ФС.3.7.0003.22. Фармакопейная статья. Ломефлоксацин + Простаты экстракт крупного рогатого скота, суппозитории ректальные
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 11.04.2022 № 246)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание»)
Примечание
В соответствии с Приказом Минздрава России от 11.04.2022 № 246 данный документ введен в действие с 01.04.2022.
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
| Ломефлоксацин + Простаты экстракт крупного рогатого скота, суппозитории ректальные | ФС.3.7.0003.22 |
|---|---|
| Lomefloxacin + Prostate extractum pecora, rectalis suppositories | Вводится впервые |
Настоящая фармакопейная статья распространяется на комбинированный препарат Ломефлоксацин + Простаты экстракт крупного рогатого скота, суппозитории ректальные.
Препарат должен содержать в одном суппозитории не менее 85% и не более 115% простаты экстракта от заявленного количества в пересчете на водорастворимые пептиды и не менее 90% и не более 100% ломефлоксацина гидрохлорида от заявленного количества.
Препарат должен соответствовать общим требованиям ОФС «Лекарственные формы», ОФС «Суппозитории» и ниже приведенным требованиям.
Описание. Суппозитории торпедообразной формы от белого или почти белого до светло-кремового с сероватым оттенком цвета. Допускается появление белого налета на поверхности суппозитория и наличие на срезе воздушного стержня и воронкообразного углубления.
Метод: ВЭЖХ. В соответствии требованиями ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография».
Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора ломефлоксацина гидрохлорида, должно соответствовать времени удерживания основного пика на хроматограмме раствора стандартного образца (СО) ломефлоксацина гидрохлорида.
Метод: Качественная реакция с биуретовым реактивом.
Один суппозиторий помещают в коническую колбу вместимостью 50 мл, прибавляют 15 мл воды, помещают в предварительно нагретую до температуры 38 °C ультразвуковую баню и обрабатывают ультразвуком в течение 20 мин при периодическом перемешивании. Полученный раствор охлаждают на льду до температуры от 15 до 25 °C, и осторожно фильтруют через бумажный фильтр «синяя лента» (размер пор 8 — 15 ммк), отбрасывая первые 3 мл фильтрата.
К 2 мл фильтрата прибавляют 4 мл биуретового реактива, перемешивают, наблюдается окрашивание раствора в фиолетовый цвет. В качестве раствора сравнения используют 2 мл воды и 4 мл биуретового реактива.
Однородность массы. Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм».
Размер частиц. Не более 100 мкм. Допускается наличие не более 1% частиц размером более 100 мкм.
Один суппозиторий помещают в коническую колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 10 мл хлороформа, и перемешивают до растворения жировой основы. Полученный раствор переносят на бумажный фильтр «красная лента» (размер пор 13 — 25 мкм), промывают тремя порциями хлороформа по 2 мл каждая, высушивают на воздухе и суспендируют в касторовом масле. Около 0,005 г полученной гомогенной суспензии помещают на предметное стекло, накрывают покровным стеклом, и просматривают под микроскопом с объективом 20x/0,45. Общее число частиц для анализа должно быть не менее 1000. За конечный результат принимают среднее значение размера частиц при рассмотрении пяти разных участков анализируемой пробы. Для анализа проводят не менее двух определений.
Температура плавления. Не выше 37 °C. Один суппозиторий расплавляют на водяной бане при температуре (45 — 50) °C, расплав тщательно перемешивают, и помещают в пять капиллярных трубок в количестве, достаточном для формирования в каждой трубке столбика высотой около 10 мм. Капиллярные трубки оставляют при температуре 0 °C в течение 2 ч и далее проводят определение открытым капиллярным методом в соответствии с требованиями ОФС «Температура плавления».
Испытание проводят в соответствии с требованиями ОФС «Однородность дозирования», способ 1.
От серии, подлежащей испытанию, отбирают 30 суппозиториев. В каждом из 10 суппозиториев определяют количественное содержание ломефлоксацина гидрохлорида методом ВЭЖХ в условиях количественного определения ломефлоксацина гидрохлорида.
Испытуемый раствор. Один суппозиторий помещают в коническую колбу со шлифом вместимостью 250 мл, и далее проводят приготовление аналогично приготовлению испытуемого раствора, описанному в разделе «Количественное определение. Ломефлоксацина гидрохлорид».
