---
title: "\"ГОСТ Р ИСО 10272-1-2010. Национальный стандарт Российской Федерации. Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Часть 1. Метод обнаружения Campylobacter spp.\""
number: "ГОСТ Р ИСО 10272-1-2010"
issuer: "Федеральное агентство по техническому регулированию и метрологии"
status: утратил силу
canonical: "https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-10272-1-2010"
---

## "ГОСТ Р ИСО 10272-1-2010. Национальный стандарт Российской Федерации. Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Часть 1. Метод обнаружения Campylobacter spp."

# "ГОСТ Р ИСО 10272-1-2010. Национальный стандарт Российской Федерации. Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Часть 1. Метод обнаружения Campylobacter spp."

(утв. и введен в действие Приказом Росстандарта от 26.11.2010 N 546-ст)

> [!WARNING]
> Документ утратил силу с 15 февраля 2015 года в связи с изданием Приказа Росстандарта от 27.06.2013 N 227-ст.
> Взамен введен в действие [ГОСТ ISO 10272-1-2013](https://bukva.ai/docs/gost-iso-10272-1-2013).
> Документ утратил силу с 15 февраля 2015 года в связи с изданием Приказа Росстандарта от 27.06.2013 N 227-ст. Взамен введен в действие [ГОСТ ISO 10272-1-2013](https://bukva.ai/docs/gost-iso-10272-1-2013).
> Документ [введен](#p100011) в действие с 1 января 2012 года.

> [!NOTE]
> ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

```mermaid
flowchart LR
  n0["ГОСТ Р ИСО 10272-1-2010"]:::rst
  click n0 "https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-10272-1-2010" "ГОСТ Р ИСО 10272-1-2010. Национальный стандарт Российской Федерации. Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Часть 1. Метод обнаружения Campylobacter spp. (утв. и вв"
  n1["ГОСТ ISO 10272-1-2013"]:::doc
  click n1 "https://bukva.ai/docs/gost-iso-10272-1-2013" "ГОСТ ISO 10272-1-2013. Межгосударственный стандарт. Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Методы обнаружения и подсчета бактерий Campylobacter spp. Часть 1. Метод."
  n0 --> n1
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;
```


<div align="right">

<a id="p100001"></a>УТВЕРЖДЕН и введен в действие<br>
Приказом Федерального<br>
агентства по техническому<br>
регулированию и метрологии

</div>

от 26 ноября 2010 г. N 546-ст

<a id="p100002"></a>**НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ**

<a id="p100003"></a>**МИКРОБИОЛОГИЯ ПИЩЕВЫХ ПРОДУКТОВ И КОРМОВ ДЛЯ ЖИВОТНЫХ**

<a id="p100004"></a>**ЧАСТЬ 1**

<a id="p100005"></a>**МЕТОД ОБНАРУЖЕНИЯ CAMPYLOBACTER SPP.**

<a id="p100006"></a>Microbiology of food and animal feeding stuffs. Part 1.
Method for detection of Campylobacter spp.

<a id="p100007"></a>**ISO 10272-1:2006**
Microbiology of food and animal feeding
stuffs - Horizontal method for detection and enumeration
of Campylobacter spp. - Part 1: Detection method
**(IDT)**

<a id="p100008"></a>**ГОСТ Р ИСО 10272-1-2010**

<a id="p100009"></a>Группа Н09

<div align="right">

<a id="p100010"></a>ОКС 07.100.30,

</div>

67.040

<div align="right">

<a id="p100011"></a>Дата введения

</div>

1 января 2012 года


### <a id="p100012"></a>Предисловие


<a id="p100013"></a>Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от 27 декабря 2002 г. N 184-ФЗ "О техническом регулировании", а правила изменения национальных стандартов Российской Федерации - ГОСТ Р 1.0-2004 "Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения".


### <a id="p100014"></a>Сведения о стандарте


1. <a id="p100015"></a>Подготовлен ОАО "Всероссийский научно-исследовательский институт сертификации" (ОАО "ВНИИС") на основе собственного аутентичного перевода на русский язык международного стандарта, указанного в [пункте 4](#p100018).
2. <a id="p100016"></a>Внесен Техническим комитетом по стандартизации ТК 335 "Методы испытаний агропромышленной продукции на безопасность".
3. <a id="p100017"></a>Утвержден и введен в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 26 ноября 2010 г. N 546-ст.
4. <a id="p100018"></a>Настоящий стандарт является идентичным международному стандарту ИСО 10272-1:2006 "Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Горизонтальный метод обнаружения и подсчета бактерий Campylobacter spp. Часть 1. Метод обнаружения" (ISO 10272-1:2006 "Microbiology of food and animal feeding stuffs - Horizontal method for detection and enumeration of Campylobacter spp. - Part 1: Detection method").
<a id="p100019"></a>Наименование настоящего стандарта изменено относительно наименования указанного международного стандарта для приведения в соответствие с ГОСТ Р 1.5-2004 (пункт 3.5).
<a id="p100020"></a>Сведения о соответствии ссылочных международных стандартов ссылочным национальным стандартам Российской Федерации (и действующим в этом качестве межгосударственным стандартам) приведены в дополнительном [Приложении ДА](#p100357).
5. <a id="p100021"></a>Введен впервые.

<a id="p100022"></a>Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячно издаваемых информационных указателях "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет.


### 1. <a id="p100023"></a>Область применения


<a id="p100024"></a>Настоящий стандарт устанавливает метод обнаружения Campylobacter spp. и распространяется на продукцию, предназначенную для потребления человеком или кормления животных. Настоящий стандарт может быть использован при оценке окружающей среды при производстве пищевой продукции и обращении с ней.


### 2. <a id="p100025"></a>Нормативные ссылки


<a id="p100026"></a>В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:
<a id="p100027"></a>ИСО 6887 (все части). Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Приготовление испытуемых проб, исходных суспензий и десятичных разведений для микробиологических исследований
<a id="p100028"></a>ИСО 7218. Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Общие правила микробиологических исследований
<a id="p100029"></a>ИСО 8261. Молоко и молочные продукты. Общие правила приготовления испытуемых проб, исходных суспензий и десятичных разведений для микробиологических исследований
<a id="p100030"></a>ИСО/ТУ 11133-1. Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Правила приготовления и производства питательных сред. Часть 1. Общие правила по обеспечению качества приготовления питательных сред в лаборатории
<a id="p100031"></a>ИСО/ТУ 11133-2. Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Руководящие положения по приготовлению и производству питательных сред. Часть 2. Практические руководящие положения по определению эффективности питательных сред.


