ФС.3.1.0102.18. Фармакопейная статья. Циклофосфамид, таблетки

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том III»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Циклофосфамид, таблетки Cyclophosphamidi tabulettae	ФС.3.1.0102.18 Взамен ГФ X, ст. 197

Настоящая фармакопейная статья распространяется на лекарственный препарат циклофосфамид, таблетки (таблетки, покрытые оболочкой). Препарат должен соответствовать требованиям ОФС «Таблетки» и ниже приведенным требованиям.

Содержит не менее 90,0% и не более 110,0% от заявленного количества циклофосфамида C7H15Cl2N2O2P·H2O.

Описание. Содержание раздела приводится в соответствии с ОФС «Таблетки».

Подлинность

1. ИК-спектрометрия. Навеску порошка растертых таблеток, содержащую 0,2 г циклофосфамида, взбалтывают с 2 мл хлороформа, фильтруют и выпаривают досуха. ИК-спектр полученного остатка, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца циклофосфамида.

2. Качественная реакция. Навеску порошка растертых таблеток, содержащую 0,2 г циклофосфамида, взбалтывают с 10 мл спирта 95% и фильтруют. К фильтрату прибавляют 5 мл азотной кислоты до кислой реакции среды и затем 2% раствор серебра нитрата; должен образоваться белый творожистый осадок, легко растворимый в растворе аммиака.

3. Качественная реакция. К навеске порошка растертых таблеток, содержащей 0,1 г циклофосфамида, прибавляют 2 мл воды и 2 мл серной кислоты концентрированной и кипятят; должно появиться темно-бурое окрашивание. После охлаждения осторожно прибавляют 25 мл 20% раствора натрия гидроксида и снова нагревают. Образующиеся пары должны окрашивать влажную лакмусовую бумагу в синий цвет.

Растворение. Определение проводят в соответствии с ОФС «Растворение для твердых дозированных лекарственных форм» методом ВЭЖХ.

Условия испытания

Аппарат:	«Вращающаяся корзинка»;
Среда растворения:	вода;
Объем среды растворения:	900 мл;
Температура:	37 +/- 0,5 °C;
Скорость вращения корзинки:	100 об/мин;
Время растворения:	45 мин.

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил-вода 30:70.

Испытуемый раствор. Каждую корзинку, в которую помещена одна таблетка, погружают в сосуд для растворения с предварительно нагретой средой растворения. Через 45 мин отбирают пробу раствора и фильтруют, отбрасывая первые порции фильтрата. При необходимости полученный фильтрат дополнительно разводят средой растворения до концентрации циклофосфамида около 0,055 мг/мл.

Стандартный раствор. Около 55 мг (точная навеска) стандартного образца циклофосфамида помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. 1,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка	30 x 0,39 см, силикагель октадецилсилильный для хроматографии (C18);
Температура колонки	25 °C;
Скорость потока	1,5 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 195 нм;
Объем пробы	50 мкл.

Хроматографируют стандартный и испытуемый растворы.

Пригодность хроматографической системы (с использованием стандартного раствора) определяют в соответствии с ОФС «Хроматография» со следующими уточнениями:

• фактор асимметрии пика циклофосфамида должен быть не более 2,0;
• относительное стандартное отклонение площади пика циклофосфамида должно быть не более 2%.

Количество циклофосфамида, перешедшее в раствор, в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot 900 \cdot a_{0} \cdot 1 \cdot P}{S_{0} \cdot L \cdot F \cdot 100 \cdot 10} = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 0,9}{S_{0} \cdot L \cdot F}

где

S1 — площадь основного пика на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь основного пика на хроматограмме стандартного раствора;

a0 — навеска стандартного образца циклофосфамида, мг;

P — содержание циклофосфамида ества в стандартном образце циклофосфамида, %;

L — заявленное содержание циклофосфамида в одной таблетке, мг;

F — фактор дополнительного разведения испытуемого раствора.

