---
title: "\"ГОСТ Р 53184-2008. Национальный стандарт Российской Федерации. Рыба, морские беспозвоночные и продукты их переработки. Определение содержания диоксинов и диоксинподобных полихлорированных бифенилов хромато-масс-спектральным методом\""
number: "ГОСТ Р 53184-2008"
issuer: "Федеральное агентство по техническому регулированию и метрологии"
status: утратил силу
canonical: "https://bukva.ai/docs/gost-r-53184-2008"
---

## "ГОСТ Р 53184-2008. Национальный стандарт Российской Федерации. Рыба, морские беспозвоночные и продукты их переработки. Определение содержания диоксинов и диоксинподобных полихлорированных бифенилов хромато-масс-спектральным методом"

# "ГОСТ Р 53184-2008. Национальный стандарт Российской Федерации. Рыба, морские беспозвоночные и продукты их переработки. Определение содержания диоксинов и диоксинподобных полихлорированных бифенилов хромато-масс-спектральным методом"

(утв. и введен в действие Приказом Ростехрегулирования от 18.12.2008 N 634-ст)

> [!WARNING]
> Документ утратил силу с 15 февраля 2015 года в связи с изданием Приказа Росстандарта от 29.11.2012 N 1629-ст.
> Взамен введен в действие [ГОСТ 31792-2012](https://bukva.ai/docs/gost-31792-2012).
> Документ утратил силу с 15 февраля 2015 года в связи с изданием Приказа Росстандарта от 29.11.2012 N 1629-ст. Взамен введен в действие [ГОСТ 31792-2012](https://bukva.ai/docs/gost-31792-2012).
> Документ [введен](#p100010) в действие с 1 января 2010 года.

> [!NOTE]
> ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

```mermaid
flowchart LR
  n0["ГОСТ Р 53184-2008"]:::rst
  click n0 "https://bukva.ai/docs/gost-r-53184-2008" "ГОСТ Р 53184-2008. Национальный стандарт Российской Федерации. Рыба, морские беспозвоночные и продукты их переработки. Определение содержания диоксинов и диоксинподобных... (утв. и"
  n1["ГОСТ 31792-2012"]:::doc
  click n1 "https://bukva.ai/docs/gost-31792-2012" "ГОСТ 31792-2012. Межгосударственный стандарт. Рыба, морские беспозвоночные и продукты их переработки. Определение содержания диоксинов и диоксинподобных полихлорированных бифенилов"
  n0 --> n1
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;
```


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утвержден и введен в действие<br>
Приказом Федерального<br>
агентства по техническому<br>
регулированию и метрологии

</div>

от 18 декабря 2008 г. N 634-ст

<a id="p100002"></a>**НАЦИОНАЛЬНЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ**

<a id="p100003"></a>**РЫБА, МОРСКИЕ БЕСПОЗВОНОЧНЫЕ И ПРОДУКТЫ ИХ ПЕРЕРАБОТКИ**

<a id="p100004"></a>**ОПРЕДЕЛЕНИЕ СОДЕРЖАНИЯ ДИОКСИНОВ**
**И ДИОКСИНПОДОБНЫХ ПОЛИХЛОРИРОВАННЫХ**
**БИФЕНИЛОВ ХРОМАТО-МАСС-СПЕКТРАЛЬНЫМ МЕТОДОМ**

<a id="p100005"></a>Fish, marine invertebrates and products
of their processing. Determination of dioxins
and dioxin-like biphenyls content by GC-MS method

<a id="p100006"></a>**ГОСТ Р 53184-2008**

<a id="p100007"></a>Группа Н23

<a id="p100008"></a>ОКС 67.120.30

<div align="right">

<a id="p100009"></a>ОКП 92 7110

</div>

92 7114

<div align="right">

<a id="p100010"></a>Дата введения

</div>

1 января 2010 года


### <a id="p100011"></a>Предисловие


<a id="p100012"></a>Цели и принципы стандартизации в Российской Федерации установлены Федеральным законом от 27 декабря 2002 г. N 184-ФЗ "О техническом регулировании", а правила применения национальных стандартов Российской Федерации - ГОСТ Р 1.0-2004 "Стандартизация в Российской Федерации. Основные положения".


### <a id="p100013"></a>Сведения о стандарте


1. <a id="p100014"></a>Разработан ГУ "НПО "Тайфун" Федеральной службы по гидрометеорологии и мониторингу окружающей среды, ФГУП "Атлантический научно-исследовательский институт рыбного хозяйства и океанографии" (ФГУП "Атлант НИРО").
2. <a id="p100015"></a>Внесен Техническим комитетом по стандартизации ТК 335 "Методы испытаний агропромышленной продукции на безопасность".
3. <a id="p100016"></a>Утвержден и введен в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 18 декабря 2008 г. N 634-ст.
4. <a id="p100017"></a>Настоящий стандарт разработан с учетом основных нормативных положений международных стандартов ИСО 18073:2004 "Качество воды. Определение содержания от тетра- до октахлористых диоксинов и фуранов. Метод изотопного разведения HRGC/HRMS", ИСО 17858:2007 "Качество воды. Определение содержания диоксинподобных PCB. Метод GC/MS" и основных положений МУК МЗ РФ от 01.06.1999 "Методические указания по идентификации и изомерспецифическому определению полихлорированных дибензо-n-диоксинов и дибензофуранов в мясе, птице, рыбе, продуктах и субпродуктах из них, а также других жиросодержащих продуктах и кормах методом хромато-масс-спектрометрии".
5. <a id="p100018"></a>Введен впервые.

<a id="p100019"></a>Информация об изменениях к настоящему стандарту публикуется в ежегодно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты", а текст изменений и поправок - в ежемесячно издаваемых информационных указателях "Национальные стандарты". В случае пересмотра (замены) или отмены настоящего стандарта соответствующее уведомление будет опубликовано в ежемесячно издаваемом информационном указателе "Национальные стандарты". Соответствующая информация, уведомление и тексты размещаются также в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет.


### 1. <a id="p100020"></a>Область применения


<a id="p100021"></a>Настоящий стандарт предназначен для идентификации и выполнения измерений массовых концентраций 17 высокотоксичных полихлорированных дибензо-n-диоксинов и дибензофуранов: 2,3,7,8-тетрахлордибензо-n-диоксина, 2,3,7,8-пентахлордибензо-n-диоксина; 1,2,3,4,7,8-гексахлордибензо-n-диоксина; 1,2,3,6,7,8-гексахлордибензо-n-диоксина; 1,2,3,7,8,9-гексахлордибензо-n-диоксина; 1,2,3,4,6,7,8-гептахлордибензо-n-диоксина; октахлордибензо-n-диоксина; 2,3,7,8-тетрахлордибензофурана; 1,2,3,7,8-пентахлордибензофурана; 2,3,4,7,8-пентахлордибензофурана; 1,2,3,4,7,8-гексахлордибензофурана; 1,2,3,6,7,8-гексахлордибензофурана; 2,3,4,6,7,8-гексахлордибензофурана; 1,2,3,7,8,9-гексахлордибензофурана; 1,2,3,4,6,7,8-гептахлордибензофурана; 1,2,3,4,7,8,9-гептахлордибензофурана; октахлордибензофурана, а также 14 диоксиноподобных планарных полихлорированных бифенилов (ПХБ): 3,3',4,4'-тетрахлорбифенила; 3,4,4',5-тетрахлорбифенила; 2,3,3',4,4'-пентахлорбифенила; 2,3,4,4',5-пентахлорбифенила; 2,3',4,4',5-пентахлорбифенила; 2',3,4,4',5-пентахлорбифенила; 3,3',4,4',5-пентахлорбифенила; 2,3,3',4,4',5-гексахлорбифенила; 2,3,3',4,4',5'-гексахлорбифенила; 2,3',4,4',5,5'-гексахлорбифенила; 3,3',4,4',5,5'-гексахлорбифенила; 2,2',3,3',4,4',5-гептахлорбифенила; 2,2',3,4,4',5,5'-гептахлорбифенила; 2,3,3',4,4',5,5'-гептахлорбифенила в рыбе, морских беспозвоночных и продуктах их переработки.
<a id="p100022"></a>Метод анализа основан на экстракции аналитов органическими растворителями, последовательной очистке экстракта с применением гель-фильтрации и колоночной хроматографии на различных сорбентах и количественном анализе методом хромато-масс-спектрометрии с использованием суррогатных изотопно-меченых стандартов - аналогов определяемых соединений, вводимых в пробу на стадии пробоподготовки.
<a id="p100023"></a>Предел обнаружения различных конгенеров составляет соответственно от 0,1 до 0,5 нг/кг. Определению не мешает присутствие в образцах пестицидов, полихлорированных бифенилов и прочих галогенированных соединений.


### 2. <a id="p100024"></a>Нормативные ссылки


<a id="p100025"></a>В настоящем стандарте использованы нормативные ссылки на следующие стандарты:
<a id="p100026"></a>ГОСТ Р 52161.2.15-2006 (МЭК 60335-2-15:2005). Безопасность бытовых и аналогичных электрических приборов. Часть 2.15. Частные требования для приборов для нагревания жидкостей
<a id="p100027"></a>ГОСТ 12.1.007-76. Система стандартов безопасности труда. Вредные вещества. Классификация и общие требования безопасности
<a id="p100028"></a>[ГОСТ 201-76](https://bukva.ai/docs/gost-201-76). Тринатрийфосфат. Технические условия
<a id="p100029"></a>[ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) (ИСО 1042-83, ИСО 4788-80). Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Общие технические условия
<a id="p100030"></a>[ГОСТ 2652-78](https://bukva.ai/docs/postanovlenie-gost-2652-78). Калия бихромат технический. Технические условия
<a id="p100031"></a>[ГОСТ 4166-76](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76). Реактивы. Натрий сернокислый. Технические условия
<a id="p100032"></a>ГОСТ 4204-77. Реактивы. Кислота серная. Технические условия
<a id="p100033"></a>ГОСТ 4328-77. Реактивы. Натрия гидроокись. Технические условия
<a id="p100034"></a>ГОСТ 6709-72. Вода дистиллированная. Технические условия
<a id="p100035"></a>[ГОСТ 6995-77](https://bukva.ai/docs/standart-gost-6995-77). Реактивы. Метанол-яд. Технические условия
<a id="p100036"></a>[ГОСТ 7636-85](https://bukva.ai/docs/gost-7636-85). Рыба, морские млекопитающие, морские беспозвоночные и продукты их переработки. Методы анализа
<a id="p100037"></a>ГОСТ 9293-74. Азот газообразный и жидкий. Технические условия
<a id="p100038"></a>[ГОСТ 9968-86](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9968-86). Метилен хлористый технический. Технические условия
<a id="p100039"></a>ГОСТ 20010-93. Перчатки резиновые технические. Технические условия
<a id="p100040"></a>ГОСТ 24104-2001. Весы лабораторные. Общие технические требования
<a id="p100041"></a>ГОСТ 25336-82. Посуда и оборудование лабораторные стеклянные. Типы, основные параметры и размеры
<a id="p100042"></a>[ГОСТ 28498-90](https://bukva.ai/docs/gost-28498-90). Термометры жидкостные стеклянные. Общие технические требования. Методы испытаний
<a id="p100043"></a>[ГОСТ 29227-91](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) (ИСО 835-80). Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования.
<a id="p100044"></a>*Примечание.* При пользовании настоящим стандартом целесообразно проверить действие ссылочных стандартов в информационной системе общего пользования - на официальном сайте Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии в сети Интернет или по ежегодно издаваемому информационному указателю "Национальные стандарты", который опубликован по состоянию на 1 января текущего года, и по соответствующим ежемесячно издаваемым информационным указателям, опубликованным в текущем году. Если ссылочный стандарт заменен (изменен), то при пользовании настоящим стандартом следует руководствоваться заменяющим (измененным) стандартом. Если ссылочный стандарт отменен без замены, то положение, в котором дана ссылка на него, применяется в части, не затрагивающей эту ссылку.


### 3. <a id="p100045"></a>Термины, определения и сокращения



#### <a id="p100046"></a>3.1 В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями:

<a id="p100047"></a>3.1.1. Полихлорированные дибензо-n-диоксины/дибензофураны; ПХДД/ДФ: все конгенеры дибензо-n-диоксинов и дибензофуранов с содержанием в молекуле от одного до восьми атомов хлора.
<a id="p100048"></a>3.1.2. Суррогатный стандарт; SIS: смесь конгенеров ПХДД/ДФ или ПХБ, изотопно-меченых по углероду ${}^{13}C_{12}$ , вводимая в пробу на стадии обработки для контроля полноты извлечения и количественных расчетов.
<a id="p100049"></a>3.1.3. Внутренний стандарт; RIS: Изотопно-меченый по углероду ${}^{13}C_{12}$ изомер ПХДД/ДФ, не входящий в состав SIS, вводимый в подготовленный к анализу экстракт для контроля конечного объема экстракта, проверки стабильности работы масс-спектрометра и оперативного контроля эффективности хроматографического разделения изомеров.
<a id="p100050"></a>3.1.4. Реконструированная масс-хроматограмма: масс-хроматограмма, полученная компьютерной обработкой результатов анализа и показывающая значение сигнала, создаваемого ионами с заданной массой, а.е.м., характерной для конгенеров ПХДД/ДФ с определенной степенью хлорирования.
<a id="p100051"></a>3.1.5. Диоксиновый эквивалент токсичности; TEQ: конгенеры ПХДД/ДФ или ПХБ - значение, выраженное в относительных величинах токсичности, установленных Всемирной организацией здравоохранения, при условии, что токсичность изомера 2,3,7,8-тетрахлордибензо-n-диоксина принята равной 1 [(Приложение А)](#p100827).
<a id="p100052"></a>3.1.6. Суммарный диоксиновый эквивалент токсичности пробы: суммарная токсичность пробы, создаваемая токсичными конгенерами ПХДД/ДФ и планарными ПХБ, определяемая как сумма произведений концентраций каждого конгенера на соответствующий эквивалент токсичности ( $\sum$ TEQ, пг/г).

#### <a id="p100053"></a>3.2 В настоящем стандарте применены следующие сокращения для нижеследующих конгенеров:

<a id="p100054"></a>ТХДД - любой изомер тетрахлордибензо-n-диоксина;
<a id="p100055"></a>ПеХДД - любой изомер пентахлордибензо-n-диоксина;
<a id="p100056"></a>ГкХДД - любой изомер гексахлордибензо-n-диоксина;
<a id="p100057"></a>ГпХДД - любой изомер гептахлордибензо-n-диоксина;
<a id="p100058"></a>ОХДД - октахлордибензо-n-диоксин;
<a id="p100059"></a>ТХДФ - любой изомер тетрахлордибензофурана;
<a id="p100060"></a>ПеХДФ - любой изомер пентахлордибензофурана;
<a id="p100061"></a>ГкХДФ - любой изомер гексахлордибензофурана;
<a id="p100062"></a>ГпХДФ - любой изомер гептахлордибензофурана;
<a id="p100063"></a>ОХДФ - октахлордибензофуран;
<a id="p100064"></a>ПХБ - любой конгенер полихлорбифенила.
<a id="p100065"></a>*Примечание.* Порядок замещения для конкретного изомера указывается цифровым индексом, согласно правилам IUPAC, например, 1,2,3,4,5-пентахлордибензо-n-диоксин.


#### <a id="p100066"></a>3.3 Для обозначения конгенеров планарных полихлорированных бифенилов (ПХБ) используют следующие сокращения:

<a id="p100067"></a>ПХБ 77 - 3,3',4,4'-тетраХБ;
<a id="p100068"></a>ПХБ 81 - 3,4,4',5-тетраХБ;
<a id="p100069"></a>ПХБ 105 - 2,3,3',4,4'-пентаХБ;
<a id="p100070"></a>ПХБ 114 - 2,3,4,4',5-пентаХБ;
<a id="p100071"></a>ПХБ 118 - 2,3',4,4',5-пентаХБ;
<a id="p100072"></a>ПХБ 123 - 2',3,4,4',5-пентаХБ;
<a id="p100073"></a>ПХБ 126 - 3,3',4,4',5-пентаХБ;
<a id="p100074"></a>ПХБ 156 - 2,3,3',4,4',5-гексаХБ;
<a id="p100075"></a>ПХБ 157 - 2,3,3',4,4',5'-гексаХБ;
<a id="p100076"></a>ПХБ 167 - 2,3',4,4',5,5'-гексаХБ;
<a id="p100077"></a>ПХБ 169 - 3,3',4,4',5,5'-гексаХБ;
<a id="p100078"></a>ПХБ 170 - 2,2',3,3',4,4',5-гептаХБ;
<a id="p100079"></a>ПХБ 180 - 2,2',3,4,4',5,5'-гептаХБ;
<a id="p100080"></a>ПХБ 189 - 2,3,3',4,4',5,5'-гептаХБ.
<a id="p100081"></a>3.4. Для обозначения масс-спектрометрического режима анализа с использованием химической ионизации и детектированием отрицательно заряженных ионов используется сокращение ХИ ОИ.


### 4. <a id="p100082"></a>Требования безопасности


<a id="p100083"></a>Конгенеры ПХДД/ДФ относятся к высокотоксичным соединениям, обладающим канцерогенным, мутагенным и тератогенным действием. Для наиболее токсичного 2,3,7,8-ТХДД $LD_{50} = 0,05\text{мг}/\text{кг}$ , класс опасности 1.
<a id="p100084"></a>Требования безопасности при работе с препаратами, содержащими ПХДД/ДФ, устанавливают в соответствии со специальными инструкциями по работе с диоксином [[1]](#p100978), [[2]](#p100979) и ГОСТ 12.1.007.
<a id="p100085"></a>Помещения, в которых проводится подготовка проб, должны быть оборудованы приточно-вытяжной вентиляцией. Исходные стандартные образцы для приготовления градуировочных растворов и аттестованных смесей следует хранить в запираемом металлическом шкафу.
<a id="p100086"></a>Все операции по приготовлению аттестованных смесей и градуировочных растворов, содержащих ТХДД и его меченые аналоги, добавление стандартов к образцу, подготовку образца к анализу следует проводить под тягой в вытяжном шкафу.
<a id="p100087"></a>Пробы, подготовленные к анализу, и растворы стандартных образцов, градуировочных и контрольных растворов, аттестованных смесей следует держать в ампулах, закрытых завинчивающейся или запрессованной крышкой с тефлонированной резиновой прокладкой, прокалываемой микрошприцем.
<a id="p100088"></a>Меры по оказанию первой помощи при попадании диоксина и его растворов на кожу, в глаза и желудок проводят в соответствии с [[2]](#p100979).