### 3. <a id="p100032"></a>Термины и определения


<a id="p100033"></a>В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями:
<a id="p100034"></a>3.1. Campylobacter (Campylobacter): микроорганизмы, образующие характерные колонии на твердой селективной среде, когда их инкубируют микроаэробным способом при температуре 41,5 °C, но не при 25 °C, которые обладают характерной подвижностью, биохимическими свойствами и способностью к росту, описанными в тех случаях, когда испытания проводят в соответствии с настоящим стандартом.
<a id="p100035"></a>*Примечание.* Наиболее часто встречающимися видами являются Campylobacter jejuni и Campylobacter coli. Вместе с тем были описаны и другие виды (Campylobacter lari, Campylobacter upsaliensis и некоторые другие).

<a id="p100036"></a>3.2. Обнаружение Campylobacter (detection of Campylobacter): определение присутствия или отсутствия рассматриваемых микроорганизмов в определенном количестве продукта при условии проведения испытания в соответствии с настоящим стандартом.


### 4. <a id="p100037"></a>Сущность метода



#### <a id="p100038"></a>4.1 Общие положения

<a id="p100039"></a>Для обнаружения Campylobacter выполняют этапы работ в соответствии с [Приложением A](#p100192).

#### <a id="p100040"></a>4.2 Обогащение в селективной жидкой среде

<a id="p100041"></a>Пробой инокулируют жидкую обогатительную среду (бульон Болтона) и гомогенизируют.
<a id="p100042"></a>Инкубируют в аэробной атмосфере при температуре 37 °C в течение 4 - 6 ч и затем при температуре 41,5 °C в течение (44 +/- 4) ч.

#### <a id="p100043"></a>4.3 Изоляция и отбор для подтверждения

<a id="p100044"></a>Из культур, полученных по 4.2, инокулируют две твердые селективные среды:
- <a id="p100045"></a>модифицированный агар с углем, цефоперазоном и дезоксихолатом (агар mCCD);
- <a id="p100046"></a>любую другую твердую селективную среду, основанную на принципе, отличном от принципа агара mCCD.
<a id="p100047"></a>Далее их инкубируют при температуре 41,5 °C в аэробной атмосфере и проверяют после (44 +/- 4) ч с целью обнаружения присутствия колоний, которые по своим характеристикам предположительно являются Campylobacter.

#### <a id="p100048"></a>4.4 Подтверждение

<a id="p100049"></a>Колонии, предположительно являющиеся Campylobacter, пересевают на неселективный колумбийский кровяной агар и затем подтверждают при исследовании под микроскопом и надлежащих биохимических испытаниях и испытаниях на рост.
<a id="p100050"></a>Вид Campylobacter идентифицируют путем специфических биохимических испытаний и испытаний на чувствительность к антибиотикам.


### 5. <a id="p100051"></a>Питательные среды и реактивы



#### <a id="p100052"></a>5.1 Общие положения

<a id="p100053"></a>Качество подготовки, изготовления и оценки эффективности питательных сред для выращивания Campylobacter по ИСО 7218, ИСО/ТУ 11133-1 и ИСО/ТУ 11133-2.
<a id="p100054"></a>Примечание. Ввиду наличия большого количества питательных сред и реактивов их составы и процедуры приготовления дополнительно приведены в [Приложении B](#p100204).


#### <a id="p100055"></a>5.2 Жидкая обогатительная среда: бульон Болтона

<a id="p100056"></a>См. [B.1](#p100205).

#### <a id="p100057"></a>5.3 Селективная среда для чашек Петри: модифицированный агар с углем, цефоперазоном и дезоксихолатом (агар mCCD)

<a id="p100058"></a>См. [B.2](#p100244).

#### <a id="p100059"></a>5.4 Среды и реактивы для подтверждения и идентификации


##### <a id="p100060"></a>5.4.1 Колумбийский кровяной агар

<a id="p100061"></a>См. [B.3](#p100277).

##### <a id="p100062"></a>5.4.2 Бульон Бруцелла

<a id="p100063"></a>См. [B.4](#p100296).

##### <a id="p100064"></a>5.4.3 Реактив для обнаружения оксидазы

<a id="p100065"></a>См. [B.5](#p100307).

##### <a id="p100066"></a>5.4.4 Раствор пероксида водорода, 3% (по объему).


##### <a id="p100067"></a>5.4.5 Реактивы для определения гидролиза гиппурата

<a id="p100068"></a>См. [B.6](#p100313).

##### <a id="p100069"></a>5.4.6 Кровяной агар Мюллера-Хинтона

<a id="p100070"></a>См. [B.7](#p100331).

##### <a id="p100071"></a>5.4.7 Диски с налидиксовой кислотой (30 мкг) и цефалотином (30 мкг).


##### <a id="p100072"></a>5.4.8 Диски с индоксилацетатом

<a id="p100073"></a>См. [B.8](#p100350).


### 6. <a id="p100074"></a>Оборудование и стеклянная химическая посуда


<a id="p100075"></a>Используют обычное микробиологическое лабораторное оборудование по ИСО 7218.
<a id="p100076"></a>6.1. Оборудование для сухой стерилизации (сушильный шкаф) или влажной стерилизации (автоклав) по ИСО 7218.
<a id="p100077"></a>6.2. Сушильный шкаф, ламинарный бокс или термостат, способные функционировать в диапазоне температур от 37 °C до 55 °C.

#### <a id="p100078"></a>6.3 Термостат, работающий при температуре (41,5 +/- 1) °C.

<a id="p100079"></a>6.4. Водяные бани, работающие в диапазоне температур (25 +/- 1) °C и (37 +/- 1) °C, или термостаты, работающие в диапазоне температур (25 +/- 1) °C и (37 +/- 1) °C.

#### <a id="p100080"></a>6.5 Водяная баня, работающая в диапазоне температур 47 °C - 50 °C.

<a id="p100081"></a>6.6. pH-метр с точностью 0,1 при 25 °C.
<a id="p100082"></a>6.7. Пробирки с размерами 18 x 180 мм и 9 x 180 мм, пробирки для гемолиза с размерами 13 x 75 мм, бутылки с нетоксичными металлическими крышками и/или колбы подходящей вместимости с соответствующими крышками.

#### <a id="p100083"></a>6.8 Чашки Петри, стеклянные или пластиковые, диаметром 90 - 100 мм.

<a id="p100084"></a>6.9. Градуированные пипетки с полным сливом, с широким отверстием, номинальной вместимостью 1 и 10 см3, градуированные с делениями 0,1 см3, и пастеровские пипетки.
<a id="p100085"></a>6.10. Резиновые соски или любая другая безопасная система, которую можно адаптировать к градуированным пипеткам.
<a id="p100086"></a>6.11. Стерильные петли, платиново-иридиевые, никелево-хромовые или пластиковые, диаметром приблизительно 3 мм, и проволоки из того же материала или стеклянная или пластиковая палочка.
<a id="p100087"></a>Никелево-хромовая петля не пригодна для использования в испытании на оксидазу (см. [9.4.6](#p100129)).

