--- title: "\"ГОСТ Р 51428-99. Государственный стандарт Российской Федерации. Соки фруктовые. Метод определения содержания винной кислоты с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии\"" number: "ГОСТ Р 51428-99" issuer: "Государственный комитет Российской Федерации по стандартизации и метрологии" status: действует canonical: "https://bukva.ai/docs/gost-r-51428-99" --- ## "ГОСТ Р 51428-99. Государственный стандарт Российской Федерации. Соки фруктовые. Метод определения содержания винной кислоты с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии" # "ГОСТ Р 51428-99. Государственный стандарт Российской Федерации. Соки фруктовые. Метод определения содержания винной кислоты с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии" (принят и введен в действие Постановлением Госстандарта России от 22.12.1999 N 583-ст) > [!IMPORTANT] > Документ включен в Перечень международных и региональных (межгосударственных) стандартов (п. п. 122, 179), а в случае их отсутствия - национальных (государственных) стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения требований технического регламента Таможенного союза "Технический регламент на соковую продукцию из фруктов и овощей" (ТР ТС 023/2011) и осуществления оценки соответствия объектов технического регулирования (Решение Коллегии Евразийской экономической комиссии от 28.01.2020 N 19). > Документ включен в Перечень международных и региональных (межгосударственных) стандартов, а в случае их отсутствия - национальных (государственных) стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения требований технического регламента Таможенного союза "Требования безопасности пищевых добавок, ароматизаторов и технологических вспомогательных средств" (ТР ТС 029/2012) и осуществления оценки соответствия объектов технического регулирования (Решение Коллегии Евразийской экономической комиссии от 07.02.2018 N 21). > Документ включен в Перечень стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения требований технического регламента Таможенного союза "Требования безопасности пищевых добавок, ароматизаторов и технологических вспомогательных средств" (ТР ТС 029/2012) и осуществления оценки (подтверждения) соответствия продукции (Решение Коллегии Евразийской экономической комиссии от 02.10.2012 N 258). > Документ включен в Перечень стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения требований технического регламента Таможенного союза "Технический регламент на соковую продукцию из фруктов и овощей" (ТР ТС 023/2011) и осуществления оценки (подтверждения) соответствия продукции (Решение Комиссии Таможенного союза от 09.12.2011 N 882). > Документ включен в Перечень национальных стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения Федерального закона "Технический регламент на соковую продукцию из фруктов и овощей" и осуществления оценки соответствия (Распоряжение Правительства РФ от 19.05.2009 N 690-р). > С 1 июля 2003 года до вступления в силу технических регламентов акты федеральных органов исполнительной власти в сфере технического регулирования носят рекомендательный характер и подлежат обязательному исполнению только в части, соответствующей целям, указанным в пункте 1 статьи 46 Федерального закона от 27.12.2002 N 184-ФЗ. > Документ [введен](#p100009) в действие с 01.01.2001.
Принят и введен в действие
Постановлением Госстандарта России
от 22 декабря 1999 г. N 583-ст **ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ** **СОКИ ФРУКТОВЫЕ** **МЕТОД ОПРЕДЕЛЕНИЯ СОДЕРЖАНИЯ ВИННОЙ КИСЛОТЫ С ПОМОЩЬЮ** **ВЫСОКОЭФФЕКТИВНОЙ ЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ** Fruit juices. Method for determination of tartaric acid
content using high performance liquid chromatography **ГОСТ Р 51428-99** Группа Н59 ОКС 67.080;
ОКСТУ 9109
Дата введения 1 января 2001 года ## Предисловие 1. Разработан Всероссийским научно-исследовательским институтом консервной и овощесушильной промышленности (ВНИИКОП). Внесен Техническим комитетом по стандартизации ТК 93 "Продукты переработки плодов и овощей". 2. Принят и введен в действие Постановлением Госстандарта России от 22 декабря 1999 г. N 583-ст. 3. Стандарт гармонизирован с европейским стандартом ЕН 12137:1997 "Соки фруктовые и овощные. Определение винной кислоты в виноградном соке. Метод высокоэффективной жидкостной хроматографии".
4. Введен впервые.