### 5. <a id="p100089"></a>Средства измерений, вспомогательное оборудование, реактивы, материалы



#### <a id="p100090"></a>5.1. Средства измерений

<a id="p100091"></a>Хромато-масс-спектрометр высокого или низкого разрешения, позволяющий вести регистрацию отдельных ионов с заданными массами в диапазоне 50 - 600 а.е.м. при ионизации пробы в режиме электронного удара или химической ионизации с детектированием отрицательно заряженных ионов, оснащенный компьютерной системой обработки данных и имеющий предел обнаружения 2,3,7,8-ТХДД в режиме селективного детектирования ионов (соотношение сигнал/шум) при инжекции 1,0 пг данного вещества в прибор не хуже 5:1 (например, MAT-95XP, DFS, JMS-700, Agilent-5975, Varian-320MS, ITMS-240MS, ITQ 900GC/MS, TSQ Quantum или другие с подобными характеристиками).
<a id="p100092"></a>Кварцевые капиллярные хроматографические колонки 30 (60) м, диаметром 0,25 мм с неподвижной неполярной фазой типов (DB-5MS, VF-5MS) и (или) полярной фазой типов SP-Sil88, DB-DIOXIN (допускается использование и других колонок с неподвижными фазами, обеспечивающими разделение 2,3,7,8-замещенных изомеров и других ПХДД и ПХДФ).
<a id="p100093"></a>Термометр технический ртутный прямой с диапазоном измеряемой температуры от 0 °C до 100 °C с ценой деления 1 °C и температуры 300 °C с ценой деления 2 °C по [ГОСТ 28498](https://bukva.ai/docs/gost-28498-90).
<a id="p100094"></a>Весы лабораторные общего назначения среднего класса точности с пределом допустимой погрешности до 0,1 мг по ГОСТ 24104.

#### <a id="p100095"></a>5.2. Вспомогательные устройства и лабораторная посуда

<a id="p100096"></a>Микрошприцы хроматографические на 10 мкл, ценой деления 0,1 мкл, например фирмы Hamilton N 700, по нормативным документам.
<a id="p100097"></a>Автоматические дозаторы переменного объема (100 - 1000 мм3), с пределом погрешности не более +/- 0,8%, например фирмы Eppendorf N 3111.000.165, по нормативным документам.
<a id="p100098"></a>Автоматические дозаторы переменного объема (10 - 100 мм3), с пределом погрешности не более +/- 0,6%, например Eppendorf N 3111.000.149, по нормативным документам.
<a id="p100099"></a>Ротационный испаритель ИР - 1 М2 по [[3]](#p100980) или аналогичный по нормативным документам.
<a id="p100100"></a>Аппарат для встряхивания проб типа АВУ-1 по [[4]](#p100981) или аналогичный по нормативным документам.
<a id="p100101"></a>Микроизмельчитель тканей, Brinkmann Instr., PT-10/35, мощностью 300 - 500 Вт по нормативным документам.
<a id="p100102"></a>Шкаф сушильный типа 2В-151 по нормативным документам.
<a id="p100103"></a>Холодильник бытовой любой марки по нормативным документам.
<a id="p100104"></a>Муфельная печь любой марки, обеспечивающая нагрев в диапазоне температур 300 °C - 800 °C по нормативным документам.
<a id="p100105"></a>Пипетки 1-2-1, 2-2-5 по [ГОСТ 29227](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91).
<a id="p100106"></a>Перчатки резиновые технические по ГОСТ 20010.
<a id="p100107"></a>Цилиндры мерные исполнения 3, вместимостью 25, 50, 100, 250 см3 по [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100108"></a>Стаканы мерные вместимостью 100, 500, 800 см3 по ГОСТ 25336.
<a id="p100109"></a>Колбы круглодонные исполнения 4, вместимостью 500 см3, 100 см3 по ГОСТ 25336.
<a id="p100110"></a>Колбы плоскодонные конические исполнения 4, вместимостью 1000, 500, 250, 100 см3 по ГОСТ 25336.
<a id="p100111"></a>Колбы мерные, 10, 50 см3 класса - 2 по [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74).
<a id="p100112"></a>Колбы грушевидные, 100 см3 исполнения 4 по ГОСТ 25336.
<a id="p100113"></a>Воронки стеклянные конические 36 - 50, В-100-150 по ГОСТ 25336.
<a id="p100114"></a>Колонки стеклянные диаметром 8 мм, длиной 300 мм с верхним резервуаром по нормативным документам [(Приложение Б)](#p100866).
<a id="p100115"></a>Колонки стеклянные диаметром 6 мм, длиной 150 мм с верхним резервуаром по нормативным документам [(Приложение Б)](#p100866).
<a id="p100116"></a>Колонки стеклянные для гель-фильтрации диаметром 18 мм, длиной 600 мм по нормативным документам [(Приложение Б)](#p100866).
<a id="p100117"></a>Колонки стеклянные диаметром 30 мм, длиной 400 мм, с фильтром Шотта по нормативным документам [(Приложение Б)](#p100866).
<a id="p100118"></a>Палочки стеклянные по нормативным документам.
<a id="p100119"></a>Краны тефлоновые типа Cole-Parmer N A-30503-00 по нормативным документам.
<a id="p100120"></a>Воронки делительные ВД-1-100 ХС по ГОСТ 25336.
<a id="p100121"></a>Дефлегматор 250-14/23-29/32-ТС по ГОСТ 25336.
<a id="p100122"></a>Холодильник ХПТ-1-300-14/23 ХС по ГОСТ 25336.
<a id="p100123"></a>Эксикатор 2-250 по ГОСТ 25336.
<a id="p100124"></a>Микрофлаконы на 0,9 см3 с коническим дном типа Wheaton, Supelco N 27333 по нормативным документам.
<a id="p100125"></a>Стеклянные флаконы с завинчивающейся крышкой (Mini-Vials) вместимостью 2 см3 типа Supelco N 27023 по нормативным документам.
<a id="p100126"></a>Стеклянные флаконы с завинчивающейся крышкой (Mini-Vials) вместимостью 4 см3 типа Supelco N 27024 по нормативным документам.
<a id="p100127"></a>Тефлонированные прокладки (септы) диаметром 10 мм для виал типа Supelco N 27360-U по нормативным документам.
<a id="p100128"></a>Кримпер (устройство для герметизации виал) типа Supelco N 33195 по нормативным документам.
<a id="p100129"></a>Ампулы темного стекла, медицинские, вместимостью 5 см3 типа Jena-Vitropack [[5]](#p100982).
<a id="p100130"></a>Насос водоструйный по ГОСТ 25336.
<a id="p100131"></a>Баня водяная ультразвуковая типа В-12 по ГОСТ Р 52161.2.15.

#### <a id="p100132"></a>5.3. Реактивы и материалы

<a id="p100133"></a>Дихлорметан, х.ч., по [ГОСТ 9968](https://bukva.ai/docs/standart-gost-9968-86) или по [[6]](#p100983).
<a id="p100134"></a>Метанол, х.ч., по [ГОСТ 6995](https://bukva.ai/docs/standart-gost-6995-77).
<a id="p100135"></a>Силикагель Kieseigel 60, 70 - 230 мкм, импортный, например Merck N 7734.9025, по нормативным документам.
<a id="p100136"></a>Алюминия окись 90, основная, например фирмы Merck N 1097.9050, по нормативным документам.
<a id="p100137"></a>Натрий сернокислый безводный, х.ч., по [ГОСТ 4166](https://bukva.ai/docs/gost-4166-76).
<a id="p100138"></a>Калия бихромат, х.ч., по [ГОСТ 2652](https://bukva.ai/docs/postanovlenie-gost-2652-78).
<a id="p100139"></a>Тринатрийфосфат, ч., по ГОСТ 201.
<a id="p100140"></a>Гидроокись натрия, х.ч., по ГОСТ 4328.
<a id="p100141"></a>Серная кислота концентрированная, ос.ч., по ГОСТ 4204.
<a id="p100142"></a>Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.
<a id="p100143"></a>Гелий марки А по [[7]](#p100984).
<a id="p100144"></a>Азот, ос.ч., по ГОСТ 9293.
<a id="p100145"></a>Газовая смесь аргон-метан, 10% об. метана, ос.ч., по [[8]](#p100985) или [[9]](#p100986).
<a id="p100146"></a>н-Гексан, для следового анализа, импортный, например фирмы Merck, N 4368.2500, по нормативным документам.
<a id="p100147"></a>н-Декан, для следового анализа, импортный, например фирмы Merck, N 803405.0250, по нормативным документам.
<a id="p100148"></a>н-Нонан, для следового анализа, импортный, например фирмы Merck, N 806838.0250, по нормативным документам.
<a id="p100149"></a>Волокнистый кварцевый материал СКВ по [[10]](#p100987).
<a id="p100150"></a>Сорбент Bio-Beads S-X3, 200 - 400 mesh, Bio-Rad.Lab., N 152-2750, по нормативным документам.

#### <a id="p100151"></a>5.4. Стандартные растворы и контрольные образцы

<a id="p100152"></a>Изотопно-меченые суррогатные и внутренние стандарты ПХДД/ДФ, включающие:
<a id="p100153"></a>а) $SIS_{\text{ПХДД}/\text{ДФ}}$ - раствор смеси изотопно-меченых по углероду ${}^{13}C_{12}$ конгенеров ПХДД/ДФ в нонане, EDF-4053, производства компании Cambridge Isotope Laboratories, Inc., US (код по каталогу CIL N EDF4053), с погрешностью содержания каждого компонента +/- 10% (таблица 1).

<a id="p100154"></a>Таблица 1

<div align="center">

<a id="p100155"></a>Состав раствора $SIS_{\text{ПХДД}/\text{ДФ}}$ 

</div>



| Компоненты | Концентрация, мкг/см3 |
| --- | --- |
| 13 2,3,7,8-ТХДД ( C 99%) 12 | 1,0 |
| 13 1,2,3,7,8-ПеХДД ( C 99%) 12 | 1,0 |
| 13 1,2,3,6,7,8-ГхХДД ( C 99%) 12 | 1,0 |
| 13 1,2,3,4,6,7,8-ГпХДД ( C 99%) 12 | 1,0 |
| 13 ОХДД ( C 99%) 12 | 2,0 |
| 13 2,3,7,8-ТХДФ ( C 99%) 12 | 1,0 |
| 13 1,2,3,7,8-ПеХДФ ( C 99%) 12 | 1,0 |
| 13 1,2,3,6,7,8-ГхХДФ ( C 99%) 12 | 1,0 |
| 13 1,2,3,4,6,7,8-ГпХДФ ( C 99%) 12 | 1,0 |


<a id="p100166"></a>б) $RIS_{\text{ПХДД}/\text{ДФ}}$ - раствор смеси внутренних стандартов ПХДД/ДФ в нонане EPA 23RIS производства Cambridge Isotope Laboratory, Inc., US (код по каталогу CIL N EDF4055), с погрешностью содержания каждого компонента +/- 10% (таблица 2).

<a id="p100167"></a>Таблица 2

<a id="p100168"></a>Состав раствора $RIS_{\text{ПХДД}/\text{ДФ}}$ 


| Компоненты | Концентрация, мкг/см3 |
| --- | --- |
| 13 1,2,3,4-ТХДД ( C 99%) 12 | 0,5 |
| 13 1,2,3,7,8,9-ГхХДД ( C 99%) 12 | 0,5 |


<a id="p100172"></a>Калибровочный стандарт, включающий раствор 18 токсичных конгенеров ПХДД/ДФ, производства Cambridge Isotope Laboratory, Inc., US (номер по каталогу CIL N EDF-7999-10x), с погрешностью содержания каждого компонента +/- 10% (таблица 3), раствор в нонане.

<a id="p100173"></a>Таблица 3

<div align="center">

<a id="p100174"></a>Состав калибровочного стандарта

</div>



| Конгенер ПХДД | Концентрация, нг/см3 | Конгенер ПХДФ | Концентрация, нг/см3 |
| --- | --- | --- | --- |
| 2,3,7,8-ТХДД | 400 | 2,3,7,8-ТХДФ | 400 |
| 1,2,3,7,8-ПеХДД | 2000 | 1,2,3,7,8-ПеХДФ | 2000 |
| 1,2,3,4,7,8-ГкХДД | 2000 | 2,3,4,7,8-ПеХДФ | 2000 |
| 1,2,3,6,7,8-ГкХДД | 2000 | 1,2,3,4,7,8-ГкХДФ | 2000 |
| 1,2,3,7,8,9-ГкХДД | 2000 | 1,2,3,6,7,8-ГкХДФ | 2000 |
| 1,2,3,4,6,7,8-ГпХДД | 2000 | 2,3,4,6,7,8-ГкХДФ | 2000 |
| ОХДД | 4000 | 1,2,3,6,7,8-ГкХДФ | 2000 |
| 2,3,4,6,7,8-ГкХДФ | 2000 | 1,2,3,7,8,9-ГкХДФ | 2000 |
| 1,2,3,4,6,7,8-ГпХДФ | 2000 | ОХДФ | 4000 |


<a id="p100185"></a>Контрольный образец тканей рыбы с аттестованным содержанием ПХДД/ДФ и диоксинподобных планарных ПХБ (код по каталогу CIL N EDF2526), с содержанием конгенеров ПХДД/ДФ в диапазоне 10 - 50 нг/кг и конгенеров ПХБ в диапазоне 100 - 500 нг/кг.
<a id="p100186"></a>Изотопно-меченые суррогатные и внутренние стандарты ПХБ, включающие:
<a id="p100187"></a>а) $SIS_{\text{ПХБ}}$ - раствор смеси изотопно-меченых суррогатных планарных ПХБ в нонане (код по каталогу CIL N EC4995), с погрешностью содержания каждого компонента +/- 10% (таблица 4).

<a id="p100188"></a>Таблица 4

<a id="p100189"></a>Состав $SIS_{\text{ПХБ}}$ 


| Конгенер ПХБ | Концентрация, мкг/см3 |
| --- | --- |
| 13 ПХБ 77 ( C 99%) 12 | 1,0 |
| 13 ПХБ 81 ( C 99%) 12 | 1,0 |
| 13 ПХБ 105 ( C 99%) 12 | 1,0 |
| 13 ПХБ 114 ( C 99%) 12 | 1,0 |
| 13 ПХБ 118 ( C 99%) 12 | 1,0 |
| 13 ПХБ 123 ( C 99%) 12 | 1,0 |
| 13 ПХБ 126 ( C 99%) 12 | 1,0 |
| 13 ПХБ 156 ( C 99%) 12 | 1,0 |
| 13 ПХБ 157 ( C 99%) 12 | 1,0 |
| 13 ПХБ 167 ( C 99%) 12 | 1,0 |
| 13 ПХБ 169 ( C 99%) 12 | 1,0 |
| 13 ПХБ 170 ( C 99%) 12 | 1,0 |
| 13 ПХБ 180 ( C 99%) 12 | 1,0 |
| 13 ПХБ 189 ( C 99%) 12 | 1,0 |


<a id="p100205"></a>б) $RIS_{\text{ПХБ}}$ - раствор 2,3,4,4',5,6-гексахлорбифенила в нонане (код по каталогу CIL PCB N 166), с концентрацией 100 +/- 5 мкг/см3.
<a id="p100206"></a>Калибровочный стандарт, включающий раствор 14 планарных конгенеров ПХБ, производства Cambridge Isotope Laboratory (номер по каталогу CIL N EC-5000), с погрешностью содержания каждого компонента +/- 10% (таблица 5), раствор в нонане.

<a id="p100207"></a>Таблица 5

<a id="p100208"></a>Состав $RIS_{\text{ПХБ}}$ 


| Конгенер ПХБ | Концентрация, мкг/см3 |
| --- | --- |
| ПХБ 77 | 2,0 |
| ПХБ 81 | 2,0 |
| ПХБ 105 | 2,0 |
| ПХБ 114 | 2,0 |
| ПХБ 118 | 2,0 |
| ПХБ 123 | 2,0 |
| ПХБ 126 | 2,0 |
| ПХБ 156 | 2,0 |
| ПХБ 157 | 2,0 |
| ПХБ 167 | 2,0 |
| ПХБ 169 | 2,0 |
| ПХБ 170 | 2,0 |
| ПХБ 180 | 2,0 |
| ПХБ 189 | 2,0 |


<a id="p100224"></a>Допускается применение других средств измерений и оборудования с метрологическими характеристиками, а также других реактивов и материалов по качеству не ниже указанных в настоящем стандарте.


### 6. <a id="p100225"></a>Определение полихлорированных дибензо-n-диоксинов и дибензофуранов



#### <a id="p100226"></a>6.1. Подготовка посуды, сорбентов и реактивов


##### <a id="p100227"></a>6.1.1 Подготовка посуды

<a id="p100228"></a>Стеклянную химическую посуду замачивают в растворе тринатрийфосфата на 6 - 7 ч, затем промывают водопроводной водой, моют горячей хромовой смесью, ополаскивают водопроводной водой, а затем трижды дистиллированной водой и сушат при температуре 300 °C в сушильном шкафу.

