ФС.2.5.0078.18. Фармакопейная статья. Кровохлебки лекарственной корневища и корни

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 31.10.2018 № 749)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание. Том IV»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Кровохлебки лекарственной корневища и корни	ФС.2.5.0078.18
Sanguisorbae officinalis rhizomata et radices	Взамен ФС 42-1082-76

Собранные осенью, очищенные от остатков надземных частей, отмытые от земли и высушенные корневища и корни дикорастущего, многолетнего травянистого растения кровохлебки лекарственной — Sanguisorba officinalis L. сем. розоцветных — Rosaceae.

ПОДЛИННОСТЬ

Внешние признаки. Цельное сырье. Цельные или разрезанные на куски одревесневшие корневища с отходящими от них немногочисленными корнями и отдельные корни. Длина корневищ и корней до 20 см, толщина корневищ 0,5 — 2,5 см, корней 0,3 — 1,5 см. Поверхность корневищ и корней гладкая или слегка продольно-морщинистая. Излом у корневищ неровный, у корней более ровный, под лупой у корневищ заметно лучистое строение. Цвет корневищ и корней снаружи темно-коричневый, почти черный, на изломе желтоватый или коричневато-желтый. Запах отсутствует. Вкус водного извлечения вяжущий.

Измельченное сырье. При рассмотрении измельченного сырья под лупой (10x) или стереомикроскопом (16x) видны кусочки корневищ и корней различной формы, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 5 мм. Цвет желтоватый, коричневато-желтый, темно-коричневый и почти черный. Запах отсутствует, вкус водного извлечения вяжущий.

Микроскопические признаки. Цельное сырье. При рассмотрении поперечного среза корня должно быть видно, что корень имеет беспучковое строение, темно-коричневая пробка состоит из мелких клеток. Кора широкая. Под пробкой располагаются 2 — 3 слоя крупных тангентально вытянутых клеток паренхимы с утолщенными оболочками. Внутренняя кора рыхлая, в периферической части с межклетниками, в ней иногда встречаются лубяные волокна со слабоутолщенной, неодревесневшей оболочкой, расположенные одиночно или группами по 2 — 3. Камбиальная зона хорошо выражена. Древесина рассеянно-сосудистая, представлена сосудами, волокнами либриформа и паренхимой. Сердцевинные лучи многочисленные, узкие, однорядные, на границе с наружной корой часто изогнуты. Крахмальные зерна мелкие, овальные или округлые, простые, реже сложные 5 — 7 мкм в диаметре. В паренхимных клетках часто встречаются крупные друзы. Корневище отличается от корня наличием в центре сердцевины.

Рисунок — Кровохлебки лекарственной корневища и корни

1 — вторичное строение корня кровохлебки: общий вид (800x); 2 — корень кровохлебки: камбиальное кольцо; 3 — корень кровохлебки: сосуды ксилемы, вторичная флоэма, камбиальное кольцо (200x); 4 — корень кровохлебки: крахмальные зерна (800x); 5 — корень кровохлебки: друзы оксалата кальция (800x); 6 — корневище кровохлебки: 4 — 5 рядов мелких клеток пробки; клетки паренхимы первичной коры; межклетники; между проводящими элементами мощные сердцевидные лучи (200x); 7 — корневище кровохлебки: перидерма, кора, сердцевидные лучи; центральный цилиндр, сердцевина (800x); 8 — корневище кровохлебки: группы сосудов ксилемы; механические клетки в ксилеме (200x); 9 — корневище кровохлебки: крупные паренхимные клетки сердцевины; крахмальные зерна; друзы оксалата кальция (200x)

На поперечном срезе корневища кровохлебки видно, что оно имеет пучковое строение, покровная ткань — пробка, состоящая из прямостенных таблитчато расположенных, тонкостенных клеток темно-коричневого цвета. Под пробкой залегает коровая тонкостенная паренхима, клетки которой слегка округлые. Корневище имеет пучковое строение. Эндодерма выражена. Флоэмные элементы представлены мелкими тонкостенными клетками. Линия камбия четко выражена в пучках и также выражен межпучковый камбий. Сосуды в поперечном сечении округлые или радиально-овальные, в радиальных группах. Преобладают в основном спиральные, пористые, сетчатые или лестничные сосуды. Друзы оксалата кальция представлены в первичной коре и сердцевине. Сердцевина занимает большой объем и состоит из крупноклеточной, тонкостенной паренхимы. Включения в виде крахмальных зерен имеются в коровой паренхиме и сердцевине. Крахмальные зерна мелкие.