#### <a id="p100088"></a>6.12 Пинцет тонкий, с закругленными краями, из нержавеющей стали.

<a id="p100089"></a>6.13. Микроскоп, предпочтительно с фазовым контрастом (для наблюдения характерной подвижности Campylobacter).
<a id="p100090"></a>6.14. Надлежащее оборудование для достижения аэробной атмосферы с содержанием кислорода (5 +/- 2)%, диоксида углерода (10 +/- 3)%, альтернативного водорода <= 10%, с соблюдением баланса азота. Используют подходящие герметичные контейнеры, чтобы удерживать чашки Петри и/или колбы или бутылки вместимостью 350 см3, используемые для обогатительного бульона.
<a id="p100091"></a>Примечания
1. <a id="p100092"></a>Необходимая аэробная атмосфера достигается при использовании имеющихся в продаже газогенераторных комплектов; следует в точности соблюдать производственные инструкции, особенно те из них, которые касаются объема сосуда и вместимости газогенераторного комплекта. В качестве альтернативы используют заполнение сосуда надлежащей газовой смесью перед инкубацией.
2. <a id="p100093"></a>В качестве альтернативы инкубации в аэробной атмосфере обогатительный бульон можно инкубировать в бутылках с винтовыми крышками или колбах, заполнив их обогатительным бульоном, оставляя свободное пространство менее 2 см и тщательно закупоривая крышками.


### 7. <a id="p100094"></a>Отбор проб


<a id="p100095"></a>В лабораторию направляют представительную пробу. Проба не должна быть повреждена или изменена в процессе транспортирования или хранения.
<a id="p100096"></a>Отбор проб не является частью метода, установленного в настоящем стандарте. Отбор проб проводят в соответствии с конкретным стандартом на данную продукцию, в случае его отсутствия рекомендуется достижение соглашения заинтересованных сторон по отбору проб конкретного продукта.
<a id="p100097"></a>Принимая во внимание, что Campylobacter spp. весьма чувствительны к замораживанию, испытуемые пробы не замораживают и хранят при температуре (3 +/- 2) °C. Их анализируют в кратчайшие сроки. Также принимают меры по предотвращению высыхания проб.


### 8. <a id="p100098"></a>Приготовление испытуемой пробы


<a id="p100099"></a>Испытуемую пробу приготовляют в соответствии с конкретным стандартом на определенный вид продукции. Если не существует конкретного стандарта, рекомендуется, чтобы заинтересованные стороны достигли соглашения по данному вопросу.

9. <a id="p100100"></a>Методы проведения испытаний (см. [Приложение A](#p100192))


#### <a id="p100101"></a>9.1. Пробы, исходная суспензия и разбавления

<a id="p100102"></a>Для приготовления исходной суспензии количество x порции пробы (масса или объем) вводят в девятикратный объем обогатительной среды - бульон Болтона [(5.2)](#p100055), с тем чтобы получить соотношение проба/обогатительная среда 1:10 (масса/объем или объем/объем). Гомогенизируют.

#### <a id="p100103"></a>9.2. Обогащение

<a id="p100104"></a>Исходную суспензию (9.1) инкубируют в аэробной атмосфере [(6.14)](#p100090) при температуре 37 °C в течение 4 - 6 ч, затем при температуре 41,5 °C в течение (44 +/- 4) ч.

#### <a id="p100105"></a>9.3. Изоляция

<a id="p100106"></a>9.3.1. Используя культуру, полученную в обогатительной среде (9.2), инокулируют стерильной петлей [(6.11)](#p100086) поверхность первой селективной изолирующей среды, агара mCCD [(5.3)](#p100057).
<a id="p100107"></a>Аналогичным образом поступают со второй выбранной селективной изолирующей средой для Campylobacter.
<a id="p100108"></a>Примечание. Предпочтительно выбрать вторую изолирующую среду, основанную на принципах, отличных от агара mCCD. Примерами изолирующих сред, которые можно использовать, являются агар Skirrow, агар Karmali и агар Preston (см. [библиографию](#p100367)).

<a id="p100109"></a>9.3.2. Слои [(9.3.1)](#p100106) инкубируют при температуре 41,5 °C в аэробной атмосфере [(6.14)](#p100090).
<a id="p100110"></a>9.3.3. После инкубации в течение (44 +/- 4) ч слои исследуют с целью выявления типичных и/или подозрительных колоний Campylobacter.
<a id="p100111"></a>Типичные колонии на агаре mCCD имеют сероватый цвет, часто с металлическим блеском, они плоские и влажные и имеют тенденцию к разрастанию. Разрастание колоний менее выражено на более сухих поверхностях агара. Возможно образование других форм колоний.

#### <a id="p100112"></a>9.4. Подтверждение вида Campylobacter


##### <a id="p100113"></a>9.4.1 Общие положения

<a id="p100114"></a>Поскольку рассматриваемые бактерии быстро разрушаются на воздухе, необходимо незамедлительно следовать процедурам, описанным в 9.4.2 - [9.4.6](#p100129).

##### <a id="p100115"></a>9.4.2 Отбор колоний для подтверждения

<a id="p100116"></a>9.4.2.1. Для подтверждения с каждого слоя каждой селективной среды [(9.3.1)](#p100106) отбирают по меньшей мере одну колонию, рассматриваемую в качестве типичной или подозрительной колонии Campylobacter, и еще четыре колонии, если первая дала отрицательный результат.
<a id="p100117"></a>9.4.2.2. Производят посев каждой из отобранных колоний на слой колумбийского кровяного агара [(5.4.1)](#p100060), чтобы дать развиться четко изолированным колониям. Слои инкубируют в аэробной атмосфере при температуре 41,5 °C в течение 24 - 48 ч. При исследовании морфологии, подвижности, аэробного роста при температуре 25 °C, аэробного роста при температуре 41,5 °C и присутствия оксидазы следует использовать чистые культуры.

##### <a id="p100118"></a>9.4.3 Исследование морфологии и подвижности

<a id="p100119"></a>9.4.3.1. Одну колонию со слоя колумбийского кровяного агара [(9.4.2.2)](#p100117) суспендируют в 1 см3 бульона Бруцелла [(5.4.2)](#p100062) и исследуют морфологию и подвижность при помощи микроскопа [(6.13)](#p100089).
<a id="p100120"></a>9.4.3.2. Для дальнейшего исследования сохраняют все культуры [(9.4.2.2)](#p100117), в которых обнаружены изогнутые палочки со спиральной "штопорообразной" подвижностью (9.4.3.1).

##### <a id="p100121"></a>9.4.4 Исследование аэробного роста при температуре 25 °C

<a id="p100122"></a>Используя колонии, изолированные по [9.4.2.2](#p100117), инокулируют при помощи петли [(6.11)](#p100086) поверхность слоя колумбийского кровяного агара [(5.4.1)](#p100060).
<a id="p100123"></a>Слой инкубируют при температуре 25 °C в аэробной атмосфере [(6.14)](#p100090) в течение (44 +/- 4) ч.
<a id="p100124"></a>Исследуют слой с целью выявления видимого роста колоний Campylobacter.