Раствор стандартного образца ломефлоксацина гидрохлорида. Приготовление раствора стандартного образца приведено в разделе «Количественное определение. Ломефлоксацина гидрохлорид».
На жидкостном хроматографе анализируют испытуемый раствор и раствор стандартного образца ломефлоксацина гидрохлорида.
Содержание C17H19F2N3O3HCI (ломефлоксацина гидрохлорида) в одном суппозитории в процентах от номинального (Xi) вычисляют по формуле:
Xi = \frac{S \cdot ao \cdot 100 \cdot 100 \cdot 2 \cdot P \cdot 387,81 \cdot 100}{S \cdot L \cdot 100 \cdot 50 \cdot 1 \cdot 100 \cdot 351,35} = \frac{S \cdot ao \cdot P \cdot 4 \cdot 387,81}{So \cdot L \cdot 351,35} ,
где: S — площадь пика ломефлоксацина на хроматограмме испытуемого раствора;
So — площадь пика ломефлоксацина на хроматограмме раствора стандартного образца ломефлоксацина гидрохлорида;
ao — навеска стандартного образца ломефлоксацина гидрохлорида, мг;
L — номинальное содержание ломефлоксацина гидрохлорида в одном суппозитории, мг;
P — содержание ломефлоксацина в стандартном образце ломефлоксацина гидрохлорида, %;
387,81 — молекулярная масса ломефлоксацина гидрохлорида;
351,35 — молекулярная масса ломефлоксацина.
Микробиологическая чистота. Испытание проводят в соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
Метод: ВЭЖХ. В соответствии требованиями ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»
Растворитель. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 2,0 мл фосфорной кислоты концентрированной, растворяют в воде, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Метанол смешивают с полученным раствором в соотношении 40:60. Раствор используют свежеприготовленным.
Раствор фосфорной кислоты. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 25 мл фосфорной кислоты концентрированной, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают. Раствор используют свежеприготовленным.
Фосфатный буферный раствор. В мерную колбу вместимостью 1000 мл помещают 3,45 г аммония фосфорнокислого однозамещенного и 1,45 г натрия 1-пентан-сульфоната моногидрата, растворяют в воде, доводят объем раствора тем же растворителем до метки, устанавливают pH раствора потенциометрически до 2,50 +/- 0,05 раствором фосфорной кислоты и перемешивают. Раствор используют свежеприготовленным.
Подвижная фаза. Смесь метанола и фосфатного буферного раствора в соотношении (40:60). Раствор используют свежеприготовленным.
Испытуемый раствор. В коническую колбу со шлифом вместимостью 250 мл помещают около 2,25 г (точная навеска) измельченной массы 10 суппозиториев (эквивалентно 400 мг ломефлоксацина гидрохлорида), прибавляют 100,0 мл растворителя и нагревают в горячей водяной бане до расплавления, перемешивают в течение 5 мин при периодическом подогревании в той же водяной бане, затем охлаждают на льду до образования корочки (не менее 30 мин) и фильтруют через бумажный фильтр «красная лента» с размером пор 13 — 25 мкм, отбрасывая первые 3 мл фильтрата. В случае необходимости фильтрацию повторяют через бумажный фильтр «синяя лента» с размером пор 2 — 3 мкм, отбрасывая первые 3 мл фильтрата. 1 мл фильтрата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора растворителем до метки и перемешивают (концентрация ломефлоксацина гидрохлорида около 0,04 мг/мл).
Раствор стандартного образца ломефлоксацина гидрохлорида. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают около 100 мг (точная навеска) стандартного образца ломефлоксацина гидрохлорида, растворяют при нагревании в 50 мл растворителя, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают.
2,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора растворителем до метки и перемешивают (концентрация ломефлоксацина гидрохлорида около 0,04 мг/мл).
Растворы используют свежеприготовленными.
Время удерживания ломефлоксацина около 6 — 8 мин.
Результаты анализа считаются достоверными, если выполняются требования теста «Проверка пригодности хроматографической системы».
Проверка пригодности хроматографической системы
Для проверки пригодности хроматографической системы используют раствор стандартного образца ломефлоксацина гидрохлорида.
Хроматографическая система считается пригодной, если выполняются следующие условия:
- фактор асимметрии пика (As) ломефлоксацина должен быть не менее 0,9 и не более 1,9;
- относительное стандартное отклонение площади пика ломефлоксацина, рассчитанное по 5 последовательным хроматограммам, должно быть не более 2,0%.
