---
title: "\"ГОСТ Р 53514-2009. Национальный стандарт Российской Федерации. Мясо и мясные продукты. Иммунопреципитационный метод определения массовой доли животного (говяжьего, свиного, бараньего) белка\""
number: "ГОСТ Р 53514-2009"
issuer: "Федеральное агентство по техническому регулированию и метрологии"
status: утратил силу
canonical: "https://bukva.ai/docs/gost-r-53514-2009"
---

## "ГОСТ Р 53514-2009. Национальный стандарт Российской Федерации. Мясо и мясные продукты. Иммунопреципитационный метод определения массовой доли животного (говяжьего, свиного, бараньего) белка"

# "ГОСТ Р 53514-2009. Национальный стандарт Российской Федерации. Мясо и мясные продукты. Иммунопреципитационный метод определения массовой доли животного (говяжьего, свиного, бараньего) белка"

(утв. и введен в действие Приказом Ростехрегулирования от 11.12.2009 N 748-ст)

> [!WARNING]
> Документ утратил силу с 1 июля 2015 года в связи с изданием Приказа Росстандарта от 12.10.2012 N 488-ст.
> Взамен введен в действие [ГОСТ 31477-2012](https://bukva.ai/docs/standart-gost-31477-2012).
> Документ утратил силу с 1 июля 2015 года в связи с изданием Приказа Росстандарта от 12.10.2012 N 488-ст. Взамен введен в действие [ГОСТ 31477-2012](https://bukva.ai/docs/standart-gost-31477-2012).
> Документ [введен](#p100009) в действие с 1 июля 2010 года.

> [!NOTE]
> ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

```mermaid
flowchart LR
  n0["ГОСТ Р 53514-2009"]:::rst
  click n0 "https://bukva.ai/docs/gost-r-53514-2009" "ГОСТ Р 53514-2009. Национальный стандарт Российской Федерации. Мясо и мясные продукты. Иммунопреципитационный метод определения массовой доли животного (говяжьего, свиного... (утв."
  n1["ГОСТ 31477-2012"]:::doc
  click n1 "https://bukva.ai/docs/standart-gost-31477-2012" "ГОСТ 31477-2012. Межгосударственный стандарт. Мясо и мясные продукты. Иммунопреципитационный метод определения массовой доли животного (говяжьего, свиного, бараньего) белка (введен"
  n0 --> n1
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;
```


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утвержден и введен в действие<br>
Приказом Федерального агентства<br>
по техническому регулированию<br>
и метрологии<br>
от 11 декабря 2009 г. N 748-ст

</div>


<a id="p100002"></a>**НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ**

<a id="p100003"></a>**МЯСО И МЯСНЫЕ ПРОДУКТЫ**

<a id="p100004"></a>**ИММУНОПРЕЦИПИТАЦИОННЫЙ МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ МАССОВОЙ ДОЛИ**
**ЖИВОТНОГО (ГОВЯЖЬЕГО, СВИНОГО, БАРАНЬЕГО) БЕЛКА**

<a id="p100005"></a>Meat and meat products. Immune method for determination
of animal (pork, beef, mutton) proteins mass fraction

<div align="right">

<a id="p100006"></a>**ГОСТ Р 53514-2009**

<a id="p100007"></a>Группа Н19

<a id="p100008"></a>ОКС 67.120.10

<a id="p100009"></a>Дата введения<br>
1 июля 2010 года

</div>



### <a id="p100010"></a>Предисловие


<a id="p100011"></a>Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от 27 декабря 2002 г. N 184-ФЗ "О техническом регулировании", а правила применения национальных стандартов Российской Федерации - ГОСТ Р 1.0-2004 "Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения".


### <a id="p100012"></a>Сведения о стандарте


1. <a id="p100013"></a>Разработан Государственным научным учреждением Всероссийским научно-исследовательским институтом мясной промышленности им. В.М. Горбатова Российской академии сельскохозяйственных наук (ГНУ ВНИИМП им. В.М. Горбатова Россельхозакадемии).
2. <a id="p100014"></a>Внесен Техническим комитетом по стандартизации ТК 226 "Мясо и мясная продукция".
3. <a id="p100015"></a>Утвержден и введен в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 11 декабря 2009 г. N 748-ст.
4. <a id="p100016"></a>Введен впервые.

<a id="p100017"></a>Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячно издаваемых информационных указателях "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет.