##### <a id="p100125"></a>9.4.5 Исследование аэробного роста при температуре 41,5 °C

<a id="p100126"></a>Используя колонии, изолированные по [9.4.2.2](#p100117), инокулируют при помощи петли [(6.11)](#p100086) поверхность слоя колумбийского кровяного агара [(5.4.1)](#p100060).
<a id="p100127"></a>Слой инкубируют при температуре 41,5 °C в аэробной атмосфере [(6.14)](#p100090) в течение (44 +/- 4) ч.
<a id="p100128"></a>Исследуют слой с целью выявления видимого роста колоний Campylobacter.

##### <a id="p100129"></a>9.4.6 Обнаружение оксидазы

<a id="p100130"></a>Используя платиново-иридиевую петлю или стеклянную палочку [(6.11)](#p100086), отбирают порцию четко изолированной колонии из каждой отдельной чашки [(9.4.2.2)](#p100117) и наносят на фильтровальную бумагу, смоченную реактивом для обнаружения оксидазы [(5.4.3)](#p100064). Появление лилового, сиреневого или темно-синего цвета в течение 10 с свидетельствует о положительной реакции. Если используется имеющийся в продаже набор для анализа оксидазы, необходимо следовать инструкциям изготовителя.
<a id="p100131"></a>Результаты подтверждают, используя положительный и отрицательный контроль. Примерами подходящих контрольных штаммов являются Pseudomonas aeruginosa NCTC [<*>](#p100186) 10662 (положительный контроль) и Escherichia coli NCTC [<*>](#p100186) 9001 (отрицательный контроль).
<a id="p100132"></a>9.4.7. Интерпретацию Campylobacter spp. проводят по результатам таблицы 1.

<a id="p100133"></a>Таблица 1

<a id="p100134"></a>Характеристики Campylobacter spp.


| Наименование показателя | Характеристика |
| --- | --- |
| Морфология [(9.4.3)](#p100118) | Малые искривленные бациллы |
| Подвижность [(9.4.3)](#p100118) | Характерная |
| Микроаэробный рост при температуре 25 °C [(9.4.4)](#p100121) | - |
| Аэробный рост при температуре 41,5 °C [(9.4.5)](#p100125) | - |
| Оксидаза [(9.4.6)](#p100129) | + |


<a id="p100141"></a>Campylobacter spp. присутствует, если по меньшей мере одна колония демонстрирует вышеуказанные характеристики.

#### <a id="p100142"></a>9.5 Идентификация вида Campylobacter (альтернативная процедура)


##### <a id="p100143"></a>9.5.1 Общие положения

<a id="p100144"></a>Из Campylobacter spp., произрастающих при температуре 41,5 °C, чаще всего встречаются Campylobacter jejuni и Campylobacter coli. Вместе с тем были описаны другие виды (Campylobacter lari, Campylobacter upsaliensis и некоторые другие); характеристики, приведенные в таблице 2, позволяют провести их дифференциацию.

<a id="p100145"></a>Таблица 2

<a id="p100146"></a>Характеристики видов Campylobacter


<table>
<colgroup><col width="27%"><col width="10%"><col width="8%"><col width="8%"><col width="10%"><col width="11%"><col width="6%"><col width="3%"><col width="18%"></colgroup>
<tr><td>Характеристика</td><td>C. jejuni</td><td>C. coli</td><td>C. lari</td><td colspan="2">C. upsaliensis</td><td colspan="3"></td></tr>
<tr><td>Каталаза <a href="#p100159">(9.5.2)</a></td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td colspan="2">- или малое количество</td><td colspan="3"></td></tr>
<tr><td>Налидиксовая кислота <a href="#p100163">(9.5.3)</a></td><td><sup> S</td><td>a</sup> S</td><td>&lt;su R/S</td><td>p&gt;a</sup></td><td><sup>b S</td><td></sup></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td>Цефалотин <a href="#p100163">(9.5.3)</a></td><td>R</td><td>R</td><td>R</td><td colspan="2">S</td><td colspan="3"></td></tr>
<tr><td>Гидролиз гиппурата <a href="#p100173">(9.5.4)</a></td><td>+</td><td>-</td><td>-</td><td colspan="2">-</td><td colspan="3"></td></tr>
<tr><td>Индоксилацетат <a href="#p100181">(9.5.5)</a></td><td>+</td><td>+</td><td>-</td><td colspan="2">+</td><td colspan="3"></td></tr>
<tr><td colspan="6">"+" - положительная реакция;</td><td colspan="3"></td></tr>
<tr><td colspan="6">"-" - отрицательная реакция;</td><td colspan="3"></td></tr>
<tr><td colspan="6">S - чувствительный рост;</td><td colspan="3"></td></tr>
<tr><td colspan="6">R - устойчивый рост.</td><td colspan="3"></td></tr>
<tr><td colspan="8"><sup>a</sup> Было подтверждено увеличение устойчивости к налидиксовой кислоте</td><td></td></tr>
<tr><td colspan="6">штаммов C. jejuni и C. coli. <b> Были отмечены одновременно чувствительные и устойчивые штаммы</td><td colspan="3"></td></tr>
<tr><td colspan="6">C. lari.</td><td colspan="3"></td></tr>
</table>



##### <a id="p100159"></a>9.5.2 Определение каталазы

<a id="p100160"></a>Для каждой колонии, отобранной в соответствии с [9.4.2.2](#p100117), помещают петлю культуры в каплю раствора пероксида водорода [(5.4.4)](#p100066) на чистом предметном стекле.
<a id="p100161"></a>Испытание считается положительным, если в течение 30 с появляются пузырьки.
<a id="p100162"></a>Результаты подтверждают, используя положительный и отрицательный контроль. Примерами подходящих контрольных штаммов являются Staphylococcus aureus NCTC [<*>](#p100186) 8532 (положительный контроль), Enterococcus faecalis NCTC [<*>](#p100186) 775 (отрицательный контроль).

##### <a id="p100163"></a>9.5.3 Определение чувствительности к налидиксовой кислоте и цефалотину

<a id="p100164"></a>Для каждой колонии, отобранной в соответствии с [9.4.2.2](#p100117), используют петлю [(6.11)](#p100086) с целью приготовления суспензии в бульоне Бруцелла [(5.4.2)](#p100062), плотностью 0,5 по шкале МакФарланда.
<a id="p100165"></a>Суспензию разбавляют в отношении 1:10 тем же бульоном.
<a id="p100166"></a>Заливают суспензией поверхность слоя с 5%-ным кровяным агаром Мюллера-Хинтона [(5.4.6)](#p100069).
<a id="p100167"></a>Выдерживают в течение 5 мин, сливают избыток суспензии. Чашки высушивают в сушильном шкафу [(6.2)](#p100077) при 37 °C в течение 10 мин.
<a id="p100168"></a>Помещают на поверхность агара диск с налидиксовой кислотой и диск с цефалотином [(5.4.7)](#p100071).
<a id="p100169"></a>Чашки инкубируют крышками вниз при температуре 37 °C в течение (22 +/- 2) ч в микроаэробной атмосфере [(6.14)](#p100090).
<a id="p100170"></a>Результаты бактериального роста интерпретируют следующим образом:
- <a id="p100171"></a>рост, который наблюдается при контакте с диском, классифицируется как устойчивый;
- <a id="p100172"></a>при наличии зоны любых размеров, обусловленной ингибированием роста, он классифицируется как чувствительный.