Измельченное сырье. При рассмотрении «давленого» микропрепарата должны быть видны фрагменты темно-коричневой пробки; фрагменты паренхимы с крупными клетками, содержащими друзы оксалата кальция; фрагменты паренхимных клеток с крахмальными зернами; фрагменты сетчатых и спиральных сосудов; редкие лубяные волокна, их обрывки; отдельные зерна крахмала и друзы оксалата кальция.

Рисунок 2 — Кровохлебки корневища и корни

1 — «давленый» микропрепарат: а — фрагменты сосудов (200x), б — клетки паренхимы (200x), в — друзы оксалата кальция (200x); 2 — «давленый» микропрепарат: в — друзы оксалата кальция (200x), г — фрагмент пробки (200x)

Определение основных групп биологически активных веществ

Приготовление растворов

Раствор стандартного образца (СО) галловой кислоты. Около 0,05 г СО галловой кислоты растворяют в 50 мл спирта 96% и перемешивают. Срок годности раствора 1 мес при хранении в защищенном от света месте.

Тонкослойная хроматография

Около 0,5 г сырья, измельченного до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, помещают в круглодонную колбу со шлифом вместимостью 100 мл, прибавляют 5 мл спирта 50%, нагревают на кипящей водяной бане с обратным холодильником в течение 10 мин. Колбу с содержимым охлаждают до комнатной температуры и полученное извлечение фильтруют через бумажный фильтр в колбу вместимостью 25 мл. Экстракцию повторяют еще раз. Извлечение фильтруют в ту же колбу объемом 25 мл (испытуемый раствор).

На линию старта высокоэффективной хроматографической пластинки со слоем силикагеля наносят в виде полос длиной 10 мм и шириной не более 2 мм 5 мкл (0,005 мл) испытуемого раствора, рядом — 2 мкл (0,002 мл) раствора СО галловой кислоты. Пластинку с нанесенными пробами сушат при комнатной температуре в течение 5 мин, затем помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение не менее 40 мин смесью растворителей этилацетат — толуол — кислота муравьиная безводная — вода (30:10:5:2) и хроматографируют восходящим способом.

Когда фронт растворителей пройдет не менее 8 см от линии старта, пластинку вынимают из камеры, высушивают до удаления следов растворителей под тягой при комнатной температуре, хроматограмму опрыскивают раствором железа (III) хлорида спиртовым раствором 1% и просматривают при дневном свете.

На хроматограмме СО галловой кислоты должна обнаруживаться зона темно-синего цвета.

На хроматограмме испытуемого раствора должно обнаруживаться не менее трех зон синего цвета ниже зоны адсорбции галловой кислоты и зона синевато-коричневого цвета на уровне зоны галловой кислоты; допускается обнаружение других зон адсорбции.

Качественная реакция

Около 0,1 г сырья, измельченного до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, кипятят 2 — 3 мин с 10 мл воды. Охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через бумажный фильтр. К 2 — 3 мл фильтрата прибавляют 1 каплю железа (III) аммония сульфата раствора 10% или 2 — 3 капли железа (III) хлорида раствора 3%; должно наблюдаться интенсивное сине-черное окрашивание (дубильные вещества).

ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Цельное сырье, измельченное сырье — не более 13%.

Зола общая. Цельное сырье, измельченное сырье — не более 12%.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Цельное сырье, измельченное сырье — не более 5%.

Измельченность сырья. Цельное сырье: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм — не более 5%. Измельченное сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 5 мм — не более 5%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм — не более 5%.

Посторонние примеси

Потемневшие в изломе корневища и корни. Цельное сырье — не более 10%.

Других частей растения. Цельное сырье, измельченное сырье — не более 3%.

Органическая примесь. Цельное сырье, измельченное сырье — не более 1%.

Минеральная примесь. Цельное сырье, измельченное сырье — не более 1%.

Тяжелые металлы и мышьяк. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Цельное сырье, измельченное сырье: содержание суммы дубильных веществ в пересчете на танин — не менее 14%.

Определение дубильных веществ в пересчете на пирогаллол проводят в соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания дубильных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах», метод 1.

Упаковка, маркировка и транспортирование. В соответствии с требованиями ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Хранение. В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

---