##### <a id="p100229"></a>6.1.2 Подготовка реактивов и материалов

<a id="p100230"></a>Очистку растворителей н-гексана и дихлорметана осуществляют путем перегонки при атмосферном давлении с использованием стеклянной химической посуды в соответствии с правилами перегонки органических веществ.
<a id="p100231"></a>Используемые растворители квалификации "для следового анализа" производства фирмы Merck или аналогичные используются без очистки.
<a id="p100232"></a>Натрий сернокислый безводный марки ос.ч. прокаливают в муфельной печи 4 ч при температуре 400 °C, охлаждают в эксикаторе, хранят в колбе со шлифом не более месяца.
<a id="p100233"></a>Смесь гексан-дихлорметан (1:1) готовится смешением равных объемов гексана и дихлорметана в емкости вместимостью 5 дм3 из темного стекла, снабженной притертой пробкой.
<a id="p100234"></a>Смесь гексан-дихлорметан (97:3) готовится смешением 970 см3 гексана и 30 см3 дихлорметана в емкости вместимостью 1 дм3 из темного стекла, снабженной притертой пробкой.
<a id="p100235"></a>Смесь гексан-дихлорметан (40:60) готовится смешением 400 см3 гексана и 600 см3 дихлорметана в емкости вместимостью 1 дм3 из темного стекла, снабженной притертой пробкой.
<a id="p100236"></a>Кварцевый волокнистый материал СКВ прокаливают в муфельной печи при 700 °C в течение 30 мин и хранят в герметичной стеклянной таре не более месяца.
<a id="p100237"></a>При подготовке и использовании каждой новой партии реактивов и материалов или замене одного из них проводят проверку путем выполнения всей процедуры анализа для холостого опыта и контрольной аттестованной смеси, оценивая результаты с учетом характеристик погрешности. Допускается использование растворителей и сорбентов других марок, обеспечивающих проведение анализа с заданной погрешностью.

##### <a id="p100238"></a>6.1.3 Подготовка сорбентов


###### <a id="p100239"></a>6.1.3.1 Активирование оксида алюминия

<a id="p100240"></a>Навеску оксида алюминия массой 200 г помещают в кварцевый стакан и прокаливают в муфельной печи при 700 °C в течение 8 ч. Активированную окись алюминия хранят в герметичной стеклянной таре не более 3 сут.

###### <a id="p100241"></a>6.1.3.2 Активирование силикагеля

<a id="p100242"></a>Навеску силикагеля массой 200 - 400 г промывают последовательно двойными объемами метанола, а затем активируют в муфельной печи 8 ч при 350 °C. Активированный силикагель хранят в герметически закрытой стеклянной таре не более двух недель.

###### <a id="p100243"></a>6.1.3.3 Приготовление силикагеля, модифицированного серной кислотой

<a id="p100244"></a>Для приготовления партии силикагеля, модифицированного кислотой ( $SiO_{2}/H_{2}SO_{4}$ ), тщательно смешивают 56 г активированного $SiO_{2}$ и 24 см3 концентрированной $H_{2}SO_{4}$ (плотность 1,83 г/см3). Кислоту необходимо приливать небольшими порциями в колбу с активированным $SiO_{2}$ , встряхивая содержимое колбы. Готовый модифицированный сорбент должен представлять собой однородную массу без комков. Хранят приготовленный сорбент в колбе, закрытой притертой стеклянной пробкой, в эксикаторе и используют в течение 1 мес. По истечении этого срока остатки сорбента утилизируют.

###### <a id="p100245"></a>6.1.3.4 Приготовление силикагеля, модифицированного гидроксидом натрия

<a id="p100246"></a>Силикагель, модифицированный щелочью, готовят на основе активированного силикагеля со сроком хранения не более одного дня. Для приготовления 100 г $SiO_{2} + \text{щелочь}$ тщательно смешивают 67 г активированного $SiO_{2}$ и 31 см3 1 М водного раствора NaOH. Раствор щелочи приливают небольшими порциями в колбу с активированным $SiO_{2}$ и встряхивают содержимое колбы. Готовый модифицированный сорбент должен представлять собой однородную массу без комков. Хранят приготовленный сорбент в колбе, закрытой стеклянной пробкой, вне эксикатора, используют в течение одного месяца.

###### <a id="p100247"></a>6.1.3.5 Подготовка колонки для гель-фильтрации Bio-Beads SE-X3

<a id="p100248"></a>20 г сухого полистирольного геля Bio-Beads SE-X3 помещают в чистую колбу вместимостью 250 см3, заливают смесью гексан-дихлорметан (1:1) и выдерживают 24 ч.
<a id="p100249"></a>В колонку для гель-фильтрации, представляющую собой стеклянную трубку длиной 70 см и диаметром 20 мм с впаянным в нижней части пористым стеклянным фильтром Шотта и тефлоновым краном ([рисунок Б.1](#p100870), Приложение Б, 1), помещают слой кварцевого волокнистого материала СКВ и уплотняют его стеклянной палочкой. При закрытом кране наливают в колонку смеси гексан-дихлорметан (1:1) на 1/3 высоты рабочей части колонки. Переносят количественно сорбент в колонку, используя смесь гексан-дихлорметан (1:1). Пропускают через колонку 600 см3 смеси гексан-дихлорметан (1:1).
<a id="p100250"></a>Подготовленный полистирольный материал для гель-фильтрации Bio-Beads SE-X3 хранят в набухшем состоянии в колонке под слоем растворителя.

#### <a id="p100251"></a>6.2. Калибровка колонки Bio-Beads SE-X3

<a id="p100252"></a>Калибровка колонки для гель-фильтрации заключается в определении объема элюента FI, после пропускания которого начинается выделение целевой фракции, содержащей ПХДД/ДФ, и объема элюента FII, пропускание которого обеспечивает полное выделение целевой фракции из колонки.
<a id="p100253"></a>В мини-виалу вместимостью 2 см3 вносят 1 см3 смеси гексан-дихлорметан (1:1), затем добавляют автоматическим дозатором 5 мкл раствора смеси калибровочного стандарта ПХДД/ДФ. Перемешивают содержимое виалы на ультразвуковой бане 30 с и количественно переносят в колонку для гель-фильтрации.
<a id="p100254"></a>Элюируют колонку после внесения в нее раствора ПХДД/ДФ смесью гексан-дихлорметан (1:1) объемом 110 см3, пропуская растворитель со скоростью 1 мл/мин.
<a id="p100255"></a>Отбирают в мерные цилиндры фракции в следующих объемах:
<a id="p100256"></a>F1 - 0 - 40 (40 см3);
<a id="p100257"></a>F2 - 40 - 50 (10 см3);
<a id="p100258"></a>F3 - 50 - 60 (10 см3);
<a id="p100259"></a>F4 - 60 - 100 (40 см3);
<a id="p100260"></a>F5 - 100 - 110 (10 см3).
<a id="p100261"></a>Концентрируют каждую фракцию на роторном испарителе до объема около 0,5 - 1,0 см3 и переносят количественно в мини-виалу, выпаривают потоком азота до 100 - 200 мкл, добавляют внутренний стандарт и определяют содержание ПХДД/ДФ в каждой фракции, как описано ниже.
<a id="p100262"></a>Результат калибровки считается удовлетворительным, если суммарное содержание ПХДД/ДФ во фракциях FI, FIII, FIV, FV не превышает 5% внесенного количества и составляет не менее 95% ПХДД/ДФ во фракции FII. В противном случае требуется повторный опыт и корректировка объемов отбрасываемой и собираемой фракций.

#### <a id="p100263"></a>6.3 Подготовка градуировочных растворов ПХДД/ДФ и растворов изотопно-меченых суррогатных и внутренних стандартов

<a id="p100264"></a>Градуировочные растворы смеси индивидуальных и изотопно-меченых ПХДД/ДФ используют для проверки времен удерживания конгенеров, линейного диапазона детектирования и расчета фактора отклика анализируемых конгенеров.
<a id="p100265"></a>В качестве базового раствора смеси индивидуальных конгенеров ПХДД/ДФ используют смесь индивидуальных ПХДД/ДФ в нонане EDF-7999-10x.
<a id="p100266"></a>В качестве базового раствора суррогатного стандарта используют смесь изотопно-меченых по углероду ${}^{13}C_{12}$ конгенеров ПХДД/ДФ в нонане EDF-4053.
<a id="p100267"></a>В качестве базового раствора внутреннего стандарта ПХДД/ДФ используют смесь изотопно-меченых по углероду ${}^{13}C_{12}$ конгенеров ПХДД/ДФ в нонане EDF-4055.

##### <a id="p100268"></a>6.3.1 Приготовление градуировочных растворов


###### <a id="p100269"></a>6.3.1.1 Приготовление раствора C1

<a id="p100270"></a>Используя регулируемые автоматические дозаторы на объемы 100 - 1000 мкл и 10 - 100 мкл, последовательно вносят в виалу вместимостью 2 см3 950 мкл н-декана, 10 мкл базового раствора EDF-7999-10x и 40 мкл раствора EDF-4053.

###### <a id="p100271"></a>6.3.1.2 Приготовление раствора C2

<a id="p100272"></a>Используя регулируемые автоматические дозаторы на объемы 100 - 1000 мкл и 10 - 100 мкл, последовательно вносят в виалу вместимостью 4 см3 1870 мкл н-декана, 50 мкл базового раствора EDF-7999-10x и 80 мкл раствора EDF-4053.

###### <a id="p100273"></a>6.3.1.3 Приготовление раствора C3

<a id="p100274"></a>Используя регулируемые автоматические дозаторы на объемы 100 - 1000 мкл и 10 - 100 мкл, последовательно вносят в виалу вместимостью 2 см3 910 мкл н-декана, 50 мкл базового раствора EDF-7999-10x и 40 мкл раствора EDF-4053.

###### <a id="p100275"></a>6.3.1.4 Приготовление раствора C4

<a id="p100276"></a>Используя регулируемые автоматические дозаторы на объемы 100 - 1000 мкл и 10 - 100 мкл, последовательно вносят в виалу вместимостью 2 см3 860 мкл н-декана, 100 мкл базового раствора EDF-7999-10x и 40 мкл раствора EDF-4053.

###### <a id="p100277"></a>6.3.1.5 Приготовление раствора C5

<a id="p100278"></a>Используя регулируемые автоматические дозаторы на объемы 100 - 1000 мкл и 10 - 100 мкл, последовательно вносят в виалу вместимостью 4 см3 760 мкл н-декана, 200 мкл базового раствора EDF-7999-10x и 40 мкл раствора EDF-4053.
<a id="p100279"></a>Концентрации градуировочных растворов (нг/см3) приведены в таблице 6.

<a id="p100280"></a>Таблице 6

<a id="p100281"></a>Концентрации градуировочных растворов в нанограммах/см3


| Конгенер ПХДД/ДФ | С1 | С2 | С3 | С4 | С5 |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| 2,3,7,8-ТХДД | 4 | 10 | 20 | 40 | 80 |
| 1,2,3,7,8-ПеХДД | 20 | 50 | 100 | 200 | 400 |
| 1,2,3,4,7,8-ГкХДД | 20 | 50 | 100 | 200 | 400 |
| 1,2,3,6,7,8-ГкХДД | 20 | 50 | 100 | 200 | 400 |
| 1,2,3,7,8,9-ГкХДД | 20 | 50 | 100 | 200 | 400 |
| 1,2,3,4,6,7,8-ГпХДД | 20 | 50 | 100 | 200 | 400 |
| ОХДД | 40 | 100 | 200 | 400 | 800 |
| 2,3,7,8-ТХДФ | 20 | 50 | 100 | 200 | 400 |
| 1,2,3,7,8-ПеХДФ | 20 | 50 | 100 | 200 | 400 |
| 2,3,4,7,8-ПеХДФ | 20 | 50 | 100 | 200 | 400 |
| 1,2,3,4,7,8-ГкХДФ | 20 | 50 | 100 | 200 | 400 |
| 1,2,3,6,7,8-ГкХДФ | 20 | 50 | 100 | 200 | 400 |
| 2,3,4,6,7,8-ГкХДФ | 20 | 50 | 100 | 200 | 400 |
| 1,2,3,6,7,8-ГкХДФ | 20 | 50 | 100 | 200 | 400 |
| 2,3,4,6,7,8-ГкХДФ | 20 | 50 | 100 | 200 | 400 |
| 1,2,3,7,8,9-ГкХДФ | 20 | 50 | 100 | 200 | 400 |
| 1,2,3,4,6,7,8-ГпХДФ | 20 | 50 | 100 | 200 | 400 |
| ОХДФ | 40 | 100 | 200 | 400 | 800 |
| 13 2,3,7,8-ТХДД ( C 99%) 12 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 13 1,2,3,7,8-ПеХДД ( C 99%) 12 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 13 1,2,3,6,7,8-ГхХДД ( C 99%) 12 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 13 1,2,3,4,6,7,8-ГпХДД ( C 99%) 12 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 13 ОХДД ( C 99%) 12 | 80 | 80 | 80 | 80 | 80 |
| 13 2,3,7,8-ТХДФ ( C 99%) 12 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 13 1,2,3,7,8-ПеХДФ ( C 99%) 12 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 13 1,2,3,6,7,8-ГхХДФ ( C 99%) 12 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 13 1,2,3,4,6,7,8-ГпХДФ ( C 99%) 12 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 |


<a id="p100310"></a>Приготовленные градуировочные растворы можно хранить в герметически закрытых виалах при температуре не выше минус 10 °C без доступа солнечного света не более 6 мес, в стеклянных запаянных ампулах не более двух лет.

##### <a id="p100311"></a>6.3.2 Приготовление рабочего раствора изотопно-меченого суррогатного стандарта

<a id="p100312"></a>Для приготовления рабочего раствора SIS-1 в мерную колбу вместимостью 50 см3 вносят автоматическим регулируемым дозатором 1000 мкл базового раствора EDF-4053 и доводят объем раствора до метки н-деканом. Обозначают полученный рабочий раствор как SIS-1. Концентрации суррогатных стандартов в рабочем растворе (нг/см3) приведены в таблице 7.

<a id="p100313"></a>Таблица 7

<div align="center">

<a id="p100314"></a>Концентрация суррогатных стандартов

</div>

в рабочем растворов в нанограммах/см3


| Конгенер ПХДД/ДФ | SIS базовый ПХДД/ДФ | SIS-1 |
| --- | --- | --- |
| 13 1,2,3,7,8-ПеХДД ( C 99%) 12 | 1000 | 20 |
| 13 1,2,3,6,7,8-ГхХДД ( C 99%) 12 | 1000 | 20 |
| 13 1,2,3,4,6,7,8-ГпХДД ( C 99%) 12 | 1000 | 20 |
| 13 ОХДД ( C 99%) 12 | 2000 | 40 |
| 13 2,3,7,8-ТХДФ ( C 99%) 12 | 1000 | 20 |
| 13 1,2,3,7,8-ПеХДФ ( C 99%) 12 | 1000 | 20 |
| 13 1,2,3,6,7,8-ГхХДФ ( C 99%) 12 | 1000 | 20 |
| 13 1,2,3,4,6,7,8-ГпХДФ ( C 99%) 12 | 1000 | 20 |


<a id="p100324"></a>Приготовленный раствор перемешивают на ультразвуковой бане 10 мин, расфасовывают в стеклянные ампулы по 1 см3. Ампулы запаивают и хранят до использования без доступа солнечного света не более двух лет.

##### <a id="p100325"></a>6.3.3 Приготовление рабочего раствора изотопно-меченого внутреннего стандарта

<a id="p100326"></a>Для приготовления рабочего раствора внутреннего стандарта в мерную колбу вместимостью 10 см3 вносят автоматическим регулируемым дозатором 1000 мкл базового раствора EDF-4055 и доводят объем раствора до метки н-деканом. Обозначают полученный рабочий раствор внутреннего стандарта как RIS-1. Концентрации внутренних стандартов в рабочем растворе (нг/см3) приведены в таблице 8.

<a id="p100327"></a>Таблица 8

<div align="center">

<a id="p100328"></a>Концентрации внутренних стандартов

</div>

в рабочем растворе в нанограммах/см3


| Конгенер ПХДД/ДФ | RIS-1 базовый | RIS-1 |
| --- | --- | --- |
| 13 1,2,3,4-ТХДД ( C 99%) 12 | 500 | 50 |
| 13 2,3,7,8,9-ГхХДД ( C 99%) 12 | 500 | 50 |


<a id="p100332"></a>Приготовленный раствор перемешивают на ультразвуковой бане 10 мин, расфасовывают в стеклянные ампулы по 1 см3. Ампулы запаивают и хранят до использования без доступа солнечного света не более двух лет.

#### <a id="p100333"></a>6.4. Подготовка проб для анализа

<a id="p100334"></a>Образцы рыбы и морепродуктов хранят замороженными при температуре минус 20 °C не более двух месяцев.
<a id="p100335"></a>Для анализа отбирают из каждой партии рыбы не менее трех тушек общей массой 0,5 - 1,0 кг, при необходимости размораживают образцы при комнатной температуре.
<a id="p100336"></a>*Примечание.* Если экземпляры рыбы имеют массу свыше 1 кг, допускается использовать для анализа серединную часть тушки от трех экземпляров рыбы общей массой 1 кг.

<a id="p100337"></a>Отделяют голову и внутренности рыбы и гомогенизируют тушку на шнековой мясорубке с диаметром отверстий измельчителя не более 3 мм. Полученный фарш пропускают через мясорубку повторно. Отбирают для анализа образец фарша массой 50 г, остаток замораживают при минус 20 °C и хранят в стеклянной таре до завершения анализа.
<a id="p100338"></a>Печень рыбы размораживают, гомогенизируют образец массой не менее 100 г на шнековой мясорубке. Если рыба не разделана, размораживают тушки и извлекают печень не менее чем от трех экземпляров так, чтобы масса образца была не менее 100 г.
<a id="p100339"></a>Неочищенные щупальца кальмара размораживают, отбирают пробу массой 0,5 - 1 кг, гомогенизируют на шнековой мясорубке с диаметром отверстий измельчителя не более 3 мм. Полученный фарш пропускают через мясорубку повторно. Отбирают для анализа образец фарша массой 50 г, остаток замораживают при минус 20 °C и хранят до завершения анализа.
<a id="p100340"></a>У мелких ракообразных (креветок) отделяют голову и кишечный канал, гомогенизируют не очищенные от панциря тушки так, чтобы масса пробы составляла не меньше 100 г.
<a id="p100341"></a>Пробы рыбьего жира используют без подготовки.


