--- title: "\"ОФС.1.8.2.0010.18. Общая фармакопейная статья. Количественное определение белка колориметрическим методом с биуретовым реактивом в препаратах крови человека и животных\"" number: "ГФ XIV" issuer: "Министерство здравоохранения Российской Федерации" status: действует canonical: "https://bukva.ai/docs/gf-xiv-minzdrav-rossii-ministerstvo-19" --- ## "ОФС.1.8.2.0010.18. Общая фармакопейная статья. Количественное определение белка колориметрическим методом с биуретовым реактивом в препаратах крови человека и животных" # "ОФС.1.8.2.0010.18. Общая фармакопейная статья. Количественное определение белка колориметрическим методом с биуретовым реактивом в препаратах крови человека и животных" ("Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том II") > [!IMPORTANT] > В соответствии с Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749 данный документ введен в действие с 01.12.2018. > Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте http://femb.ru/femb/pharmacopea.php, и разделен в Информационном банке на отдельные фармакопейные статьи.
**МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ** **ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ**
| Количественное определение белка колориметрическим методом с биуретовым реактивом в препаратах крови человека и животных | ОФС.1.8.2.0010.18
Вводится впервые | | --- | --- | Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на метод количественного определения белка колориметрическим методом с биуретовым реактивом в препаратах крови человека (иммуноглобулинах, альбумине) и животных (антитоксических сыворотках) (Метод А) и на методику количественного определения белка колориметрическим методом с биуретовым реактивом в препаратах крови животных (гетерологичные иммуноглобулины и антитоксические сыворотки), разведенных в 100 раз (Метод Б).
**Методы основаны на взаимодействии в щелочной среде пептидных связей молекул белков с ионами двухвалентной меди (Cu2+) с образованием биуретового комплекса, окрашенного в фиолетовый цвет, интенсивность которого, измеряемая при длине волны 540 нм, прямо пропорциональна содержанию белка в препарате.**
Колориметрический метод с биуретовым реактивом обладает низкой чувствительностью к посторонним веществам, которые могут присутствовать в качестве примеси в препарате. Метод А (содержание белка от 5 до 20%) К 5 мл испытуемого раствора, приготовленного из испытуемого образца с содержанием белка от 2 до 4 мг/мл, прибавляют 5 мл биуретового реактива для препаратов крови человека и животных, перемешивают и оставляют при комнатной температуре на 30 мин. При тех же условиях аналогичным образом готовят стандартный раствор (СО). Испытуемые и стандартные растворы готовят в двух повторностях. Одновременно готовят контрольный раствор, используемый в качестве раствора сравнения, содержащий 5 мл 0,9% раствора натрия хлорида и 5 мл биуретового реактива. Измеряют оптическую плотность окрашенных растворов при длине волны 540 нм (если нет других указаний в нормативной документации) в кюветах с толщиной слоя 10 мм. Содержание белка (X) в препарате в процентах вычисляют по формуле: $X = \frac{A \cdot Co}{Ao} ,$ где: А - значение оптической плотности раствора испытуемого образца; Ао - значение оптической плотности СО; Со - содержание белка в СО, в процентах.
**Примечания**
1. Испытуемый раствор (А). 1 или 2 мл испытуемого образца (в зависимости от исходного содержания белка) помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем раствора 0,9% раствором натрия хлорида до метки и перемешивают. Содержание белка в испытуемом растворе от 2 до 4 мг/мл. 2. Стандартный раствор (СО). Для препаратов иммуноглобулинов, альбумина и антитоксических сывороток используют соответствующие стандартные образцы, разрешенные к применению уполномоченными органами в соответствии с инструкциями по применению. Допускается использование стандартных образцов предприятия, аттестованных с использованием вышеуказанных стандартных образцов.
3. Биуретовый реактив для препаратов крови человека и животных. В мерную колбу вместимостью 1000 мл вносят 45 г калия-натрия тартрата, растворяют в 200 мл 0,2 М раствора натрия гидроксида, прибавляют 5 г меди (II) сульфата, затем прибавляют 5 г калия иодида и доводят объем тем же раствором натрия гидроксида до метки и перемешивают.
Метод Б (содержание белка от 0,08 до 0,13%) К 5 мл раствора испытуемого образца с содержанием белка в препарате от 0,8 до 1,3 мг/мл прибавляют 5 мл биуретового реактива для препаратов крови человека и животных, перемешивают и оставляют при комнатной температуре на 30 мин. Аналогичным образом готовят разведенный 1:100 стандартный образец (СО). Одновременно готовят контрольный раствор (см. приготовление по методу А). Испытуемые и стандартные образцы готовят в двух повторностях. Далее анализ проводят по методу А. Содержание белка (X) в разведенном препарате 1:100 в процентах рассчитывают по формуле: $X = \frac{D\text{исп}. \cdot Cco}{Dco} ,$ где: Dисп. - значение оптической плотности испытуемого образца, разведенного 1:100;
Dсо - значение оптической плотности СО, разведенного 1:100;
Cсо - содержание белка в СО, в процентах.
Примечания
1. Разведенный стандартный образец. Используют соответствующие стандартные образцы (иммуноглобулина или антитоксической сыворотки), разрешенные к применению уполномоченными органами в соответствии с инструкциями по применению. 1 мл стандартного образца с содержанием белка от 80 до 160 мг/мл помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора 0,9% раствором натрия хлорида до метки и перемешивают. Допускается использование стандартных образцов предприятия, аттестованных с использованием вышеуказанных стандартных образцов.
2. Буретовый реактив для препаратов крови человека и животных (см. [Примечания N 3 Метод А](#p100019)).
---