ФС.2.5.0094.18. Фармакопейная статья. Стальника полевого корни

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том IV»)

ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

flowchart LR
  n0["Государственная фармакопея СССР. XI издание. Выпуск..."]:::rst
  click n0 "https://bukva.ai/docs/gf-xi-minzdrav-sssr-ministerstvo" "Государственная фармакопея СССР. XI издание. Выпуск 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье"
  n1["ФС.2.5.0094.18"]:::doc
  click n1 "https://bukva.ai/docs/fs-2-5-0094-18" "ФС.2.5.0094.18. Фармакопейная статья. Стальника полевого корни (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)"
  n0 --> n1
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Собранные осенью и высушенные корни дикорастущего и культивируемого многолетнего травянистого растения стальника полевого (пашенного) — Ononis arvensis L., сем. бобовых — Fabaceae.

Внешние признаки. Цельное сырье. Цельные или разрезанные корни длиной до 40 см, толщиной 0,5 — 2,5 см. Корни цилиндрические, слегка сплюснутые, перекрученные, прямые или изогнутые, твердые, деревянистые. Поверхность корней продольно-бороздчатая; пробка местами отслаивается; излом волокнистый. Цвет корня с поверхности светло-коричневый, на изломе желтовато-белый. Запах слабый, своеобразный. Вкус водного извлечения сладковато-горьковатый, слегка вяжущий.

Измельченное сырье. Кусочки корней различной формы, проходящие сквозь сито с отверстиями диаметром 7 мм. Цвет светло-коричневый или желтовато-белый. Запах слабый, своеобразный. Вкус водного извлечения сладковато-горьковатый, слегка вяжущий.

Порошок. Кусочки корней различной формы, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. Цвет светло-коричневый или желтовато-белый. Запах слабый, своеобразный. Вкус водного извлечения сладковато-горьковатый, слегка вяжущий.

Микроскопические признаки. Цельное сырье.

На поперечном срезе под микроскопом должно быть видно, что корень стальника вторичного строения непучкового типа, в центре диархный мелкоклеточный луч первичной ксилемы. Корень имеет отчетливо лучистую структуру центрального цилиндра. Проводящие элементы флоэмы и ксилемы расположены узкими радиальными тяжами и разделены широкими многорядными лучами паренхимы.

С поверхности корня расположен узкий пробковый слой, сложенный из смятых клеток с тонкими клеточными стенками, окрашенными в светло-коричневый цвет. При рассмотрении с поверхности клетки пробки многоугольной формы с заметными остатками протопласта.

В коровой части и во флоэме корня на поперечном сечении видны крупные клетки основной паренхимы. Они овальной формы, угловатые, реже смятые, с аморфным протопластом, содержащим мелкие крахмальные зерна (рис. 6). В коровой части корня расположены одиночно или небольшими группами многоугольные лубяные волокна, клеточные стенки которых не одревесневают. Мелкоклеточные проводящие элементы флоэмы расположены ближе к камбию. Зона камбия широкая, четко выраженная.

Ксилема состоит из крупных сосудов и более узких в просвете трахеид, клеток древесной паренхимы и мощных групп волокон либриформа с одревесневшими оболочками. В просвете крупных сосудов изредка встречаются засохшие пигментированные выделения темно-коричневого цвета. К либриформу со стороны сердцевинных лучей паренхимы прилегают клетки с призматическими кристаллами оксалата кальция.

В коровой части корня клетки радиальных лучей паренхимы тангентально вытянуты, в древесинной — вытянутые радиально, с одревесневшими пористыми оболочками. В паренхиме лучей часто встречаются одиночные призматические кристаллы оксалата кальция или их группы, а также содержатся мелкие, простые и 2 — 4-сложные крахмальные зерна.

Измельченное сырье и порошок. При рассмотрении «давленых препаратов» должны быть видны многочисленные фрагменты: ксилемы с волокнами либриформа и кристаллоносной обкладкой; пробки с тонкостенными угловатыми клетками светло-коричневого цвета; паренхимы сердцевинных лучей с мелкими крахмальными зернами.