## 1. Область применения Настоящий стандарт распространяется на виноградный сок и подобные ему продукты, содержащие виноградный сок, и устанавливает метод определения содержания (массовой концентрации или массовой доли) винной кислоты с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ). Диапазон определения массовой концентрации (массовой доли) винной кислоты - от 1,0 до 10,0 г/дм3 (г/кг). ## 2. Нормативные ссылки В настоящем стандарте использованы ссылки на следующие стандарты: [ГОСТ 1770-74](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74). Посуда мерная лабораторная стеклянная. Цилиндры, мензурки, колбы, пробирки. Технические условия ГОСТ 4204-77. Кислота серная. Технические условия [ГОСТ 5817-77](https://bukva.ai/docs/gost-5817-77). Кислота винная. Технические условия ГОСТ 24104-88. Весы лабораторные общего назначения и образцовые. Общие технические условия [ГОСТ 26313-84](https://bukva.ai/docs/standart-gost-26313-84). Продукты переработки плодов и овощей. Правила приемки, методы отбора проб [ГОСТ 26671-85](https://bukva.ai/docs/gost-26671-85). Продукты переработки плодов и овощей, консервы мясные и мясорастительные. Подготовка проб для лабораторных анализов [ГОСТ 29227-91](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) (ИСО 835-1-81). Посуда лабораторная стеклянная. Пипетки градуированные. Часть 1. Общие требования [ГОСТ Р 51431-99](https://bukva.ai/docs/gost-r-51431-99). Соки фруктовые и овощные. Метод определения относительной плотности ИСО 3696-87 <*>. Вода для лабораторного анализа. Технические условия и методы испытаний. --- <*> Действует до введения в действие ГОСТ Р, разработанного на основе стандарта ИСО. ## 3. Сущность метода Метод основан на определении массовой концентрации или массовой доли винной кислоты в виноградном соке с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ) с применением ионоэксклюзивной колонки и спектрофотометрического детектора в ультрафиолетовой области спектра. ## 4. Средства измерений, лабораторное оборудование, реактивы и материалы Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания 200 г, 2-го класса точности. Весы лабораторные общего назначения по ГОСТ 24104 с наибольшим пределом взвешивания 500 г, 4-го класса точности. Жидкостный хроматограф, состоящий из: - насоса высокого давления с верхним пределом давления не менее 25 МПа и диапазоном регулирования подачи растворителя от 0,1 до 5 см3/мин; - петлевого устройства ввода пробы с рабочим объемом петли от 0,010 до 0,020 см3; - спектрофотометрического детектора с переменной длиной волны, позволяющего проводить измерение оптической плотности при длине волны 210 нм, снабженного проточной кварцевой кюветой вместимостью не более 0,01 см3, с относительной погрешностью измерения оптической плотности не более 2%; - регистрирующего устройства (самописца или интегратора), позволяющего проводить измерения при чувствительности 0,2 мВ/см с погрешностью записи в рабочих условиях не более 0,5%; - термостата колонок, пригодного для поддержания рабочей температуры 40 °C; - колонки длиной 300 мм, внутренним диаметром 7,8 мм, заполненной ионоэксклюзивным сорбентом на основе сополимера стирола с дивинилбензолом с привитыми сульфогруппами в водородной форме размером частиц 10 мкм; - предколонки, заполненной катионитом в водородной форме. Микрошприц вместимостью, обеспечивающей полное заполнение петли инжектора. Колбы мерные по [ГОСТ 1770](https://bukva.ai/docs/gost-1770-74) вместимостью 50, 100 и 500 см3. Пипетки по [ГОСТ 29227](https://bukva.ai/docs/gost-29227-91) типа 2, исполнения 1, 1-го класса точности вместимостью 10 и 25 см3. Фильтры мембранные размером пор не более 0,5 мкм.
Кислота серная по ГОСТ 4204, х.ч.
