---
title: "\"ГОСТ Р 53773-2010. Национальный стандарт Российской Федерации. Продукция соковая. Методы определения антоцианинов\""
number: "ГОСТ Р 53773-2010"
issuer: "Федеральное агентство по техническому регулированию и метрологии"
status: утратил силу
canonical: "https://bukva.ai/docs/gost-r-53773-2010"
---

## "ГОСТ Р 53773-2010. Национальный стандарт Российской Федерации. Продукция соковая. Методы определения антоцианинов"

# "ГОСТ Р 53773-2010. Национальный стандарт Российской Федерации. Продукция соковая. Методы определения антоцианинов"

(утв. и введен в действие Приказом Ростехрегулирования от 24.02.2010 N 21-ст)

> [!WARNING]
> Документ утратил силу с 1 января 2016 года в связи с изданием Приказа Росстандарта от 09.07.2014 N 777-ст.
> Взамен введен в действие [ГОСТ 32709-2014](https://bukva.ai/docs/gost-32709-2014).
> Документ утратил силу с 1 января 2016 года в связи с изданием Приказа Росстандарта от 09.07.2014 N 777-ст. Взамен введен в действие [ГОСТ 32709-2014](https://bukva.ai/docs/gost-32709-2014).
> Документ включен в Перечень стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения требований Технического регламента Таможенного союза "Технический регламент на соковую продукцию из фруктов и овощей" (ТР ТС 023/2011) и осуществления оценки (подтверждения) соответствия продукции (Решение Комиссии Таможенного союза от 09.12.2011 N 882).
> Документ [введен](#p100010) в действие с 1 января 2011 года.

> [!NOTE]
> ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

```mermaid
flowchart LR
  n0["ГОСТ Р 53773-2010"]:::rst
  click n0 "https://bukva.ai/docs/gost-r-53773-2010" "ГОСТ Р 53773-2010. Национальный стандарт Российской Федерации. Продукция соковая. Методы определения антоцианинов (утв. и введен в действие Приказом Ростехрегулирования от 24.02.20"
  n1["ГОСТ 32709-2014"]:::doc
  click n1 "https://bukva.ai/docs/gost-32709-2014" "ГОСТ 32709-2014. Межгосударственный стандарт. Продукция соковая. Методы определения антоцианинов (введен в действие Приказом Росстандарта от 09.07.2014 N 777-ст)"
  n0 --> n1
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;
```


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утвержден и введен в действие<br>
Приказом Федерального<br>
агентства по техническому<br>
регулированию и метрологии

</div>

от 24 февраля 2010 г. N 21-ст

<a id="p100002"></a>**НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ**

<a id="p100003"></a>**ПРОДУКЦИЯ СОКОВАЯ**

<a id="p100004"></a>**МЕТОДЫ ОПРЕДЕЛЕНИЯ АНТОЦИАНИНОВ**

<a id="p100005"></a>Juice products. Methods for determination of Anthocyanins

<div align="right">

<a id="p100006"></a>**ГОСТ Р 53773-2010**

<a id="p100007"></a>Группа Н59

<a id="p100008"></a>ОКС 67.080<br>
67.050

<a id="p100009"></a>ОКСТУ 9109

</div>


<a id="p100010"></a>Дата введения

<div align="center">

1 января 2011 года

</div>



### <a id="p100011"></a>Предисловие


<a id="p100012"></a>Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от 27 декабря 2002 г. N 184-ФЗ "О техническом регулировании", а правила применения национальных стандартов Российской Федерации - ГОСТ Р 1.0-2004 "Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения".


### <a id="p100013"></a>Сведения о стандарте


1. <a id="p100014"></a>Разработан Некоммерческой организацией "Российский союз производителей соков" (НО "РСПС") при участии НИИ питания Российской Академии медицинских наук (НИИ питания РАМН).
2. <a id="p100015"></a>Внесен Подкомитетом "Соки фруктовые и овощные, нектары, сокосодержащие напитки и морсы" Технического комитета по стандартизации ТК 93 "Продукты переработки фруктов, овощей и грибов".
3. <a id="p100016"></a>Утвержден и введен в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 24 февраля 2010 г. N 21-ст.
4. <a id="p100017"></a>В настоящем стандарте учтены основные положения международного стандарта CODEX-STAN 247-2005 "Общий стандарт на фруктовые соки и нектары" (CODEX-STAN 247-2005 "Codex general standard for fruit juices and nectars") в части методов анализа и отбора проб соковой продукции;
<a id="p100018"></a>в части качественного определения антоцианинов учтены основные нормативные положения документа IFU Метод 71:1998 "Определение антоцианинов методом высокоэффективной жидкостной хроматографии" (Международная федерация производителей фруктовых соков) [IFU-Analyses No. 71 "Anthocyanins by HPLC" (International Federation of Fruit Juice Produces)].
5. <a id="p100019"></a>Введен впервые.

<a id="p100020"></a>Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячно издаваемых информационных указателях "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет.


### 1. <a id="p100021"></a>Область применения


<a id="p100022"></a>Настоящий стандарт распространяется на фруктовые соки и нектары, фруктовые концентрированные соки, фруктовые пюре и концентрированные пюре, морсы и концентрированные морсы, сокосодержащие напитки, соковую продукцию обогащенную и для детского питания (далее - соковая продукция) и устанавливает следующие методы определения антоцианинов:
- <a id="p100023"></a>метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (далее - ВЭЖХ) для качественного определения антоцианинов в соковой продукции;
- <a id="p100024"></a>метод pH-дифференциальной спектрофотометрии для определения массовой концентрации (массовой доли) суммы антоцианинов в соковой продукции. Нижний предел измерений массовой концентрации (массовой доли) суммы антоцианинов составляет 5 мг/дм3 $(\text{млн}^{- 1})$ . Верхний предел измерений массовой концентрации (массовой доли) 5000 мг/дм3 $(\text{млн}^{- 1})$ .