##### <a id="p100173"></a>9.5.4 Определение гидролиза гиппурата

<a id="p100174"></a>Для каждой колонии, отобранной в соответствии с [9.4.2.2](#p100117), используют петлю [(6.11)](#p100086) с большим количеством инокулята с целью приготовления суспензии в пробирке для гемолиза [(6.7)](#p100082), содержащей 0,4 см3 раствора гиппурата натрия [(5.4.5)](#p100067), при этом обращают особое внимание на то, чтобы исключить попадание агара.
<a id="p100175"></a>Встряхивают с целью тщательного перемешивания и инкубируют в течение 2 ч на водяной бане [(6.4)](#p100079) при температуре 37 °C или в течение 4 ч в термостате при температуре 37 °C.
<a id="p100176"></a>Осторожно добавляют 0,2 см3 раствора нингидрина [(5.4.5)](#p100067) на поверхность раствора гиппурата натрия. Избегают встряхивания.
<a id="p100177"></a>Интерпретацию проводят после дополнительного инкубирования в течение 10 мин на водяной бане [(6.4)](#p100079) при температуре 37 °C или в термостате при температуре 37 °C.
<a id="p100178"></a>Темно-фиолетовый цвет свидетельствует о положительной реакции.
<a id="p100179"></a>Светло-фиолетовый цвет или отсутствие окраски свидетельствуют об отрицательной реакции.
<a id="p100180"></a>Результаты подтверждают, используя положительный и отрицательный контроль. Примерами подходящих контрольных штаммов являются Campylobacter jejuni NCTC [<*>](#p100186) 11351 (положительный контроль), Campylobacter coli NCTC [<*>](#p100186) 11366 (отрицательный контроль).

##### <a id="p100181"></a>9.5.5 Определение гидролиза индоксилацетата

<a id="p100182"></a>Помещают колонию, отобранную в соответствии с [9.4.2.2](#p100117), на диск с индоксилацетатом [(5.4.8)](#p100072) и добавляют каплю стерилизованной дистиллированной воды. Для проведения отчетливой реакции требуется полная петля материала колоний.
<a id="p100183"></a>В случае гидролиза индоксилацетата в течение 5 - 10 мин наблюдается изменение цвета в сторону темно-синего. Отсутствие изменения цвета свидетельствует о том, что гидролиз отсутствовал.
<a id="p100184"></a>Результаты подтверждают, используя положительный и отрицательный контроль. Примерами подходящих контрольных штаммов являются Campylobacter jejuni NCTC <*> 11351 (положительный контроль), Campylobacter lari NCTC <*> 11352 (отрицательный контроль).

<a id="p100185"></a>

---

<a id="p100186"></a><*> Национальная коллекция типовых культур (National collection of type cultures, NCTC).


##### <a id="p100187"></a>9.5.6 Интерпретация

<a id="p100188"></a>Виды Campylobacter, показывающие рост при температуре 41,5 °C, могут быть идентифицированы в соответствии с [таблицей 2](#p100146).


### 10. <a id="p100189"></a>Обработка результатов


<a id="p100190"></a>В соответствии с интерпретацией результатов указывают наличие или отсутствие Campylobacter в порции пробы x г или x см3 продукта по ИСО 7218.





<div align="right">

<a id="p100191"></a>Приложение A

</div>

(обязательное)

<div align="center">

<a id="p100192"></a>**ДИАГРАММА МЕТОДИКИ РАБОТЫ**

</div>



<table>
<colgroup><col width="50%"><col width="50%"></colgroup>
<tr><td colspan="2">Порция пробы x г или x см3</td></tr>
</table>

                                       \/

<table>
<colgroup><col width="50%"><col width="50%"></colgroup>
<tr><td colspan="2">9x г 9x см3 бульона Болтона <a href="#p100055">(5.2)</a></td></tr>
</table>

                                       \/

<table>
<colgroup><col width="50%"><col width="50%"></colgroup>
<tr><td colspan="2">ОБОГАЩЕНИЕ Инкубация в аэробной атмосфере при температуре 37 °C в течение 4 - 6 часов, далее при температуре 41,5 °C в течение (44 +/- 4) ч</td></tr>
</table>

                                       \/

<table>
<colgroup><col width="50%"><col width="50%"></colgroup>
<tr><td colspan="2">ИЗОЛЯЦИЯ Агар mCCD <a href="#p100057">(5.3)</a> + 2-я среда, в качестве предпочтительной</td></tr>
</table>

                                       \/

<table>
<colgroup><col width="50%"><col width="50%"></colgroup>
<tr><td colspan="2">Инкубация в микроаэробной атмосфере при 41,5 °C в течение (44 +/- 4) ч</td></tr>
</table>

                                       \/

<table>
<colgroup><col width="50%"><col width="50%"></colgroup>
<tr><td colspan="2">Характерные колонии <a href="#p100115">(9.4.2)</a></td></tr>
</table>

                                       \/

<table>
<colgroup><col width="50%"><col width="50%"></colgroup>
<tr><td colspan="2">Подтверждение (<a href="#p100118">9.4.3</a> - <a href="#p100129">9.4.6</a>)</td></tr>
</table>

                                       \/

<table>
<colgroup><col width="50%"><col width="50%"></colgroup>
<tr><td colspan="2">Идентификация (по выбору) <a href="#p100142">(9.5)</a></td></tr>
</table>

                                       \/

| Выражение результатов [(раздел 10)](#p100189) |
| --- |


<div align="center">

<a id="p100202"></a>Рисунок A.1

</div>






<div align="right">

<a id="p100203"></a>Приложение B<br>
(обязательное)

</div>


<div align="center">

<a id="p100204"></a>**СОСТАВ И ПРИГОТОВЛЕНИЕ ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД И РЕАКТИВОВ**