### 1. <a id="p100018"></a>ОБЛАСТЬ ПРИМЕНЕНИЯ


<a id="p100019"></a>Настоящий стандарт распространяется на мясо и мясные полуфабрикаты и устанавливает иммунопреципитационный метод определения массовой доли животного (говяжьего, свиного, бараньего) белка.
<a id="p100020"></a>Стандарт предназначен для идентификации свиного, говяжьего или бараньего белков в составе мясного сырья и мясных продуктов, не подвергнутых тепловой обработке.


### 2. <a id="p100021"></a>НОРМАТИВНЫЕ ССЫЛКИ


<a id="p100022"></a>В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:
<a id="p100023"></a>[ГОСТ Р 50444-92](https://bukva.ai/docs/standart-1552) Приборы, аппараты и оборудование медицинские. Общие технические условия
<a id="p100024"></a>[ГОСТ Р 51447-99](https://bukva.ai/docs/gost-r-51447-99) (ИСО 3100-1-91) Мясо и мясные продукты. Методы отбора проб
<a id="p100025"></a>ГОСТ 12.1.004-91 Система стандартов безопасности труда. Пожарная безопасность. Общие требования
<a id="p100026"></a>ГОСТ 12.1.007-76 Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности
<a id="p100027"></a>ГОСТ 12.1.019-79 Система стандартов безопасности труда. Электробезопасность. Общие требования и номенклатура видов защиты
<a id="p100028"></a>ГОСТ 12.4.009-83 Система стандартов безопасности труда. Пожарная техника для защиты объектов. Основные виды. Размещение и обслуживание
<a id="p100029"></a>[ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия
<a id="p100030"></a>ГОСТ 6709-72 Вода дистиллированная. Технические условия
<a id="p100031"></a>[ГОСТ 9656-75](https://bukva.ai/docs/gost-9656-75) Реактивы. Кислота борная. Технические условия
<a id="p100032"></a>[ГОСТ 10652-73](https://bukva.ai/docs/gost-10652-73) Реактивы. Соль динатриевая этилендиамин-N, N, N', N'-тетрауксусной кислоты 2-водная (трилон Б). Технические условия
<a id="p100033"></a>[ГОСТ 20903-75](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20903-75) Кюветы прямоугольные кварцевые для спектрофотометров. Основные размеры. Технические требования
<a id="p100034"></a>[ГОСТ 25011-81](https://bukva.ai/docs/gost-25011-81) Мясо и мясные продукты. Методы определения белка
<a id="p100035"></a>ГОСТ 25336-82 Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры
<a id="p100036"></a>ГОСТ 26678-85 Холодильники и морозильники бытовые электрические компрессионные параметрического ряда. Общие технические условия
<a id="p100037"></a>*Примечание.* При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодно издаваемому информационному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим ежемесячно издаваемым информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.


### 3. <a id="p100038"></a>СУЩНОСТЬ МЕТОДА


<a id="p100039"></a>Метод основан на проявлении особых свойств защитных систем высших позвоночных - вырабатывать новые сывороточные белки (антитела) при введении в организм посторонних для него веществ (антигенов). Используют диагностическую преципитирующую сыворотку к конкретному виду животного белка, вызывающую образование нерастворимого комплекса антиген-антитело.


### 4. <a id="p100040"></a>ДИАПАЗОНЫ ИЗМЕРЕНИЙ И МЕТРОЛОГИЧЕСКИЕ ХАРАКТЕРИСТИКИ МЕТОДА


<a id="p100041"></a>4.1. Диапазон измерений массовой доли животного (говяжьего, свиного, бараньего) белка от 1% до 85%.
<a id="p100042"></a>4.2. Метрологические характеристики метода при доверительной вероятности 0,95 приведены в таблице 1.

<div align="right">

<a id="p100043"></a>Таблица 1

</div>



| <a id="p100044"></a>Наименование показателя | <a id="p100045"></a>Диапазон измерений массовой доли, % | <a id="p100046"></a>Границы относительной погрешности $\pm \delta,%$ | <a id="p100047"></a>Предел повторяемости $r_{\text{отн}},\%$ | <a id="p100048"></a>Предел воспроизводимости $R_{\text{отн}},\%$ |
| --- | --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100049"></a>Массовая доля животного белка, % | <a id="p100050"></a>От 1 до 85 включ. | <a id="p100051"></a>30 | <a id="p100052"></a>24 | <a id="p100053"></a>38 |



### 5. <a id="p100054"></a>ОТБОР ПРОБ



#### <a id="p100055"></a>5.1 Отбор проб - по [ГОСТ Р 51447](https://bukva.ai/docs/gost-r-51447-99).

<a id="p100056"></a>5.2. Пробу хранят в холодильнике при температуре от 0 °C до 5 °C до полного завершения испытания в течение суток.
<a id="p100057"></a>Допускается хранение проб при температуре от минус 20 °C до минус 10 °C в герметичной упаковке в течение одной недели с даты отбора проб на исследование.