### 2. <a id="p100025"></a>Нормативные ссылки


<a id="p100026"></a>В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:
<a id="p100027"></a>[ГОСТ Р ИСО 5725-1-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-1-2002) Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 1. Основные положения и определения
<a id="p100028"></a>[ГОСТ Р ИСО 5725-2-2002](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-2-2002) Точность (правильность и прецизионность) методов и результатов измерений. Часть 2. Основной метод определения повторяемости и воспроизводимости стандартного метода измерений
<a id="p100029"></a>[ГОСТ Р 51652-2000](https://bukva.ai/docs/gost-r-51652-2000) Спирт этиловый ректификованный из пищевого сырья. Технические условия
<a id="p100030"></a>ГОСТ 12.1.005-88 Система стандартов безопасности труда. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны
<a id="p100031"></a>ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности
<a id="p100032"></a>ГОСТ 12.1.018-93 Система стандартов безопасности труда. Пожаровзрывобезопасность статического электричества. Общие требования
<a id="p100033"></a>ГОСТ 12.1.019-79 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты
<a id="p100034"></a>[ГОСТ 199-78](https://bukva.ai/docs/gost-199-78) Реактивы. Натрий уксуснокислый 3-водный. Технические условия
<a id="p100035"></a>[ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия
<a id="p100036"></a>ГОСТ 3118-77 Реактивы. Кислота соляная. Технические условия
<a id="p100037"></a>ГОСТ 4234-77 Реактивы. Калий хлористый. Технические условия
<a id="p100038"></a>ГОСТ 6552-80 Реактивы. Кислота ортофосфорная. Технические условия
<a id="p100039"></a>ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия
<a id="p100040"></a>ГОСТ 24104-2001 Весы лабораторные. Общие технические требования <*>

<a id="p100041"></a>

---

<a id="p100042"></a><*> С 1 января 2010 г. действует ГОСТ Р 53228-2008 в части вновь разрабатываемых и модернизируемых весов; с 1 января 2013 г. - в части весов, разработанных до 1 января 2010 г.

<a id="p100043"></a>ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры
<a id="p100044"></a>[ГОСТ 26313-84](https://bukva.ai/docs/standart-gost-26313-84) Продукты переработки плодов и овощей. Правила приемки, методы отбора проб
<a id="p100045"></a>[ГОСТ 26671-85](https://bukva.ai/docs/gost-26671-85) Продукты переработки плодов и овощей, консервы мясные и мясорастительные. Подготовка проб для лабораторных анализов
<a id="p100046"></a>[ГОСТ 29227-91 (ИСО 835-1-81)](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования.
<a id="p100047"></a>*Примечание.* При использовании настоящего стандарта целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодно издаваемому указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим ежемесячно издаваемым информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.


### 3. <a id="p100048"></a>Термины и определения


<a id="p100049"></a>В настоящем стандарте применен следующий термин с соответствующим определением:
<a id="p100050"></a>3.1. антоцианины: Водорастворимые растительные пигменты, обусловливающие красную, синюю и фиолетовую окраску фруктов, относящиеся к классу флавоноидов и представляющие собой гликозиды антоцианидинов.
<a id="p100051"></a>Примечание. Структура основных антоцианидинов, входящих в состав природных антоцианинов, приведена в Приложении А (см. [рисунок А.1](#p100236)).


### 4. <a id="p100052"></a>Отбор и подготовка проб


<a id="p100053"></a>4.1. Отбор проб - по [ГОСТ 26313](https://bukva.ai/docs/standart-gost-26313-84), подготовка проб - по [ГОСТ 26671](https://bukva.ai/docs/gost-26671-85).


### 5. <a id="p100054"></a>Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ)



#### <a id="p100055"></a>5.1 Сущность метода ВЭЖХ

<a id="p100056"></a>Метод обращенно-фазовой ВЭЖХ с фотометрическим детектированием при 518 нм обеспечивает разделение и качественное определение антоцианинов в соковой продукции, имеющей красную, синюю и фиолетовую окраску, с целью установления таких нарушений, как добавление экстрактов и соков из других окрашенных фруктов и овощей и (или) избыточное разбавление соковой продукции.
<a id="p100057"></a>Полученные хроматограммы сравнивают с хроматограммами аутентичных фруктовых соков и данными [таблицы Б.2](#p100286) Приложения Б.

#### <a id="p100058"></a>5.2 Средства измерений, вспомогательное оборудование, посуда, реактивы, материалы

<a id="p100059"></a>5.2.1. Хроматограф жидкостный высокоэффективный со спектрофотометрическим детектором (рабочий диапазон длин волн поглощения от 200 до 600 нм) и программно-аппаратным комплексом сбора и обработки результатов типа "Millenium 2000".
<a id="p100060"></a>5.2.2. Колонка аналитическая длиной 250 мм и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная октадецилсиликагелем размером частиц 5 мкм.

##### <a id="p100061"></a>5.2.3 Шприц для ВЭЖХ вместимостью 10 и 20 мкл.

<a id="p100062"></a>5.2.4. Весы лабораторные по ГОСТ 24104 с пределами абсолютной погрешности однократного взвешивания +/- 0,1 мг.
<a id="p100063"></a>5.2.5. Фильтры мембранные с диаметром пор 0,2 и 0,45 мкм для фильтрования подвижной фазы и проб.
<a id="p100064"></a>5.2.6. pH-метр с диапазоном измерений pH от 2 до 18; погрешность измерений +/- 0,01 ед. pH.
<a id="p100065"></a>5.2.7. Пипетки градуированные 1-2-1, 1-2-2, 1-2-5, 1-2-1 и 1-2-25 2-го класса точности по [ГОСТ 29227](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91).
<a id="p100066"></a>5.2.8. Колбы мерные вместимостью 25, 100 см3 с одной отметкой по [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).

##### <a id="p100067"></a>5.2.9 Емкости для жидких проб (виалы) вместимостью 2 - 6 см3.

<a id="p100068"></a>5.2.10. Центрифуга лабораторная с фактором разделения (g-фактор) 800 - 1000.

##### <a id="p100069"></a>5.2.11 Посуда лабораторная стеклянная по ГОСТ 25336:

<a id="p100070"></a>воронки лабораторные,
<a id="p100071"></a>стаканы вместимостью 50, 100 и 1000 см3.

##### <a id="p100072"></a>5.2.12 Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.


##### <a id="p100073"></a>5.2.13 Спирт этиловый ректификованный по [ГОСТ Р 51652](https://bukva.ai/docs/gost-r-51652-2000).


##### <a id="p100074"></a>5.2.14 Ацетонитрил для ВЭЖХ по [[1]](#p100309).


##### <a id="p100075"></a>5.2.15 Кислота ортофосфорная по ГОСТ 6552.

<a id="p100076"></a>Допускается применение других средств измерений, вспомогательного оборудования, не уступающих вышеуказанным по метрологическим и техническим характеристикам и обеспечивающим необходимую точность измерения, а также реактивов и материалов по качеству не хуже вышеуказанных.