</div>



### <a id="p100205"></a>B.1. Бульон Болтона

<a id="p100206"></a>B.1.1. Базовая среда
<a id="p100207"></a>B.1.1.1. Состав:
<a id="p100208"></a>продукт ферментативного переваривания животных тканей - 10,0 г;
<a id="p100209"></a>гидролизат лактальбумина - 5,0 г;
<a id="p100210"></a>дрожжевой экстракт - 5,0 г;
<a id="p100211"></a>натрия хлорид - 5,0 г;
<a id="p100212"></a>натрия пируват - 0,5 г;
<a id="p100213"></a>натрия пиросульфит - 0,5 г;
<a id="p100214"></a>натрия карбонат - 0,6 г;
<a id="p100215"></a> $\alpha - \text{кетоглутароваякислота}$ - 1,0 г;
<a id="p100216"></a>гемин (раствор в 0,1%-ном растворе натрия гидроксида) - 0,01 г;
<a id="p100217"></a>вода - 1000 см3.
<a id="p100218"></a>B.1.1.2. Приготовление
<a id="p100219"></a>Базовые компоненты по [B.1.1.1](#p100207) или готовую обезвоженную среду растворяют в 1000 см3 воды при слабом нагреве.
<a id="p100220"></a>Корректируют pH так, чтобы после стерилизации его значение для готовой среды составляло (7,4 +/- 0,2) при температуре 25 °C.
<a id="p100221"></a>Среду разливают в колбы вместимостью 100 - 200 см3. Стерилизуют в автоклаве [(6.1)](#p100076) при температуре 121 °C в течение 15 мин.
<a id="p100222"></a>B.1.2. Стерильная лизированная дефибринированная кровь лошади
<a id="p100223"></a>Используют кровь лошади, лизированную сапонином или замораживанием и последующим размораживанием.
<a id="p100224"></a>B.1.3. Антибиотический раствор
<a id="p100225"></a>B.1.3.1. Состав:
<a id="p100226"></a>цефоперазон - 0,02 г;
<a id="p100227"></a>ванкомицин - 0,02 г;
<a id="p100228"></a>триметоприма лактат - 0,02 г;
<a id="p100229"></a>амфотерицин B - 0,01 г;
<a id="p100230"></a>этанол/стерильная дистиллированная вода 50:50 (по объему) - 5,0 см3.
<a id="p100231"></a>B.1.3.2. Приготовление
<a id="p100232"></a>Компоненты растворяют в смеси этанола и стерильной дистиллированной воды в соотношении 50:50.
<a id="p100233"></a>B.1.4. Полная среда
<a id="p100234"></a>B.1.4.1. Состав:
<a id="p100235"></a>базовая среда [(B.1.1)](#p100206) - 1000 см3;
<a id="p100236"></a>стерильная лизированная дефибринированная кровь лошади [(B.1.2)](#p100222) - 50 см3;
<a id="p100237"></a>антибиотический раствор [(B.1.3)](#p100224) - 5 см3.
<a id="p100238"></a>B.1.4.2. Приготовление
<a id="p100239"></a>К базовой среде при температуре от 47 °C до 50 °C в стерильных условиях добавляют кровь, затем антибиотический раствор и перемешивают. Соблюдая стерильность, среду разливают в пробирки или колбы (см. 9.1.2), чтобы приготовить объем сред, необходимый для испытания. Если обогатительную среду приготовляют заранее, ее надо хранить не более 4 ч при комнатной температуре или в темном месте при (3 +/- 2) °C не более семи дней.
<a id="p100240"></a>B.1.5. Эксплуатационное испытание
<a id="p100241"></a>Эксплуатационные характеристики бульона Болтона необходимо испытывать в соответствии с методами и критериями, описанными в ИСО 11133-2. Примерами подходящих контрольных штаммов являются Campylobacter jejuni NCTC 11351 или ATCC <1> 33291 со следующими критериями: > 10 колоний на модифицированном агаре с углем, цефоперазоном и дезоксихолатом (mCCD) после инкубации в микроаэробных условиях при 41,5 °C в течение (44 +/- 4) ч.

<a id="p100242"></a>

---

<a id="p100243"></a><1> Американская коллекция типовых культур (American Type Culture Collection, ATCC).

<a id="p100244"></a>B.2. Модифицированный агар с углем, цефоперазоном и дезоксихолатом (агар mCCD)
<a id="p100245"></a>B.2.1. Базовая среда
<a id="p100246"></a>B.2.1.1. Состав:
<a id="p100247"></a>мясной экстракт - 10,0 г;
<a id="p100248"></a>продукт ферментативного переваривания животных тканей - 10,0 г;
<a id="p100249"></a>натрия хлорид - 5,0 г;
<a id="p100250"></a>древесный уголь - 4,0 г;
<a id="p100251"></a>продукт ферментативного переваривания казеина - 3,0 г;
<a id="p100252"></a>дезоксихолат натрия - 1,0 г;
<a id="p100253"></a>железа сульфат (II) - 0,25 г;
<a id="p100254"></a>натрия пируват - 0,25 г;
<a id="p100255"></a>агар - 8,0 - 18,0 <1>;
<a id="p100256"></a>вода - 1000 см3.

<a id="p100257"></a>

---

<a id="p100258"></a><1> В зависимости от прочности геля агара.

<a id="p100259"></a>B.2.1.2. Приготовление
<a id="p100260"></a>Компоненты для базовой среды или обезвоженную базовую среду растворяют в 1000 см3 воды и постепенно доводят до кипения. При необходимости, корректируют pH таким образом, чтобы после стерилизации он составлял (7,4 +/- 0,2) при температуре 25 °C.
<a id="p100261"></a>Базовую среду разливают в колбы вместимостью 100 - 200 см3. Стерилизуют в автоклаве [(6.1)](#p100076) при температуре 121 °C в течение 15 мин.
<a id="p100262"></a>B.2.2. Антибиотический раствор
<a id="p100263"></a>B.2.2.1. Состав:
<a id="p100264"></a>цефаперазон - 0,032 г;
<a id="p100265"></a>амфотерицин B - 0,01 г;
<a id="p100266"></a>вода - 5 см3.
<a id="p100267"></a>B.2.2.2. Приготовление
<a id="p100268"></a>Компоненты растворяют в воде. Стерилизуют путем фильтрации.
<a id="p100269"></a>B.2.3. Полная среда
<a id="p100270"></a>B.2.3.1. Состав:
<a id="p100271"></a>базовая среда [(B.2.1)](#p100245) - 1000 см3;
<a id="p100272"></a>антибиотический раствор [(B.2.2)](#p100262) - 5 см3.
<a id="p100273"></a>B.2.3.2. Приготовление
<a id="p100274"></a>Антибиотический раствор добавляют к базовой среде, охлажденной до температуры 47 °C - 50 °C, затем тщательно перемешивают. Разливают по 15 см3 полной среды по стерильным чашкам Петри. Дают затвердеть. Непосредственно перед применением тщательно высушивают слои агара, предпочтительно с открытыми крышками и поверхностью агара, направленной вниз в сушильном шкафу [(6.2)](#p100077), в течение 30 мин или до того момента, когда поверхность агара не будет содержать видимой влаги. Если они были приготовлены заранее, невысушенные агаровые слои следует хранить не более 4 ч при температуре окружающей среды или в темноте при температуре (3 +/- 2) °C не более семи дней.
<a id="p100275"></a>B.2.4. Эксплуатационное испытание
<a id="p100276"></a>Определение селективности или производительности по ИСО 11133-1. Информация о эксплуатационных критериях - в ИСО 11133-2, таблица B.5.

