ФС.3.1.0007.18. Фармакопейная статья. Ампициллин, таблетки
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749)
Примечание
В соответствии с Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749 данный документ введен в действие с 01.12.2018. Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте http://femb.ru/femb/pharmacopea.php по состоянию на 14.03.2019. Взамен ВФС 42-3432-99.
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
| Ампициллин, таблетки Ампициллин, таблетки Ampicillini tabulettae |
ФС.3.1.0007.18 Взамен ВФС 42-3432-99 |
|---|
Настоящая фармакопейная статья распространяется на лекарственный препарат ампициллин, таблетки. Препарат должен соответствовать требованиям ОФС «Таблетки» и нижеприведенным требованиям.
Содержит количество ампициллина (ампициллина безводного или ампициллина тригидрата), эквивалентное не менее 90,0% и не более 110,0% от заявленного количества ампициллина C16H19N3O4S.
Описание. Содержание раздела приводится в соответствии с требованиями ОФС «Таблетки».
1. Спектрофотометрия. Спектры поглощения испытуемого и стандартного растворов в области длин волн от 230 до 350 нм должны иметь максимум при одной и той же длине волны (испытание «Количественное определение»).
2. Тонкослойная хроматография (ОФС «Тонкослойная хроматография»).
Пластинка. ТСХ пластинка со слоем силикагеля силанизированного.
Подвижная фаза (ПФ). Пиридин-вода-хлороформ-метанол 1:30:80:90.
Испытуемый раствор. Навеску порошка растертых таблеток, эквивалентную 20,0 мг ампициллина, встряхивают с 5,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и фильтруют.
Раствор сравнения А. Около 20,0 мг стандартного образца ампициллина тригидрата растворяют в 5,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М.
Раствор сравнения Б. Около 20,0 мг стандартного образца амоксициллина тригидрата и около 20,0 мг стандартного образца ампициллина тригидрата растворяют в 5,0 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М.
На линию старта пластинки наносят по 1 мкл испытуемого раствора (4 мкг), раствора сравнения А (4 мкг) и раствора сравнения Б (по 4 мкг стандартных образцов амоксициллина тригидрата и ампициллина тригидрата). Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру с ПФ и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт подвижной фазы пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и опрыскивают 0,2% раствором нингидрина, нагревают при температуре 130 °C в течение 10 мин.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора сравнения Б должны наблюдаться две четко разделенные зоны адсорбции.
Основная зона адсорбции на хроматограмме испытуемого раствора по положению, величине и интенсивности окраски должна соответствовать зоне адсорбции на хроматограмме раствора сравнения А.
Растворение. Определение проводят в соответствии с ОФС «Растворение для твердых дозированных лекарственных форм» методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).
| Аппарат: | «Вращающаяся корзинка»; |
|---|---|
| Среда растворения: | вода; |
| Объем среды растворения: | 900 мл; |
| Температура: | 37 +/- 0,5 °C; |
| Скорость вращения мешалки: | 100 об/мин; |
| Время растворения: | 45 мин. |
Растворы готовят непосредственно перед использованием.
Раствор меди(II) сульфата. В мерную колбу вместимостью 1 л помещают 3,93 г меди(II) сульфата, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Буферный раствор pH 5,2. Смешивают 464 мл лимонной кислоты раствора 0,1 М с 536 мл динатрия гидрофосфата раствора 0,2 М. pH полученного раствора 5,2 +/- 0,05.
Буферный раствор меди(II) сульфата. В мерную колбу вместимостью 1 л помещают 15 мл раствора меди(II) сульфата и доводят объем раствора буферным раствором pH 5,2 до метки.
Испытуемый раствор. Каждую корзинку, в которую помещена одна таблетка, помещают в сосуд для растворения с предварительно нагретой средой растворения. Через 45 мин отбирают пробу раствора и фильтруют, отбрасывая первые порции фильтрата. Полученный раствор разводят буферным раствором меди(II) сульфата до концентрации ампициллина около 0,025 мг/мл. 25 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, плотно закрывают и нагревают на водяной бане при температуре 80 +/- 2 °C в течение 30 мин. Затем быстро охлаждают до комнатной температуры и при необходимости доводят объем раствора водой до метки.