### 7. <a id="p100342"></a>Проведение испытаний



#### <a id="p100343"></a>7.1. Экстракция ПХДД/ДФ

<a id="p100344"></a>Извлечение ПХДД/ДФ из образца проводится методом колоночной экстракции. Навеску гомогенизированного образца взвешивают в стакане вместимостью 250 см3 с точностью до 0,01 г, добавляют к нему 120 - 150 г безводного $Na_{2}SO_{4}$ и тщательно перемешивают стеклянной палочкой. Образец с добавленным $Na_{2}SO_{4}$ выдерживают в течение 1 ч, периодически перемешивая, при необходимости добавляя некоторое количество $Na_{2}SO_{4}$ . Перетирают образец пестиком в стеклянной ступке. Полностью высушенный образец представляет собой легко пересыпающуюся массу.
<a id="p100345"></a>Для анализа рыбы и тканей с низким содержанием липидов используют навеску 15 - 20 г, при анализе печени, гонад, мышц с высоким содержанием липидов - 6 - 8 г.
<a id="p100346"></a>Экстракцию образца проводят в стеклянной колонке с внутренним диаметром 30 мм и высотой рабочей части 30 см, имеющей в своей нижней части впаянный стеклянный фильтр Шотта и снимающийся тефлоновый кран. На стеклянный фильтр помещают слой кварцевой ваты СКВ и уплотняют ее стеклянной палочкой. Помещают 1/3 массы образца в колонку; в следующую 1/3 массы сначала вносят 50 мкл изотопно-меченого раствора суррогатного стандарта SIS-1, перемешивают стеклянной палочкой, а затем помещают в колонку; после этого в колонку переносят остаток пробы и уплотняют содержимое колонки постукиванием.
<a id="p100347"></a>Экстрагируют ПХДД/ДФ, пропуская через колонку с пробой 300 см3 смеси гексан-дихлорметан (1:1) со скоростью 3 - 4 мл/мин. Вытекающий из колонки экстракт-элюат собирают в круглодонную колбу вместимостью 500 см3.
<a id="p100348"></a>Экстракт-элюат концентрируют на роторном испарителе при температуре 50 °C до объема около 50 см3. Взвешивают грушевидную колбу 100 см3 и количественно переносят в нее сконцентрированный экстракт, обмывая стенки колбы смесью гексан-дихлорметан (1:1). Экстракт концентрируют на роторном испарителе до объема около 1 см3, добавляют около 1 см3 дихлорметана и очищают методом колоночной хроматографии.
<a id="p100349"></a>Пробу рыбьего жира массой 1 г растворяют в 20 см3 смеси гексан-дихлорметан (1:1) и очищают методом колоночной хроматографии.

#### <a id="p100350"></a>7.2. Очистка экстракта методом колоночной хроматографии


##### <a id="p100351"></a>7.2.1 Отделение липидов и высокомолекулярных соединений методом гель-фильтрации

<a id="p100352"></a>Из подготовленной колонки Bio-Beads SE-X3 сливают через тефлоновый кран растворитель и, не допуская высыхания верхнего слоя, промывают колонку, пропуская последовательно 35 см3 смеси метанол-дихлорметан (1:4) и 65 см3 смеси гексан-дихлорметан (1:1). Смесь такого же состава, гексан-дихлорметан (1:1), используют в качестве элюента.
<a id="p100353"></a>После окончания промывки сорбента под колонку ставят мерный цилиндр вместимостью 50 см3 и вносят в колонку сконцентрированный экстракт. Стенки колбы из-под экстракта обмывают не менее пяти раз элюентом и смывки также вносят в колонку.
<a id="p100354"></a>Пропускают элюат со скоростью 1 мл/мин, регулируя скорость тефлоновым краном. После пропускания 50 см3 элюата (фракция FI) заменяют цилиндр и отбирают целевую фракцию FII. Когда объем целевой фракции достигнет 50 см3, цилиндр с собранной фракцией FII извлекают из-под колонки.
<a id="p100355"></a>Переносят фракцию FII в грушевидную колбу и концентрируют на роторном испарителе до объема ~ 1 см3 и далее очищают на колонке с активированным и модифицированным силикагелем.

##### <a id="p100356"></a>7.2.2 Очистка на колонке с силикагелем

<a id="p100357"></a>Помещают в стеклянную колонку с внутренним диаметром 8 мм и длиной рабочей части 200 мм, с резервуаром для элюата в верхней части, слой кварцевой ваты, заполняют в следующем порядке:
- <a id="p100358"></a>1 см3 $SiO_{2}$ акт;
- <a id="p100359"></a>1 см3 $SiO_{2}/NaOH$ ;
- <a id="p100360"></a>1 см3 $SiO_{2}$ акт;
- <a id="p100361"></a>3 см3 $SiO_{2}/H_{2}SO_{4}$ ;
- <a id="p100362"></a>1 см3 $SiO_{2}$ акт;
- <a id="p100363"></a>слой безводного $Na_{2}SO_{4}$ на 1,0 - 1,5 см по высоте колонки.
<a id="p100364"></a>Каждый вносимый слой уплотняют постукиванием.
<a id="p100365"></a>Для смачивания сорбентов через колонку пропускают 10 см3 гексана. Под колонку подставляют чистую грушевидную колбу вместимостью 50 см3 для сбора элюата. Затем вносят сконцентрированную фракцию FII, собранную с колонки Bio-Beads SE-X3. Элюируют аналиты 50 см3 гексана. Стенки колбы обмывают гексаном не менее пяти раз, смывки вносят в колонку последовательно. Элюат концентрируют на роторном испарителе до объема около 1 см3.

##### <a id="p100366"></a>7.2.3 Очистка на активированном оксиде алюминия

<a id="p100367"></a>Используют колонку с внутренним диаметром 6 мм и длиной рабочей части 150 мм, с резервуаром для элюента в верхней части. На слой кварцевой ваты вносят 5 г сорбента. Пропускают через колонку 5 см3 гексана. После прохождения гексана в колонку вносят сконцентрированный элюат, собранный после колонки с силикагелем. Пропускают через колонку 50 см3 смеси гексан-дихлорметан (97:3), обмывают стенки колбы элюатом не менее пяти раз, смывы вносят в колонку последовательно. Отобранную фракцию утилизируют. Далее пропускают через колонку 50 см3 смеси гексан-дихлорметан (40:60) (об.), отбирая в чистую грушевидную колбу целевую фракцию Ф2, содержащую ПХДД/ДФ. Фракцию Ф2 концентрируют на роторном испарителе под вакуумом до объема около 0,5 см3.

##### <a id="p100368"></a>7.2.4 Концентрирование для инструментального анализа

<a id="p100369"></a>Сконцентрированную фракцию Ф2 после колонки с активированным оксидом алюминия количественно переносят с помощью гексана во флакон mini-Vial с оттянутым донышком. Избыток гексана осторожно удаляют потоком азота. Когда объем растворителя во флаконе достигнет примерно 100 мкл, автоматическим дозатором добавляют 20 мкл раствора внутреннего стандарта в декане RIS-1 и продолжают отдув до объема добавленного декана. Герметизируют флакон тефлонированной прокладкой и крышкой и передают для инструментального анализа.

#### <a id="p100370"></a>7.3. Выполнение измерений

<a id="p100371"></a>7.3.1. Хромато-масс-спектрометрия низкого разрешения в режиме химической ионизации пробы с детектированием отрицательно заряженных ионов (ХИ ОИ)
<a id="p100372"></a>Данный метод анализа обладает всеми преимуществами масс-спектрометрии и характеризуется высокой специфичностью ионизации аналитов ПХДД/ДФ, за счет чего снижается мешающее влияние посторонних веществ, присутствующих в пробе, и повышается надежность идентификации и чувствительность анализа. Метод позволяет использовать сравнительно недорогую аппаратуру низкого разрешения.

###### <a id="p100373"></a>7.3.1.1 Подготовка хромато-масс-спектрометра

<a id="p100374"></a>Хромато-масс-спектрометр готовят для анализа в режиме химической ионизации пробы с детектированием отрицательно заряженных ионов (ХИ ОИ) в соответствии с инструкцией по эксплуатации. В качестве газа-реагента используют смесь аргон-метан. Проверяют настройку и соответствие паспортной чувствительности прибора. Устанавливают программу анализа для хроматографического разделения конгенеров ПХДД/ДФ с использованием малополярной колонки типа DB-5MS. Примерный вид программы приведен ниже:
<a id="p100375"></a>    а) хроматографическая программа:
<a id="p100376"></a>    режим инжектора .......................... splitless;
<a id="p100377"></a>    задержка продувки инжектора .............. 1 мин;
<a id="p100378"></a>    время сброса растворителя ................ 5 мин;
<a id="p100379"></a>    тип колонки .............................. DB-5MS;
<a id="p100380"></a>    длина колонки ............................ 30 м;
<a id="p100381"></a>    диаметр колонки .......................... 25 мм;
<a id="p100382"></a>    толщина пленки фазы ...................... 25 мкм.
<a id="p100383"></a>    Программирование температуры:
<a id="p100384"></a>    начальная температура колонки ............ 160 °C;
<a id="p100385"></a>    начальное время задержки ................. 1 мин;
<a id="p100386"></a>    скорость нагрева колонки ................. 10 °C/мин до 220 °C,
                                               3 °C/мин до 300 °C;
<a id="p100387"></a>    температура инжектора .................... 290 °C;
<a id="p100388"></a>    скорость потока гелия через колонку ...... 1 см3/мин.
<a id="p100389"></a>    б) режим масс-спектрометра:
<a id="p100390"></a>    температура интерфейса ................... 290 °C;
<a id="p100391"></a>    температура ионного источника ............ 200 °C;
<a id="p100392"></a> селективное сканирование ................. массы ионов (см. [таблицу 9](#p100397));
<a id="p100393"></a>    газ-реагент .............................. аргон-метан, 10% об. метана;
<a id="p100394"></a>    давление газа-реагента ................... 2,2 - 2,5 мм рт. ст.;
<a id="p100395"></a>    инжектируемый объем ...................... 1 мкл.
<a id="p100396"></a>Масс-спектрометрический анализ проводят в режиме селективного сканирования характеристических ионов аналитов. При химической ионизации ПХДД/ДФ максимальную интенсивность в спектре показывают ионы молекулярного кластера и ионы, образованные выбросом атома хлора из молекулярного иона. Значения масс характеристических ионов, используемых в анализе, приведены в таблице 9.

<a id="p100397"></a>Таблица 9


| Анализируемая группа конгенеров ПХДД/ДФ | Тип иона | Характеристические ионы, m/e, а.е.м. | Соотношение интенсивностей сигнала ионов |
| --- | --- | --- | --- |
| ТХДД | _ _ _ M , (M + 2) , (M + 4) | 320; 322; 324 | 0,8:1:0,5 |
| 13 | _ _ |  |  |
| [ C ]-2,3,7,8-ТХДД | (M + 2) , (M + 4) | 334; 336 | 1:0,5 |
| 12 |  |  |  |
| 13 | _ _ |  |  |
| [ C ]-1,2,3,4-ТХДД | (M + 2) , (M + 4) | 334; 336 | 1:0,5 |
| 12 |  |  |  |
| ПеХДД | _ _ _ M , (M + 2) , (M + 4) | 354; 356; 358 | 0,7:1:0,5 |
| 13 | _ _ |  |  |
| [ C ]-1,2,3,7,8-ПеХДД | M , (M + 2) | 366; 368 | 0,7:1 |
| 12 |  |  |  |
| ГхХДД | _ _ (M-Cl) , (M-Cl + 2) , _ (M-Cl + 4) | 353; 355; 357 | 0,6:1:0,6 |
| 13 | _ _ |  |  |
| [ C ]-1,2,3,6,7,8-ГхХДД | (M-Cl + 2) , (M-Cl + 4) | 367; 369 | 1:0,6 |
| 12 |  |  |  |
| 13 | _ _ |  |  |
| [ C ]-1,2,3,7,8,9-ГхХДД | (M-Cl + 2) , (M-Cl + 4) | 367; 369 | 1:0,6 |
| 12 |  |  |  |
| ГпХДД | _ _ (M-Cl) , (M-Cl + 2) , _ (M-Cl + 4) | 387; 389; 391 | 0,3:1:0,7 |
| 13 | _ _ |  |  |
| [ C ]-1,2,3,4,6,7,8-ГпХДД | (M-Cl + 2) , (M-Cl + 4) | 401; 403 | 1:0,7 |
| 12 |  |  |  |
| ОХДД | _ (M-Cl + 2) , _ _ (M-Cl + 4) , (M-Cl + 6) | 423; 425; 427 | 0,4:1:0,3 |
| 13 | _ _ |  |  |
| [ C ]-ОХДД | (M-Cl + 2) , (M-Cl + 4) | 435; 437 | 0,4:1 |
| 12 |  |  |  |
| ТХДФ | _ _ _ M , (M + 2) , (M + 4) | 304; 306; 308 | 0,7:1:0,5 |
| 13 | _ _ |  |  |
| [ C ]-2,3,7,8-ТХДФ | (M + 2) , (M + 4) | 316; 318 | 0,7:1 |
| 12 |  |  |  |
| ПХДФ | _ _ _ M , (M + 2) , (M + 4) | 338; 340; 342 | 0,6:1:0,7 |
| 13 | _ _ |  |  |
| [ C ]-1,2,3,7,8-ПеХДФ | (M + 2) , (M + 4) | 352; 354 | 1:0,7 |
| 12 |  |  |  |
| ГхДФ | _ _ _ M , (M + 2) , (M + 4) | 372; 374; 376 | 0,5:1:0,8 |
| 13 | _ _ |  |  |
| [ C ]-1,2,3,6,7,8-ГхХДФ | (M + 2) , (M + 4) | 386; 388 | 1:0,8 |
| 12 |  |  |  |
| ГпХДФ | _ _ _ M , (M + 2) , (M + 4) | 406; 408; 410 | 0,4:1:0,9 |
| 13 | _ _ |  |  |
| [ C ]-1,2,3,4,6,7,8-ГпХДФ | (M + 2) , (M + 4) | 420; 422 | 1:0,9 |
| 12 |  |  |  |
| ОХДФ | _ _ _ M , (M + 2) , (M + 4) | 442; 444; 446 | 0,9:1:0,7 |


<a id="p100420"></a>Для повышения чувствительности анализа режим масс-спектральной съемки разбивают на пять сегментов, в течение которых прибор фиксирует те или иные группы ионов. Примерная длительность сегментов и детектируемые ионы приведены в таблице 10.

<a id="p100421"></a>Таблица 10


| Сегмент | Время начала сканирования группы ионов, мин | Детектируемые массы, m/e, а.е.м. |
| --- | --- | --- |
| 1 | 9,0 | 304, 306, 308, 316, 318, 320, 322, 324, 334, 336 |
| 2 | 15,5 | 338, 340, 342, 352, 354, 356, 358, 366, 368 |
| 3 | 19,0 | 353, 355, 357, 367, 369, 372, 374, 376, 386, 388 |
| 4 | 23,0 | 387, 389, 391, 401, 403, 406, 408, 410, 420, 422 |
| 5 | 28,0 | 423, 425, 427, 435, 437, 442, 444, 446 |


<a id="p100428"></a>Длительность сегментов корректируют при анализе калибровочной смеси.

###### <a id="p100429"></a>7.3.1.2 Проведение градуировки

<a id="p100430"></a>Градуировка заключается в определении времен удерживания и факторов отклика анализируемых конгенеров ПХДД/ДФ. Градуировка выполняется путем анализа калибровочных смесей C1 - C5.
<a id="p100431"></a>Для оценки фона (чистоты аналитической системы) перед началом работы инжектируют в прибор 1 мкл чистого растворителя и записывают масс-хроматограмму. Наличие в фоне прибора ионов, мешающих анализу, проверяется путем построения реконструированных хроматограмм по всем характеристическим ионам, приведенным в [таблице 9](#p100397). При нормально работающем приборе на реконструированных хроматограммах не должно присутствовать пиков.
<a id="p100432"></a>Каждый приготовленный градуировочный раствор C1 - C5 анализируют в условиях, приведенных в [7.3.1.1](#p100373). Записывают масс-хроматограмму каждого раствора и с помощью программы обработки на реконструированных масс-хроматограммах по сигналам характеристических ионов и соответствующих суррогатных стандартов определяют времена удерживания и площади пиков, соответствующие каждому анализируемому конгенеру.
<a id="p100433"></a>Для каждого градуировочного раствора определяют относительный фактор отклика $(RRF)_{n}$ каждого индивидуального конгенера ПХДД/ДФ относительно соответствующего изотопно-меченого конгенера суррогатного стандарта, который рассчитывают по формуле

<a id="p100434"></a> $(RRF)_{n} = (S_{ns})m_{is}/(S_{is})m_{ns}$ , (1)

<a id="p100435"></a>где $S_{ns}$ - площадь пика конгенера ПХДД/ДФ в калибровочном растворе;
<a id="p100436"></a> $m_{is}$ - масса соответствующего изотопно-меченого конгенера суррогатного стандарта в калибровочном растворе, нг;
<a id="p100437"></a> $S_{is}$ - площадь пика соответствующего изотопно-меченого конгенера суррогатного стандарта в калибровочном растворе;
<a id="p100438"></a> $m_{ns}$ - масса конгенера ПХДД/ДФ в калибровочном растворе, нг.
<a id="p100439"></a>При наличии линейности детектирования вариация значения относительного фактора отклика (RRF) не должна превышать +/- 20% для всех калибровочных растворов.
<a id="p100440"></a>Проводят измерения для каждого раствора и рассчитывают относительные факторы отклика для каждого индивидуального конгенера ПХДД/ДФ для трех параллельных измерений.
<a id="p100441"></a>Вариация значений относительных факторов отклика (RRF), рассчитанных для трех параллельных измерений, не должна превышать +/- 10%.
<a id="p100442"></a>Перед началом анализа каждой новой партии проб проводят проверку линейного диапазона и постоянства факторов отклика путем хроматографирования не менее трех градуировочных растворов смеси ПХДД/ДФ, приготовленных в соответствии с [6.3.1](#p100268). При отсутствии постоянства линейности $(RRF)_{i}$ выясняются и устраняются причины нестабильной работы прибора. Заменяя неполярную хроматографическую колонку на полярную, например, DB-5MS на DB-Dioxin, определяют времена удерживания конгенеров на этом типе колонки. Примерные относительные значений времени удерживания для полярной и малополярной колонок приведены в таблице 11.