#### <a id="p100077"></a>5.3 Подготовка к проведению определения


##### <a id="p100078"></a>5.3.1 Подготовка проб для хроматографического определения

<a id="p100079"></a>Для качественного определения антоцианинов в концентрированных соках и пюре взвешивают 1 г пробы с записью результата до третьего знака после запятой и пробу разбавляют в 5 см3 дистиллированной воды (пюре и соковую продукцию с высоким содержанием растворимых сухих веществ разбавляют дистиллированной водой в соотношении от 1:2 до 1:5). Подготовленную пробу для удаления мутной взвеси центрифугируют и фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,2 мкм.
<a id="p100080"></a>Для качественного определения антоцианинов в другой соковой продукции, а также в соках прямого отжима 1 г пробы без предварительного разбавления центрифугируют и фильтруют через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.
<a id="p100081"></a>При суммарном содержании антоцианинов в соке менее 0,1% пробу фильтруют через мембранный фильтр, не разбавляя.

##### <a id="p100082"></a>5.3.2 Приготовление подвижной фазы для жидкостной хроматографии

<a id="p100083"></a>Готовят раствор ортофосфорной кислоты с pH = 2,1. Для этого в дистиллированную воду по каплям добавляют концентрированную ортофосфорную кислоту (см. [5.2.15](#p100075)), pH контролируют с помощью pH-метра. Полученный раствор ортофосфорной кислоты смешивают с ацетонитрилом в соотношении 88:12 в процентах по объему. Подвижную фазу фильтруют под вакуумом через мембранный фильтр с диаметром пор 0,45 мкм.
<a id="p100084"></a>Срок хранения подвижной фазы - одна неделя при хранении в плотно укупоренной посуде.

##### <a id="p100085"></a>5.3.3 Выполнение измерений

<a id="p100086"></a>Условия хроматографического анализа:
<a id="p100087"></a>колонка аналитическая длиной 250 мм и внутренним диаметром 4,6 мм, заполненная октадецилсиликагелем размером частиц 5 мкм;
<a id="p100088"></a>температура колонки: 35 °C;
<a id="p100089"></a>детектирование: фотометрический детектор с длиной волны 518 нм;
<a id="p100090"></a>скорость подачи элюента: 1,0 см3/мин;
<a id="p100091"></a>объем вводимой пробы: 10 - 20 мкл.
<a id="p100092"></a>Градиентное элюирование:
<a id="p100093"></a>ортофосфорная кислота с pH = 2,1 (см. [5.3.2](#p100082)) в соотношении с ацетонитрилом (см. [5.2.14](#p100074)) в соответствии с таблицей 1.

<div align="center">

<a id="p100094"></a>Таблица 1

<a id="p100095"></a>Состав подвижной фазы

</div>



| Длительность, мин | Ортофосфорная кислота, % по объему | Ацетонитрил, % по объему | Тип градиента |
| --- | --- | --- | --- |
| 0 | 88 | 12 | Линейный |
| 20 | 75 | 25 | Линейный |
| 30 | 60 | 40 | Линейный |


<a id="p100100"></a>Хроматографическая система (обращенно-фазовая колонка в качестве неподвижной фазы и градиент водного раствора ортофосфорной кислоты и ацетонитрила) должна обеспечивать разделение основных пиков антоцианинов, приведенных в [таблице Б.1](#p100254) Приложения Б.
<a id="p100101"></a>Примечание. Пример разделения пиков антоцианинов сока черной смородины приведен на [рисунке Б.1](#p100283) Приложения Б. Хроматографическая система должна обеспечивать разделение на четыре основных пика для сока черной смородины, причем пики 2 и 3 должны разделяться полностью (до нулевой линии).


#### <a id="p100102"></a>5.4 Обработка и оформление результатов

<a id="p100103"></a>Идентификацию пиков проводят путем сравнения с хроматограммами соковой продукции из фруктов с известным составом пигментов антоцианина и с [таблицей Б.2](#p100286) Приложения Б.
<a id="p100104"></a>Содержание индивидуальных пигментов, выраженное в относительных единицах - процентах, определяют как отношение площади хроматографического пика к сумме площадей всех идентифицированных пиков антоцианинов.
<a id="p100105"></a>Систематизированные данные, характеризующие порядок выхода наиболее распространенных антоцианинов в соковой продукции из фруктов и их примерный состав, приведены в [таблице Б.2](#p100286) Приложения Б.


### 6. <a id="p100106"></a>Метод pH-дифференциальной спектрофотометрии



#### <a id="p100107"></a>6.1 Сущность метода pH-дифференциальной спектрофотометрии

<a id="p100108"></a>Метод основан на применении pH-дифференциальной спектрофотометрии. Суммарную массовую концентрацию (массовую долю) антоцианинов в соковой продукции определяют на основе изменения поглощения света с длиной волны 510 нм при изменении кислотности растворов соковой продукции с pH от 1 до 4,4.

#### <a id="p100109"></a>6.2 Средства измерений, вспомогательные устройства, материалы, реактивы

<a id="p100110"></a>6.2.1. Спектрофотометр СФ-26, СФ-46 или подобный, позволяющий проводить измерения при длинах волн от 200 до 900 нм, допустимая абсолютная погрешность измерения коэффициента пропускания - не более 1%.
<a id="p100111"></a>6.2.2. Кюветы кварцевые для спектрофотометрии с длиной оптического пути 10 мм.

##### <a id="p100112"></a>6.2.3 Установка ультразвуковая с частотой ультразвука 43 - 45 кГц.


##### <a id="p100113"></a>6.2.4 Аппарат для встряхивания проб по [[2]](#p100310).

<a id="p100114"></a>6.2.5. Весы лабораторные по ГОСТ 24104 с пределами абсолютной погрешности однократного взвешивания +/- 0,1 мг.
<a id="p100115"></a>6.2.6. Весы лабораторные по ГОСТ 24104 с пределами абсолютной погрешности однократного взвешивания +/- 0,5 мг.
<a id="p100116"></a>6.2.7. pH-метр с диапазоном измерений pH от 2 до 18; погрешность измерений +/- 0,01 ед. pH;

##### <a id="p100117"></a>6.2.8 Фильтры мембранные с диаметром пор 0,45 мкм.

<a id="p100118"></a>6.2.9. Центрифуга лабораторная с фактором разделения (g-фактор) 800 - 1000.
<a id="p100119"></a>6.2.10. Колбы мерные наливные 2-50-2, 2-100-2, 2-250-2 по [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100120"></a>6.2.11. Пипетки 4-1-2 или 5-1-2, 4-2-10 или 5-2-10, 4-2-25 или 5-2-25 по [ГОСТ 29227](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91).

