ФС.2.1.0224.22. Фармакопейная статья. Гидроксиникотиноилглутамат кальция

(утв. и введена в действие Приказом Минздрава России от 11.04.2022 № 246)

(«Государственная фармакопея Российской Федерации. XIV издание»)

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Гидроксиникотиноилглутамат кальция	ФС.2.1.0224.22
Гидроксиникотиноилглутамат кальция
Calcii hydroxynicotinoylglutamas	Вводится впервые

(2S)-2-[(5-Гидроксипиридин-3-карбонил)амино]пентандиоат кальция гидроксид

C11H12CaN2O7	М.м. 324,30

Содержит не менее 98,0% и не более 101,0% гидроксиникотиноилглутамата кальция C11H12CaN2O7 в пересчете на безводное и свободное от остаточных органических растворителей вещество.

Описание. Белый или белый с желтоватым оттенком кристаллический порошок.

Растворимость. Легко растворим в хлористоводородной кислоте разведенной 8,3%, умеренно растворим в воде, практически нерастворим в спирте 96%.

Подлинность

1. ИК-спектрометрия (ОФС «Спектрометрия в инфракрасной области»). Инфракрасный спектр субстанции, снятый в диске с калия бромидом, в области от 4000 до 400 см-1 по положению полос поглощения должен соответствовать спектру стандартного образца гидроксиникотиноилглутамата кальция.

2. Качественная реакция. В 10 мл воды растворяют 0,1 г субстанции. Полученный раствор должен давать характерную реакцию A на кальций (ОФС «Общие реакции на подлинность»).

Прозрачность раствора. Раствор 0,25 г субстанции в 50 мл воды должен быть прозрачным (ОФС «Прозрачность и степень мутности жидкостей»).

Цветность раствора. Раствор, полученный в испытании «Прозрачность раствора», должен выдерживать сравнение с эталоном Y6 (ОФС «Степень окраски жидкостей», метод 2).

pH. От 5,5 до 7,5 (0,5% раствор, ОФС «Ионометрия», метод 3).

Родственные примеси. Определение проводят методом ВЭЖХ (ОФС «Высокоэффективная жидкостная хроматография»).

Буферный раствор. Растворяют 2,8 г калия дигидрофосфата и 1,6 г тетрабутиламмония гидросульфата в 900 мл воды, прибавляют 2 мл триэтиламина и доводят pH раствора фосфорной кислотой до 3,50 +/- 0,05. Переносят полученный раствор в мерную колбу вместимостью 1000 мл и доводят объем раствора водой до метки.

Подвижная фаза А (ПФА). Буферный раствор.

Подвижная фаза Б (ПФБ). Метанол.

Испытуемый раствор. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в 1 мл хлористоводородной кислоты раствора 0,1 М и доводят объем раствора тем же растворителем до метки.

Раствор сравнения. В мерную колбу вместимостью 100 мл помещают 0,5 мл испытуемого раствора и доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

Раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 50 мг субстанции, растворяют в 5 мл водорода пероксида раствора 3% и доводят объем раствора тем же растворителем до метки. Полученный раствор кипятят на водяной бане в течение 15 мин.

Раствор для проверки чувствительности хроматографической системы. В мерную колбу вместимостью 10 мл помещают 0,5 мл раствора сравнения и доводят объем раствора хлористоводородной кислоты раствором 0,1 М до метки.

Хроматографические условия

Колонка	150 x 4,6 мм, силикагель октадецилсилильный, эндкепированный, для хроматографии, 5 мкм;
Температура колонки	40 °C;
Скорость потока	1,4 мл/мин;
Детектор	спектрофотометрический, 240 нм;
Объем пробы	20 мкл.

Режим хроматографирования

Время, мин	ПФА, %	ПФБ, %
0 — 10	95	5
10 — 20	95 \rightarrow 70	5 \rightarrow 30
20 — 25	70	30
25 — 26	70 \rightarrow 95	30 \rightarrow 5
26 — 30	95	5

Хроматографируют раствор для проверки чувствительности хроматографической системы, раствор для проверки разделительной способности хроматографической системы, раствор сравнения и испытуемый раствор.

Пригодность хроматографической системы

На хроматограмме раствора для проверки разделительной способности хроматографической системы разрешение (RS) между пиками гидроксиникотиноилглутамата и примеси с относительным временем удерживания около 0,9 должно быть не менее 2.

На хроматограмме раствора для проверки чувствительности хроматографической системы отношение сигнал/шум (S/N) для пика гидроксиникотиноилглутамата должно быть не менее 10.

На хроматограмме раствора сравнения:

• фактор асимметрии пика (AS) гидроксиникотиноилглутамата должен быть не менее 0,8 и не более 1,5;
• относительное стандартное отклонение площади пика гидроксиникотиноилглутамата должно быть не более 2,0% (6 введений);
• эффективность хроматографической колонки (N), рассчитанная по пику гидроксиникотиноилглутамата, должна составлять не менее 3000 теоретических тарелок.

Допустимое содержание примесей. На хроматограмме испытуемого раствора:

• площадь пика любой примеси не должна превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 0,5%);
• сумма площадей пиков всех примесей не должна более чем в 2 раза превышать площадь основного пика на хроматограмме раствора сравнения (не более 1,0%).

Не учитывают пики, площадь которых менее 0,1 площади основного пика на хроматограмме раствора сравнения (менее 0,05%).

Вода. Не более 8,0% (ОФС «Определение воды», метод 1). Для определения используют около 0,2 г (точная навеска) субстанции.

Сульфаты. Не более 0,1% (ОФС «Сульфаты», метод 1). В 50 мл воды растворяют 0,5 г субстанции. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Хлориды. Не более 0,02% (ОФС «Хлориды»). В 50 мл воды растворяют 0,5 г субстанции. Для определения используют 10 мл полученного раствора.

Тяжелые металлы. Не более 0,001%. Определение проводят в соответствии с ОФС «Тяжелые металлы», метод 2, в зольном остатке, полученном после сжигания 1 г субстанции, с использованием эталонного раствора 1.

Остаточные органические растворители. В соответствии с ОФС «Остаточные органические растворители».

<*> Бактериальные эндотоксины. Не более 14 ЕЭ на 1 мг гидроксиникотиноилглутамата кальция (ОФС «Бактериальные эндотоксины»). Для проведения испытания готовят исходный раствор субстанции в воде для ЛАЛ-теста с концентрацией 5 мг/мл.

---

<*> Испытание проводят для субстанции, предназначенной для производства лекарственных препаратов для парентерального применения.

Микробиологическая чистота. В соответствии с ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Определение проводят методом титриметрии.

Около 0,15 г (точная навеска) субстанции растворяют в 250 мл воды, прибавляют 10 мл аммония хлорида буферного раствора pH 9,5 и титруют 0,05 М раствором натрия эдетата до сине-фиолетового окрашивания (индикатор — 50 мг хромового темно-синего индикаторной смеси).

1 мл 0,05 М раствора натрия эдетата соответствует 16,22 мг гидроксиникотиноилглутамата кальция C11H12CaN2O7.

Хранение. В защищенном от света месте.

---