<a id="p100443"></a>Таблица 11


<table>
<colgroup><col width="45%"><col width="28%"><col width="27%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Соединение</td><td colspan="2">Неподвижная фаза</td></tr>
<tr><td>DB-5MS</td><td>DB-Dioxin</td></tr>
<tr><td>1,2,3,4-ТХДД</td><td>0,99</td><td>1,02</td></tr>
<tr><td>2,3,7,8-ТХДД</td><td>1,00</td><td>1,00</td></tr>
<tr><td>1,2,3,7,8-ПеХДД</td><td>1,23</td><td>1,40</td></tr>
<tr><td>1,2,3,4,7,8-ГхХДД</td><td>1,46</td><td>2,08</td></tr>
<tr><td>1,2,3,6,7,8-ГхХДД</td><td>1,47</td><td>1,94</td></tr>
<tr><td>1,2,3,7,8,9-ГхХДД</td><td>1,50</td><td>2,15</td></tr>
<tr><td>1,2,3,4,6,7,8-ГпХДД</td><td>1,76</td><td>2,98</td></tr>
<tr><td>ОХДД</td><td>2,17</td><td>4,50</td></tr>
<tr><td>2,3,7,8-ТХДФ</td><td>0,96</td><td>0,96</td></tr>
<tr><td>1,2,3,7,8-ПеХДФ</td><td>1,18</td><td>1,31</td></tr>
<tr><td>2,3,4,7,8-ПеХДФ</td><td>1,22</td><td>1,35</td></tr>
<tr><td>1,2,3 Т,4,7,8-ГкХДФ</td><td>1,39</td><td>2,01</td></tr>
<tr><td>1,2,3,6,7,8-ГхХДФ</td><td>1,39</td><td>2,03</td></tr>
<tr><td>2,3,4,6,7,8-ГхХДФ</td><td>1,43</td><td>2,07</td></tr>
<tr><td>1,2,3,7,8,9-ГхХДФ</td><td>1,48</td><td>2,09</td></tr>
<tr><td>1,2,3,4,6,7,8-ГпХДФ</td><td>1,61</td><td>2,83</td></tr>
<tr><td>1,2,3,4,7,8,9-ГпХДФ</td><td>1,74</td><td>2,96</td></tr>
<tr><td>ОХДФ</td><td>2,12</td><td>4,45</td></tr>
</table>



###### <a id="p100464"></a>7.3.1.3 Хромато-масс-спектральный анализ полученных экстрактов

<a id="p100465"></a>Отбирают микрошприцем 1 мкл анализируемого экстракта, подготовленного, как описано в [7.2](#p100350), и вводят его в инжектор газового хроматографа. Записывают масс-хроматограммы, идентифицируют индивидуальные конгенеры ПХДД/ДФ и изотопно-меченые конгенеры суррогатного стандарта по масс-спектру и совпадению времен удерживания.
<a id="p100466"></a>Наличие в пробе или контрольном образце индивидуального конгенера ПХДД/ДФ считают установленным при соблюдении следующих условий:
<a id="p100467"></a>а) на всех реконструированных масс-хроматограммах, построенных по массам характеристических ионов для данного конгенера, присутствуют пики, имеющие соотношение интенсивности сигнал/шум больше или равное трем, при этом времена удерживания, определяемые по разным характеристическим пикам данного конгенера, совпадают (пики синхронны);
<a id="p100468"></a>б) хроматографическое время удерживания конгенера, определяемое по положению максимума пика характеристического иона, не отличается более чем +/- 1 с от времени удерживания, определенного для данного конгенера при анализе градуировочного раствора;
<a id="p100469"></a>в) соотношение интенсивностей характеристических ионов на вершине пиков не отличается более чем на 15% от значений, приведенных в [таблице 9](#p100397).
<a id="p100470"></a>При наличии плохо разделенных хроматографических пиков конгенеров ПХДД/ДФ меняют малополярную колонку на полярную. Приемлемым хроматографическим разделением считается выполнение условий для неполностью разделенных пиков:

<a id="p100471"></a> $2h/(H_{1} + H_{2})<0,7$ ,

<a id="p100472"></a>где h - высота долины между ними;
<a id="p100473"></a> $H_{1}$ и $H_{2}$ - высоты неразрешенных пиков.

##### <a id="p100474"></a>7.3.2 Хромато-масс-спектрометрия высокого или низкого разрешения с ионизацией пробы электронным ударом

<a id="p100475"></a>Хромато-масс-спектрометрия высокого разрешения (R >= 10000) обладает чрезвычайно высокой специфичностью выделения характеристических ионов аналитов, масса которых определяется с точностью до 0,001 а.е.м. Ионы, имеющие массу, отличную от заданной, не детектируются прибором, что резко снижает мешающее влияние посторонних веществ, присутствующих в пробе. При анализе ПХДД/ДФ методом хромато-масс-спектрометрии высокого разрешения для надежной идентификации аналитов достаточно фиксировать наличие двух характеристических ионов конгенера, масса которых определяется с точностью 0,001 а.е.м.

###### <a id="p100476"></a>7.3.2.1 Подготовка хромато-масс-спектрометра

<a id="p100477"></a>Хромато-масс-спектрометр типа DFS, JMS-700, MAT-95XP или аналогичный готовят для анализа в режиме ионизации пробы электронным ударом в соответствии с инструкцией по эксплуатации. Устанавливают энергию ионизации 70 эВ. Проверяют масс-спектрометрическое разрешение и соответствие паспортной чувствительности прибора.
<a id="p100478"></a>Устанавливают программу анализа для хроматографического разделения конгенеров ПХДД/ДФ с использованием малополярной колонки типа DB-5MS. Примерный вид программы приведен в [7.3.1.1](#p100373).
<a id="p100479"></a>Масс-спектрометрический анализ проводят в режиме селективного сканирования характеристических ионов аналитов. При ионизации ХДД/ДФ электронным ударом максимальную интенсивность в спектре показывают ионы молекулярного кластера. Значения масс характеристических ионов, используемых в анализе, приведены в таблице 12.

<a id="p100480"></a>Таблица 12

<a id="p100481"></a>Значения масс характеристических ионов


<table>
<colgroup><col width="38%"><col width="23%"><col width="23%"><col width="16%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Конгенеры ПХДД/ДФ и соответствующие изотопно-меченые конгенеры</td><td colspan="2">Характеристические ионы, m/e, а.е.м.</td><td rowspan="2">Соотношение интенсивностей сигнала ионов</td></tr>
<tr><td>M1</td><td>M2</td></tr>
<tr><td>ТХДД</td><td>+ 319,897 (M )</td><td>+ 321,894 (M + 2)</td><td>0,77</td></tr>
<tr><td>13</td><td>+</td><td>+</td><td></td></tr>
<tr><td>[ C ]-2,3,7,8-ТХДД</td><td>331,937 (M )</td><td>333,934 (M + 2)</td><td>0,77</td></tr>
<tr><td>12</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>13</td><td>+</td><td>+</td><td></td></tr>
<tr><td>[ C )-1,2,3,4-ТХДД</td><td>331,931 (M )</td><td>333,934 (M + 2)</td><td>0,77</td></tr>
<tr><td>12</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>ПеХДД</td><td>+ 355,855 (M + 2)</td><td>+ 357,852 (M + 4)</td><td>1,55</td></tr>
<tr><td>13</td><td>+</td><td>+</td><td></td></tr>
<tr><td>[ C ]-1,2,3,7,8-ПеХДД</td><td>367,895 (M + 2)</td><td>396,892 (M + 2)</td><td>1,55</td></tr>
<tr><td>12</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>ГхХДД</td><td>+ 389,816 (M + 2)</td><td>+ 391,813 (M + 4)</td><td>1,24</td></tr>
<tr><td>13</td><td>+</td><td>+</td><td></td></tr>
<tr><td>[ C ]-1,2,3,6,7,8-ГхХДД</td><td>401,856 (M + 2)</td><td>403,853 (M + 4)</td><td>1,24</td></tr>
<tr><td>12</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>13</td><td>+</td><td>+</td><td></td></tr>
<tr><td>[ C ]-1,2,3,7,8,9-ГхХДД</td><td>401,856 (M + 2)</td><td>403,853 (M + 4)</td><td>1,24</td></tr>
<tr><td>12</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>ГпХДД</td><td>+ 423,777 (M + 2)</td><td>+ 425,774 (M + 4)</td><td>1,05</td></tr>
<tr><td>13</td><td>+</td><td>+</td><td></td></tr>
<tr><td>[ C ]-1,2,3,4,6,7,8-ГпХДД</td><td>435,817 (M + 2)</td><td>437,814 (M + 4)</td><td>1,05</td></tr>
<tr><td>12</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>ОХДД</td><td>+ 457,738 (M + 2)</td><td>+ 459,735 (M + 4)</td><td>0,89</td></tr>
<tr><td>13</td><td>+</td><td>+</td><td></td></tr>
<tr><td>[ C ]-ОХДД</td><td>469,778 (M + 2)</td><td>471,775 (M + 4)</td><td>0,89</td></tr>
<tr><td>12</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>ТХДФ</td><td>+ 303,902 (M )</td><td>+ 305,899 (M + 2)</td><td>0,77</td></tr>
<tr><td>13</td><td>+</td><td>+</td><td></td></tr>
<tr><td>[ C ]-2,3,7,8-ТХДФ</td><td>315,942 (M )</td><td>317,939 (M + 2)</td><td>0,77</td></tr>
<tr><td>12</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>ПХДФ</td><td>+ 339,860 (M + 2)</td><td>+ 341,857 (M + 4)</td><td>1,55</td></tr>
<tr><td>13</td><td>+</td><td>+</td><td></td></tr>
<tr><td>[ C ]-1,2,3,7,8-ПеХДФ</td><td>351,900 (M + 2)</td><td>353,897 (M + 4)</td><td>1,55</td></tr>
<tr><td>12</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>ГхДФ</td><td>+ 373,821 (M + 2)</td><td>+ 375,818 (M + 4)</td><td>1,24</td></tr>
<tr><td>13</td><td>+</td><td>+</td><td></td></tr>
<tr><td>[ C ]-1,2,3,6,7,8-ГхХДФ</td><td>383,864 (M)</td><td>385,861 (M + 2)</td><td>0,51</td></tr>
<tr><td>12</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>ГпХДФ</td><td>+ 407,782 (M + 2)</td><td>+ 409,779 (M + 4)</td><td>1,05</td></tr>
<tr><td>13</td><td>+</td><td>+</td><td></td></tr>
<tr><td>[ C ]-1,2,3,4,6,7,8-ГпХДФ</td><td>417,825 (M)</td><td>419,822 (M + 2)</td><td>0,44</td></tr>
<tr><td>12</td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>ОХДФ</td><td>+ 441,743 (M + 2)</td><td>+ 443,740 (M + 4)</td><td>0,89</td></tr>
</table>


<a id="p100505"></a>При использовании масс-спектрометра низкого разрешения регистрируют ионы с соответствующими номинальными массами, например, вместо 319,897 - 320 и т.д.
<a id="p100506"></a>Для обеспечения большей достоверности результатов регистрируют по три иона в кластере для каждого соединения, например, $(M)^{+}$ , $(M + 2)^{+}$ , $(M + 4)^{+}$ .

###### <a id="p100507"></a>7.3.2.2 Проведение градуировки

<a id="p100508"></a>Градуировка прибора проводится по схеме, аналогичной приведенной в [7.3.1.2](#p100429), и включает определение времен удерживания и относительных факторов отклика $(RRF)_{n}$ конгенеров ПХДД/ДФ.

###### <a id="p100509"></a>7.3.2.3 Анализ экстрактов

<a id="p100510"></a>Анализ экстрактов проводят согласно [7.3.1.3](#p100464). Вычисляют отношение площадей хроматографических пиков на масс-хроматограммах ионов M1 и M2, регистрируемых для каждого определяемого соединения и внутреннего стандарта, и сравнивают его с теоретическим значением, приведенным в [таблице 12](#p100481). Это отношение должно быть в пределах +/- 15% от теоретического значения, например, для ТХДД - от 0,65 до 0,89 (теоретическое отношение равно 0,77). Если хроматографические пики в указанной области времен удерживания имеются, но отношение площадей пиков выходит за эти пределы, то говорить о положительной идентификации по этим пикам ПХДД или ПХДФ в данной пробе нельзя, и требуется дополнительный анализ - на хроматографической колонке с другой неподвижной фазой или в режиме химической ионизации с детектированием отрицательно заряженных ионов. Если время удерживания данного компонента совпадает с временем удерживания соответствующего изотопно-меченого внутреннего стандарта (отличается от него не более чем на 1 с или на 1 скан) или отличается от времени удерживания, измеренного для стандартного образца, не более чем на 0,01% и отношение площадей пиков находится в указанных пределах, то этот конгенер ПХДД/ДФ в данной пробе считается идентифицированным.

#### <a id="p100511"></a>7.4. Обработка результатов измерений

<a id="p100512"></a>По окончании анализа с помощью системы обработки данных фиксируют на реконструированных масс-хроматограммах пики в области времен удерживания, соответствующих выходу 2,3,7,8-замещенных ПХДД/ДФ и суррогатных стандартов.
<a id="p100513"></a>Массовую концентрацию конгенеров ПХДД/ДФ в экстракте анализируемой пробы $C_{i}$ , нг/кг, рассчитывают на основании полученных сигналов для каждого конкретного конгенера по формуле

<a id="p100514"></a> $C_{i} = (S_{n})m_{i}/(S_{i})(RRF)_{n}M$ , (2)

<a id="p100515"></a>где $S_{n}$ - площадь пика конгенера ПХДД/ДФ на реконструированной хроматограмме;
<a id="p100516"></a> $m_{i}$ - количество введенного изотопно-меченого суррогатного стандарта, нг;
<a id="p100517"></a> $S_{i}$ - площадь пика соответствующего конгенера изотопно-меченого суррогатного стандарта ПХДД/ДФ;
<a id="p100518"></a> $(RRF)_{n}$ - относительный фактор отклика для индивидуального конгенера ПХДД/ДФ, рассчитанный по [формуле (1)](#p100434);
<a id="p100519"></a>M - масса образца, взятого для анализа, кг.
<a id="p100520"></a>Коэффициент извлечения конкретного конгенера изотопно-меченого суррогатного стандарта $(REC)_{s}$ рассчитывают по формуле

<a id="p100521"></a> $(R\text{ЕС })_{s} = (S_{sur})m_{r}/(S_{r})m_{s}(RRF)_{sr}$ , (3)

<a id="p100522"></a>где $S_{sur}$ - площадь пика конкретного конгенера изотопно-меченого суррогатного стандарта на реконструированной хроматограмме анализируемого образца;
<a id="p100523"></a> $m_{r}$ - количество введенного в анализируемый образец изотопно-меченого внутреннего стандарта, нг;
<a id="p100524"></a> $S_{r}$ - площадь пика конкретного конгенера изотопно-меченого внутреннего стандарта на реконструированной хроматограмме анализируемого образца;
<a id="p100525"></a> $m_{s}$ - количество введенного в анализируемый образец изотопно-меченого суррогатного стандарта, нг;
<a id="p100526"></a> $(RRF)_{sr}$ - относительный фактор отклика для индивидуального конгенера изотопно-меченого суррогатного стандарта, рассчитываемый из градуировочного раствора по формуле

<a id="p100527"></a> $(RRF)_{sr} = (S_{surs})m_{rs}/(S_{rs})m_{surs}$ , (4)

<a id="p100528"></a>где $S_{surs}$ - площадь пика индивидуального конгенера изотопно-меченого суррогатного стандарта на реконструированной хроматограмме градуировочного раствора;
<a id="p100529"></a> $m_{rs}$ - массовая доля изотопно-меченого внутреннего стандарта в градуировочном растворе, нг;
<a id="p100530"></a> $S_{rs}$ - площадь пика индивидуального конгенера изотопно-меченого внутреннего стандарта на реконструированной хроматограмме градуировочного раствора;
<a id="p100531"></a> $m_{surs}$ - массовая доля изотопно-меченого суррогатного стандарта в градуировочном растворе, нг.
<a id="p100532"></a>Определение площадей $S_{n}$ , $S_{i}$ , $S_{sur}$ , $S_{r}$ , $S_{surs}$ , $S_{rs}$ проводят по масс-хроматограммам либо для одного из двух ионов M1 или M2, указанных в [таблице 12](#p100481), либо для двух ионов с усреднением результатов, либо по сумме площадей соответствующих пиков на обеих масс-хроматограммах.

#### <a id="p100533"></a>7.5. Характеристика погрешности измерений

<a id="p100534"></a>Диапазон измеряемых концентраций конгенеров ПХДД/ДФ и показатели сходимости и воспроизводимости приведены в таблице 13.