##### <a id="p100121"></a>6.2.12 Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

<a id="p100122"></a>6.2.13. Цианидин-3-О-глюкозид, содержание основного вещества не менее 95%.

##### <a id="p100123"></a>6.2.14 Спирт этиловый ректификованный по [ГОСТ Р 51652](https://bukva.ai/docs/gost-r-51652-2000).


##### <a id="p100124"></a>6.2.15 Ацетонитрил для ВЭЖХ по [[1]](#p100309).


##### <a id="p100125"></a>6.2.16 Натрий уксуснокислый по ГОСТ 199, ч.д.а.


##### <a id="p100126"></a>6.2.17 Калий хлористый по ГОСТ 4234, ч.д.а.


##### <a id="p100127"></a>6.2.18 Кислота соляная по ГОСТ 3118.

<a id="p100128"></a>Допускается применение других средств измерений, вспомогательного оборудования, не уступающих вышеуказанным по метрологическим и техническим характеристикам и обеспечивающим необходимую точность измерения, а также реактивов и материалов по качеству не хуже вышеуказанных.

#### <a id="p100129"></a>6.3 Проведение измерений


##### <a id="p100130"></a>6.3.1 Условия проведения измерений

<a id="p100131"></a>Измерения проводят в следующих лабораторных условиях:

<a id="p100132"></a>    температура окружающего воздуха . . . . . . . . .(25 +/- 5) °C;
<a id="p100133"></a>    атмосферное давление. . . . . . . . . . . . . . .(97 +/- 10) кПа;
<a id="p100134"></a>    относительная влажность . . . . . . . . . . . . .(65 +/- 15)%;
<a id="p100135"></a>    частота переменного тока. . . . . . . . . . . . .(50 +/- 5) Гц;
<a id="p100136"></a>    напряжение в сети . . . . . . . . . . . . . . . .(220 +/- 10) В.


##### <a id="p100137"></a>6.3.2 Подготовка к проведению определения методом pH-дифференциальной спектрофотометрии


###### <a id="p100138"></a>6.3.2.1 Подготовка буферных растворов

<a id="p100139"></a>а) Подготовка буферного раствора с pH = 1,0
<a id="p100140"></a>Для приготовления буферного раствора с pH = 1,0 помещают 1,49 г хлористого калия KCl в мерную колбу вместимостью 100 см3, доводят до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают.
<a id="p100141"></a>Для приготовления раствора соляной кислоты молярной концентрации c(HCl) = 0,2 моль/дм3 в мерную колбу вместимостью 100 см3 помещают 75 см3 дистиллированной воды, осторожно приливают 1,7 см3 концентрированной соляной кислоты HCl, доводят до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают.
<a id="p100142"></a>Затем в стакане вместимостью 100 см3 смешивают 25 см3 полученного раствора KCl с 67 см3 раствора HCl молярной концентрации 0,2 моль/дм3. При необходимости значение pH полученного буферного раствора доводят до 1,0 концентрированной соляной кислотой.
<a id="p100143"></a>б) Подготовка буферного раствора с pH = 4,5
<a id="p100144"></a>Для приготовления буферного раствора с pH = 4,5 растворяют 1,64 г уксуснокислого натрия, помещают в мерную колбу вместимостью 100 см3, доводят до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают. Доводят значение pH раствора до 4,5 концентрированной соляной кислотой.
<a id="p100145"></a>Срок хранения буферных растворов - не более 3 мес.

###### <a id="p100146"></a>6.3.2.2 Подготовка проб для анализа

<a id="p100147"></a>а) Определение массовой концентрации суммы антоцианинов в соковой продукции, не содержащей нерастворимые в воде вещества, проводят следующим образом. В две мерные колбы вместимостью 25 см3 каждая помещают по 1 см3 пробы и доводят до метки буферными растворами с pH 1,0 и 4,5, приготовленными в соответствии с [6.3.2.1](#p100138). Растворы перемешивают, выдерживают в течение 15 мин и проводят измерение оптической плотности при длинах волн 510 и 700 нм. Измерение оптической плотности при 700 нм проводят для установления величины поглощения света посторонними примесями в анализируемой соковой продукции.
<a id="p100148"></a>б) Определение массовой концентрации суммы антоцианинов в соковой продукции, содержащей нерастворимые в воде вещества, проводят следующим образом. 15 см3 пробы предварительно гомогенизируют, а затем центрифугируют по [6.2.9](#p100118) с фактором разделения не менее 990 g в течение 20 мин.
<a id="p100149"></a>Получают осветленную пробу. После этого в две мерные колбы, вместимостью 25 см3 каждая, помещают по 1 см3 осветленной пробы и доводят до метки буферными растворами с pH 1,0 и 4,5, приготовленными в соответствии с [6.3.2.1](#p100138). Растворы перемешивают, выдерживают в течение 15 мин и проводят измерение оптической плотности при длинах волн 510 и 700 нм. Измерение оптической плотности при 700 нм проводят для установления величины поглощения света посторонними примесями в анализируемой соковой продукции.
<a id="p100150"></a>в) Определение массовой доли суммы антоцианинов в концентрированных соках проводят после предварительного разбавления пробы дистиллированной водой весовым методом в соотношении 1:5.
<a id="p100151"></a>Для этого на лабораторных весах по ГОСТ 24104 в колбе вместимостью 25 см3 взвешивают 5 г концентрированного сока с записью результата до третьего знака после запятой, прибавляют дистиллированную воду до метки и тщательно перемешивают. Затем в две мерные колбы вместимостью по 25 см3 (V) отбирают по 1 см3 приготовленного раствора и доводят их до метки буферными растворами с pH 1,0 и 4,5, приготовленными по [6.3.2.1](#p100138) (соотношение двух взятых объемов 25 см3 и 1 см3 составляет величину разведения (R), используемую при расчете массовой доли антоцианинов по [формуле 4](#p100175)).
<a id="p100152"></a>Растворы перемешивают и выдерживают в течение 15 мин до начала измерений и проводят измерение оптической плотности при длинах волн 510 и 700 нм.
<a id="p100153"></a>г) Подготовку проб по [6.3.2.2 а)](#p100147) и [б)](#p100148) проводят с целью определения массовой концентрации суммы антоцианинов, а по [6.3.2.2 в)](#p100150) - с целью определения их массовой доли.
<a id="p100154"></a>6.3.2.3. Значения оптической плотности должны находиться в пределах 0,2 - 1,0.
<a id="p100155"></a>Для проб соковой продукции, приготовленных по [6.3.2.2 в)](#p100150), имеющих значения оптической плотности раствора более 1,0, повышают величину разведения (R). Для проб соковой продукции, приготовленных по [6.3.2.2 б)](#p100148), увеличивают объем буферных растворов.
<a id="p100156"></a>Для проб соковой продукции, приготовленных по [6.3.2.2 в)](#p100150), имеющих значения оптической плотности раствора менее 0,2, уменьшают величину разведения (R). Для проб соковой продукции, приготовленных по [6.3.2.2 б)](#p100148), имеющих значения оптической плотности раствора менее 0,2, увеличивают объем анализируемой пробы.

