ФС.2.5.0100.18. Фармакопейная статья. Тыквы семена
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том IV»)
Примечание
В соответствии с Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749 данный документ введен в действие с 01.12.2018. Текст документа приведен в соответствии с публикацией на сайте http://femb.ru/femb/pharmacopea.php по состоянию на 15.03.2019. Взамен ГФ XI, вып. 2, ст. 78.
ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ
flowchart LR n0["Государственная фармакопея СССР. XI издание. Выпуск..."]:::rst click n0 "https://bukva.ai/docs/gf-xi-minzdrav-sssr-ministerstvo" "Государственная фармакопея СССР. XI издание. Выпуск 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье" n1["ФС.2.5.0100.18"]:::doc click n1 "https://bukva.ai/docs/fs-2-5-0100-18" "ФС.2.5.0100.18. Фармакопейная статья. Тыквы семена (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)" n0 --> n1 classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000; classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000; classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;
| Тыквы семена | ФС.2.5.0100.18 |
|---|---|
| Cucurbitae semina | Взамен ГФ XI, вып. 2, ст. 78 |
Зрелые, очищенные от остатков мякоти околоплодника и высушенные семена однолетних культивируемых растений тыквы обыкновенной — Cucurbita pepo L., тыквы крупной — Cucurbita maxima Duch. и тыквы мускатной — Cucurbita moschata (Duch.) Poir., сем. тыквенных — Cucurbitaceae.
Внешние признаки. Цельное сырье. Семена эллиптические, плотные, слегка суженные с одной стороны, окаймленные по краю ободком. Поверхность семян глянцевая или матовая, гладкая или слегка шероховатая. Кожура семени состоит из двух частей: деревянистой, легко отделяемой и внутренней — пленчатой, плотно прилегающей к зародышу; иногда деревянистая кожура отсутствует (сорт голосемянная). Зародыш состоит из двух желтовато-белых семядолей и небольшого корешка. Длина семени 1,5 — 2,5 см, ширина 0,8 — 1,4 см, толщина в средней части семени 0,1 — 0,4 мм.
Цвет семян белый, белый с желтоватым или сероватым оттенком, реже зеленовато-серый или желтый. Цвет семян голосемянного сорта от желтовато-зеленого до коричневато-зеленого. Запах отсутствует. Вкус семени, очищенного от деревянистой части кожуры, маслянистый, сладковатый.
Микроскопические признаки. Цельное сырье. При рассмотрении поперечного среза семени должны быть видны: семенная кожура, алейроновый слой (недоразвитый эндосперм) и семядоли зародыша. В семенной кожуре эпидермис представлен крупными палисадными клетками с утолщенными и, как правило, волнистыми боковыми стенками и почти всегда разрушенной наружной стенкой. Под эпидермисом расположена мощная склеренхима, в которой различаются три слоя. Наружная часть склеренхимы состоит из 5 — 7 рядов, плотно сомкнутых клеток с многочисленными порами. Срединная часть склеренхимы представлена одним слоем очень крупных округлочетырехугольных клеток с толстой слоистой оболочкой и узкими порами. Внутренняя часть склеренхимы в зависимости от вида тыквы содержит от двух до шести рядов клеток звездчатой формы, которые образуют крупные межклетники. К внутренней части склеренхимы примыкает несколько слоев тонкостенных сдавленных клеток. Алейроновый слой представлен одним рядом небольших изодиаметрических клеток, густо заполненных алейроновыми зернами. В клетках семядолей хорошо различим эпидермальный слой из мелких, овальных клеток; далее следуют клетки палисадного слоя. Все они густо заполнены алейроновыми зернами и каплями жирного масла.
1 — 6 - поперечные срезы (90x); 7 — «давленый» препарат (окраска одревесневших/лигнифицированных элементов и капель жирного масла) (90x); 1, 2 — поперечный срез: склеренхима; 3 — поперечный срез: звездчатые пористые клетки; 4 — поперечный срез: алейроновый слой и эпидермальный слой семядоли; 5 — фрагмент поперечного среза семядоли; 6 — поперечный срез: капли жирного масла; 7 — капли жирного масла и алейроновые зерна
Определение основных групп биологически активных веществ
Нингидрина раствор 0,4% в ацетоне. 0,4 г нингидрина помещают в мерную колбу вместимостью 100,0 мл, прибавляют 40 мл ацетона, перемешивают, затем доводят объем раствора этим же растворителем до метки и вновь перемешивают.
