ФС.3.7.0002.22. Фармакопейная статья. Желчь крупного рогатого скота + Поджелудочной железы крупного рогатого скота и свиней порошок + Слизистой тонкой кишки свиней порошок, таблетки
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 11.04.2022 № 246)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание»)
Примечание
В соответствии с Приказом Минздрава России от 11.04.2022 № 246 данный документ введен в действие с 01.04.2022.
Настоящая фармакопейная статья распространяется на лекарственный препарат желчь крупного рогатого скота + поджелудочной железы крупного рогатого скота и свиней порошок + слизистой тонкой кишки свиней порошок, таблетки (таблетки, покрытые оболочкой).
Препарат должен соответствовать требованиям ОФС «Таблетки», ОФС «Фармацевтическая субстанция животного происхождения» и ниже приведенным требованиям.
Описание. Содержание раздела приводится в соответствии с ОФС «Таблетки».
Амилолитическая и протеолитическая активность. Способность препарата вызвать гидролиз крахмала и казеина (раздел «Количественное определение»).
Качественная реакция. Должно появиться синее окрашивание при реакции с 1% раствором фурфурола в кислой среде. (Холевая кислота)
Однородность массы. В соответствии с требованиями ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм».
Распадаемость. Не менее 40 мин. В соответствии с требованиями ОФС «Распадаемость таблеток и капсул».
Эфирорастворимые липиды. Не более 5%. Определение проводят методом гравиметрии.
Испытуемый раствор. В колбу вместимостью 200 мл с обратным холодильником, помещают около 1 г порошка тщательно растертых таблеток (точная навеска), прибавляют 80 — 100 мл эфира и перемешивают на магнитной мешалке в течение 1 ч.
Полученный раствор фильтруют во взвешенную и доведенную до постоянной массы коническую колбу через бумажный фильтр, предварительно смоченный эфиром. Эфир отгоняют, остаток сушат до постоянной массы при температуре от 100 до 105 °C и взвешивают. Масса остатка должна быть не более 0,050 г.
Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».
Холевая кислота. Не менее 5%. Определение проводят методом фотоколориметрии.
1% раствор фурфурола. Фурфурол перегоняют из колбы Вюрца с воздушным холодильником, отбирают фракцию с температурой кипения 158 — 161 °C. В мерной колбе вместимостью 100 мл растворяют 1 мл перегнанного фурфурола в 20 мл воды объем раствора до метки.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают порошок двух растертых таблеток (точная навеска), прибавляют 1 мл 1 М раствора натрия гидроксида и 50 мл воды, перемешивают содержимое колбы в течение 10 мин, объем раствора доводят водой до метки, затем фильтруют через бумажный фильтр в коническую колбу вместимостью 100 мл.
Исходный раствор стандартного образца (СО) холевой кислоты. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 20 мг (точная навеска) холевой кислоты растворяют на водяной бане с температурой (40 +/- 2) °C в 5 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида до содержания холевой кислоты 2,0 мг/мл.
Раствор стандартного образца (СО) холевой кислоты. Из исходного раствора СО, готовят водные растворы с содержанием холевой кислоты в 0,4 и 0,6 мг/мл.
Контрольный раствор. В пробирку помещают 1 мл 0,1 М раствора натрия гидроксида, затем прибавляют 1 мл 1% раствора фурфурола и 6 мл 8 М раствора серной кислоты.
В пробирки № 1, 2 помещают по 1 мл испытуемого раствора, в пробирки № 3, 4 помещают по 1 мл раствора СО холевой кислоты, прибавляют по 1 мл 1% раствора фурфурола, сразу же помещают пробирки в ледяную баню на 5 мин, затем в каждую пробирку прибавляют по 6 мл 8 М раствора серной кислоты и тщательно перемешивают содержимое пробирок. Пробирки помещают в термостат при температуре 70 °C и выдерживают в течение 8 мин
Оптическую плотность полученных растворов измеряют на фотоколориметре с длиной волны 670 нм в кювете с толщиной слоя 5 мм.