##### <a id="p100157"></a>6.3.3 Выполнение спектрофотометрических измерений

<a id="p100158"></a>Измерения оптической плотности подготовленных проб проводят на спектрофотометре при длинах волн 510 и 700 нм. Измеряемой величиной является разность в оптической плотности растворов с pH 1,0 и 4,5 при длинах волн 510 и 700 нм, которая пропорциональна массовой концентрации (массовой доле) антоцианинов в исследуемом растворе. Пробы анализируют два раза в условиях повторяемости в соответствии с требованиями ГОСТ Р ИСО 5725-1 [(подраздел 3.14)](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-1-2002#p100153) и [ГОСТ Р ИСО 5725-2](https://bukva.ai/docs/gost-r-iso-5725-2-2002).

#### <a id="p100159"></a>6.4 Обработка результатов спектрофотометрических измерений

<a id="p100160"></a>6.4.1. Вычисления массовой концентрации суммы антоцианинов проводят до третьего десятичного знака в следующем порядке.
<a id="p100161"></a>Оптическую плотность суммы антоцианинов рассчитывают как разность оптических плотностей растворов при разных длинах волн и значениях pH по формуле

<div align="center">

<a id="p100162"></a> $A = (A_{510} - A_{700})_{pH = 1,0} - (A_{510} - A_{700})_{pH = 4,5}$ . (1)

</div>


<a id="p100163"></a>Массовую концентрацию суммы антоцианинов c(X), мг/дм3, рассчитывают в пересчете на цианидин-3-глюкозид по формуле

<div align="center">

<a id="p100164"></a> $c(X) = \frac{A \cdot M(X) \cdot V_{1}}{V_{2} \cdot \epsilon \cdot l} \cdot 10^{3}$ , (2)

</div>


<a id="p100165"></a>где A - измеренная оптическая плотность суммы антоцианинов;
<a id="p100166"></a>M(X) - молекулярная масса цианидин-3-глюкозида, равная 449,2 г/моль;
<a id="p100167"></a> $V_{1}$ - вместимость мерной колбы, взятой для разбавления, см3;
<a id="p100168"></a> $V_{2}$ - объем пробы, отобранный для анализа, см3;
<a id="p100169"></a> $\epsilon$ - молярный коэффициент экстинкции цианидин-3-глюкозида, равный $26900[\text{моль} \cdot \text{см}/\text{дм}^{3}]^{- 1}$ ;
<a id="p100170"></a>l - длина оптического пути кюветы, равная 1 см.
<a id="p100171"></a>6.4.2. Вычисления массовой доли суммы антоцианинов проводят до третьего десятичного знака в следующем порядке.
<a id="p100172"></a>Оптическую плотность суммы антоцианинов рассчитывают как разность оптических плотностей растворов при разных длинах волн и значениях pH по формуле

<div align="center">

<a id="p100173"></a> $A = (A_{510} - A_{700})_{pH = 1,0} - (A_{510} - A_{700})_{pH = 4,5}$ . (3)

</div>


<a id="p100174"></a>Массовую долю суммы антоцианинов c(X), $\text{млн}^{- 1}$ , в пересчете на цианидин-3-глюкозид рассчитывают по формуле

<div align="center">

<a id="p100175"></a> $c(X) = \frac{A \cdot M(X) \cdot R \cdot V}{\epsilon \cdot l \cdot m(X)} \cdot 10^{3}$ , (4)

</div>


<a id="p100176"></a>где A - измеренная оптическая плотность суммы антоцианинов;
<a id="p100177"></a>M(X) - молекулярная масса цианидин-3-глюкозида, равная 449,2 г/моль;
<a id="p100178"></a>R - величина разведения по [6.3.2.2 в)](#p100150);
<a id="p100179"></a>V - объем буферного раствора, см3, по [6.3.2.2 в)](#p100150);
<a id="p100180"></a> $\epsilon$ - молярный коэффициент экстинкции цианидин-3-глюкозида, равный $26900[\text{моль} \cdot \text{см}/\text{дм}^{3}]^{- 1}$ ;
<a id="p100181"></a>l - длина оптического пути кюветы, равная 1 см;
<a id="p100182"></a>m(X) - масса анализируемой пробы, г.
<a id="p100183"></a>Расхождение между двумя параллельными определениями (в процентах от среднего значения), выполненными в условиях повторяемости, не должно превышать предела повторяемости (сходимости) $r_{\text{отн}}$ , приведенного в [таблице 2](#p100187) при вероятности P = 0,95.
<a id="p100184"></a>При соблюдении этого условия за окончательный результат определения принимают среднеарифметическое значение результатов двух параллельных определений $X_{\text{ср}}$ , округленное до второго десятичного знака.
<a id="p100185"></a>Границы относительной погрешности определения массовой концентрации (массовой доли) суммы антоцианинов $\pm \delta$ , %, при соблюдении условий, регламентированных настоящим методом, при вероятности P = 0,95 не должны превышать значений, приведенных в таблице 2.