<a id="p100535"></a>Таблица 13


| Диапазон измеряемых концентраций конгенеров ПХДД/ДФ, нг/кг | Границы интервала, в котором погрешность находится с вероятностью P = 0,95, сигма, +/- % | Относительное стандартное отклонение воспроизводимости сигма , % R |
| --- | --- | --- |
| От 0,5 до 10 включ. | 48 | 61 |
| Св. 10 до 200 включ. | 25 | 36 |
| Св. 200 до 1000 включ. | 15 | 13 |



#### <a id="p100540"></a>7.6. Оформление результатов измерений

<a id="p100541"></a>Протокол испытаний должен содержать, как минимум, следующие сведения:
<a id="p100542"></a>всю информацию, необходимую для исчерпывающей идентификации пробы;
<a id="p100543"></a>метод испытания и определяемый элемент со ссылкой на настоящий стандарт;
<a id="p100544"></a>результаты испытаний с указанием единиц измерений;
<a id="p100545"></a>содержание липидов в образце по [ГОСТ 7636](https://bukva.ai/docs/gost-7636-85);
<a id="p100546"></a>дату отбора пробы и способ отбора (если он известен);
<a id="p100547"></a>дату окончания проведения испытания;
<a id="p100548"></a>информацию о выполнении требований к повторяемости результатов;
<a id="p100549"></a>все детали проведения испытания, не оговоренные в настоящем стандарте или не считающиеся обязательными, а также все инциденты, наблюдавшиеся при проведении испытания, которые могли повлиять на конечный результат.
<a id="p100550"></a>Результаты измерения массовой концентрации индивидуальных конгенеров ПХДД/ДФ представляют в форме

<a id="p100551"></a> $C_{i} \pm \Delta\text{нг}/\text{кг}$ , (5)

<a id="p100552"></a>где $C_{i}$ - концентрация конгенера ПХДД/ДФ в пробе, нг/кг;
<a id="p100553"></a> $\Delta$ - граница интервала, в котором абсолютная погрешность измерений концентрации конгенера ПХДД/ДФ, нг/кг, находится с доверительной вероятностью P = 0,95.
<a id="p100554"></a>Характеристику погрешности рассчитывают по формуле

<a id="p100555"></a> $\Delta = 0,01\delta C_{i}$ , (6)

<a id="p100556"></a>где $\delta$ - граница интервала, в котором относительная погрешность измерений концентрации конгенера ПХДД/ДФ, %, находится с доверительной вероятностью P = 0,95. Допускается результаты измерений в документах, выдаваемых лабораторией, представлять в виде

<a id="p100557"></a> $C_{i} \pm \Delta_{\text{л}},\text{нг}/\text{кг},\text{при условии},\text{что }\Delta_{\text{л}}<\Delta$ , (7)

<a id="p100558"></a>где $\Delta_{\text{л}}$ - значение характеристики погрешности результатов измерений, установленное при реализации данной методики в лаборатории и обеспеченное контролем качества результатов. Рекомендуемая форма протокола представлена в [Приложении В](#p100880).

#### <a id="p100559"></a>7.7. Контроль качества измерений

<a id="p100560"></a>Контроль качества измерений обеспечивают выполнением следующих условий:
- <a id="p100561"></a>анализ проб проводят сериями. Каждая серия включает до 11 полевых образцов, один из которых анализируют дважды (дубликат), образец сертифицированного материала с заданным содержанием ПХДД/ДФ и процедурный холостой образец;
- <a id="p100562"></a>оперативный контроль точности и правильности измерений обеспечивается анализом изотопно-меченых суррогатных стандартов - аналогов определяемых веществ, вводимых в каждый образец на стадии пробоподготовки.
<a id="p100563"></a>Допускаемые критерии качества анализа:
- <a id="p100564"></a>содержание индивидуальных конгенеров ПХДД/ДФ в процедурном холостом образце меньше 1 пг;
- <a id="p100565"></a>определяемое содержание конгенеров ПХДД/ДФ в сертифицированном материале должно соответствовать сертификату анализа для 90% определяемых соединений;
- <a id="p100566"></a>отклонение результатов при анализе дубликатов - не более +/- 25% от среднего значения плюс величина предела обнаружения метода для 90% определяемых соединений (оперативный контроль воспроизводимости);
- <a id="p100567"></a>значения величины извлечения конгенеров $(REC)_{s}$ , рассчитанные, как указано в 7.4, находятся в диапазоне 50% - 110%;
- <a id="p100568"></a>чувствительность прибора определяют один раз в день (или после настройки прибора) путем анализа стандартного градуировочного раствора ПХДД/ДФ;
- <a id="p100569"></a>приемлемый критерий качества - соотношение сигнал-шум больше 10:1 при инжекции 1 пг 2,3,7,8-ТХДД;
- <a id="p100570"></a>хроматографическое разрешение подтверждают анализом градуировочного раствора, проводимым до и после анализа аналитической серии;
- <a id="p100571"></a>приемлемое значение - разделение пиков 1,2,3,4,7,8-ГхДФ и 1,2,3,6,7,8-ГХДФ соответствует условию:

<a id="p100572"></a> $h/(H_{1} + H_{2})<0,7$ , (8)

<a id="p100573"></a>где h - высота долины между ними;
<a id="p100574"></a> $H_{1}$ и $H_{2}$ - высоты пиков конгенеров;
- <a id="p100575"></a>масс-спектральное разрешение, определенное при настройке прибора, составляет для низкого разрешения не ниже 0,8 а.е.м., во всем диапазоне измеряемых масс, для прибора высокого разрешения R >= 10000;
- <a id="p100576"></a>линейность калибровки инструмента определяют по анализу пяти градуировочных растворов ПХДД/ДФ. Критерий качества - допустимое стандартное отклонение рассчитанного относительного фактора отклика $(RRF)_{n}$ должно быть меньше 20%;
- <a id="p100577"></a>стабильность работы инструмента подтверждается до и после анализа серии образцов путем анализа градуировочного раствора ПХДД/ДФ C2. Критерий качества - различия значений величины относительного отклика $(RRF)_{n}$ , рассчитанные до и после анализа серии образцов, не должны превышать +/- 15%.
<a id="p100578"></a>Проверку чистоты инструмента на содержание анализируемых компонентов проводят после каждого анализа градуировочного стандартного раствора путем инжекции декана. Приемлемый критерий - значение вносимой ошибки за счет фона инструмента не должно превышать 1% от среднего значения определяемых концентраций.
<a id="p100579"></a>При невыполнении любого из перечисленных условий принимаются меры по выявлению причин и повторяется анализ партии проб.


### 8. <a id="p100580"></a>Определение диоксиноподобных (планарных) полихлорированных бифенилов



#### <a id="p100581"></a>8.1. Подготовка калибровочных растворов ПХБ и растворов изотопно-меченых суррогатных и внутренних стандартов

<a id="p100582"></a>Градуировочные растворы смеси индивидуальных и изотопно-меченых ПХБ используют для проверки времен удерживания конгенеров, линейного диапазона детектирования и расчета фактора отклика анализируемых конгенеров.
<a id="p100583"></a>В качестве базового раствора смеси индивидуальных конгенеров планарных ПХБ используется смесь индивидуальных ПХБ в нонане EC-5000.
<a id="p100584"></a>В качестве базового раствора суррогатного стандарта используется смесь изотопно-меченых по углероду ${}^{13}\text{С}_{12}$ конгенеров ПХБ в нонане EC N 4995.

##### <a id="p100585"></a>8.1.1 Приготовление градуировочных растворов


###### <a id="p100586"></a>8.1.1.1 Раствор B1

<a id="p100587"></a>Используя регулируемые автоматические дозаторы на объемы 100 - 1000 мкл и 10 - 100 мкл, последовательно вносят в виалу вместимостью 4 см3 1910 мкл н-нонана, 10 мкл базового раствора EC-5000 и 80 мкл раствора EC N 4995.

###### <a id="p100588"></a>8.1.1.2 Раствор B2

<a id="p100589"></a>Используя регулируемые автоматические дозаторы на объемы 100 - 1000 мкл и 10 - 100 мкл, последовательно вносят в виалу вместимостью 2 см3 940 мкл н-нонана, 20 мкл базового раствора EC-5000 и 40 мкл раствора EC N 4995.

###### <a id="p100590"></a>8.1.1.3 Раствор B3

<a id="p100591"></a>Используя регулируемые автоматические дозаторы на объемы 100 - 1000 мкл и 10 - 100 мкл, последовательно вносят в виалу вместимостью 2 см3 920 мкл н-нонана, 40 мкл базового раствора EC-5000 и 40 мкл раствора EC N 4995.

###### <a id="p100592"></a>8.1.1.4 Раствор B4

<a id="p100593"></a>Используя регулируемые автоматические дозаторы на объемы 100 - 1000 мкл и 10 - 100 мкл, последовательно вносят в виалу вместимостью 2 см3 860 мкл н-нонана, 100 мкл базового раствора EC-5000 и 40 мкл раствора EC N 4995.

###### <a id="p100594"></a>8.1.1.5 Раствор B5

<a id="p100595"></a>Используя регулируемые автоматические дозаторы на объемы 100 - 1000 мкл и 10 - 100 мкл, последовательно вносят в виалу вместимостью 2 см3 760 мкл н-нонана, 200 мкл базового раствора EC-5000 и 40 мкл раствора EC N 4995.
<a id="p100596"></a>Концентрации калибровочных растворов (нг/см3) приведены в таблице 14.

<a id="p100597"></a>Таблица 14

<a id="p100598"></a>Концентрации калибровочных растворов в нанограммах/см3


| Конгенер ПХДД/ДФ | B1 | B2 | B3 | B4 | B5 |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| ПХБ 77 | 10 | 40 | 80 | 200 | 400 |
| ПХБ 81 | 10 | 40 | 80 | 200 | 400 |
| ПХБ 105 | 10 | 40 | 80 | 200 | 400 |
| ПХБ 114 | 10 | 40 | 80 | 200 | 400 |
| ПХБ 118 | 10 | 40 | 80 | 200 | 400 |
| ПХБ 123 | 10 | 40 | 80 | 200 | 400 |
| ПХБ 126 | 10 | 40 | 80 | 200 | 400 |
| ПХБ 156 | 10 | 40 | 80 | 200 | 400 |
| ПХБ 157 | 10 | 40 | 80 | 200 | 400 |
| ПХБ 167 | 10 | 40 | 80 | 200 | 400 |
| ПХБ 169 | 10 | 40 | 80 | 200 | 400 |
| ПХБ 170 | 10 | 40 | 80 | 200 | 400 |
| ПХБ 180 | 10 | 40 | 80 | 200 | 400 |
| ПХБ 189 | 10 | 40 | 80 | 200 | 400 |
| 13 ПХБ 77 ( C 99%) 12 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 13 ПХБ 81 ( C 99%) 12 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 13 ПХБ 105 ( C 99%) 12 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 13 ПХБ 114 ( C 99%) 12 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 13 ПХБ 118 ( C 99%) 12 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 13 ПХБ 123 ( C 99%) 12 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 13 ПХБ 126 ( C 99%) 12 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 13 ПХБ 156 ( C 99%) 12 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 13 ПХБ 157 ( C 99%) 12 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 13 ПХБ 167 ( C 99%) 12 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 13 ПХБ 169 ( C 99%) 12 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 13 ПХБ 170 ( C 99%) 12 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 13 ПХБ 180 ( C 99%) 12 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 |
| 13 ПХБ 189 ( C 99%) 12 | 40 | 40 | 40 | 40 | 40 |


<a id="p100628"></a>Приготовленные калибровочные растворы могут храниться в герметически закрытых виалах при температуре не выше минус 10 °C без доступа солнечного света не более 6 мес, в стеклянных запаянных ампулах не более двух лет.

##### <a id="p100629"></a>8.1.2 Приготовление рабочего раствора изотопно-меченого суррогатного стандарта ПХБ

<a id="p100630"></a>Для приготовления рабочего раствора SIS в мерную колбу вместимостью 25 см3 вносят автоматическим регулируемым дозатором 1000 мкл раствора EC N 4995 и доводят объем раствора до метки н-нонаном. Обозначают полученный рабочий раствор как $SIS_{\text{ПХБ}}$ . Концентрации суррогатных стандартов в рабочем растворе приведены в таблице 15.

<div align="right">

<a id="p100631"></a>Таблица 15

</div>


<div align="center">

<a id="p100632"></a>Концентрации суррогатных стандартов<br>
в рабочем растворе в нанограммах/см3

</div>



| Конгенер ПХДД/ДФ | SIS базовый ПХБ | SIS ПХБ |
| --- | --- | --- |
| 13 ПХБ 77 ( C 99%) 12 | 1000 | 40 |
| 13 ПХБ 81 ( C 99%) 12 | 1000 | 40 |
| 13 ПХБ 105 ( C 99%) 12 | 1000 | 40 |
| 13 ПХБ 114 ( C 99%) 12 | 1000 | 40 |
| 13 ПХБ 118 ( C 99%) 12 | 1000 | 40 |
| 13 ПХБ 123 ( C 99%) 12 | 1000 | 40 |
| 13 ПХБ 126 ( C 99%) 12 | 1000 | 40 |
| 13 ПХБ 156 ( C 99%) 12 | 1000 | 40 |
| 13 ПХБ 157 ( C 99%) 12 | 1000 | 40 |
| 13 ПХБ 167 ( C 99%) 12 | 1000 | 40 |
| 13 ПХБ 169 ( C 99%) 12 | 1000 | 40 |
| 13 ПХБ 170 ( C 99%) 12 | 1000 | 40 |
| 13 ПХБ 180 ( C 99%) 12 | 1000 | 40 |
| 13 ПХБ 189 ( C 99%) 12 | 1000 | 40 |


<a id="p100648"></a>Приготовленный раствор перемешивают на ультразвуковой бане 10 мин, расфасовывают в стеклянные ампулы по 1 см3. Ампулы запаивают и хранят до использования без доступа солнечного света не более двух лет.

##### <a id="p100649"></a>8.1.3 Приготовление рабочего раствора внутреннего стандарта $RIS_{\text{ПХБ}}$

<a id="p100650"></a>Для приготовления рабочего раствора внутреннего стандарта в мерную колбу вместимостью 50 см3 вносят автоматическим регулируемым дозатором 50 мкл раствора 2,3,4,4',5,6-гексахлорбифенила (код по каталогу CIL PCB N 166) с концентрацией (100 +/- 5) мкг/см3 и доводят объем раствора до метки н-нонаном. Обозначают полученный рабочий раствор внутреннего стандарта как $RIS_{\text{ПХБ}}$ . Концентрация внутреннего стандарта в рабочем растворе составляет 100 нг/см3.
<a id="p100651"></a>Приготовленный раствор перемешивают на ультразвуковой бане 10 мин, расфасовывают в стеклянные ампулы по 1 см3. Ампулы запаивают и хранят до использования без доступа солнечного света не более двух лет.

#### <a id="p100652"></a>8.2. Подготовка проб для анализа

<a id="p100653"></a>Подготовка проб для анализа планарных ПХБ аналогична процедуре, описанной в [6.4](#p100333). При этом размораживают, а затем гомогенизируют на шнековой мясорубке образец массой не менее 100 г.

#### <a id="p100654"></a>8.3. Экстракция планарных ПХБ

<a id="p100655"></a>Для анализа рыбы и тканей с низким содержанием липидов используют навеску 7 - 8 г, при анализе печени, гонад, мышц с высоким содержанием липидов - 3 - 5 г. Извлечение ПХБ из образца проводится методом колоночной экстракции, описанным в [7.1](#p100343), а в качестве изотопно-меченого суррогатного стандарта используют раствор стандарта $SIS_{\text{ПХБ}}$ (см. [8.1.2](#p100629)).
<a id="p100656"></a>Пробу рыбьего жира массой 1 г растворяют в 20 см3 смеси гексан-дихлорметан (1:1) и очищают методом колоночной хроматографии.

#### <a id="p100657"></a>8.4. Очистка экстракта методом колоночной хроматографии

<a id="p100658"></a>Очистку экстракта проводят методом колоночной хроматографии, описанным в [7.2](#p100350). При концентрировании экстракта для инструментального анализа, когда объем растворителя во флаконе достигнет примерно 100 мкл, автоматическим дозатором добавляют 20 мкл раствора внутреннего стандарта в нонане $RIS_{\text{ПХБ}}$ (см. [8.1.3](#p100649)) и продолжают отдув до объема добавленного нонана. Герметизируют флакон тефлонированной прокладкой и передают для инструментального анализа.

#### <a id="p100659"></a>8.5. Выполнение измерений


##### <a id="p100660"></a>8.5.1 Подготовка хромато-масс-спектрометра

<a id="p100661"></a>Хромато-масс-спектрометр низкого разрешения типов Varian-320MS, Agilent-5975, ITMS-240MS, ITQ-900GC/MS или аналогичный готовят для анализа в режиме ионизации пробы электронным ударом с селективным детектированием характеристических ионов в соответствии с инструкцией по эксплуатации. Проверяют настройку и соответствие паспортной чувствительности прибора.
<a id="p100662"></a>Устанавливают программу анализа для хроматографического разделения конгенеров планарных ПХБ с использованием малополярной колонки типа DB-5MS.
<a id="p100663"></a>Примерный вид программы приведен ниже:
<a id="p100664"></a>    а) хроматографическая программа:
<a id="p100665"></a>    режим инжектора ........................... splitless;
<a id="p100666"></a>    задержка продувки инжектора ............... 1 мин;
<a id="p100667"></a>    время сброса растворителя ................. 10 мин;
<a id="p100668"></a>    тип колонки ............................... DB-5MS;
<a id="p100669"></a>    длина колонки ............................. 30 м;
<a id="p100670"></a>    диаметр колонки ........................... 0,25 мм;
<a id="p100671"></a>    толщина пленки фазы ....................... 0,25 мкм;
<a id="p100672"></a>    программирование температуры:
<a id="p100673"></a>    начальная температура колонки ............. 80 °C;
<a id="p100674"></a>    начальное время задержки .................. 1 мин;
<a id="p100675"></a>    скорость  нагрева  колонки ................ 20 °C/мин до 180 °C,
                                                4 °C/мин до 280 °C;
<a id="p100676"></a>    температура инжектора ..................... 290 °C;
<a id="p100677"></a>    скорость потока гелия через колонку ....... 1 мл/мин;
<a id="p100678"></a>    б) режим масс-спектрометра:
<a id="p100679"></a>    температура интерфейса .................... 290 °C;
<a id="p100680"></a>    температура ионного источника ............. 200 °C;
<a id="p100681"></a>    селективное сканирование .................. массы ионов см. таблицу 16;
<a id="p100682"></a>    инжектируемый объем ....................... 1 мкл.
<a id="p100683"></a>Масс-спектрометрический анализ проводится в режиме селективного сканирования характеристических ионов аналитов. При ионизации ПХБ методом электронного удара максимальную интенсивность в спектре показывают ионы молекулярного кластера и ионы, образованные выбросом атома хлора из молекулярного иона. Значения масс характеристических ионов, используемых в анализе, приведены в таблице 16.

