ФС.2.1.0231.22. Фармакопейная статья. Залеплон
(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 11.04.2022 № 246)
(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание»)
Примечание
В соответствии с Приказом Минздрава России от 11.04.2022 № 246 данный документ введен в действие с 01.04.2022.
МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ
| Залеплон | ФС.2.1.0231.22 |
|---|---|
| Залеплон | |
| Zaleplonum | Вводится впервые |
N-[3-(3-Цианопиразоло [1,5 - \alpha] пиримидин-7-ил)фенил]-N-этилацетамид
 | |
| C17H15N5O | М.м. 305,33 |
Содержит не менее 98,0% и не более 102,0% залеплона C17H15N5O в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.
Описание. Белый или почти белый порошок.
Растворимость. Умеренно растворим в спирте 96%, мало растворим в пропиленгликоле, практически нерастворим в воде.
1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца залеплона.
2. ВЭЖХ. Время удерживания основного пика на хроматограмме испытуемого раствора должно соответствовать времени удерживания пика залеплона на хроматограмме раствора стандартного образца залеплона (раздел «Количественное определение»).
Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Подвижная фаза А (ПФА). Растворяют 1,4 г калия дигидрофосфата, в 900 мл воды и доводят значение pH раствора фосфорной кислотой концентрированной до 3,00 +/- 0,05. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.
Подвижная фаза Б (ПФБ). Ацетонитрил.
Растворитель. Ацетонитрил-вода 250:750.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают около 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.
Раствор стандартного образца залеплона. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают около 25 мг (точная навеска) стандартного образца залеплона, растворяют в растворителе и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.
Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг стандартного образца примеси 2, 5 мг стандартного образца примеси 3 и 5 мг стандартного образца примеси 5 растворяют в растворителе и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 50 мг стандартного образца залеплона и доводят объем раствора растворителем до метки.
Примесь 1: 3-аминопиразол-4-карбонитрил, CAS 16617-46-2.
Примесь 2: (E)-N-{3-[3-(диметиламино)акрилоил]фенил}-N-этилацетамид, CAS 96605-66-2.
Примесь 3: 7-[3-(N-этилацетамидо)фенил]пиразоло [1,5 - \alpha] пиримидин-3-карбоксамид, CAS 940951-54-2.
Примесь 4: N-[3-(3-цианопиразоло [1,5 - \alpha] пиримидин-7-ил)фенил]ацетамид, CAS 115931-01-6.
Примесь 5: N-[3-(3-цианопиразоло [1,5 - \alpha] пиримидин-5-ил)фенил]-N-этилацетамид, CAS 478081-98-0.
Примесь 6: (E)-N-(3-[3-циано-6-{3-[3-(N-этилацетамидо)фенил]оксопроп-1-ен-1-ил}пиразоло [1,5 - \alpha] пиримидин-7-ил)фенил]-N-этилацетамид, CAS 940951-61-1.
| Колонка | 150 x 4,6 мм, силикагель октилсилильный для хроматографии, 5 мкм; |
|---|---|
| Температура колонки | 25 °C; |
| Скорость потока | 1,5 мл/мин; |
| Детектор | спектрофотометрический, 225 нм; |
| Объем пробы | 10 мкл. |
| Время, мин | ПФА, % | ПФБ, % |
|---|---|---|
| 0 — 15 | 80 \rightarrow 60 | 20 \rightarrow 40 |
| 15 — 25 | 60 \rightarrow 45 | 40 \rightarrow 55 |
| 25 — 26 | 45 \rightarrow 80 | 55 \rightarrow 20 |
| 26 — 35 | 80 | 20 |
Хроматографируют раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор стандартного образца залеплона и испытуемый раствор.
Относительное время удерживания соединений. Залеплон — 1; примесь 1 — около 0,15; примесь 2 — около 0,54; примесь 3 — около 0,57; примесь 4 — около 0,70; примесь 5 — около 1,11; примесь 6 — около 1,59.
Пригодность хроматографической системы
На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы:
- разрешение (Rs) между пиками примеси 2 и примеси 3 должно быть не менее 1,2;
- разрешение (Rs) между пиками залеплона и примеси 5 должно быть не менее 2,0.
На хроматограмме раствора стандартного образца залеплона относительное стандартное отклонение площади пика залеплона должно быть не более 5,0% (6 введений).
Поправочные коэффициенты. Для расчета содержания, площади пиков следующих примесей умножаются на соответствующие поправочные коэффициенты: примесь 1 — 2,0; примесь 2 — 2,78; примесь 3 — 1,25; примесь 4 — 0,91; примесь 5 — 1,54; примесь 6 — 1,96.
Содержание любой примеси в субстанции в процентах (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 50 \cdot 100 \cdot 10}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 50} = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 1000}{S_{0} \cdot a_{1}} ,
где S1 — площадь пика любой примеси на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 — площадь пика залеплона на хроматограмме раствора стандартного образца залеплона;
a0 — навеска стандартного образца залеплона, мг;
P — содержание залеплона в стандартном образце залеплона, %.
Допустимое содержание примесей:
- примеси 1, 2 и 5 — не более 0,15% каждая;
- примеси 3, 4 и 6 — не более 0,10% каждая;
- любая другая примесь — не более 0,10%;
- сумма примесей — не более 0,5%.
Вода. Не более 2,0% (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют около 1 г (точная навеска) субстанции.
Сульфатная зола. Не более 0,2% (ОФС «Сульфатная зола»). Для определения используют около 1 г (точная навеска) субстанции.
Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».
Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».
Количественное определение. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).
Буферный раствор. Растворяют 0,3 г аммония формиата в 900 мл воды и доводят pH раствора муравьиной кислотой до 4,00 +/- 0,05. Полученный раствор переносят в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.
Подвижная фаза (ПФ). Ацетонитрил-буферный раствор 280:720.
Растворитель. Ацетонитрил-вода 1:1.
Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают около 25 мг (точная навеска) субстанции, растворяют в растворителе и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.
Раствор стандартного образца залеплона. В мерную колбу вместимостью 50 мл помещают около 25 мг (точная навеска) стандартного образца залеплона, растворяют в растворителе и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 1,0 мл полученного раствора и доводят объем раствора растворителем до метки.
Раствор для проверки пригодности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 5 мг стандартного образца примеси 2, 5 мг стандартного образца примеси 5, растворяют в растворителе и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 1,0 мл полученного раствора, прибавляют 50 мг стандартного образца залеплона и доводят объем раствора растворителем до метки.
Хроматографируют раствор для проверки пригодности хроматографической системы, раствор стандартного образца залеплона и испытуемый раствор.
Относительное время удерживания соединений. Залеплон — 1; примесь 5 — около 1,2.
Пригодность хроматографической системы
На хроматограмме раствора для проверки пригодности хроматографической системы:
фактор асимметрии пика (As) залеплона должен быть не более 1,5;
Содержание залеплона C17H15N5O в субстанции в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество в процентах (X) вычисляют по формуле:
X = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot 50 \cdot 10 \cdot P \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot 50 \cdot 10 \cdot (100 - W)} = \frac{S_{1} \cdot a_{0} \cdot P \cdot 100}{S_{0} \cdot a_{1} \cdot (100 - W)} ,
где S1 — площадь пика залеплона на хроматограмме испытуемого раствора;
S0 — площадь пика залеплона на хроматограмме раствора стандартного образца залеплона;
a0 — навеска стандартного образца залеплона, мг;
P — содержание залеплона в стандартном образце залеплона, %;
W — суммарное содержание воды и остаточных органических растворителей в субстанции, %.
Хранение. В защищенном от света месте.