ГОСТ 7636-85. Государственный стандарт Союза ССР. Рыба, морские млекопитающие, морские беспозвоночные и продукты их переработки. Методы анализа

Государственный комитет СССР по стандартам · № ГОСТ 7636-85Утратил силу 16.10.2026

(утв. и введен в действие Постановлением Госстандарта СССР от 27.03.1985 № 898)

(ред. от 03.10.2023)

Внимание

Документ утратил силу с 01.07.1986 в части п. 8.11.2 и в части п. 3.7.1 в части определения сырого жира в кормовой рыбной муке и из морских млекопитающих и ракообразных, предназначенной для производства комбикормов, с 01.12.1986 в части п. 3.8 и с 01.07.1987 в части п. 8.12.1. Взамен введены в действие ГОСТ 26570-85, ГОСТ 13496.15-85, ГОСТ 26927-86 и ГОСТ 26657-85 («ИУС» № 9, № 10, 1985; № 2, № 9, 1986). Документ включен в Перечень международных и региональных (межгосударственных) стандартов (п. п. 14, 34, 55, 123, 148, 182), а в случае их отсутствия — национальных (государственных) стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения требований технического регламента Евразийского экономического союза «О безопасности рыбы и рыбной продукции» (ТР ЕАЭС 040/2016) и осуществления оценки соответствия объектов технического регулирования (Решение Коллегии Евразийской экономической комиссии от 19.07.2022 № 107). Отдельные положения данного документа включены в Перечень международных и региональных (межгосударственных) стандартов, а в случае их отсутствия — национальных (государственных) стандартов, содержащих правила и методы исследований (испытаний) и измерений, в том числе правила отбора образцов, необходимые для применения и исполнения требований технического регламента Таможенного союза «О безопасности пищевой продукции» (ТР ТС 021/2011) и осуществления оценки соответствия объектов технического регулирования (Решение Коллегии Евразийской экономической комиссии от 24.12.2019 № 236). С 1 июля 2003 года до вступления в силу технических регламентов акты федеральных органов исполнительной власти в сфере технического регулирования носят рекомендательный характер и подлежат обязательному исполнению только в части, соответствующей целям, указанным в пункте 1 статьи 46 Федерального закона от 27.12.2002 г. № 184-ФЗ. Текст документа приведен с учетом поправки, опубликованной в «ИУС», № 7, 1986; поправки, опубликованной в «ИУС», № 12, 2005. Ограничение срока действия снято по Протоколу № 5-94 Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации («ИУС» № 11 — 12, 1994). Изменение № 2 введено в действие на территории РФ Приказом Росстандарта от 03.10.2023 № 1043-ст с 01.08.2024 с правом досрочного применения. Взамен ГОСТ 7636-55, ГОСТ 13893-68, ГОСТ 13929-68, кроме определения хлористого натрия в водорослях и продуктах их переработки, ГОСТ 13930-68, кроме разд. 2 и 3 в части определения влажности рыбной муки, муки из морских млекопитающих и ракообразных и определения влаги в водорослях в продуктах их переработки, ГОСТ 17258-71, ГОСТ 17259-71, ГОСТ 18657-73, ГОСТ 8714-72 в части разд. 3, пп. 3.3 — 3.8, ГОСТ 18170-72 в части разд. 3, пп. 3.3 — 3.5, ГОСТ 7047-55 разд. II в части определения витамина A в печени рыб, морских млекопитающих и морских беспозвоночных, ГОСТ 18173-72 в части разд. 3, п. 3.2. Документ утратил силу с 01.07.1986 в части п. 8.11.2 и в части п. 3.7.1 в части определения сырого жира в кормовой рыбной муке и из морских млекопитающих и ракообразных, предназначенной для производства комбикормов, с 01.12.1986 в части п. 3.8 и с 01.07.1987 в части п. 8.12.1. Взамен введены в действие ГОСТ 26570-85, ГОСТ 13496.15-85, ГОСТ 26927-86 и ГОСТ 26657-85 («ИУС» № 9, № 10, 1985; № 2, № 9, 1986).

ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

flowchart LR
  n0["ГОСТ 7636-55"]:::rst
  click n0 "https://bukva.ai/docs/standart-gost-34308-2017" "ГОСТ 7636-55. Межгосударственный стандарт. Рыбы, морские млекопитающие, морские беспозвоночные и продукты их переработки. Методы анализа"
  n1["ГОСТ 7047-55"]:::doc
  click n1 "https://bukva.ai/docs/gost-7047-55" "ГОСТ 7047-55. Государственный стандарт Союза ССР. Витамины A, C, Д, B1, B2 и PP. Отбор проб, методы определения витаминов и испытания качества витаминных препаратов (утв. Госстанда"
  n2["ГОСТ 18173-72"]:::rst
  n3["ГОСТ 8714-72"]:::doc
  click n3 "https://bukva.ai/docs/gost-8714-72" "ГОСТ 8714-72. Межгосударственный стандарт. Жир пищевой из рыбы и морских млекопитающих. Технические условия (введен Постановлением Госстандарта СССР от 28.04.1972 N 884)"
  n4["ГОСТ 18170-72"]:::doc
  n5["ГОСТ 7636-85"]:::doc
  click n5 "https://bukva.ai/docs/gost-7636-85" "ГОСТ 7636-85. Государственный стандарт Союза ССР. Рыба, морские млекопитающие, морские беспозвоночные и продукты их переработки. Методы анализа (утв. и введен в действие Постановле"
  n6["ГОСТ 26570-85"]:::rst
  click n6 "https://bukva.ai/docs/standart-gost-r-43-0-12-2018" "ГОСТ 26570-85. Государственный стандарт Союза ССР. Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Методы определения кальция (утв. и введен в действие Постановлением Госстандарта СССР от "
  n7["ГОСТ 26657-85"]:::rst
  click n7 "https://bukva.ai/docs/popravka-popravki-gost-8002-2020" "ГОСТ 26657-85. Государственный стандарт Союза ССР. Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Методы определения содержания фосфора (утв. Постановлением Госстандарта СССР от 22.11.198"
  n8["ГОСТ 26927-86"]:::doc
  click n8 "https://bukva.ai/docs/gost-26927-86" "ГОСТ 26927-86. Государственный стандарт Союза ССР. Сырье и продукты пищевые. Методы определения ртути (введен Постановлением Госстандарта СССР от 25.06.1986 N 1755)"
  n9["ГОСТ 13496.15-85"]:::rst
  n10["ГОСТ 26570-95"]:::doc
  click n10 "https://bukva.ai/docs/gost-26570-95" "ГОСТ 26570-95. Межгосударственный стандарт. Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Методы определения кальция (введен в действие Постановлением Госстандарта России от 29.02.1996 N"
  n11["ГОСТ 26657-97"]:::doc
  click n11 "https://bukva.ai/docs/gost-26657-97" "ГОСТ 26657-97. Межгосударственный стандарт. Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Методы определения содержания фосфора (введен в действие Постановлением Госстандарта России от 1"
  n12["ГОСТ 13496.15-97"]:::rst
  click n12 "https://bukva.ai/docs/gost-13496-15-97" "ГОСТ 13496.15-97. Межгосударственный стандарт. Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Методы определения содержания сырого жира (введен в действие Постановлением Госстандарта Росс"
  n13["ГОСТ 32904-2014"]:::doc
  click n13 "https://bukva.ai/docs/gost-32904-2014" "ГОСТ 32904-2014. Межгосударственный стандарт. Корма, комбикорма. Определение содержания кальция титриметрическим методом (введен в действие Приказом Росстандарта от 13.10.2014 N 13"
  n14["ГОСТ 13496.15-2016"]:::doc
  click n14 "https://bukva.ai/docs/standart-gost-13496-15-2016" "ГОСТ 13496.15-2016. Межгосударственный стандарт. Корма, комбикорма, комбикормовое сырье. Методы определения массовой доли сырого жира (введен в действие Приказом Росстандарта от 20"
  n5 --> n8
  n5 --> n9
  n5 --> n7
  n5 --> n6
  n0 --> n5
  n3 --> n5
  n4 --> n5
  n2 --> n5
  n1 --> n5
  n6 --> n10
  n10 --> n13
  n7 --> n11
  n9 --> n12
  n12 --> n14
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;

Утвержден и введен в действие Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 27 марта 1985 г. № 898

ГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ СОЮЗА ССР

РЫБА, МОРСКИЕ МЛЕКОПИТАЮЩИЕ, МОРСКИЕ БЕСПОЗВОНОЧНЫЕ И ПРОДУКТЫ ИХ ПЕРЕРАБОТКИ

МЕТОДЫ АНАЛИЗА

Fish, marine mammals, invertebrates and products of their processing. Methods of analysis

ГОСТ 7636-85

Группа Н29

ОКСТУ 9109

Взамен <*>

<*> Взамен ГОСТ 7636-55; ГОСТ 13893-68; ГОСТ 13929-68, кроме определения хлористого натрия в водорослях и продуктах их переработки; ГОСТ 13930-68, кроме разд. 2 и 3 в части определения влажности рыбной муки, муки из морских млекопитающих и ракообразных и определения влаги в водорослях в продуктах их переработки; ГОСТ 17258-71; ГОСТ 17259-71; ГОСТ 18657-73; ГОСТ 8714-72 в части разд. 3, пп. 3.3 — 3.8; ГОСТ 18170-72 в части разд. 3, пп. 3.3 — 3.5; ГОСТ 7047-55 разд. II в части определения витамина A в печени рыб, морских млекопитающих и морских беспозвоночных; ГОСТ 18173-72 в части разд. 3, п. 3.2.

Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 27 марта 1985 г. № 898 срок действия установлен

с 1 января 1986 года до 1 января 1991 года

РАЗРАБОТАН Министерством рыбного хозяйства СССР

ИСПОЛНИТЕЛИ

В.П. Быков, канд. техн. наук; А.Н. Головин, канд. техн. наук; С.Г. Кириченко, канд. биол. наук; Т.М. Лебедева; Е.Н. Конищева

ВНЕСЕН Министерством рыбного хозяйства СССР

Член Коллегии С.В. Бутысин

УТВЕРЖДЕН И ВВЕДЕН В ДЕЙСТВИЕ Постановлением Государственного комитета СССР по стандартам от 27 марта 1985 г. № 898

Настоящий стандарт распространяется на рыбу, морских млекопитающих, морских беспозвоночных и продукты их переработки и устанавливает методы физического и химического анализа.

Стандарт не распространяется на рыбные консервы и пресервы.

1. МЕТОДЫ ОТБОРА ПРОБ

1.1. Отбор проб — по ГОСТ 7631, кормовой муки из рыбы, морских млекопитающих и ракообразных — по ГОСТ 13496.0

2. ПОДГОТОВКА К АНАЛИЗУ СРЕДНЕЙ ПРОБЫ

2.1. Подготовка к анализу средней пробы свежей, охлажденной, мороженой, соленой, пряной, маринованной, вяленой, сушеной и копченой рыбы, сырья морских млекопитающих и пищевого рыбного фарша

2.1.1. Рыбу, отобранную для анализа, очищают от механических загрязнений, целых и крупнодробленых пряностей и чешуи. Обмывать рыбу не допускается. Мороженую рыбу предварительно размораживают до температуры в толще рыбы минус 1 °C.

2.1.2. Среднюю пробу, составленную из мелкой рыбы массой экземпляра 0,1 кг и менее (кроме бычка, мойвы, черноморской ставриды всех размеров и салаки длиной свыше 15 см), размалывают без разделки. У салаки длиной более 15 см, у бычка, черноморской ставриды перед размалыванием удаляют голову, внутренности вместе с икрой или молоками и хвостовой плавник. У мойвы удаляют голову вместе с пучком внутренностей, не разрезая брюшко, и хвостовой плавник.

2.1.3. При подготовке средней пробы, составленной из рыбы массой экземпляра от 0,1 до 1 кг, рыбу разделывают на филе: отделяют голову и плавники, разрезают тушку по брюшку и удаляют все внутренности вместе с икрой или молоками; разрезают вдоль спинки, удаляют позвоночник и, по возможности, все ребра и кожу.

У рыбы свежей, охлажденной, мороженой (за исключением рыбы с плотной кожей: акулы, макруруса, осетровых, пинагора, сома, ставриды, угря, лососевых и др.) удаляют чешую, не удаляя кожу.

2.1.4. Среднюю пробу в виде кусков, отобранную от крупной рыбы массой экземпляра более 1 кг, измельчают после обесшкуривания и удаления костей.

2.1.5. Среднюю пробу мелкой неразделанной рыбы или крупной рыбы дважды пропускают через ручную мясорубку или один раз через электрическую мясорубку. Фарш тщательно перемешивают, квартуют и часть его в количестве 100 — 200 г переносят в широкогорлую банку с плотно закрывающейся крышкой.

2.1.6. Средние пробы мороженого китового мяса и печени измельчают мясорубкой. При поступлении средней пробы в мороженом виде ее размораживают на воздухе до температуры от 0 до минус 1 °C.

2.1.7. Среднюю пробу соленой китовой печени перед измельчением оставляют для стекания тузлука на 20 — 30 мин.

2.1.8. Китовое мясо измельчают трехкратным, а печень двукратным пропусканием через мясорубку. Фарш тщательно перемешивают, отбирают 250 — 300 г для анализа и переносят в широкогорлую банку с плотно закрывающейся крышкой.

2.1.9. Среднюю пробу мороженого рыбного фарша размораживают на воздухе до температуры 0 — 2 °C, тщательно перемешивают и переносят в широкогорлую банку с притертой пробкой.

2.1.10. При определении водоудерживающей способности среднюю пробу делят на две равные части. Одну часть пробы, предназначенную для определения водоудерживающей способности, размораживают до 3 — 4 °C, разделывают на филе, удаляя кости, и при необходимости пропускают через мясорубку. Полученный фарш тщательно перемешивают и помещают в широкогорлую банку с плотно закрывающейся крышкой.

2.2 Подготовка к анализу средней пробы полуфабрикатов и кулинарных изделий

2.2.1. Среднюю пробу, доставленную в лабораторию, направляют на анализ не позднее чем через 30 мин. Замороженную пробу предварительно размораживают при комнатной температуре в плотно закрытой банке.

2.2.2. После определения физических показателей (длины, массы нетто, составных частей) и органолептической оценки по ГОСТ 7631 пробу освобождают от несъедобных частей (кости, целые и крупнодробленые пряности и др.), плотную часть пропускают через мясорубку, смешивают с жидкой фракцией (при ее наличии) и растирают в ступке до однородной массы.

2.2.3. Рыбомучные изделия после определения соотношения составных частей (в случае необходимости) измельчают.

Начинку пропускают через мясорубку и растирают в ступке до однородной массы, а мучную часть или целые кулинарные изделия измельчают вместе с корочкой ножом или пропускают дважды через мясорубку.

При необходимости анализа кулинарных изделий с начинкой целиком составные части их смешивают.

2.2.4. Пробу, отобранную от кулинарных изделий или полуфабрикатов, приготовленных из измельченного сырья (фарш, паста и др.), перед анализом разрезают на кусочки, тщательно перемешивают и растирают в ступке до однородной массы.

2.3 Подготовка к анализу средней пробы икры

2.3.1. Пробу зернистой икры осетровых и лососевых рыб, а также пробойной икры различных видов рыб измельчают в гомогенизаторе или растирают в ступке до получения однородной массы.

2.3.2. Паюсную икру осетровых рыб не измельчают. Навески отбирают из разных мест средней пробы.

2.3.3. Среднюю пробу ястычной икры всех видов рыб дважды пропускают через мясорубку для измельчения пленок, а затем растирают в ступке до получения однородной массы.

С обвощенных ястыков предварительно удаляют слой воска.

2.4 Подготовка к анализу средней пробы концентратов, белковой массы, бульонов, гидролизатов и паст

2.4.1. Среднюю пробу концентрата рыбного белка помещают в чистую сухую банку вместимостью 500 см3, перемешивают и направляют на анализ без предварительной обработки.

2.4.2. 500 г белковой массы размораживают на воздухе до температуры 0 минус 2 °C, пропускают через мясорубку, тщательно перемешивают, квартуют и часть ее переносят в широкогорлую банку с плотно закрывающейся крышкой.

2.4.3. Среднюю пробу гидролизата и рыбного бульона помещают в стеклянную банку с притертой пробкой вместимостью 500 см3. Перед анализом содержимое банки тщательно перемешивают.

2.4.4. При подготовке средней пробы пасты содержимое вскрытых банок тщательно перемешивают и растирают в ступке до получения однородной массы.

2.5 Подготовка к анализу средней пробы жиров и жидких витаминных препаратов

2.5.1. Среднюю пробу исследуемого жира тщательно взбалтывают в течение 3 — 5 мин и делят на две части.

Одну часть фильтруют через бумажный складчатый фильтр (при температуре, указанной в стандарте на данный жир для определения прозрачности) и затем используют для определения цвета, плотности, кислотного числа, йодного числа, числа омыления, неомыляемых веществ и др.

Нефильтрованную часть средней пробы используют для определения прозрачности, содержания воды и примесей нежирового характера.

2.5.2. Среднюю пробу жидких витаминных препаратов фильтруют при температуре, указанной в стандарте для определения прозрачности, и направляют на анализ.

2.6 Подготовка к анализу средней пробы кормовой муки из рыбы, морских млекопитающих и ракообразных

2.6.1. Поступившую в лабораторию среднюю пробу муки в количестве 500 г делят методом квантования на две части.

Одну часть просеивают через металлическое сито со стороной отверстий 1 мм. Не прошедшую через сито муку растирают в фарфоровой ступке или на лабораторной мельнице и снова просеивают. Растирание и просеивание продолжают до тех пор, пока вся мука не будет просеяна через сито. Просеянную муку тщательно перемешивают и помещают в банку с притертой пробкой. Непросеянную часть муки оставляют для определения крупности помола, наличия песка, частиц железа (металлических примесей) и обнаружения примеси стекла.

2.7 Подготовка к анализу средней пробы рыбного клея

2.7.1. Среднюю пробу жидкого технического клея, поступившую в лабораторию, хранят в широкогорлой банке вместимостью 500 см3 с притертой пробкой; перед анализом содержимое банки тщательно перемешивают.

2.7.2. Среднюю пробу пищевого клея в количестве 0,3 кг предварительно нагревают на водяной бане при температуре 85 — 90 °C до полного расплавления клея, а затем после перемешивания отбирают часть его и помещают в чистую сухую широкогорлую банку.

2.7.3. При подготовке пробы для определения вязкости и стойкости клеевого раствора при хранении готовят 300 г раствора клея 18%-ной концентрации по товарно-сухому клею или 15%-ной концентрации по беззольному и безводному клею. Навеску клея (X) в граммах для приготовления раствора клея вычисляют по формуле

X = \frac{15 \cdot 300}{100 - (m_{1} + m)} ,

где 15 — массовая доля безводного и беззольного клея в растворе, %;

m — массовая доля золы в клее, %;

m1 — массовая доля воды в клее, %.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений.

Необходимое количество дистиллированной воды для приготовления раствора 15%-ной концентрации клея вычисляют по разности между 300 г и навеской клея. Навеску клея, взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,01 г, помещают в стакан, приливают необходимое количество дистиллированной воды (300 г — X) и, накрыв стакан часовым стеклом, нагревают при помешивании на водяной бане до полного растворения клея. Концентрацию клеевого раствора проверяют клеемером по ГОСТ 2067.

2.8 Подготовка к анализу средней пробы кормовых продуктов, консервированных пиросульфитом натрия и кислотами

2.8.1. Среднюю пробу растирают до однородной массы и тщательно перемешивают.

2.9 Подготовка к анализу средней пробы морских беспозвоночных и продуктов их переработки

2.9.1. Средние пробы водных беспозвоночных очищают от загрязнений и при наличии излишней воды обсушивают фильтровальной бумагой или марлей.

Разделку беспозвоночных для подготовки пробы проводят аккуратно и по возможности быстро во избежание подсыхания, а мороженых — во избежание потери дефростационной воды.

Съедобные части собирают в чистую сухую посуду (кюветы, противни) и немедленно измельчают мясорубкой. Фарш тщательно перемешивают и часть его в количестве 250 — 300 г переносят в широкогорлую склянку с пробкой.

А. Свежие и охлажденные беспозвоночные

2.9.2. Двустворчатые моллюски. Для раскрытия раковины тонкий нож или скальпель вводят между створками и разрезают мускул-замыкатель. Из открытой раковины, надрезав мантию в передней ее части, сливают межстворчатую жидкость. Для более полного удаления жидкости раковины можно ставить на 5 — 10 мин вертикально на сетке, замком вверх. После этого из раковины тщательно извлекают все мясо (тело моллюска). У черноморских мидий и устриц для пробы берут всю массу заключенного в раковине тела (без биссуса).

При разделке тихоокеанской мидии, гребешка и других крупных моллюсков для средней пробы берут только съедобные части (мускул-замыкатель, мантию и половые железы). Для этого тело моллюска дополнительно разделывают, отделяя несъедобные части (желудок, кишечник, жабры, и биссус). При наличии песка на поверхности съедобных частей последние тщательно очищают от него. Допускается быстрая промывка в проточной воде с последующей подсушкой поверхности фильтровальной бумагой.

Выделенное мясо дважды измельчают мясорубкой. Остаток из мясорубки тщательно измельчают ножницами и добавляют к фаршу.

2.9.3. Головоногие моллюски. При разделке целого кальмара острым ножом делают неглубокий разрез туловища от края мантии до основания плавника, стараясь не повредить мешочек с сепией. Отгибают стенки мантии и удаляют внутренности и хитиновую пластинку (раковину). Брюшную полость зачищают тупой стороной ножа. После этого разрезают голову, удаляют глаза и клюв.

У разделанного кальмара с мантии и конечностей снимают вручную с тонкого края предварительно надрезанную наружную пленку с присосками. Мясо измельчают в мясорубке.

При разделке осьминога удаляют внутренности, пищевод, ротовой аппарат, глаза и кожу вместе с присосками. Для этого осьминога кладут на спину и делают разрез вдоль головы-туловища от клюва до конца брюшной полости. Через разрез удаляют внутренности. Операцию проводят осторожно, чтобы не раздавить мешочек с сепией; удаляют глаза, клюв, выворачивают разделанного осьминога наизнанку и тщательно зачищают от остатков внутренностей, песка и крови. С туловища и конечностей снимают кожу вместе с присосками, после чего измельчают мясорубкой.

2.9.4. Ракообразные. При разделке ракообразных берут: у краба — мясо клешненосных и ходильных конечностей, у креветок и лангустов — мясо абдомена (шейки), у омаров и раков — мясо клешней и абдомена (шейки).

Отделение конечностей у крабов, клешней и абдомена у омаров, абдомена у креветок и лангустов проводят как при промысловой разделке. С ходильных конечностей краба осторожно, не нарушая кожистой пленки, прикрывающей мясо плечевого сустава, срезают жабры.

Отделенные часта ракообразных очищают от остатков внутренностей; при необходимости панцирное покрытие осушают фильтровальной бумагой, после чего отделенные части помещают в чистые сухие кюветы или противни, на которых проводят дальнейшую разделку во избежание потерь студнеобразного мяса.

У краба перерезают перегородки, соединяющие конечности. Ножницами разрезают конечности на части (поперек) вблизи кожистых суставов, одновременно разрезая хитиновую пластинку, прикрепленную к суставу. Панцирные трубки разрезают вдоль и тщательно (шпателем или ложкой) извлекают мясо вместе с пигментной пленкой. Клешню разбивают резким и сильным ударом деревянного молотка, укладывая ее на чистую сухую поверхность выпуклой стороной кверху.

Пинцетом из мяса тщательно удаляют остатки кусочков панциря и хитиновые пластинки.

Для выделения мяса из абдомена (у креветок, раков и лангустов) ножницами разрезают панцирь от верхнего края шейки до тельсона, после чего аккуратно извлекают мясо вместе с пигментной пленкой.

Выделенное мясо ракообразных, полностью очищенное от панциря и хитиновых пластинок, измельчают мясорубкой.

2.9.5. Иглокожие. При разделке голотурий (трепанг, кукумария) берут оболочку с венчиком щупальцев. Тело голотурий разрезают по брюшку и спинке через анальное отверстие. Перед разделкой предварительно выпускают полостную жидкость, сделав прокол острием ножа в оболочке. Через разрез удаляют внутренности и тщательно зачищают брюшную полость от остатков внутренностей и песка. Очищенные оболочки измельчают. Для лучшего измельчения оболочки голотурий предварительно замораживают, помещая их в морозильную камеру бытового холодильника, после чего быстро пропускают через охлажденную там же мясорубку.

При отсутствии условий для замораживания оболочки разрезают на кусочки и постепенно пропускают через мясорубку. Остаток в мясорубке тщательно измельчают ножницами в узком небольшом стаканчике и добавляют к основной массе, после чего тщательно растирают в фарфоровой ступке.

При разделке морских ежей берут икру, которая расположена внутри известковой скорлупы в виде пяти желез желто-оранжевой окраски.

Для извлечения икры скорлупу ежей раскалывают при помощи ножа или щипцов на две части и ястыки осторожно извлекают из панциря деревянной лопаточкой. Можно предварительно встряхнуть расколотые половинки скорлупы для удаления основной части внутренностей, после чего лопаточкой извлечь икру. Выделенную икру тщательно растирают в фарфоровой ступке.

Б. Сыро-мороженые и варено-мороженые беспозвоночные

2.9.6. Во избежание потери воды мороженых беспозвоночных размораживают при комнатной температуре, до температуры в толще тела (блока) от 0 — минус 1 °C.

Для размораживания беспозвоночных кладут в чистые кюветы, противни и накрывают сверху влажной тканью или бумагой во избежание подсыхания.

Жидкость, образующуюся в результате таяния ледяной глазури или налета снега, удаляют, а поверхность обсушивают фильтровальной бумагой.

Образцы беспозвоночных, разделанные без замораживания, сразу измельчают мясорубкой. Неразделанные или частично разделанные образцы дополнительно разделывают способами, изложенными в разд. А, после чего дважды измельчают мясорубкой и растирают в фарфоровой ступке.

В. Сушеная продукция из беспозвоночных

2.9.7. Среднюю пробу сушеного кальмара, мидии, гребешка, мактры и мяса краба и креветок предварительно разрезают ножницами, после чего измельчают лабораторной мельницей (типа кофейной), или пропускают через мясорубку. Сушеное мясо краба и креветок можно измельчать в ступке.

Сушеных трепанга и кукумарию разрезают на кусочки острым ножом на сухой чистой доске, после чего измельчают мясорубкой. Если оболочки кукумарии или трепанга не могут быть разрезаны ножом, их сначала дробят в металлической ступке на куски, которые затем измельчают в однородный порошок в лабораторной мельнице.

Г. Подготовка к анализу средней пробы белковой пасты «Океан»

2.9.8. Среднюю пробу мороженой пасты «Океан» размораживают на воздухе при температуре не выше 20 °C до температуры в толще блока (куска, брикета) от 0 до минус 1 °C.

Для размораживания пасту укладывают в чистые кюветы, противни и накрывают сверху влажной тканью или бумагой во избежание подсыхания.

Размороженную пасту дважды пропускают через мясорубку и растирают в фарфоровой ступке.

2.10 Подготовка к анализу средней пробы натуральной амбры

2.10.1. Пробу хрупкой амбры растирают и фарфоровой ступке до порошкообразного состояния, а воскообразной — до мелкой крупки.

При невозможности измельчения воскообразной амбры в ступке ее режут ножом или ланцетом на мелкие, тонкие ломтики или кусочки размером 2 — 4 мм, которые затем тщательно перемешивают.

2.11 Подготовка к анализу средней пробы жемчужного пата и перламутрового препарата

2.11.1. Среднюю пробу тщательно перемешивают и часть ее массой от 150 до 200 г помещают в чистую сухую стеклянную банку с притертой пробкой.

2.12 Подготовка к анализу средней пробы кристаллического спермацета

2.12.1. Среднюю пробу спермацета расплавляют и после тщательного перемешивания часть ее в количестве от 150 до 200 г помещают в чистую сухую стеклянную банку с притертой пробкой.

3. МЕТОДЫ АНАЛИЗА РЫБЫ, МОРСКИХ МЛЕКОПИТАЮЩИХ И БЕСПОЗВОНОЧНЫХ (свежей, охлажденной, мороженой, соленой, пряной, маринованной, вяленой, сушеной и копченой рыбы, сырья морских млекопитающих, пищевого рыбного фарша, печени рыб)

3.1 Подготовка средней пробы к анализу — по п. 2.1.

3.2. Методы определения азота летучих оснований, аммиака и сероводорода

3.2.1 Определение азота летучих оснований титриметрическим методом

3.2.1.1 Сущность метода

Свободные и связанные летучие основания отгоняют с паром. Образующийся аммиак взаимодействует с серной кислотой. Избыток серной кислоты оттитровывают щелочью.

3.2.1.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709 <*>.

<*> В Российской Федерации действует ГОСТ Р 58144-2018 «Вода дистиллированная. Технические условия».

Часы механические по ГОСТ 10733.

Аппарат для отгонки вместимостью 0,7 — 1,0 дм3 (черт. 1).

Колба коническая или плоскодонная по ГОСТ 25336, вместимостью 500 см3.

Бюретка по ГОСТ 20292, вместимостью 25 или 50 см3 с делениями на 0,1 см3.

Электроплитка бытовая по ГОСТ 14919.

Капельница по ГОСТ 25336.

Кислота серная по ГОСТ 4204, раствор 0,05 моль/дм3 (0,1 н).

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, раствор 0,1 моль/дм3 (0,1 н).

Магния окись по ГОСТ 4526.

Парафин по ГОСТ 23683.

Метиловый красный по ГОСТ 5853, раствор 0,2 г/дм3 (0,02%-ный): растворяют 0,02 г метилового красного в 100 см3 спирта 600 г/дм3 (60%-ного).

3.2.1.3 Проведение анализа

Собирают аппарат (черт. 1), состоящий из отгонной колбы 4, каплеуловителя 3, парообразователя 2, холодильника 5, нагревательного элемента 1, приемника 6. Всю систему предварительно пропаривают в течение 10 — 15 мин.

3.2. Методы определения азота летучих оснований, аммиака и сероводорода

1 — нагревательный элемент; 2 — парообразователь; 3 — каплеуловитель; 4 — отгонная колба; 5 — холодильник; 6 — приемная колба

Черт. 1

Навеску исследуемого продукта массой от 9 до 10 г, взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,01 г, количественно переносят 250 см3 дистиллированной воды в отогнанную колбу 4, туда же добавляют 1 г окиси магния и, во избежание вспенивания, кусочек чистого парафина. Колбу закрывают пробкой с каплеуловителем 3, соединяют с холодильником 5 и парообразователем 2.

Подогревая колбу на слабом огне, пропускают в нее пар и проводят отгонку в течение 30 мин, считая с момента появления капли дистиллята в холодильнике. Дистиллят собирают в приемник 6, в который предварительно внесено 15 — 25 см3 0,05 моль/дм3 раствора серной кислоты. Конец трубки холодильника должен быть погружен в серную кислоту.

За 5 — 7 мин до окончания отгонки конец холодильника вынимают из раствора.

По окончании отгонки конец трубки холодильника обмывают водой в приемную колбу и избыток кислоты в ней оттитровывают раствором гидроокиси натрия 0,1 моль/дм3 в присутствии 5 капель метилового красного до перехода окраски от розовой до слабожелтой.

Параллельно с рабочим проводят контрольный анализ без навески исследуемого образца.

3.2.1.4 Обработка результатов

Массовую долю азота летучих оснований (X1) в % вычисляют по формуле

X_{1} = \frac{(V - V_{1}) \cdot 0,0014 \cdot K \cdot 100}{m} ,

где V — объем раствора 0,1 моль/дм3 гидроокиси натрия, израсходованный на титрование серной кислоты в контрольном анализе, см3;

V1 — объем раствора 0,1 моль/дм3 гидроокиси натрия, израсходованный на титрование серной кислоты в рабочем анализе, см3;

0,0014 — количество азота, эквивалентное 1 см3 раствора 0,1 моль/дм3 гидроокиси натрия, г;

K — коэффициент пересчета на точный раствор 0,1 моль/дм3 гидроокиси натрия;

m — масса исследуемого образца, г.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, допускаемые расхождения между которыми не должны превышать 0,001%.

Вычисления проводят до третьего десятичного знака.

3.2.1а Определение массовой доли общего азота летучих оснований титриметрическим методом в диапазоне измерений от 10 до 50 мг/100 г

3.2.1а.1 Сущность метода

Метод основан на экстракции из пробы летучих азотистых оснований с помощью раствора хлорной кислоты, подщелачивании, отгонке (дистилляции) летучих азотистых оснований водяным паром в раствор борной кислоты с последующим титрованием раствором соляной кислоты, с потенциометрической или автоматической индикацией точки эквивалентности.

Метод применяют при разногласиях в оценке органолептических показателей непереработанной пищевой рыбной продукции животного происхождения.

3.2.1а.2 Средства измерений, оборудование, реактивы, материалы

Бюретки лабораторные стеклянные номинальной вместимостью 5 см3 и наименьшей ценой деления 0,01 см3 по ГОСТ 29251.

Весы неавтоматического действия специального или высокого класса точности с пределом допускаемой абсолютной погрешности не более +/- 0,01 г по ГОСТ OIML R 76-1 или весы лабораторные электронные 2 класса точности с наибольшим пределом взвешивания 300 г.

Колбы лабораторные стеклянные Кн-2-(250, 500)-29/32 ТХС по ГОСТ 25336.

Колбы мерные лабораторные стеклянные 2-(250, 500, 1000, 2000)-1 по ГОСТ 1770.

pH-метр лабораторный или блок автоматического титрования.

Стаканы лабораторные стеклянные В-1-(50, 100, 250, 500) ТХС по ГОСТ 25336.

Цилиндры мерные лабораторные стеклянные 2-(10, 50, 100, 1000)-1 по ГОСТ 1770.

Мясорубка механическая по ГОСТ 4025, или мясорубка электрическая по ГОСТ 20469, или гомогенизатор.

Система паровой дистилляции.

Аммоний хлористый по ГОСТ 3773, х.ч.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Кислота борная по ГОСТ 9656, х.ч.

Кислота соляная (плотность 1,19 г/см3) по ГОСТ 3118, х.ч.

Кислота соляная стандарт-титр с молярной концентрацией c(HCl) = 0,1 моль/дм3.

Кислота хлорная (плотность 1,66 г/см3), х.ч.

Метиленовый синий, х.ч.

Метиловый красный, х.ч.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, х.ч.

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962.

Фенолфталеин, х.ч.

Пеногаситель силиконовый.

Бумага фильтровальная лабораторная ФМ-III диаметром 110 мм по ГОСТ 12026.

Воронки лабораторные стеклянные В-25-38 ХС, В-36-80 ХС, В-100-150 ХС по ГОСТ 25336.

Пипетки градуированные 1-1-1-1; 1-1-1-2; 1-1-1-5; 1-1-1-10 по ГОСТ 29228.

Пробирки для минерализации вместимостью 250 см3.

Стаканчики лабораторные стеклянные СВ-14/8 по ГОСТ 25336.

Допускается применение других средств измерений и оборудования, не уступающих вышеуказанным по метрологическим и техническим характеристикам, а также реактивов и материалов по качеству не ниже указанных.

3.2.1а.3 Приготовление растворов

Приготовление раствора хлорной кислоты 6 г/100 см3

36,14 см3 хлорной кислоты плотностью 1,66 г/см3 растворяют в 200 — 300 см3 дистиллированной воды, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3, доводят объем дистиллированной водой до метки и перемешивают.

Раствор хранят не более 1 мес при температуре (20 +/- 5) °C.

Приготовление раствора гидроокиси натрия 20 г/100 см3

100 г гидроокиси натрия растворяют в 200 — 300 см3 дистиллированной воды, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 500 см3, доводят объем дистиллированной водой до метки и перемешивают.

Раствор хранят не более 14 сут при температуре (20 +/- 5) °C.

Приготовление раствора соляной кислоты молярной концентрации 0,01 моль/дм3

0,835 см3 соляной кислоты плотностью 1,19 г/см3 переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3, доводят объем в колбе дистиллированной водой до отметки и перемешивают. Работу проводят в вытяжном шкафу.

Раствор хранят не более 3 мес при температуре (20 +/- 5) °C.

Приготовление раствора соляной кислоты молярной концентрации 0,01 моль/дм3 из стандарт-титра соляной кислоты молярной концентрации c(HCl) = 0,1 моль/дм3 (0,1 Н)

Содержимое одной ампулы стандарт-титра соляной кислоты вносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3, доводят дистиллированной водой объем до метки и перемешивают. Получают основной раствор соляной кислоты концентрацией 0,1 моль/дм3. Из него готовят рабочий раствор соляной кислоты молярной концентрации 0,01 моль/дм3.

100 см3 основного раствора соляной кислоты концентрации 0,1 моль/дм3 доводят до метки дистиллированной водой в мерной колбе вместимостью 1000 см3.

Раствор хранят не более 3 мес при температуре (20 +/- 5) °C.

Приготовление раствора соляной кислоты молярной концентрации 0,05 моль/дм3 из стандарт-титра

Содержимое одной ампулы стандарт-титра соляной кислоты молярной концентрации c(HCl) = 0,1 моль/дм3 (0,1 Н) вносят в мерную колбу вместимостью 2000 см3, доводят дистиллированной водой до метки и перемешивают.

Раствор хранят не более 1 мес при температуре (20 +/- 5) °C.

Определение точной молярной концентрации соляной кислоты проводят в соответствии с требованиями ГОСТ 25794.1 не реже одного раза в месяц.

Приготовление раствора борной кислоты 3 г/100 см3

30 г борной кислоты растворяют в 200 — 300 см3 дистиллированной воды, количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3, доводят объем дистиллированной водой до метки и перемешивают.

Раствор хранят не более 14 сут при температуре (20 +/- 5) °C.

Приготовление раствора индикатора фенолфталеина 1 г/100 см3

1,0 г фенолфталеина растворяют в 100 см3 этилового спирта.

Раствор хранят не более 6 мес при температуре (20 +/- 5) °C.

Приготовление раствора индикатора Таширо

0,2 г метилового красного и 0,1 г метиленового синего растворяют в 100 см3 этилового спирта.

Раствор хранят в емкости из темного стекла не более 10 сут при температуре (20 +/- 5) °C.

3.2.1а.4 Проверка правильности работы оборудования

При получении сомнительных результатов (слишком низких или с большими расхождениями между параллельными определениями) проводят проверку системы паровой дистилляции.

Для проверки системы паровой дистилляции в отгонную колбу вместо экстракта помещают 0,05 г аммония хлористого и проводят процедуру паровой дистилляции.

Используют аммоний хлористый (NH4)Cl с чистотой не менее 99,5%. Его молекулярная масса равна 53,491 г/моль. Процентное содержание азота в аммонии хлористом (чистотой 99,5%) составляет 26,04%.

Получение результата содержания азота в аммонии хлористом ниже 26,04% может указывать на неполную перегонку или нарушение герметичности системы паровой дистилляции.

3.2.1а.5 Проведение анализа

Анализ необходимо проводить в лаборатории, свободной от паров аммиака, в соответствии с ГОСТ 12.1.005.

Навеску измельченной средней пробы массой (10 +/- 0,1) г смешивают с 90,0 см3 раствора хлорной кислоты (концентрацией 6 г/100 см3) в гомогенизаторе в течение 2 мин. Затем смесь фильтруют. Полученный экстракт допускается хранить в холодильнике при температуре от 2 °C до 6 °C не более 7 сут в воздухонепроницаемой колбе (банке) с закрытой крышкой.

В отгонную колбу помещают 50,0 см3 экстракта и добавляют 3 — 5 капель раствора индикатора фенолфталеина (концентрацией 1 г/100 см3) для последующей проверки подщелачивания экстракта. Для предотвращения вспенивания в экстракт допускается добавить несколько капель силиконового пеногасителя. Непосредственно перед началом паровой дистилляции в отгонную колбу наливают 6,5 см3 раствора гидроокиси натрия (концентрацией 20 г/100 см3).

В приемную коническую колбу вместимостью не менее 250 см3 наливают 100 см3 раствора борной кислоты (концентрацией 3 г/100 см3) и 3 — 5 капель раствора индикатора Таширо. Колбу располагают таким образом, чтобы нижний конец трубки дистиллятора был полностью погружен в раствор борной кислоты.