### 6. <a id="p100058"></a>СРЕДСТВА ИЗМЕРЕНИЙ, ОБОРУДОВАНИЕ, МАТЕРИАЛЫ И РЕАКТИВЫ


<a id="p100059"></a>Спектрофотометр СФ-103 типа "Аквилон", обеспечивающий измерения в диапазоне длин волн от 200 до 900 нм по [[1]](#p100175).
<a id="p100060"></a>Кюветы кварцевые толщиной 1 см по [ГОСТ 20903](https://bukva.ai/docs/standart-gost-20903-75).
<a id="p100061"></a>Весы лабораторные с пределом допускаемой абсолютной погрешности однократного взвешивания не более +/- 0,1 мг.
<a id="p100062"></a>Микроизмельчитель тканей РТ-2 по [[2]](#p100176) или гомогенизатор с частотой вращения 8000 - 24000 об/мин.
<a id="p100063"></a>Центрифуга с регулируемой скоростью вращения до 8000 об/мин.
<a id="p100064"></a>Пробирки центрифужные по ГОСТ 25336.
<a id="p100065"></a>Аппарат встряхивающий.
<a id="p100066"></a>Холодильник бытовой по ГОСТ 26678.
<a id="p100067"></a>Дозатор пипеточный переменного объема по [ГОСТ Р 50444](https://bukva.ai/docs/standart-1552) и [[3]](#p100177).
<a id="p100068"></a>Колбы мерные 2-го класса точности вместимостью 250 см3 по [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100069"></a>Цилиндр мерный 2-го класса точности вместимостью 250 см3 по [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100070"></a>Воронки стеклянные ВД-1-100 ХС по ГОСТ 25336.
<a id="p100071"></a>Диагностическая сыворотка по [[4]](#p100178).
<a id="p100072"></a>Свинина, говядина, баранина с массовой долей белка по Кьельдалю не менее 18% по [ГОСТ 25011](https://bukva.ai/docs/gost-25011-81) для использования в качестве контрольного образца.
<a id="p100073"></a>Соевый изолят с массовой долей белка по Кьельдалю не менее 85% по [ГОСТ 25011](https://bukva.ai/docs/gost-25011-81).
<a id="p100074"></a>Кислота борная по [ГОСТ 9656](https://bukva.ai/docs/gost-9656-75), ч.
<a id="p100075"></a>2-амино-2(гидроксиметил)-1,3-пропандиол (ТРИС) с массовой долей основного вещества 99,9%.
<a id="p100076"></a>Соль динатриевая этилендиамин-N, N, N', N'-тетрауксусной кислоты (трилон Б) по [ГОСТ 10652](https://bukva.ai/docs/gost-10652-73), ч.д.а.
<a id="p100077"></a>Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
<a id="p100078"></a>Допускается применение других средств измерений с метрологическими характеристиками, оборудования с техническими характеристиками и реактивов по качеству не ниже указанных в настоящем стандарте.


### 7. <a id="p100079"></a>ПОДГОТОВКА К ВЫПОЛНЕНИЮ ИЗМЕРЕНИЙ



#### <a id="p100080"></a>7.1 Приготовление растворов


##### <a id="p100081"></a>7.1.1 Приготовление концентрированного буферного раствора

<a id="p100082"></a>Навеску 2-амино-2(гидроксиметил)-1,3-пропандиола (ТРИС) массой 15,0 г и навеску трилона Б массой 1,5 г с помощью воронки переносят в мерную колбу вместимостью 250 см3 и при перемешивании добавляют 100 - 150 см3 дистиллированной воды. Полученный раствор перемешивают, в него добавляют постепенно 5,5 г борной кислоты и доводят объем раствора до метки дистиллированной водой. Раствор тщательно перемешивают до растворения осадка.

##### <a id="p100083"></a>7.1.2 Приготовление рабочего буферного раствора

<a id="p100084"></a>В мерную колбу вместимостью 250 см3 с помощью мерного цилиндра вносят 50 см3 концентрированного буферного раствора. Раствор в колбе доводят до метки дистиллированной водой, тщательно перемешивают и получают рабочий буферный раствор, содержащий в 1 см3 0,012 г ТРИС, 0,001 г трилона Б и 0,0044 г борной кислоты.