X_{3,4} = \frac{A \cdot C_{0(3,4)} \cdot 100}{A_{0(3,4)} \cdot 2 \cdot 1000} = \frac{A \cdot C_{0(3,4)}}{A_{0(3,4)} \cdot 20} ,
X_{\text{ср}} = \frac{X_{3} + X_{4}}{2}
A — значение оптической плотности испытуемого раствора:
A0(3,4) — значение оптической плотности раствора СО холевой кислоты (пробирки 3, 4);
C0(3,4) — концентрация холевой кислоты в растворе СО холевой кислоты (пробирки 3, 4), мг/мл;
100 — разведение препарата, мл;
1000 — пересчет из миллиграммов в граммы.
Амилолитическая активность. Не менее 25 ЕД и не более 85 ЕД в одной таблетке. Определение проводят методом иодометрии. За единицу амилолитической активности принимают такое количество фермента, которое расщепляет крахмал с такой начальной скоростью, при которой один микроэквивалент гликозидной связи гидролизуется в 1 мин.
1% раствор крахмала. В мерный стакан вместимостью 200 мл помещают 1,0 г крахмала растворимого, суспендируют в 25 мл воды и вливают при перемешивании 50 мл кипящей воды, кипятят при перемешивании в течение 3 мин, охлаждают и количественно переносят в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.
Фосфатный буферный раствор pH 6,8.
27,2 г калия дигидрофосфата растворяют в 500 мл воды в мерной колбе вместимостью 1 л, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают (раствор А).
71,6 г динатрия гидрофосфата додекагидрата растворяют в 500 мл воды в мерной колбе вместимостью 1 л, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают (раствор Б).
В мерную колбу вместимостью 1 л помещают 510 мл раствора А, доводят объем раствора раствором Б до метки, перемешивают.
0,2 М раствор натрия хлорида. 0,58 г натрия хлорида растворяют в 30 мл воды в мерной колбе вместимостью 50 мл, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают.
0,05 М раствор натрия тиосульфата. 500,0 мл 0,1 М раствора натрия тиосульфата помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой, свободной от углерода диоксида, до метки и перемешивают.
Раствор серной кислоты (1:4). В фарфоровый или стеклянный стакан подходящего объема помещают 4 объема воды и тонкой струйкой при перемешивании вливают один объем серной кислоты концентрированной.
Раствор стандартного образца СО панкреатина. Около 0,020 г (точная навеска) СО панкреатина помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл растворяют в 50 мл фосфатного буферного раствора pH 6,8, доводят объем буферным раствором до метки и перемешивают.
Испытуемый раствор. 6 таблеток препарата растирают в порошок в фарфоровой ступке и количественно переносят 50 мл фосфатного буферного раствора pH 6,8 в мерную колбу вместимостью 100 мл. Встряхивают в течение 10 мин, доводят объем раствора тем же буферным раствором до метки, перемешивают.
В 4 конические колбы со шлифами вместимостью 250 мл приливают по 25 мл 1% раствора крахмала, 10 мл фосфатного буферного раствора pH 6,8 и 1 мл 0,2 М раствора натрия хлорида. Колбы закрывают пробками, помещают в водяную баню при температуре (37 +/- 0,5) °C и выдерживают в течение 1 мин. В колбу № 1 (опытную) прибавляют 1 мл испытуемого раствора, перемешивают, в колбу № 2 (опытную) прибавляют 1 мл раствора СО панкреатина, перемешивают, обе колбы возвращают в баню и включают секундомер (время выдержки — точно 10 мин).
В колбы № 3 и № 4 (контрольные) прибавляют по 2 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты, в колбу № 3 прибавляют 1 мл испытуемого раствора, в колбу № 4 — 1 мл раствора ГСО панкреатина.
Через 10 мин после начала реакции в колбы № 1 и № 2 прибавляют по 2 мл 1 М раствора хлористоводородной кислоты.