При применении блока автоматического титрования в качестве приемника используют колбу вместимостью 500 см3, которую по окончании дистилляции помещают в титратор.

Перед осуществлением процесса паровой дистилляции необходимо прогреть систему в течение 5 мин при максимальном уровне подачи пара.

Систему паровой дистилляции настраивают таким образом, чтобы за 10 мин производилось около 100 см3 дистиллята. Через 10 мин дистилляции трубку дистилляционного аппарата удаляют из приемной колбы и промывают водой.

Содержимое приемной колбы титруют раствором соляной кислоты молярной концентрации 0,05 моль/дм3. Уровень pH конечной точки должен составлять (5,0 +/- 0,1).

При применении блока автоматического титрования проводится титрование с использованием стандартного раствора соляной кислоты молярной концентрации 0,01 моль/дм3.

Полученные результаты титрования используют для вычисления массовой доли общего азота летучих оснований.

Контрольный (холостой) анализ проводят, используя вместо экстракта 50,0 см3 раствора хлорной кислоты.

3.2.1а.6 Обработка результатов

Массовую долю общего азота летучих оснований X (мг/100 г пробы), вычисляют по формуле

X = \frac{(V_{1} - V_{0}) \cdot c \cdot 14 \cdot 100 \cdot 2}{m} , (1)

где V1 — объем 0,05 моль/дм3 (0,01 моль/дм3 при автоматическом титровании) раствора соляной кислоты, израсходованный на титрование исследуемой пробы, см3;

V0 — объем 0,05 моль/дм3 (0,01 моль/дм3 при автоматическом титровании) раствора соляной кислоты, израсходованный на титрование контрольной пробы, см3;

c — точная молярная концентрация раствора соляной кислоты, моль/дм3;

14 — масса азота, эквивалентная 1 см3 раствора соляной кислоты молярной концентрации 1 моль/дм3, мг;

m — масса пробы, г;

2 — фактор пересчета количества экстракта, взятого для измерения, на общий объем экстракта.

Вычисление проводят до третьего десятичного знака. За окончательный результат принимают среднеарифметическое значение результатов двух параллельных измерений, округленное до второго десятичного знака, если удовлетворяются условия повторяемости.

3.2.1а.7 Метрологические характеристики

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 1а, для соответствующих диапазонов концентраций.

Таблица 1а

Анализируемый рыбный объект	Диапазон определяемых концентраций, массовая доля АЛО, мг/100 г	Показатель точности (границы относительной погрешности, P = 0,95) \delta , %	Показатель повторяемости (среднеквадратичное отклонение повторяемости) \sigma_{r} , %	Показатель воспроизводимости (среднеквадратичное отклонение воспроизводимости) \sigma_{R} , %	Предел повторяемости (значение допустимого расхождения между двумя результатами параллельных определений) r, %	Предел воспроизводимости (значение допустимого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в разных лабораториях) R, % (P = 0,95)
Виды семейства Scorpaenidae (скорпеновые)	10 — 40	5	1,1	1,6	3	4
Виды семейства Pleuronectidae (камбаловые), за исключением вида Hippoglossus spp. (палтус)	15 — 40	7	1,5	2,1	4	6
Другие виды [семейства Salmo salar (атлантический лосось), Merlucciidae, Gadidae]	10 — 50	10	3,1	4,3	9	12

3.2.1а.8 Контроль точности результатов

Проверку приемлемости результатов измерений, полученных в условиях повторяемости, осуществляют в соответствии с требованиями нормативных документов, действующих на территории государства, принявшего стандарт. Расхождение между результатами измерений не должно превышать предела повторяемости (r). Значение r приведено в п. 3.2.1а.7, таблица 1а.

\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq r, (2)

где X₁, X₂ - результаты измерений, выполненных в условиях повторяемости;

r — предел повторяемости.

Проверку приемлемости результатов измерений, полученных в условиях воспроизводимости, проводят с учетом требований нормативных документов, действующих на территории государства, принявшего стандарт. Расхождение между результатами измерений, полученными двумя лабораториями, не должно превышать предела воспроизводимости (R). Значение R приведено в п. 3.2.1а.7, таблица 1а.

Процедуру контроля стабильности показателей качества, результатов анализа (повторяемости, промежуточной прецизионности и погрешности) проводят в соответствии с порядком, установленным в лаборатории, по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

3.2.1а.9 Оформление результатов

Результат анализа, выраженный в мг/100 г, при доверительной вероятности P = 0,95 представляют в виде

(\overline{X} \pm \Delta), (3)

где \overline{X} — среднеарифметическое значение результатов определений, признанных приемлемыми, мг/100 г;

\Delta — граница абсолютной погрешности, мг/100 г.

\Delta = \frac{\delta \cdot X}{100} , (4)

где \delta — граница относительной погрешности методики [показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций (п. 3.2.1а.7, таблица 1а)], %.

3.2.2 Определение азота летучих оснований колориметрическим методом (с реактивом Несслера)

3.2.2.1 Сущность метода

Свободные и связанные летучие основания отгоняют с паром. Аммиак определяют после обработки дистиллята реактивом Несслера.

3.2.2.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Фотоэлектроколориметр или спектрофотометр с пределами измерения оптической плотности от 0 до 1,3 по ГОСТ 12083.

Аппарат для встряхивания.

Аппарат для отгонки.

Цилиндр мерный с пришлифованной пробкой по ГОСТ 1770, вместимостью 200 см3 или коническая колба по ГОСТ 25336, вместимостью 250 — 300 см3.

Пробирка по ГОСТ 25336, диаметром 20 — 30 мм.

Воронка химическая по ГОСТ 25336, диаметром 60 — 80 мм.

Колбы мерные по ГОСТ 1770, вместимостью 50, 500 и 1000 см3.

Пипетки по ГОСТ 20292, вместимостью 1, 2, 5, 10 и 25 см3.

Бюретка по ГОСТ 20292, вместимостью 25 см3 с делениями на 0,1 см3.

Аммоний хлористый по ГОСТ 3773.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, раствор 100 г/дм3 (10%-ный).

Кислота серная по ГОСТ 4204, раствор 0,05 моль/дм3 (0,1 н).

Калий-натрий виннокислый 4-водный (сегнетова соль) по ГОСТ 5845, раствор 500 г/дм3 (50%-ный).

Магния окись по ГОСТ 4526, водная суспензия 50 г/дм3 (5%-ная) — магнезиальное молоко.

Йод по ГОСТ 4159.

Калий йодистый по ГОСТ 4232.

Ртуть по ГОСТ 4658.

Вода дистиллированная, безаммиачная, приготовленная по ГОСТ 4517.

3.2.2.3 Подготовка к анализу

Приготовление реактива Несслера

22,5 г йода растворяют в 20 см3 воды, содержащей 30 г йодистого калия. К раствору йода прибавляют 30 г металлической ртути и сильно встряхивают до исчезновения окраски от йода. Если после этого раствор не будет давать с крахмалом реакцию на йод, к нему прибавляют по каплям раствор йода в йодистом калии до положительной реакции. После этого раствор разбавляют водой до 200 см3, перемешивают и прибавляют к нему 375 см3 раствора гидроокиси натрия 100 г/дм3 (10%-ного); дают раствору отстояться и сливают сифоном в склянку оранжевого стекла.

Реактив хранят в темноте.

Приготовление раствора хлористого аммония

1,9095 г дважды перекристаллизованного и высушенного при комнатной температуре до постоянной массы хлористого аммония растворяют в мерной колбе вместимостью 1 дм3 (основной раствор). Этот раствор, содержащий 0,5 мг азота в 1 см3, может сохраняться в течение нескольких месяцев в темном прохладном месте. Перед началом работы 5 см3 основного раствора отбирают пипеткой в мерную колбу вместимостью 500 см3 и доводят объем дистиллированной водой до метки (рабочий раствор). Этот раствор содержит 0,005 мг азота в 1 см3.

Магнезиальное молоко

5 г окиси магния, отвешенных с абсолютной погрешностью не более 0,01 г, помещают в фарфоровую ступку и, отмерив цилиндром 95 см3 дистиллированной воды, приливают ее небольшими порциями, тщательно растирая густую массу пестиком. Гомогенизированную массу переносят остатком воды через воронку в склянку или колбу с пришлифованной пробкой. Взвесь перед использованием тщательно взбалтывают и, не давая осесть осадку, отбирают пипеткой с широким отверстием.

3.2.2.4 Проведение анализа

От 9 до 10 г исследуемого продукта, взвешенных с абсолютной погрешностью не более 0,01 г, переносят в мерный цилиндр с пришлифованной пробкой вместимостью 200 см3 или колбу вместимостью 250 — 300 см3, заливают дистиллированной водой до объема 100 см3 (при применении колбы приливают 90 см3 воды) и встряхивают на аппарате в течение 10 мин со скоростью 40 — 50 качаний в минуту.

Примечание. Встряхивание можно заменить настаиванием в течение 20 мин при периодическом взбалтывании.

Взвесь фильтруют через марлю, уложенную на воронку диаметром 60 — 80 мм.

Отгонку летучих оснований проводят в аппарате, аналогичном приведенному в пп. 3.2.1.3 (черт. 1), но меньшей вместимости (100 см3).

Предварительно парообразователь доводят до кипения и собранный аппарат пропаривают в течение 5 — 10 мин.

В дистилляционную колбу вносят 5 см3 профильтрованной вытяжки, добавляют 2 см3 магнезиального молока 50 г/дм3 и проводят отгонку с паром в течение 10 мин, считая с момента появления капли дистиллята в холодильнике. Дистиллят собирают в приемник (широкая пробирка). Предварительно в приемник вносят 1 — 2 см3 раствора 0,05 моль/дм3 серной кислоты, в которую опускают конец трубки холодильника. По окончании отгонки последний обмывают водой в приемную пробирку.

Дистиллят переносят в мерную колбу вместимостью 50 см3, смывают приемную пробирку и разбавляют дистиллированной водой до 3/4 объема колбы. Одновременно в три мерные колбы вместимостью 50 см3 отбирают 5, 10 и 25 см3 рабочего стандартного раствора хлористого аммония и добавляют безаммиачной воды до 3/4 их объема.

Во все колбы добавляют по 1 см3 раствора сегнетовой соли 500 г/дм3, взбалтывают, добавляют по 2 см3 реактива Несслера, доводят объемы до метки безаммиачной водой и перемешивают взбалтыванием.

Растворы оставляют в покое на 10 — 15 мин, после чего определяют оптическую плотность фотоэлектроколориметром при длине волны 400 нм в кюветах с рабочей длиной 10 мм по отношению к контрольному раствору.

Количество азота, соответствующее определенной оптической плотности, рассчитывают по градуировочному графику.

3.2.2.5 Построение градуировочного графика

Готовят ряд разведений раствора хлористого аммония с известной концентрацией. Для этого в мерные колбы вместимостью 50 см3 из бюретки последовательно вносят указанные в табл. 1 количества рабочего раствора хлористого аммония и доводят объем дистиллированной водой до метки.

Таблица 1

Номер колбы	Количество рабочего раствора хлористого аммония, см3	Количество азота в колбе, г
1	10	0,000050
2	15	0,000075
3	20	0,000100
4	25	0,000125
5	30	0,000150
6	35	0,000175
7	40	0,000200
8	45	0,000225

Оптическую плотность растворов определяют при длине волны 400 нм в кюветах с рабочей длиной 10 мм.

По полученным данным строят градуировочный график, откладывая на оси абсцисс содержание азота (г в 50 см3), на оси ординат — соответствующую оптическую плотность.

3.2.2.6 Обработка результатов

Содержание азота летучих оснований (X2) в % вычисляют по формуле

X_{2} = \frac{m_{1} \cdot V \cdot 100}{m \cdot V_{1}} ,

где m — масса образца, взятая для приготовления вытяжки, г;

m₁ - массовая доля азота, найденная по градуировочному графику, г;

V — объем смеси, полученный при приготовлении вытяжки из навески, см3;

V₁ - объем профильтрованной вытяжки, взятый для отгонки летучих оснований, см3.

3.2.3 Определение аммиака (качественная реакция)

3.2.3.1 Сущность метода

Метод основан на взаимодействии аммиака, образующегося при порче рыбы, с соляной кислотой и появлении при этом облачка хлористого аммония.

3.2.3.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Пробирка химическая по ГОСТ 25336, диаметром не менее 20 мм.

Кислота соляная по ГОСТ 3118, раствор 250 г/дм3 (25%-ный).

Спирт этиловый питьевой по ГОСТ 5963, раствор 950 г/дм3 (95%-ный).

Эфир медицинский по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

3.2.3.3 Подготовка к анализу

Приготовление реактива Эбера

Смешивают одну часть соляной кислоты 250 г/дм3 (плотность 1120 кг/м3), три части этилового спирта 950 г/дм3 и одну часть серного эфира.

3.2.3.4 Проведение анализа

В широкую пробирку наливают 2 — 3 см3 смеси Эбера, закрывают ее пробкой и встряхивают 2 — 3 раза.

Вынимают пробку из пробирки и сразу же закрывают ее другой пробкой, через которую продета тонкая стеклянная палочка с загнутым концом. На конец палочки должен быть прикреплен кусочек исследуемого мяса рыбы. Исследуемый объект должен иметь температуру, наиболее близкую к температуре воздуха лаборатории в момент проведения анализа. Мясо вводят в пробирку так, чтобы не запачкать стенок пробирки и чтобы оно находилось на расстоянии 1 — 2 см от уровня жидкости.

3.2.3.5 Обработка результатов

Через несколько секунд в результате реакции аммиака с соляной кислотой образуется облачко хлористого аммония.

Интенсивность реакции обозначается следующим образом:

реакция отрицательная;

+ реакция слабоположительная (быстро исчезающее расплывчатое облачко);

++ реакция положительная (устойчивое облачко, появляющееся через несколько секунд после внесения мяса в пробирку с реактивом);

+++ реакция резко положительная (облачко появляется сразу после внесения мяса в пробирку с реактивом).

3.2.4 Определение сероводорода (качественная реакция)

3.2.4.1 Сущность метода

Метод основан на взаимодействии сероводорода, образующегося при порче рыбы, со свинцовой солью с появлением темного окрашивания вследствие образования сернистого свинца.

3.2.4.2 Аппаратура, реактивы и материалы

Бюксы по ГОСТ 25336, вместимостью 40 — 50 см3.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, раствор 330 г/дм3 (33%-ный).

Свинец уксуснокислый по ГОСТ 1027, раствор 40 г/дм3 (4%-ный).

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

Весы лабораторные технические класса 1 с пределами измерений от 0 до 1000 г.

3.2.4.3 Подготовка к анализу

Приготовление раствора свинцовой соли

К раствору уксуснокислого свинца 40 г/дм3 добавляют раствор гидроокиси натрия 300 г/дм3 до растворения образующегося вначале осадка гидрата окиси свинца (необходимо избегать большого избытка щелочи). Полученный раствор фильтруют через бумажный фильтр.

3.2.4.4 Проведение анализа

15 — 25 г исследуемого фарша помещают рыхлым слоем в бюксу вместимостью 40 — 50 см3. В бюксу подвешивают горизонтально над фаршем полоску плотной фильтровальной бумаги, на поверхность которой, обращенной к фаршу, нанесены 3 — 4 капли раствора свинцовой соли. Диаметр капли 2 — 3 мм. Расстояние между бумагой и поверхностью фарша должно быть 1 см.

Бюксу закрывают сверху крышкой, зажимая фильтровальную бумагу между крышкой и корпусом бюксы, и оставляют стоять при комнатной температуре.

Параллельно проводят контрольный анализ без навески продукта.

По истечении 15 мин бумагу снимают и сравнивают ее окраску с окраской бумага, смоченной тем же раствором свинцовой соли (контрольный анализ).

При наличии в исследуемом образце свободного сероводорода происходит побурение или почернение участков бумаги, смоченных раствором свинцовой соли.

Интенсивность реакции обозначают следующим образом:

реакция отрицательная;

+/- следы окрашивания капли;

+ реакция слабоположительная (бурое окрашивание по краям капли);

++ реакция положительная (бурое окрашивание всей капли, более интенсивное по краям);

+++ реакция резко положительная (интенсивное темно-бурое окрашивание всей капли).

3.3. Методы определения воды

3.3.1 Определение массовой доли воды высушиванием при 100 — 105 °C

3.3.1.1 Сущность метода

Метод основан на выделении (испарении) воды из продукта при тепловой обработке и определении изменения массы его взвешиванием.

Метод применяется для анализа рыбы, морских млекопитающих, морских беспозвоночных и продуктов их переработки.

3.3.1.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Шкаф сушильный лабораторный по ГОСТ 13474.

Эксикатор по ГОСТ 25336.

Термометр ртутный стеклянный лабораторный с пределами измерений от 0 до 200 °C по ГОСТ 215.

Стаканчики для взвешивания (бюксы) стеклянные по ГОСТ 25336 или металлические.

Песок силикатный речной или морской очищенный и прокаленный.

3.3.1.3 Проведение анализа

Навеску анализируемой пробы от 1,5 до 2 г (3 — 4 г для паюсной икры), взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,001 г, помещают в чистую высушенную и тарированную бюксу со стеклянной палочкой, при помощи которой распределяют навеску продукта в бюксе ровным тонким слоем. Навеска исследуемого продукта может быть увеличена до 5 г при использовании ее после высушивания для определения содержания жира. Бюксу закрывают притертой крышкой, взвешивают на аналитических весах и высушивают в сушильном шкафу при 100 — 105 °C до постоянной массы.

Навески продуктов, за исключением сушеных, вяленых и обработанных холодным копчением, первые 2 ч сушат при 60 — 80 °C. Навески продуктов с массовой долей жира более 20% необходимо первые 2 ч сушить при температуре 60 — 65 °C, а с массовой долей жира более 40% (печень тресковых рыб и т.д.) — 2 ч при 60 — 65 °C в токе инертного газа.

Первое взвешивание проводят через 3 ч после начала сушки, последующие — через 30 — 40 мин.

Постоянная масса считается достигнутой, если разница между двумя взвешиваниями не превышает 0,001 г.

Перед каждым взвешиванием бюксу с пробой закрывают крышкой и охлаждают 30 мин в эксикаторе.

Для рыбы и других продуктов, способных при высушивании спекаться в плотную массу, в бюксу предварительно вносят 5 — 10 г песка и навеску продукта тщательно перемешивают. Кварцевый песок предварительно очищают следующим образом: промывают водопроводной чистой водой, заливают раствором соляной кислоты (1:1) на сутки, тщательно промывают водопроводной, а затем дистиллированной водой до исчезновения кислой реакции на лакмус, высушивают, прокаливают и просеивают.

Очистку песка описанным выше способом проводят во всех случаях, где требуется использование песка.

3.3.1.4 Обработка результатов

Массовую долю воды (X3) в процентах вычисляют по формуле

X_{3} = \frac{(m_{1} - m_{2}) \cdot 100}{m_{1} - m} ,

где m — масса бюксы с песком, г;

m₁ - масса бюксы с навеской и песком до высушивания, г;

m₂ - масса бюксы с навеской и песком после высушивания, г.

Вычисление проводят до первого десятичного знака.

3.3.2. Определение массовой доли воды высушиванием при 130 °C (рыба соленая, вяленая, сушеная, холодного копчения, мука)

3.3.2.1 Сущность метода — по п. 3.3.1.1.

3.3.2.2 Аппаратура, материалы и реактивы — по п. 3.3.1.2.

3.3.2.3 Проведение анализа

Навеску рыбы подсушивают в течение 30 мин при 60 — 80 °C, затем окончательно высушивают в течение 1 ч при температуре 130 °C. Навеску жирных видов рыб берут с песком.

По истечении указанного времени бюксу вынимают, охлаждают 30 мин в эксикаторе и взвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,001 г.

3.3.2.4 Обработка результатов — по п. 3.3.1.4.

3.3.3 Определение массовой доли воды отгонкой в жирах и витаминных препаратах

3.3.3.1 Сущность метода

Метод основан на выделении воды из продукта отгонкой с парами растворителя жира и определении ее объема.

3.3.3.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Аппарат количественного определения воды АКОВ (типа Дина и Старка) по ГОСТ 1594 (черт. 2).

3.3. Методы определения воды

1 — отгонная колба; 2 — приемник; 3 — холодильник

Черт. 2

Штатив с кольцом и зажимом.

Цилиндр по ГОСТ 1770, вместимостью 100 см3, с делениями на 1 см3.

Баня песочная.

Стеклянная палочка диаметром 3 — 4 мм с резиновым наконечником или медная проволочка, согнутая полукольцом.

Толуол по ГОСТ 5789, или ксилол каменноугольный по ГОСТ 9949, или бензин по ГОСТ 443.

3.3.3.3 Проведение анализа

В стеклянную колбу 1 аппарата отвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,1 г 10 — 15 г тщательно измельченного продукта или 50 — 200 г жира (в зависимости от предполагаемого содержания воды) с таким расчетом, чтобы отогнанная вода составляла не более 10 см3, т.е. не более вместимости приемника-ловушки 2, приливают 80 — 100 см3 одного из перечисленных растворителей и тщательно перемешивают содержимое колбы. В колбу помещают несколько кусочков неглазурованного фаянса, пемзы или фарфора и с помощью шлифа присоединяют ее к отводной трубке приемника, соединенного с холодильником 3.

Колбу нагревают, доводя содержимое до интенсивного кипения, и поддерживают его до окончания анализа.

Если на стенках холодильника или приемника остаются капли воды, их осторожно сталкивают со стенки в нижнюю часть приемника стеклянной палочкой с резиновым наконечником или медной проволокой.

Отгонку прекращают, когда объем воды в приемнике перестает увеличиваться и верхний слой растворителя в ловушке-приемнике станет совершенно прозрачным.

Содержимое колбы охлаждают до комнатной температуры и проводят отсчет объема воды в приемнике.

3.3.3.4 Обработка результатов

Массовую долю воды (X4) в процентах вычисляют по формуле

X_{4} = \frac{m_{1} \cdot 100}{m} ,

где m — масса пробы, г;

m₁ - масса воды в приемнике, г (1 см3 воды принимают равным 1 г).

Вычисление проводят до первого десятичного знака.

3.3.4 Определение массовой доли воды высушиванием на приборе ВЧМ (прибор Чижовой)

3.3.4.1 Сущность метода

Метод основан на выделении воды из продукта при нагревании инфракрасными лучами и определении изменения его массы взвешиванием.

Метод применяют для определения воды в вяленой рыбе и рыбе холодного копчения.

3.3.4.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Прибор ВЧМ Чижовой (черт. 3).

Автотрансформатор (типа ЛАТР-1).

Эксикатор по ГОСТ 25336.

3.3. Методы определения воды

1 — шарниры; 2 — металлические плиты; 3 — ручка; 4 — термометры

Черт. 3

Термометр ртутный стеклянный лабораторный с пределами измерений от 0 до 200 °C по ГОСТ 215.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

3.3.4.3 Подготовка к анализу

Прибор Чижовой нагревают до температуры обезвоживания исследуемого продукта (125 — 180 °C) в соответствии с установленным режимом.

Для изготовления бумажных пакетов лист бумаги размером 15 x 15 см складывают по диагонали пополам и края загибают в одну сторону на 1 см. При определении воды в жирных пробах (сельдь и др.) в бумажный пакет помещают дополнительно лист фильтровальной бумаги.

Заготовительные пакеты просушивают 1 — 3,5 мин между нагретыми плитами прибора при температуре, при которой будет высушиваться навеска, и переносят на 5 мин в эксикатор для охлаждения. После этого пакеты взвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,01 г.

3.3.4.4 Проведение анализа

Навеску анализируемой пробы 2 — 3 г, взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,01 г, помещают в предварительно высушенный и взвешенный пакет и распределяют ее шпателем равномерным тонким слоем по внутренней поверхности пакета. Шпатель вытирают о внутреннюю сторону пакета. Пакет с навеской складывают, помещают в прибор между плитами и выдерживают 1 — 3,5 мин в соответствии с режимом обезвоживания, указанным в табл. 2.

Таблица 2

Наименование продукта	Масса анализируемой пробы, г	Температура высушивания, °C	Продолжительность высушивания, мин
Рыба вяленая и холодного копчения	2	135	3,0
То же	3	145	3,5
«»	3	155	3,0
«»	3	180	1,0

3.3.4.5 Обработка результатов

Массовую долю воды (X5) в процентах вычисляют по формуле

X_{5} = \frac{(m_{1} - m_{2}) \cdot 100}{m_{1} - m} ,

где m — масса пакета, г;

m1 — масса пакета с навеской до обезвоживания, г;

m2 — масса пакета с навеской после обезвоживания, г.

Вычисление проводят до первого десятичного знака.

3.4. Методы определения белковых веществ

3.4.1. Определение массовой доли белковых веществ макрометодом — по п. 8.9.1.

3.4.2. Определение массовой доли белковых веществ макрометодом с селеновой смесью — по п. 8.9.2.

3.4.3. Определение массовой доли белковых веществ макрометодом с перекисью водорода без отгонки — по п. 8.9.3.

3.4.4. Определение массовой доли белковых веществ полумикрометодом — по п. 8.9.4.

3.4.5 Определение массовой доли белка в рыбе, морских млекопитающих, морских беспозвоночных и продукции из них по методу Кьельдаля — по п. 8.9.1а.

3.5. Методы определения хлористого натрия (поваренной соли)

3.5.1. Определение массовой доли хлористого натрия аргентометрическим методом (используется при разногласиях в оценке качества продукции)

3.5.1.1 Сущность метода

Метод основан на взаимодействии хлористого натрия с азотнокислым серебром в присутствии хромовокислого калия с образованием красного осадка — хромовокислого серебра.

3.5.1.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Бюретки по ГОСТ 20292, вместимостью 10, 25, 50 см3.

Колбы мерные по ГОСТ 1770, вместимостью 200, 250 см3.

Колбы конические по ГОСТ 25336, вместимостью 100, 250, 500 см3.

Стакан лабораторный химический по ГОСТ 25336, вместимостью 400 см3.

Палочки стеклянные по ГОСТ 25336.

Стекло часовое.

Электропечь сопротивления лабораторная по ГОСТ 13474.

Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026 или фильтры бумажные.

Капельница лабораторная по ГОСТ 25336.

Пипетки по ГОСТ 20292, вместимостью 10, 25, 50 см3.

Воронка по ГОСТ 25336.

Тигли фарфоровые по ГОСТ 9147.

Марля медицинская по ГОСТ 9412.

Вата медицинская гигроскопическая по ГОСТ 5556.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, раствор 0,1 моль/дм3 (0,1 н).

Серебро азотнокислое по ГОСТ 1277, раствор 0,1 моль/дм3 (0,1 н).

Калий хромовокислый по ГОСТ 4459, 100 г/дм3 (10%-ный) или насыщенный раствор.

Натрий двууглекислый по ГОСТ 4201, раствор 0,01 моль/дм3 (0,01 н).

Кислота уксусная ледяная по ГОСТ 61 и раствор 0,01 моль/дм3 (0,01 н).

Фенолфталеин по ГОСТ 5850, раствор 10 г/дм3 (1%-ный).

Паранитрофенол, раствор 0,5 г/дм3 (0,05%-ный).

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

3.5.1.3 Проведение анализа

Навеску исследуемого образца 2 — 5 г (для рыбного клея 5 — 10 г), взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,01 г, помещают в мерную колбу вместимостью 200 — 250 см3 и заливают на 3/4 объема дистиллированной водой, нагретой до 60 °C. Содержимое колбы настаивают в течение 15 — 20 мин, периодически сильно взбалтывая. Допускается экстрагирование хлористого натрия из фарша водой комнатной температуры, при этом время настаивания увеличивают до 25 — 30 мин. По окончании настаивания жидкость в колбе охлаждают до комнатной температуры, объем доводят водой до метки.

При определении хлористого натрия в пробах жирной рыбы (массовая доля жира более 20%) и кормовой муки навеску средней пробы от 2 до 2,5 г подсушивают (при анализе рыбы), а затем осторожно обугливают в фарфоровом тигле на пламени газовой горелки или в муфельной печи до прекращения выделения дыма.

Уголь измельчают, смывают горячей дистиллированной водой в мерную колбу вместимостью 200 — 250 см3 и после охлаждения до комнатной температуры объем доводят водой до метки.

Содержимое мерной колбы в обоих случаях тщательно взбалтывают и фильтруют через сухой бумажный фильтр, вату или двойной слой марли, причем первые 20 — 30 см3 фильтрата отбрасывают.

Для устранения испарения жидкости во время фильтрования воронку с фильтром накрывают часовым стеклом.

В две конические колбы отбирают по 10 — 25 см3 фильтрата (50 см3 — при анализе кормовой муки) и титруют раствором азотнокислого серебра 0,1 моль/дм3 в присутствии 3 — 4 капель раствора хромовокислого калия 100 г/дм3 (10%-ного) или 1 капли насыщенного раствора до получения неисчезающей красновато-бурой окраски.

При исследовании средне- или крепкосоленой рыбы отбирают для титрования меньшее количество фильтрата (но не менее 10 см3).

В случае исследования продуктов, имеющих кислую или щелочную реакцию (маринады, испорченная соленая рыба), перед титрованием раствором азотнокислого серебра отобранную порцию фильтрата нейтрализуют раствором двууглекислого натрия 0,01 моль/дм3 или раствором 0,01 моль/дм3 уксусной кислоты в присутствии индикаторов фенолфталеина или паранитрофенола. После нейтрализации двууглекислым натрием фенолфталеин должен оставаться бесцветным, в случае использования гидроокиси натрия — окраситься в бледно-розовый цвет. Паранитрофенол после нейтрализации приобретает слабо-желтую окраску.

3.5.1.4 Обработка результатов

Массовую долю хлористого натрия в процентах вычисляют по формуле

X_{6} = \frac{K \cdot 0,00585 \cdot V \cdot V_{1} \cdot 100}{V_{2} \cdot m} ,

где V — объем водной вытяжки в мерной колбе, см3;

V1 — объем раствора азотнокислого серебра 0,1 моль/дм3, израсходованный на титрование исследуемого раствора, см3;

V2 — объем водной вытяжки, взятый для титрования, см3;

m — навеска исследуемого образца, г;

0,00585 — количество хлористого натрия, соответствующее 1 см3 раствора 0,1 моль/дм3 азотнокислого серебра, г;

K — коэффициент пересчета на точный раствор 0,1 моль/дм3 азотнокислого серебра.

Вычисление проводят до первого десятичного знака.

3.5.2 Упрощенный аргентометрический метод

3.5.2.1 Сущность метода — по п. 3.5.1.1.

3.5.2.2 Аппаратура, материалы и реактивы — по п. 3.5.1.2.

3.5.2.3 Проведение анализа

Навеску фарша 2 — 5 г взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,01 г, помещают в химический стакан и приливают в него мерным цилиндром соответственно 98 — 95 см3 или 248 — 245 см3 дистиллированной воды, размешивают стеклянной палочкой с резиновым наконечником. Через 25 — 30 мин настаивания содержимое стакана фильтруют через бумажный фильтр, вату или двойной слой марли.

В две колбы для титрования отбирают пипеткой 10 — 25 см3 фильтрата, добавляют 3 — 4 капли раствора хромовокислого калия и титруют из бюретки раствором азотнокислого серебра до неисчезающей красновато-бурой окраски.

3.5.2.4 Обработка результатов — по п. 3.5.1.4.

3.5.3 Меркурометрический метод

3.5.3.1 Сущность метода

Метод основан на взаимодействии хлористого натрия с азотнокислой ртутью (II) или азотнокислой ртутью (I) в присутствии дифенилкарбазида или дифенилкарбазона с образованием комплекса, окрашивающего раствор в фиолетовый цвет, и титриметрическом определении его.

Раствор азотнокислой ртути (I) используют при исследовании продуктов с массовой долей соли 50 г/дм3 (5%) и более.

3.5.3.2 Аппаратура, материалы и реактивы — по п. 3.5.1.2 со следующими дополнениями:

Баня водяная.

Склянка с притертой пробкой вместимостью 1000 см3.

Спирт этиловый питьевой по ГОСТ 5963, раствор 950 г/дм3 (95%-ный).

Дифенилкарбазид по ГОСТ 5859, насыщенный раствор.

Бромфеноловый синий, раствор 1 г/дм3 (0,1%-ный).

Кислота азотная по ГОСТ 4461, концентрированная.

Ртуть (I) азотнокислая двуводная по ГОСТ 4521, раствор 0,1 моль/дм3.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Ртуть (II) азотнокислая одноводная по ГОСТ 4520, раствор 0,025 моль/дм3 (0,05 н).

Дифенилкарбазон по ГОСТ 17551, спиртовой раствор 10 г/дм3 (1%-ный).

3.5.3.3 Подготовка к анализу

Приготовление раствора азотнокислой ртути (II) 0,025 моль/дм3 (0,05 н)

5,5 г желтой окиси ртути растворяют в 7 — 10 см3 концентрированной азотной кислоты. Раствор количественно переносят в мерную колбу вместимостью 1 дм3 и доводят объем дистиллированной водой до метки, хорошо перемешивают и затем фильтруют через бумажный складчатый фильтр. Профильтрованный раствор хранят в склянке с притертой пробкой.

Приготовление раствора азотнокислой ртути (I) 0,1 моль/дм3 (0,1 н)

30 г азотнокислой ртути (I) растворяют в 1 дм3 азотной кислоты 0,2 моль/дм3 при легком нагревании на водяной бане. При наличии в растворе нерастворившегося осадка его фильтруют. Титр рабочего раствора азотнокислой ртути (I) устанавливают через сутки после приготовления раствора по фиксаналам или навескам х.ч. хлористого натрия (или калия).

Приготовление раствора индикатора бромфенолового синего (бромфенолблау) 1 г/дм3 (0,1%-ного)

В мерной колбе вместимостью 100 см3 растворяют 100 мг индикатора в небольшом количестве дистиллированной воды, добавляют 1,5 см3 раствора гидроокиси натрия 0,1 моль/дм3 и доводят объем дистиллированной водой до метки.

Приготовление раствора индикатора дифенилкарбазона 10 г/дм3 (1%-ного)

1 г дифенилкарбазона растворяют в 100 см3 спирта 950 г/дм3 (95%). Раствор хранят в склянке из темного стекла.

При установлении титра пользуются тем индикатором, который будет применяться при анализах проб.

3.5.3.4 Проведение анализа

Навеску средней пробы массой от 2 до 5 г, отвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,001 г (в зависимости от предполагаемого содержания соли), помещают в мерную колбу вместимостью 200 — 250 см3 и заливают на 3/4 объема дистиллированной водой комнатной температуры. Содержимое колбы настаивают 25 — 30 мин, периодически сильно взбалтывая. Объем жидкости в колбе доводят до метки и фильтруют через сухой бумажный фильтр, вату или двойной слой марли.

Титрование проводят одним из следующих способов:

титрование азотнокислой ртутью (I) с индикатором бромфеноловым синим.

К 25 см3 фильтрата прибавляют 15 капель раствора бромфенолблау 1 г/дм3 и титруют раствором азотнокислой ртути (I) 0,1 моль/дм3 до перехода окраски из зеленовато-синей через светло-серую в сиреневую;

титрование азотнокислой ртутью (I) с индикатором дифенилкарбазоном.

25 см3 фильтрата подкисляют 1 см3 концентрированной азотной кислоты (свободной от окислов азота), добавляют 8 — 10 капель спиртового раствора дифенилкарбазона 10 г/дм3 (1%-ного) (реактив хранят в склянке из темного стекла) и титруют раствором 0,1 моль/дм3 азотнокислой ртути (I) до резкого изменения окраски в голубой или сине-фиолетовый цвет;

титрование азотнокислой ртутью (II).

К 25 см3 фильтрата прибавляют 1 — 2 капли концентрированной азотной кислоты (оптимальное значение pH4) и затем 3 — 5 капель насыщенного раствора дифенилкарбазида в спирте.

Смесь хорошо взбалтывают и титруют раствором азотнокислой ртути (II) 0,025 моль/дм3 до появления слабой фиолетовой окраски.

3.5.3.5 Обработка результатов

Массовую долю хлористого натрия (X7) в процентах вычисляют по формуле

X_{7} = \frac{V \cdot K \cdot V_{1} \cdot T \cdot 100}{m \cdot V_{2}} ,

где T — титры растворов азотнокислой ртути:

0,0029 — для 0,025 моль/дм3 раствора азотнокислой ртути (II);

0,0058 — для 0,1 моль/дм3 раствора азотнокислой ртути (I);

V — общий объем вытяжки в мерной колбе, см3;

V1 — объем 0,1 моль/дм3 раствора азотнокислой ртути (I) или 0,025 моль/дм3 раствора азотнокислой ртути (II), израсходованный на титрование, см3;

V2 — объем водной вытяжки, взятый для титрования, см3;

m — масса исследуемого образца, г;

K — коэффициент пересчета на точный 0,1 моль/дм3 раствор азотнокислой ртути (I).

3.6. Методы определения кислотности

3.6.1. Определение общей кислотности титриметрическим методом — по ГОСТ 8756.15.

3.6.2 Определение свободной уксусной кислоты маринадов титриметрическим методом

3.6.2.1 Сущность метода

Метод основан на выделении (отгоне) уксусной кислоты из водной вытяжки рыбы или разбавленной заливки и количественном определении ее титрованием.

3.6.2.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Весы лабораторные с пределом допускаемой абсолютной погрешности взвешивания не более +/- 0,01 г по ГОСТ OIML.R 76-1 или по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт. (в ред. Изменения № 1, введенного в действие Приказом Росстандарта от 25.06.2014 № 667-ст,Изменения № 2, введенного в действие Приказом Росстандарта от 03.10.2023 № 1043-ст

Аппарат для отгонки (черт. 4).

Аппарат для отгонки

3.6. Методы определения кислотности

1 — парообразователь; 2 — кран; 3 — глицериновая баня; 4 — нагревательный прибор; 5 — отгонная колба; 6 — термометр; 7 — терморегулирующее устройство; 8 — холодильник; 5 — приемная колба

Черт. 4

Глицерин по ГОСТ 6259.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, раствор 0,1 моль/дм3 или калия гидроокись по ГОСТ 24363, раствор 0,1 моль/дм3.

Фенолфталеин по ГОСТ 5850, спиртовой раствор 10 г/дм3 (1%-ный).

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

3.6.2.3 Подготовка к анализу

При подготовке прибора к работе температуру глицериновой (масляной) бани доводят до 150 °C, а воду в парообразователе — до кипения. Для парообразователя необходимо брать дистиллированную воду, проверенную на полное отсутствие углекислоты. Новый прибор с замененными частями или прибор, не эксплуатировавшийся несколько суток, необходимо до начала работы пропарить вначале с холодильником, свободным от воды в течение 10 мин, а затем с холодильником, заполненным водой, до нейтральной реакции дистиллята.

Отгонную колбу 5 помещают в глицериновую баню до пробки или шлифа во избежание конденсации паров при выходе из колбы.

3.6.2.4 Проведение анализа

Фильтрат вытяжки рыбы или разбавленной заливки готовят по ГОСТ 8756.15.

10 см3 фильтрата помещают в отгонную колбу 5, которую соединяют с холодильником 8 и при закрытом кране 2 помещают в глицериновую баню 3. Пробу нагревают в течение 5 мин, после чего открывают кран и пропускают пар через пробу в течение 40 мин. За это время в приемной колбе 9 образуется 200 — 250 см3 дистиллята.

Перед отгонкой в приемную колбу наливают от 10 до 15 см3 дистиллированной воды, свободной от углекислоты, и погружают в нее конец трубки холодильника. За 15 мин до окончания отгонки конец трубки холодильника вынимают из дистиллята и смывают дистиллированной водой (от 3 до 5 см3) в приемную колбу (в процессе отгонки температура глицериновой бани должна поддерживаться на уровне 145 — 160 °C). Включение в схему терморегулирующего устройства не обязательно, однако наличие его значительно облегчает проведение анализа. Собранный дистиллят титруют раствором 0,1 г/дм3 гидроокиси натрия в присутствии нескольких капель фенолфталеина.

Одновременно готовят контрольную пробу — 200 — 250 см3 дистиллированной воды, свободной от углекислоты, и титруют в присутствии нескольких капель фенолфталеина раствором 0,1 моль/дм3 гидроокиси натрия.