#### <a id="p100085"></a>7.2 Приготовление испытуемого экстракта пробы

<a id="p100086"></a>7.2.1. Навеску пробы массой 5,0 г перемешивают с 5 см3 рабочего буферного раствора в гомогенизаторе в течение 5 мин и выдерживают смесь 1 ч при температуре от 5 °C до 8 °C, периодически встряхивая в течение 5 мин.
<a id="p100087"></a>7.2.2. Смесь центрифугируют при 5000 об/мин в течение 20 мин. Для измерений используют верхний прозрачный слой, содержащий экстракт анализируемого белка.

#### <a id="p100088"></a>7.3 Приготовление двухкомпонентных модельных мясорастительных смесей для построения градуировочного графика

<a id="p100089"></a>Навески по 25,0 г свинины (говядины или баранины) смешивают с навесками 400,0 г и 100,0 г соевого изолята и навески по 100,0 г свинины (говядины или баранины) смешивают с навесками 100, 30, 15 и 3,5 г соевого изолята.
<a id="p100090"></a>Каждую смесь перемешивают на микроизмельчителе тканей в течение 30 мин до образования гомогенной массы. Допускается использование уменьшенных навесок в случае приготовления смеси путем растирания в ступке. Получают двухкомпонентные модельные мясорастительные смеси, массовая доля животного (говяжьего, свиного, бараньего) белка в которых относительно массовой доли общего белка равна 1,3%; 5,0%; 17,5%; 41,4%; 58,5% и 86,1%.
<a id="p100091"></a>Предварительно определяют массовую долю общего белка методом Кьельдаля по [ГОСТ 25011](https://bukva.ai/docs/gost-25011-81).


### 8. <a id="p100092"></a>ПРОВЕДЕНИЕ ИЗМЕРЕНИЙ



#### <a id="p100093"></a>8.1 Измерение испытуемых растворов

<a id="p100094"></a>8.1.1. 20 мм3 экстракта пробы смешивают с 400 мм3 рабочего буферного раствора, измеряют фоновое поглощение на спектрофотометре при $\lambda = 405\text{нм}$ (контроль), затем добавляют 20 мм3 диагностической сыворотки, содержащей антитела, к определяемому виду белка, проводят реакцию осаждения при постоянном встряхивании смеси в течение 1 ч. Для выявления специфического белка измеряют оптическую плотность среды в кювете с толщиной оптического слоя 1 см.
<a id="p100095"></a>8.1.2. Для подтверждения действия диагностической преципитирующей сыворотки на животный белок параллельно проводят анализ контрольного образца, не содержащего определяемый белок.
<a id="p100096"></a>8.1.3. Для каждого испытуемого раствора проводят два измерения, по результатам которых с помощью градуировочного графика находят средние значения массовой концентрации животного (говяжьего, свиного, бараньего) белка в этих растворах.

#### <a id="p100097"></a>8.2 Построение градуировочного графика

<a id="p100098"></a>Градуировочный график строят по результатам двукратного определения в соответствии с [8.1.1](#p100094) массовой доли животного (говяжьего, свиного, бараньего) белка в двухкомпонентных модельных мясорастительных смесях, содержащих животный белок и добавки растительного соевого белка, соответственно в таблицах 2 - [4](#p100137).

<div align="right">

<a id="p100099"></a>Таблица 2

</div>



| <a id="p100100"></a>Оптическая плотность среды $(D_{405})$ при 405 нм | <a id="p100101"></a>0,070 | <a id="p100102"></a>0,075 | <a id="p100103"></a>0,100 | <a id="p100104"></a>0,158 | <a id="p100105"></a>0,200 | <a id="p100106"></a>0,260 |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100107"></a>Массовая доля свиного белка в образце C, % от общего белка | <a id="p100108"></a>1,3 | <a id="p100109"></a>5,0 | <a id="p100110"></a>17,5 | <a id="p100111"></a>41,4 | <a id="p100112"></a>58,5 | <a id="p100113"></a>86,1 |


<div align="right">

<a id="p100114"></a>Таблица 3

</div>



| <a id="p100115"></a>Оптическая плотность среды $(D_{405})$ при 405 нм | <a id="p100116"></a>0,065 | <a id="p100117"></a>0,085 | <a id="p100118"></a>0,110 | <a id="p100119"></a>0,135 | <a id="p100120"></a>0,155 | <a id="p100121"></a>0,175 | <a id="p100122"></a>0,200 | <a id="p100123"></a>0,225 | <a id="p100124"></a>0,250 | <a id="p100125"></a>0,275 |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100126"></a>Массовая доля говяжьего белка в образце C, % от общего белка | <a id="p100127"></a>1 | <a id="p100128"></a>10 | <a id="p100129"></a>20 | <a id="p100130"></a>30 | <a id="p100131"></a>40 | <a id="p100132"></a>50 | <a id="p100133"></a>60 | <a id="p100134"></a>70 | <a id="p100135"></a>80 | <a id="p100136"></a>90 |