<div align="right">

<a id="p100186"></a>Таблица 2

</div>


<div align="center">

<a id="p100187"></a>Основные метрологические характеристики метода определения<br>
массовой концентрации или массовой доли суммы антоцианинов

</div>



<table>
<colgroup><col width="35%"><col width="20%"><col width="22%"><col width="23%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Метрологическая характеристика (P = 0,95, n = 2)</td><td colspan="3">Значение показателя при диапазонах измерений массовой концентрации (массовой доли), -1 мг/дм3 (млн )</td></tr>
<tr><td>От 5 до 100 включ. &lt;1&gt;</td><td>Св. 100 до 1000 включ. &lt;2&gt;</td><td>Св. 1000 до 5000 включ. &lt;3&gt;</td></tr>
<tr><td>Предел повторяемости (сходимости) r , % отн</td><td>14</td><td>9</td><td>8</td></tr>
<tr><td>Предел воспроизводимости R , % отн</td><td>19</td><td>14</td><td>10</td></tr>
<tr><td>Граница относительной погрешности +/- дельта, %</td><td>14</td><td>10</td><td>7</td></tr>
<tr><td>Предел обнаружения -1 метода, мг/дм3 (млн )</td><td colspan="3">1,0</td></tr>
<tr><td colspan="4">&lt;1&gt; Исследования проводились на образцах клубники, выращенной в средней полосе Российской Федерации. &lt;2&gt; Исследования проводились на образцах клюквы, выращенной в Российской Федерации. &lt;3&gt; Исследования проводились на образцах черной смородины, выращенной в средней полосе Российской Федерации.</td></tr>
</table>


<a id="p100197"></a>Если массовая концентрация (массовая доля) суммы антоцианинов превышает 5000 мг/дм3 $(\text{млн}^{- 1})$ , то определение массовой концентрации (массовой доли) суммы антоцианинов проводят после разбавления пробы.
<a id="p100198"></a>В заключение результат массовой концентрации (массовой доли) суммы антоцианинов представляют в следующем виде:

<div align="center">

<a id="p100199"></a> $X_{\text{ср}} \pm \Delta$ , (5)

</div>


<a id="p100200"></a>где $X_{\text{ср}}$ - среднее значение результатов двух параллельных определений, мг/дм3 $(\text{млн}^{- 1})$ ;
<a id="p100201"></a> $\Delta$ - границы абсолютной погрешности определений, мг/дм3 $(\text{млн}^{- 1})$ , рассчитанные по формуле

<div align="center">

<a id="p100202"></a> $\Delta = \frac{\delta \cdot X_{\text{ср}}}{100}$ , (6)

</div>


<a id="p100203"></a>где $\delta$ - значение относительной погрешности метода приведено в [таблице 2](#p100187), %.

#### <a id="p100204"></a>6.5 Контроль точности результатов определения


##### <a id="p100205"></a>6.5.1 Оперативный контроль повторяемости результатов определения

<a id="p100206"></a>Оперативный контроль повторяемости результатов определения массовой концентрации (массовой доли) антоцианинов проводят при получении каждого результата определения путем сравнения расхождения между результатами двух параллельных определений (в процентах от среднего значения) с пределом повторяемости (сходимости), приведенным в [таблице 2](#p100187).
<a id="p100207"></a>Повторяемость результатов признают удовлетворительной при условии

<div align="center">

<a id="p100208"></a> $|X_{1} - X_{2}| \leq 0,01r_{\text{отн}}X_{\text{ср}}$ . (7)

</div>


<a id="p100209"></a>При превышении предела повторяемости (сходимости) определение повторяют. При повторном превышении указанного предела выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, их устраняют и определение повторяют.

##### <a id="p100210"></a>6.5.2 Оперативный контроль воспроизводимости результатов определения

<a id="p100211"></a>Абсолютное расхождение между результатами двух независимых определений, которые получены в условиях воспроизводимости (одна и та же методика, идентичный объект определения, разные лаборатории, разные операторы, различное оборудование), не должно превышать предела воспроизводимости, приведенного в [таблице 2](#p100187). При превышении указанного предела воспроизводимости контрольное определение повторяют. При повторном превышении указанного предела воспроизводимости выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.

##### <a id="p100212"></a>6.5.3 Оперативный контроль погрешности (точности) результатов определения

<a id="p100213"></a>Для проведения оперативного контроля погрешности определение проводят в пробах, объем или масса которых должна соответствовать удвоенному их количеству, необходимому для проведения определения. Пробу делят на две равные части. В одну из них добавляют стандартный раствор цианидин-3-глюкозида в таких количествах, чтобы добавка составляла 50% - 150% исходного содержания компонента в пробе, но не превышала верхней границы диапазона определения массовой концентрации или массовой доли компонента с учетом границ погрешности определения (см. [таблицу 2](#p100187)). В обеих частях пробы проводят определение в соответствии с требованиями настоящего стандарта.
<a id="p100214"></a>Результаты контрольных определений признают удовлетворительными, если погрешность определения массовой концентрации (массовой доли) цианидина-3-глюкозида в добавке не превышает норматива оперативного контроля погрешности (точности), то есть выполняется условие

<div align="center">

<a id="p100215"></a> $|X_{\text{доб}} - X_{\text{ср}} - c_{\text{доб}}| \leq K_{\text{доб}}$ , (8)

</div>


<a id="p100216"></a>где $X_{\text{доб}}$ - среднее значение двух определений массовой концентрации (массовой доли) цианидина-3-глюкозида в пробе с добавкой, мг/дм3 $(\text{млн}^{- 1})$ ;
<a id="p100217"></a> $X_{\text{ср}}$ - среднее значение двух определений массовой концентрации (массовой доли) цианидина-3-глюкозида в пробе без внесения добавки, мг/дм3 $(\text{млн}^{- 1})$ ;
<a id="p100218"></a> $c_{\text{доб}}$ - значение добавки цианидина-3-глюкозида, мг/дм3 $(\text{млн}^{- 1})$ ;
<a id="p100219"></a> $K_{\text{доб}}$ - норматив оперативного контроля погрешности, мг/дм3 $(\text{млн}^{- 1})$ .
<a id="p100220"></a>При проведении внутрилабораторного контроля (P = 0,90) значение $K_{\text{доб}}$ рассчитывают по формуле

<div align="center">

<a id="p100221"></a> $K_{\text{доб}} = 0,84 \cdot \frac{\delta}{100} \cdot \sqrt{X_{\text{доб}}^{2} + X_{\text{ср}}^{2}}$ . (9)

</div>


<a id="p100222"></a>При проведении внешнего контроля (P = 0,95) значение $K_{\text{доб}}$ рассчитывают по формуле

<div align="center">

<a id="p100223"></a> $K_{\text{доб}} = \frac{\delta}{100} \cdot \sqrt{X_{\text{доб}}^{2} + X_{\text{ср}}^{2}}$ , (10)

</div>


<a id="p100224"></a>где $\delta$ - границы относительной погрешности определения массовой концентрации (массовой доли) цианидина-3-глюкозида, указанные в [таблице 2](#p100187).
<a id="p100225"></a>При превышении норматива оперативного контроля погрешности проводят повторные контрольные определения. При повторном превышении указанного норматива выясняют причины, приводящие к неудовлетворительным результатам, и устраняют их.
<a id="p100226"></a>Периодичность контроля погрешности (точности) устанавливается самой лабораторией с учетом фактического состояния работ. При замене оборудования, колонок, реактивов или при построении новой градуировочной зависимости проведение оперативного контроля погрешности обязательно.


