ФС.2.5.0084.18. Фармакопейная статья. Мелиссы лекарственной трава

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том IV»)

ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

flowchart LR
  n0["ФС.2.5.0084.18"]:::rst
  click n0 "https://bukva.ai/docs/fs-2-5-0084-18" "ФС.2.5.0084.18. Фармакопейная статья. Мелиссы лекарственной трава (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 N 749)"
  n1["ФС.2.5.0084"]:::doc
  click n1 "https://bukva.ai/docs/fs-2-5-0084" "ФС.2.5.0084. Фармакопейная статья. Мелиссы лекарственной трава (утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 13.03.2024 N 120)"
  n0 --> n1
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

Собранная в фазу бутонизации, начала цветения и цветения высушенная трава многолетнего культивируемого травянистого растения мелиссы лекарственной — Melissa officinalis L., сем. яснотковых — Lamiaceae.

Внешние признаки. Цельное сырье. Верхние части стеблей длиной до 35 см с супротивными черешковыми листьями, бутонами или цветками, отдельные листья, цветки, куски стеблей. Листья скрученные, тонкие, яйцевидные с клиновидным основанием, с городчатым краем и перистым жилкованием, слегка опушенные. Стебли четырехгранные, продольно-желобчатые, слабоопушенные, с рыхлой серовато-белой сердцевиной, толщиной до 3 мм. Цветки и бутоны в ложных мутовках в пазухах верхних листьев. Прицветники эллиптические, заостренные или продолговатые, чашечка двугубая, опушенная, с плоской верхней губой. Венчик 13 — 15 мм длины, в полтора-два раза длиннее чашечки, двугубый, с плоской двураздельной верхней губой и трехраздельной нижней. Тычинок 4, две из которых короче других.

Листья зеленые, серовато-зеленые, иногда зеленовато-коричневые, стебли от светло-зеленого до зеленовато-серого цвета, на изломе серовато-белые. Венчик желтовато-белый.

Запах слабый, характерный, вкус водного извлечения слегка горьковатый.

Измельченное сырье. Смесь кусочков стеблей, листьев, цветков и бутонов различной формы, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

При рассмотрении под лупой (10x) или стереомикроскопом (16x) должны быть видны кусочки листьев зеленого, серовато-зеленого или зеленовато-коричневого цвета; черешков, стеблей серовато-зеленого или светло-зеленого цвета, редко серовато-зеленой или коричневатой чашечки и желтовато-белого венчика; кусочки стеблей часто расщеплены в продольном сечении и имеют желтовато-белую губчатую сердцевину. На фрагментах листовых пластинок заметны многочисленные темно-коричневые блестящие округлые образования (эфирномасличные железки), беловатые волоски, особенно многочисленные на кусочках мелких молодых листьев.

Цвет от зеленого до зеленовато-коричневого с серовато-зелеными, светло-зелеными, светло-коричневыми, коричневыми, коричневато-белыми, желтовато-белыми вкраплениями.

Запах слабый, характерный, вкус водного извлечения слегка горьковатый.

Порошок. Кусочки стеблей, листьев, цветков и бутонов различной формы, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 2 мм.

Цвет от зеленого до зеленовато-коричневого с серовато-зелеными, светло-зелеными, светло-коричневыми, коричневыми, коричневато-белыми, желтовато-белыми вкраплениями.

Запах слабый, характерный, вкус водного извлечения слегка горьковатый.

Микроскопические признаки. Цельное сырье, измельченное сырье. При рассмотрении листа с поверхности должны быть видны клетки верхнего эпидермиса, стенки клеток извилистые. Клетки нижнего эпидермиса мельче с более извилистыми стенками. Устьичный комплекс на обеих сторонах листа диацитного типа.

