ФС.3.4.0027.22. Фармакопейная статья. Золототысячника трава + Любистока лекарственного корневища и корни + Розмарина обыкновенного листья, таблетки
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 11.04.2022 № 246)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание»)
Примечание
В соответствии с Приказом Минздрава России от 11.04.2022 № 246 данный документ введен в действие с 01.04.2022.
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
Настоящая фармакопейная статья распространяется на лекарственный препарат Золототысячника трава + Любистока лекарственного корневища и корни + Розмарина обыкновенного листья, таблетки. Препарат должен соответствовать требованиям ОФС «Таблетки» и нижеприведенным требованиям.
Содержит не менее 34% и не более 166% суммы полифенолов в пересчете на пирогаллол от заявленного количества.
Описание. Содержание раздела приводится в соответствии с требованиями ОФС «Таблетки».
В химический стакан помещают 3 таблетки препарата, смывают водой оболочку. Затем к освобожденным от оболочки таблеткам прибавляют 25 мл воды и оставляют до полного разрушения. Распавшиеся таблетки в виде взвеси переносят на сито с размером отверстий 0,25 мм и промывают водой.
При рассмотрении микропрепаратов должны быть видны:
- фрагменты листовой пластинки с эпидермисом, состоящим из клеток с извилистыми стенками, складчатой кутикулой и устьицами анизоцитного типа; фрагменты эпидермиса лепестков с прямоугольно-вытянутыми клетками с извилистыми стенками и со складчатой кутикулой; фрагменты эпидермиса стебля с прямоугольными вытянутыми клетками эпидермиса с прямыми стенками; фрагменты мезофилла с мелкими одиночными призматическими кристаллами и мелкими друзами оксалата кальция, фрагменты склеренхимных волокон и узких сосудов с окаймленными порами, а также фрагменты спиральных и сетчатых сосудов (золототысячника трава, рис. 1);
- фрагменты толстостенных прямоугольных клеток перидермы, фрагменты паренхимы с эфирномасличными каналами, фрагменты сетчатых и лестничных сосудов, простые, округлые или яйцевидные крахмальные зерна (любистока лекарственного корни, рис. 2);
- фрагменты многоугольных клеток эпидермиса с прямыми или слегка извилистыми четковидно-утолщенными стенками, покрытые толстой кутикулой; фрагменты устьиц диацитного типа; волоски 2 типов: простые, одноклеточные, конические и многоклеточные, разветвленные, а также головчатые волоски с короткой одноклеточной ножкой и одно-, двухклеточной шаровидной головкой; фрагменты эпидермиса с эфирномасличными железками, состоящими из одноклеточной короткой ножки и головкой с 8-мью радиально расположенными выделительными клетками; фрагменты гиподермы, представленной крупными клетками с извилистыми и с четковидно-утолщенными стенками (розмарина лекарственного листья, рис. 3).
Рисунок 1 — Золототысячника трава
1 — фрагмент листа: а — клетки эпидермиса с извилистыми стенками, б — складчатая кутикула, в — сосочковидные выросты по краю листа, г — устьица анизоцитного типа (200x); 2 — фрагмент эпидермиса венчика со складчатой кутикулой (200x); 3 — фрагмент эпидермиса наружной стороны чашелистика с устьицами анизоцитного типа (200x)
Рисунок 2 — Любистока лекарственного корневища и корни
1 — фрагмент поперечного среза: а — пробка, б — эфирномасличный канал (200x); 2 — фрагмент продольного среза: эфирномасличный канал (400x); 3 — сетчатые и лестничные сосуды (400x); 4 — крахмальные зерна (200x)
Рисунок 3 — Розмарина лекарственного листья
1 — фрагмент нижнего эпидермиса с устьицами диацитного типа (200x); 2 — гиподерма с извилистыми четковидно-утолщенными стенками (400x); 3 — многоклеточный, разветвленный волосок (400x); 4 — головчатые волоски (400x); 5 — эфирномасличная железка (вид сбоку) (400x)
1. Определение фенольных соединений
Раствор стандартного образца рутина. 0,01 г стандартного образца (СО) рутина растворяют в 10 мл метанола и перемешивают.