Все колбы вынимают из бани, охлаждают. В каждую колбу при перемешивании прибавляют по 10 мл 0,1 М раствора йода и сразу же по 45 мл 0.1 М раствора натрия гидроксида. Колбы выдерживают в темном месте в течение 15 мин (точно по секундомеру), вынимают и прибавляют по 4 мл раствора серной кислоты (1:4), титруют 0,05 М раствором натрия тиосульфата.
Протеолитическая активность. Не менее 1,0 ЕД и не более 4,0 ЕД в одной таблетке. Определение проводят методом спектрофотометрии. За единицу протеолитической активности принимается такое количество фермента, которое при температуре 37 °C расщепляет казеин с такой начальной скоростью, при которой в одну мин образуются неосаждаемые трихлоруксусной кислотой продукты гидролиза казеина, эквивалентные 1 ммоль тирозина.
Раствор казеина. В мерный стакан вместимостью 200 мл помещают 2,0 г казеина растворяют в 60 мл фосфатного буферного раствора pH 8,0 и нагревают в течение 15 мин на водяной бане при температуре 80 — 90 °C, периодически перемешивая, охлаждают до комнатной температуры, доводят pH до 8,0 1 М раствором натрия гидроксида, переносят с помощью 30 мл фосфатного буферного раствора pH 8,0 в мерную колбу вместимостью 100 мл, объем доводят до метки тем же буферным раствором и перемешивают.
Фосфатный буферный раствор pH 8,0.
В мерную колбу вместимостью 1 л помещают 9,09 г калия дигидрофосфата, растворяют в 500 мл воды, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают (раствор А).
В мерную колбу вместимостью 1 л помещают 23,88 г динатрия гидрофосфата додекагидрата, растворяют в 500 мл воды, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают (раствор Б).
В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мл раствора А, доводят объем до метки раствором Б, перемешивают.
0,5 М раствор натрия карбоната. В мерную колбу вместимостью 1 л помещают 53 г натрия карбоната безводного, растворяют в воде, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают.
5% раствор трихлоруксусной кислоты. 5 г трихлоруксусной кислоты растворяют в 95 мл воды при перемешивании.
Испытуемый раствор. 10 таблеток препарата растирают в порошок в фарфоровой ступке и количественно переносят 100 мл воды в мерную колбу вместимостью 250 мл. Встряхивают в течение 30 мин, доводят объем раствора водой до метки, перемешивают и фильтруют через бумажный фильтр.
Раствор стандартного образца СО панкреатина. Около 0,035 г (точная навеска) СО панкреатина помещают в мерную колбу вместимостью 250 мл и растворяют в 100 мл воды при перемешивании в течение 30 мин. Доводят объем раствора водой до метки и перемешивают.
В 4 пробирки вместимостью 20 мл вносят по 2 мл раствора казеина, помещают в термостат при температуре (37 +/- 0,5) °C и выдерживают в течение 10 мин. В пробирку № 1 (опытную) прибавляют 2 мл испытуемого раствора, в пробирку № 2 (опытную) прибавляют 2 мл раствора СО панкреатина. Все пробирки помещают в термостат и выдерживают при температуре (37 +/- 0,5) °C в течение 15 мин (точно по секундомеру). Затем во все пробирки прибавляют по 4 мл 5 % раствора трихлоруксусной кислоты, перемешивают.
В пробирку № 3 (контрольную) прибавляют 2 мл испытуемого раствора, в пробирку № 4 (контрольную) прибавляют 2 мл раствора СО панкреатина, все пробирки помещают в термостат при температуре (37 +/- 0.5) °C, выдерживают в течение 20 мин (точно по секундомеру), после чего содержимое пробирок фильтруют через бумажные фильтры.
Для определения отбирают в пробирки вместимостью 20 мл по 1 мл фильтрата, прибавляют по 5 мл 0,5 М раствора натрия карбоната и по 1 мл реактива Фолина, предварительно разведенного водой 1:2.
Через 20 мин измеряют оптическую плотность полученных растворов на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 630 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм, используя в качестве раствора сравнения воду.
Хранение. В соответствии с ОФС «Хранение лекарственных средств».