### 7. <a id="p100227"></a>Требования безопасности



#### <a id="p100228"></a>7.1 Условия безопасного проведения работ

<a id="p100229"></a>При работе с химическими реактивами следует соблюдать требования безопасности, установленные для работ с токсичными, едкими и легковоспламеняющимися веществами по ГОСТ 12.1.005 и ГОСТ 12.1.007. При подготовке проб к анализу и выполнении измерений с использованием жидкостного хроматографа соблюдают правила пожаровзрывобезопасности по ГОСТ 12.1.018, по электробезопасности - по ГОСТ 12.1.019, и инструкции по эксплуатации прибора.

#### <a id="p100230"></a>7.2 Требования к квалификации оператора

<a id="p100231"></a>К выполнению измерений, обработке и оформлению результатов допускаются инженер-химик, техник или лаборант, имеющие высшее или среднее специальное образование, опыт работы в химической лаборатории и изучившие инструкцию по эксплуатации метода высокоэффективной жидкостной хроматографии. Первое применение метода высокоэффективной жидкостной хроматографии в лаборатории следует проводить под руководством специалиста, владеющего теорией метода высокоэффективной жидкостной хроматографии и имеющего практические навыки в этой области.





<div align="right">

<a id="p100232"></a>Приложение А<br>
(справочное)

</div>


<div align="center">

<a id="p100233"></a>**СТРУКТУРА ОСНОВНЫХ АНТОЦИАНИДИНОВ, ВХОДЯЩИХ**<br>
**В СОСТАВ ПРИРОДНЫХ АНТОЦИАНИНОВ**

</div>


<a id="p100234"></a>А.1. Общая структура антоцианидинов приведена на рисунке А.1.

<div align="center">

<a id="p100235"></a> ![7. Требования безопасности](https://i.bukva.ai/FonjCffC/img_0.png) 

<a id="p100236"></a>Рисунок А.1. Общая структура антоцианидинов

</div>


<a id="p100237"></a>*Примечание.* Конкретный вид антоцианидина зависит от состава радикалов $R_{1}$ , $R_{2}$ , приведенных в таблице А.1.

<div align="right">

<a id="p100238"></a>Таблица А.1

</div>


<div align="center">

<a id="p100239"></a>Виды антоцианидинов в зависимости от состава радикалов

</div>



<table>
<colgroup><col width="22%"><col width="28%"><col width="28%"><col width="22%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Вид антоцианидина</td><td colspan="2">Состав радикалов</td><td rowspan="2">Сокращенное наименование</td></tr>
<tr><td>R 1</td><td>R 2</td></tr>
<tr><td>Пеларгонидин</td><td>H</td><td>H</td><td>Pgd</td></tr>
<tr><td>Цианидин</td><td>OH</td><td>H</td><td>Cyd</td></tr>
<tr><td>Пеонидин</td><td>OCH 3</td><td>H</td><td>Pnd</td></tr>
<tr><td>Дельфинидин</td><td>OH</td><td>OH</td><td>Dpd</td></tr>
<tr><td>Петунидин</td><td>OCH 3</td><td>OH</td><td>Ptd</td></tr>
<tr><td>Мальвидин</td><td>OCH 3</td><td>OCH 3</td><td>Mvd</td></tr>
<tr><td colspan="4">Примечание - R и R - H или гликозиды. 3 4</td></tr>
</table>






<div align="right">

<a id="p100249"></a>Приложение Б<br>
(справочное)

</div>


<div align="center">

<a id="p100250"></a>**СИСТЕМАТИЗИРОВАННЫЕ ЛИТЕРАТУРНЫЕ И ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫЕ ДАННЫЕ**<br>
**ПО ПОРЯДКУ ВЫХОДА НАИБОЛЕЕ РАСПРОСТРАНЕННЫХ АНТОЦИАНИНОВ**<br>
**ФРУКТОВ И ИХ ПРИМЕРНОМУ СОСТАВУ**

</div>


<a id="p100251"></a>Б.1. Порядок элюирования индивидуальных антоцианинов, их сокращенное и полное наименования приведены в [таблице Б.1](#p100254).
<a id="p100252"></a>Б.2. Примерный состав основных антоцианинов фруктов приведен в [таблице Б.2](#p100286).

<div align="right">

<a id="p100253"></a>Таблица Б.1

</div>


<div align="center">

<a id="p100254"></a>Порядок элюирования индивидуальных антоцианинов,<br>
их сокращенное и полное наименования

</div>



<table>
<colgroup><col width="23%"><col width="36%"><col width="41%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">N п/п</td><td colspan="2">Наименование антоцианинов</td></tr>
<tr><td>сокращенное</td><td>полное</td></tr>
<tr><td>1</td><td>Dpd-3,5-diglu</td><td>Дельфинидин-3,5-диглюкозид</td></tr>
<tr><td>2</td><td>Cyd-3,5-diglu</td><td>Цианидин-3,5-диглюкозид</td></tr>
<tr><td>3</td><td>Dpd-3-samb</td><td>Дельфинидин-3-самбубиозид</td></tr>
<tr><td>4</td><td>Dpd-3-gal</td><td>Дельфинидин-3-галактозид</td></tr>
<tr><td>5</td><td>Dpd-3-glu</td><td>Дельфинидин-3-глюкозид</td></tr>
<tr><td>6</td><td>Cyd-3-sop</td><td>Цианидин-3-софорозид</td></tr>
<tr><td>7</td><td>Cyd-3-glu-rut</td><td>Цианидин-3-гликорутинозид</td></tr>
<tr><td>8</td><td>Dpd-3-rut</td><td>Дельфинидин-3-рутинозид</td></tr>
<tr><td>9</td><td>Cyd-3-gal</td><td>Цианидин-3-галактозид</td></tr>
<tr><td>10</td><td>Dpd-3-ara</td><td>Дельфинидин-3-арабинозид</td></tr>
<tr><td>11</td><td>Cyd-3-samb</td><td>Цианидин-3-самбубиозид</td></tr>
<tr><td>12</td><td>Cyd-3-glu</td><td>Цианидин-3-глюкозид</td></tr>
<tr><td>13</td><td>Cyd-3-xyl-rut</td><td>Цианидин-3-ксилозорутинозид</td></tr>
<tr><td>14</td><td>Cyd-3-rut</td><td>Цианидин-3-рутинозид</td></tr>
<tr><td>15</td><td>Ptd-3-gal</td><td>Петунидин-3-галактозид</td></tr>
<tr><td>16</td><td>Cyd-3-ara</td><td>Цианидин-3-арабинозид</td></tr>
<tr><td>17</td><td>Ptd-3-glu</td><td>Петунидин-3-глюкозид</td></tr>
<tr><td>18</td><td>Pgd-3-glu</td><td>Пеларгонидин-3-глюкозид</td></tr>
<tr><td>19</td><td>Pnd-3-gal</td><td>Пеонидин-3-галактозид</td></tr>
<tr><td>20</td><td>Pgd-3-ara</td><td>Пеларгонидин-3-арабинозид</td></tr>
<tr><td>21</td><td>Pnd-3-glu</td><td>Пеонидин-3-глюкозид</td></tr>
<tr><td>22</td><td>Mvd-3-glu</td><td>Мальвидин-3-глюкозид</td></tr>
<tr><td>23</td><td>Pnd-3-ara</td><td>Пеонидин-3-арабинозид</td></tr>
</table>