3.6.2.5 Обработка результатов

Массовую долю свободной уксусной кислоты (X8) в процентах вычисляют по формуле

X_{8} = \frac{(V_{1} - V_{2}) \cdot K \cdot K_{1} \cdot V_{0} \cdot 100}{m \cdot V} ,

где V — объем фильтрата, взятый для отгонки, см3;

V0 — общий объем вытяжки, см3;

V1 — объем раствора 0,1 моль/дм3 гидроокиси натрия, израсходованный на титрование дистиллята, см3;

V2 — объем раствора 0,1 моль/дм3 гидроокиси натрия, израсходованный на титрование контрольной пробы, см3 (при объеме дистиллята 200 — 250 см3 — 0,1 см3);

m — масса исследуемого образца, г;

K — коэффициент пересчета на точный раствор 0,1 моль/дм3 гидроокиси натрия;

K1 — коэффициент пересчета на соответствующую кислоту (уксусная кислота — 0,0060; яблочная кислота — 0,0067; молочная кислота — 0,0090; винная кислота — 0,0075).

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

3.6.3. Определение активной кислотности потенциометрическим методом — по ГОСТ 8756.16.

3.6.4 Определение кислотности рыбной печени титриметрическим методом

3.6.4.1 Сущность метода

Метод основан на извлечении спиртоэфирной смесью продуктов, обладающих кислотными свойствами, и количественном определении их титрованием.

3.6.4.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Мясорубка бытовая по ГОСТ 4025.

Ступка фарфоровая по ГОСТ 9147.

Чашка фарфоровая по ГОСТ 9147.

Колба лабораторная по ГОСТ 25336, вместимостью 100 см3.

Палочка стеклянная.

Спирт этиловый технический по ГОСТ 17299.

Эфир серный по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

Натрий сернокислый безводный по ГОСТ 4166.

Калия гидроокись по ГОСТ 24363, раствор 0,1 моль/дм3 или натрия гидроокись по ГОСТ 4328, раствор 0,1 моль/дм3 (0,1 н).

Фенолфталеин по ГОСТ 5850, спиртовой раствор 10 г/дм3 (0,1%-ный).

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

3.6.4.3 Проведение анализа

От 1,5 до 2 г дважды измельченной в мясорубке и растертой в ступке рыбной печени отвешивают в фарфоровую чашку с погрешностью не более 0,01 г, добавляют 4,0 г безводного сернокислого натрия, перемешивают стеклянной палочкой, переносят в колбу вместимостью 100 см3, прибавляют 40 см3 спиртоэфирной смеси (1 объем спирта и 2 объема эфира), закрывают пробкой, взбалтывают и выдерживают при периодическом перемешивании в течение 1 ч. Отстоявшийся раствор сливают в другую колбу через бумажный фильтр, остаток в колбе промывают небольшими порциями спиртоэфирной смеси, собирая промывную жидкость в ту же колбу так, чтобы общий объем фильтрата не превысил 50 см3.

Для титрования берут весь объем фильтрата, добавляют 1 см3 раствора фенолфталеина 10 г/дм3 и титруют раствором 0,1 моль/дм3 гидроокиси натрия.

3.6.4.4 Обработка результатов

Кислотность печени (X9) в мг KOH на 1 г печени вычисляют по формуле

X_{9} = \frac{5,61 \cdot V}{m} ,

где 5,61 — количество гидроокиси калия в 1 см3 раствора 0,1 моль/дм3, мг;

V — объем гидроокиси калия, израсходованный на титрование, см3;

m — навеска печени, г.

Вычисление проводят до первого десятичного знака.

3.7. Методы определения жира

3.7.1 <*>. Определение массовой доли жира экстракционным методом в аппарате Сокслета

<*> В части определения сырого жира в кормовой рыбной муке и из морских млекопитающих и ракообразных, предназначенной для производства комбикормов, - ГОСТ 13496.15-2016.

3.7.1.1 Сущность метода

Метод основан на экстракции жира органическим растворителем из сухой навески и определении его массы взвешиванием.

Метод применяется при разногласиях в оценке качества продукта.

3.7.1.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Аппарат экстракционный (аппарат Сокслета).

Баня водяная.

Шкаф сушильный лабораторный по ГОСТ 13474.

Стекло часовое.

Эксикатор по ГОСТ 25336.

Холодильник стеклянный лабораторный по ГОСТ 25336.

Ступка фарфоровая по ГОСТ 9147.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

Стаканчики для взвешивания (бюксы) стеклянные по ГОСТ 25336 или металлические.

Воронка стеклянная делительная по ГОСТ 25336.

Вата медицинская гигроскопическая по ГОСТ 5556.

Натрий сернокислый безводный по ГОСТ 4166 или натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный по ГОСТ 4172.

Эфир петролейный температурой кипения 40 — 60 °C или эфир этиловый, не содержащий перекисей, высушенный над хлористым кальцием или сернокислым натрием, по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

Песок силикатный речной или морской очищенный и прокаленный.

3.7.1.3 Проведение анализа

Навеску исследуемого продукта 5 — 10 г, взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,01 г, помещают в фарфоровую ступку. Туда же добавляют двойное-тройное по массе количество безводного сернокислого (или фосфорнокислого) натрия и смесь хорошо растирают пестиком. Обезвоженный продукт количественно переносят в пакет или специальный патрон (см. п. 3.7.2.3). Ступку протирают ваткой, смоченной эфиром, которую затем присоединяют к сухой навеске и помещают в экстрактор аппарата Сокслета. Экстрактор соединяют с предварительно высушенной при 105 °C и взвешенной колбой и наливают эфир с таким расчетом, чтобы количество его в 1,5 раза превышало объем экстрактора. Экстрактор с помощью пришлифованной пробки соединяют с холодильником. Воду пропускают в холодильник аппарата, и колбу слабо нагревают на водяной бане.

Экстракцию жира проводят в течение 10 — 12 ч. Интенсивность нагрева должна быть такой, чтобы в течение 1 ч происходило не менее 5 — 6 и не более 8 — 10 сливаний эфира. Полноту извлечения жира проверяют нанесением капли стекающего из экстрактора растворителя на часовое стекло. После испарения растворителя на стекле не должно оставаться жирного пятна.

При перерыве в работе в экстракторе оставляют эфир в таком количестве, чтобы патрон с навеской был погружен в него и извлечение жира из навески продолжалось настаиванием в течение времени перерыва.

По окончании экстракции жира эфир из колбочки отгоняют, а колбу с жиром помещают в сушильный шкаф, высушивают при 100 — 105 °C до постоянной массы, охлаждают в эксикаторе и взвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,001 г. Колбу с жиром лучше сушить в атмосфере инертного газа или под вакуумом.

3.7.1.4 Обработка результатов

Массовую долю жира X10 в процентах вычисляют по формуле

X_{10} = \frac{(m_{1} - m_{2}) \cdot 100}{m} ,

где m — масса исследуемого образца, г;

m1 — масса колбочки с жиром, г;

m2 — масса пустой колбочки, г.

Вычисление проводят до первого десятичного знака.

3.7.2 Определение массовой доли жира экстракционным методом по обезжиренному остатку

3.7.2.1 Сущность метода

Метод основан на определении изменения массы образца после экстракции жира растворителем.

3.7.2.2 Аппаратура, реактивы и материалы — по п. 3.7.1.2.

3.7.2.3 Проведение анализа

2 — 5 г исследуемого образца, отвешенных с абсолютной погрешностью не более 0,001 г, высушивают в бюксе в сушильном шкафу при температуре 100 — 105 °C.

Высушенную навеску количественно переносят в пакеты из фильтровальной бумаги размером 8 x 9 см. Стенки бюксы протирают небольшим кусочком ваты, смоченным в эфире, вату присоединяют к навеске в пакет из фильтровальной бумаги.

Пакет с навеской вкладывают в другой пакет из фильтровальной бумаги размером 9 x 10 см так, чтобы линии загиба обоих пакетов не совпадали. Пакеты можно перевязать ниткой. Наружный пакет нумеруют графитовым карандашом. Пакет с навеской помещают в ту же бюксу и высушивают до постоянной массы в сушильном шкафу при 100 — 105 °C. Допускается сушить пробы для нежирных продуктов при 100 — 105 °C непосредственно в пакетах. Высушенный до постоянной массы пакет с навеской помещают в экстрактор аппарата Сокслета.

В аппарат Сокслета можно поместить несколько пакетов при условии, что в процессе экстракции все пакеты будут погружены в эфир и хорошо им омыты.

Экстракцию эфиром продолжают в течение 10 — 12 ч. Окончание экстракции проверяют нанесением капли стекающего из экстрактора растворителя на часовое стекло. После испарения растворителя на стекле не должно оставаться жирного пятна. По окончании экстракции пакет помещают в ту же бюксу и в течение 20 — 30 мин выдерживают в вытяжном шкафу для удаления эфира, затем высушивают в шкафу при температуре 100 — 105 °C до постоянной массы в течение 1 — 3 ч, охлаждают в эксикаторе и взвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,001 г.

3.7.2.4 Обработка результатов

Массовую долю жира (X11) в процентах вычисляют по формуле

X_{11} = \frac{(m_{1} - m_{2}) \cdot 100}{m} ,

где m — масса исследуемого образца, г;

m1 — масса высушенных бюксы, пакета и образца до экстракции, г;

m2 — масса высушенных бюксы, пакета и образца после экстракции, г.

Вычисление проводят до первого десятичного знака.

3.7.3 Определение массовой доли жира экстракционно-весовым методом ВНИИКОП (ускоренным) — по ГОСТ 8756.21

3.7.4 Определение массовой доли жира рефрактометрическим методом (ускоренным)

3.7.4.1 Сущность метода

Метод основан на измерении разности коэффициентов преломления чистого растворителя и мисцеллы.

3.7.4.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Рефрактометр по ГОСТ 24908, имеющий шкалу показателя преломления в интервале 1,3 — 1,7.

Ступка фарфоровая по ГОСТ 9147.

Пробирки химические стеклянные по ГОСТ 25336 (14 x 120 мм).

Пипетки с делениями по ГОСТ 20292, вместимостью 10 см3.

Палочки стеклянные по ГОСТ 25336.

Воронки стеклянные по ГОСТ 25336, диаметром 50 мм.

Фильтры обеззоленные.

Вата медицинская гигроскопическая по ГОСТ 5556.

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962.

\alpha -хлорнафталин.

\alpha_{1} -бромнафталин.

Трикрезилортофосфат.

3.7.4.3 Проведение анализа

2 г исследуемого образца взвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,001 г, помещают в фарфоровую ступку <*>. Туда же градуированной пипеткой вместимостью 10 см3 приливают 5 см3 растворителя ( \alpha_{1} -бромнафталина, \alpha -хлорнафталина или трикрезилортофосфата). Навеску с растворителем тщательно растирают пестиком в течение 5 мин. Полученную массу фильтруют через бумажный складчатый фильтр в чистую сухую пробирку.

<*> Навеску икры предварительно подсушивают при температуре 60 — 70 °C в течение 15 — 30 мин, а затем помещают в фарфоровую ступку.

1 — 2 капли прозрачного фильтрата наносят стеклянной палочкой на нижнюю призму рефрактометра. После этого осторожно (не допуская удара) закрывают верхнюю призму и через 1 — 2 мин определяют показатель рефракции мисцеллы. Определение проводят трижды. Из трех определений берут среднее арифметическое значение. По окончании каждого определения мисцеллу удаляют с поверхности фильтровальной бумагой или ватой, смоченной спиртом.

Преломление чистого растворителя определяют один раз перед началом работы, а плотность его — не реже одного раза в месяц и при получении новой партии.

3.7.4.4 Обработка результатов

Массовую долю жира (X12) в процентах вычисляют по формуле

X_{12} = \frac{10^{4} \cdot \alpha \cdot m_{1}}{m} (n_{0} - n) , (3)

где m — масса исследуемого образца, г;

m1 — масса растворителя, г;

n — показатель преломления мисцеллы;

n0 — показатель преломления чистого растворителя;

\alpha — показатель отношения массовой доли жира в растворителе к разности между показателями преломления растворителя и мисцеллы (определяют экспериментально).

Так как m, m1, \alpha являются постоянными величинами для растворителя, с которым проводятся работы, выражение \frac{10^{4} \cdot \alpha \cdot m_{1}}{m} в формуле (3) можно заменить обозначением ПВ (постоянная величина). Тогда расчет количества жира в анализируемом продукте сводится к умножению постоянной величины ПВ на разность показателей преломления чистого растворителя и мисцеллы.

X_{13} = \text{П}_{\text{В}} \times \Delta n . (4)

Значения коэффициента \alpha и постоянной величины ПВ при применении вышеуказанных растворителей приведены в табл. 3.

Таблица 3

Растворитель	\alpha	ПВ
\alpha -бромнафталин	0,0407	1514
\alpha_{1} -хлорнафталин	0,0612	1840
Трикрезилортофосфат	0,1212	3514

Формулы для вычисления жира рефрактометрическим методом даны применительно к температуре 20 °C.

Измеряя рефракцию мисцеллы и растворителя при другой температуре (выше или ниже 20 °C), пользуются температурными поправками, приведенными в табл. 4.

Таблица 4

Изменение показателя рефракции при изменении температуры на 1 °C

Наименование растворителя, использованного в работе	При повышении температуры на 1 °C	При понижении температуры на 1 °C
\alpha -бромнафталин	-0,00043	0,00043
\alpha_{1} -хлорнафталин	-0,00045	0,00045
Трикрезилортофосфат	-0,00039	0,00039

Вычисление проводят до первого десятичного знака.

3.7.5 Определение массовой доли жира и воды отгонкой

3.7.5.1 Сущность метода

Метод основан на одновременном извлечении жира и воды из навески растворителем и последующем раздельном количественном их определении взвешиванием.

3.7.5.2 Аппаратура, материалы и реактивы — по п. 3.3.3.2 со следующими дополнениями:

Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026.

Воронка стеклянная по ГОСТ 25336.

Колба мерная по ГОСТ 1770, вместимостью 100 см3.

Пипетка по ГОСТ 20292, вместимостью 20 см3.

Бюксы по ГОСТ 25336, диаметром 40 — 50 мм.

Баня водяная.

Электроплитка по ГОСТ 14919.

3.7.5.3 Проведение анализа

Определение массовой доли воды проводят по п. 3.3.3.

По окончании отгонки воды и охлаждения раствора в отгонной колбе раствор фильтруют через бумажный фильтр или вату в мерную колбу вместимостью 100 см3. Осадок переносят на фильтр, смывают колбу и промывают осадок на фильтре несколькими порциями свежего растворителя. Объем в колбе доводят до метки растворителем и перемешивают взбалтыванием.

Отбирают пипеткой 20 — 30 см3 раствора, переносят в бюксу диаметром 40 — 50 мм, предварительно взвешенную с погрешностью не более 0,001 г, и растворитель выпаривают на водяной бане до полного исчезновения запаха. Бюксу тщательно вытирают снаружи фильтровальной бумагой и взвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,001 г.

3.7.5.4 Обработка результатов

Массовую долю жира (X14) в процентах вычисляют по формуле

X_{14} = \frac{(m_{1} - m_{2}) \cdot 100 \cdot V}{m \cdot V_{1}} ,

где m — масса исследуемого образца, г;

m1 — масса бюксы с жиром, г;

m2 — масса пустой бюксы, г;

V — общий объем раствора, см3;

V1 — объем раствора, отобранный для определения жира, см3.

Вычисление проводят до первого десятичного знака.

3.7.6 Определение массовой доли жира ускоренным экстракционно-весовым методом ФГБУН «ФИЦ питания и биотехнологии»

3.7.6.1 Сущность метода

Метод основан на растворении липидов бинарной смесью органических растворителей, отделении (отгонке) растворителей и весовом определении массы липидов.

3.7.6.2 Аппаратура, материалы, реактивы

Шкаф сушильный по ГОСТ 13474.

Баня водяная.

Насос водоструйный лабораторный стеклянный по ГОСТ 25336.

Мясорубка бытовая по ГОСТ 4025.

Часы песочные на 1 мин по ГОСТ 10576 или секундомеры механические по ГОСТ 5072.

Экстрактор.

Тигли по ГОСТ 20292, вместимостью 50 см3 или цилиндры мерные по ГОСТ 20292, вместимостью 100 см3.

Бюксы по ГОСТ 25336 или стаканчики химические по ГОСТ 25336.

Эксикатор по ГОСТ 25336.

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962.

Хлороформ технический по ГОСТ 20015.

Бензол по ГОСТ 5955.

3.7.6.3 Проведение анализа

3 — 5 г анализируемого продукта, отвешенных с абсолютной погрешностью не более 0,001 г, помещают в фильтрующую делительную воронку 7 экстрактора (черт. 5), приливают 20 см3 96° этилового спирта, закрывают ее притертой пробкой, оставляют на 5 мин, после чего интенсивно встряхивают, переворачивая в течение 1 — 2 мин.

3.7. Методы определения жира

1 — сливной кран; 2 — приемник экстракта; 3 — шлифовое соединение отвода к вакуумному насосу; 4 — шлифовое соединение; 5 — кран для слива экстракта в приемник; 6 — впаянная пористая пластина 2 или 3; 7 — фильтрующая делительная воронка; 8 — притертая пробка

Черт. 5

Воронку устанавливают на приемнике экстрактора 2, отвод 3 которого соединяют с вакуумным насосом, открывают сливной кран 5 делительной воронки, включают вакуумный насос и отсасывают экстракт в приемник. В воронку приливают 20 см3 экстрагирующей бинарной смеси: хлороформ-этанол (2:1), проводят одноминутную экстракцию, как описано выше, и отсасывают экстракт в приемник.

Экстракцию бинарной смесью хлороформ-этанол повторяют еще 3 раза. Экстракты из приемника переносят в мерный цилиндр с притертой пробкой и тщательно перемешивают. Отбирают пипеткой 50 см3 экстракта и переносят в предварительно высушенный и взвешенный стаканчик или бюксу.

Растворители отгоняют на кипящей водяной бане до исчезновения запаха.

Оставшийся в бюксе так называемый «сырой» жир сушат в сушильном шкафу 5 мин при температуре 105 °C, охлаждают до комнатной температуры в эксикаторе над хлористым кальцием и взвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,001 г.

Для отделения нелипидных компонентов в бюксу с «сырым» жиром приливают 10 см3 хлороформа и через 5 мин хлороформный экстракт сливают. Операцию повторяют дважды, после чего в бюксе остаются только нелипидные компоненты.

Бюксу с остатком подсушивают в сушильном шкафу 5 мин при 105 °C, охлаждают в эксикаторе и взвешивают. Содержание липидов находят по разности значений масс «сырого» жира и нелипидных компонентов.

Примечание. Метод распространяется на все продукты, кроме рыбной муки. Для рыбной муки используется смесь хлороформ-бензол (1:1) или хлороформ-этанол (2:1).

3.7.6.4 Обработка результатов

Массовую долю липидов (X15) в процентах вычисляют по формуле

X_{15} = \frac{(m_{1} - m_{2}) \cdot 100 \cdot V}{m \cdot V_{1}} ,

где m — масса исследуемого образца, г;

m1 — концентрация «сырого» жира в 50 см3 экстракта, г/см3;

m2 — концентрация нелипидных компонентов в 50 см3 экстракта, г/см3;

V — общий объем экстракта, см3;

V1 — объем экстракта, взятый для анализа, см3.

Вычисление проводят до первого десятичного знака.

3.8. Определение общей ртути методом беспламенной атомной абсорбции

3.8.1 Сущность метода

Метод основан на окислении ртути в двухвалентный ион в присутствии марганцовокислого калия, восстановлении ее в металлическую форму двухлористым оловом и количественном определении по изменению энергии излучения.

3.8.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Анализатор ртути.

Колба лабораторная мерная по ГОСТ 1770, вместимостью 100 см3.

Цилиндр мерный по ГОСТ 1770, вместимостью 100 и 50 см3.

Аппарат для сжигания из стекла «Пирекс».

Баня водяная.

Воронка стеклянная по ГОСТ 25336, диаметром 70 — 90 мм.

Кислота серная по ГОСТ 4204, ос.ч. (плотность 1840 кг/м3) и раствор 9 моль/дм3.

Кислота азотная по ГОСТ 4461, ос.ч. (плотность 1520 кг/м3) и раствор 5,6 моль/дм3.

Олово двухлористое 2-водное по ГОСТ 36-78, раствор 100 г/дм3 (10%-ный).

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Калий марганцовокислый по ГОСТ 20490, раствор 50 г/дм3 (5%-ный).

Гидроксиламина гидрохлорид ч.д.а. по ГОСТ 5456, раствор 15 г/дм3 (1,5%-ный).

Фильтры обеззоленные.

Склянка для определения ртути.

3.8.3 Проведение анализа

От 0,5 до 3 г исследуемой пробы взвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,001 г, помещают в колбу <> вместимостью 250 см3 для деструкции. Туда же добавляют 15 — 20 см3 смеси концентрированных азотной и серной кислот <> (1:1) <>. Колбу соединяют с обратным холодильником и помещают на водяную баню температурой 60 — 70 °C на 15 мин. Затем колбу опускают на 5 мин в кипящую водяную баню.

<*> Изготовляют из стекла «Пирекс».

<**> Все реактивы должны быть свободными от ртути.

<***> Для спокойного течения реакции добавляют персульфат калия; допускается выдержка пробы с кислотами в течение 10 — 12 ч перед нагреванием.

По истечении указанного срока в колбу осторожно добавляют 30 см3 дистиллированной воды и оставляют в кипящей водяной бане в течение 60 мин. В горячий деструктат добавляют 25 — 30 см3 дистиллированной воды и фильтруют в колбу вместимостью 100 см3 через бумажный фильтр, охлаждают и затем выливают в склянку для определения ртути.

В склянку добавляют при помешивании раствор марганцовокислого калия 50 г/дм3 или сухого в количестве, обеспечивающем полное окисление исследуемой пробы (появляется устойчивая буро-коричневая окраска). Пробу оставляют на 5 мин, затем добавляют 5 см3 5,6 моль/дм3 азотной кислоты и, перемешивая, выдерживают 15 с. Добавляют 5 см3 18 моль/дм3 серной кислоты и выдерживают 45 с, периодически перемешивая содержимое.

Ртуть в пробе окисляется в двухвалентный ион марганцовокислым калием в присутствии азотной и серной кислот.

Для удаления избытка марганцовокислого калия к пробе добавляют 5 см3 (или больше) 1,5%-ного раствора или несколько кристаллов гидроксиламина гидрохлорида (раствор должен стать совершенно прозрачным). Добавляют 5 см3 раствора двухлористого олова 100 г/дм3 (при этом ртуть восстанавливается в металлическую форму) и сразу в склянку вводят барботер (аэратор). Ртуть, испаряясь, циркулирует по системе аэратора. Ртутные пары поглощают линию ртути 253,7 нм, испускаемую ртутной лампой. Изменение энергии излучения обнаруживается фотоэлементом.

Отсчет ртути проводят по шкале в микрограммах.

Одновременно проводят контрольный анализ.

3.8.4 Обработка результатов

Содержание ртути в исследуемом образце (X16) в млн-1 (мг/кг) определяют по формуле

X_{16} = \frac{(m_{2} - m_{1})}{m} ,

где m — навеска исследуемого образца, г;

m1 — содержание ртути в контрольном анализе, определенное по шкале прибора, мкг;

m2 — содержание ртути в исследуемом образце, определенное по шкале прибора, мкг.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

3.9. Определение водоудерживающей способности свежего, охлажденного, сыро-, варено-мороженого мяса (фарша) рыбы, морских млекопитающих, морских беспозвоночных и кулинарных изделий

3.9.1 Сущность метода

Метод основан на выделении воды из анализируемой пробы прессованием и определении ее по массе или площади «влажного» пятна.

3.9.2 Аппаратура, материалы и реактивы.

Мясорубка бытовая по ГОСТ 4025.

Разновес (гиря) массой 1 кг.

Пластина (стеклянная, плексигласовая), 100 x 100 мм или круг диаметром 100 — 150 мм.

Холодильник бытовой электрический по ГОСТ 16317.

Планиметр по ГОСТ 18248.

Стаканчики для взвешивания (бюксы) по ГОСТ 25336.

Чашка фарфоровая по ГОСТ 9147.

Эксикатор по ГОСТ 25336.

Часы песочные по ГОСТ 10576 на 10 мин.

Калий хлористый по ГОСТ 4234, насыщенный раствор.

Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026.

Фильтры (средней плотности).

3.9.3 Проведение анализа (весовой метод)

Мясо или размороженный до температуры 3 — 4 °C фарш массой 0,1 — 0,3 кг пропускают через мясорубку с решеткой диаметром отверстий 3 мм, не допуская потери сока. После тщательного перемешивания всей массы часть ее помещают в бюксу с притертой крышкой.

0,3 г фарша взвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,001 г, помещают на полиэтиленовый кружок, который переносят на кружок фильтровальной бумаги, расположенный на стеклянной или плексигласовой пластинке (кругу) так, чтобы навеска фарша лежала на фильтровальной бумаге. Сверху полиэтиленовый кружок закрывают стеклянной или плексигласовой пластиной (кругом), на которую ставят груз (гирю) массой 1 кг. Продолжительность прессования 10 мин.

По окончании прессования массу освобождают от фильтровальной бумаги и полиэтиленового кружка, помещают в предварительно тарированную бюксу, взвешивают и высушивают при температуре 105 °C. Массовую долю воды в отпрессованной навеске определяют по п. 3.3.

3.9.4 Обработка результатов

Количество отпрессованной воды (X17) в г вычисляют по формуле

X₁₇ = m₁ - m₂,

где m1 — масса исследуемого образца до прессования, г;

m2 — масса исследуемого образца после прессования, г.

Водоудерживающую способность (WC) исследуемого продукта в процентах вычисляют по формуле

W_{C} = \frac{m_{2}(m_{1} - m_{X_{17}})}{m_{1}} ,

где m1 — масса исследуемого образца, г;

m2 — массовая доля воды в отпрессованной навеске, %;

m_{X_{17}} — масса воды, отпрессованной из навески, г.

3.9.5 Проведение анализа (по площади влажного пятна)

Метод применяют для исследования рыбы тощей и средней жирности.

Прессование проводят по п. 3.9.3, используя фильтры средней плотности, предварительно выдержанные 3 сут в эксикаторе над насыщенным раствором хлористого кальция (подготовленные фильтры должны храниться в полиэтиленовом пакете в холодильнике).

По окончании прессования фильтр освобождают от навески, очерчивают карандашом контур пятна вокруг прессованного мяса и контур общего пятна по границе распространения воды. Площадь пятен определяют планиметром.

Площадь «влажного» пятна находят по разности между площадью общего пятна и площадью пятна, образованного отпрессованной массой.

Одновременно определяют массовую долю воды в исследуемом образце по п. 3.3.

3.9.6 Обработка результатов

Водоудерживающую способность исследуемого продукта (W_{C_{1}}) в процентах вычисляют по формуле

W_{C_{1}} = \frac{(m_{1} - 0,0084 \cdot S) \cdot 100}{m} ,

где m — навеска исследуемого образца, г;

m1 — массовая доля воды в навеске, г;

S — площадь «влажного» пятна, см2;

0,0084 — количество воды в 1 см2 «влажного» пятна, г.

Вычисление проводят до первого десятичного знака.

3.10. Определение сорбиновой кислоты — по 5.7.

4. МЕТОДЫ АНАЛИЗА ПОЛУФАБРИКАТОВ И КУЛИНАРНЫХ ИЗДЕЛИЙ

4.1 Подготовка средней пробы к анализу — по п. 2.2.

4.2 Определение воды — по п. 3.3.

4.3. Определение хлористого натрия (поваренной соли) — по п. 3.5.1 и 3.5.2.

4.4. Определение жира — по пп. 3.7.1; 3.7.2; 3.7.4.

4.5 Определение соотношения отдельных частей продукта

4.5.1 Сущность метода

Метод основан на определении отдельных частей продукта взвешиванием.

4.5.2 Аппаратура и материалы

Чашки фарфоровые по ГОСТ 9147.

Стаканы химические по ГОСТ 25336.

Пинцет по ГОСТ 21241.

Шпатель по ГОСТ 1078.

4.5.3 Определение соотношения рыбы (морских беспозвоночных) и овощей

Из навески исследуемого образца массой 100 г выбирают отдельно в две тарированные фарфоровые чашки рыбу и нерыбные объекты и овощи.

Отобранные продукты взвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,5 г и выражают соотношение в процентах от взятой навески.

4.5.4 Определение соотношения рыбы (морских беспозвоночных) и желе (или желе с другими компонентами и т.д.)

Навеску средней пробы массой 100 — 200 г взвешивают в фарфоровой чашке с абсолютной погрешностью не более 0,1 г и отделяют рыбу, тщательно счищая желе или желе с другими компонентами в тарированную чашку или стакан. Чашку с содержимым взвешивают и массу желе (или желе с другими компонентами) выражают в процентах. Процентное содержание рыбы находят по разности между массой исследуемого образца и массой желе (или желе с другими компонентами).

4.5.5. Определение соотношения рыбы (морских беспозвоночных) и заливки (томатный соус, маринад и т.п.).

Соотношение в продукте рыбы и заливки определяют отдельно для каждой упаковочной единицы из числа выделенных для средней пробы. Результаты определений вычисляют для каждой упаковочной единицы в отдельности.

Тщательно вытертую снаружи единицу упаковки (банку, пакет и т.д.) взвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,5 г — для мелкой фасовки и до 1 г — для крупной упаковочной единицы (более 350 г).

Упаковку вскрывают и осторожно, так, чтобы твердая часть продукта не проходила, сливают жидкую часть в фарфоровую чашку или стакан. Слив продолжают 15 мин, причем каждые 5 мин упаковку осторожно переворачивают. По окончании стекания упаковку с твердой частью продукта взвешивают и по разности рассчитывают массу жидкой части. Содержимое упаковки (плотную часть) переносят в фарфоровую чашку.

Упаковку моют, высушивают и после взвешивания по разности между массой брутто и упаковки определяют массу нетто.

Примечание. При необходимости проводят:

Определение соотношения других компонентов продукта (например, овощей, заливки и т.п.).
Подогревание продукции на водяной бане до 50 — 60 °C перед сливом жидкой части для лучшего разделения компонентов.

Массу рыбы находят по разности между массой нетто и массой жидкой части.

Массовую долю рыбы и жидкой части вычисляют в процентах к массе нетто продукта.

Среднюю пробу продукта в противнях (лотках или другой упаковке массой нетто более 1 кг) помещают на ровную поверхность (без уклона). Содержимое противня разрезают посредине вдоль и поперек на четыре равные части. Если разрез приходится на позвоночную кость (рыба с твердой костью), допускается сместить его выше или ниже середины противня, но не более, чем на 1 см.

На чистую предварительно взвешенную тарелку выкладывают из противня лопаточкой или широким ножом без острия любую четвертую часть. Выкладывание начинают от середины противня, двигая лопаточкой к его краям.

Отобранную пробу взвешивают вместе с тарелкой и по разности определяют массу пробы.

Отделяют рыбу от заливки, соуса, пользуясь ложкой или тупой стороной ножа для удаления остатков соуса, пряностей или других специй с кусков рыбы.

Взвешивают тарелку с соусом и по разности между массой пробы и массой тарелки определяют массу его.

Массу рыбы находят по разности между массой пробы и массой соуса.

Соотношение массы рыбы и жидкой части вычисляют в процентах и распространяют на всю упаковку.

4.5.6. Определение соотношения рыбы и плотной части в мучных изделиях с начинками из рыбы или рыбных фаршей и других морепродуктов

500 г сырых размороженных или жареных изделий взвешивают на технических весах с абсолютной погрешностью не более 1 г, отделяют фарш от теста и взвешивают фарш (при массе изделия более 500 г отбирают 1 экз.).

4.5.7 Массовую долю фарша (X18) в % к массе изделий вычисляют по формуле

X_{18} = \frac{m_{1} \cdot 100}{m} ,

где m — масса изделий, г;

m1 — масса фарша, г.

4.6. Определение общей кислотности — по ГОСТ 8756.15 (титриметрическим методом).

4.7. Определение крахмала — по ГОСТ 10574 (количественный метод).

5. МЕТОДЫ АНАЛИЗА ИКРЫ

5.1 Подготовка средней пробы к анализу — по п. 2.3.

5.2. Определение величины вакуума в банках с икрой

5.2.1 Сущность метода

Метод основан на определении величины вакуума вакуумметром.

5.2.2 Аппаратура

Вакуумметр по ГОСТ 8625.

5.2.3 Проведение анализа

Банку, предназначенную для анализа, моют и тщательно протирают сухой тряпкой.

Для проверки величины вакуума полой иглой, навинченной на штуцер вакуумметра, прокалывают крышку банки. При этом эластичная резиновая пробка, в которую вставлен запиленный по конусу и отточенный конец иглы, уплотняется, предотвращая потерю вакуума при анализе.

Крышку банки прокалывают так, чтобы конец иглы не попадал на кольцо жесткости или маркировочные знаки.

По отклонению стрелки вакуумметра определяют величину вакуума в банке.

5.3 Определение воды — по п. 3.3.1.

5.4. Определение хлористого натрия (поваренной соли) — по пп. 3.5.1; 3.5.2.

5.5. Методы определения азота летучих оснований в икре рыб

5.5.1 Определение азота летучих оснований титриметрическим методом

5.5.1.1 Сущность метода — по п. 3.2.1.1.

Свободные и связанные летучие основания отгоняют с паром.

Образующийся аммиак взаимодействует с серной кислотой, избыток которой оттитровывают щелочью.

5.5.1.2 Аппаратура, материалы и реактивы — по п. 3.2.1.2 со следующими дополнениями:

Пипетки по ГОСТ 20292, вместимостью 100 см3.

Аппарат для встряхивания.

Колбы мерные с пришлифованной пробкой по ГОСТ 1770, вместимостью 200 см3.

Воронка стеклянная по ГОСТ 25336, диаметром 70 — 80 мм.

Марля медицинская по ГОСТ 9412.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

5.5.1.3 Подготовка вытяжки икры

От 9 до 10 г тонкоизмельченной икры взвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,1 г, переносят в мерную колбу с пришлифованной пробкой вместимостью 200 см3 и заливают дистиллированной водой до 3/4 объема.

Смесь взбалтывают в течение 30 мин на аппарате для встряхивания, доводят объем дистиллированной водой до 200 см3, после чего фильтруют через марлю, уложенную на воронку.

Профильтрованную вытяжку используют для отгонки летучих оснований.

5.5.1.4 Проведение анализа

В отгонную колбу вместимостью 700 — 1000 см3 вносят 100 см3 профильтрованной вытяжки, прибавляют 1 г окиси магния и, во избежание вспенивания, кусочек чистого парафина. Колбу быстро закрывают пробкой, соединенной с парообразователем с интенсивно кипящей водой и с каплеуловителем.

Параллельно с рабочим проводят контрольный анализ (отгоняют 100 см3 дистиллированной воды и 1 г окиси магния).

Отгонку проводят в течение 30 мин с момента закипания жидкости в колбе. Дистиллят собирают в коническую колбу вместимостью 300 — 500 см3 с 15 — 20 см3 раствора серной кислоты 0,05 моль/дм3, погружая в нее конец холодильника.

По окончании отгонки конец холодильника обмывают дистиллированной водой в приемную колбу, избыток серной кислоты в нем оттитровывают раствором гидроокиси натрия 0,1 моль/дм3 с индикатором метиловым красным.

5.5.1.5 Обработка результатов

Массовую долю азота летучих оснований (X19) в % вычисляют по формуле

X_{19} = \frac{(V - V_{1}) \cdot K \cdot 0,0014 \cdot V_{2} \cdot 100}{m \cdot V_{3}} ,

где V — объем раствора гидроокиси натрия 0,1 моль/дм3, израсходованный на титрование серной кислоты в контрольном анализе, см3;

V1 — объем раствора гидроокиси натрия 0,1 моль/дм3, израсходованный на титрование серной кислоты в рабочем анализе, см3;

K — коэффициент пересчета рабочего раствора гидроокиси натрия на точный раствор 0,1 моль/дм3 (0,1 н);

0,0014 — количество азота, эквивалентное 1 см3 точного раствора гидроокиси натрия 0,1 моль/дм3, г;

V2 — общий объем приготовленной вытяжки из икры, см3;

V3 — объем профильтрованной вытяжки, взятый для отгонки, см3;

m — масса икры, г.

Вычисление проводят до третьего десятичного знака.

5.5.2. Определение азота летучих оснований колориметрическим методом — по п. 3.2.2, кроме приготовления стандартного раствора хлористого аммония.

Стандартный раствор хлористого аммония

0,9548 г дважды перекристаллизованного и высушенного при комнатной температуре до постоянной массы хлористого аммония, отвешенных с абсолютной погрешностью не более 0,0001 г, растворяют в мерной колбе вместимостью 0,5 дм3. Приготовленный основной стандартный раствор, содержащий 0,5 мг азота в 1 см3, сохраняется в течение нескольких дней в темном прохладном месте. Перед началом работы 5 см3 раствора отбирают пипеткой в мерную колбу вместимостью 500 см3 и доводят объем дистиллированной водой до метки. Это рабочий стандартный раствор, содержащий 0,005 мг азота в 1 см3.

5.6. Методы определения уротропина

5.6.1 Определение уротропина (гексаметилентетрамина) титрованием

5.6.1.1 Сущность метода

Метод основан на разложении уротропина в кислой среде до формальдегида, окислении его йодом в муравьиную кислоту в щелочной среде с последующим титрованием избытка йода тиосульфатом натрия.

5.6.1.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Микроизмельчитель тканей.

Электроплитка бытовая по ГОСТ 14919.

Штативы с кольцами и зажимами.

Колба плоскодонная (для парообразования) по ГОСТ 25336, вместимостью 2000 см3.

Холодильник стеклянный лабораторный с прямой трубкой по ГОСТ 25336.

Трубка соединительная стеклянная по ГОСТ 25336, диаметром 10 мм, высотой 1200 мм.

Каплеуловитель стеклянный лабораторный по ГОСТ 25336.

Колба Кьельдаля по ГОСТ 25336, вместимостью 500 — 750 см3.

Колба коническая с притертой пробкой (колба Эрленмейера) по ГОСТ 25336, вместимостью 300 — 500 см3.

Колба мерная по ГОСТ 1770, вместимостью 200 см3.

Пипетки по ГОСТ 20292, вместимостью 1, 10, 20 см3.

Часы.

Бюретка по ГОСТ 20292, вместимостью 25 см3 с ценой деления 0,1 см3.

Фуксин основной для приготовления фуксинсернистой кислоты.

Кислота соляная по ГОСТ 3118, концентрированная.

Кислота ортофосфорная по ГОСТ 6552, раствор 250 г/дм3 (25%-ный).

Кислота серная по ГОСТ 4204, концентрированная и раствор 5 моль/дм3 (10 н).

Йод по ГОСТ 4159, раствор 0,05 моль/дм3 (0,1 н) в йодистом калии.

Калий йодистый по ГОСТ 4232.

Натрий сернистокислый (сульфит) по ГОСТ 195 или натрий сернистокислый кислый (бисульфит натрия).

Натрий серноватистокислый (тиосульфат) по СТ СЭВ 223 раствор 0,1 моль/дм3 (0,1 н).

Крахмал растворимый по ГОСТ 10163, раствор 10 г/дм3 (1%-ный).

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, раствор 1 моль/дм3 (1 н).

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

5.6.1.3 Приготовление раствора фуксинсернистой кислоты

0,2 г фуксина (основного) растворяют при нагревании в 120 см3 горячей воды.

После охлаждения прибавляют в раствор 2 г безводного сульфита натрия в 20 см3 воды, 2 см3 концентрированной соляной кислоты и доводят объем до 200 см3. Реактив выдерживают в течение суток в темном месте.

5.6.1.4 Проведение анализа

Перед определением воду в колбе-парообразователе отгонного аппарата доводят до интенсивного кипения, которое поддерживается до окончания анализа.

К холодильнику отгонного аппарата присоединяют приемную коническую колбу со шлифом, в которую предварительно наливают 5 см3 дистиллированной воды.