<div align="right">

<a id="p100684"></a>Таблица 16

</div>



| Анализируемая группа конгенеров ПХБ | Тип иона | Характеристические ионы, m/e, а.е.м. | Соотношение интенсивностей сигнала ионов |
| --- | --- | --- | --- |
| ПХБ 77 | + + + M , (M + 2) , (M + 4) | 290; 292; 294 | 0,77:1:0,5 |
| 13 | + + |  |  |
| ПХБ 77 ( C 99%) | M , (M + 2) | 302; 304 | 0,77:0,5 |
| 12 |  |  |  |
| ПХБ 81 | + + + M , (M + 2) , (M + 4) | 290; 292; 294 | 0,77:1:0,5 |
| 13 | + + |  |  |
| ПХБ 81 ( C 99%) | M , (M + 2) | 302; 304 | 0,77:0,5 |
| 12 |  |  |  |
| ПХБ 105 | + + + M , (M + 2) , (M + 4) | 324; 326; 328 | 0,6:1:0,65 |
| 13 | + + |  |  |
| ПХБ 105 ( C 99%) | M , (M + 2) | 336; 338 | 0,6:1 |
| 12 |  |  |  |
| ПХБ 114 | + + + M , (M + 2) , (M + 4) | 324; 326; 328 | 0,6:1:0,65 |
| 13 | + + |  |  |
| ПХБ 114 ( C 99%) | M , (M + 2) | 336; 338 | 0,6:1 |
| 12 |  |  |  |
| ПХБ 118 | + + + M , (M + 2) , (M + 4) | 324; 326; 328 | 0,6:1:0,65 |
| 13 | + + |  |  |
| ПХБ 118 ( C 99%) | M , (M + 2) | 336; 338 | 0,6:1 |
| 12 |  |  |  |
| ПХБ 123 | + + + M , (M + 2) , (M + 4) | 324; 326; 328 | 0,6:1:0,65 |
| 13 | + + |  |  |
| ПХБ 123 ( C 99%) | M , (M + 2) | 336; 338 | 0,6:1 |
| 12 |  |  |  |
| ПХБ 126 | + + + M , (M + 2) , (M + 4) | 324; 326; 328 | 0,6:1:0,65 |
| 13 | + + |  |  |
| ПХБ 126 ( C 99%) | M , (M + 2) | 336; 338 | 0,6:1 |
| 12 |  |  |  |
| ПХБ 156 | + + + M , (M + 2) , (M + 4) | 358; 360; 362 | 0,5:1:0,85 |
| 13 | + + |  |  |
| ПХБ 156 ( C 99%) | (M + 2) , (M + 4) | 372; 374 | 1:0,85 |
| 12 |  |  |  |
| ПХБ 157 | + + + M , (M + 2) , (M + 4) | 358; 360; 362 | 0,5:1:0,85 |
| 13 | + + |  |  |
| ПХБ 157 ( C 99%) | (M + 2) , (M + 4) | 372; 374 | 1:0,85 |
| 12 |  |  |  |
| ПХБ 167 | + + + M , (M + 2) , (M + 4) | 358; 360; 362 | 0,5:1:0,85 |
| 13 | + + |  |  |
| ПХБ 167 ( C 99%) | (M + 2) , (M + 4) | 372; 374 | 1:0,85 |
| 12 |  |  |  |
| ПХБ 169 | + + + M , (M + 2) , (M + 4) | 358; 360; 362 | 0,5:1:0,85 |
| 13 | + + |  |  |
| ПХБ 169 ( C 99%) | (M + 2) , (M + 4) | 372; 374 | 1:0,85 |
| 12 |  |  |  |
| ПХБ 170 | + + + M , (M + 2) , (M + 4) | 394; 396; 398 | 0,44:1:0,97 |
| 13 | + + |  |  |
| ПХБ 170 ( C 99%) | (M + 2) , (M + 4) | 408; 410 | 1:0,97 |
| 12 |  |  |  |
| ПХБ 180 | + + + M , (M + 2) , (M + 4) | 394; 396; 398 | 0,44:1:0,97 |
| 13 | + + |  |  |
| ПХБ 180 ( C 99%) | (M + 2) , (M + 4) | 408; 410 | 1:0,97 |
| 12 |  |  |  |
| ПХБ 189 | + + + M , (M + 2) , (M + 4) | 408; 410 | 0,44:1:0,97 |
| 13 | + + |  |  |
| ПХБ 189 ( C 99%) | (M + 2) , (M + 4) | 408; 410 | 1:0,97 |
| 12 |  |  |  |
| ПХБ 166 RIS | + + + M , (M + 2) , (M + 4) | 358; 360; 362 | 0,5:1:0,85 |


<a id="p100715"></a>Для повышения чувствительности анализа режим масс-спектральной съемки разбит на три сегмента, в течение которых прибор фиксирует те или иные группы ионов. Примерная длительность сегментов и детектируемые ионы приведены в таблице 17.

<div align="right">

<a id="p100716"></a>Таблица 17

</div>



| Сегмент | Время начала сканирования группы ионов, мин | Детектируемые массы, m/e, а.е.м. |
| --- | --- | --- |
| 1 | 16 - 18,4 | 290; 292; 294; 302; 304 |
| 2 | 18,4 - 21,5 | 324; 326; 328; 336; 338; 358; 360; 362 |
| 3 | 21,5 - 27,5 | 358; 360; 362; 372; 374; 394; 396; 398; 408; 410 |


<a id="p100721"></a>Длительность сегментов корректируется при анализе калибровочной смеси.

##### <a id="p100722"></a>8.5.2 Проведение градуировки

<a id="p100723"></a>Градуировка заключается в определении времен удерживания и факторов отклика анализируемых конгенеров ПХБ. Градуировка выполняется путем анализа калибровочных смесей B1 - B5.
<a id="p100724"></a>Для оценки фона (чистоты аналитической системы) перед началом работы инжектируют в прибор 1 мкл чистого нонана и записывают масс-хроматограмму. Наличие в фоне прибора ионов, мешающих анализу, проверяется путем построения реконструированных хроматограмм по всем характеристическим ионам, приведенным в [таблице 16](#p100684). При нормально работающем приборе на реконструированных хроматограммах должны отсутствовать пики аналитов. Допустимо, если на реконструированных хроматограммах, построенных для иона m/e = 326 а.е.м. в диапазоне времен удерживания ПХБ 118 и ПХБ 105, имеются пики, соотношение сигнал-шум которых не менее 3:1. Если это условие не выполняется, определяют и устраняют причину фоновых сигналов.
<a id="p100725"></a>Приготовленные градуировочные растворы B1 - B5 анализируют в условиях, приведенных в [8.5.1](#p100660), в последовательности B1, B2, B3, B4, B5. Записывают масс-хроматограмму каждого раствора и с помощью программы компьютерной обработки данных определяют на масс-хроматограммах, реконструированных по сигналам характеристических ионов и соответствующих суррогатных стандартов, времена удерживания и площади пиков, соответствующие каждому анализируемому конгенеру.
<a id="p100726"></a>Для вычисления площади пиков аналитов используют сигнал иона максимальной интенсивности в кластере или сумму сигналов двух ионов, одинаковых для нативного ПХБ и соответствующего суррогатного стандарта, например, для ПХБ 118 суммируют площади пиков ионов m/e = 324 + 326 и для соответствующего суррогатного стандарта m/e = 336 + 338 а.е.м.
<a id="p100727"></a>Для каждого градуировочного раствора определяют относительный фактор отклика $RRF_{n}$ каждого индивидуального конгенера ПХБ относительно соответствующего изотопно-меченого конгенера суррогатного стандарта, который рассчитывают по формуле

<div align="center">

<a id="p100728"></a> $(RRF)_{n} = (S_{ns})m_{is}/(S_{is})m_{ns}$ , (9)

</div>


<a id="p100729"></a>где $S_{ns}$ - площадь пика конгенера ПХБ в калибровочном растворе;
<a id="p100730"></a> $m_{is}$ - масса соответствующего изотопно-меченого конгенера суррогатного стандарта в калибровочном растворе, нг;
<a id="p100731"></a> $S_{is}$ - площадь пика соответствующего изотопно-меченого конгенера суррогатного стандарта в калибровочном растворе;
<a id="p100732"></a> $m_{ns}$ - масса конгенера ПХБ в калибровочном растворе, нг.
<a id="p100733"></a>При наличии линейности детектирования различие величины относительного фактора отклика (RRF) не должно превышать +/- 20% для всех калибровочных растворов.
<a id="p100734"></a>Проводят три параллельных измерения для каждого раствора и рассчитывают относительные факторы отклика для каждого индивидуального конгенера ПХБ для трех измерений.
<a id="p100735"></a>Различие значений относительных факторов отклика (RRF), рассчитанных для трех параллельных измерений, не должно превышать +/- 10%.
<a id="p100736"></a>Перед началом анализа каждой новой партии проб проводят проверку линейного диапазона и постоянства факторов отклика путем хроматографирования не менее трех рабочих растворов смеси ПХБ, приготовленных в соответствии с [8.1.1](#p100585). При отсутствии постоянства $(RRF)_{i}$ , т.е. линейности, выясняют и устраняются причины нестабильной работы прибора.
<a id="p100737"></a>Примерные относительные времена удерживания малополярной колонки DB-5MS приведены в таблице 18.

<div align="right">

<a id="p100738"></a>Таблица 18

</div>



| Соединение | Неподвижная фаза DB-5MS |
| --- | --- |
| ПХБ 77 | 0,84 |
| ПХБ 81 | 0,82 |
| ПХБ 105 | 0,93 |
| ПХБ 114 | 0,9 |
| ПХБ 118 | 0,88 |
| ПХБ 123 | 0,87 |
| ПХБ 126 | 0,99 |
| ПХБ 156 | 1,07 |
| ПХБ 157 | 1,08 |
| ПХБ 167 | 1,03 |
| ПХБ 169 | 1,15 |
| ПХБ 170 | 1,16 |
| ПХБ 180 | 1,10 |
| ПХБ 189 | 1,22 |
| ПХБ 166 RIS | 1,00 |



##### <a id="p100755"></a>8.5.3 Хромато-масс-спектральный анализ полученных экстрактов

<a id="p100756"></a>Отбирают микрошприцем 1 мкл анализируемого экстракта, подготовленного, как описано в [8.4](#p100657), и вводят в инжектор газового хроматографа. Записывают масс-хроматограммы и идентифицируют индивидуальные конгенеры ПХБ и изотопно-меченые конгенеры суррогатного стандарта по масс-спектру и совпадению значений времени удерживания.
<a id="p100757"></a>Наличие в пробе или контрольном образце индивидуального конгенера ПХБ считают установленным, если на всех реконструированных масс-хроматограммах, построенных по массам характеристических ионов для данного конгенера, присутствуют синхронные пики, имеющие отношение сигнал/шум, больше или равное трем, время удерживания не отличается на +/- 2 с от определенного для данного конгенера или соответствующего изотопно-меченого аналога при анализе градуировочного раствора и соотношение интенсивностей характеристических ионов на вершине пиков не отличается более чем на 20% от теоретического (см. [таблицу 16](#p100684)).

#### <a id="p100758"></a>8.6. Обработка результатов измерений

<a id="p100759"></a>По окончании анализа с помощью системы обработки данных фиксируют на реконструированных масс-хроматограммах пики в области времен удерживания, соответствующих выходу планарных ПХБ, суррогатных и внутреннего стандартов.
<a id="p100760"></a>Массовую концентрацию конгенеров ПХБ в экстракте анализируемой пробы $C_{i}$ , нг/кг, рассчитывают на основании полученных сигналов для каждого конкретного конгенера по формуле

<a id="p100761"></a> $C_{i} = (S_{n})m_{i}/(S_{i})(RRF)_{n}M$ , (10)

<a id="p100762"></a>где $S_{n}$ - площадь пика конгенера ПХБ на реконструированной хроматограмме;
<a id="p100763"></a> $m_{i}$ - количество введенного изотопно-меченого суррогатного стандарта, нг;
<a id="p100764"></a> $S_{i}$ - площадь пика соответствующего конгенера изотопно-меченого суррогатного стандарта ПХБ;
<a id="p100765"></a> $(RRF)_{n}$ - относительный фактор отклика для индивидуального конгенера ПХБ, рассчитанный по [формуле (9)](#p100728);
<a id="p100766"></a>M - масса образца, взятого для анализа, кг.
<a id="p100767"></a>Коэффициент извлечения конкретного конгенера изотопно-меченого суррогатного стандарта $(REC)_{s}$ определяется по формуле

<a id="p100768"></a> $(REC)_{s} = (S_{sur})m_{r}/(S_{R})m_{s}(RRF)_{sr}$ , (11)

<a id="p100769"></a>где $S_{sur}$ - площадь пика конкретного конгенера изотопно-меченого суррогатного стандарта на реконструированной хроматограмме анализируемого образца;
<a id="p100770"></a> $m_{r}$ - количество введенного в анализируемый образец внутреннего стандарта, нг;
<a id="p100771"></a> $S_{R}$ - площадь пика внутреннего стандарта на реконструированной хроматограмме анализируемого образца;
<a id="p100772"></a> $m_{s}$ - количество введенного в анализируемый образец изотопно-меченого суррогатного стандарта, нг;
<a id="p100773"></a> $(RRF)_{sr}$ - относительный фактор отклика для индивидуального конгенера изотопно-меченого суррогатного стандарта определяется из градуировочного раствора по формуле

<a id="p100774"></a> $RRF_{sr} = (S_{surs})m_{rs}/(S_{rs})m_{surs}$ , (12)

<a id="p100775"></a>где $S_{surs}$ - площадь пика индивидуального конгенера изотопно-меченого суррогатного стандарта на реконструированной хроматограмме градуировочного раствора;
<a id="p100776"></a> $S_{rs}$ - площадь пика внутреннего стандарта на реконструированной хроматограмме градуировочного раствора;
<a id="p100777"></a> $m_{rs}$ - массовая доля внутреннего стандарта в градуировочном растворе, нг;
<a id="p100778"></a> $m_{surs}$ - массовая доля изотопно-меченого суррогатного стандарта в градуировочном растворе, нг.
<a id="p100779"></a>Определение площадей пиков проводят по реконструированным масс-хроматограммам либо для одного из двух ионов M1 или M2, указанных в [таблице 16](#p100684), либо для двух ионов с усреднением результатов, либо по сумме площадей соответствующих пиков на обеих масс-хроматограммах.

#### <a id="p100780"></a>8.7. Характеристики погрешности измерений

<a id="p100781"></a>Характеристики погрешности измерений для различных концентраций конгенеров ПХБ приведены в таблице 19.

<a id="p100782"></a>Таблица 19


| Диапазон измеряемых концентраций конгенеров ПХБ, нг/кг | Границы интервала, в котором погрешность находится с вероятностью P = 0,95 сигма, +/- % | Относительное стандартное отклонение воспроизводимости сигма , % R |
| --- | --- | --- |
| От 5 до 50 включ. | 22 | 31 |
| Св. 50 до 500 включ. | 13 | 26 |



#### <a id="p100786"></a>8.8. Оформление результатов измерений

<a id="p100787"></a>Протокол испытаний должен содержать, как минимум, следующие сведения:
- <a id="p100788"></a>всю информацию, необходимую для исчерпывающей идентификации пробы;
- <a id="p100789"></a>метод испытания и определяемый элемент со ссылкой на настоящий стандарт;
- <a id="p100790"></a>результаты испытаний с указанием единиц измерений;
- <a id="p100791"></a>содержание липидов в образце по [ГОСТ 7636](https://bukva.ai/docs/gost-7636-85);
- <a id="p100792"></a>дату отбора пробы и способ отбора (если он известен);
- <a id="p100793"></a>дату окончания проведения испытания;
- <a id="p100794"></a>информацию о выполнении требований к повторяемости результатов;
- <a id="p100795"></a>все детали проведения испытания, не оговоренные в настоящем стандарте или не считающиеся обязательными, а также все инциденты, наблюдавшиеся при проведении испытания, которые могли повлиять на конечный результат.
<a id="p100796"></a>Результаты измерения массовой концентрации индивидуальных конгенеров планарных ПХБ Ci представляют в форме:

<div align="center">

<a id="p100797"></a> $Ci \pm \Delta\text{нг}/\text{кг}$ , (13)

</div>


<a id="p100798"></a>где Ci - концентрация конгенера ПХБ в пробе, нг/кг;
<a id="p100799"></a> $\Delta$ - граница интервала, в котором абсолютная погрешность измерений концентрации конгенера ПХБ, нг/кг, находится с доверительной вероятностью P = 0,95.
<a id="p100800"></a>Характеристику погрешности вычисляют по формуле

<div align="center">

<a id="p100801"></a> $\Delta = 0,01\delta Ci$ , (14)

</div>


<a id="p100802"></a>где $\delta$ - граница интервала, в котором относительная погрешность измерений концентрации конгенера ПХБ в %, находится с доверительной вероятностью P = 0,95.
<a id="p100803"></a>Допускается результаты измерений в документах, выдаваемых лабораторией, представлять в виде

<div align="center">

<a id="p100804"></a> $Ci \pm \Delta_{\text{л}},\text{нг}/\text{кг},\text{при условии},\text{что }\Delta_{\text{л}}<\Delta$ , (15)

</div>


<a id="p100805"></a>где $\Delta_{\text{л}}$ - значение характеристики погрешности результатов измерений, установленное при реализации данной методики в лаборатории и обеспеченное контролем качества результатов.
<a id="p100806"></a>Рекомендуемая форма протокола представлена в [Приложении Г](#p100933).