Через 45 мин в раствор должно перейти не менее 75% (Q) циклофосфамида C7H15Cl2N2O2P.

Родственные примеси. Определение проводят методом ТСХ (ОФС «Тонкослойная хроматография»).

Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля G.

Подвижная фаза (ПФ). Метилэтилкетон-вода-ацетон-муравьиная кислота безводная 80:12:4:2.

Испытуемый раствор А. Навеску порошка растертых таблеток, содержащую 0,2 г циклофосфамида, взбалтывают с 50 мл хлороформа в течение 15 мин и фильтруют. Выпаривают фильтрат досуха и растворяют остаток в 10 мл спирта 96%.

Испытуемый раствор Б. 1 мл испытуемого раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл и доводят объем раствора спиртом 96% до метки.

На линию старта пластинки наносят по 10 мкл испытуемого раствора А (100 мкг) и испытуемого раствора Б (1 мкг). Пластинку с нанесенными пробами высушивают в потоке теплого воздуха в течение 5 — 10 мин, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт ПФ пройдет около 80 — 90% от линии старта, ее вынимают из камеры и нагревают при 100 °C в течение 10 мин. Горячую пластинку помещают в камеру с ПФ, в которую помещена выпарительная чашка, содержащая равные объемы 5% раствора калия перманганата и хлористоводородной кислоты концентрированной. Закрывают камеру и выдерживают в течение 2 мин. Пластинку вынимают из камеры, помещают в поток холодного воздуха до удаления избытка хлора и до тех пор, пока область пластинки ниже линии старта дает очень слабое синее окрашивание с раствором крахмала с калия йодидом; необходимо избегать длительного воздействия холодного воздуха. Пластинку опрыскивают раствором крахмала с калия йодидом и выдерживают в течение 5 мин.

Хроматографическая система считается пригодной, если на хроматограмме испытуемого раствора Б четко видна зона адсорбции.

Любая дополнительная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора А по интенсивности окраски не должна превышать зону адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора Б (не более 1%).

Зона адсорбции на линии старта при оценке не учитывается.

Однородность дозирования. Определение проводят в соответствии с ОФС «Однородность дозирования», способ 1 в условиях испытания «Количественное определение» или способ 2.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил-вода 30:70.

Испытуемый раствор. Точную навеску порошка растертых таблеток, соответствующую около 50 мг циклофосфамида, помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. 2,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 20 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Раствор стандартного образца циклофосфамида. Около 50 мг (точная навеска) стандартного образца циклофосфамида помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. 2,0 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 20 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Хроматографические условия

Колонка	30 x 0,39 см, силикагель октадецилсилильный для хроматографии (C18);
Температура колонки	25 °C;
Скорость потока	1,5 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 195 нм;
Объем пробы	50 мкл.

Хроматографируют испытуемый раствор и раствор стандартного образца циклофосфамида.

Пригодность хроматографической системы (с использованием стандартного раствора) определяют в соответствии с ОФС «Хроматография» со следующими уточнениями:

• фактор асимметрии пика циклофосфамида должен быть не более 2,0;
• относительное стандартное отклонение площади пика циклофосфамида должно быть не более 2%.

Содержание циклофосфамида C7H15Cl2N2O2P·H2O в одной таблетке в процентах от заявленного количества (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot G \cdot 100 \cdot 20 \cdot 2}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot L \cdot 2 \cdot 100 \cdot 20} = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot G}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot L}

где

S1 — площадь пика циклофосфамида на хроматограмме испытуемого раствора;

S0 — площадь пика циклофосфамида на хроматограмме раствора стандартного образца циклофосфамида;

a1 — навеска порошка таблеток, мг;

a0 — навеска стандартного образца циклофосфамида, мг;

P — содержание циклофосфамида в стандартном образце циклофосфамида, %.

G — средняя масса одной таблетки, мг;

L — заявленное количество циклофосфамида в одной таблетке, мг.

Хранение. В защищенном от света месте.

---