- эффективность хроматографической колонки, рассчитанная по пику ломефлоксацина, должна быть не менее 1500 теоретических тарелок;
Содержание C17H19F2N3O3HCI (ломефлоксацина гидрохлорида) (X) в одном суппозитории от заявленного количества в процентах вычисляют по формуле:
X = \frac{S \cdot ao \cdot 100 \cdot 100 \cdot 2 \cdot G \cdot P \cdot 387,81}{So \cdot a \cdot 100 \cdot 50 \cdot 1 \cdot 100 \cdot 351,35} = \frac{S \cdot ao \cdot G \cdot P \cdot 387,81}{So \cdot a \cdot 25 \cdot 351,35} ,
где: S — площадь пика ломефлоксацина на хроматограмме испытуемого раствора;
So — площадь пика ломефлоксацина на хроматограмме раствора СО ломефлоксацина гидрохлорида;
a — навеска измельченной массы суппозиториев, в г;
ao — навеска СО ломефлоксацина гидрохлорида, в мг;
P — содержание ломефлоксацина в СО ломефлоксацина гидрохлорида, в %;
387,81 — молекулярная масса ломефлоксацина гидрохлорида;
351,35 — молекулярная масса ломефлоксацина;
G — средняя масса суппозиториев, в граммах.
Метод: Спектрофотометрический.
Испытуемый раствор. В коническую колбу вместимостью 50 мл вносят около 2,25 г (точная навеска) измельченной массы 10 суппозиториев (эквивалентно 20 мг водорастворимых пептидов), прибавляют 10 мл воды, помещают в предварительно нагретую до температуры 38 °C ультразвуковую баню и обрабатывают ультразвуком в течение 20 мин при периодическом перемешивании. Затем раствор охлаждают на льду до образования сплошной корочки, осторожно декантируют в пробирку для центрифугирования, оставляя корочку в колбе. К остатку в колбе прибавляют 5,0 мл воды, повторяя извлечение еще раз. Полученный раствор после охлаждения помещают в ту же пробирку, оставляя корочку в колбе. Содержимое пробирки центрифугируют при 8000 об/мин в течение 25 мин. 12,0 мл полученного раствора помещают в пробирку вместимостью 15 мл, прибавляют 0,5 г натрия хлорида, содержимое пробирки перемешивают и фильтруют через бумажный фильтр «синяя лента» (размер пор 8 — 15 мкм), отбрасывая первые 2 мл фильтрата (концентрация водорастворимых пептидов около 1,33 мг/мл).
Раствор стандартного образца альбумина.
В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают около 33 мг (с точностью до 0,0005 г) стандартного образца альбумина бычьего сывороточного, растворяют в натрия хлорида растворе 5%, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают (концентрация альбумина около 1,32 мг/мл). Раствор используют свежеприготовленным.
Отбирают три пробы по 2,0 мл испытуемого раствора, переносят в три пробирки. В каждую пробирку прибавляют по 4,0 мл биуретового реактива, и перемешивают. Через 30 мин измеряют оптическую плотность каждого полученного раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 540 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. Перед измерением допускается фильтрация растворов через мембранный фильтр PTFE с диаметром пор 0,45 мкм. За результаты анализа принимают среднее значение трех реакций.
Параллельно измеряют оптическую плотность раствора стандартного образца альбумина, обработанного таким же образом, как указано выше для испытуемого раствора.
В качестве раствора сравнения используют смесь 2,0 мл натрия хлорида раствор 5% и 4,0 мл биуретового реактива.
Содержание водорастворимых пептидов (X) в одном суппозитории от заявленного количества в процентах вычисляют по формуле:
X = \frac{A \cdot ao \cdot 15 \cdot G \cdot P}{Ao \cdot a \cdot 25 \cdot 100} = \frac{A \cdot ao \cdot G \cdot P \cdot 0,006}{Ao \cdot a} ,
где: A — оптическая плотность испытуемого раствора;
Ao — оптическая плотность раствора СО альбумина;
a — навеска измельченной массы суппозиториев, г;
ao — навеска СО альбумина, в миллиграммах;
G — средняя масса суппозиториев, в граммах;
P — содержание основного вещества в СО альбумина, в процентах.
Хранение. При температуре не выше 25 °C в соответствии с ОФС «Хранение лекарственных препаратов».