Срок годности раствора не более 5 сут, в защищенном от света месте.
Испытуемый раствор. Навеску порошка растертых таблеток, эквивалентную содержанию около 140 мг золототысячника травы, около 140 мг любистока лекарственного корневища и корни, около 140 мг розмарина обыкновенного листья помещают в коническую колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 10,0 мл метанола, обрабатывают ультразвуком в течение 10 мин. 1 мл надосадочной жидкости фильтруют через мембранный фильтр с размером пор 0,45 мкм во флакон из темного стекла.
Срок годности раствора не более 5 сут, в защищенном от света месте.
Реактив для детектирования. Анисового альдегида раствор уксуснокислый в этаноле.
На линию старта ТСХ пластинки со слоем силикагеля 60 F254 в виде полос длиной 10 мм и шириной 2 мм наносят по 10 мкл испытуемого раствора и раствора СО рутина. Пластинку с нанесенными пробами сушат в течение 5 мин, помещают в камеру, предварительно насыщенную смесью растворителей этилацетат — уксусная кислота — вода (69:16:16) в течение не менее 1 ч, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Пластинку обрабатывают анисового альдегида раствором уксуснокислым в этаноле, выдерживают при температуре 110 — 115 °C в течение 7 мин и просматривают при дневном свете.
На хроматограмме раствора СО рутина должна обнаруживаться зона адсорбции желто-коричневого или коричневого цвета.
На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции коричневого цвета над линией старта, выше нее зона адсорбции желто-коричневого или коричневого цвета, над ней зона адсорбции желто-коричневого или коричневого цвета на уровне зоны адсорбции СО рутина, чуть выше зона адсорбции желто-коричневого или коричневого цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции.
Подвижная фаза (ПФ). Толуол — этилацетат (95:5).
Раствор стандартного образца розмаринового лекарственного листья масла эфирного. 0,1 г стандартного образца (СО) розмарина лекарственного листья масла эфирного растворяют в 10 мл метанола и перемешивают.
Срок годности раствора не более 5 сут, в защищенном от света месте.
Испытуемый раствор. Навеску порошка растертых таблеток, эквивалентную содержанию около 540 мг золототысячника травы, около 540 мг любистока лекарственного корневища и корни, около 540 мг розмарина обыкновенного листья помещают в коническую колбу вместимостью 1000 мл, прибавляют 500 мл воды и получают эфирное масло в соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания эфирного масла в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» (метод 3, время перегонки 3 ч). Смесь из эфирного масла и декалина помещают в мерную колбу вместимостью 5 мл и доводят объем раствора метанолом до метки и перемешивают.
На линию старта ТСХ пластинки со слоем силикагеля 60 F254 в виде полос длиной 15 мм и шириной 2 мм наносят 10 мкл испытуемого раствора и 15 мкл раствора СО розмарина лекарственного листья масла. Пластинку с нанесенными пробами сушат в течение 5 мин, помещают в камеру, предварительно насыщенную смесью растворителей толуол — этилацетат (95:5) в течение не менее 1 ч, и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.
На хроматограмме испытуемого раствора в средней части пластинки должны обнаруживаться две зоны адсорбции с флуоресценцией светло-синего или голубого цвета, верхняя из которых более интенсивная.
Затем пластинку обрабатывают анисового альдегида раствором уксуснокислым в этаноле, выдерживают при температуре 110 — 115 °C в течение 7 и просматривают при дневном свете.
На хроматограмме раствора СО розмарина лекарственного листья масла эфирного должны обнаруживаться две зоны адсорбции красновато-коричневого цвета в нижней трети пластинки; зона адсорбции красновато-коричневого цвета в средней трети пластинки, и над ней зона адсорбции коричневого или желто-коричневого цвета; зона адсорбции красновато-коричневого цвета в верхней трети пластинки.