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография

На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем силикагеля наносят 10 мкл (0,01 мл) извлечения (см. раздел «Количественное определение» и рядом 20 мкл (0,02 мл) раствора стандартного образца (СО) ононина (см. раздел «Количественное определение», приготовление раствора А СО ононина). Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в хроматографическую камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 1 ч смесью растворителей: хлороформ-спирт 96% (2:1) и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 — 90% длины пластинки от линии старта, пластинку вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

На хроматограмме раствора СО ононина должна обнаруживаться зона адсорбции фиолетового цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции фиолетового цвета на уровне зоны адсорбции раствора СО ононина; допускается обнаружение дополнительных слабовыраженных зон адсорбции ниже и выше указанной зоны адсорбции.

Влажность. Цельное сырье — не более 14%; измельченное сырье, порошок — не более 14%.

Зола общая. Цельное сырье — не более 10%; измельченное сырье, порошок — не более 10%.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок — не более 4%.

Измельченность сырья. Цельное сырье: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3 мм, — не более 5%. Измельченное сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, — не более 5%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, — не более 5%. Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, — не более 5%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм — не более 5%.

Посторонние примеси

Другие части растения (листья, стебли, в том числе отделенные при анализе). Цельное сырье — не более 2%.

Корней, почерневших в изломе. Цельное сырье — не более 1%.

Органическая примесь. Цельное сырье, измельченное сырье — не более 1%.

Минеральная примесь. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок — не более 1%.

Тяжелые металлы и мышьяк. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок: сумма изофлавоноидов в пересчете на ононин — не менее 1,5%.

Приготовление растворов.

Раствор СО ононина. Около 0,01 г (точная навеска) СО ононина растворяют в спирте 96% в мерной колбе вместимостью 25 мл, доводят объем раствора спиртом 96% до метки и перемешивают (раствор А СО ононина).

1 мл раствора А СО ононина переносят в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора спиртом 96% до метки и перемешивают (раствор Б СО ононина). Срок годности не более 3 месяцев при хранении в прохладном, защищенном от света месте.

Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. Около 1 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в коническую плоскодонную колбу вместимостью 100 мл с притертой пробкой, прибавляют 50 мл спирта 70%, закрывают колбу пробкой и взвешивают (с погрешностью +/- 0,01 г). Затем колбу соединяют с обратным холодильником и нагревают на кипящей водяной бане (умеренное кипение) в течение 90 мин. Затем охлаждают в течение 30 мин, закрывают той же пробкой, снова взвешивают и восполняют недостающий экстрагент до первоначальной массы. Извлечение фильтруют через бумажный фильтр. 1 мл фильтрата помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора спиртом 96% до метки и перемешивают (испытуемый раствор).

Оптическую плотность испытуемого раствора измеряют на спектрофотометре при длине волны 260 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют спирт 96%.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора Б СО ононина в аналогичных условиях.

Содержание суммы изофлавоноидов в пересчете на ононин и абсолютно сухое сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{A \cdot a_{0} \cdot 1 \cdot 50 \cdot 50 \cdot P \cdot 100 \cdot 100}{A_{0} \cdot a \cdot 25 \cdot 25 \cdot 1 \cdot (100 - W) \cdot 100} = \frac{A \cdot a_{0} \cdot 400 \cdot P}{A_{0} \cdot a \cdot (100 - W)} ,

где A — оптическая плотность испытуемого раствора;

A0 — оптическая плотность поглощения раствора Б СО ононина;

a — навеска сырья, г;

a0 — навеска СО ононина г;

P — содержание основного вещества в СО ононина, %;

W — влажность сырья, %.

Допускается вычислять содержание суммы изофлавоноидов в пересчете на ононин и абсолютно сухое сырье с использованием удельного показателя поглощения ононина по формуле:

где A — оптическая плотность испытуемого раствора;

A_{1\text{см}}^{1\%} — удельный показатель поглощения ононина при длине волны 260 нм, равный 763;

a — навеска сырья, г;

W — влажность сырья, %.

Упаковка, маркировка и транспортирование. В соответствии с требованиями ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Хранение. В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».