Раствор стандартного образца ампициллина. Около 50 мг (точная навеска) стандартного образца ампициллина безводного помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора буферным раствором меди(II) сульфата до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мл полученного раствора, плотно закрывают и нагревают на водяной бане при температуре 80 +/- 2 °C в течение 30 мин. Затем быстро охлаждают до комнатной температуры и при необходимости доводят объем раствора водой до метки.
Раствор сравнения. Среда растворения.
Измеряют оптическую плотность испытуемого и стандартного растворов на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 320 нм в кювете с толщиной слоя 1 см.
Количество ампициллина, перешедшее в раствор, в процентах (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{A_{1} \cdot 900 \cdot F \cdot a_{0} \cdot 5 \cdot P}{A_{0} \cdot L \cdot 100 \cdot 100} = \frac{A_{1} \cdot F \cdot a_{0} \cdot P \cdot 0,45}{A_{0} \cdot L} ,
где A1 — оптическая плотность испытуемого раствора;
A0 — оптическая плотность раствора стандартного образца ампициллина;
a0 — навеска стандартного образца ампициллина безводного, мг;
P — содержание ампициллина в стандартном образце ампициллина безводного, %;
L — заявленное количество ампициллина в одной таблетке, мг;
F — фактор разведения испытуемого раствора.
Через 45 мин в раствор должно перейти не менее 75% (Q) ампициллина C16H19N3O4S.
Светопоглощающие примеси. Определение проводят методом спектрофотометрии (ОФС «Спектрофотометрия в ультрафиолетовой и видимой областях»).
Испытуемый раствор. Точную навеску порошка растертых таблеток, содержащую около 0,15 г ампициллина, количественно помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в воде и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. Полученный раствор фильтруют, отбрасывая первые порции фильтрата.
Измеряют оптическую плотность испытуемого раствора на спектрофотометре в максимуме поглощения при длине волны 322 нм в кювете с толщиной слоя 1 см. Измерение оптической плотности проводят сразу же после приготовления растворов.
Оптическая плотность должна быть не более 0,2.
Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Испытуемый раствор и растворы сравнения используют свежеприготовленными или хранят при температуре 4 °C не более суток.
Подвижная фаза А (ПФА). В мерную колбу вместимостью 1 л помещают 0,5 мл уксусной кислоты раствора 2 М, 50 мл калия дигидрофосфата раствора 0,2 М, 50 мл ацетонитрила и доводят объем раствора водой до метки.
Подвижная фаза Б (ПФБ). В мерную колбу вместимостью 1 л помещают 0,5 мл уксусной кислоты раствора 2 М, 50 мл калия дигидрофосфата раствора 0,2 М, 400 мл ацетонитрила и доводят объем раствора водой до метки.
Испытуемый раствор. Навеску порошка растертых таблеток, эквивалентную около 31 мг ампициллина, помещают в мерную колбу вместимостью 10 мл, прибавляют 5 мл ПФА, доводят объем тем же растворителем до метки и фильтруют.
Раствор сравнения А. Около 27,0 мг (точная навеска) стандартного образца ампициллина безводного помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в ПФА и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Раствор сравнения Б. 1,0 мл раствора сравнения А помещают в мерную колбу вместимостью 20 мл и доводят объем раствора ПФА до метки.
Раствор сравнения В. Навеску порошка растертых таблеток, эквивалентную 0,2 г ампициллина, смешивают с 1 мл воды. Нагревают раствор при 60 °C в течение 1 ч и охлаждают. 1 мл полученного раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл и доводят объем раствора ПФА до метки.
Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. 2 мг стандартного образца цефрадина помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, растворяют в ПФА и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. 5 мл полученного раствора смешивают с 5 мл раствора сравнения А.
Цефрадин: (6R,7R)-7-[(2R)-2-амино-2-(циклогекса-1,4-диен-1-ил) ацетамидо]-3-метил-8-оксо-5-тиа-1-азабицикло[4.2.0]окт-2-ен-2-карбоновая кислота, CAS 66592-87-8.
| Время, мин | ПФА, % | ПФБ, % |
| 0 — tR | 85 | 15 |
| tR — (tR + 30) | 85 \rightarrow 0 | 15 \rightarrow 100 |
| (tR + 30) — (tR + 45) | 0 | 100 |
| (tR + 45) — (tR + 60) | 85 | 15 |
| tR — время удерживания пика амоксициллина | ||
Хроматографируют раствор сравнения Б и испытуемый раствор в изократическом режиме до элюирования пика ампициллина. Хроматографируют ПФА и проводят тот же цикл для получения хроматограммы нулевой линии.