<div align="right">

<a id="p100137"></a>Таблица 4

</div>



| <a id="p100138"></a>Оптическая плотность среды $(D_{405})$ при 405 нм | <a id="p100139"></a>0,060 | <a id="p100140"></a>0,090 | <a id="p100141"></a>0,115 | <a id="p100142"></a>0,130 | <a id="p100143"></a>0,160 | <a id="p100144"></a>0,170 | <a id="p100145"></a>0,190 | <a id="p100146"></a>0,230 | <a id="p100147"></a>0,260 | <a id="p100148"></a>0,280 |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| <a id="p100149"></a>Массовая доля бараньего белка в образце C, % от общего белка | <a id="p100150"></a>11 | <a id="p100151"></a>110 | <a id="p100152"></a>220 | <a id="p100153"></a>330 | <a id="p100154"></a>440 | <a id="p100155"></a>550 | <a id="p100156"></a>660 | <a id="p100157"></a>770 | <a id="p100158"></a>880 | <a id="p100159"></a>990 |



### 9. <a id="p100160"></a>ОБРАБОТКА РЕЗУЛЬТАТОВ


<a id="p100161"></a>9.1. Массовую долю животного (говяжьего, свиного, бараньего) белка $\text{Б}_{\text{ж}},\%$ , относительно массовой доли общего белка, вычисляют по формуле

<a id="p100162"></a> $\text{Б}_{\text{ж}} = \frac{\text{С}}{\text{Б}_{\text{к}}} 100,(1)$ 

<a id="p100163"></a>где C - среднеарифметическое значение массовой доли животного (говяжьего, свиного, бараньего) белка в испытуемой пробе, %;
<a id="p100164"></a> $\text{Б}_{\text{к}}$ - массовая доля общего белка в анализируемом образце, определенная методом Кьельдаля, %.
<a id="p100165"></a>9.2. За окончательный результат измерения принимают среднеарифметическое из двух параллельных определений, если выполняется условие приемлемости:

<a id="p100166"></a> $[(2|\text{С}_{1} - \text{С}_{2}|)/(\text{С}_{1} + \text{С}_{2})] \cdot 100 \leq r_{\text{отн}},(2)$ 

<a id="p100167"></a>где $\text{С}_{1}$ и $\text{С}_{2}$ - результаты параллельных определений массовой доли животного (говяжьего, свиного, бараньего) белка, определенные по градуировочному графику, %;
<a id="p100168"></a> $r_{\text{отн}}$ - предел повторяемости, приведенный в [таблице 1](#p100043).
<a id="p100169"></a>Результат вычислений округляют до целого числа.


### 10. <a id="p100170"></a>ТРЕБОВАНИЯ БЕЗОПАСНОСТИ


<a id="p100171"></a>10.1. При подготовке и проведении измерений необходимо соблюдать требования техники безопасности при работе с химическими реактивами по ГОСТ 12.1.007.
<a id="p100172"></a>10.2. Помещение, в котором проводят измерения, должно быть снабжено приточно-вытяжной вентиляцией. Работу необходимо проводить, соблюдая правила личной гигиены и противопожарной безопасности в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.004, и иметь средства пожаротушения по ГОСТ 12.4.009.
<a id="p100173"></a>10.3. При работе с электроприборами необходимо соблюдать требования безопасности по ГОСТ 12.1.019.






## <a id="p100174"></a>БИБЛИОГРАФИЯ



1. <a id="p100175"></a>ТУ 4434-010-18294344-2002 Спектрофотометры СФ-101, СФ-103
2. <a id="p100176"></a>ТУ 64-1-1505-79           Микроизмельчитель тканей РТ-2
3. <a id="p100177"></a>ТУ 64-1-3329-81           Дозаторы пипеточные
4. <a id="p100178"></a>ТУ 42 КВС 13-74           Сыворотка,     преципитирующая      белки
   <a id="p100179"></a>сыворотки крови  свиньи, мелкого рогатого
   <a id="p100180"></a>скота, крупного рогатого  скота,  раствор
   <a id="p100181"></a>для   диагностических   целей (рег. N ФСР
   <a id="p100182"></a>2007/00346 от 11.07.07)
   <a id="p100183"></a>------------------------------------------------------------------