Кислота винная по [ГОСТ 5817](https://bukva.ai/docs/gost-5817-77), ч.д.а. Вода для лабораторного анализа по ИСО 3696, категории 1. Допускается использование других средств измерений, лабораторного оборудования и реактивов, по метрологическим и техническим характеристикам не уступающих указанным выше. ## 5. Отбор и подготовка проб #### 5.1 Отбор проб - по [ГОСТ 26313](https://bukva.ai/docs/standart-gost-26313-84). #### 5.2 Подготовка проб к испытаниям - по [ГОСТ 26671](https://bukva.ai/docs/gost-26671-85). Концентрированные продукты разводят водой до заданного значения относительной плотности в соответствии с нормативным или техническим документом на конкретный вид продукта. Относительную плотность разбавленной пробы определяют по [ГОСТ Р 51431](https://bukva.ai/docs/gost-r-51431-99) и найденное значение указывают в протоколе испытаний. ## 6. Подготовка к проведению испытаний Для приготовления растворов, используемых при проведении испытания, и подвижной фазы для ВЭЖХ используют только воду категории 1 по ИСО 3696. #### 6.1 Приготовление градуировочных растворов Готовят серию градуировочных растворов винной кислоты в диапазоне массовых концентраций от 100 до 500 мг/дм3. Для этого навеску винной кислоты массой 50 мг переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3, растворяют в небольшом количестве воды, объем содержимого в колбе доводят водой до метки. Получают градуировочный раствор винной кислоты массовой концентрации 500 мг/дм3. Остальные градуировочные растворы готовят точным разведением первого раствора в соответствующее количество раз. ## 7. Проведение испытаний #### 7.1 Приготовление раствора пробы для хроматографического анализа Проводят два параллельных определения. Пробу объемом 25 - 50 см3 (25 - 50 г) помещают в мерную колбу вместимостью 500 см3, добавляют около 300 см3 горячей воды температурой 80 - 85 °C, тщательно перемешивают и оставляют для охлаждения до комнатной температуры, после чего объем содержимого в колбе доводят до отметки водой, перемешивают и фильтруют через мембранный фильтр. Фильтрат используют для хроматографического анализа. #### 7.2 Хроматографический анализ Хроматографический анализ градуировочных растворов и растворов пробы, приготовленных по [7.1](#p100062), проводят при следующих условиях: - состав подвижной фазы - раствор серной кислоты $c(H_{2}SO_{4}) = 0,005\text{моль}/\text{дм}^{3}$ ; - скорость потока подвижной фазы - 0,6 см3/мин (для предотвращения чрезмерного давления скорость потока при кондиционировании колонки повышают постепенно, начиная с 0,2 см3/мин); - длина волны детектора - 210 нм; - температура колонки - 40 °C;
- объем анализируемого раствора - полное заполнение петли инжектора;
- длительность анализа - 20 мин; - ориентировочное время удерживания винной кислоты - 10 мин. Анализ градуировочных растворов проводят непосредственно перед анализом каждой серии растворов проб. Регистрируют высоту пика винной кислоты. ## 8. Обработка и оформление результатов испытаний По результатам анализа градуировочных растворов строят градуировочный график зависимости высоты пика винной кислоты от ее массовой концентрации. По градуировочному графику определяют массовую концентрацию винной кислоты в растворе пробы, соответствующую высоте пика винной кислоты на хроматограмме раствора пробы. Массовую концентрацию винной кислоты в пробе $x_{1}$ , г/дм3, вычисляют по формуле $x_{1} = \frac{cV_{1}}{V_{2}} \cdot 10^{- 3}$ , (1) где c - массовая концентрация винной кислоты в растворе пробы, определенная по градуировочному графику, мг/дм3; $V_{1}$ - объем приготовленного по [7.1](#p100062) раствора пробы, см3; $V_{2}$ - объем пробы, взятый для приготовления раствора пробы по [7.1](#p100062), см3. Массовую долю винной кислоты $x_{2}$ , г/кг, вычисляют по формуле $x_{2} = \frac{cV_{1}}{m} \cdot 10^{- 3}$ , (2) где m - масса навески пробы, взятой для приготовления раствора пробы по [7.1](#p100062), г. Вычисления проводят до второго десятичного знака. Относительное расхождение между результатами двух параллельных определений, выполненных одним оператором при анализе одной и той же пробы с использованием одних и тех же средств измерений и реактивов в течение возможно минимального интервала времени, не должно превышать норматива оперативного контроля сходимости 6% (P = 0,95). При соблюдении этого условия за окончательный результат испытания принимают среднее арифметическое результатов двух параллельных определений, округленное до первого десятичного знака.
Относительное расхождение между результатами двух определений, выполненных в двух лабораториях, не должно превышать норматива оперативного контроля воспроизводимости 15% (P = 0,95).
Пределы относительной погрешности определения массовой концентрации или массовой доли винной кислоты при соблюдении условий, регламентированных настоящим стандартом, не превышают +/- 10,5% (P = 0,95).
В протоколе испытаний указывают:
- информацию, необходимую для идентификации исследуемого продукта (вид продукта, происхождение, шифр);
- ссылку на настоящий стандарт;
- дату и способ отбора проб (по возможности);
- дату получения пробы для испытаний;
- дату проведения испытаний;
- результат испытаний с указанием погрешности и единицы измерений;
- соблюдение норматива контроля сходимости результатов;
- особенности проведения испытаний (разведение концентрированной пробы, относительную плотность разведенной пробы и пр.);
- отклонения условий проведения испытаний от описанных в стандарте, которые могли повлиять на результат испытаний.
---