В колбу Кьельдаля помещают 5 — 6 г тщательно измельченной икры, взвешенной с абсолютной погрешностью не более 0,01 г, добавляют 200 см3 дистиллированной воды и энергично перемешивают. Через 30 мин в колбу с навеской прибавляют 10 см3 раствора фосфорной кислоты 250 г/дм3, перемешивают содержимое и немедленно закрывают тщательно пригнанной пробкой, соединяющей колбу с парообразователем с одной стороны, с другой — холодильником через каплеуловитель (во избежание переброса кислоты).

Образовавшийся в кислой среде формальдегид отгоняют с водяным паром через холодильник и собирают в приемной колбе со шлифом. Отгонку проводят до получения 100 — 200 см3 дистиллята.

После получения 100 см3 дистиллята проводят пробу на полноту отгонки формальдегида. Для этого 5 см3 дистиллята смешивают с 1 см3 концентрированной серной кислоты и прибавляют 5 см3 раствора фуксинсернистой кислоты. В присутствии формальдегида жидкость окрашивается в фиолетовый цвет.

Отгонку прекращают после получения отрицательной реакции на формальдегид.

К дистилляту в приемной колбе прибавляют 20 см3 раствора йода в йодистом калии 0,05 моль/дм3, 10 см3 раствора гидроокиси натрия 1 моль/дм3; колбу, плотно закрыв пробкой, взбалтывают и оставляют на 15 мин.

По истечении указанного времени содержимое колбы подкисляют 11 см3 раствора серной кислоты 0,5 моль/дм3, избыток йода оттитровывают раствором серноватистокислого натрия (тиосульфата) 0,1 моль/дм3 в присутствии раствора крахмала 10 г/дм3.

Параллельно проводят контрольный анализ со свежеперегнанной дистиллированной водой.

5.6.1.5 Обработка результатов

Массовую долю уротропина (X20) в процентах вычисляют по формуле

X_{20} = \frac{(V - V_{1}) \cdot K \cdot 0,00117 \cdot 100}{m} ,

где V — объем раствора серноватистокислого натрия 0,1 моль/дм3, израсходованный на титрование йода в контрольном анализе, см3;

V1 — объем раствора серноватистокислого натрия 0,1 моль/дм3, израсходованный на титрование йода, в рабочем анализе, см3;

K — коэффициент пересчета на точный раствор серноватистокислого натрия 0,1 моль/дм3;

0,00117 — количество уротропина, эквивалентное 1 см3 точного раствора серноватистокислого натрия 0,1 моль/дм3, г;

m — навеска икры, г.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

5.6.2 Определение уротропина (гексаметилентетрамина) колориметрическим методом

5.6.2.1 Сущность метода

Метод основан на способности формальдегида, образующегося при разложении уротропина в кислой среде, давать окрашенный комплекс с реактивом Нэша.

5.6.2.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Фотоэлектроколориметр или спектрофотометр с пределами измерения оптической плотности от 0 до 1,3 по ГОСТ 12083.

Электроплитка бытовая по ГОСТ 14919.

Баня водяная.

Термометр ртутный стеклянный лабораторный с пределами измерений от 0 до 200 °C по ГОСТ 215.

Ступка фарфоровая по ГОСТ 9147.

Чашка фарфоровая по ГОСТ 9147, вместимостью 50 — 100 см3.

Колбы мерные по ГОСТ 1770, вместимостью 25, 100, 200 и 1000 см3.

Колбы плоскодонные конические по ГОСТ 25336, вместимостью 250, 500, 1000 — 2000 см3.

Насадка Вюрца по ГОСТ 25336.

Аллонж по ГОСТ 25336.

Холодильник Либиха по ГОСТ 25336.

Трубка стеклянная диаметром 10 мм, длиной 1200 мм.

Бюретка по ГОСТ 20292, вместимостью 25 см3.

Пипетка по ГОСТ 20292, вместимостью 10 см3.

Магний сернокислый по ГОСТ 4523, ч.д.а.

Кислота лимонная моногидрат и безводная по ГОСТ 3652, х.ч.

Уротропин (гексаметилентетрамин) с массовой долей основного вещества не менее 990 г/дм3 (99%-ный) по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

Натрий двууглекислый по ГОСТ 4201, х.ч., раствор 1 моль/дм3 (1 н).

Кислота серная по ГОСТ 4204, х.ч., раствор 810 г/дм3 (81%-ный).

Динатриевая соль хромотроповой кислоты, раствор 5 г/дм3 (0,5%-ный) в дистиллированной воде (раствор в склянке с притертой пробкой хранится не более 5 сут).

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Аммоний уксуснокислый по ГОСТ 3117, ч.д.а.

Кислота уксусная по ГОСТ 61, х.ч.

Ацетилацетон по ГОСТ 10259, ч.д.а.

Бумага индикаторная «Рифан» или «Универсальная».

5.6.2.3 Приготовление растворов

Ацетилацетоновый реактив (реактив Нэша)

В мерной колбе вместимостью 1 дм3 растворяют в дистиллированной воде 150 г уксуснокислого аммония, добавляют 3 см3 ледяной уксусной кислоты, объем в колбе доводят водой до метки и перемешивают. Приготовленный раствор уксуснокислого аммония в склянке с притертой пробкой сохраняется 2 — 3 мес.

Для приготовления реактива Нэша к 100 см3 раствора уксуснокислого аммония добавляют 1 см3 ацетилацетона и тщательно перемешивают. Реактив Нэша годен для использования в течение 2 сут.

5.6.2.4 Проведение анализа

В фарфоровую ступку отвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,1 г от 7 до 8 г хорошо измельченной средней пробы икры и тщательно растирают с 2 г лимонной кислоты и 30 г сульфата магния.

Смесь количественно переносят в термостойкую колбу 2 вместимостью 500 см3 (черт. 6). Остатки из ступки смывают 10 см3 дистиллированной воды и обтирают небольшими кусочками чистой ваты или фильтровальной бумаги, которые помещают в ту же колбу.

Колбу 2 немедленно соединяют через насадку Вюрца 3 с колбой-парообразователем 1, в котором интенсивно кипит вода, и с холодильником 4.

Образующийся формальдегид отгоняют с водяным паром, собирая дистиллят в приемную колбу 7, соединенную с холодильником при помощи аллонжа 5 с обязательным отводом 6 для регулирования давления в системе.

После получения 100 см3 дистиллята проводят пробу на полноту отгонки формальдегида. Для этого 0,5 см3 дистиллята собирают в пробирку, смешивают с 0,5 см3 раствора хромотроповой кислоты 5 г/дм3 и добавляют 4 см3 раствора серной кислоты 810 г/дм3. В присутствии формальдегида смесь окрашивается в розовый или фиолетовый цвет. При отрицательной реакции на формальдегид отгонку прекращают.

Дистиллят нейтрализуют раствором двууглекислого натрия 1 моль/дм3 до pH 7 (по индикаторной бумаге) и количественно переносят дистиллированной водой в мерную колбу вместимостью 200 см3, объем в мерной колбе доводят до метки и тщательно перемешивают.

5.6. Методы определения уротропина

1 — парообразователь; 2 — отгонная колба; 3 — насадка Вюрца; 4 — водяной холодильник; 5 — аллонж с отводом; 6 — регулятор давления; 7 — приемная колба

Черт. 6

Для проведения цветной реакции отбирают пипеткой 1 см3 нейтрализованного дистиллята в мерную колбу вместимостью 25 см3 и добавляют 1 — 2 см3 реактива Нэша. Обмывают горло колбы 3 — 5 см3 дистиллированной воды, перемешивают содержимое и термостатируют 15 мин в водяной бане температурой 50 °C. По истечении указанного времени содержимое колбы охлаждают проточной водопроводной водой, доводят объем дистиллированной водой до метки и тщательно перемешивают.

Оптическую плотность окрашенных растворов измеряют в кюветах с рабочей длиной 10 мм фотоэлектроколориметром или спектрофотометром при длине волны 412 нм по отношению к контрольной пробе из 1 см3 дистиллированной воды и 1 см3 реактива Нэша, термостатированной 15 мин при 50 °C. Содержание уротропина, соответствующее определенной оптической плотности, рассчитывают по градуировочному графику.

5.6.2.5 Построение градуировочного графика

Готовят основной стандартный раствор уротропина. Для этого 1 г гексаметилентетрамина, взвешенного с абсолютной погрешностью не более 0,0001 г, количественно переносят дистиллированной водой в мерную колбу вместимостью 100 см3. После растворения уротропина объем в колбе доводят до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают. Отбирают пипеткой 10 см3 приготовленного раствора гексаметилентетрамина, вносят в колбу отгонного аппарата и после добавления 2 г лимонной кислоты и 30 г сульфата магния отгоняют формальдегид с водяным паром по п. 5.6.1.4.

Нейтрализованный и разведенный до 200 см3 дистиллят является основным стандартным раствором (с массовой концентрацией 0,5 г уротропина в 1 см3) и служит для приготовления серии рабочих стандартных растворов с различной концентрацией уротропина.

В 5 мерных колб вместимостью 100 см3 последовательно наливают из бюретки 2, 4, 6, 8 и 10 см3 основного стандартного раствора. Колбы доливают дистиллированной водой до метки и тщательно перемешивают. 1 см3 каждого из приготовленных растворов содержит 0,010; 0,020; 0,030; 0,040; 0,050 мг уротропина.

Из каждого из пяти растворов берут пипеткой по 1 см3 в мерные колбы вместимостью 25 см3 и приливают по 1 см3 реактива Нэша.

Все дальнейшие операции проводят по п. 5.6.2.4.

Подготовку серии стандартных растворов проводят три раза, начиная каждый раз с приготовления основного раствора гексаметилентетрамина. Для каждого раствора одной и той же концентрации берут среднее значение оптической плотности из трех измерений.

По полученным данным строят градуировочный график, откладывая на оси абсцисс количество уротропина, а на оси ординат — соответствующие оптические плотности.

5.6.2.6 Обработка результатов

Массовую долю уротропина в икре (X21) в процентах вычисляют по формуле

X_{21} = \frac{m \cdot V \cdot 100}{m_{1} \cdot V_{1} \cdot 1000} ,

где m — содержание уротропина, найденное по градуировочному графику, мг;

V — объем дистиллята после нейтрализации и разведения, см3;

V1 — объем разведенного дистиллята, взятый для цветной реакции, см3;

m1 — масса исследуемого образца, г;

1000 — коэффициент пересчета миллиграммов в граммы.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

5.7. Определение сорбиновой кислоты колориметрическим методом

5.7.1 Сущность метода

Метод основан на способности малонового альдегида, в который окисляется сорбиновая кислота в кислой среде, образовывать окрашенный комплекс с тиобарбитуровой кислотой.

5.7.2 Средства измерений, оборудование, реактивы, материалы

Фотоэлектроколориметр или спектрофотометр с пределами измерения оптической плотности от 0 до 1,3 по ГОСТ 12083.

Весы лабораторные с пределом допускаемой абсолютной погрешности взвешивания не более +/- 0,01 г по ГОСТ OIML.R 76-1-2011 или по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

Баня водяная.

Колбы мерные по ГОСТ 1770, вместимостью 500 и 100 см3.

Стаканы по ГОСТ 25336, вместимостью 150 см3.

Цилиндры мерные по ГОСТ 1770.

Воронки химические по ГОСТ 25336, диаметром 6 — 8 см.

Бюретки по ГОСТ 20292, вместимостью 25 см3.

Пипетки по ГОСТ 20292, вместимостью 5, 10, 15 см3.

Палочки стеклянные.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

Ареометр общего назначения по ГОСТ 18481 для определения плотности жидкости (\rho = 1000 - 1100\text{кг}/\text{м}^{3}) .

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962.

Кислота уксусная по ГОСТ 61.

Калий двухромовокислый по ГОСТ 4220, раствор 0,02 моль/дм3.

Кислота трихлоруксусная, водный раствор 200 г/дм3 (20%-ный).

Кислота сорбиновая (2,4 гексадиеновая) с массовой долей основного вещества не менее 99%.

Кислота тиобарбитуровая, свежеприготовленный раствор 0,02 моль/дм3.

Допускается применение аналогичных по метрологическим характеристикам средств измерений, аналогичного по техническим характеристикам оборудования и материалов с требованиями безопасности не ниже указанных в настоящем стандарте.

5.7.3 Приготовление реактивов

Раствор тиобарбитуровой кислоты

0,2880 г тиобарбитуровой кислоты переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3 90%-ной уксусной кислотой (\rho = 1066\text{кг}/\text{м}^{3}) . Колбу заполняют на 2/3 объема, содержимое слегка нагревают на водяной бане и взбалтывают. После растворения тиобарбитуровой кислоты объем жидкости в колбе доливают до метки уксусной кислотой и перемешивают. Приготовленный раствор тиобарбитуровой кислоты годен в течение одних суток.

Стандартный раствор сорбиновой кислоты

Навеску 0,1 г свежевозогнанной или свежеперекристаллизованной из спирта сорбиновой кислоты, взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,0001 г, количественно переносят дистиллированной водой в мерную колбу вместимостью 1000 см3, заполняют ее на 3/4 объема и энергично перемешивают. После полного растворения сорбиновой кислоты колбу доливают водой до метки и перемешивают содержимое.

1 см3 основного стандартного раствора содержит 0,1 мг сорбиновой кислоты.

5.7.4 Приготовление вытяжки из пробы продукции

В высокий стакан вместимостью 150 см3 помещают 1 г тщательно измельченной пробы исследуемой продукции (пробы с низким содержанием влаги необходимо измельчать до размера частиц не более 1 мм), взвешенной с абсолютной погрешностью не более 0,01 г, и растирают ее стеклянной палочкой с резиновым наконечником, постепенно приливая небольшими порциями 25 см3 дистиллированной воды. Полученную смесь выдерживают 25 мин при периодическом перемешивании.

В стакан добавляют 10 см3 водного раствора трихлоруксусной кислоты 200 г/дм3 и осторожно, во избежание вспенивания, нагревают содержимое до кипения при непрерывном помешивании. После 10 мин спокойного кипения горячую смесь фильтруют через смоченный водой бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 500 см3. При фильтровании применяют воронку с обогревом или поддерживают температуру фильтруемой смеси, помещая стакан в горячую водяную баню. Стакан и осадок на фильтре промывают 6 — 7 раз кипящей дистиллированной водой, собирая промывные воды в ту же мерную колбу.

Фильтрат проверяют на полноту осаждения белков, добавляя несколько капель 200 г/дм3 трихлоруксусной кислоты. При помутнении раствора проводят повторное осаждение белков трихлоруксусной кислотой и горячее фильтрование.

Жидкость должна занимать не более 1/2 объема колбы.

5.7.5 Проведение анализа

В колбу с фильтратом приливают 10 см3 раствора двухромовокислого калия 0,02 моль/дм3 и 15 см3 раствора тиобарбитуровой кислоты 0,02 моль/дм3.

После тщательного перемешивания колбу помещают в кипящую водяную баню и выдерживают 30 мин. Уровень воды в бане должен быть выше уровня жидкости в колбах. По истечении указанного времени колбу охлаждают на воздухе или в проточной воде, объем раствора доводят дистиллированной водой до метки, жидкость перемешивают. Одновременно проводят контрольный анализ, используя все реактивы без вытяжки из пробы продукции.

Оптическую плотность окрашенного раствора измеряют спектрофотометром или фотоэлектроколориметром при длине волны 532 нм в кюветах с рабочей длиной 10 мм по отношению к контрольному раствору. Содержание сорбиновой кислоты, соответствующее определенной оптической плотности, рассчитывают по градуировочному графику.

Окраска раствора устойчива и сохраняется в течение нескольких часов.

5.7.6 Построение градуировочного графика

В мерные колбы вместимостью 500 см3 последовательно вносят из бюретки основной стандартный раствор сорбиновой кислоты в количествах, указанных в табл. 5.

Таблица 5

Номер колбы	Количество основного стандартного раствора, см3	Количество сорбиновой кислоты, мг
1	5	0,5
2	10	1,0
3	15	1,5
4	20	2,0
5	25	2,5
Контрольный анализ	0	0

В каждую колбу приливают по 10 см3 раствора трихлоруксусной кислоты 200 г/дм3, разбавляют содержимое дистиллированной водой до 1/2 объема колбы и проводят все дальнейшие операции в соответствии с п. 5.7.5.

Оптическую плотность окрашенных растворов измеряют спектрофотометром или фотоэлектроколориметром при длине волны 532 нм.

Подготовку серии растворов для построения градуировочного графика проводят три раза, начиная каждый раз с приготовления основного раствора сорбиновой кислоты. Для каждого раствора одинаковой концентрации берут среднее значение оптической плотности трех измерений.

По полученным данным строят градуировочный график, откладывая на оси абсцисс количество сорбиновой кислоты, на оси ординат — соответствующие оптические плотности.

5.7.7 Обработка результатов

Массовую долю сорбиновой кислоты в продукте (X22) в процентах вычисляют по формуле

X_{22} = \frac{m_{1} \cdot 100}{m \cdot 1000} ,

где m — масса пробы продукции, взятая для приготовления вытяжки, г;

m1 — содержание сорбиновой кислоты, найденное по градуировочному графику, мг;

1000 — коэффициент пересчета миллиграммов в граммы.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

5.8 Определение тяжелых металлов (олова и свинца) — по ГОСТ 5370.

5.9. Определение наличия песка

5.9.1 Сущность метода

Метод основан на термохимической минерализации (сжигание, обработка соляной кислотой) навески икры и весовом определении песка.

5.9.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Электроплитка бытовая по ГОСТ 14919.

Баня водяная.

Шкаф сушильный по ГОСТ 13474.

Электропечь сопротивления лабораторная по ГОСТ 13474.

Эксикатор по ГОСТ 25336.

Ступка фарфоровая по ГОСТ 9147.

Чашка фарфоровая по ГОСТ 9147.

Тигель фарфоровый по ГОСТ 9147.

Колба коническая по ГОСТ 25336, вместимостью 250 см3.

Воронка стеклянная по ГОСТ 25336.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

Фильтр обеззоленный.

Кислота соляная по ГОСТ 3118, раствор 100 г/дм3 (10%-ный).

5.9.3 Проведение анализа

20 — 50 г измельченной икры, взвешенных с абсолютной погрешностью не более 0,01 г, подсушивают в фарфоровой чашке или большом тигле в сушильном шкафу, затем обугливают на плитке или в муфельной печи. Уголь выщелачивают горячей водой и фильтруют. Фильтр с осадком озоляют. Золу обрабатывают раствором соляной кислоты 100 г/дм3 в течение 30 мин на кипящей водяной бане и фильтруют через обеззоленный фильтр. Осадок на фильтре промывают горячей водой до исчезновения реакции на хлор (проба с раствором азотнокислого серебра). Фильтр вместе с осадком сжигают и прокаливают в предварительно взвешенном фарфоровом тигле. Тигель охлаждают в эксикаторе и взвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,001 г.

5.9.4 Обработка результатов

Массовую долю песка (X23) в процентах вычисляют по формуле

X_{23} = \frac{(m_{2} - m_{1}) \cdot 100}{m} ,

где m — масса икры, г;

m1 — масса тигля, г;

m2 — масса тигля с прокаленным осадком, г.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

6. МЕТОДЫ АНАЛИЗА КОНЦЕНТРАТОВ, БЕЛКОВОЙ МАССЫ, БУЛЬОНОВ, ГИДРОЛИЗАТОВ И ПАСТ

6.1 Подготовка средней пробы к анализу — по п. 2.4.

6.2 Определение воды — по п. 3.3.1.

6.3. Определение жира — по пп. 3.7.1; 3.7.2; 3.7.4.

Для жидких продуктов навеску массой 3 — 5 г, взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,001 г, предварительно высушенную с песком до постоянной массы, переносят в фарфоровую ступку и растирают до получения тонкого порошка, который количественно переносят в пакет для дальнейшей экстракции эфиром.

6.4. Определение общего азота — по пп. 8.9.1; 8.9.2; 8.9.4.

Пересчет на белковые вещества не проводят.

6.5. Методы определения аминного азота

6.5.1 Определение аминного азота осаждением фосфатом меди

6.5.1.1 Сущность метода

Метод основан на осаждении белка фосфатом меди и титриметрическом определении аминного азота в фильтрате.

6.5.1.2 Аппаратура, реактивы и материалы

Колбы мерные по ГОСТ 1770, вместимостью 50, 100, 1000 см3.

Пипетки градуированные по ГОСТ 20292, вместимостью 2, 5, 10, 20 см3.

Бюретка по ГОСТ 20292, вместимостью 50 см3.

Воронки по ГОСТ 25336.

Колбы конические по ГОСТ 25336, вместимостью 100 см3.

Цилиндры мерные по ГОСТ 1770, вместимостью 50 и 250 см3.

Капельница лабораторная по ГОСТ 25336.

Фильтры бумажные с синей лентой.

Кислота соляная, х.ч., по ГОСТ 3118, плотностью 1119 кг/м3.

Кислота уксусная, х.ч., по ГОСТ 61 ледяная.

Потенциометр постоянного тока по ГОСТ 9245.

Калий йодистый, х.ч., по ГОСТ 4232, раствор 100 г/дм3 (10%-ный).

Крахмал растворимый по ГОСТ 10163, раствор 10 г/дм3 (1%-ный).

Натрий серноватистокислый (тиосульфат) по СТ СЭВ 223, раствор 0,01 моль/дм3 (0,01 н).

Натрий тетраборнокислый (бура), х.ч., по ГОСТ 4199.

Натрия гидроокись, ч.д.а., по ГОСТ 4328, раствор 0,5 моль/дм3 (0,5 н).

Натрий фосфорнокислый трехзамещенный, ч.д.а, по ГОСТ 201.

Натрий фосфорнокислый двузамещенный 12-водный по ГОСТ 4172.

Медь двухлористая 2-водная, ч.д.а., по ГОСТ 4167.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Тимолфталеин, раствор 2,5 г/дм3 (0,25%-ный) в 50%-ном этиловом спирте.

6.5.1.3 Приготовление растворов

Раствор хлорной меди

27,3 г хлорной меди растворяют в 500 см3 дистиллированной воды, перемешивают и доводят объем до 1000 см3 дистиллированной водой.

Раствор фосфата натрия

68,5 г трехзамещенного фосфорнокислого натрия растворяют в 500 см3 дистиллированной воды, перемешивают и доводят объем до 1000 см3 или 64,5 г двузамещенного 12-водного фосфорнокислого натрия растворяют в 500 см3 дистиллированной воды, освобожденной кипячением от углекислого газа, добавляют 7,2 г гидроокиси натрия и доводят объем до 1000 см3 дистиллированной водой.

Боратный буферный раствор

28,6 г тетрабората натрия растворяют в 750 см3 дистиллированной воды, добавляют 50 см3 раствора соляной кислоты 1 моль/дм3 (1 н) и доводят объем дистиллированной водой до 1000 см3 (pH 8,8).

Суспензия фосфата меди

Смешивают один объем раствора хлорида меди с двумя объемами раствора фосфата натрия и приливают два объема боратного буфера.

Суспензия готовится перед началом работы.

6.5.1.4 Проведение анализа

В мерную колбу вместимостью 50 см3 помещают 0,2 — 0,3 г упаренного или 0,10 — 0,15 г сухого гидролизата, отвешенного с абсолютной погрешностью не более 0,001 г, добавляют 4 см3 воды, 5 капель тимолфталеина и по каплям раствор 0,5 моль/дм3 гидроокиси натрия до слабо-голубого окрашивания (pH 10,2). После этого в колбу добавляют 20 см3 суспензии фосфата меди, хорошо перемешивают. При исчезновении осадка добавляют еще 5 см3 суспензии, объем в колбе доводят до метки дистиллированной водой, энергично перемешивают и фильтруют через плотный фильтр. Фильтрат должен быть абсолютно прозрачным.

В две колбы отмеряют по 10 см3 фильтрата, подкисляют 0,4 см3 ледяной уксусной кислоты, добавляют 7,5 см3 раствора йодида калия 100 г/дм3 и титруют выделившийся йод раствором 0,01 моль/дм3 тиосульфата натрия. В процессе титрования, когда раствор примет соломенно-желтую окраску, добавляют 1,5 см3 крахмала (появляется синяя окраска) и продолжают титрование до исчезновения синей окраски.

Одновременно проводят контрольное определение без исследуемого раствора.

6.5.1.5 Обработка результатов

Массовую долю аминного азота (X24) в процентах вычисляют по формуле

X_{24} = \frac{(V - V_{1}) \cdot 0,28 \cdot K \cdot V_{2} \cdot 100}{V_{3} \cdot m \cdot 1000} ,

где V — объем раствора тиосульфата натрия 0,01 моль/дм3, пошедший на титрование исследуемого образца, см3;

V1 — объем раствора тиосульфата натрия 0,01 моль/дм3, пошедший на титрование контрольного образца, см3;

K — коэффициент пересчета на точный раствор 0,01 моль/дм3 тиосульфата натрия;

V2 — объем приготовленного раствора, см3;

V3 — объем фильтрата, взятый на титрование, см3;

0,28 — количество аминного азота, соответствующее 1 см3 точного раствора 0,01 моль/дм3 тиосульфата натрия, мг;

m — масса исследуемого образца, г

1000 — коэффициент пересчета мг в г.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, расхождения между которыми не должны превышать 0,2%.

Вычисление проводят до третьего десятичного знака.

6.5.2 Определение аминного азота формольным титрованием

6.5.2.1 Сущность метода

Метод основан на связывании аминных групп с формалином и косвенном определении их количества по результатам титрования карбоксильных групп.

6.5.2.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Потенциометр постоянного тока измерительный с пределами измерений значений pH от 0 до 14 по ГОСТ 9245.

Стаканы стеклянные лабораторные по ГОСТ 25336, вместимостью 50, 100 см3.

Пипетки по ГОСТ 20292, вместимостью 2, 20 см3.

Цилиндр мерный по ГОСТ 1770, вместимостью 10 см3.

Колба мерная по ГОСТ 1770, вместимостью 100 см3.

Бюретка по ГОСТ 20292, вместимостью 25 см3.

Мешалка магнитная.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, раствор 0,1 моль/дм3 (0,1 н) и 0,02 моль/дм3 (0,02 н).

Формалин по ГОСТ 1625, раствор 400 г/дм3 (40%-ный).

Кислота серная по ГОСТ 4204, раствор 0,05 моль/дм3 (0,1 н).

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962.

Индикатор смешанный (Таширо).

6.5.2.3 Приготовление реактивов

Нейтрализованный формалин

Формалин нейтрализуется в день анализа раствором 0,1 моль/дм3 (0,1 н) гидроокиси натрия до pH = 7.

Индикатор смешанный

0,12 г метилового красного и 0,08 г метиленового синего растворяют отдельно в небольшом количестве спирта 900 г/дм3 (90%-ного). Растворы сливают в мерную колбу вместимостью 100 см3, объем доводят спиртом до метки.

6.5.2.4 Проведение анализа

Сначала проводят контрольное титрование.

В стеклянный стакан наливают 20 см3 дистиллированной воды, помещают магнит. В стакан помещают электроды, приливают 10 см3 нейтрализованного формалина, включают мешалку и титруют жидкость раствором 0,02 моль/дм3 гидроокиси натрия до pH = 9.

При проведении рабочего анализа в стакан вместимостью 50 см3 помещают 0,2 — 0,3 г исследуемого образца, взвешенного с абсолютной погрешностью не более 0,001 г, и доводят объем дистиллированной водой до 20 см3. В стакан опускают магнит, электроды.

Раствор нейтрализуют 0,1 моль/дм3 гидроокиси натрия до pH 6,8 — 7,0.

При работе с очень кислым гидролизатом (pH 1,0) начинать нейтрализацию удобнее раствором 1 моль/дм3 (1 н) гидроокиси натрия, постепенно переходя к концентрации 0,1 моль/дм3 и 0,02 моль/дм3.

По окончании нейтрализации в гидролизат добавляют 10 см3 формалина (pH 4,5 — 5,5) и титруют раствором 0,02 моль/дм3 (0,02 н) гидроокиси натрия до pH 9.

6.5.2.5 Обработка результатов

Массовую долю аминного азота (X25) в процентах вычисляют по формуле

X_{25} = \frac{(V - V_{1}) \cdot K \cdot 0,28 \cdot 100}{m \cdot 1000} ,

где V — объем раствора гидроокиси натрия 0,02 моль/дм3, пошедший на титрование исследуемого образца, см3;

V1 — объем раствора гидроокиси натрия 0,02 моль/дм3, пошедший на титрование контрольного образца, см3;

K — коэффициент пересчета на точный раствор 0,02 моль/дм3 гидроокиси натрия;

0,28 — количество аминного азота, соответствующее 1 см3 раствора 0,02 моль/дм3 гидроокиси натрия, мг;

1000 — коэффициент пересчета мг в г;

m — навеска исследуемого образца, г.

6.6. Определение хлористого натрия (поваренной соли) — по п. 3.5.1.

Навеску образца гидролизата 0,2 — 0,3 г отвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,001 г и дальше проводят определение по п. 3.5.1.3.

6.7 Определение золы — по п. 11.6.

6.8. Определение перекиси водорода в белковой массе

6.8.1 Сущность метода

Метод основан на извлечении перекиси водорода из навески белковой массы водой и количественном определении ее титрованием.

6.8.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Колбы конические по ГОСТ 25336, вместимостью 100 и 250 см3, по ГОСТ 1770.

Колба мерная по ГОСТ 1770, вместимостью 100 см3.

Колбы конические по ГОСТ 25336, вместимостью 100 и 250 см3.

Пипетка по ГОСТ 20292, вместимостью 5 и 10 см3.

Бюретка по ГОСТ 20292, вместимостью 25 см3.

Воронка стеклянная по ГОСТ 25336, диаметром 50 — 70 мм.

Калий марганцовокислый по ГОСТ 20490, раствор 0,01 моль/дм3 (0,05 н).

Кислота серная по ГОСТ 4204, раствор 100 — 150 г/дм3 (10 — 15%-ный).

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

6.8.3 Проведение анализа

Навеску анализируемого продукта массой от 9 до 10 г, взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,1 г, количественно переносят дистиллированной водой через воронку в мерную колбу вместимостью 100 см3. Количество воды должно быть не более 2/3 объема колбы. Содержимое колбы перемешивают и настаивают в течение 10 мин, периодически взбалтывая. В колбу доливают дистиллированную воду до метки, содержимое перемешивают и фильтруют через бумажный фильтр в чистую сухую колбу. Отбирают пипеткой в коническую колбу 10 см3 фильтрата, приливают 5 см3 серной кислоты 100 — 150 г/дм3 и титруют раствором 0,01 моль/дм3 перманганата калия до появления слабо-розовой окраски.

Одновременно проводят контрольный анализ с навеской исследуемого продукта до обработки его перекисью водорода.

6.8.4 Обработка результатов

Массовую долю перекиси водорода в белковой массе (X26) в процентах вычисляют по формуле

X_{26} = \frac{(V - V_{1}) \cdot K \cdot 0,00085 \cdot V_{2} \cdot 100}{m \cdot V_{3}} ,

где V — объем раствора марганцовокислого калия 0,01 моль/дм3, пошедший на титрование 10 см3 рабочего образца, см3;

V1 — объем раствора марганцовокислого калия 0,01 моль/дм3, пошедший на титрование 10 см3 контрольного образца, см3;

V2 — объем вытяжки, см3;

V3 — объем фильтрата, взятый для титрования, см3;

K — коэффициент пересчета на точный раствор 0,01 моль/дм3 перманганата калия;

0,00085 — количество перекиси водорода, соответствующее 1 см3 0,01 моль/дм3 раствора перманганата калия, г;

m — навеска исследуемого образца, г.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

6.9. Определение растворимости белка в воде

6.9.1 Сущность метода

Метод основан на извлечении из белка водорастворимой фракции, обезвоживании нерастворимой части центрифугированием, выпариванием, высушиванием и весовом определении ее.

6.9.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Центрифуга по ГОСТ 3585.

Шкаф сушильный по ГОСТ 13474.

Эксикатор по ГОСТ 25336.

Стаканчики для взвешивания (бюксы) с притертой крышкой по ГОСТ 25336.

Колба мерная по ГОСТ 1770, вместимостью 250 см3.

Пипетка по ГОСТ 20292, вместимостью 20 см3.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

6.9.3 Проведение анализа

Навеску рыбного белка (с известной массовой долей воды) массой от 4,5 до 5 г растирают в ступке с небольшим количеством дистиллированной воды в течение 3 — 5 мин и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 250 см3. Колбу доливают водой до метки и, закрыв пробкой, содержимое взбалтывают, переворачивая колбу 10 — 15 раз. Содержимое колбы центрифугируют в течение 20 мин со скоростью 1000 об/мин. Пипеткой отбирают 20 см3 центрифугата и переносят в предварительно высушенную и тарированную бюксу.

Бюксу с центрифугатом помещают в сушильный шкаф и выпаривают жидкость при температуре не выше 70 °C.

Остаток в бюксе сушат еще 2 ч при температуре 100 — 105 °C, затем охлаждают в эксикаторе и взвешивают.

6.9.4 Обработка результатов

Растворимость рыбного белка (X27) в процентах вычисляют по формуле

X_{27} = \frac{m_{1} \cdot 100 \cdot V_{1} \cdot 100}{m_{2} \cdot V_{2}(100 - m)} ,

где m — массовая доля воды в рыбном белке, %;

m1 — масса сухого остатка после выпаривания 20 см3 центрифугата, г;

m2 — масса рыбного белка, г;

V1 — объем раствора в мерной колбе, см3;

V2 — объем центрифугата, отобранный для высушивания, см3.

Вычисления проводят до единицы.

6.10. Определение прозрачности и растворимости гидролизата

6.10.1 Сущность метода

Метод основан на визуальном определении прозрачности гидролизата в проходящем свете и растворимости.

6.10.2 Проведение анализа

5 г гидролизата, отвешенных с абсолютной погрешностью не более 0,01 г, растворяют, помешивая, в 250 см3 дистиллированной воды температурой 18 — 20 °C.

Прозрачность раствора и отсутствие нерастворимого осадка определяют визуально.

6.11. Определение растворимости концентрата (бульонных таблеток)

Таблетку концентрата растворяют в 200 см3 горячей воды температурой 70 — 80 °C, перемешивая стеклянной палочкой.

Отсутствие нерастворимого осадка определяют визуально.

6.12. Определение азота летучих оснований — по пп. 3.2.1; 3.2.2.

6.13 Определение общей кислотности — по ГОСТ 8756.15.

6.14. Определение активной кислотности гидролизата (pH)

Навеску гидролизата разводят дистиллированной водой в соотношении 1:10 и определяют активную кислотность по ГОСТ 8756.16.

6.15 Определение тяжелых металлов — по ГОСТ 5370.

7. МЕТОДЫ АНАЛИЗА ЖИРОВ, КРИСТАЛЛИЧЕСКОГО СПЕРМАЦЕТА, ЖИДКИХ ВИТАМИННЫХ ПРЕПАРАТОВ И СЫРЬЯ ДЛЯ ИХ ПРОИЗВОДСТВА

7.1. Подготовка средней пробы к анализу — по пп. 2.5 и 2.12.

7.2. Методы определения цвета жира

7.2.1 Определение цвета жира визуально

7.2.1.1 Сущность метода

Метод основан на визуальном определении цвета жира в проходящем дневном свете.

7.2.1.2 Аппаратура, материалы

Стакан химический бесцветного стекла по ГОСТ 25336, диаметром 50 — 100 мм.

Термометр ртутный стеклянный лабораторный с пределами измерений от 0 до 200 °C по ГОСТ 215.

Электроплитка бытовая по ГОСТ 14919.

7.2.1.3 Проведение анализа

Часть профильтрованной средней пробы или жидкого витаминного препарата наливают в стакан диаметром 50 — 100 мм из бесцветного стекла (слабоокрашенный жир или препарат наливают в стакан диаметром 100 мм).

Жир или жидкий витаминный препарат нагревают до температуры, при которой проводится определение прозрачности, и рассматривают в проходящем дневном свете, определяя цвет и оттенок.

7.2.2 Определение цвета жира цветомером ВНИИЖ-16

7.2.2.1 Сущность метода

Метод основан на сравнении цвета жира с цветом стандартных стеклянных фильтров.

7.2.2.2. Цвет жира определяют цветомером ВНИИЖ-16 <*> и выражают числом красных единиц при 35 желтых. При этом цвет одной половины поля зрения, освещенной световым потоком, прошедшим через слой жира, сравнивают с цветом другой половины поля зрения, которая может быть освещена световым потоком переменного цвета. Изменения цвета последнего достигают при помощи набора светофильтров, выделяющих световые потоки определенной величины и цвета. Величину светового потока и его цвет измеряют в условных цветовых единицах.

<*> Цвет всех видов жиров допускается определять на других приборах, дающих сопоставимые результаты.

7.2.2.3 Аппаратура, реактивы

Цветомер ВНИИЖ-16 (черт. 7).

Растворитель.

7.2. Методы определения цвета жира

1 — кювета для масла толщиной 10 мм; 2 — набор желтых светофильтров; 3 — набор красных светофильтров; 4 — кожух призмы; 5 — окуляр; 6 — ручка перемещения клина; 7 — набор нейтральных светофильтров; 8 — верхнее и нижнее окна прибора; 9 — кювета для масла толщиной 130 мм; 10 — кювета для масла толщиной 50 мм

Черт. 7

Цветомер ВНИИЖ-16 состоит из корпуса с вмонтированной оптической системой цветных фильтров, осветителя, основными частями которого являются кожух с белой, рассеивающей свет, поверхностью экрана, двух ламп накаливания, набора кювет различной длины.

Прибор предназначен для измерения цвета жира, выражаемого числом красных единиц в интервале от 2 до 70 при 20 — 125 желтых.

В световой поток, прошедший через верхнее окно прибора, могут быть введены:

желтые фильтры, выделяющие потоки, равные 20, 35 и 70 единицам желтого цвета;

красные фильтры, выделяющие потоки, равные 10, 20 и 30 единицам красного цвета;

двойной клин, позволяющий получать переменные световые потоки в интервале 1 — 10 единиц красного цвета.

Правая половина поля зрения освещается потоком, прошедшим через слой жира, левая — через систему цветных фильтров.

Прибор должен быть установлен перед осветителем так, чтобы освещенность полей зрения окуляра была одинаковой. При правильной установке граница между полями должна быть отчетливо видна.

7.2.2.4 Подготовка пробы

Пробу анализируемого жира нагревают до температуры, при которой предусмотрено определение его прозрачности. При заполнении кюветы жиром не должно быть воздушных пузырьков.

7.2.2.5 Проведение анализа

Заполненную жиром кювету с толщиной слоя 50 мм ставят перед нижним окном прибора и, введя в поток желтый фильтр, уравнивают окраску обеих половин поля зрения перемещением клина. Измерения проводят с таким желтым фильтром (или суммой фильтров), с которым наилучшим образом выравнивается окраска.

Если перемещением клина не достигается равенство окраски, вводят последовательно дополнительные красные фильтры 10, 20 и 30 единиц красного цвета. В этом случае к отсчету, полученному по шкале красного клина, добавляют соответствующее число красных единиц. Значение цвета получают как среднее арифметическое 3 — 5 измерений.

Перед заполнением кюветы новой порцией жира и после окончания измерений кювету промывают растворителем или теплой водой с мылом и высушивают при слабом нагревании.

Разборка цветомера ЦНИИЖ-16 не допускается, так как при этом нарушается юстировка прибора и градуировка его шкалы.

7.2.3 Определение цвета жира спектрофотометром или фотоэлектроколориметром (кроме жира лососевых и окуневых рыб)

7.2.3.1 Сущность метода

Метод основан на определении величины оптической плотности жира.

7.2.3.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Фотоэлектроколориметр или спектрофотометр с пределами измерений оптической плотности от 0 до 1,3 по ГОСТ 12083.

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962.

Эфир медицинский по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

Колба плоскодонная по ГОСТ 25336, вместимостью 100 см3.

Воронка стеклянная по ГОСТ 25336.

Термометр стеклянный технический по ГОСТ 2823 с пределом измерений температуры от 0 до плюс 150 °C.