### <a id="p100277"></a>B.3. Колумбийский кровяной агар

<a id="p100278"></a>B.3.1. Базовая среда
<a id="p100279"></a>B.3.1.1. Состав:
<a id="p100280"></a>продукт ферментативного переваривания животных тканей - 23,0 г;
<a id="p100281"></a>крахмал - 1,0 г;
<a id="p100282"></a>натрия хлорид - 5,0 г;
<a id="p100283"></a>агар - 8,0 - 18,0 г <1>;
<a id="p100284"></a>вода - 1000 см3.

<a id="p100285"></a>

---

<a id="p100286"></a><1> В зависимости от прочности геля агара.

<a id="p100287"></a>B.3.1.2. Приготовление
<a id="p100288"></a>Базовые компоненты или полную обезвоженную базовую среду растворяют в воде путем нагрева. При необходимости корректируют pH таким образом, чтобы после стерилизации он составлял (7,3 +/- 0,2) при 25 °C. Базовую среду распределяют в колбы подходящей вместимости. Стерилизуют в автоклаве [(6.1)](#p100076), установленном на 121 °C, в течение 15 мин.
<a id="p100289"></a>B.3.2. Стерильная дефибринированная баранья кровь
<a id="p100290"></a>B.3.3. Полная среда
<a id="p100291"></a>B.3.3.1. Состав:
<a id="p100292"></a>базовая среда [(B.3.1)](#p100278) - 1000 см3;
<a id="p100293"></a>антибиотический раствор (B.3.2) - 5,0 см3.
<a id="p100294"></a>B.3.3.2. Приготовление
<a id="p100295"></a>Кровь в стерильных условиях добавляют к базовой среде, охлажденной до температуры 47 °C - 50 °C, затем перемешивают. Разливают около 15 см3 полной среды по стерильным чашкам Петри. Дают затвердеть. Непосредственно перед применением тщательно высушивают слои агара, предпочтительно с открытыми крышками и поверхностью агара, направленной вниз в сушильном шкафу [(6.2)](#p100077), в течение 30 мин или до того момента, когда поверхность агара не будет содержать видимой влаги. Если они были приготовлены заранее, невысушенные агаровые слои следует хранить не более 4 ч при температуре окружающей среды или не более семи дней при температуре (3 +/- 2) °C.

### <a id="p100296"></a>B.4. Бульон Бруцелла

<a id="p100297"></a>B.4.1. Состав:
<a id="p100298"></a>продукт ферментативного переваривания казеина - 10,0 г;
<a id="p100299"></a>продукт ферментативного переваривания животных тканей - 10,0 г;
<a id="p100300"></a>глюкоза - 1,0 г;
<a id="p100301"></a>дрожжевой экстракт - 2,0 г;
<a id="p100302"></a>натрия хлорид - 5,0 г;
<a id="p100303"></a>натрия гидросульфит - 0,1 г;
<a id="p100304"></a>вода - 1000 см3.
<a id="p100305"></a>B.4.2. Приготовление
<a id="p100306"></a>Компоненты для базовой среды или готовую обезвоженную среду растворяют в воде, постепенно нагревая. При необходимости корректируют pH таким образом, чтобы после стерилизации он составлял (7,3 +/- 0,2) при температуре 25 °C. Базовую среду объемом 10 см3 распределяют в колбы подходящей емкости. Стерилизуют в автоклаве [(6.1)](#p100076) при температуре 121 °C в течение 15 мин.

### <a id="p100307"></a>B.5. Реагент для обнаружения оксидазы

<a id="p100308"></a>B.5.1. Состав:
<a id="p100309"></a> $N,N,N\prime,N\prime - \text{тетраметил} - 1,4 - \text{фенилендиаминадигидрохлорид}$ - 1,0 г;
<a id="p100310"></a>вода - 100,0 см3.
<a id="p100311"></a>B.5.2. Приготовление
<a id="p100312"></a>Компоненты растворяют в воде непосредственно перед использованием.

### <a id="p100313"></a>B.6. Реагенты для обнаружения гидролиза гиппурата

<a id="p100314"></a>B.6.1. Раствор гиппурата натрия
<a id="p100315"></a>B.6.1.1. Состав:
<a id="p100316"></a>натрия гиппурат - 10,0 г;
<a id="p100317"></a>фосфатно-буферный солевой раствор (PBS):
<a id="p100318"></a>натрия хлорид - 8,5 г,
<a id="p100319"></a>динатрия гидрофосфат дигидрат $(Na_{2}HPO_{4} \cdot 2H_{2}O)$ - 8,98 г,
<a id="p100320"></a>натрия дигидрофосфат моногидрат $(NaH_{2}PO_{4} \cdot 2H_{2}O)$ - 2,71 г;
<a id="p100321"></a>вода - 1000,0 см3.
<a id="p100322"></a>B.6.1.2. Приготовление
<a id="p100323"></a>Гиппурат натрия растворяют в растворе PBS. Стерилизуют путем фильтрации. Соблюдая стерильность, реагент объемом 0,4 см3 распределяют в малые колбы надлежащей вместимостью [(6.7)](#p100082). Хранят при температуре 20 °C.
<a id="p100324"></a>B.6.2. Раствор нингидрина, 3,5% (масса/объем)
<a id="p100325"></a>B.6.2.1. Состав:
<a id="p100326"></a>нингидрин - 1,75 г;
<a id="p100327"></a>ацетон - 25 см3;
<a id="p100328"></a>бутанол - 25 см3.
<a id="p100329"></a>B.6.2.2. Приготовление
<a id="p100330"></a>Нингидрин растворяют в смеси ацетон/бутанол. Раствор хранят в холодильнике в темноте не более одной недели.

### <a id="p100331"></a>B.7. Кровяной агар Мюллера-Хинтона

<a id="p100332"></a>B.7.1. Базовая среда
<a id="p100333"></a>B.7.1.1. Состав:
<a id="p100334"></a>продукт ферментативного переваривания животных тканей - 6,0 г;
<a id="p100335"></a>продукт ферментативного переваривания казеина - 17,5 г;
<a id="p100336"></a>крахмал растворимый - 1,5 г;
<a id="p100337"></a>агар - 8,0 - 18,0 г <1>;
<a id="p100338"></a>вода - 1000 см3.

<a id="p100339"></a>

---

<a id="p100340"></a><1> В зависимости от прочности геля агара.