На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться зона адсорбции красновато-коричневого цвета в нижней трети пластинки, над ней две зоны адсорбции красновато-коричневого цвета на уровне зон адсорбции СО розмарина лекарственного листья масла эфирного; зона адсорбции красновато-коричневого цвета на уровне зоны адсорбции СО розмарина лекарственного листья масла эфирного в средней трети пластинки; над ней зона адсорбции коричневого или желто-коричневого цвета на уровне зоны адсорбции СО розмарина лекарственного листья масла эфирного; зона адсорбции красновато-коричневого цвета на уровне зоны адсорбции СО розмарина лекарственного листья масла эфирного в верхней трети пластинки; допускается обнаружение других зон адсорбции.
Однородность массы. В соответствии с требованиями ОФС «Однородность массы дозированных лекарственных форм».
Распадаемость. Не более 30 мин. В соответствии с требованиями ОФС «Распадаемость таблеток и капсул».
Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».
Натрия карбоната раствор 29%. 29,0 г натрия карбоната безводного растворяют в воде и доводят объем раствора водой до 100,0 мл.
Раствор стандартного образца пирогаллола. 0,05 г (точная навеска) стандартного образца (СО) пирогаллола помещают в мерную колбу темного стекла вместимостью 100 мл, прибавляют 70 мл воды, помещают на ультразвуковую баню на 2 мин, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. 5,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу темного стекла вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. 2,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу темного стекла вместимостью 25 мл, прибавляют 1,0 мл реактива Фолина-Чокальтеу, 10 мл воды, доводят объем раствора натрия карбоната раствором 29% до метки и перемешивают.
Испытуемый раствор. Препарат измельчают до величины частиц, проходящих через сито с отверстиями размером 0,5 мм.
Точную навеску порошка растертых таблеток, эквивалентную содержанию около 71,0 мг золототысячника травы, около 71,0 мг любистока лекарственного корневища и корни, около 71,0 мг розмарина обыкновенного листья помещают в коническую колбу вместимостью 100 мл прибавляют 70 мл воды и нагревают с обратным холодильником на водяной бане в течение 35 мин. После охлаждения извлечение количественно переносят в мерную колбу вместимостью 200 мл, доводят объем раствора водой до метки, затем центрифугируют при 3000 об/мин в течение 10 мин. 2,0 мл надосадочной жидкости помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, прибавляют 1,0 мл реактива Фолина-Чокальтеу, 10,0 мл воды, доводят объем раствора натрия карбоната раствором 29% до метки и перемешивают.
Оптическую плотность испытуемого раствора измеряют через 30 мин на спектрофотометре при длине волны 760 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения. В качестве раствора сравнения используют воду.
Параллельно измеряют оптическую плотность раствора СО пирогаллола в аналогичных условиях.
Содержание суммы полифенолов в пересчете на пирогаллол в одной таблетке в процентах от заявленного количества (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{A \cdot a_{0} \cdot 200 \cdot 5 \cdot 2 \cdot 25 \cdot G \cdot P \cdot 100}{A_{0} \cdot a \cdot 100 \cdot 2 \cdot 100 \cdot 25 \cdot 100 \cdot L} = \frac{A \cdot a_{0} \cdot P \cdot G}{A_{0} \cdot a \cdot 10 \cdot L} ,
где A — оптическая плотность испытуемого раствора;
A0 — оптическая плотность раствора СО пирогаллола;
A0 — навеска СО пирогаллола, мг;
a — навеска порошка растертых таблеток, мг;
G — средняя масса одной таблетки в мг;
P — содержание основного вещества в СО пирогаллола, %;
L — заявленное количество пирогаллола в одной таблетке, мг.
Хранение. В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственных средств».