7.2.3.3 Проведение анализа

Пробу анализируемого жира при необходимости нагревают до температуры, при которой предусмотрено определение его прозрачности, и фильтруют через бумажный фильтр. Профильтрованный жир наливают в кювету с рабочей длиной 3 — 10 мм (в зависимости от цвета жира) и определяют оптическую плотность при длине волны 440 нм по сравнению с пустой кюветой. Если после фильтрации жир остается непрозрачным, его нагревают до 40 °C.

Перед заполнением кюветы новой порцией жира и после окончания измерения его оптической плотности кювету промывают спиртоэфирной смесью (1:2) и высушивают.

7.2.3.4 Обработка результатов

Оптическую плотность (El) в относительных единицах, характеризующую цвет жира, вычисляют по формуле

E_{l} = \frac{E}{l} ,

где E — оптическая плотность исследуемого жира;

l — рабочая длина кюветы, мм.

Вычисление проводят до третьего десятичного знака.

Цвет жира, соответствующий полученному значению оптической плотности, устанавливают по табл. 6.

Таблица 6

Цвет жира	Величина оптической плотности (El)
Светло-желтый	До 0,6
Желтый	Св. 0,6 до 0,8
Темно-желтый (или светло-коричневый)	Св. 0,8 до 2,0
Коричневый	Св. 2,0 до 3,0
Темный	Св. 3,0

7.3. Определение прозрачности жира

7.3.1 Сущность метода

Метод основан на визуальном определении прозрачности жира, нагретого до требуемой температуры, в проходящем и отраженном свете.

7.3.2 Аппаратура

Баня водяная.

Цилиндр мерный по ГОСТ 1770, вместимостью 100 см3.

Стакан химический по ГОСТ 25336, вместимостью 200 — 300 см3.

Термостат.

Термометр ртутный стеклянный лабораторный с пределами измерений от 0 до 200 °C по ГОСТ 215.

Палочка стеклянная.

7.3.3 Проведение анализа

Перед анализом жир, помещенный в химический стакан, осторожно нагревают на водяной бане до температуры 60 — 70 °C (медицинский рыбий жир должен иметь температуру 5 °C).

100 см3 жира переносят в цилиндр, медленно охлаждают при непрерывном перемешивании стеклянной палочкой до температуры, предусмотренной для определения прозрачности, и выдерживают в течение 3 ч при установленной температуре, периодически помешивая через каждые 15 мин.

По истечении указанного времени жир рассматривают в проходящем и отраженном свете на белом фоне.

Жир считается прозрачным, если в нем нет мути или взвешенных частиц.

7.4. Определение относительной плотности жира пикнометром

7.4.1 Сущность метода

Метод основан на определении отношения массы жира к массе воды при установленных для них температурах.

7.4.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Пикнометры стеклянные по ГОСТ 22524, градуированные при температуре 20 °C.

Термометр ртутный стеклянный лабораторный с пределами измерений от 0 до 200 °C по ГОСТ 215.

Баня водяная.

Пипетки по ГОСТ 20292.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

7.4.3 Проведение анализа

Пикнометр тщательно промывают хромовой смесью, водой, спиртом, просушивают и взвешивают на аналитических весах.

Для определения массы воды (водного числа) взвешенный пикнометр наполняют выше метки дистиллированной водой. Температуру воды доводят до 20 °C погружением пикнометра в водяную баню данной температуры на 20 — 30 мин, после чего доводят уровень воды в пикнометре до метки удалением излишка ее с помощью полосок фильтровальной бумаги.

Пикнометр вынимают из бани, тщательно вытирают снаружи и взвешивают.

После удаления воды пикнометр высушивают, вновь взвешивают, наполняют профильтрованным жиром (с некоторым избытком), доводят до температуры 20 °C (или указанной в стандарте на данный вид жира) погружением в водяную баню, имеющую ту же температуру, и выдерживают в ней пикнометр до тех пор, пока уровень мениска не перестанет изменяться. Избыток жира отбирают фильтровальной бумагой, свернутой в тонкую трубочку. После этого пикнометр с жиром тщательно вытирают и взвешивают.

7.4.4 Обработка результатов

Относительную плотность жира (\rho_{20}^{20}) вычисляют по формуле

\rho_{20}^{20} = \frac{m_{2} - m}{m_{1} - m} ,

где m — масса пустого пикнометра, г;

m1 — масса пикнометра с водой, г;

m2 — масса пикнометра с жиром, г.

Относительную плотность \rho_{4}^{20} вычисляют по формуле

\rho_{4}^{20} = \rho_{20}^{20} \cdot 0,9982 ,

где \rho_{20}^{20} — относительная плотность жира, определенная при 20 °C;

0,9982 — плотность воды при 20 °C.

Вычисление проводят до третьего десятичного знака.

7.5. Определение примесей нежирового характера (отстоя) объемным методом в жире-полуфабрикате

7.5.1 Сущность метода

Метод основан на осаждении из жира в период отстаивания веществ нежирового характера, имеющих большую плотность, и определении их количества измерением объема.

7.5.2 Проведение анализа

После тщательного перемешивания пробы отбирают 100 см3 жира и вносят его в стеклянный мерный цилиндр вместимостью 100 см3, оставляют на 24 ч, после чего измеряют объем, занимаемый отстоем.

Определение проводят при температуре, установленной стандартом на исследуемый жир. Количество отстоя выражают в объемных единицах.

7.6. Определение примесей нежирового характера, исключая воду

7.6.1 Сущность метода

Метод основан на растворении жировой фракции липидов органическим растворителем, отделении веществ нежирового характера фильтрованием, обезвоживании их высушиванием и определении массы взвешиванием.

7.6.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Шкаф сушильный по ГОСТ 13474.

Колбы конические по ГОСТ 25336, вместимостью 250 — 300 см3.

Секундомер механический по ГОСТ 5072.

Эксикатор по ГОСТ 25336.

Бюксы по ГОСТ 25336.

Термометр ртутный стеклянный лабораторный с пределами измерений от 0 до 200 °C по ГОСТ 215.

Палочка стеклянная.

Воронка стеклянная по ГОСТ 25336, диаметром 100 мм.

Воронка для горячего фильтрования.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

Эфир петролейный температурой кипения 40 — 60 °C или бензин-растворитель для резиновой промышленности температурой кипения до 90 °C по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

7.6.3 Проведение анализа

Из разогретой и тщательно перемешанной пробы жира в коническую колбу вместимостью 250 — 300 см3 отбирают с абсолютной погрешностью не более 0,01 г навеску массой 50 г и растворяют в равном объеме петролейного эфира или бензина. Полученный раствор фильтруют через предварительно доведенный до постоянной массы при 100 — 105 °C фильтр. Колбу тщательно промывают эфиром или бензином, который фильтруют через тот же фильтр. Остаток на фильтре промывают небольшими порциями эфира или бензина до полного удаления жира, после чего фильтр с остатком в той же бюксе высушивают до постоянной массы при 100 — 105 °C.

При отсутствии бензина или достаточного количества петролейного эфира навеску жира фильтруют через воронку для горячего фильтрования при температуре не выше 60 °C, остаток на фильтре промывают петролейным или серным эфиром, после чего фильтр с остатком доводят до постоянной массы при 100 — 105 °C.

7.6.4 Обработка результатов

Массовую долю примесей в жире (X28) в процентах вычисляют по формуле

X_{28} = \frac{(m_{2} - m_{1}) \cdot 100}{m} ,

где m — навеска жира, г;

m1 — масса высушенного бумажного фильтра с бюксой, г;

m2 — масса бумажного фильтра с высушенным остатком и бюксой, г.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

7.7 Определение воды — по п. 3.3.3.

7.8. Определение температуры плавления спермацета

7.8.1 Сущность метода

Метод основан на визуальном определении момента начала движения жира в капилляре под давлением столба воды.

7.8.2 Аппаратура

Баня водяная.

Термометр ртутный стеклянный лабораторный с пределами измерений от 0 до 200 °C по ГОСТ 215.

Стакан химический по ГОСТ 25336.

Трубка капиллярная стеклянная с внутренним диаметром 1,0 — 1,5 мм и длиной 100 — 120 мм.

Секундомер механический по ГОСТ 5072.

7.8.3 Проведение анализа

Для наполнения спермацетом тонкостенной капиллярной трубки с внутренним диаметром 1,0 — 1,5 мм и длиной 100 — 120 мм (предварительно хорошо вымытой и высушенной) опускают конец капилляра в расплавленный на водяной бане спермацет и заполняют его на 10 — 20 мм по высоте.

Заполненный капилляр охлаждают холодной водой. Капилляр с застывшим спермацетом прикрепляют к термометру так, чтобы столбик спермацета находился против шарика, и погружают термометр с капилляром в химический стакан с водой, предварительно нагретой до температуры 25 °C.

Ртутный резервуар термометра помещают ниже поверхности воды на 4 см и осторожно, перемешивая воду мешалкой, нагревают ее.

Показания термометра в момент, когда спермацет под напором столба воды поднимается в капилляре вверх, принимают за температуру плавления.

Температуру водяной бани поднимают со скоростью не более 1 °C в мин. Около точки перехода спермацета в жидкое состояние скорость повышения температуры должна быть не более 0,5 — 0,75 °C в мин.

7.9. Определение кислотного числа

7.9.1 Сущность метода

Метод основан на взаимодействии свободных жирных кислот, содержащихся в 1 г жира, с гидроокисью калия.

7.9.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Секундомер механический по ГОСТ 5072.

Баня водяная.

Колбы конические с притертой пробкой по ГОСТ 25336, вместимостью 250 см3.

Колба коническая с боковой отводной трубкой.

Капельница по ГОСТ 25336.

Цилиндр мерный по ГОСТ 1770, вместимостью 50 см3.

Холодильник стеклянный лабораторный (обратный) по ГОСТ 25336.

Бюретки по ГОСТ 20292, вместимостью 25 и 50 см3.

Фенолфталеин по ГОСТ 5850, спиртовой раствор 10 г/дм3 (1%-ный).

Калия гидроокись по ГОСТ 24363, раствор 0,1 моль/дм3 (0,1 н) или натрия гидроокись по ГОСТ 4328, раствор 0,1 моль/дм3 (0,1 н).

Эфир медицинский по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962.

Алкалиблау 6Б.

Тимолфталеин, спиртовой раствор 10 г/дм3 (1%-ный).

7.9.3 Проведение анализа

В коническую колбу вместимостью 250 см3 отвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,01 г (в зависимости от ожидаемого кислотного числа) 2 — 10 г профильтрованного жира или 1 — 2 г препарата «Витамин A в жире», или концентрата витамина A, приливают 30 — 50 см3 нейтрализованной (по тому индикатору, с которым проводится титрование) смеси спирта с этиловым эфиром (1:2) и перемешивают взбалтыванием. Если при этом жир не растворяется, содержимое колбы слегка нагревают на водяной бане с обратным холодильником, а затем охлаждают до температуры 15 — 20 °C. В полученный раствор прибавляют 1 см3 спиртового раствора фенолфталеина 10 г/дм3 и при постоянном взбалтывании быстро титруют раствором гидроокиси калия 0,1 моль/дм3 или натрия до появления слабо-розовой окраски, устойчивой в течение 30 с.

Во избежание гидролиза раствора мыла количество спирта в нейтрализованной смеси должно превышать количество гидроокиси натрия или калия, пошедшее на титрование, в 5 раз.

При исследовании темно-окрашенных жиров титрование лучше вести в конической колбе с боковой отводной трубкой с добавленном 2 см3 спиртового раствора тимолфталеина 10 г/дм3 в качестве индикатора или 20 см3 спиртового раствора 20 г/дм3 алкалиблау 6Б.

Наблюдают за изменением окраски смеси во время титрования в тонком слое, находящемся в отводной трубке колбы.

Тимолфталеин в кислой среде бесцветен, а в щелочной дает голубое окрашивание; при титровании темно-окрашенных жиров он принимает голубовато-зеленый или грязно-зеленый цвет.

7.9.4 Обработка результатов

Кислотное число исследуемого жира (X29) в мг KOH на 1 г жира вычисляют по формуле

X_{29} = \frac{5,61 \cdot K \cdot V}{m} ,

где V — объем раствора гидроокиси калия или гидроокиси натрия 0,1 моль/дм3, израсходованный на титрование, см3;

K — коэффициент пересчета на точный раствор 0,1 моль/дм3 щелочи;

5,61 — количество гидроокиси калия, соответствующее 1 см3 точного раствора 0,1 моль/дм3, мг;

m — масса исследуемого жира, г.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

7.10. Определение числа омыления

7.10.1 Сущность метода

Метод основан на взаимодействии свободных и связанных жирных кислот, содержащихся в 1 г жира, со щелочью и определении числа омыления обратным титрованием.

7.10.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Баня водяная.

Колбы конические по ГОСТ 25336, вместимостью 250 см3 со шлифом.

Холодильник стеклянный лабораторный (обратный) по ГОСТ 25336.

Цилиндры мерные по ГОСТ 1770, вместимостью 50 см3.

Бюретка по ГОСТ 20292, вместимостью 25 — 50 см3.

Кислота соляная по ГОСТ 3118, раствор 0,5 моль/дм3 (0,5 н).

Фенолфталеин по ГОСТ 5850, спиртовой раствор 10 г/дм3 (1%-ный) или алкалиблау спиртовой раствор 20 г/дм3 (2%-ный) (при анализе темноокрашенных жиров).

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962.

Калия гидроокись по ГОСТ 24363, спиртовой раствор 0,5 моль/дм3 (0,5 н).

7.10.3 Приготовление спиртового раствора 0,5 моль/дм3 гидроокиси калия

30 г гидроокиси калия растворяют в 20 см3 воды в мерной колбе вместимостью 1 дм3 и доливают до метки этиловым спиртом.

Раствор оставляют на сутки для отстаивания в закрытой колбе.

Прозрачный раствор осторожно декантируют в склянку из темного стекла.

7.10.4 Проведение анализа

В колбу для омыления отвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,001 г 1,5 — 2 г хорошо перемешанного и профильтрованного жира и приливают из бюретки 25 см3 спиртового раствора гидроокиси калия 0,5 моль/дм3. Колбу соединяют с обратным холодильником, глубоко опускают в сильно кипящую водяную баню и кипятят 1 ч при периодическом взбалтывании до полного омыления жира.

Об окончании реакции омыления судят по отсутствию помутнения пробы от нескольких капель воды.

К полученному горячему прозрачному мыльному раствору приливают 0,5 см3 раствора фенолфталеина 10 г/дм3 или при анализе темноокрашенных жиров раствора алкалиблау 20 г/дм3 и сразу титруют раствором соляной кислоты 0,5 моль/дм3 до нейтральной реакции.

Одновременно проводят контрольный анализ без навески жира.

7.10.5 Обработка результатов

Число омыления исследуемого жира (X30) в мг KOH на 1 г жира вычисляют по формуле

X_{30} = \frac{28,055 \cdot K \cdot (V - V_{1})}{m} ,

где 28,055 — количество гидроокиси калия, соответствующее 1 см3 раствора соляной кислоты 0,5 моль/дм3, мг;

K — коэффициент пересчета на точный раствор соляной кислоты 0,5 моль/дм3;

V — объем раствора соляной кислоты 0,5 моль/дм3, израсходованный на титрование раствора в контрольном анализе, мл;

V1 — объем раствора соляной кислоты 0,5 моль/дм3, израсходованный на титрование в рабочем анализе, см3;

m — навеска жира, г.

Вычисление проводят до единицы.

7.11. Методы определения йодного числа

7.11.1. Определение йодного числа титрованием с использованием йодно-ртутного раствора (применяется при разногласиях в оценке качества продукта)

7.11.1.1 Сущность метода

Метод основан на взаимодействии йода с непредельными жирными кислотами жира.

7.11.1.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Колбы с притертой пробкой по ГОСТ 25336, вместимостью 500 см3.

Цилиндр мерный по ГОСТ 1770, вместимостью 100 см3.

Бюретки по ГОСТ 20292, вместимостью 50, 25 см3 с делениями на 0,1 см3.

Капельницы по ГОСТ 25336.

Ртуть двухлористая (сулема) по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

Йод по ГОСТ 4159.

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962.

Кислота соляная по ГОСТ 3118.

Натрий серноватистокислый (тиосульфат) по СТ СЭВ 223, водный раствор 0,1 моль/дм3.

Калий йодистый по ГОСТ 4232, водный раствор 100 г/дм3 (10%-ный) (не содержащий йодноватокислой соли).

Хлороформ по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

Крахмал растворимый по ГОСТ 10163, раствор 10 г/дм3 (1%-ный), к которому прибавляют кристалл сулемы для стойкости при хранении.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

7.11.1.3 Приготовление йодно-ртутного раствора

Йодно-ртутный раствор (раствор Гюбля) готовят смешиванием отдельно приготовленных спиртовых растворов двухлористой ртути (сулемы) и йода.

25 г йода растворяют в 500 см3 спирта 950 г/дм3, а 30 г сулемы растворяют в 500 см3 спирта 950 г/дм3 и профильтровывают. Оба раствора хранят в отдельных склянках из темного стекла с притертыми пробками и смешивают в равных объемах за 48 ч до начала определения.

7.11.1.4 Проведение испытания

В конической колбе с притертой пробкой взвешивают 0,2 г профильтрованного жира с абсолютной погрешностью не более 0,0002 г, приливают 15 — 20 см3 хлороформа, свободного от перекисей, и 25 см3 йодно-ртутного раствора. Колбу закрывают притертой пробкой, смоченной раствором йодистого калия во избежание улетучивания йода. Содержимое колбы осторожно перемешивают. Колбу ставят в темное место при температуре 20 °C на 24 ч.

По окончании настаивания в колбу приливают 15 см3 раствора йодистого калия 100 г/дм3 и 100 см3 дистиллированной воды. Если при этом выпадает осадок йодистой ртути, не растворяющийся при взбалтывании, добавляют еще 5 см3 раствора йодистого калия.

Смесь взбалтывают, и титруют выделившийся йод раствором серноватистокислого натрия 0,1 моль/дм3 до светло-желтой окраски. После этого прибавляют 1 см3 раствора крахмала 10 г/дм3 и продолжают титрование до исчезновения синего окрашивания.

Одновременно проводят контрольное определение без навески жира.

7.11.1.5 Обработка результатов

Йодное число (X31) в г йода на 100 г жира вычисляют по формуле

X_{31} = \frac{0,01269 \cdot K \cdot (V - V_{1}) \cdot 100}{m} ,

где 0,01269 — количество йода, соответствующее 1 см3 раствора тиосульфата натрия 0,1 моль/дм3, г;

K — коэффициент пересчета на точный раствор 0,1 моль/дм3 тиосульфата натрия;

V — объем раствора тиосульфата натрия 0,1 моль/дм3, израсходованный в контрольном анализе, см3;

V1 — объем раствора тиосульфата натрия 0,1 моль/дм3, израсходованный в рабочем анализе, см3;

m — навеска жира, г.

Вычисление проводят до единицы.

7.11.2 Определение йодного числа титрованием с использованием солянокислого раствора хлористого йода

7.11.2.1 Сущность метода — по п. 7.13.1.1.

7.11.2.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Колбы по ГОСТ 25336 с притертой пробкой, вместимостью 350 — 500 см3.

Колбы мерные по ГОСТ 1770, вместимостью 1 дм3.

Пипетки стеклянные по ГОСТ 20292, вместимостью 1; 3 и 10 см3.

Часы песочные по ГОСТ 10576, на 5, 10 и 15 мин.

Воронка делительная по ГОСТ 25336, вместимостью 500 см3.

Цилиндр мерный по ГОСТ 1770, вместимостью 100 см3 с делениями через 1 см3.

Хлороформ по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

Кислота соляная по ГОСТ 3118.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Эфир медицинский по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

Калий йодистый по ГОСТ 4232, водный раствор 100 г/дм3 (10%-ный).

Натрий серноватистокислый (тиосульфат), водный раствор 0,1 моль/дм3.

Крахмал растворимый по ГОСТ 10163, раствор 10 г/дм3 (1%-ный) свежеприготовленный.

Калий йодноватокислый по ГОСТ 4202.

7.11.2.3 Приготовление раствора хлористого йода 0,2 моль/дм3 (0,2 н)

В склянку с притертой пробкой вносят 11,1 г йодистого калия, 7 г йодноватокислого калия, 50 см3 воды, 50 см3 концентрированной соляной кислоты и взбалтывают до полного растворения йода. Приливают 20 см3 хлороформа и добиваются фиолетовой окраски слоя хлороформа добавлением по каплям водного раствора йодноватокислого калия 10 г/дм3 при энергичном взбалтывании.

После отстаивания водный слой сливают в мерную колбу и доводят объем водой до 1 дм3. Реактив хранят в склянке темного стекла.

7.11.2.4 Проведение анализа

В колбу с притертой пробкой отвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,0001 г 0,08 — 0,12 г профильтрованного жира.

Для растворения жира в колбу приливают 3 см3 этилового эфира, свободного от перекисей, и добавляют из бюретки 25 см3 0,2 моль/дм3 солянокислого раствора хлористого йода.

Колбу плотно закрывают пробкой, перемешивают и оставляют стоять 5 — 10 мин, затем вносят 10 см3 раствора йодистого калия 100 г/дм3, 50 см3 дистиллированной воды и выделившийся йод титруют раствором тиосульфата натрия 0,1 моль/дм3 до светло-желтой окраски.

После этого в колбу прибавляют 1 см3 свежеприготовленного раствора крахмала 10 г/дм3, 2 — 3 см3 хлороформа, свободного от перекисей, и продолжают титрование до полного исчезновения синего окрашивания.

Одновременно проводят контрольное определение без навески жира.

7.11.2.5 Обработка результатов

Йодное число (X32) в г йода на 100 г жира вычисляют по формуле

X_{32} = \frac{0,01269 \cdot K \cdot (V - V_{1}) \cdot 100}{m} ,

где 0,01269 — количество йода соответствующее 1 см3 раствора тиосульфата натрия 0,1 моль/дм3, г;

K — коэффициент пересчета на точный раствор тиосульфата натрия 0,1 моль/дм3;

V — объем раствора тиосульфата натрия 0,1 моль/дм3, израсходованный в контрольном анализе, см3;

V1 — объем раствора тиосульфата натрия 0,1 моль/дм3, израсходованный в рабочем анализе, см3;

m — навеска жира, г.

7.12. Определение перекисного числа

7.12.1 Сущность метода

Метод основан на взаимодействии перекисей, содержащихся в жире, с йодистым калием в присутствии ледяной уксусной кислоты с выделением йода, который оттитровывают раствором тиосульфата натрия.

7.12.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Баня водяная.

Часы песочные по ГОСТ 10576 на 2 мин или секундомер.

Колбы с притертой пробкой по ГОСТ 25336, вместимостью 250 — 300 см3.

Микробюретка по ГОСТ 20292, вместимостью 10 см3 с делениями на 0,01 — 0,02 см3.

Цилиндры мерные по ГОСТ 1770, вместимостью 50 и 100 см3.

Пипетки по ГОСТ 20292, вместимостью 1 см3.

Натрий серноватистокислый (тиосульфат), раствор 0,01 моль/дм3.

Хлороформ по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

Кислота уксусная ледяная по ГОСТ 61.

Калий йодистый по ГОСТ 4232, насыщенный водный раствор.

Крахмал растворимый по ГОСТ 10163, водный раствор 10 г/дм3 (1%-ный).

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

7.12.3 Проведение анализа

В коническую колбу с притертой пробкой вносят навеску тщательно перемешанного и профильтрованного жира массой 1 г, взятую с абсолютной погрешностью не более 0,0001 г.

Китовые жиры предварительно осторожно подогревают на водяной бане до температуры 60 — 70 °C. Навеску жира в колбе растворяют в 30 см3 смеси, состоящей из 12 см3 хлороформа и 18 см3 ледяной уксусной кислоты. К раствору приливают 1 см3 насыщенного на холоде раствора йодистого калия и смесь равномерно взбалтывают точно 2 мин.

В колбу добавляют 100 см3 свежепрокипяченной дистиллированной воды, 1 см3 раствора крахмала 10 г/дм3 и немедленно титруют в присутствии крахмала выделившийся йод раствором тиосульфата натрия 0,01 моль/дм3 до исчезновения синего окрашивания. Одновременно проводят контрольный анализ без навески жира.

7.12.4 Обработка результатов

Перекисное число исследуемого жира (X33) в процентах йода вычисляют по формуле

X_{33} = \frac{(V_{1} - V) \cdot 0,001269 \cdot K \cdot 100}{m} ,

где V1 — объем раствора тиосульфата натрия 0,01 моль/дм3, израсходованный на титрование в рабочем анализе, см3;

V — объем раствора тиосульфата натрия 0,01 моль/дм3, израсходованный на титрование в контрольном анализе, см3;

m — навеска жира, г;

K — коэффициент пересчета на точный раствор тиосульфата натрия 0,01 моль/дм3 (0,01 н);

0,001269 — количество йода, соответствующее 1 см3 точного раствора тиосульфата натрия 0,01 моль/дм3, г.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

7.13. Определение неомыляемых веществ

7.13.1 Сущность метода

Метод основан на омылении триглицеридов щелочью, экстракции неомыляемых веществ этиловым спиртом, обезвоживании и определении их количества взвешиванием.

7.13.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Баня песочная.

Шкаф сушильный по ГОСТ 13474.

Колбы конические со шлифом по ГОСТ 25336, вместимостью 250 — 300 см3.

Холодильник стеклянный лабораторный (обратный) по ГОСТ 25336 со шлифом.

Воронка делительная по ГОСТ 25336, вместимостью 500 см3.

Колбы с притертой пробкой по ГОСТ 25336, вместимостью 250 — 350 см3.

Термометр стеклянный технический по ГОСТ 2823 с пределом измерений температуры от 0 до плюс 150 °C.

Цилиндры мерные по ГОСТ 1770, вместимостью 25 и 100 см3.

Воронка по ГОСТ 25336, диаметром 50 мм.

Холодильник стеклянный лабораторный (водяной) по ГОСТ 25336.

Аллонж по ГОСТ 25336.

Колба коническая по ГОСТ 25336, вместимостью 250 — 350 см3.

Капельница по ГОСТ 25336.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

Калия гидроокись по ГОСТ 24363, спиртовой раствор 2 моль/дм3 (2 н).

Эфир медицинский по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

Натрий сернокислый безводный по ГОСТ 4166.

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962.

Фенолфталеин по ГОСТ 5850, спиртовой раствор 10 г/дм3 (1%-ный).

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

7.13.3 Проведение анализа

В коническую колбу взвешивают 2 — 3 г с абсолютной погрешностью не более 0,001 г тщательно перемешанного и профильтрованного жира. Китовые жиры предварительно подогревают на водяной бане до температуры 60 — 70 °C. К навеске жира приливают 20 см3 свежеприготовленного спиртового раствора гидроокиси калия 2 моль/дм3 и, отметив уровень раствора, нагревают колбу на песочной бане с обратным холодильником в течение 2 ч (1 ч для рыбьих жиров). Уровень раствора доводят этиловым спиртом до первоначального и прибавляют 80 см3 дистиллированной воды.

После этого содержимое колбы нагревают еще 30 мин. Полученный раствор должен быть прозрачным. После охлаждения раствор количественно переносят в делительную воронку и экстрагируют неомыляемые вещества этиловым эфиром. При образовании эмульсии к эфирному раствору добавляют несколько капель спирта для расслоения. Экстракцию проводят в три приема, используя для первой экстракции 50 см3 эфира, для последующих — по 25 см3. Собранные вместе в делительной воронке эфирные вытяжки промывают водой до полного удаления раствора мыла, о чем свидетельствует исчезновение окраски промывных вод при реакции с фенолфталеином.

Эфирный раствор количественно переносят через воронку с фильтром и безводным сернокислым натрием в предварительно высушенную и взвешенную колбу.

Эфир отгоняют на водяной бане с холодильником, остатки эфира удаляют на водяной бане без холодильника. Колбу с неомыляемыми веществами высушивают при температуре 100 — 105 °C до постоянной массы.

7.13.4 Обработка результатов

Массовую долю неомыляемых веществ (X34) в процентах вычисляют по формуле

X_{34} = \frac{(m_{2} - m_{1}) \cdot 100}{m} ,

где m — навеска жира, г;

m1 — масса пустой колбы, г;

m2 — масса колбы с остатком после высушивания, г.

Вычисление проводят до первого десятичного знака.

7.14. Методы определения витаминов A, D и E в тканях и органах (печень и др.) рыб, жирах рыб, морских млекопитающих и в жидких витаминных препаратах

7.14.1 Определение витаминов A и D в жирах рыб и морских млекопитающих

Витамин A в препарате и витамины A и D в медицинском жире определяют по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

Концентраты витамина A в жире, полученные методом молекулярной дистилляции и содержащие свыше 5000 МЕ витамина в 1 г, омылению не подвергают. Навеску концентрата в количестве 0,1 — 0,2 г непосредственно растворяют в хлороформе в мерной колбе вместимостью 25 см3 с пришлифованной пробкой. Колориметрирование и расчет проводят по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

7.14.2. Определение витамина A в тканях и органах (печень и др.) рыб, морских млекопитающих, морских беспозвоночных и продуктах их переработки колориметрическим методом

7.14.2.1 Сущность метода

Метод основан на взаимодействии витамина A с треххлористой сурьмой с образованием окрашенного комплекса.

7.14.2.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Холодильник стеклянный лабораторный по ГОСТ 25336.

Термометр ртутный стеклянный лабораторный по ГОСТ 215 с пределом измерений температуры от 0 до плюс 150 °C.

Секундомер механический по ГОСТ 5072.

Фотоэлектроколориметр или спектрофотометр с пределами измерения оптической плотности от 0 до 1,3 по ГОСТ 12083.

Воронки химические по ГОСТ 25336, диаметром 35 — 50 мм.

Колбы конические с притертой пробкой по ГОСТ 25336, вместимостью 100 см3.

Пипетка по ГОСТ 20292, вместимостью 1 и 5 см3.

Воронки делительные по ГОСТ 25336, вместимостью 300 — 500 см3.

Цилиндр мерный по ГОСТ 1770, вместимостью 100 см3.

Баня водяная.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

Калия гидроокись по ГОСТ 24363, х.ч.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, х.ч.

Натрий сернокислый безводный по ГОСТ 4166, х.ч.

Бензидин-основание.

Азот газообразный по ГОСТ 9293.

Ангидрид уксусный по ГОСТ 5815, ч.д.а.

Кислота серная по ГОСТ 4204, ч.д.а.

Медь сернокислая 5-водная по ГОСТ 4165, ч.д.а.

Фенолфталеин по ГОСТ 5850, спиртовой раствор 10 г/дм3 (1%-ный).

Калий йодистый по ГОСТ 4232, ч.д.а.

Калий марганцовокислый по ГОСТ 20490, х.ч.

Пирогаллол А по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962.

Сурьма треххлористая.

Хлороформ по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

Эфир медицинский по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

7.14.2.3 Подготовка и очистка реактивов

Азот

Для очистки от примесей азот пропускают последовательно через поглотители: щелочной раствор пирогаллола А (5 г пирогаллола на 100 см3 раствора KOH 500 г/дм3), концентрированную серную кислоту, стеклянную вату и безводный хлористый кальций.

Натрий сернокислый (безводный)

Безводный сернокислый натрий подсушивают при температуре 105 — 110 °C в течение 2 — 3 ч.

Спирт этиловый

Этиловый ректификованный спирт освобождают от альдегидов перегонкой над твердой гидроокисью калия или натрия или раствором 10 г на 1 дм3 спирта.

Начальную и конечную партии отгона отбрасывают.

Эфир этиловый

В склянку с корковой пробкой помещают 500 см3 эфира, 50 см3 раствора KMnO4 40 г/дм3, 5 см3 раствора NaOH 400 г/дм3 или KOH, взбалтывают содержимое и оставляют на сутки в темноте. Смесь (верхний слой) переносят в делительную воронку (нижний слой сливают), высушивают в течение суток сернокислым натрием, перегоняют и сохраняют в темноте.

Эфир необходимо проверять на отсутствие перекисей по качественной реакции с йодистым калием.

Хлороформ

Хлороформ промывают 5 — 6 раз дистиллированной водой (2:1), высушивают безводным сернокислым натрием, перегоняют в темную склянку и хранят в прохладном месте в течение 5 — 6 недель.

Хлороформ необходимо проверять на отсутствие свободного хлора, соляной кислоты и фосгена. Наличие фосгена и соляной кислоты устанавливают с бензидином следующим образом: несколько кристаллов бензидина растворяют в 10 см3 хлороформа (в склянке с притертой пробкой) и оставляют на ночь. При наличии соляной кислоты и фосгена раствор становится мутным.

Треххлористая сурьма

Треххлористую сурьму промывают хлороформом до тех пор, пока хлороформ, используемый для промывки, не будет прозрачным и бесцветным. Высушивают промытую хлороформом треххлористую сурьму в эксикаторе над серной кислотой в течение 1 — 2 сут в темноте.

Для приготовления раствора 230 г треххлористой сурьмы растворяют в колбе в 1 дм3 хлороформа для наркоза при нагревании на теплой водяной бане. Колбу закрывают притертой пробкой и оставляют на ночь. Прозрачную часть раствора сливают в мерный цилиндр вместимостью 1 дм3, прибавляют 2% (по объему) уксусного ангидрида, переносят в темную склянку, перемешивают и закрывают притертой пробкой. Раствор годен для анализа через сутки в течение 5 — 6 недель.

7.14.2.4 Проведение анализа

К навеске исследуемой пробы массой 2 — 3 г, взятой с абсолютной погрешностью не более 0,001 г, добавляют 1 см3 водного раствора KOH 600 г/дм3 и 10 — 20 см3 этилового спирта. Смесь нагревают на водяной бане при температуре 85 — 90 °C с обратным холодильником до полного растворения исследуемого образца, но не менее 2 ч. Если полного растворения не происходит, добавляют еще 10 — 20 см3 спирта и продолжают нагревание. После омыления жира к раствору добавляют 10 — 20 см3 спирта и двойное (по отношению к общему объему спирта) количество воды. Содержимое колбы количественно переносят в делительную воронку.

Неомыляемую фракцию трижды извлекают эфиром. Первый раз добавляют 50 см3 эфира, второй и третий раз — по 30 см3. Во избежание образования стойкой эмульсии экстракцию эфиром проводят в хорошо охлажденном растворе и при осторожном перемешивании содержимого воронки.

Объединенные эфирные вытяжки промывают дистиллированной водой, добавляя по 30 — 40 см3 до исчезновения щелочной реакции промывных вод (проба с фенолфталеином). Промытые эфирные вытяжки медленно фильтруют в колбу для отгона через бумажный фильтр, на который предварительно насыпают 8 г безводного сульфата натрия.

Фильтр с сульфатом натрия три раза промывают эфиром по 10 см3, собирая фильтрат в ту же колбу.

Эфир отгоняют в токе азота при температуре не выше 40 °C.

Остаток вначале растворяют в небольшом объеме хлороформа для наркоза, затем разбавляют тем же хлороформом так, чтобы в 1 см3 раствора содержалось около 30 МЕ витамина A.

0,4 см3 полученного хлороформного раствора переносят в кювету фотоэлектроколориметра с рабочей длиной 10 мм, быстро прибавляют 4 см3 хлороформного раствора хлорида сурьмы, содержащего 20 г/дм3 уксусного ангидрида, и измеряют оптическую плотность раствора фотоэлектроколориметром при длине волны 620 нм. Показания прибора отмечают не позднее, чем через 5 с после добавления в кювету хлороформного раствора хлорида сурьмы. Содержание витамина A, соответствующее определенной оптической плотности, рассчитывают по градуировочному графику.

7.14.2.5 Построение градуировочного графика

Навеску раствора ретинола ацетата в масле (для инъекции), содержащего 100000 МЕ в 1 см3 (фактическое содержание витамина A в 1 см3 раствора устанавливают как указано в нормативных документах, действующих на территории государства, принявшего стандарт) массой 0,1 г, взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,0001 г, разводят в таком количестве хлороформа для наркоза, чтобы получить раствор, содержащий 100 МЕ витамина A в 1 см3.

Приготовленный раствор используют для получения ряда разведений с содержанием витамина A от 5 до 50 МЕ в 1 см3 с интервалом в 5 МЕ.

Из каждого разведения отбирают по 0,4 см3 раствора, проводят цветную реакцию в кювете с рабочей длиной 10 мм так же, как при анализе исследуемого раствора и определяют оптическую плотность при длине волны 620 нм.

По полученным данным строят градуировочный график, откладывая на оси абсцисс количества витамина A, на оси ординат — соответствующие оптические плотности.

Градуировочный график строят каждый раз при смене реактивов, особенно треххлористой сурьмы.

7.14.2.6 Обработка результатов

Массовую долю витамина A (X35) в 1 грамме исследуемого продукта (фарша) в международных единицах (МЕ) вычисляют по формуле

X_{35} = \frac{m \cdot V}{m_{1}} ,

где m — содержание витамина A в 1 см3 раствора, найденное по градуировочному графику в международных единицах (МЕ);

V — разведение, см3;

m1 — навеска образца, г.

Вычисление проводят до единицы.

7.14.3 Определение витамина E в жире — по ГОСТ 9393.

7.15. Определение ионола в ветеринарном жире — по ГОСТ 9393.

8. МЕТОДЫ АНАЛИЗА КОРМОВОЙ МУКИ ИЗ РЫБЫ, МОРСКИХ МЛЕКОПИТАЮЩИХ И РАКООБРАЗНЫХ

8.1 Подготовка средней пробы — по п. 2.6.

8.2. Определение внешнего вида муки

8.2.1 Сущность метода

Метод основан на визуальном определении внешнего вида муки.

8.2.2 Проведение испытания

Среднюю пробу муки, рассыпанную тонким слоем на пергаментной бумаге, полимерной пленке или другом материале, внимательно просматривают на присутствие комков, плесени, величину гранул.

8.3. Определение крупности помола

8.3.1 Сущность метода

Метод основан на фракционировании частиц муки просеиванием ее через сито и определении массы фракции взвешиванием.

8.3.2 Аппаратура и материалы

Сито диаметром 150 мм с сеткой проволочной стальной тканой для мукомольной промышленности по ГОСТ 3924 со стороной отверстия 3,2 мм.

Стакан химический по ГОСТ 25336, вместимостью 200 см3.

8.3.3 Проведение анализа

Навеску муки массой 100 г, взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,5 г, просеивают через сито с квадратными отверстиями, со стороной равной 3,2 мм.

Остаток крупных частиц на сите переносят в тарированный стакан и взвешивают. Масса остатка в граммах, выраженная в процентах от общей массы пробы, характеризует крупность помола.

8.4. Определение содержания металлопримесей в кормовой рыбной муке

8.4.1 Сущность метода

Метод основан на извлечении ферромагнитных частиц магнитом и определении их массы взвешиванием.

8.4.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Лист стекла или плексигласа размером 500 x 500 мм.

Магнит.

Стакан химический по ГОСТ 25336, вместимостью 100 см3.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, раствор 100 г/дм3 (10%-ный).

Бумага фильтровальная по ГОСТ 12026.

Сита из сетки проволочной стальной тканой для мукомольной промышленности по ГОСТ 3924 с размерами сторон 0,5 и 1,0 мм.

8.4.3 Проведение анализа

Навеску муки массой 250 г, взятую из средней пробы без просеивания через сито и измельчения в ступке, рассыпают на стекле, плексигласе или мраморной доске слоем толщиной 5 мм и извлекают металлические частицы подковообразным магнитом. Во избежание потерь при снятии металлических частиц с магнита, его полюсы предварительно обертывают папиросной бумагой, через которую собирают металлопримеси. Для этого проводят магнитом продольные и поперечные бороздки по всей поверхности муки, чтобы покрыть ими весь образец муки без промежутков.

Снимают с магнита выбранные частицы железа, осторожно снимают бумагу с полюсов магнита и ссыпают металлические частицы на чистый лист белой бумаги. Образец муки заравнивают и повторяют обработку магнитом. Эту операцию проводят несколько раз до тех пор, пока на магните не будут больше собираться частицы железа.

После этого, держа за края бумагу, на которой собрано железо, водят ее по полюсам магнита и осторожно сдувают примешанную муку так, чтобы металлические частицы во время сдувания удерживались магнитом. Магнит следует укрепить в деревянном штативе полюсами вверх.