<a id="p100341"></a>B.7.1.2. Приготовление
<a id="p100342"></a>Компоненты для среды или готовую обезвоженную базовую среду растворяют в 1000 см3 воды и постепенно доводят до кипения. При необходимости корректируют pH таким образом, чтобы после стерилизации он составлял (7,3 +/- 0,2) при температуре 25 °C. Базовую среду разливают в колбы вместимостью 100 - 200 см3. Стерилизуют в автоклаве [(6.1)](#p100076) при температуре 121 °C в течение 15 мин.
<a id="p100343"></a>B.7.2. Стерильная дефибринированная баранья кровь
<a id="p100344"></a>B.7.3. Полная среда
<a id="p100345"></a>B.7.3.1. Состав:
<a id="p100346"></a>базовая среда [(B.7.1)](#p100332) - 1000,0 см3;
<a id="p100347"></a>стерильная дефибринированная баранья кровь (B.7.2) - 50,0 см3.
<a id="p100348"></a>B.7.3.2. Приготовление
<a id="p100349"></a>Кровь в стерильных условиях добавляют к базовой среде, охлажденной до температуры 47 °C - 50 °C, постоянно перемешивая. Разливают около 15 см3 полной среды по стерильным чашкам Петри. Дают затвердеть. Непосредственно перед применением тщательно высушивают слои агара, предпочтительно с открытыми крышками и поверхностью агара, направленной вниз в сушильном шкафу [(6.2)](#p100077), в течение 30 мин или до того момента, когда поверхность агара не будет содержать видимой влаги. Если они были приготовлены заранее, невысушенные агаровые слои следует хранить не более 4 ч при температуре окружающей среды или не более семи дней при температуре (3 +/- 2) °C.

### <a id="p100350"></a>B.8. Диски с индоксилацетатом

<a id="p100351"></a>B.8.1. Состав:
<a id="p100352"></a>индоксилацетат - 0,1 г;
<a id="p100353"></a>ацетон - 1,0 см3.
<a id="p100354"></a>B.8.2. Приготовление
<a id="p100355"></a>Индоксилацетат растворяют в ацетоне. Наносят от 25 до 50 мкл данного раствора на чистые бумажные диски (диаметр от 0,6 до 1,2 см). После высушивания при комнатной температуре диски хранят при температуре 4 °C в темных пробирках или бутылках в присутствии силикагеля.





<div align="right">

<a id="p100356"></a>Приложение ДА<br>
(справочное)

</div>


<div align="center">

<a id="p100357"></a>**СВЕДЕНИЯ О СООТВЕТСТВИИ ССЫЛОЧНЫХ**<br>
**МЕЖДУНАРОДНЫХ СТАНДАРТОВ ССЫЛОЧНЫМ НАЦИОНАЛЬНЫМ СТАНДАРТАМ**<br>
**РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ (И ДЕЙСТВУЮЩИМ В ЭТОМ КАЧЕСТВЕ**<br>
**МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫМ СТАНДАРТАМ)**

</div>


<div align="right">

<a id="p100358"></a>Таблица ДА.1

</div>



<table>
<colgroup><col width="27%"><col width="18%"><col width="55%"></colgroup>
<tr><td>Обозначение ссылочного международного стандарта</td><td>Степень соответствия</td><td>Обозначение и наименование соответствующего национального стандарта</td></tr>
<tr><td>ИСО 6887</td><td>-</td><td>&lt;*&gt;</td></tr>
<tr><td>ИСО 7218:2007</td><td>IDT</td><td><a href="https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-7218-2008">ГОСТ Р ИСО 7218-2008</a> "Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Общие требования и рекомендации по микробиологическим исследованиям"</td></tr>
<tr><td>ИСО 8261:2001</td><td>-</td><td>&lt;*&gt;</td></tr>
<tr><td>ИСО/ТУ 11133-1:2000</td><td>IDT</td><td><a href="https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-11133-1-2008">ГОСТ Р ИСО 11133-1-2008</a> "Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Руководящие указания по приготовлению и производству культуральных сред. Часть 1. Общие руководящие указания по обеспечению качества приготовления культуральных сред в лаборатории"</td></tr>
<tr><td>ИСО/ТУ 11133-2:2003</td><td>IDT</td><td><a href="https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-11133-2-2008">ГОСТ Р ИСО 11133-2-2008</a> "Микробиология пищевых продуктов и кормов для животных. Руководящие указания по приготовлению и производству культуральных сред. Часть 2. Практические руководящие указания по эксплуатационным испытаниям культуральных сред"</td></tr>
<tr><td colspan="3">&lt;*&gt; Соответствующий национальный стандарт отсутствует. До его утверждения рекомендуется использовать перевод на русский язык данного международного стандарта. Перевод данного международного стандарта находится в Федеральном информационном фонде технических регламентов и стандартов.</td></tr>
<tr><td colspan="3">Примечание. В настоящей таблице использовано следующее условное обозначение степени соответствия стандартов:</td></tr>
<tr><td colspan="3">- IDT - идентичные стандарты.</td></tr>
</table>







## <a id="p100367"></a>БИБЛИОГРАФИЯ



1. <a id="p100368"></a>BAYLIS, C.L. et al. Comparison of three enrichment media for the
   isolation of Campylobacter spp. from foods. J. Appl. Microbiol.
   2000, 89, pp. 884 - 891
2. <a id="p100369"></a>BOLTON, F.J. and ROBERTSON, L. A selective medium for isolating
   Campylobacter jejuni/coli. J. Clin. Pathol. 1982, 35, pp. 462 - 467
3. <a id="p100370"></a>BOLTON, F.J. et al. A blood-free selective medium for the isolation
   of Campylobacter jejuni from faeces. J. Clin. Microbiol. 1984, 19,
   pp. 169 - 171
4. <a id="p100371"></a>BOLTON, F.J. et al. Detection of Campylobacter jejuni and
   Campylobacter coli in foods by enrichment culture and polymerase
   chain reaction enzyme-linked immunosorbent assay. J. Food Prot.
   2002, 65, pp. 760 - 767
5. <a id="p100372"></a>CORRY, J.E.L. et al. (eds). Handbook of culture media for food
   microbiology. Progress in Industrial Microbiology. Vol. 37.
   Elsevier, Amsterdam, 2003
6. <a id="p100373"></a>HUNT, J.M. et al. Campylobacter. In: Food and Drug Administration
   Bacteriological Analytical Manual, 8th Edition, AOAC, Arlington Va,
   USA, 1998
7. <a id="p100374"></a>HUTCHINSON, D.N. and BOLTON, F.J. Improved blood-free selective
   medium for the isolation of Campylobacter jejuni from faecal
   specimen. J. Clin. Pathol. 1984, 37, pp. 956 - 957
8. <a id="p100375"></a>KARMALI, M.A. et al. Evaluation of a blood-free, charcoal-based,
   selective medium for the isolation of Campylobacter organisms from
   faeces. J. Clin. Microbiol. 1986, 23, pp. 456 - 459
9. <a id="p100376"></a>SKIRROW, M.B. Campylobacter enteritis: a new disease. Brit. Med. J.
   1977, 2, pp. 9 - 11.
   <a id="p100377"></a>------------------------------------------------------------------