Хроматографируют раствор сравнения В и цикл повторяют.
Идентификация примесей. Для идентификации пиков примесей используют хроматограмму раствора сравнения В, на которой должны наблюдаться пики ампициллина и димера ампициллина.
Относительное время удерживания соединений. Ампициллин — 1, димер ампициллина — около 2,8.
Пригодность хроматографической системы. На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (R) между пиками ампициллина и цефрадина должно быть не менее 3,0.
Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:
- площадь пика димера ампициллина не должна быть более 4,5-кратной площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 4,5%);
- площадь любого пика, за исключением основного пика, не должна быть более двукратной площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 2,0%);
- суммарная площадь пиков примесей не должна быть более пятикратной площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (не более 5,0%).
Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения Б (менее 0,1%).
Вода. Не менее 10,0% и не более 15,0% (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют около 0,1 г препарата.
Однородность дозирования. Определение проводят в соответствии с ОФС «Однородность дозирования», способ 2 или методом спектрофотометрии, способ 1 в условиях испытания «Растворение».
Испытуемый раствор. Одну таблетку помещают в мерную колбу вместимостью 200 мл, прибавляют 2 мл спирта 96%, встряхивают в течение 2 мин, прибавляют 100 мл воды и энергично встряхивают в течение 10 мин. Доводят объем раствора водой до метки и фильтруют, отбрасывая первые порции фильтрата. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают 2,0 мл фильтрата и доводят объем раствора средой растворения до метки. При необходимости полученный раствор разводят средой растворения до концентрации ампициллина около 25 мкг/мл.
Содержание ампициллина C16H19N3O4S в одной таблетке в процентах (X) от заявленного количества вычисляют по формуле:
X = \frac{A_{1} \cdot a_{0} \cdot 5 \cdot P \cdot 200 \cdot 50 \cdot F}{A_{0} \cdot 100 \cdot 100 \cdot L \cdot 2} = \frac{A_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot F \cdot 2,5}{A_{0} \cdot L} ,
где A1 — оптическая плотность испытуемого раствора;
A0 — оптическая плотность раствора стандартного образца ампициллина;
a0 — навеска стандартного образца ампициллина безводного, мг;
P — содержание ампициллина в стандартном образце ампициллина безводного, %;
F — фактор разведения испытуемого раствора;
L — заявленное количество ампициллина в одной таблетке, мг.
Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
Количественное определение. Определение проводят методом спектрофотометрии в условиях испытания «Растворение».
Испытуемый раствор. Взвешивают 10 таблеток и определяют среднюю массу таблетки (ОФС «Лекарственные формы»). Точную навеску порошка растертых таблеток, эквивалентную около 50 мг ампициллина, помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 70 мл воды, встряхивают в течение 30 мин, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и фильтруют, отбрасывая первые порции фильтрата. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора буферным раствором меди(II) сульфата до метки. В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 25 мл полученного раствора, плотно закрывают и нагревают на водяной бане при температуре 80 +/- 2 °C в течение 30 мин. Затем быстро охлаждают до комнатной температуры и при необходимости доводят объем раствора водой до метки.
Содержание ампициллина C16H19N3O4S в процентах от заявленного количества (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{A_{1} \cdot a_{0} \cdot 5 \cdot P \cdot 100 \cdot 100 \cdot G}{A_{0} \cdot 100 \cdot 100 \cdot a_{1} \cdot 5 \cdot L} = \frac{A_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot G}{A_{0} \cdot a_{1} \cdot L} ,
где A1 — оптическая плотность испытуемого раствора;
A0 — оптическая плотность раствора стандартного образца ампициллина;
a1 — навеска порошка таблеток, мг;
a0 — навеска стандартного образца ампициллина безводного, мг;
P — содержание ампициллина в стандартном образце ампициллина безводного, %;
G — средняя масса одной таблетки, мг;
L — заявленное количество ампициллина в одной таблетке, мг.
Хранение. В защищенном от света месте.