<a id="p100280"></a>*Пример* хроматограммы сока черной смородины приведен на рисунке Б.1.

<div align="center">

<a id="p100281"></a> ![7. Требования безопасности](https://i.bukva.ai/FonjCffC/img_1.png) 

<a id="p100282"></a>1 - Dpd-3-glu (дельфинидин-3-глюкозид);<br>
2 - Dpd-3-rut (дельфинидин-3-рутинозид);<br>
3 - Cyd-3-glu (цианидин-3-глюкозид);<br>
4 - Cyd-3-rut (цианидин-3-рутинозид)

<a id="p100283"></a>Рисунок Б.1. Пример хроматограммы сока<br>
черной смородины (происхождение - Россия, 2007 год,<br>
исследования НИИ питания РАМН)

</div>


<a id="p100284"></a>*Примечание.* Хроматографическая система должна обеспечивать разделение четырех основных пиков, причем пики 2 и 3 должны разделяться полностью (до нулевой линии).

<div align="right">

<a id="p100285"></a>Таблица Б.2

</div>


<div align="center">

<a id="p100286"></a>Примерный состав основных антоцианинов фруктов

</div>



<table>
<colgroup><col width="5%"><col width="5%"><col width="5%"><col width="4%"><col width="4%"><col width="4%"><col width="4%"><col width="5%"><col width="4%"><col width="4%"><col width="4%"><col width="4%"><col width="4%"><col width="5%"><col width="4%"><col width="4%"><col width="4%"><col width="4%"><col width="4%"><col width="4%"><col width="4%"><col width="4%"><col width="4%"><col width="4%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Наименование фрукта</td><td colspan="23">Относительное содержание антоцианинов, %</td></tr>
<tr><td>Dpd-3,5-diglu</td><td>Cyd3,5-diglu</td><td>Dpd-3-gal</td><td>Cyd-3-samb</td><td>Dpd-3-glu</td><td>Cyd-3-sop</td><td>Cyd-3-glu-rut</td><td>Dpd-3-rut</td><td>Cyd-3-gal</td><td>Dpd-3-ara</td><td>Cyd-3-samb</td><td>Cyd-3-glu</td><td>Cyd-3-xyl-rut</td><td>Cyd-3-rut</td><td>Ptd-3-gal</td><td>Cyd-3-ara</td><td>Ptd-3-glu</td><td>Pgd-3-glu</td><td>Pnd-3-gal</td><td>Pgd-3-ara</td><td>Pnd-3-glu</td><td>Mvd-3-glu</td><td>Pnd-3-ara</td></tr>
<tr><td>Гранат</td><td>0 - 15</td><td>0 - 15</td><td>-</td><td>-</td><td>15 - 45</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>15 - 45</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Гибискус</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>Более 45</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Черника</td><td>-</td><td>-</td><td>0 - 15</td><td>-</td><td>0 - 15</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>0 - 15</td><td>0 - 15</td><td>-</td><td>15 - 45</td><td>-</td><td>-</td><td>0 - 15</td><td>0 - 15</td><td>0 - 15</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>0 - 15</td><td>0 - 15</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Красный виноград</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>15 - 45</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>0 - 15</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>15 - 45</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>0 - 15</td><td>Более 45</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Черная смородина</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>15 - 45</td><td>-</td><td>-</td><td>15 - 45</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>0 - 15</td><td>-</td><td>15 - 45</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Красная смородина</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>0 - 15</td><td>0 - 15</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>0 - 15</td><td>Более 45</td><td>0 - 15</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Слива</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>Более 45</td><td>-</td><td>Более 45</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Клюква</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>15 - 45</td><td>-</td><td>-</td><td>0 - 15</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>15 - 45</td><td>-</td><td>-</td><td>15 - 45</td><td>-</td><td>0 - 15</td><td>-</td><td>15 - 45</td></tr>
<tr><td>Клубника</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>0 - 15</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>Более 45</td><td>-</td><td>0 - 15</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Черешня</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>15 - 45</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>Более 45</td><td>-</td><td>15 - 45</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Вишня</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>0 - 15</td><td>Более 45</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>0 - 15</td><td>-</td><td>15 - 45</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Малина</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>15 - 45</td><td>0 - 15</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>15 - 45</td><td>-</td><td>0 - 15</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Ежевика</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>Более 45</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>0 - 15</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Брусника</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>Более 45</td><td>-</td><td>-</td><td>0 - 15</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>0 - 15</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Бузина</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>Более 45</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Черноплодная рябина</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>Более 45</td><td>-</td><td>-</td><td>0 - 15</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>15 - 45</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>0 - 15</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Крыжовник черный</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>0 - 15</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>0 - 15</td><td>-</td><td>Более 45</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Калина</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>Более 45</td><td>0 - 15</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Ирга</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>Более 45</td><td>-</td><td>-</td><td>15 - 45</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>0 - 15</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr>
</table>







## <a id="p100308"></a>Библиография



1. <a id="p100309"></a>ТУ 6-09-3534-74 Ацетонитрил для ВЭЖХ
2. <a id="p100310"></a>ТУ 64-1-2451-78 Аппарат для встряхивания проб
   <a id="p100311"></a>------------------------------------------------------------------