#### <a id="p100807"></a>8.9. Контроль качества измерений

<a id="p100808"></a>Контроль качества измерений обеспечивают выполнением следующих условий:
- <a id="p100809"></a>анализ проб проводят сериями. Каждая серия включает до 11 полевых образцов, один из которых анализируют дважды (дубликат), образец сертифицированного материала с заданным содержанием ПХБ и процедурный холостой образец;
- <a id="p100810"></a>оперативный контроль точности и правильности измерений обеспечивается анализом изотопно-меченых суррогатных стандартов - аналогов определяемых веществ, вводимых в каждый образец на стадии пробоподготовки.
<a id="p100811"></a>Допускаемые критерии качества анализа:
- <a id="p100812"></a>содержание индивидуальных конгенеров ПХБ в процедурном холостом образце меньше 10 нг;
- <a id="p100813"></a>определяемое содержание конгенеров ПХБ в сертифицированном материале должно соответствовать сертификату анализа для 90% определяемых соединений;
- <a id="p100814"></a>отклонение результатов при анализе дубликатов - не более +/- 25% от среднего значения плюс величина предела обнаружения метода для 90% определяемых соединений (оперативный контроль воспроизводимости);
- <a id="p100815"></a>значения величины извлечения конгенеров $(REC)_{s}$ , рассчитанные, как указано в [8.6](#p100758), находятся в диапазоне 50% - 110%;
- <a id="p100816"></a>чувствительность прибора определяют один раз в день (или после настройки прибора) путем анализа стандартного градуировочного раствора B1 ПХБ. Приемлемый критерий качества - соотношение сигнал-шум больше (10:1) для ПХБ 180;
- <a id="p100817"></a>хроматографическое разрешение подтверждают анализом градуировочного раствора, проводимым до и после анализа аналитической серии. Приемлемое значение - разделение пиков ПХБ 123 и ПХБ 118 соответствует условию:

<div align="center">

<a id="p100818"></a> $2h/(H_{1} + H_{2})<0,9$ , (16)

</div>


<a id="p100819"></a>где h - высота долины между пиками конгенеров;
<a id="p100820"></a> $H_{1}$ и $H_{2}$ - высоты пиков;
- <a id="p100821"></a>масс-спектральное разрешение, определенное при настройке прибора, составляет для низкого разрешения не ниже 0,8 а.е.м. во всем диапазоне масс проводимых измерений;
- <a id="p100822"></a>линейность калибровки инструмента определяют по анализу пяти градуировочных растворов ПХБ. Критерий качества - допустимое стандартное отклонение рассчитанного относительного фактора отклика $(RRF)_{n}$ должно быть меньше 20%;
- <a id="p100823"></a>стабильность работы инструмента подтверждается до и после анализа серии образцов путем анализа градуировочного раствора ПХБ B2. Критерий качества - различия значений величины относительного отклика $(RRF)_{n}$ , рассчитанные до и после анализа серии образцов, не должны превышать +/- 15%;
- <a id="p100824"></a>проверку чистоты инструмента на содержание анализируемых компонентов проводят после каждого анализа градуировочного стандартного раствора путем инжекции декана. Приемлемый критерий - значение вносимой ошибки за счет фона инструмента не должно превышать 1% от среднего значения определяемых концентраций.
<a id="p100825"></a>При невыполнении любого из перечисленных условий принимаются меры по выявлению причин и повторяется анализ партии проб.





<div align="right">

<a id="p100826"></a>Приложение А<br>
(справочное)

</div>


<div align="center">

<a id="p100827"></a>**ДИОКСИНОВЫЙ ЭКВИВАЛЕНТ ТОКСИЧНОСТИ (TEQ)**<br>
**КОНГЕНЕРОВ ПХДД/ДФ И ДИОКСИНПОДОБНЫХ ПХБ**

</div>


<a id="p100828"></a>А.1. Диоксиновый эквивалент токсичности (TEQ) конгенеров ПХДД/ДФ и диоксиноподобных ПХБ - значение, выраженное в относительных величинах токсичности, установленных Всемирной организацией здравоохранения, приведен в таблице А.1.

<div align="right">

<a id="p100829"></a>Таблица А.1

</div>



| Конгенер | TEQ |
| --- | --- |
| Дибензо-n-диоксины (ПХДД): |  |
| 2,3,7,8-ТХДД | 1 |
| 1,2,3,7,8-ПеХДД | 1 |
| 1,2,3,4,7,8-ГеХДД | 0,1 |
| 1,2,3,6,7,8-ГеХДД | 0,1 |
| 1,2,3,7,8,9-ГеХДД | 0,1 |
| 1,2,3,4,6,7,8-ГпХДД | 0,01 |
| ОХДД | 0,0001 |
| Дибензофураны (ПХДФ): |  |
| 2,3,7,8-ТХДФ | 0,1 |
| 1,2,3,7,8-ПеХДФ | 0,05 |
| 2,3,4,7,8-ПеХДФ | 0,5 |
| 1,2,3,4,7,8-ГеХДФ | 0,1 |
| 1,2,3,6,7,8-ГеХДФ | 0,1 |
| 1,2,3,7,8,9-ГеХДФ | 0,1 |
| 2,3,4,6,7,8-ГеХДФ | 0,1 |
| 1,2,3,4,6,7,8-ГпХДФ | 0,01 |
| 1,2,3,4,7,8,9-ГпХДФ | 0,01 |
| ОХДФ | 0,0001 |
| Диоксинподобные ПХБ: |  |
| Не-орто ПХБ: |  |
| ПХБ 77 | 0,0001 |
| ПХБ 81 | 0,0001 |
| ПХБ 126 | 0,1 |
| ПХБ 169 | 0,01 |
| Моно-орто ПХБ: |  |
| ПХБ 105 | 0,0001 |
| ПХБ 114 | 0,0005 |
| ПХБ 118 | 0,0001 |
| ПХБ 123 | 0,0001 |
| ПХБ 156 | 0,0005 |
| ПХБ 157 | 0,0005 |
| ПХБ 167 | 0,00001 |
| ПХБ 189 | 0,0001 |






<div align="right">

<a id="p100865"></a>Приложение Б<br>
(справочное)

</div>


<div align="center">

<a id="p100866"></a>**КОЛОНКИ ДЛЯ АНАЛИЗА**

</div>


<a id="p100867"></a>Б.1. Колонки для анализа приведены на рисунках Б.1 - [Б.4](#p100878).

<div align="center">

<a id="p100868"></a> ![8.9. Контроль качества измерений](https://i.bukva.ai/xk7efkGN/img_0.png) 

<a id="p100869"></a>1 - фильтр Шотта; 2 - фторопластовый кран;<br>
3 - стеклянный наконечник

<a id="p100870"></a>Рисунок Б.1. Колонка для экстракции

<a id="p100871"></a> ![8.9. Контроль качества измерений](https://i.bukva.ai/xk7efkGN/img_1.png) 

<a id="p100872"></a>1 - фильтр Шотта; 2 - фторопластовый кран;<br>
3 - стеклянный наконечник

<a id="p100873"></a>Рисунок Б.2. Колонка Bio-Beads SE-X3

<a id="p100874"></a> ![8.9. Контроль качества измерений](https://i.bukva.ai/xk7efkGN/img_2.png) 

<a id="p100875"></a>1 - безводный $Na_{2}SO_{4}$ ; 2 - активированный $SiO_{2}$ ;<br>
3 - $SiO_{2}/H_{2}SO_{4}$ ; 4 - активированный $SiO_{2}$ ;<br>
5 - $SiO_{2}/NaOH$ ; 6 - активированный $SiO_{2}$ 

<a id="p100876"></a>Рисунок Б.3. Колонка для мультислойного сорбента

<a id="p100877"></a> ![8.9. Контроль качества измерений](https://i.bukva.ai/xk7efkGN/img_3.png) 

<a id="p100878"></a>Рисунок Б.4. Колонка для навески $Al_{2}O_{3}$ массой 5 г

</div>






<a id="p100879"></a>Приложение В
(справочное)

<div align="right">

<a id="p100880"></a>**ФОРМА ПРЕДСТАВЛЕНИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ АНАЛИЗА**

</div>

**НА СОДЕРЖАНИЕ ПХДД/ПХДФ**

<div align="center">

<a id="p100881"></a>              ПРОТОКОЛ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ХИМИЧЕСКОГО АНАЛИЗА N

</div>


<a id="p100882"></a>Заказчик
<a id="p100883"></a>Описание пробы
<a id="p100884"></a>Код образца заказчика
<a id="p100885"></a>Дата получения проб
<a id="p100886"></a>Дата анализа проб
<a id="p100887"></a>Определяемые компоненты: полихлорированные дибензо-n-диоксины и
<a id="p100888"></a>дибензофураны (ПХДД/ПХДФ)
<a id="p100889"></a>Метод анализа: ГОСТ Р 53184-2008


<table>
<colgroup><col width="41%"><col width="23%"><col width="19%"><col width="18%"></colgroup>
<tr><td>Код пробы</td><td></td><td>Матрица</td><td></td></tr>
<tr><td rowspan="2">Определяемый компонент</td><td rowspan="2">Диоксиновый эквивалент, TEQ</td><td colspan="2">Результаты анализов</td></tr>
<tr><td>Концентрация, нг/кг</td><td>Концентрация в TEQ, нг/кг</td></tr>
<tr><td>2,3,7,8-ТХДД</td><td>1</td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>1,2,3,7,8-ПеХДД</td><td>1</td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>1,2,3,4,7,8-ГкХДД</td><td>0,1</td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>1,2,3,6,7,8-ГкХДД</td><td>0,1</td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>1,2,3,7,8,9-ГкХДД</td><td>0,1</td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>1,2,3,4,6,7,8-ГпХДД</td><td>0,01</td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>ОХДД</td><td>0,0001</td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>2,3,7,8-ТХДФ</td><td>0,1</td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>1,2,3,7,8-ПеХДФ</td><td>0,5</td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>2,3,4,7,8-ПеХДФ</td><td>0,5</td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>1,2,3,4,7,8-ГкХДФ</td><td>0,1</td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>1,2,3,6,7,8-ГкХДФ</td><td>0,1</td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>2,3,4,6,7,8-ГкХДФ</td><td>0,1</td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>1,2,3,7,8,9-ГкХДФ</td><td>0,1</td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>1,2,3,4,6,7,8-ГпХДФ</td><td>0,01</td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>1,2,3,4,7,8,9-ГпХДФ</td><td>0,01</td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>ОХДФ</td><td>0,0001</td><td></td><td></td></tr>
<tr><td colspan="4">Суммарная концентрация в TEQ, нг/кг</td></tr>
<tr><td>Другие ТХДД</td><td>-</td><td></td><td>-</td></tr>
<tr><td>Другие ТХДФ</td><td>-</td><td></td><td>-</td></tr>
<tr><td>Другие ПеХДД</td><td>-</td><td></td><td>-</td></tr>
<tr><td>Другие ПеХДФ</td><td>-</td><td></td><td>-</td></tr>
<tr><td>Другие ГкХДД</td><td>-</td><td></td><td>-</td></tr>
<tr><td>Другие ГкХДФ</td><td>-</td><td></td><td>-</td></tr>
<tr><td>Другие ГпХДД</td><td>-</td><td></td><td>-</td></tr>
<tr><td>Другие ГпХДФ</td><td>-</td><td></td><td>-</td></tr>
</table>


<a id="p100919"></a>Окончание таблицы


| Суррогатный стандарт | Предел обнаружения, нг/кг | Извлечение, % |
| --- | --- | --- |
| 13 ( C )2,3,7,8-ТХДД 12 |  |  |
| 13 ( C )2,3,7,8-ТХДФ 12 |  |  |
| 13 ( C )1,2,3,7,8-ПеХДД 12 |  |  |
| 13 ( C )1,2,3,7,8-ПеХДФ 12 |  |  |
| 13 ( C )1,2,3,6,7,8-ГкХДД 12 |  |  |
| 13 ( C )1,2,3,4,7,8-ГкХДФ 12 |  |  |
| 13 ( C )1,2,3,4,6,7,8-ГпХДД 12 |  |  |
| 13 ( C )1,2,3,4,6,7,8-ГпХДФ 12 |  |  |
| 13 ( C )ОХДД 12 |  |  |
| Содержание липидов в пробе, % |  |  |


<a id="p100931"></a>Личная подпись ответственного исполнителя





<div align="right">

<a id="p100932"></a>Приложение Г<br>
(справочное)

</div>


<div align="center">

<a id="p100933"></a>**ФОРМА ПРЕДСТАВЛЕНИЯ РЕЗУЛЬТАТОВ АНАЛИЗА НА СОДЕРЖАНИЕ**<br>
**ПЛАНАРНЫХ ПОЛИХЛОРИРОВАННЫХ БИФЕНИЛОВ**

</div>


<a id="p100934"></a>              ПРОТОКОЛ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ХИМИЧЕСКОГО АНАЛИЗА N

<a id="p100935"></a>Заказчик
<a id="p100936"></a>Описание пробы
<a id="p100937"></a>Код образца заказчика
<a id="p100938"></a>Дата получения проб
<a id="p100939"></a>Дата анализа проб
<a id="p100940"></a>Определяемые компоненты: полихлорированные планарные бифенилы
<a id="p100941"></a>Метод анализа: ГОСТ Р 53184-2008


<table>
<colgroup><col width="18%"><col width="12%"><col width="7%"><col width="16%"><col width="11%"><col width="15%"><col width="22%"></colgroup>
<tr><td colspan="2">Код пробы</td><td colspan="2"></td><td colspan="2">Матрица</td><td></td></tr>
<tr><td rowspan="2">Конгенер ПХБ</td><td rowspan="2">TEQ</td><td colspan="5">Результаты анализов</td></tr>
<tr><td colspan="3">Концентрация, нг/кг</td><td colspan="2">Концентрация в TEQ, нг/кг</td></tr>
<tr><td>ПХБ 81</td><td>0,0001</td><td colspan="3"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td>ПХБ 77</td><td>0,0001</td><td colspan="3"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td>ПХБ 123</td><td>0,0001</td><td colspan="3"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td>ПХБ 118</td><td>0,0001</td><td colspan="3"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td>ПХБ 114</td><td>0,0005</td><td colspan="3"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td>ПХБ 105</td><td>0,0001</td><td colspan="3"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td>ПХБ 126</td><td>0,1</td><td colspan="3"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td>ПХБ 167</td><td>0,00001</td><td colspan="3"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td>ПХБ 156</td><td>0,0005</td><td colspan="3"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td>ПХБ 157</td><td>0,0005</td><td colspan="3"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td>ПХБ 169</td><td>0,01</td><td colspan="3"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td>ПХБ 180</td><td>-</td><td colspan="3"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td>ПХБ 170</td><td>-</td><td colspan="3"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td>ПХБ 189</td><td>0,0001</td><td colspan="3"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td colspan="5">Суммарная концентрация TEQ, нг/кг</td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td colspan="3">Суррогатный стандарт</td><td colspan="2">Предел обнаружения, нг/кг</td><td colspan="2">Извлечение, %</td></tr>
<tr><td colspan="3">13</td><td colspan="2"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td colspan="3">ПХБ 81 ( C 99%)</td><td colspan="2"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td colspan="3">12</td><td colspan="2"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td colspan="3">13</td><td colspan="2"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td colspan="3">ПХБ 77 ( C 99%)</td><td colspan="2"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td colspan="3">12</td><td colspan="2"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td colspan="3">13 ПХБ 123 ( C 99%) 12</td><td colspan="2"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td colspan="3">13 ПХБ 118 ( C 99%) 12</td><td colspan="2"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td colspan="3">13 ПХБ 114 ( C 99%) 12</td><td colspan="2"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td colspan="3">13 ПХБ 105 ( C 99%) 12</td><td colspan="2"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td colspan="3">13 ПХБ 126 ( C 99%) 12</td><td colspan="2"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td colspan="3">13 ПХБ 167 ( C 99%) 12</td><td colspan="2"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td colspan="3">13 ПХБ 156 ( C 99%) 12</td><td colspan="2"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td colspan="3">13 ПХБ 157 ( C 99%) 12</td><td colspan="2"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td colspan="3">13 ПХБ 169 ( C 99%) 12</td><td colspan="2"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td colspan="3">13 ПХБ 180 ( C 99%) 12</td><td colspan="2"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td colspan="3">13 ПХБ 170 ( C 99%) 12</td><td colspan="2"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td colspan="3">13 ПХБ 189 ( C 99%) 12</td><td colspan="2"></td><td colspan="2"></td></tr>
<tr><td colspan="3">Содержание липидов в пробе, %</td><td colspan="2"></td><td colspan="2"></td></tr>
</table>


<a id="p100976"></a>Личная подпись ответственного исполнителя






## <a id="p100977"></a>БИБЛИОГРАФИЯ



1. <a id="p100978"></a>Инструкция по технике безопасности по работе с 2,3,7,8-ТХДД,
   утвержденная 3-м ГУ при МЗ СССР 02.12.1986)
2. <a id="p100979"></a>Временная инструкция по лечению отравлений диоксином, утвержденная
   заместителем Министра здравоохранения СССР 10 сентября 1986 г.
3. <a id="p100980"></a>ТУ 25-1173.102-84            Ротационный испаритель ИР-1 М2
4. <a id="p100981"></a>ТУ 64-1-2451-88              Аппарат для встряхивания проб фирмы АВУ-1
5. <a id="p100982"></a>ИСО 9187-1:2006              Медицинское оборудование для инъекций.
   Часть 1. Ампулы для инъекционных растворов
6. <a id="p100983"></a>ТУ 6-09-06-856-71            Хлористый метилен
7. <a id="p100984"></a>ТУ 0271-135-31323949-2005    Гелий
8. <a id="p100985"></a>ТУ 2114-02-05015259-97       Смеси газовые
9. <a id="p100986"></a>ТУ 51-180-83                 Смеси газовые
10. <a id="p100987"></a>ТУ 6-11-15-191-81           Волокнистый кварцевый материал СКВ.
   <a id="p100988"></a>------------------------------------------------------------------