Очищенные от муки металлические частицы переносят в стакан вместимостью 100 см3 и заливают 25 см3 раствора гидроокиси натрия 100 г/дм3 или калия и кипятят 30 мин на слабом огне; при этом происходит разрушение остатков частиц муки гидроокисью натрия. Содержимое стакана разбавляют тройным количеством воды и фильтруют через бумажный фильтр.

Фильтр промывают один — два раза водой и подсушивают в сушильном шкафу при 100 °C в течение 30 мин.

Металлические частицы собирают с фильтра магнитом через бумагу, переносят на тарированное часовое стекло и взвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,01 г.

8.4.4 Обработка результатов

Содержание металлопримесей (X36) в млн-1 (мг/кг) рассчитывают по формуле

X_{36} = \frac{m_{2} - m_{1}}{m} \cdot 10^{6} ,

где m — масса исследуемого продукта, г;

m1 — масса часового стекла, г;

m2 — масса часового стекла с частицами железа, г;

106 — коэффициент пересчета г в мг и г в кг.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, расхождения между которыми не должны превышать 0,03 млн-1 (мг/кг).

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

8.5. Определение размера металлопримесей

8.5.1 Сущность метода — по п. 8.3.1.

8.5.2 Аппаратура и материалы — по п. 8.3.2.

8.5.3 Проведение анализа.

Взвешенные металлические частицы просеивают через два металлических сита, верхнее — с диаметром отверстий 2 мм и нижнее — с отверстиями диаметром 0,5 мм. Металлические частицы, задержанные на том и другом сите, взвешивают отдельно и выражают их количество в миллиграммах на килограмм муки (или в граммах на тонну). Металлические частицы, задержанные на первом сите, считают крупнее 2 мм, на втором сите — крупнее 0,5 мм.

8.6. Определение воды — по ГОСТ 13496.3 <*> (метод применяют при разногласиях в оценке качества продукции)

<*> В Российской Федерации действует ГОСТ Р 54951-2012 (ИСО 6496:1999) «Корма для животных. Определение содержания влаги».

8.7. Определение хлористого натрия — по пп. 3.5.1 и 3.5.3.

8.8. Определение жира — по пп. 3.7.1; 3.7.2; 3.7.4.

8.9. Методы определения белковых веществ (сырого протеина)

8.9.1 Определение массовой доли белковых веществ макрометодом

8.9.1.1 Сущность метода

Метод основан на окислении органического вещества при сжигании его в серной кислоте в присутствии катализатора, отгонке образующегося аммиака паром, улавливании его раствором серной кислоты и определении содержания азота методом титрования.

Белковые вещества определяют, умножая количества общего азота на коэффициент 6,25. Метод применяют при разногласиях в оценке качества продукции.

8.9.1.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Электроплитка бытовая по ГОСТ 14919 или газовые горелки.

Холодильник шариковый по ГОСТ 25336.

Воронка капельная по ГОСТ 25336.

Бюретка по ГОСТ 20292, вместимостью 50 см3. Каплеуловитель по ГОСТ 25336.

Колбы для сжигания по ГОСТ 25336, вместимостью 100 см3.

Колбы плоскодонные или круглодонные по ГОСТ 25336, вместимостью 500 — 700 см3.

Колбы плоскодонные по ГОСТ 25336, вместимостью 250 — 300 см3.

Капельница по ГОСТ 25336.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Кислота серная по ГОСТ 4204, концентрированная и раствор 0,05 моль/дм3 (0,1 н).

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, раствор 330 г/дм3 (33%-ный) прокипяченный и раствор 0,1 моль/дм3 (0,1 н).

Медь сернокислая 5-водная по ГОСТ 4165.

Калий сернокислый по ГОСТ 4145.

Метиловый красный по ГОСТ 5853, спиртовой раствор 0,2 г/дм3 (0,02%-ный).

Индикатор смешанный (Таширо).

8.9.1.3. Приготовление раствора смешанного индикатора — по п. 6.5.2.3.

8.9.1.4 Проведение анализа

Навеску муки массой 0,2 — 0,3 г взвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,0005 г (для рыбы 0,6 — 1,0 г, для тузлука до 5 г) в закрытую с одной стороны трубочку из фильтровальной бумаги или из станиоля, помещают в колбу для сжигания вместимостью 100 см3, добавляют несколько мелких кристаллов медного купороса (0,2 — 0,3 г) и приливают 10 — 20 см3 серной кислоты плотностью 1840 кг/м3.

Колбу с содержимым осторожно нагревают в вытяжном шкафу, не допуская разбрызгивания жидкости. Когда содержимое колбы станет однородным, прекращают нагревание, дают остыть, добавляют 0,5 г сернокислого калия и продолжают нагревание до тех пор, пока жидкость в колбе не станет прозрачной, зеленовато-голубой окраски без бурого оттенка. Внутренние стенки колбы должны быть совершенно чистыми. Это достигается осторожным взбалтыванием содержимого колбы для смывания со стенок темных, обугленных частиц муки.

По окончании сжигания содержимое колбы охлаждают и количественно переносят в отгонную колбу вместимостью 500 — 750 см3 (черт. 8).

Колбу для сжигания тщательно ополаскивают, проверяя полноту смывания добавлением 1 — 2 капель раствора метилового красного.

Общий объем раствора в отгонной колбе должен быть не более 250 — 300 см3.

Приемником служит коническая колба вместимостью 250 — 300 см3, в которую из бюретки налито 25 — 30 см3 раствора серной кислоты 0,05 моль/дм3. Конец трубки холодильника должен быть погружен в раствор серной кислоты.

В отгонную колбу осторожно, по стенкам, избегая смешивания жидкостей, приливают 50 — 70 см3 раствора гидроокиси натрия 330 г/дм3, бросают кусочек лакмусовой бумаги и быстро закрывают ее пробкой, соединенной посредством каплеуловителя с холодильником, осторожно перемешивают содержимое и нагревают. Реакция жидкости в колбе должна быть резко щелочной.

После закипания жидкости в колбе приемник опускают так, чтобы конец трубки холодильника находился на некотором расстоянии от поверхности раствора, и продолжают отгонку до тех пор, пока не отгонится не менее 2/3 жидкости.

Конец отгонки определяют по лакмусовой бумаге. Если отгонка закончена, капля дистиллята не должна вызывать посинения красной лакмусовой бумаги. При появлении в конце отгонки при кипении толчков отгонку прекращают.

По окончании отгонки конец трубки холодильника обмывают водой в приемную колбу и содержащийся в ней избыток серной кислоты оттитровывают раствором гидроокиси натрия 0,1 моль/дм3 в присутствии метилового красного или двойного индикатора.

Одновременно проводят контрольный анализ без навески исследуемого образца.

8.9.1.5 Обработка результатов

Массовую долю белковых веществ (X37) в процентах вычисляют по формуле

X_{37} = \frac{(V - V_{1}) \cdot K \cdot 0,0014 \cdot 6,25 \cdot 100}{m} ,

V1 — объем раствора гидроокиси натрия 0,1 моль/дм3, израсходованный на титрование избытка серной кислоты в рабочем анализе, см3;

K — коэффициент пересчета на точный раствор гидроокиси натрия 0,1 моль/дм3, г;

0,0014 — количество азота, эквивалентное 1 см3 раствора гидроокиси натрия, 0,1 моль/дм3, г;

6,25 — коэффициент пересчета количества азота на белковые вещества;

m — навеска муки, г;

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

8.9.1а Определение массовой доли белка в рыбе, морских млекопитающих, морских беспозвоночных и продукции из них по методу Кьельдаля

8.9.1а.1 Сущность метода

Метод Кьельдаля основан на минерализации органического вещества концентрированной серной кислотой в присутствии катализатора с образованием сульфата аммония, разрушении сульфата аммония щелочью с выделением аммиака, отгонке (дистилляции) аммиака водяным паром в раствор борной кислоты с последующим титрованием раствором соляной кислоты, с автоматической фотометрической индикацией точки эквивалентности.

Метод Кьельдаля включает три основных этапа: минерализация, дистилляция и титрование.

Определение массовой доли белка по методу Кьельдаля осуществляется в диапазоне измерений:

для непереработанной пищевой рыбной продукции (рыба, морские млекопитающие, беспозвоночные) <*> — от 1,0% до 30,0%;
для переработанной пищевой рыбной продукции (рыбная продукция) <*> — от 1,0% до 60,0%;
для непищевой рыбной продукции (кормовая мука рыбная) <*> — от 45% до 80,0%.

<*> Наименование анализируемого объекта приведено в таблице 6а (п. 8.9.1а.7).

8.9.1а.2 Средства измерений, оборудование, реактивы, материалы

Блок автоматического фотометрического титрования.

Весы лабораторные электронные 2 класса точности с наибольшим пределом взвешивания 300 г.

Колбы лабораторные стеклянные Кн-2-250-29/32 ТХС по ГОСТ 25336.

Колбы мерные лабораторные стеклянные 2-(100, 250, 500, 1000, 2000)-1 по ГОСТ 1770.

Стаканы лабораторные стеклянные В-1-(50, 100, 250) ТХС по ГОСТ 25336.

Цилиндры мерные лабораторные стеклянные 2-(10, 50, 100, 1000)-1 по ГОСТ 1770.

Скруббер (вытяжная система) с водоструйным насосом или отсасывающим устройством, изготовленным из кислотоустойчивого материала для использования с магистральным водопроводом.

Дигестор для минерализации проб или минерализатор, снабженный электронным терморегулятором (100 — 420) °C.

Мясорубка механическая по ГОСТ 4025, или мясорубка электрическая по ГОСТ 20469, или гомогенизатор.

Система паровой дистилляции.

Аммония сульфат, х.ч.

Бромкрезоловый зеленый, ч.д.а.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Водорода пероксид (раствор с массовой долей 30%) по ГОСТ 10929, ч.д.а.

Калий сернокислый по ГОСТ 4145, х.ч.

Калия гидроокись по ГОСТ 24363, ч.д.а.

Катализатор для сульфатной минерализации при определении белка или таблетка катализатора Cu/3,5 Кьельтабс (далее — таблетка катализатора).

Кислота борная по ГОСТ 9656, х.ч.

Кислота серная концентрированная (плотность 1,80 — 1,84 г/см3) по ГОСТ 4204, ч.д.а.

Кислота соляная (плотность 1,19 г/см3) по ГОСТ 3118, х.ч. или по ГОСТ 14261, ос.ч.

Кислота соляная стандарт-титр с молярной концентрацией c(HCl) = 0,1 моль/дм3.

Медь (II) сернокислая 5-водная по ГОСТ 4165, ч.д.а.

Метиловый красный, х.ч.

Натрий сернокислый по ГОСТ 4166, х.ч.

Натрий углекислый по ГОСТ 83, х.ч.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, х.ч.

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962.

Бумага фильтровальная лабораторная ФМ-III по ГОСТ 12026.

Воронки В-36-80 ХС по ГОСТ 25336.

Пипетки градуированные 8-2-0,1 или 8-2-0,2 по ГОСТ 29228.

Пипетки градуированные 6-1-10 или 6-2-10 по ГОСТ 29228.

Пробирки для минерализации дигесторные на 250 см3.

Стаканчики СВ-14/8 по ГОСТ 25336.

Ступка фарфоровая с пестиком по ГОСТ 9147.

8.9.1а.3 Приготовление растворов

Приготовление 40%-ного раствора гидроокиси натрия

400 г гидроокиси натрия растворяют в 600 см3 дистиллированной воды.

Раствор хранят в емкости из стекла не более 1 мес при температуре (20 +/- 5) °C.

Приготовление катализатора

Мелко растертый безводный натрий сернокислый (калий сернокислый) тщательно смешивают с тонко растертой медью (II) сернокислой в весовом соотношении 10:1. Компоненты смеси, взвешенные с погрешностью не более 0,1 г, растирают в ступке.

Смесь хранят в герметически закрытой емкости и предохраняют от влаги в течение 1 мес при температуре (20 +/- 5) °C.

Допускается применение таблеток катализатора Cu/3,5 Кьельтабс или аналогичных согласно руководству к используемому оборудованию.

Предварительная подготовка (сушка/обезвоживание) реактивов

Натрий сернокислый (Na2SO4) высушивают до постоянной массы при температуре от 100 °C до 105 °C в соответствии с ГОСТ 4212.

Натрий углекислый (Na2CO3) прокаливают до постоянной массы при температуре от 250 °C до 300 °C в соответствии с ГОСТ 4212.

Процедуру сушки/обезвоживания реактивов проводят перед каждым приготовлением растворов.

Приготовление раствора борной кислоты с массовой долей H3BO3 4 г/100 см3 с индикаторами (бромкрезоловый зеленый и метиловый красный)

40,0 г борной кислоты растворяют в 500 — 600 см3 дистиллированной воды, перемешивают и добавляют дистиллированную воду, доводят объем примерно до 900 см3. Полученный раствор охлаждают до комнатной температуры.

Раствор метилового красного

0,1 г метилового красного (C15H15N3O2) растворяют в 100 см3 этилового спирта.

Раствор бромкрезолового зеленого

0,1 г бромкрезолового зеленого (C21H14Br4O5S) растворяют в 100 см3 этилового спирта.

10,0 см3 раствора бромкрезолового зеленого добавляют в приготовленный раствор борной кислоты и после смешивания добавляют 7,0 см3 раствора метилового красного. Доводят объем до 1,0 дм3. Тщательно перемешивают.

Приготовленный раствор используется для поглощения аммиака.

Раствор хранят в емкости из темного стекла в течение 1 мес при температуре (20 +/- 5) °C.

Приготовление раствора соляной кислоты концентрации 0,1 моль/дм3

8,35 см3 соляной кислоты плотностью 1,19 г/см3 переносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3, доводят объем в колбе дистиллированной водой до метки и перемешивают. Работу проводят в вытяжном шкафу.

Раствор хранят 3 мес при температуре (20 +/- 5) °C.

Приготовление раствора соляной кислоты при использовании стандарт-титра соляной кислоты молярной концентрации c(HCl) = 0,1 моль/дм3 (0,1 Н)

Содержимое одной ампулы стандарт-титра соляной кислоты вносят в мерную колбу вместимостью 1000 см3, доводят дистиллированной водой объем до метки и перемешивают. Раствор хранят 3 мес при температуре (20 +/- 5) °C.

Допускается готовить раствор соляной кислоты с концентрацией, предусмотренной согласно руководству к используемому оборудованию.

8.9.1а.4 Проверка правильности работы оборудования

Принцип дистилляции заключается в превращении аммония (NH4) в аммиак (NH3) с помощью щелочи, дальнейшей отгонке паром в приемный сосуд, содержащий борную кислоту, и титровании стандартным раствором кислоты.

Используют аммония сульфат (NH4)2SO4 с чистотой не менее 99,5%. Молекулярный вес (NH4)2SO4 равен 132,14 г/моль.

Процентное содержание азота в аммонии сульфате (чистотой 99,5%) составляет 21,09%.

Допускается использовать аммония сульфат в качестве стандарта, позволяющего судить об уровне восстановления в дистилляционной системе.

0,15 г аммония сульфата, взвешенного с точностью 0,01 г, помещают в пробирку для минерализации. Добавляют 75 см3 дистиллированной воды и проводят дистилляцию.

Процентное содержание азота вычисляют по формуле

\%\text{азота} = \frac{(V_{\text{оп}} - V_{\text{хол}}) \cdot c \cdot 1,40}{m} , (1)

где Vоп — объем соляной кислоты концентрацией 0,1 моль/дм3, израсходованный на титрование образца;

Vхол — объем соляной кислоты концентрацией 0,1 моль/дм3, израсходованный на титрование при контрольном измерении;

c — фактическая молярная концентрация соляной кислоты, моль/дм3, определенная до четвертого знака;

m — масса сульфата аммония, взятая для проведения дистилляции, г.

Процент восстановления азота вычисляют по формуле

\%\text{восстановления} = \frac{\text{Реальныйпроцентазота}}{21,09} \cdot 100. (2)

При получении процента восстановления азота более 99,0% установку считают пригодной к эксплуатации (для проведения исследований).

8.9.1а.5 Проведение анализа

Минерализация

Образец массой 0,3 — 0,4 г взвешивают с точностью до 0,01 г и помещают в каждую пробирку для минерализации.

Добавляют 1 таблетку катализатора, используемого для сульфатной минерализации (или 8 г катализатора, приготовленного по п. 8.9.1а.3), в пробирку для минерализации.

Для некоторых типов образцов из-за низкой точки кипения требуется длительное время сжигания. В этом случае необходимо добавить еще одну таблетку катализатора.

В пробирку для минерализации с образцом и катализатором осторожно добавляют 12,5 см3 концентрированной серной кислоты и перемешивают. Если анализируемые образцы имеют высокое содержание жира и углеводов, может иметь место кристаллизация, в этом случае добавляют дополнительно 2 — 3 см3 концентрированной серной кислоты перед сжиганием. Кристаллизация во время сжигания может быть причиной потери азота.

Для образцов с высоким содержанием жира или углеводов используют 15 см3 серной кислоты и пероксид водорода, который является противопенным агентом и сдерживает вспенивание различных типов образцов в процессе сжигания (минерализации).

Присоединяют скруббер к пробиркам для минерализации в штативе и устанавливают водоструйный насос на полный поток.

Устанавливают штатив вместе со скруббером в дигестор для минерализации проб и включают нагрев. Минерализацию проводят при температуре 400 — 420 °C.

Примерно через 5 мин уменьшают поток в водоструйном насосе до появления паров кислоты в головке скруббера.

Продолжают процесс сжигания, пока образцы не осветлятся до голубовато-зеленоватого цвета раствора. Окончание процесса минерализации определяют по отсутствию темных включений, а также цвету жидкости в минерализационной пробирке, которая должна быть бесцветной (или с зеленовато-голубым оттенком).

Вынимают штатив с пробирками вместе со скруббером и переносят в подставку для охлаждения на 10 — 20 мин.

Одновременно аналогично проводят контрольный (холостой) анализ без навески.

Дистилляция

Устанавливают пробирку для минерализации с образцом в блок системы паровой дистилляции и закрывают защитную дверцу.

При измерении массовой доли общего азота дистилляционная система добавляет дистиллированную воду автоматически перед началом цикла дистилляции.

Введение щелочи и цикл дистилляции (5 — 8 мин, в зависимости от прибора) контролируются автоматически.

Приемный раствор в дистилляционной колбе должен стать зеленым, показывая наличие щелочи — аммония.

Титрование

После прохождения цикла дистилляции дистиллят титруют раствором соляной кислоты 0,1 моль/дм3 (или раствором соляной кислоты с концентрацией, предусмотренной согласно руководству к используемому оборудованию). Конечная точка титрования достигается при серо-розовом цвете приемного раствора и фиксируется блоком автоматического фотометрического титрования.

Отмечают объем кислоты, использованный для титрования.

Аналогично проводят дистилляцию и титрование для контрольного (холостого) анализа.

8.9.1а.6 Обработка результатов

Массовую долю белка X, %, вычисляют по формуле

X = \frac{14,0067 \cdot (V_{1} - V_{2}) \cdot c \cdot 100}{m \cdot 1000} \cdot 6,25, (3)

где V1 — объем раствора соляной кислоты, затраченный на титрование анализируемого образца, см3;

V2 — объем раствора соляной кислоты, затраченный на титрование при контрольном измерении, см3;

c — фактическая молярная концентрация соляной кислоты, моль/дм3;

14,0067 — масса азота, эквивалентная 1 дм3 раствора соляной кислоты молярной концентрации c(HCl) = 1 моль/дм3, г;

m — масса навески продукта, г;

100 — коэффициент перерасчета результатов, %;

1000 — коэффициент перерасчета см3 в дм3;

6,25 — коэффициент перерасчета азота на белок.

8.9.1а.7 Метрологические характеристики

При соблюдении всех регламентированных условий проведения анализа в точном соответствии с данной методикой погрешность (и ее составляющие) результатов измерений при доверительной вероятности P = 0,95 не превышает значений, приведенных в таблице 6а, для соответствующих диапазонов концентраций.

Таблица 6а

Анализируемый объект	Диапазон определяемых концентраций, %	Показатель точности (границы относительной погрешности при P = 0,95) \pm \delta , %	Показатель повторяемости (среднеквадратичное отклонение повторяемости) \sigma_{r} , %	Показатель воспроизводимости (среднеквадратичное отклонение воспроизводимости) \sigma_{R} , %	Предел повторяемости (значение допустимого расхождения между двумя результатами параллельных определений) r, %	Предел воспроизводимости (значение допустимого расхождения между двумя результатами измерений, полученными в разных лабораториях) R, % (P = 0,95)
Рыба	3 — 25	9	2,3	3,2	6	9
Рыбная продукция	1 — 60	14	4,7	6,5	13	18
Морские млекопитающие	8 — 30	10	2,6	3,6	7	10
Кормовая мука рыбная	45 — 80	6	1,2	1,6	3	5
Беспозвоночные	1 — 25	6	1,3	1,8	4	5

8.9.1а.8 Контроль точности результатов

За результат анализа принимают среднеарифметическое значение результатов двух параллельных определений, расхождение между которыми не превышает предела повторяемости:

\frac{2 \cdot |X_{1} - X_{2}| \cdot 100}{(X_{1} + X_{2})} \leq r, (4)

где X1, X2 — результаты параллельных определений, %;

r — значение предела повторяемости (п. 8.9.1а.7, таблица 6а), при этом r = 2,8\sigma_{r} .

При невыполнении условия (4) выясняют причины превышения предела повторяемости, устраняют их и вновь выполняют анализ.

8.9.1а.9 Оформление результатов

Результат анализа представляют в виде

(\overline{X} \pm \Delta) , %, при вероятности P = 0,95,

где \overline{X} — среднеарифметическое значение результатов определений, признанных приемлемыми, %;

\Delta — граница абсолютной погрешности, %.

\Delta = \frac{\delta \cdot \overline{X}}{100} , (5)

где \delta — граница относительной погрешности методики [показатель точности в соответствии с диапазоном концентраций (п. 8.9.1а.7, таблица 6а)], %.

8.9.2. Определение массовой доли белковых веществ макрометодом с селеновой смесью — по п. 8.9.1, но в качестве катализатора используют 2 г селеновой смеси, состоящей из 1,9 весовых частей надсернокислого калия по ГОСТ 4146 и 0,1 части селенистокислой меди (0,1 часть селенистокислой меди можно заменить смесью из 0,05 частей сернокислой меди и 0,05 частей селена элементарного).

8.9.3 Определение массовой доли белковых веществ макрометодом с перекисью водорода без отгонки

8.9.3.1 Сущность метода

Метод основан на сжигании навески исследуемого образца в серной кислоте в присутствии перекиси водорода и определении общего азота кипячением минерализованной пробы с 20 см3 раствора гидроокиси натрия 0,1 моль/дм3.

8.9.3.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Электроплитка бытовая по ГОСТ 14919 или горелки газовые.

Колбы мерные по ГОСТ 1770, вместимостью 500 и 200 см3.

Бюретки по ГОСТ 20292, вместимостью 25 и 50 см3.

Капельницы по ГОСТ 25336.

Часы механические по ГОСТ 10733.

Цилиндры мерные по ГОСТ 1770, вместимостью 100 и 50 см3.

Колбы конические по ГОСТ 25336, вместимостью 250 и 500 см3.

Колбы круглодонные длинногорлые (Кьельдаля) по ГОСТ 25336, вместимостью 100 — 250 см3.

Кислота серная по ГОСТ 4204, плотностью 1840 кг/м3 и раствор 0,05 моль/дм3 (0,1 н).

Водорода перекись по ГОСТ 10929, раствор 300 г/дм3 (30%-ный).

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, раствор 150 г/дм3 (15%-ный).

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Смешанный индикатор: смешивают равные объемы спиртовых растворов метилового красного 2 г/дм3 (0,2%-ного) и метиленового синего 1 г/дм3 (0,1%-ного).

8.9.3.3 Проведение анализа

Предварительно определяют количество гидроокиси натрия в 20 см3 раствора 0,1 моль/дм3 после кипячения по отношению к серной кислоте 0,05 моль/дм3 и к добавляемым реактивам. Это количество условно называют «рабочим титром щелочи» и обозначают T.

Установка «рабочего титра» 20 см3 0,1 моль/дм3 раствора гидроокиси натрия и проверка реактивов

В коническую колбу вместимостью 500 см3 наливают 100 см3 дистиллированной воды, добавляют 1,5 см3 концентрированной серной кислоты и 5 капель смешанного индикатора.

Содержимое колбы осторожно нейтрализуют раствором гидроокиси натрия 150 г/дм3 до переходной окраски и подкисляют несколькими см3 раствора серной кислоты 0,05 моль/дм3; вновь точно нейтрализуют раствором гидроокиси натрия 0,1 моль/дм3.

В колбу приливают из бюретки 20 см3 раствора гидроокиси натрия 0,1 моль/дм3, ставят на горячую плитку и кипятят 15 мин, считая с момента закипания, быстро охлаждают под краном или погружают в холодную воду.

Содержимое колбы нейтрализуют раствором серной кислоты 0,05 моль/дм3 и добавляют избыток ее 2 — 3 см3 для растворения карбонатов. Отмечают объем добавленного раствора серной кислоты.

Добавляют 2 — 3 капли смешанного индикатора и проводят обратное титрование раствором гидроокиси натрия 0,1 моль/дм3 до появления такой же окраски, какая была перед кипячением. «Рабочий титр» (T) 20 см3 раствора гидроокиси натрия 0,1 моль/дм3 по отношению к раствору серной кислоты 0,05 моль/дм3 вычисляют по формуле

T = V_{1} \cdot K_{1} - V_{2} \cdot K_{2} ,

где V1 — объем раствора серной кислоты 0,05 моль/дм3, прилитый в колбу после кипячения, см3;

K1 — поправочный коэффициент на точный раствор 0,05 моль/дм3 серной кислоты;

V2 — объем раствора гидроокиси натрия 0,1 моль/дм3, израсходованный на обратное титрование, см3:

K2 — поправочный коэффициент на точный раствор 0,1 моль/дм3 гидроокиси натрия.

Пример.

Перед кипячением в колбу прилито 20 см3 раствора гидроокиси натрия (K = 1). После кипячения добавлено 22 см3 раствора серной кислоты K = 1. На обратное титрование пошло 2,5 см3 раствора гидроокиси натрия (K = 1).

T = 22 · 1 — 2,5 · 1 = 19,5.

Это свидетельствует о том, что при кипячении произошло снижение «рабочего титра» раствора гидроокиси натрия вследствие возможного присутствия солей аммония в реактивах или под влиянием других факторов.

Исходя из установленного «рабочего титра» раствора щелочи, можно в дальнейшем определять количество азота по снижению «рабочего титра» щелочи, так как каждый см3 раствора ее эквивалентен 1,4 мг азота. При последующих определениях необходимо пользоваться одними и теми же реактивами. Необходимо ежемесячно и при смене титрованных растворов проверять «рабочий титр» раствора щелочи.

0,8 — 1,4 г рыбной муки (для рыбы и продуктов с высоким содержанием воды навеска 1,8 — 2,0 г), отвешенных с абсолютной погрешностью не более 0,0005 г, помещают в колбу для сжигания вместимостью 100 — 250 см3, добавляют соответственно 20 или 10 — 12 см3 серной кислоты плотностью 1840 кг/м3 и 5 см3 перекиси водорода. Происходит саморазогревание смеси и выделение газов.

По окончании выделения газов колбу нагревают в колбонагревателе до закипания серной кислоты, немного охлаждают, осторожно, по стенке колбы, добавляют 2 — 3 см3 перекиси водорода и продолжают нагревание. Добавление перекиси водорода с последующим нагреванием проводят несколько раз, постепенно уменьшая ее количество. Процесс минерализации продолжается 35 — 45 мин.

По окончании минерализации (жидкость в колбе должна быть полностью обесцвечена) и охлаждения колбы содержимое ее количественно переносят в мерную колбу вместимостью 500 см3 при исследовании рыбной муки и 200 см3 при исследовании рыбы и рыбных продуктов с высоким содержанием воды. Объем жидкости в колбе доводят до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают содержимое.

Пипеткой отбирают 50 см3 приготовленного раствора, переносят в коническую колбу вместимостью 500 см3, добавляют 50 см3 дистиллированной воды, 5 капель смешанного индикатора.

Содержимое колбы осторожно нейтрализуют раствором гидроокиси натрия 150 г/дм3 до переходной окраски, подкисляют несколькими см3 раствора серной кислоты 0,05 моль/дм3, а затем вновь точно нейтрализуют раствором гидроокиси натрия 0,1 моль/дм3.

После этого в колбу приливают из бюретки 20 см3 раствора гидроокиси натрия 0,1 моль/дм3 и ставят на горячую плитку. Содержимое колбы интенсивно кипятят точно 15 мин, считая с момента закипания, быстро охлаждают (под краном или погружают в холодную воду), нейтрализуют раствором серной кислоты 0,05 моль/дм3 и добавляют избыток ее 2 — 3 см3 для растворения карбонатов, отмечая количество добавленного раствора серной кислоты.

8.9.3.4 Обработка результатов

Массовую долю белковых веществ (X38) в процентах вычисляют по формуле

X_{38} = \frac{(T + V_{2} \cdot K_{2} - V_{1} \cdot K_{1}) \cdot 0,0014 \cdot 6,25 \cdot 100 \cdot V}{m \cdot V_{3}} ,

где T — «рабочий титр» 20 см3 раствора гидроокиси натрия 0,1 моль/дм3 (0,1 н);

V — объем, в котором растворена минерализованная навеска, см3;

V1 — объем раствора серной кислоты 0,05 моль/дм3, прилитый для нейтрализации и подкисления жидкости после ее кипячения, см3;

V2 — объем раствора гидроокиси натрия 0,1 моль/дм3, пошедший на обратное титрование избытка серной кислоты, см3;

V3 — объем раствора, взятый для кипячения, см3;

K1 — коэффициент пересчета на точный 0,05 моль/дм3 раствор серной кислоты;

K2 — коэффициент пересчета на точный раствор 0,1 моль/дм3 гидроокиси натрия;

0,0014 — количество азота, эквивалентное 1 см3 раствора гидроокиси натрия 0,1 моль/дм3, г;

6,25 — коэффициент пересчета азота на белковые вещества;

m — навеска муки, г.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

8.9.4 Определение массовой доли белковых веществ полумикрометодом

8.9.4.1 Аппаратура, материалы и реактивы по п. 8.9.1.2 со следующими дополнениями:

Колба мерная по ГОСТ 1770, вместимостью 100 см3.

Кислота серная по ГОСТ 4204, раствор 0,01 моль/дм3 (0,02 н).

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, раствор 0,02 моль/дм3 (0,02 н).

8.9.4.2 Проведение анализа

0,2 — 0,3 г муки (при исследовании рыбы и продуктов рыбного промысла с повышенным содержанием воды навеску увеличивают до 3 г, тузлука — до 5 г) взвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,0005 г в закрытую с одной стороны трубочку из фильтровальной бумаги или станиоля, помещают в колбу для сжигания вместимостью 100 см3, добавляют несколько мелких кристаллов сернокислой меди и приливают 10 — 20 см3 серной кислоты плотностью 1840 кг/м3.

Колбу с содержимым осторожно нагревают в вытяжном шкафу, не допуская разбрызгивания жидкости. Когда содержимое колбы станет однородным, прекращают нагревание, дают остыть, прибавляют 0,5 г сернокислого калия и продолжают нагревание до тех пор, пока жидкость в колбе не станет прозрачной зеленовато-голубой без бурого оттенка. Внутренние стенки колбы должны быть совершенно чистыми. Это достигается осторожным взбалтыванием содержимого колбы для смывания со стенок темных, обугленных частиц муки.

По окончании сжигания содержимое колбы охлаждают и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3. Из полученного раствора отбирают пипеткой 10 см3 жидкости и через воронку вносят в колбу прибора для отгонки аммиака, смывая остаток с воронки дистиллированной водой.

Отгонку аммиака водяным паром ведут в приборе, приведенном на черт. 8.

В коническую колбу-приемник 6 наливают из бюретки 25 — 30 см3 0,01 моль/дм3 раствора серной кислоты и опускают в нее конец холодильника 5. Закрывают нижнее отверстие предохранительного сосуда 2. Через воронку 3 наливают в колбу-смеситель 4 5 — 6 см3 раствора гидроокиси натрия 330 г/дм3; воронку 3 заменяют стеклянной палочкой или применяют зажим Мора и затем пускают пар.

8.9. Методы определения белковых веществ (сырого протеина)

1 — парообразователь; 2 — предохранительный сосуд; 3 — воронка; 4 — колба-смеситель; 5 — холодильник; 6 — колба-приемник

Черт. 8

Отгонку с водяным паром продолжают до тех пор, пока в приемную колбу не отгонится 50 — 60 см3 жидкости. По окончании отгонки конец холодильника обмывают дистиллированной водой, собирают воду в приемник и титруют избыток кислоты раствором 0,02 моль/дм3 гидроокиси натрия в присутствии двойного индикатора.

8.9.4.3 Обработка результатов

Массовую долю белковых веществ (X39) в процентах вычисляют по формуле

X_{39} = \frac{(V - V_{1}) \cdot K \cdot 0,00028 \cdot 6,25 \cdot 100 \cdot V_{2}}{V_{3} \cdot m} ,

где V — объем раствора гидроокиси натрия 0,02 моль/дм3, израсходованный на титрование серной кислоты в контрольном анализе, см3;

V1 — объем раствора гидроокиси натрия 0,02 моль/дм3, израсходованный на титрование избытка серной кислоты в рабочем анализе, см3;

0,00028 — количество азота, эквивалентное 1 см3 0,02 моль/дм3 раствора гидроокиси натрия, г;

K — коэффициент пересчета на точный раствор 0,02 моль/дм3 гидроокиси натрия;

6,25 — коэффициент пересчета азота на белковые вещества;

V2 — объем, в котором растворена сожженная навеска, см3;

V3 — объем раствора, взятый для отгонки, см3;

m — навеска исследуемого образца, г.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

8.9.5. Содержание белковых веществ (сырого протеина) в кормовой рыбной муке, направляемой на производство комбикормов — по ГОСТ 13496.4.

8.10. Методы определения антиокислителя-ионола

8.10.1 Определение массовой доли ионола колориметрическим методом

8.10.1.1 Сущность метода

Метод основан на способности ионола давать розовое окрашивание с хлорным железом и \alpha,\alpha\prime -дипиридилом.

Метод применяют при разногласиях в оценке качества продукции.

8.10.1.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Фотоэлектроколориметр или спектрофотометр с пределами измерения оптической плотности от 0 до 1,3 по ГОСТ 12083.

Холодильник стеклянный лабораторный по ГОСТ 25336.

Парообразователь.

Электроплитка бытовая по ГОСТ 14919.

Колбы мерные по ГОСТ 1770, вместимостью 25, 100, 200 см3.

Пробирки стеклянные по ГОСТ 25336.

Пипетки градуированные по ГОСТ 20292.

Часы механические по ГОСТ 10733.

Колбы конические со шлифом по ГОСТ 25336, вместимостью 25 и 50 см3.

Трубки соединительные стеклянные по ГОСТ 25336.

Компаратор.

Кальций хлористый кристаллический по ГОСТ 4460.

Железо треххлористое 6-водное по ГОСТ 4147, свежеприготовленный раствор 2 г/дм3 (0,2%-ный).

\alpha,\alpha\prime -дипиридил (4-метил-2,6-дитретичного бутилфенола).

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962, растворы 960 г/дм3 (96%-ный) и 500 г/дм3 (50%-ный),

Ионол технический перекристаллизованный из этилового спирта 960 г/дм3 (96%-ного).

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

8.10.1.3 Подготовка к анализу

8.10.1.3.1 Приготовление раствора \alpha,\alpha\prime -дипиридила.

200 мг \alpha,\alpha\prime -дипиридила растворяют в 1 см3 этилового спирта 960 г/дм3 и доводят объем дистиллированной водой до метки в мерной колбе вместимостью 100 см3.

8.10.1.3.2 Приготовление основного стандартного раствора ионола.

0,04 г перекристаллизованного ионола растворяют в этиловом спирте 960 г/дм3 в мерной колбе вместимостью 200 см3, доводят объем до метки спиртом и перемешивают. Раствор содержит 0,2 мг ионола в 1 см3.

Основной стандартный раствор ионола годен к употреблению в течение месяца при хранении его в холодном темном месте.

8.10.1.3.3 Приготовление рабочего стандартного раствора ионола.

Раствор готовят непосредственно перед определением.

2,5 см3 основного стандартного раствора ионола разбавляют этиловым спиртом 500 г/дм3 в мерной колбе вместимостью 25 см3. Раствор содержит 0,02 мг ионола в 1 см3.

8.10.1.4 Проведение анализа

В колбу для отгонки, соединенную с холодильником, помещают 3 г кристаллического хлористого кальция и 40 см3 дистиллированной воды. Содержимое колбы охлаждают до комнатной температуры. Отвешивают 2 г исследуемой рыбной муки с абсолютной погрешностью не более 0,001 г и помещают в ту же колбу. Колбу закрывают пробкой, в которую вставлены две стеклянные трубки, одна — для ввода в колбу пара из парообразователя, другая — для отвода дистиллята через холодильник в приемную колбу и нагревают, отгоняя ионол паром.

Дистиллят собирают в мерную колбу вместимостью 200 см3. Интенсивность отгонки должна быть такой, чтобы 100 см3 дистиллята были отогнаны за 20 — 30 мин. Когда в приемнике соберется 100 см3 дистиллята, отгонку прекращают. Форштосс холодильника смывают небольшими порциями подогретого до 70 °C этилового спирта 960 г/дм3, сливая его в мерную колбу с дистиллятом. Содержимое колбы охлаждают, доводят объем до метки этиловым спиртом, закрывают пробкой и перемешивают.

Для проведения цветной реакции в одну коническую колбу с притертой пробкой вместимостью 25 — 50 см3 вносят пипеткой 4 см3 дистиллята и 4 см3 спирта 500 г/дм3, в другую — 8 см3 этилового спирта 500 г/дм3 (контрольный опыт). В каждую колбу приливают но 2 см3 раствора \alpha,\alpha\prime -дипиридила, перемешивают, добавляют по 2 см3 раствора хлорного железа, снова перемешивают и ставят на 30 мин в темное место.

По истечении указанного времени измеряют оптическую плотность окрашенных растворов фотоэлектроколориметром в кювете с рабочей длиной 10 мм при длине волны 530 нм. Содержание ионола, соответствующее определенной оптической плотности, рассчитывают по градуировочному графику.

8.10.1.5 Построение градуировочного графика

В 8 конических колб с притертыми пробками вместимостью 25 — 50 см3 вносят от 0 до 2,5 см3 стандартного рабочего раствора, содержащего 0,02 мг ионола в 1 см3 (см. табл. 7) и доводят объем в каждой колбе до 8 см3 спиртом 500 г/дм3.

Таблица 7

Номер колбы	Количество рабочего стандартного раствора, см3	Количество добавленного спирта 500 г/дм3, см3	Количество ионола в колбе, мг
1	0,00 (контроль)	8,00	0,000
2	0,25	7,75	0,005
3	0,50	7,50	0,010
4	1,00	7,00	0,020
5	1,25	6,75	0,025
6	1,50	6,50	0,030
7	2,00	6,00	0,040
8	2,50	5,50	0,050

В каждую колбу приливают по 2 см3 \alpha,\alpha\prime -дипиридила, 2 см3 свежеприготовленного раствора хлорного железа 2 г/дм3, выдерживают 35 мин в темноте и определяют оптическую плотность фотоэлектроколориметром по отношению к этиловому спирту 500 г/дм3 в кювете с рабочей длиной 10 мм, начиная с контрольного опыта. Добавление \alpha,\alpha\prime -дипиридила и хлорного железа в колбы проводят с таким интервалом, чтобы колориметрирование содержимого очередной колбы началось ровно через 35 мин.

Величину оптической плотности контрольного опыта вычитают из величин оптической плотности, полученных при измерении серии стандартных растворов ионола (колбы 2 — 8).

По полученным данным строят градуировочный график, откладывая на оси абсцисс содержание ионола, на оси ординат — разность оптической плотности стандартного и контрольного растворов.