Около 10,0 обезжиренного шрота (см. раздел «Количественное определение»), высушенного под тягой до полного удаления следов хлороформа, переносят в коническую колбу вместимостью 250 мл, добавляют 100 мл воды и экстрагируют с обратным холодильником в водяной бане в течение 1 ч. После охлаждения содержимое колбы фильтруют в другую колбу вместимостью 250 мл через 6 — 8 слоев марли. 15,0 мл полученного фильтрата переносят в колбу вместимостью 100 мл и добавляют 45 мл спирта 96%. Колбу закрывают пробкой и помещают в холодильник с температурой 4 °C на 2 — 3 ч. Выпавший хлопьевидный осадок отфильтровывают в сухую колбу через ватный тампон, отбрасывая первые 5 мл (испытуемый раствор).
На линию старта хроматографической пластинки со слоем силикагеля наносят в виде полосы длиной 10 мм и шириной не более 2 мм 80 мкл (0,08 мл) испытуемого раствора.
Пластинку с нанесенной пробой сушат при комнатной температуре в течение 15 мин, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 1 ч смесью растворителей пропанол — муравьиная кислота концентрированная — уксусная кислота ледяная (16:5:5), и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей. Пластинку обрабатывают нингидрина раствором 0,4% в ацетоне, подсушивают, выдерживают при температуре 60 °C в течение 20 мин и просматривают при дневном свете.
На хроматограмме испытуемого раствора должно наблюдаться не менее 4 зон адсорбции (снизу вверх от линии старта): зона серо-коричневого или зелено-коричневого цвета, далее 3 зоны от желто-оранжевого или желто-коричневого цвета до сиреневого или фиолетового цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции.
Готовые срезы тыквы семян или «давленые» препараты, которые получают при использовании обратного конца препаровальной иглы или скальпеля путем надавливания на кусочки семян, помещают на предметное стекло в 2 — 3 капли раствора судана III, накрывают покровным стеклом и нагревают; должно наблюдаться оранжево-розовое или оранжево-желтое окрашивание капель (жирное масло).
Влажность. Цельное сырье — не более 13%.
Зола общая. Цельное сырье — не более 5%.
Зола, нерастворимая в растворе хлористоводородной кислоты. Цельное сырье — не более 0,5%.
Другие части растения, не соответствующие установленному описанию сырья (части околоплодника в виде отделившихся пленок и остатков сухой мякоти). Цельное сырье — не более 0,2%.
Пустые и поврежденные семена. Цельное сырье — не более 2%.
Органическая примесь. Цельное сырье — не более 0,5%.
Минеральная примесь. Цельное сырье — не более 0,1%.
Радионуклиды. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».
Тяжелые металлы и мышьяк. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».
Остаточные количества пестицидов. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».
Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».
Количественное определение. Цельное сырье: содержание суммы липофильных веществ — не менее 35%.
Аналитическую пробу сырья измельчают до размера частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм.
Около 10,0 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в патрон из фильтровальной бумаги, который переносят в аппарат Сокслета с экстрактором объемом 150 — 300 мл, к экстрактору присоединяют круглодонную колбу вместимостью 500 мл, предварительно высушенную в течение 1 ч при 100 — 105 °C и взвешенную по окончании охлаждения, и помещают в водяную баню. Экстрагируют хлороформом до полного обесцвечивания извлечения в экстракторе (около 6 — 8 часов). По окончании процесса экстракции растворитель отгоняют на роторном испарителе при температуре 50 — 60 °C и высушивают полученный комплекс липофильных веществ в сушильном шкафу при температуре 100 — 105 °C до постоянной массы.
Содержание суммы липофильных веществ в абсолютно сухом сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{a_{1} \cdot 100 \cdot 100}{a \cdot (100 - W)} ,
где a1 — масса сухого остатка, в граммах;
W — влажность сырья, в процентах.
Упаковка, маркировка и транспортирование. В соответствии с требованиями ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».
Хранение. В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».