Клетки эпидермиса по жилке вытянутой формы, угловатые, с заметно четковидно-утолщенной клеточной стенкой. На нижней стороне листовой пластинки в небольших углублениях находятся эфирномасличные железки. Крупная головка железки состоит из 8-ми радиально расположенных выделительных клеток и одноклеточной короткой ножки. Изредка встречаются железистые волоски на короткой ножке, состоящей из одной реже трех клеток. Головка волоска овальная, как правило, состоит из двух клеток.

По поверхности жилок и по краю листа встречаются длинные 3-, 6-клеточные простые волоски. Клетки волосков толстенные с бородавчатой кутикулой.

Поверхность листа покрыта мелкими одноклеточными сосочковидными волосками, конусовидными по форме, с бородавчатой кутикулой.

По всей поверхности листовой пластинки, вдоль жилок, локализованы длинные железистые волоски. Ножка волоска многоклеточная (2 — 4 клетки) с гладкой кутикулой. Головка одноклеточная, булавовидной формы, с окрашенным в светло-коричневый цвет протопластом.

При рассмотрении препаратов венчика цветка должны быть видны клетки эпидермиса венчика с сильно извилистыми стенками. Для фрагментов венчика характерны также волоски шлангообразной или пальцевидной формы, 1 — 3-клеточные, покрытые шероховатой кутикулой, иногда со спавшимися клетками. Железистые волоски на одноклеточной ножке с шаровидной одноклеточной головкой, реже встречаются волоски с шаровидной головкой на длинной одно — трехклеточной ножке.

При рассмотрении «давленого» препарата стебля должны быть видны прямоугольно вытянутые клетки эпидермиса с прямыми стенками и устьица диацитного типа. На поверхности встречаются мелкие одноклеточные сосочковидные и конусовидные волоски с бородавчатой кутикулой, а также головчатые волоски с одноклеточной шаровидной головкой на короткой одноклеточной ножке; толстостенные механические волокна; проводящие пуски представлены спиральными сосудами.

Порошок. При рассмотрении порошка должны быть видны фрагменты эпидермиса листьев, клетки которого имеют извилистые стенки и устьица диацитного типа; эфирномасличные железки округлой формы с 8 (реже 6) радиально расположенными выделительными клетками, многочисленные волоски 2-х типов: простые — от мелких одноклеточных сосочковидных и конусовидных, до очень крупных многоклеточных, как бородавчатых, так и гладкостенных (у крупных волосков часто одна или несколько спавшихся клеток) и головчатых — в большом количестве мелкие с одноклеточной шаровидной головкой на длинной одно — трехклеточной ножке; такие же волоски встречаются на фрагментах чашечки и венчика. Клетки эпидермиса венчика с сильно извилистыми стенками. Для венчика характерны также волоски шлангообразной или пальцеобразной формы, 1 — 3 клеточные, покрытые штриховатой кутикулой, иногда со спавшимися клетками. При рассмотрении «давленых» микропрепаратов должны быть видны многочисленные фрагменты листовых пластинок зеленого цвета, жилок листа, длинных кроющих и головчатых волосков.

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография

Приготовление растворов.

Раствор стандартного образца (СО) хлорогеновой кислоты. 0,02 г СО хлорогеновой кислоты растворяют в 25 мл спирта 70%. Срок годности раствора 3 месяца при хранении в хорошо укупоренной упаковке, в прохладном защищенном от света месте.

Раствор стандартного образца (СО) лютеолин-7-О-гликозида. 0,1 г СО лютеолин-7-О-гликозида растворяют при нагревании в 100 мл спирта 70%. Срок годности раствора 3 месяца.

На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем силикагеля наносят 20 мкл (0,02 мл) испытуемого раствора (см. раздел «Количественное определение» приготовление раствора А), рядом — 10 мкл (0,01 мл) раствора СО лютеолин-7-О-гликозида и 10 мкл раствора СО хлорогеновой кислоты. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в хроматографическую камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 1 ч смесью растворителей: хлороформ-спирт 96%-вода (26:16:3) и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80 — 90% от линии старта пластинки, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и сразу просматривают в УФ-свете при длине волны 365 нм.