8.10.1.6 Обработка результатов

Массовую долю ионола (X40) в процентах вычисляют по формуле

X_{40} = \frac{m \cdot V \cdot 100}{m_{1} \cdot V_{1} \cdot 1000} ,

где m — содержание ионола, найденное по градуировочному графику, мг;

m1 — навеска муки, г;

V1 — объем дистиллята, взятый для цветной реакции, см3;

V — объем дистиллята в мерной колбе, см3;

1000 — коэффициент пересчета мг в г.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений (каждое вычислено по трем измерениям), допускаемые расхождения между которыми не должны превышать 0,01%.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

8.10.2 Определение массовой доли ионола визуально-колориметрическим методом

8.10.2.1 Сущность метода — по п. 8.10.1.1.

8.10.2.2. Аппаратура реактивы и материалы — по п. 8.10.1.2.

8.10.2.3 Подготовка к анализу

Приготовление шкалы стандартных растворов ионола. В двенадцать пробирок (по 3 пробирки для каждой концентрации) наливают пипеткой рабочий стандартный раствор ионола и раствор этилового спирта 500 г/дм3 в количествах, указанных в табл. 8.

Таблица 8

Номер пробирки	Объем, см3		Количество ионола в пробирке, мг	Количество ионола в муке, %
Номер пробирки	рабочего стандартного раствора ионола	этилового спирта 500 г/дм3	Количество ионола в пробирке, мг	Количество ионола в муке, %
1	0,4	7,6	0,008	0,02
2	1,2	6,8	0,024	0,06
3	2,0	6,0	0,040	0,10
4	4,0	4,0	0,080	0,20

8.10.2.4 Проведение анализа

Дистиллят готовят по п. 8.10.1.4.

4 см3 полученного дистиллята вносят в чистую, сухую пробирку (анализ ведут параллельно с приготовлением шкалы), добавляют 4 см3 этилового спирта 500 г/дм3 (50%-ного), 2 см3 \alpha,\alpha\prime -дипиридила и перемешивают. Добавляют 2 см3 хлорного железа, снова перемешивают и ставят на 35 мин в темное место.

По истечении указанного времени сравнивают (в компараторе или без него) окраску исследуемой пробы со шкалой стандартных растворов.

Если интенсивность окраски исследуемого раствора находится в интервале между двумя окрасками шкалы, указывают пределы массовой доли ионола в процентах.

8.10.2.5 Обработка результатов

Массовую долю ионола vv в процентах вычисляют по формуле

X_{41} = \frac{m \cdot V \cdot 100}{V_{1} \cdot m_{1} \cdot 1000} ,

где m — массовая доля ионола в пробирке стандартной шкалы, окраска которой соответствует окраске исследуемого образца, мг;

V — объем дистиллята в мерной колбе, см3;

V1 — объем дистиллята, взятый для колориметрирования, см3;

m1 — навеска муки, г; 1000 — коэффициент для пересчета мг в г.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

8.11. Методы определения кальция

8.11.1 Определение массовой доли кальция объемным методом

8.11.1.1 Сущность метода

Метод основан на осаждении кальция щавелевокислым аммонием, растворении осадка в серной кислоте и количественном определении выделившейся при этом щавелевой кислоты титрованием.

Метод применяют при разногласиях в оценке качества продукции.

8.11.1.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Электропечь сопротивления лабораторная по ГОСТ 13474.

Баня водяная.

Колбы конические по ГОСТ 25336.

Тигли фарфоровые по ГОСТ 9147.

Колбы мерные по ГОСТ 1770, вместимостью 100, 1000 см3.

Воронки по ГОСТ 25336, диаметром 50 — 70 мм.

Пипетки по ГОСТ 20292, вместимостью 1, 5, 10, 25 см3.

Эксикатор по ГОСТ 25336.

Бюретка по ГОСТ 20292, вместимостью 25 см3.

Палочки стеклянные.

Цилиндры мерные по ГОСТ 1770, вместимостью 10, 25 см3.

Бумага универсальная индикаторная.

Фильтры обеззоленные с белой лентой диаметром 70 — 100 мм.

Кислота соляная по ГОСТ 3118, раствор 200 г/дм3 (20%-ный).

Аммиак водный по ГОСТ 3760, раствор 100 г/дм3 (10%-ный) и 10 г/дм3 (1%-ный).

Кислота серная по ГОСТ 4204, раствор 50 г/дм3 (5%-ный) и разведенная 1:8.

Кальций хлористый по ГОСТ 4460, раствор 100 г/дм3 (10%-ный).

Термометр стеклянный технический по ГОСТ 2823 с пределом измерений температуры от 0 до плюс 500 °C.

Аммоний щавелевокислый по ГОСТ 5712, насыщенный раствор.

Метиловый красный по ГОСТ 5853, раствор 2 г/дм3 (0,2%-ный) спиртовой раствор.

Калий марганцовокислый по ГОСТ 20490, х.ч., раствор 0,02 моль/дм3 (0,1 н) (3,165 г марганцовокислого калия растворяют в 1000 см3 дистиллированной воды).

Кислота щавелевая, х.ч., по ГОСТ 22180.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

8.11.1.3 Проведение анализа

Навеску муки массой 1,0 — 1,5 г (3,0 — 4,0 г сырья) взвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,001 г в предварительно прокаленном до постоянной массы фарфоровом тигле и обугливают в муфельной печи при 200 — 300 °C, затем повышают температуру до 550 °C и озоляют. По окончании озоления тигель охлаждают 25 — 30 мин в эксикаторе и взвешивают. Прокаливание проводят до постоянной массы.

К полученной золе добавляют 2 — 3 капли воды, 2 см3 раствора соляной кислоты 200 г/дм3, подогревают до полного растворения золы и переносят раствор в мерную колбу вместимостью 100 см3, тщательно смывая воронку и тигель. Объем раствора в колбе доводят до метки дистиллированной водой.

25 см₃ солянокислой вытяжки помещают в колбу вместимостью 250 см3, добавляют 10 см3 насыщенного раствора щавелевокислого аммония, затем, добавляя по каплям раствор аммиака 100 г/дм3, нейтрализуют соляную кислоту по метилроту до перехода розового окрашивания в желтое и появления слабого запаха аммиака. Колбу помешают на плитку, нагревают и оставляют для осаждения на 2 — 3 ч. Осадок отфильтровывают через бумажный фильтр, колбу и осадок на фильтре промывают раствором аммиака 10 г/дм3 до полного удаления щавелевокислого аммония (полноту удаления проверяют добавлением нескольких капель раствора хлористого кальция 100 г/дм3 к последней порции промывной жидкости). В случае появления мути промывку осадка продолжают.

Фильтр с осадком переносят в колбу, в которой проводили осаждение, добавляют 50 см3 раствора серной кислоты 50 г/дм3, нагревают до температуры 90 °C для растворения осадка. Горячую смесь титруют раствором марганцовокислого калия 0,02 моль/дм3 до слабого розового окрашивания, не исчезающего в течение 1 мин. Параллельно титруют контрольную пробу — 50 см3 серной кислоты 50 г/дм3 с фильтром, нагретую до 90 °C.

8.11.1.4 Обработка результатов

Массовую долю кальция (X42) в процентах вычисляют по формуле

X_{42} = \frac{(V - V_{1}) \cdot K \cdot 0,002 \cdot 100\prime \cdot 100}{V_{2} \cdot m} ,

где V — объем раствора марганцовокислого калия 0,02 моль/дм3, израсходованный на титрование рабочей пробы, см3;

V₁ - объем раствора марганцовокислого калия 0,02 моль/дм3, израсходованный на титрование контрольной пробы, см3;

K — коэффициент пересчета на точный раствор 0,02 моль/дм3 марганцовокислого калия;

0,002 — количество кальция, соответствующее 1 см3 раствора 0,02 моль/дм3 марганцовокислого калия, г;

V₂ - объем солянокислой вытяжки, взятый для определения кальция, см3;

m — навеска исследуемого образца, г;

100' — объем солянокислой вытяжки, см3.

Коэффициент пересчета на точный 0,02 моль/дм3 (0,1 н) раствор марганцовокислого калия устанавливают следующим образом. Навеску перекристаллизованной щавелевой кислоты 2 — 3 г, отвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,001 г, растворяют в мерной колбе вместимостью 250 см3. К 20 см3 приготовленного раствора приливают 3 см3 серной кислоты, разведенной 1:8, нагревают на водяной бане до 90 °C и медленно титруют раствором марганцовокислого калия до появления розового окрашивания.

Коэффициент нормальности вычисляют по формуле

K_{\text{н}} = \frac{T_{\text{п}} \cdot V}{T_{\text{т}} \cdot V_{1}} ,

где V — объем раствора щавелевой кислоты, взятой для титрования, см3;

V₁ - объем раствора марганцовокислого калия, израсходованный на титрование, см3;

TП — практический титр раствора щавелевой кислоты, который рассчитывается следующим образом:

T_{\text{п}} = \frac{\text{навеска }H_{2}C_{2}O_{4},\text{взятая для установления }K_{\text{н}}}{250\text{см}^{3}} ;

TТ — теоретический титр раствора 0,05 моль/дм3 (0,1 н) щавелевой кислоты, который рассчитывают следующим образом:

T_{\text{т}} = \frac{\text{Г} \cdot \text{экв }H_{2}C_{2}O_{4}(\text{равный }63,03) \cdot 0,1\text{н}}{1000} .

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

8.11.2 Определение содержания кальция тригонометрическим методом

8.11.2.1 Сущность метода

Метод основан на образовании в щелочной среде малодиссоциированного комплексного соединения катиона кальция с динатриевой солью этилендиамин-N,N,N',N'-тетрауксусной кислоты (трилон Б). Эквивалентную точку при титровании определяют с помощью индикаторов кальцеина (флуорексона), хрома кислотного темно-синего или мурексида.

8.11.2.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Электропечь сопротивления лабораторная по ГОСТ 13474.

Потенциометр постоянного тока по ГОСТ 9245.

Баня водяная.

Тигли фарфоровые по ГОСТ 9147.

Колбы мерные по ГОСТ 1770, вместимостью 100, 200, 1000 см3.

Воронки по ГОСТ 25336, диаметром 50 — 70 мм.

Колбы по ГОСТ 1770, вместимостью 200 — 250 см3.

Стакан фарфоровый по ГОСТ 9147, вместимостью 100 см3.

Пипетки по ГОСТ 20292, вместимостью 1, 2, 5 и 10 см3.

Бюретка по ГОСТ 20292, вместимостью 25 см3.

Палочки стеклянные по ГОСТ 25336.

Фильтры обеззоленные диаметром 50 — 70 мм.

Термометр стеклянный технический по ГОСТ 2823 с пределом измерений температуры от 0 до плюс 150 °C.

Аммоний хлористый по ГОСТ 3773.

Аммиак водный по ГОСТ 3760, раствор 250 моль/дм3 (25%-ный).

Аммиачный буферный раствор с pH 9,5 — 10,0.

Хромоген черный.

Калий хлористый по ГОСТ 4234.

Мурексид.

Натрий сернистокислый 7-водный по ГОСТ 429, раствор 50 г/дм3 (5%-ный). Хранят в парафинированной склянке или сосуде из плексигласа не более двух недель.

Соль динатриевая этилендиамин-N,N,N',N'-тетрауксусной кислоты (трилон Б) по ГОСТ 10652.

Натрий лимоннокислый трехзамещенный по ГОСТ 22280, раствор 100 г/дм3 (10%-ный).

Кислота соляная по ГОСТ 3118, концентрированная и раствор 200 г/дм3 (20%-ный).

Калия гидроокись по ГОСТ 24363.

Калий марганцовокислый по ГОСТ 20490.

Кальций углекислый по ГОСТ 4530, раствор 200 г/дм3 (20%-ный).

Кальцеин (флуорексон).

Кислотный хром темно-синий.

Триэтаноламин.

Гидроксиламин солянокислый по ГОСТ 5456.

Бумага индикаторная универсальная.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Спирт этиловый технический по ГОСТ 17299, 960 г/дм3 (96%-ный).

8.11.2.3 Подготовка и очистка реактивов

8.11.2.3.1. Приготовление и очистка раствора трилона Б 0,01 моль/дм3 (0,02 н).

10 г трилона Б растворяют в 100 см3 дистиллированной воды, понемногу добавляя этиловый спирт до появления неисчезающего осадка. Осадок отфильтровывают и отбрасывают.

К фильтрату добавляют равный объем спирта; выпавший осадок отфильтровывают под вакуумом, промывают несколько раз ацетоном, затем 2 — 3 раза эфиром.

Соль сушат при комнатной температуре на листе фильтровальной бумаги, затем — до постоянной массы при температуре не выше 80 °C.

3,72 г высушенного трилона Б растворяют дистиллированной водой в мерной колбе вместимостью 200 см3. Если раствор мутный, его переносят через фильтр в мерную колбу вместимостью 1000 см3, доводят объем до метки дистиллированной водой и тщательно перемешивают.

Допускается приготовление раствора трилона Б из фиксанала.

8.11.2.3.2. Титр раствора трилона Б проверяют по стандартному раствору кальция: 5 см3 раствора, содержащего 0,4 мг/см3 кальция, вносят в коническую колбу вместимостью 150 см3, приливают 50 см3 воды, 5 см3 раствора гидроокиси калия 200 г/дм3, флуорексон или кислотный хром темно-синий и титруют раствором трилона Б. Одновременно титруют контрольную пробу.

Нормальность трилона Б рассчитывают по формуле

N = \frac{0,02 \cdot V}{V_{1}} ,

где 0,02 — нормальность раствора, содержащего 0,4 мг/см3 кальция;

V — объем раствора кальция 0,4 мг/см3, взятый для титрования, см3;

V₁ - объем раствора трилона Б, израсходованный на титрование раствора кальция, см3.

Титр раствора трилона Б можно проверять по раствору 0,005 моль/дм3 (0,01 н) сернокислого магния.

8.11.2.3.3. Приготовление стандартного раствора, содержащего 0,4 мг/см3 кальция.

1,001 г углекислого кальция, высушенного при температуре 100 — 105 °C до постоянной массы, растворяют в 2 см3 соляной кислоты 200 г/дм3 в мерной колбе вместимостью 1000 см3, объем доводят до метки дистиллированной водой.

8.11.2.3.4 Приготовление индикатора флуорексона (кальцеина).

100 г хлористого калия и 1 г флуорексона растирают в ступке до однородной массы. Хранят в банке с притертой пробкой в темном сухом месте не более 1 года.

8.11.2.3.5 Приготовление индикатора кислотного хрома темно-синего.

100 г хлористого калия и 1 г индикатора кислотного хрома темно-синего растирают в ступке до однородной массы. Хранят в банке с притертой пробкой в темном сухом месте.

8.11.2.3.6. Приготовление раствора триэтаноламина (ТЭА) 250 г/дм3 (25%-ного).

22,3 см3 ТЭА растворяют в небольшом объеме дистиллированной воды в мерной колбе вместимостью 1000 см3 и доводят объем до метки.

8.11.2.3.7 Приготовление раствора индикатора хромогена черного.

0,5 г индикатора растворяют в 30 см3 аммиачного буферного раствора в мерной колбе вместимостью 100 см3 и доводят объем до метки этиловым спиртом 960 г/дм3 (96%-ным).

8.11.2.3.8 Приготовление аммиачного буферного раствора pH 9,5 — 10,0.

20 г хлористого аммония и 100 см3 раствора аммиака 250 г/дм3 (25%-ного) растворяют в мерной колбе вместимостью 1000 см3 и доводят объем до метки дистиллированной водой.

8.11.2.3.9 Проверка качества воды.

К 100 см3 дистиллированной воды прибавляют 1 см3 аммиачного буферного раствора и 5 — 7 капель индикатора хромогена черного.

Голубая с сиреневым оттенком окраска раствора указывает на чистоту воды.

8.11.2.4 Проведение анализа

Навеску муки 1,0 — 1,5 г, отвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,001 г в предварительно прокаленный до постоянной массы фарфоровый тигель, осторожно обугливают при температуре 200 °C, а затем озоляют в муфельной печи при температуре 500 — 550 °C. После озоления тигель с золой охлаждают в эксикаторе и взвешивают.

К полученной золе добавляют 2 — 3 капли воды, 2 см3 соляной кислоты 200 г/дм3, подогревают до полного растворения золы и переносят через воронку в мерную колбу вместимостью 100 см3, смывая тигель и воронку. Объем в колбе доводят до метки дистиллированной водой и перемешивают.

В зависимости от предполагаемого содержания кальция 5 — 10 см3 зольного раствора переносят в колбу вместимостью 200 — 250 см3, объем раствора доводят дистиллированной водой до 100 см3, добавляют 0,1 г лимоннокислого натрия, столько же гидроксиламина, 10 см3 раствора 200 г/дм3 гидроокиси калия (pH раствора 13,5) и индикатор флуорексон.

Вместо лимоннокислого натрия и солянокислого гидроксиламина можно использовать 0,5 см3 раствора триэтаноламина 250 г/дм3.

Все реагенты добавляют непосредственно перед титрованием, каждый раз перемешивая раствор.

Титруют раствором трилона Б при интенсивном перемешивании до перехода окраски от желто-зеленой до розовой.

Одновременно проводят контрольный опыт без зольного раствора.

8.11.2.5 Обработка результатов

Массовую долю кальция (X43) в процентах вычисляют по формуле

X_{43} = \frac{V_{2} \cdot (V_{4} - V_{3}) \cdot N \cdot 0,04 \cdot 100}{V_{5} \cdot m} ,

где V2 — общий объем раствора золы, см3;

V₃ - объем раствора трилона Б, израсходованный на титрование в контрольном анализе, см3;

V₄ - объем раствора трилона Б, израсходованный на титрование в рабочем анализе, см3;

V5 — объем раствора золы, взятый на титрование, см3;

N — нормальность раствора трилона Б;

0,04 — масса кальция, соответствующая 1 см3 точного раствора 1 моль/дм3 трилона Б, г;

m — навеска исследуемого образца, г.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

8.12. Методы определения фосфора

8.12.1 Определение фосфора объемным методом

8.12.1.1 Сущность метода

Метод основан на образовании нормальных солей молибденовой кислоты и двузамещенных солей фосфорной кислоты при титровании осадка фосфомолибдата, полученного в определенных условиях, гидроокисью натрия. Метод применяют при разногласиях в оценке качества продукции.

8.12.1.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Электроплитка бытовая по ГОСТ 14919.

Колбы для сжигания по ГОСТ 25336, вместимостью 100 см3.

Воронки стеклянные по ГОСТ 25336.

Колбы мерные по ГОСТ 1770, вместимостью 100 см3.

Пипетки по ГОСТ 20292, вместимостью 1, 2, 5, 10 и 25 см3.

Стаканы химические или колбы по ГОСТ 25336, вместимостью 300 — 400 см3.

Фильтры бумажные с синей лентой.

Кислота серная по ГОСТ 4204, концентрированная и раствор 0,05 моль/дм3 (0,1 н).

Кислота азотная по ГОСТ 4461, концентрированная и раствор 10 г/дм3 (1%-ный).

Аммиак водный по ГОСТ 3760.

Аммоний азотнокислый по ГОСТ 22867, насыщенный раствор.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, раствор 0,1 моль/дм3 (0,1 н).

Термометр стеклянный технический по ГОСТ 2823 с пределом измерений температуры от 0 до плюс 150 °C.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Фенолфталеин по ГОСТ 5850, раствор 10 г/дм3 (1%-ный).

Водорода перекись по ГОСТ 10929.

Аммоний молибденовокислый, х.ч., по ГОСТ 3765, раствор 90 г/дм3 (9%-ный).

8.12.1.3 Подготовка к анализу

8.12.₁.3.₁. Приготовление раствора молибденовокислого аммония.

В мерном стакане вместимостью 1000 см3 растворяют 90 г химически чистой соли в теплой воде. После охлаждения к раствору прибавляют аммиак до слабощелочной реакции, объем доводят дистиллированной водой до 1 дм3 и через 12 ч фильтруют.

8.12.1.4 Проведение анализа

Навеску кормовой муки массой 0,4 — 0,5 г (сырья 0,9 — 1,0 г), взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,0001 г, помещают в колбу Кьельдаля вместимостью 100 см3, заливают 5 см3 серной кислоты (плотностью 1840 кг/см3) и 5 см3 азотной кислоты (плотностью 1520 кг/м3). Колбу с содержимым нагревают сначала очень осторожно, чтобы избежать сильного вспенивания, потом кипятят для разрушения органического вещества. В процессе сжигания несколько раз добавляют по 2 см3 азотной кислоты или перекиси водорода вначале 2 см3, а затем по каплям, предварительно охлаждая колбу, до полного обесцвечивания раствора.

После охлаждения в колбу приливают 5 см3 дистиллированной воды и осторожно кипятят для удаления окислов азота.

Содержимое остывшей колбы количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 см3 многократным смыванием дистиллированной водой, после охлаждения объем раствора доводят до метки и тщательно перемешивают.

Отбирают 25 см3 раствора в химический стакан или коническую колбу вместимостью 300 — 400 см3, нейтрализуют аммиаком до появления осадка (примерно 2 см3), добавляют 5 см3 азотной кислоты, 10 см3 насыщенного раствора азотнокислого аммония и доводят объем жидкости дистиллированной водой до 60 — 80 см3. Раствор подогревают до 30 — 45 °C и при перемешивании приливают 10 см3 раствора молибденовокислого аммония, дают постоять 1 — 2 мин и снова приливают при помешивании 5 см3 раствора молибденовокислого аммония.

Смесь перемешивают в течение 5 — 15 мин и оставляют на 1 ч, после этого фильтруют через плотный бумажный фильтр, стараясь оставить осадок в колбе.

Промывают осадок в колбе, колбу и фильтр раствором азотной кислоты 10 г/дм3, а затем охлажденной водой до нейтральной реакции промывных вод на лакмус. Всего на промывание расходуется от 180 до 200 см3 жидкости.

Промытый фильтр с осадком переносят в колбу, в которой проводилось осаждение, добавляют раствор гидроокиси натрия 0,1 моль/дм3 в количестве несколько большем, чем требуется для растворения осадка. Осадок растворяют при помешивании стеклянной палочкой, добавляют 20 см3 воды, свободной от углекислоты, 0,5 см3 раствора фенолфталеина 10 г/дм3 и оттитровывают избыток щелочи раствором серной кислоты 0,05 моль/дм3.

8.12.1.5 Обработка результатов

Массовую долю фосфора (X44) в процентах вычисляют по формуле

X_{44} = \frac{(V \cdot K_{1} - V_{1} \cdot K_{2}) \cdot 100 \cdot 100 \cdot 0,0001348}{m \cdot 25} ,

где V — объем раствора гидроокиси натрия 0,1 моль/дм3, взятый для растворения осадка, см3;

K₁ - коэффициент пересчета на точный раствор 0,1 моль/дм3 гидроокиси натрия;

K₂ - коэффициент пересчета на точный раствор 0,05 моль/дм3 серной кислоты;

V₁ - объем раствора серной кислоты 0,05 моль/дм3, израсходованный на титрование избытка гидроокиси натрия, см3;

100 — объем минерализованной пробы, см3;

0,0001348 — количество фосфора, соответствующее 1 см3 раствора 0,1 моль/дм3 гидроокиси натрия, г;

m — масса исследуемого образца, г;

25 — объем исследуемого раствора, взятый для анализа, см3.

Вычисление проводят до первого десятичного знака.

8.12.2 Колориметрический метод определения фосфора

8.12.2.1 Сущность метода

Метод основан на способности фосфатов давать с молибденово-кислым аммонием комплексные соединения, которые восстанавливаются до окрашенного в голубой цвет молибденового окисла, называемого молибденовой синью.

8.12.2.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Фотоэлектроколориметр или спектрофотометр с пределами измерения оптической плотности от 0 до 1,3 по ГОСТ 12083.

Термостат.

Колбонагреватель или электроплитка бытовая по ГОСТ 14919.

Бумага масштабно-координатная по ГОСТ 334.

Колбы для сжигания по ГОСТ 25336, вместимостью 50 — 100 см3.

Колбы мерные по ГОСТ 1770, вместимостью 100 см3.

Пробирки с делениями по ГОСТ 25336, вместимостью 10 см3.

Пипетки по ГОСТ 20292, вместимостью 1, 2, 5 и 10 см3.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Кислота серная по ГОСТ 4204, концентрированная, 0,05 (0,1 н) и 2,5 моль/дм3 (5 н) растворы.

Натрий сернистокислый 7-водный по ГОСТ 429.

Аммоний молибденовокислый по ГОСТ 3765, х.ч., раствор 25 г/дм3 (2,5%-ный).

Водорода перекись по ГОСТ 10929.

Натрия бисульфит технический водный раствор по ГОСТ 902.

Калий фосфорнокислый однозамещенный по ГОСТ 4198.

Эйконоген (1-амино-2-нафтол-4-сульфоновая кислота).

8.12.2.3 Подготовка к анализу

8.12.2.3.1. Приготовление раствора 1-амино-2-нафтол-4-сульфоновой кислоты.

15 г бисульфита натрия и 0,5 г сернистокислого натрия растворяют в теплой дистиллированной воде в мерной колбе вместимостью 100 см3, добавляют 0,25 г эйконогена. После растворения последнего (при слабом нагревании на водяной бане) раствору дают охладиться и доводят объем до метки. Полученный основной раствор годен в течение 15 сут и должен храниться в темном прохладном месте (в случае выпадения кристаллов раствор подогревают на водяной бане до их растворения); перед употреблением его разводят дистиллированной водой в соотношении 1:4.

8.12.2.3.2. Приготовление стандартного раствора фосфорнокислого однозамещенного калия.

В мерную колбу вместимостью 1000 см3 отвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,0001 г 350,9 мг фосфорнокислого калия, приливают 20 см3 серной кислоты 0,05 моль/дм3 и доводят объем дистиллированной водой до метки. 1 см3 раствора содержит 0,08 мг фосфора.

8.12.2.4 Проведение анализа

Навеску образца массой (0,35 — 0,45 г — для рыбной и китовой граксовой муки; 0,8 — 1,0 г — для китовой сальной, мясной и муки из водорослей; 1,0 — 1,5 г — для рыбного и китового сырья), взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,0001 г, помещают в колбу для сжигания, приливают 10 см3 концентрированной серной кислоты. Колбу нагревают сначала осторожно, во избежание сильного вспенивания. Через 1,5 — 2,0 ч, дав колбе остыть, приливают несколько капель перекиси водорода (непосредственно в жидкость, а не по стенкам колбы) и продолжают нагревание на сильном огне. Эту операцию повторяют через 20 — 30 мин до полного обесцвечивания раствора и после 5 — 10 мин кипения дают колбе остыть.

Параллельно проводят контрольный анализ с перекисью водорода.

Содержимое остывшей колбы переносят многократным смыванием небольшими порциями дистиллированной воды в мерную колбу вместимостью 100 см3, после охлаждения объем жидкости доводят до метки и тщательно перемешивают.

Для проведения цветной реакции пипеткой отбирают из колбы в две мерные пробирки вместимостью 10 см3 определенное количество анализируемого и контрольного растворов: при массовой доле фосфора в образце от 1 до 2% — 2 см3, от 2% и более — 0,5 — 1,0 см3 и добавляют соответствующее количество раствора серной кислоты 2,5 моль/дм3, указанное в табл. 9.

Таблица 9

Анализируемый раствор, см3	2,5 моль/дм3 раствор серной кислоты, см3
0,5	1,25
1,0	1,00
2,0	0,50

После этого в пробирки приливают по 1,25 см3 молибденово-кислого аммония и 0,5 см3 раствора эйконогена, объем смеси доводят дистиллированной водой до метки, энергично встряхивают пробирку и помещают ее в термостат на 25 мин при 37 °C.

Оптическую плотность определяют фотоэлектроколориметром в кюветах с рабочей длиной 3 мм при длине волны 690 нм против контроля. Содержание фосфора, соответствующее определенной оптической плотности, рассчитывают по градуировочному графику.

8.12.2.5 Построение градуировочного графика

В мерные пробирки вместимостью 10 см3 вносят из микробюретки стандартный раствор однозамещенного фосфорнокислого калия в количествах, указанных в табл. 10.

Таблица 10

Номер пробирки	Количество стандартного раствора однозамещенного фосфорнокислого калия, см3	Массовая доля фосфора, мг
1	0,5	0,04
2	1,0	0,03
3	1,5	0,12
4	2,0	0,16
5	2,5	0,20

В каждую пробирку приливают по 1,25 см3 раствора серной кислоты 2,5 моль/дм, 1,25 см3 молибденовокислого аммония и 0,5 см3 раствора эйконогена, объем смеси доводят дистиллированной водой до метки и далее поступают так же, как с пробой.

По полученным данным строят градуировочный график, откладывая на оси абсцисс — массовую долю фосфора, соответствующую определенному разведению, по оси ординат — оптические плотности.

8.12.2.6 Обработка результатов

Массовую долю фосфора (X45) в процентах вычисляют по формуле

X_{45} = \frac{m_{1} \cdot V \cdot 100}{V_{1} \cdot m} ,

где m — навеска исследуемого образца, г;

m₁ - количество фосфора, найденное по градуировочному графику, мг;

V — объем, до которого доводят минерализованную пробу, см3;

V₁ - объем исследуемого раствора, взятый для проведения цветной реакции, см3;

Вычисления проводят до первого десятичного знака.

8.13. Определение песка

8.13.1 Сущность метода

Метод основан на разрушении органических веществ муки соляной кислотой, отмывании песка водой и весовом определении его.

8.13.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Электропечь сопротивления по ГОСТ 13474.

Эксикатор по ГОСТ 25336.

Стакан химический по ГОСТ 25336, вместимостью 150 — 200 см3.

Стекло часовое диаметром 70 — 80 мм.

Палочка стеклянная по ГОСТ 25336.

Пипетка Мора по ГОСТ 20292, вместимостью 5, 10 см3.

Фильтры обеззоленные.

Тигли фарфоровые по ГОСТ 9147.

Кислота соляная по ГОСТ 3118, разведенная водой в соотношении 1:1.

8.13.3 Проведение анализа

Навеску муки массой от 18 до 20 г, взятую из средней пробы без просеивания через сито и измельчения в ступке, взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,1 г, помещают в стакан вместимостью 150 см3, наливают 40 — 50 см3 соляной кислоты (1:1) и нагревают до кипения, непрерывно помешивая, пока масса в стакане не перестанет вспучиваться. Накрывают стакан часовым стеклом и оставляют кипеть 15 мин.

Прекратив нагревание, стакан доливают водой почти доверху, энергично размешивают содержимое стеклянной палочкой и оставляют в покое на 3 — 5 мин, после чего приступают к отмыванию песка.

К водопроводному крану или большой бутыли с водой присоединяют стеклянную трубку с шаровидным расширением посредине и оттянутым концом с диаметром отверстия 1 — 2 мм (удобно пользоваться пипеткой Мора вместимостью 5 — 10 см3). В расширение трубки вкладывают кусочек ваты в качестве фильтра и устанавливают подачу воды 150 — 170 см3/мин.

Отрегулировав подачу воды, подставляют под струю стакан с гидролизатом, погружая трубку до половины высоты стакана (4 — 5 см от его дна). Слив воды происходит через край стакана.

Продолжительность отделения разрушенных органических веществ — 20 мин. По окончании отмывания на дне стакана остается песок и небольшое количество крупных частиц муки. Для удаления этих частиц осадок заливают 25 — 30 см3 насыщенного раствора поваренной соли, перемешивают и, дав песку осесть на дно, осторожно сливают жидкость вместе со взвешенными частицами муки. Обработку раствором соли повторяют 3 — 4 раза до прекращение всплывания частиц муки.

Осадок в стакане промывают 2 — 3 раза декантацией и количественно переносят на обеззоленный фильтр, прокаливают в предварительно взвешенном тигле в муфельной печи при температуре 500 — 550 °C в течение 15 мин, охлаждают и взвешивают.

8.13.4 Обработка результатов

Массовую долю песка (X46) в процентах вычисляют по формула

X_{46} = \frac{(m_{2} - m_{1}) \cdot 100}{m} ,

где m — навеска исследуемого образца, г;

m₁ - масса пустого тигля, г;

m₂ - масса тигля с песком после прокаливания, г.

Вычисление проводят до первого десятичного знака.

8.14. Определение посторонних примесей (стекла)

8.14.1 Сущность метода

Метод основан на извлечении из муки неорганических примесей водой, фильтровании их, высушивании и определении компонентов с помощью оптических приборов.

8.14.2 Аппаратура, материалы и реактивы — по п. 8.13.2 со следующими дополнениями:

Лупа по ГОСТ 8309 или микроскоп по ГОСТ 8074.

8.14.3 Проведение анализа

Навеску муки массой от 18 до 20 г, взятую из средней пробы без просеивания через сито и измельчения в ступке, обрабатывают по п. 8.13.3 (без прокаливания).

Полученный осадок подсушивают фильтровальной бумагой и исследуют под лупой или микроскопом при увеличении 20 - 50^{\times} . Частицы стекла отличаются от песка по прозрачности и по острым очертаниям граней.

При обнаружении частиц, похожих на стекло, весь осадок передают в соответствующий институт или лабораторию для получения окончательного заключения после исследования в поляризованном свете.

При наличии в лаборатории поляризационной лупы исследование выделенного из муки песка проводят следующим образом. Песок распределяют тонким слоем на предметном стекле, помещают на столик лупы (между поляризатором и анализатором) и исследуют в простом свете при увеличении 10^{\times} . Обнаруженные частицы, похожие на стекло, наблюдают в поляризованном свете, после чего медленно вращают анализатор до затемнения поля, сосредоточив внимание на подозрительных частицах. В поляризованном свете кварцевый песок выступает в виде ярких кристалликов на темном фоне, а частицы стекла исчезают вовсе или принимают вид тусклых кусочков со светлыми очертаниями. Для получения более отчетливой картины рекомендуется смочить подозрительные частицы каплей воды, накрыть покровным стеклом и еще раз просмотреть в поляризованном свете. В капле воды стекло принимает вид равномерно темных кусочков.

Наличие стекла в муке не допускается.

8.15. Определение углекислого кальция

8.15.1 Сущность метода

Метод основан на взаимодействии соляной кислоты с углекислым кальцием и количественном определении его титрованием избытка кислоты.

8.15.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Электроплитка бытовая по ГОСТ 14919.

Стаканы стеклянные по ГОСТ 25336.

Колбы мерные по ГОСТ 1770.

Бюретка по ГОСТ 20292.

Кислота соляная по ГОСТ 3118, раствор 1 моль/дм3 (1 н).

Фенолфталеин по ГОСТ 5850, спиртовой раствор 10 г/дм3 (1%-ный).

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, раствор 1 моль/дм3 (1 н).

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

8.15.3 Проведение анализа

Навеску муки массой 3 — 5 г, взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,001 г, помещают в стеклянный стакан вместимостью 500 см3, добавляют 100 — 150 см3 горячей воды и 100 см3 раствора соляной кислоты 1 моль/дм3. После прекращения выделения пузырьков углекислоты содержимое стакана подогревают и выдерживают при слабом кипении 25 — 30 мин. После охлаждения к раствору добавляют 3 — 4 капли спиртового раствора фенолфталеина 10 г/дм3 и титруют раствором гидроокиси натрия 1 моль/дм3 до появления розового окрашивания.

8.15.4 Обработка результатов

Массовую долю углекислого кальция (X47) в процентах вычисляют по формуле

X_{47} = \frac{(V \cdot K_{1} - V_{1} \cdot K_{2}) \cdot 0,05 \cdot 100}{m} ,

где V — объем раствора соляной кислоты 1 моль/дм3, взятый для растворения навески, см3;

V₁ - объем раствора гидроокиси натрия 1 моль/дм3, пошедший на титрование избытка кислоты, см3;

K₁ - коэффициент пересчета на точный раствор соляной кислоты 1 моль/дм3;

K₂ - коэффициент пересчета на точный раствор 1 моль/дм3 щелочи;

0,05 — количество углекислого кальция, соответствующее 1 см3 точного раствора соляной кислоты 1 моль/дм3, г;

m — навеска исследуемого образца, г.

Вычисление проводят до первого десятичного знака.

9. МЕТОДЫ АНАЛИЗА КЛЕЙДАЮЩЕГО СЫРЬЯ, КЛЕЯ И КЛЕЕВЫХ БУЛЬОНОВ

9.1 Подготовка средней пробы — по п. 2.7.

9.2 Определение клеящей способности — по ГОСТ 2067.

9.3. Определение сухого остатка

9.3.1 Сущность метода

Метод основан на обезвоживании навески высушиванием и определении сухих веществ взвешиванием.

9.3.2 Аппаратура и материалы

Шкаф сушильный по ГОСТ 13474.

Термометр стеклянный технический по ГОСТ 2823 с пределом измерений температуры от 0 до плюс 150 °C.

Палочки стеклянные.

Стаканчики для взвешивания (бюксы) стеклянные по ГОСТ 25336.

Эксикатор по ГОСТ 25336.

9.3.3 Проведение анализа

Навеску галерты массой от 1,5 до 2 г, взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,001 г, помещают тонким слоем в предварительно высушенную бюксу со стеклянной палочкой и высушивают в шкафу, периодически перемешивая, сначала при 60 — 80 °C, а затем при 100 — 105 °C до постоянной массы.

9.3.4 Обработка результатов

Массовую долю сухого остатка (X48) в процентах вычисляют по формуле

X_{48} = \frac{m_{2} - m_{1}}{m} \cdot 100 ,

где m — масса галерты, г;

m1 — масса пустой бюксы, г;

m2 — масса бюксы с галертой после сушки, г.

Вычисление проводят до первого десятичного знака.

9.4. Определение жира — по п. 3.7.1; 3.7.2 (метод применяют при разногласиях в оценке качества продукции).

9.4.1 Определение жира экстракционным методом в аппарате Сокслета

Навеску галерты массой 6 — 8 г смешивают до загустения с тщательно промытым прокаленным песком и высушивают в шкафу при температуре 100 — 105 °C до постоянной массы.

Высушенную навеску галерты растирают в фарфоровой ступке, помещают в пакет или патрон из фильтровальной бумаги и переносят в экстрактор аппарата Сокслета. Дальнейшее определение проводят по п. 3.7.1.3.

9.5 Определение золы — по п. 11.6.

9.6 Определение хлористого натрия — по п. 3.5.

9.7. Определение муравьиной кислоты

9.7.1 Сущность метода

Метод основан на взаимодействии кислоты с раствором щелочи и определении количества кислоты титрованием.

9.7.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Баня водяная.

Колба коническая по ГОСТ 25336, вместимостью 200 — 300 см3.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, раствор 0,1 моль/дм3 (0,1 н).

Фенолфталеин по ГОСТ 5850, спиртовой раствор 10 г/дм3 (1%-ный).

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

9.7.3 Проведение анализа

Навеску жидкого клея массой от 1,5 до 2 г, взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,001 г, помещают в колбу вместимостью 200 — 300 см3, растворяют, подогревая на водяной бане, в 100 см3 дистиллированной воды, добавляют несколько капель фенолфталеина и титруют раствором гидроокиси натрия 0,1 моль/дм3 до появления розового окрашивания.

9.7.4 Обработка результатов

Массовую долю муравьиной кислоты (X49) в процентах вычисляют по формуле

X_{49} = \frac{V \cdot K \cdot 0,0046 \cdot 100}{m} ,

где V — объем раствора гидроокиси натрия 0,1 моль/дм3, израсходованный на титрование, см3;

K — коэффициент пересчета на точный раствор 0,1 моль/дм3 гидроокиси натрия;

0,0046 — количество муравьиной кислоты, соответствующее 1 см3 раствора 0,1 моль/дм3 гидроокиси натрия, г;

m — навеска клея, г.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

9.8. Определение условной вязкости по Энглеру

9.8.1 Сущность метода

Метод основан на определении вискозиметром времени истечения раствора клея стандартной концентрации по сравнению с водой.

9.8.2 Аппаратура и материалы

Вискозиметр для определения условной вязкости по ГОСТ 1532.

Секундомер механический по ГОСТ 5072.

Баня водяная.

Термометр ртутный стеклянный лабораторный с пределами измерений от 0 до 200 и от 0 до 50 °C по ГОСТ 215.

Колба мерная по ГОСТ 1770, вместимостью 200 см3.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

Бензин авиационный марки Б-70 по ГОСТ 1012.

