
| Шестая | добавоч- | 32 | 5,12 |
| Седьмая | ные | 54 | 10,24 |
| Восьмая | 128 | 20,48 | |
В случае гемолизированной или липемичной сыворотки появляется грязно-серое или буроватое окрашивание, которое не может считаться характерным для билирубина. В этих случаях следует обязательно проверять качество употреблявшейся для реакции сыворотки и повторить реакцию с вновь взятой кровью.
Для того чтобы вычислить концентрацию билирубина в сыворотке, надо знать, что минимальная концентрация, которая дает еле заметный розовый цвет при диазореакции в описанной постановке опыта, равняется 0,15 мг% билирубина.
Умножая эту концентрацию билирубина на разведение сыворотки в отмеченной пробирке, получают концентрацию билирубина в исследуемой сыворотке. Таблица позволяет узнать содержание билирубина в сыворотке без вычисления.
Если в четвертой пробирке (что случается редко) имеется розовое окрашивание, то, используя жидкость из пятой пробирки, приготовляют дальнейшие разведения в шестую и седьмую пробирки. Теперь в пятую и шестую добавляют диазореактива, спирта и отмечают результат.
- Следы розового окрашивания отмечены в третьей пробирке, а в четвертой никакого розового окрашивания нет; имея в виду, что в третьей пробирке сыворотка разведена в четыре раза (см. таблицу), умножаем 0,16 мг% на 4 и получаем 0,64 мг%.
Диазореактив готовится смешением двух растворов:
1 г сульфаниловой кислоты растворяется в 0,5 л дистиллированной воды, прибавляется 15 мл концентрированной соляной кислоты (удельный вес 1,19) и добавляется дистиллированная вода до 1 л.
0,5 г азотистокислого натрия растворяется в 100 мл дистиллированной воды; этот раствор следует чаще приготовлять свежим, он плохо хранится.
Смесь обоих реактивов готовят непосредственно перед самим определением билирубина. Для этого смешивают 10 мл реактива № 1 и 0,3 мл реактива № 2.
Как видно из сказанного, при описанном методе определения билирубина при выбранных разведениях сыворотки в 2, 4, 8 раз мы не имеем возможности определять промежуточные концентрации билирубина, например между 0,64 мг% и 1,28 мг%.
Этот метод не дает возможности точного определения количества билирубина, которое можно получить методом Гиманс ван ден Берга и др.
Однако для целей отбора доноров это не так важно; для принятия донора необходимо, чтобы в четвертой пробирке, соответствующей при пограничном окрашивании 1,28 мг% билирубина, не было красноватой окраски и чтобы в первой пробирке с качественной пробой раствор оставался бы также бесцветным в течение 10 минут.