На хроматограмме раствора СО лютеолин-7-О-гликозида должна обнаруживаться зона адсорбции с флуоресценцией желтовато-коричневого цвета, на хроматограмме раствора СО хлорогеновой кислоты — зона адсорбции с флуоресценцией сине-голубого цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться доминирующая зона адсорбции с флуоресценцией сине-голубого цвета примерно на уровне зоны адсорбции СО лютеолин-7-О-гликозида, а также зона адсорбции с флуоресценцией желтовато-коричневого цвета на уровне зоны адсорбции СО лютеолин-7-О-гликозида и зона адсорбции с флуоресценцией сине-голубого цвета на уровне зоны адсорбции СО хлорогеновой кислоты; допускается обнаружение других зон адсорбции (фенольные соединения).

Затем пластинку обрабатывают раствором диазореактива и просматривают при дневном свете.

На хроматограмме раствора СО лютеолин-7-О-гликозида должна обнаруживаться зона адсорбции коричневого цвета, на хроматограмме раствора СО хлорогеновой кислоты — также зона адсорбции коричневого цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться доминирующая зона адсорбции коричневого цвета примерно на уровне зоны адсорбции СО лютеолин-7-О-гликозида, а также зона желтовато-коричневого цвета на уровне зоны адсорбции СО лютеолин-7-О-гликозида и зона адсорбции коричневого цвета на уровне зоны адсорбции СО хлорогеновой кислоты; допускается обнаружение других зон адсорбции (фенольные соединения).

Влажность. Цельное сырье — не более 12%; измельченное сырье, порошок — не более 12%.

Зола общая. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок — не более 12%.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок — не более 3%.

Измельченность сырья. Цельное сырье: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, — не более 5%. Измельченное сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, — не более 17%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, — не более 5%. Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, — не более 10%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм — не более 10%.

Посторонние примеси

Стеблей (в том числе отделенных при анализе). Цельное сырье, измельченное сырье — не более 50%.

Органическая примесь. Цельное сырье, измельченное сырье — не более 2%.

Минеральная примесь. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок — не более 1%.

Тяжелые металлы и мышьяк. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок: сумма фенольных соединений в пересчете на розмариновую кислоту — не менее 2,0%.

Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. Около 1,0 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу с притертой пробкой вместимостью 100 мл, прибавляют 40 мл спирта 70% и взвешивают с погрешностью +/- 0,01 мл. Колбу с содержимым присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 1 ч. Затем содержимое колбы охлаждают до комнатной температуры и взвешивают, при необходимости доводят спиртом 70% до первоначальной массы. Содержимое колбы фильтруют через бумажный фильтр с красной полосой.

1,0 мл фильтрата помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят объем раствора спиртом 96% до метки и перемешивают (раствор А).

5 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл и доводят объем раствора спиртом 96% до метки и перемешивают (раствор Б — испытуемый раствор).

Оптическую плотность испытуемого раствора Б измеряют на спектрофотометре в кювете с толщиной слоя 10 мм при длине волны 326 нм относительно спирта 96%.

Содержание суммы фенольных соединений в пересчете на розмариновую кислоту и абсолютно сухое сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

X = \frac{A \cdot 40 \cdot 25 \cdot 25 \cdot 100}{A_{1\text{см}}^{1\%} \cdot a \cdot 1 \cdot 5 \cdot (100 - W)} = \frac{A \cdot 500000}{A_{1\text{см}}^{1\%} \cdot a \cdot (100 - W)} ,

где A — оптическая плотность раствора Б испытуемого раствора;

A_{1\text{см}}^{1\%} — удельный показатель поглощения розмариновой кислоты при длине волны 326 нм, равный 500;

a — навеска сырья, г;

W — влажность сырья, %.

Упаковка, маркировка и транспортирование. В соответствии с требованиями ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Хранение. В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».