Марля медицинская по ГОСТ 9412.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

9.8.3 Подготовка к анализу

Прибор устанавливают так, чтобы три штифта во внутреннем измерительном сосуде находились в горизонтальной плоскости, для чего регулируют установочные винты треножника, пока все три острия указателей уровня не будут едва заметны над поверхностью воды, налитой во внутренний сосуд. Объем воды регулируется удалением или добавлением жидкости при помощи пипетки.

Установленный треножник не следует сдвигать с места. Нагревательную баню вискозиметра необходимо каждый раз устанавливать на треножнике в одном и том же положении.

Определение водного числа вискозиметра Энглера

Водным числом вискозиметра называется время истечения 200 см3 дистиллированной воды при 20 °C.

Время, необходимое для истечения указанного количества воды, должно быть не менее 50 и не более 52 с. Среднее для данного прибора время, принимаемое за водное число прибора, должно быть определено не менее 6 раз подряд.

Во внутренний сосуд немного выше, чем острия штифтов, наливают дистиллированную воду температурой 20 °C, поддерживая ее на том же уровне в течение 10 — 15 мин с помощью водяной бани.

Слегка приподнимают штепсель и выпускают немного воды из сосуда, чтобы вся сточная трубка также заполнялась водой. Штепсель должен быть новый, деревянный, без зазубрин и повреждений на конце.

Из внутреннего сосуда отбирают пипеткой излишек воды, чтобы ее поверхность находилась точно на уровне остриев штифтов.

Под сточное отверстие вискозиметра ставят чистую сухую измерительную колбу.

Установив прибор, закрывают его крышкой, слегка придерживая рукой штепсель, запирающий сточное отверстие.

Убедившись, что температура воды во внутреннем сосуде равна 20 °C, быстро (не двигая прибора) приподнимают штепсель и одновременно другой рукой пускают в ход секундомер.

Штепсель кладут рядом на стекло. Внимательно наблюдая за колбой, останавливают секундомер в момент, когда колба наполнится до метки 200 см3. Счет ведут по нижнему мениску; луч зрения должен быть перпендикулярен оси колбы.

9.8.4 Проведение анализа

Перед каждым определением внутренний сосуд вискозиметра и его сточную трубку тщательно промывают чистым бензином и просушивают воздухом (вытирать внутренний сосуд не допускается), капли с внутреннего сосуда могут быть сняты кусочком фильтровальной бумаги с ровно обрезанными краями.

Раствор клея 18%-ной концентрации по товарно-сухому клею или 15%-ной — по беззольному и безводному клею фильтруют сначала через металлическое, а затем через шелковое сито (или марлю), подогревают до 30 °C и наполняют им внутренний сосуд вискозиметра. Необходимо следить за тем, чтобы не образовывалось пузырьков воздуха. Уровень залитого раствора клея должен немного превышать острия штифта. Деревянный штепсель должен плотно закрывать сточное отверстие.

Во внешний сосуд прибора наливают воду температурой несколько выше 80 °C. Чтобы во время опыта температура исследуемого клея была одинаковой (точно 30 °C), температуру клея, залитого во внутренний сосуд, доводят точно до 30 °C и выдерживают ее в течение 5 мин. Температуру бани устанавливают на 0,2 °C выше температуры клея и поддерживают ее на этом уровне на протяжении опыта, перемешивая содержимое бани мешалкой.

Подняв немного деревянный штепсель, дают стечь излишку клея, чтобы уровень его совпадал с верхними точками остриев. Если клея вытечет больше, чем нужно, следует добавить его по каплям погружая острия, следя за тем, чтобы в клее не оставалось пузырьков воздуха.

Установив прибор, его закрывают крышкой и под сточное отверстие ставят чистую сухую измерительную колбу. Клей непрерывно перемешивают термометром, осторожно вращая вокруг штепселя крышку прибора, в которую вставлен термометр.

Когда термометр будет показывать точно 30 °C, быстро вынимают штепсель и одновременно нажимают кнопку секундомера. Как только уровень раствора клея в измерительной колбе дойдет точно до метки 200 см3, секундомер останавливают и отсчитывают время.

9.8.5 Обработка результатов

Вязкость клея E30 (в градусах Энглера) при 30 °C вычисляют по формуле

E_{30} = \frac{\tau_{30}}{\tau_{20}} ,

где \tau_{30} — время истечения из вискозиметра 200 см3 исследуемого раствора при температуре 30 °C, с;

\tau_{20} — время истечения из вискозиметра 200 см3 дистиллированной воды при температуре 20 °C (водного число вискозиметра), с.

При определении водною числа вискозиметра Энглера расхождение между двумя параллельными определениями не должно превышать 0,5 с.

При определении вязкости по Энглеру расхождение между двумя параллельными определениями не должно превышать 1 с.

9.9. Проба на загнивание

9.9.1 Сущность метода

Метод основан на органолептическом определении запаха и визуальном осмотре термостатированной пробы.

В результате жизнедеятельности микроорганизмов органические вещества клея разрушаются. Появляются признаки его загнивания (следы плесени, гнилостный запах).

9.9.2 Аппаратура

Шкаф сушильный по ГОСТ 13474.

Термостат.

Чашки Петри по ГОСТ 25336.

9.9.3 Проведение анализа

В чашку Петри, предварительно простерилизованную в сушильном шкафу при 160 °C в течение 2 ч или в автоклаве обычным способом и охлажденную до комнатной температуры, наливают 25 см3 раствора клея стандартной концентрации (18% по товарно-сухому клею или 15% по беззольному и безводному клею).

Чашку накрывают крышкой, помещают в термостат и выдерживают при температуре 25 °C в течение 3 сут, по истечении которых клей не должен иметь признаков загнивания (гнилостного запаха), а также следов плесени.

9.10. Методы определения кислотности

9.10.1 Определение общей (титруемой) кислотности по ГОСТ 8756.15.

9.10.2. Определение активной кислотности (pH) потенциометрическим методом — по ГОСТ 8756.16.

9.10.3. Определение активной кислотности колориметрическим методом — по п. 10.5.2.

9.11. Определение азота летучих оснований — по п. 3.2.1; 3.2.2.

9.12. Определение величины адгезии

9.12.1 Сущность метода

Метод основан на определении величины усилия, необходимого для расслаивания двух склеенных полос по месту склейки.

9.12.2 Аппаратура и материалы

Разрывная машина РМ-30.

Ткань-кирза двухслойная по ГОСТ 19196, артикул 6882.

9.12.3 Подготовка к анализу

Ткань-кирзу нарезают на полоски шириной 75 мм и длиной 130 мм. Навеску клея для определения адгезии рассчитывают, исходя из содержания в клее сухих веществ так, чтобы в навеске содержалось 0,75 г сухих веществ.

В табл. 11 указаны навески клея, которые нужно отбирать в зависимости от содержания сухих веществ в исследуемых образцах.

Таблица 11

Массовая доля сухих веществ в исследуемом образце клея, %	Навеска клея, г, наносимая на
Массовая доля сухих веществ в исследуемом образце клея, %	одну полоску ткани	две полоски ткани
35	1,07	2,14
36	1,04	2,08
37	1,02	2,04
38	0,98	1,96
39	0,96	1,92
40	0,94	1,88
41	0,91	1,82
42	0,90	1,80
48	0,87	1,74
44	0,85	1,70
45	0,83	1,66

Две полоски ткани взвешивают каждую отдельно с абсолютной погрешностью не более 0,01 г.

Навеску клея равномерно размазывают по рабочей поверхности полосок стеклянной лопаточкой. 10 мм по длине полоски с одной стороны и 20 мм с другой остаются свободными от клея.

Полоски склеивают (получают «склейки») проглаживанием пальцами по пять раз с каждой стороны, оставляют для высушивания на воздухе 5 — 6 ч при температуре 20 — 25 °C.

В подсушенных «склейках» определяют остаточное содержание воды, взвешивая их через 5 — 6 ч. Высушивание прекращают после того, как массовая доля воды достигнет 10 — 20%.

Высушенную «склейку» разрезают ножницами по длине на три равные части и получают три параллельные «склейки» размером 25 x 130 мм каждая.

9.12.4 Проведение анализа

Расслаивание «склеек» проводят на разрывной машине, например, РМ-30 по шкале до 10 кг, при свободном положении ограничителя маятника и расстоянии между зажимами для полосок ткани не более 15 мм.

Для расслаивания большие концы «склейки», не намазанные клеем, закрепляют в зажимах машины, после чего включают пуск и с помощью самописца проводят запись диаграммы, по которой устанавливают расслаивающее усилие.

Скорость движения нижнего зажима при испытании проб клея должна быть равна 200 мм/мин.

Во время испытания маятник разрывной машины при опускании необходимо слегка поддерживать рукой, чтобы опускание происходило плавно и сила инерции не оказывала влияния на показания расслаивающего усилия.

Если отсутствует самописец, показания маятника машины (максимальные и минимальные значения расслаивающего усилия) записывают в журнал. Запись показаний проводят через равные промежутки расслаиваемой длины «склейки» (через 5 — 10 мм).

Из минимальных и максимальных значений подсчитывают среднее значение расслаивающего усилия.

9.12.5 Обработка результатов

Величину расслаивающего усилия (X50) в кг/см, затраченного на расслаивание погонного сантиметра склейки, вычисляют по формуле

X_{50} = \frac{X_{\text{ср}}}{2,5} ,

где Xср — средняя величина разрывного усилия, выведенная из трех параллельных определений, кг;

2,5 — ширина склейки, см.

10. МЕТОДЫ АНАЛИЗА КОРМОВЫХ ПРОДУКТОВ, КОНСЕРВИРОВАННЫХ ПИРОСУЛЬФИТОМ НАТРИЯ И КИСЛОТАМИ

10.1 Подготовка средней пробы к анализу — по п. 2.8.

10.2 Определение воды — по п. 3.3.1.

10.3 Определение хлористого натрия — по п. 3.5.1.

10.4. Определение свободной сернистой кислоты в пересчете на сернистый ангидрид — по ГОСТ 5431.

10.5. Методы определения активной кислотности (pH)

10.5.1 Определение pH потенциометрическим методом — по ГОСТ 8756.16

10.5.2 Определение pH колориметрическим методом

10.5.2.1 Сущность метода

Метод основан на изменении окраски индикатора в водной вытяжке (фильтрате) анализируемого продукта.

10.5.2.2 Аппаратура, материалы

Шкала стандартных растворов.

Ступка фарфоровая с пестиком по ГОСТ 9147.

Воронки стеклянные по ГОСТ 25336.

Колбы плоскодонные по ГОСТ 25336.

Чашка фарфоровая по ГОСТ 9147.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

10.5.2.3 Проведение анализа

От 9 до 10 г анализируемого продукта, отвешенных с абсолютной погрешностью не более 0,01 г, количественно переносят в ступку 100 см3 дистиллированной воды. Смесь тщательно растирают и фильтруют через складчатый фильтр.

Водную вытяжку наливают в пробирку, входящую в комплект шкалы, или в пробирку, аналогичную по цвету и диаметру пробиркам шкалы, добавляют индикатор согласно инструкции, прилагаемой к шкале стандартных растворов, и сравнивают полученную окраску анализируемого раствора с окраской стандартных растворов шкалы.

11. МЕТОДЫ АНАЛИЗА МОРСКИХ БЕСПОЗВОНОЧНЫХ И ПРОДУКТОВ ИХ ПЕРЕРАБОТКИ

11.1 Подготовка средней пробы к анализу — по п. 2.9.

11.2 Определение воды — по п. 3.3.1.

11.3. Определение хлористого натрия — по пп. 3.5.1; 3.5.2.

11.4. Определение белковых веществ — по пп. 8.9.1; 8.9.2; 8.9.4.

11.5. Определение жира — по пп. 3.7.1; 3.7.2; 3.7.4.

11.6. Определение золы

11.6.1 Сущность метода

Метод основан на удалении органических веществ из навески анализируемого продукта сжиганием и определении золы взвешиванием.

11.6.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Электропечь сопротивления лабораторная по ГОСТ 13474.

Тигли фарфоровые по ГОСТ 9147.

Эксикатор по ГОСТ 25336.

Шкаф сушильный по ГОСТ 13474.

Электроплитка бытовая по ГОСТ 14919.

11.6.3 Проведение анализа

Навеску сухой массы от 1,5 до 2 г (сырой массы около 4 г), взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,001 г, помещают в предварительно прокаленный, доведенный до постоянной массы, фарфоровый тигель, осторожно обугливают на плитке до прекращения выделения дыма, а затем озоляют в муфельной печи при температуре 500 °C. После взвешивания остывшего в эксикаторе тигля с золой его повторно прокаливают в течение 1 ч до постоянной массы, охлаждают и взвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,001 г.

Цвет золы может быть белым, желтым, серым, оранжевым и другим, но зола не должна содержать черных вкраплений.

11.6.4 Обработка результатов

Массовую долю золы (X51) в процентах вычисляют по формуле

X_{51} = \frac{(m_{2} - m_{1}) \cdot 100}{m} ,

где m — навеска исследуемого образца, г;

m1 — масса пустого тигля, г;

m2 — масса тигля с золой, г.

За окончательный результат принимают среднее арифметическое значение результатов двух параллельных определений, расхождения между которыми не должны превышать 0,01%.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

11.7. Определение песка

11.7.1 Сущность метода

Метод основан на сжигании органических веществ навески, обработке золы раствором соляной кислоты и определении количества песка взвешиванием.

11.7.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Электропечь сопротивления лабораторная по ГОСТ 13474.

Электроплитка бытовая по ГОСТ 14919.

Баня водяная.

Эксикатор по ГОСТ 25336.

Чашка фарфоровая по ГОСТ 9147, диаметром 70 — 90 мм.

Тигель фарфоровый по ГОСТ 9147.

Воронка стеклянная по ГОСТ 25336, диаметром 50 — 70 мм.

Стакан химический по ГОСТ 25336, вместимостью 200 — 300 см3.

Палочка стеклянная.

Фильтры обеззоленные.

Кислота соляная по ГОСТ 3118, раствор 100 г/дм3 (10%-ный) плотностью 1050 кг/м3.

11.7.3 Проведение анализа

Навеску измельченного продукта 20 — 30 г, взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,1 г, подсушивают в фарфоровой чашке или в большом тигле в сушильном шкафу, осторожно обугливают на слабом огне, затем прокаливают в муфельной печи до получения белой или слегка сероватой золы.

При исследовании сушеных беспозвоночных навеску продукта для озоления уменьшают в 2 — 3 раза.

Золу в тигле обрабатывают раствором соляной кислоты 100 г/дм3 в течение 20 — 30 мин на кипящей водяной бане. Для ускорения растворения золу перемешивают стеклянной палочкой. Раствор фильтруют через предварительно взвешенный беззольный фильтр, избегая попадания на фильтр нерастворившегося остатка. Обработку золы соляной кислотой повторяют несколько раз. Нерастворившийся остаток в тигле количественно переносят на фильтр и промывают горячей водой до исчезновения реакции на ион хлора (проба с раствором азотнокислого серебра). Фильтр с осадком сжигают и прокаливают в предварительно взвешенном фарфоровом тигле. Тигель охлаждают в эксикаторе и взвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,001 г.

11.7.4 Обработка результатов

Массовую долю песка (X52) в процентах вычисляют по формуле

X_{52} = \frac{(m_{2} - m_{1}) \cdot 100}{m} ,

где m — масса тигля с прокаленным остатком, г;

m1 — масса пустого тигля, г;

m2 — навеска исследуемого образца, г.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

11.8. Определение минеральных примесей (песка, известковых образований «жемчуг»)

11.8.1 Сущность метода

Метод основан на разрушении тканей мидий щелочью, отмывании механических неорганических включений дистиллированной водой и определении их количества взвешиванием.

11.8.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Шкаф сушильный по ГОСТ 13474.

Баня водяная.

Колба коническая по ГОСТ 25336, вместимостью 250 см3.

Стаканы химические по ГОСТ 25336, вместимостью 500 — 1000 см3.

Колба коническая по ГОСТ 25336, вместимостью 250 см3.

Воронки химические по ГОСТ 25336, диаметром 70 — 80 мм.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, ч.д.а., раствор 300 г/дм3 (30%-ный).

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709 или вода питьевая по ГОСТ 2874-73.

Вата минеральная по ГОСТ 4640-76.

11.8.3 Проведение анализа

Навеску фарша массой от 45 до 50 г, взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,1 г, помещают в коническую колбу вместимостью 250 см3 и заливают 50 — 70 см3 профильтрованного через вату раствора гидроокиси натрия 300 г/дм3. После взбалтывания содержимого стенки колбы смывают небольшим количеством воды и помещают колбу в кипящую водяную баню на 40 — 60 мин (до полного гидролиза мяса).

Для равномерного прогревания колбу периодически взбалтывают, при этом песок, «жемчуг» и кусочки ракушек оседают на дно колбы.

По окончании гидролиза содержимое колбы разводят в полтора-два раза горячей водой и после отстаивания осадка осторожно сливают раствор. Обработку горячей водой повторяют 5 — 7 раз до полного отмывания осадка. Все смывные воды собирают в один стакан. При обнаружении в смывных водах песка или известковых образований им дают отстояться, жидкость сверху осторожно сливают, осадок промывают водой и количественно переносят в колбу с основным осадком. Осадок (песок, «жемчуг» и кусочки ракушек) количественно переносят дистиллированной водой на высушенный и взвешенный фильтр.

Фильтр с осадком высушивают при температуре 100 — 105 °C около 1 ч, затем выдерживают на воздухе около 0,5 ч и взвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,001 г. После этого быстро удаляют с фильтра поочередно «жемчуг», кусочки ракушек (створки) и песок. Каждый раз после удаления очередной порции примесей фильтр взвешивают.

11.8.4 Обработка результатов

По разности масс между первым и вторым взвешиванием фильтра определяют количество «жемчуга», между вторым и третьим взвешиванием — количество ракушек, между третьим и четвертым взвешиванием — количество песка.

Количество примеси каждого вида выражают в процентах к массе мяса, взятой для анализа. Общее количество минеральных включений в мясе мидий (X53) вычисляют по формуле

X_{53} = \frac{(m_{2} - m_{1}) \cdot 100}{m} ,

где m — навеска исследуемого образца, г;

m1 — масса фильтра, г;

m2 — масса фильтра с осадком после высушивания, г.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

11.9. Определение хитина в продуктах переработки беспозвоночных

11.9.1 Сущность метода

Метод основан на выделении частиц хитина и определении в них азота макрометодом по п. 8.9.1.

11.9.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Шкаф сушильный по ГОСТ 13474.

Центрифуга лабораторная по ГОСТ 3585.

Аппарат для встряхивания жидкостей.

Баня водяная.

Насос водоструйный лабораторный стеклянный по ГОСТ 25336.

Колба коническая по ГОСТ 25336, вместимостью 200 — 250 см3.

Колба Бунзена, вместимостью 250 — 500 см3.

Пробирки центрифужные.

Холодильник обратный по ГОСТ 25336.

Фильтр стеклянный (крупнопористый) № 1 по ГОСТ 25336.

Кислота муравьиная по ГОСТ 5848, 900 г/дм3 (90%-ная).

Ацетон по ГОСТ 2603, растворы 700, 960 — 980 г/дм3 (70, 96 — 98%-ный).

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, раствор 50 г/дм3 (5%-ный).

11.9.3 Проведение анализа

Навеску фарша массой от 9 до 10 г (или муки от 4,5 до 5 г), взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,1 г, помещают в колбу со шлифом вместимостью 200 — 250 см3, добавляют 100 см3 ацетона и нагревают на водяной бане с обратным холодильником в течение 45 мин.

После нагревания содержимое колбы количественно переносят ацетоном в центрифужную пробирку вместимостью 200 см3 и центрифугируют в течение 20 мин при 2000 об/мин.

Надосадочную жидкость отбрасывают.

К осадку добавляют 100 см3 раствора ацетона 700 г/дм3, перемешивают и вновь центрифугируют в указанном режиме. Полученную жидкую фракцию также сливают.

К осадку, содержащемуся в пробирке, приливают 100 см3 муравьиной кислоты 900 г/дм3, закрывают пробкой и встряхивают в течение 18 ч.

Содержимое вновь центрифугируют в течение 15 мин при 2000 об/мин и жидкую фракцию отбрасывают.

Полученный осадок промывают ацетоном, центрифугируют в течение 20 мин, сливают жидкую фазу и вторично промывают ацетоном.

К промытому осадку добавляют 100 см3 раствора гидроокиси натрия 50 г/дм3 и нагревают на водяной бане.

Полученную массу фильтруют через стеклянный крупнопористый фильтр № 1 и промывают остаток на фильтре кипящей водой. Фильтрат отбрасывают, а остаток высушивают при 100 — 105 °C до постоянной массы.

Сухой остаток количественно переносят дистиллированной водой в колбу Кьельдаля вместимостью 100 — 250 см3, выпаривают воду до 5 см3 и определяют массовую долю азота макрометодом по п. 8.9.1.

11.9.4 Обработка результатов

Массовую долю хитина (X54) в процентах вычисляют по формуле

X54 = X·14,5,

где X — массовая доля азота хитина в исследуемом образце, %, определенная макрометодом;

14,5 — коэффициент пересчета азота хитина в хитин.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

11.10. Определение массовой доли частиц депротеинизированного панциря в мясе криля и продуктах из него

11.10.1 Сущность метода

Метод основан на выделении панциря из анализируемого продукта щелочным гидролизом и весовом определении его.

11.10.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Шкаф сушильный по ГОСТ 13474.

Эксикатор по ГОСТ 25336.

Колба коническая по ГОСТ 25336, вместимостью 200 см3.

Колба для фильтрования под вакуумом по ГОСТ 25336.

Насос водоструйный лабораторный по ГОСТ 25336.

Фильтр стеклянный крупнопористый № 1 по ГОСТ 25336.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, водный раствор 50 г/дм3 (5%-ный).

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Бумага лакмусовая красная.

11.10.3 Проведение анализа

Навеску фарша массой 10 — 20 г, отвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,1 г, помещают в коническую колбу вместимостью 200 см3, добавляют 6-кратное количество водного раствора гидроокиси натрия 50 г/дм3 и нагревают в сушильном шкафу в течение 2 ч при температуре 140 °C. Горячий гидролизат фильтруют под вакуумом (от 266 до 399 гПа) через предварительно высушенный до постоянной массы стеклянный фильтр № 1 (диаметром отверстий 100 — 120 мкм).

Остаток на фильтре промывают горячей дистиллированной водой до нейтральной реакции на лакмус и высушивают до постоянной массы.

11.10.4 Обработка результатов

Массовую долю частиц панциря (X55) в процентах вычисляют по формуле

X_{55} = \frac{(m_{2} - m_{1}) \cdot 100}{m} ,

где m — навеска исследуемого образца, г;

m1 — масса фильтра, г;

m2 — масса фильтра с частицами панциря, г.

Вычисление проводят до второго десятичного знака.

12. МЕТОДЫ АНАЛИЗА НАТУРАЛЬНОЙ АМБРЫ

12.1 Подготовка средней пробы к анализу — по п. 2.10.

12.2. Определение цвета

12.2.1. Цвет амбры определяют в целом куске при дневном освещении (визуально).

12.2.2. Если цвет амбры вызывает сомнение, кусок амбры разбивают на две равные части и просматривают цвет на разломе куска.

12.3. Определение запаха

12.3.1. Для определения запаха отбирают из нескольких мест жаждой партии разные по цвету куски амбры.

12.3.2 Запах определяют на поверхности куска амбры и на разломе его.

12.4. Определение растворимости амбры

12.4.1 Сущность метода

Метод основан на растворении органических веществ амбры этиловым спиртом и определении их количества взвешиванием.

12.4.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Баня водяная.

Эксикатор по ГОСТ 25336.

Колбы конические по ГОСТ 25336, вместимостью 200, 300 см3.

Воронки стеклянные по ГОСТ 25336, диаметром 100 мм.

Цилиндр мерный по ГОСТ 1770, вместимостью 100 см3.

Фильтры бумажные с синей лентой.

Спирт этиловый ректификованный по ГОСТ 5962.

12.4.3 Проведение анализа

2 — 3 г измельченной амбры взвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,0002 г в конической колбе вместимостью 200 — 300 см3.

В колбу с навеской амбры приливают 100 см3 этилового спирта 960 г/дм3 (96%-ного), помещают ее на водяную баню, нагретую до температуры 60 — 70 °C, где выдерживают до полного растворения амбры.

Полученный спиртовой раствор фильтруют через предварительно высушенный до постоянной массы бумажный фильтр.

Колбу 2 — 3 раза ополаскивают подогретым до 60 — 70 °C спиртом (по 10 см3), сливая его на фильтр. Остаток на фильтре промывают подогретым на водяной бане до 60 — 70 °C спиртом до тех пор, пока фильтрат не станет совершенно бесцветным. Фильтр с остатком высушивают до постоянной массы в эксикаторе при температуре 20 °C.

12.4.4 Обработка результатов

Растворимость амбры (X56) в процентах вычисляют по формуле

X_{56} = 100 - \frac{(m_{2} - m_{1})}{m} \cdot 100 ,

где m — масса исследуемого образца, г;

m1 — масса сухого фильтра, г;

m2 — масса высушенного фильтра с остатком, г.

Вычисление проводят до первого десятичного знака.

12.5 Определение воды — по п. 3.3.3.

Навеску амбры от 45 до 50 г взвешивают с погрешностью не более 0,1 г.

12.6 Определение золы — по п. 11.6.

13. МЕТОДЫ АНАЛИЗА ЧЕШУИ, ЖЕМЧУЖНОГО ПАТА И ПЕРЛАМУТРОВОГО ПРЕПАРАТА

13.1 Подготовка средней пробы к анализу — по п. 2.11.

13.2 Определение золы — по п. 11.6.

13.3. Методы определения сырого гуанина

13.3.1 Определение сырого гуанина спектрофотометрическим методом

13.3.1.1 Определение сырого гуанина в жемчужном пате

13.3.1.1.1 Сущность метода

Метод основам на выделении гуанина из жемчужного пата ацетоном, растворении в гидроокиси натрия и определении его количества по оптической плотности.

13.3.1.1.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Фотоэлектроколориметр с пределами измерений оптической плотности от 0 до 1,3 по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

Центрифуга лабораторная, v = 4000 об/мин, по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

Шкаф сушильный по ГОСТ 13474.

Колбы мерные по ГОСТ 1770, вместимостью 200 см3.

Баня водяная.

Пипетки по ГОСТ 20292 с ценой деления 0,1 см3.

Пробирки стеклянные по ГОСТ 25336.

Пробирки центрифужные.

Цилиндры мерные по ГОСТ 20292, вместимостью 10, 25 и 50 см3.

Ацетон по ГОСТ 2603.

Бензин авиационный марки Б-70 по ГОСТ 1012 или эфир петролейный по ГОСТ 11992.

Вода дистиллированная по ГОСТ 6709.

Натрия гидроокись по ГОСТ 4328, раствор 1 моль/дм3 (1 н).

Спирт этиловый технический по ГОСТ 17299.

Хлороформ по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

13.3.1.1.3 Проведение анализа

Навеску жемчужного пата массой от 0,8 до 1,0 г, отвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,0001 г, помещают в центрифужную пробирку и приливают 10 — 20 см3 ацетона. Содержимое пробирки тщательно размешивают. Суспензию центрифугируют 10 мин при 4000 об/мин. Обработку пата свежими порциями растворителя повторяют 2 — 3 раза до тех пор, пока капля центрифугата, нанесенная на фильтровальную бумагу, после испарения не будет оставлять следов нитролака. После этого растворитель сливают, а гуанин подсушивают на водяной бане для удаления ацетона.

Гуанин из пробирки количественно переносят в мерную колбу вместимостью 200 см3 небольшими порциями раствора 1 моль/дм3 гидроокиси натрия. Для лучшего растворения гуанина колбу подогревают на водяной бане при температуре 70 °C в течение 5 — 10 мин. Раствор охлаждают до комнатной температуры и доводят объем до метки раствором гидроокиси натрия 1 моль/дм3.

0,2 — 0,3 см3 полученного раствора разбавляют раствором гидроокиси натрия 1 моль/дм3 до 10 см3, тщательно перемешивают, заливают в кювету с рабочей длиной 10 мм и определяют оптическую плотность при длине волны 275 нм по отношению к раствору гидроокиси натрия 1 моль/дм3.

Содержание гуанина, соответствующее определенной оптической плотности, рассчитывают по градуировочному графику.

13.3.1.1.4 Построение градуировочного графика

Гуанин предварительно обрабатывают следующим образом: 5 — 10 г сырого гуанина разбавляют бензином в соотношении 1:10 и центрифугируют. Центрифугат сливают, а обработку повторяют сначала бензином, а затем смесью бензина с хлороформом.

Для более полного разделения суспензии при центрифугировании смесь растворителей должна иметь плотность не более 1300 кг/м3.

Очищенный гуанин подсушивают на водяной бане для удаления растворителей, а затем в сушильном шкафу до постоянной массы при температуре 100 — 105 °C. Хранят гуанин в склянке с притертой пробкой из темного стекла.

Для приготовления стандартных растворов навеску очищенного гуанина 25 мг, взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,001 г, помещают в мерную колбу вместимостью 200 см3, приливают раствор гидроокиси натрия 1 моль/дм3 при подогревании на водяной бане температурой 70 °C.

После охлаждения содержимого до комнатной температуры объем в колбе доводят до метки раствором гидроокиси натрия 1 моль/дм3. Хранят раствор не более 3 сут в прохладном, защищенном от света месте.

1 см3 приготовленного раствора содержит 0,125 мг гуанина.

Для построения градуировочного графика готовят серию растворов с различным содержанием гуанина в 1 см3. Соотношение стандартного раствора и гидроокиси натрия приведено в табл. 12.

Таблица 12

Количество гуанина в приготовленном растворе, мг/10 см3	Количество стандартного раствора гуанина, см3	Количество добавляемой щелочи, см3
0,012	0,1	9,9
0,025	0,2	9,8
0,050	0,4	9,6
0,075	0,6	9,4
0,100	0,8	9,2
0,125	1,0	9,0
0,150	1,2	8,8
0,175	1,4	8,6
0,200	1,6	8,4
0,225	1,8	8,2
0,250	2,0	8,0

Хранят серию приготовленных растворов не более 3 сут в темном прохладном месте.

Градуировочный график строят не реже двух раз в год.

Оптическую плотность серии растворов определяют против раствора гидроокиси натрия 1 моль/дм3 в кювете с рабочей длиной 10 мм. По полученным данным строят градуировочный график, откладывая на оси абсцисс содержание гуанина, на оси ординат — соответствующие оптические плотности.

13.3.1.1.5 Обработка результатов

Массовую долю гуанина в жемчужном пате (X57) в процентах вычисляют по формуле

X_{57} = \frac{m \cdot V \cdot 10 \cdot 100}{m_{1} \cdot V_{1}} ,

где m — содержание гуанина, найденное по градуировочному графику, мг;

V — объем раствора гидроокиси натрия 1 моль/дм3, взятый для растворения гуанина, см3;

10 — разведение раствора, см3;

V1 — объем исследуемого раствора, взятый для колориметрирования, см3;

m1 — масса исследуемого образца, мг.

Вычисление проводят до первого десятичного знака.

13.3.1.2 Определение гуанина в перламутровом препарате, приготовленном с добавлением спирта

Навеску препарата от 0,25 до 0,30 г помещают в предварительно высушенную до постоянной массы бюксу, подсушивают на водяной бане для удаления остатков спирта, а затем в сушильном шкафу до постоянной массы при температуре 105 °C.

Гуанин из бюксы количественно переносят в мерную колбу вместимостью 200 см3 небольшими порциями раствора 1 моль/дм3 гидроокиси натрия и далее поступают так, как указано в п. 13.3.1.1.3 для туанина, выделенного из жемчужного пата.

Обработка результатов — по п. 13.3.1.1.5.

13.3.1.3 Определение гуанина в перламутровом препарате, приготовленном с добавлением касторового масла

Навеску препарата от 0,25 до 0,30 г помещают в центрифужную пробирку и приливают 10 — 20 см3 подогретого этилового спирта. Содержимое пробирки тщательно размешивают. Суспензию центрифугируют 10 мин при 4000 об/мин. Обработку препарата свежими порциями спирта повторяют 2 — 3 раза до тех пор, пока капля центрифугата, нанесенная на фильтровальную бумагу, после испарения не будет оставлять следов масла.

По окончании центрифугирования жидкость сливают, а гуанин подсушивают на водяной бане для удаления спирта, затем в сушильном шкафу до постоянной массы и далее поступают как указано в п. 13.3.1.1.3.

13.3.1.4 Обработка результатов — по п. 13.3.1.1.5.

13.3.2 Методы определения сырого гуанина в чешуе, жемчужном пате и перламутровом препарате взвешиванием

13.3.2.1 Определение сырого гуанина в жемчужном пате

13.3.2.1.1 Сущность метода

Метод основан на выделении (отмывании) гуанина из жемчужного пата ацетоном, центрифугировании (фильтровании) и определении массы гуанина взвешиванием.

13.3.2.1.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Шкаф сушильный лабораторный по ГОСТ 13474.

Баня водяная.

Стаканчики для взвешивания (бюксы) по ГОСТ 25336.

Стаканы стеклянные лабораторные по ГОСТ 25336.

Ацетон по ГОСТ 2603.

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

13.3.2.1.3 Проведение анализа

Навеску пата массой 3 — 5 г разбавляют ацетоном в соотношении 1:50, осторожно, тщательно перемешивают и центрифугируют. Центрифугат осторожно сливают. Обработку ацетоном повторяют до тех пор, пока капля центрифугата, нанесенная на фильтровальную бумагу, после испарения не будет оставлять следов лака.

Очищенный от лака гуанин количественно переносят в предварительно высушенную бюксу небольшими порциями ацетона. Бюксу помещают на водяную баню для удаления ацетона, а затем — в сушильный шкаф для высушивания гуанина до постоянной массы.

Вместо центрифугирования выделение гуанина из суспензии можно проводить фильтрованием через предварительно высушенный до постоянной массы фильтр. Осадок на фильтре промывают 5 — 6 раз ацетоном и высушивают до постоянной массы при 100 — 105 °C.

13.3.2.1.4 Обработка результатов

Массовую долю гуанина в жемчужном пате (X58) в процентах вычисляют по формуле

X_{58} = \frac{(m - m_{1})}{m_{2}} \cdot 100 ,

где m — масса бюксы с навеской после высушивания, г;

m1 — масса бюксы, г;

m2 — масса жемчужного пата, г.

Вычисление проводят до первого десятичного знака.

13.3.2.2 Определение сырого гуанина в перламутровом препарате

13.3.2.2.1 Сущность метода

Метод основан на определении разницы между общей массой плотных веществ и белковых примесей взвешиванием.

13.3.2.2.2 Определение плотных веществ в перламутровом препарате, приготовленном с применением этилового спирта

13.3.2.2.2.1 Сущность метода — по п. 3.3.1.1.

13.3.2.2.2.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Стаканчики для взвешивания (бюксы) по ГОСТ 25336.

Шкаф сушильный лабораторный по ГОСТ 13474.

Эксикатор по ГОСТ 25336.

13.3.2.2.2.3 Проведение анализа

Навеску препарата от 0,8 до 1,0 г помещают в бюксу, предварительно высушенную до постоянной массы, взвешивают с абсолютной погрешностью не более 0,001 г и высушивают до постоянной массы при температуре 100 — 105 °C.

13.3.2.2.2.4 Обработка результатов

Массовую долю плотных веществ (X59) в процентах вычисляют по формуле

X_{59} = \frac{(m - m_{1})}{m_{2}} \cdot 100 ,

где m — масса бюксы с навеской после высушивания, г;

m1 — масса бюксы, г;

m2 — масса перламутрового препарата, г.

Вычисление доводят до первого десятичного знака.

13.3.2.2.3 Определение плотных веществ в перламутровом препарате, приготовленном с применением касторового масла

13.3.2.2.3.1 Сущность метода

Метод основан на растворении масла, содержащегося в препарате, этиловым спиртом, выделении плотного остатка ацетоном и определении его массы взвешиванием.

13.3.2.2.3.2 Аппаратура, реактивы и материалы — по п. 13.3.2.2.2.2 со следующими дополнениями:

Центрифуга лабораторная, по нормативным документам, действующим на территории государства, принявшего стандарт.

Пробирки центрифужные по ГОСТ 25336.

Баня водяная.

Спирт этиловый технический по ГОСТ 17299.

Ацетон по ГОСТ 2603.

Бензин авиационный марки Б-70 по ГОСТ 1012.

13.3.2.2.3.3 Проведение анализа

Навеску препарата массой от 0,8 до 1,0 г, взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,0001 г, помещают в центрифужную пробирку, приливают 10 — 20 см3 подогретого этилового спирта и тщательно перемешивают.

После центрифугирования в течение 10 мин при 4000 об/мин осторожно сливают жидкость. Обработку препарата спиртом повторяют до тех пор, пока капля центрифугата, нанесенная на фильтровальную бумагу, не будет оставлять следов масла. Осевший на дно центрифужной пробирки плотный остаток препарата количественно переносят небольшими порциями ацетона или бензина в предварительно высушенную до постоянной массы бюксу, помещают ее на водяную баню для удаления растворителя, а затем в сушильный шкаф для высушивания остатка до постоянной массы.

Массовую долю плотных веществ в перламутровом препарате определяют по п. 13.3.2.2.2.3 и вычисляют по п. 13.3.2.2.2.4.

Вычисление проводят до первого десятичного знака.

13.3.2.2.4 Определение белковых примесей в перламутровом препарате

13.3.2.2.4.1 Сущность метода

Метод основан на экстракции гуанина из перламутрового препарата раствором соляной кислоты, отделении примесей и определении их массы взвешиванием.

13.3.2.2.4.2 Аппаратура, материалы и реактивы

Баня водяная.

Шкаф сушильный лабораторный по ГОСТ 13474.

Стакан химический по ГОСТ 25336, вместимостью 200 — 300 см3.

Воронка стеклянная по ГОСТ 25336.

Кислота соляная по ГОСТ 3118, раствор 50 г/дм3 (5%-ный).

Бумага фильтровальная лабораторная по ГОСТ 12026.

13.3.2.2.4.3 Проведение анализа

Навеску препарата от 0,8 до 1,0 г, взвешенную с абсолютной погрешностью не более 0,0001 г, помещают в химический стакан вместимостью 200 см3 заливают 50 см3 раствора соляной кислоты 50 г/дм3 и нагревают до кипения. Гуанин быстро растворяется, а примеси коагулируют и всплывают на поверхность раствора.

После кипячения в течение 1 — 2 мин содержимое стакана в горячем виде фильтруют через высушенный до постоянной массы фильтр. Осадок промывают два раза горячим раствором соляной кислоты 50 г/дм3, а затем горячей водой, подкисленной соляной кислотой. По окончании фильтрования фильтр с осадком высушивают до постоянной массы и взвешивают.

13.3.2.2.4.4 Обработка результатов

Массовую долю белковых примесей (X60) в процентах вычисляют по формуле

X_{60} = \frac{m_{2} - m_{3}}{m_{1}} \cdot 100 ,

где m1 — масса перламутрового препарата, г;

m2 — масса фильтра с осадком после высушивания, г;

m3 — масса фильтра, г.

13.3.2.2.5 Обработка результатов по определению гуанина в перламутровом препарате

Массовую долю сырого гуанина (X61) в перламутровом препарате в процентах вычисляют по формуле

X₆₁ = X₁ - X₂,

где X1 — массовая доля плотных веществ в препарате, %;

X2 — массовая доля белковых примесей в препарате, %.

Вычисление проводят до первого десятичного знака.

13.4. Определение плотного остатка в жемчужном пате

13.4.₁. Сущность метода — по п. 3.3.1.1.

13.4.2. Аппаратура, материалы и реактивы — по п. 13.3.2.2.4.2.

13.4.3 Проведение анализа

Навеску пата массой 1 — 2 г, помещенную в предварительно высушенную бюксу, высушивают в сушильном шкафу в течение 2 ч при температуре 60 — 65 °C, а затем до постоянной массы при 100 — 105 °C.

13.4.4 Обработка результатов

Массовую долю плотного остатка в жемчужном пате определяют по п. 13.3.2.2.2.4.

Вычисление проводят до первого десятичного знака.