Диагностика и санация стафилококковых бактерионосителей. Методические рекомендации

(утв. Главным государственным санитарным врачом РФ 06.04.2001)

МЕТОДИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ

ДИАГНОСТИКА И САНАЦИЯ СТАФИЛОКОККОВЫХ БАКТЕРИОНОСИТЕЛЕЙ

В методических рекомендациях представлена принципиально новая схема лабораторной диагностики стафилококковых бактерионосителей; цитоскопический метод выявления бактерионосителей стафилококков; питательна среда, позволяющая выявлять стафилококки с персистентными свойствами; способ дифференциации стафилококковой микрофлоры, основанный на определении у штаммов, выделенных от бактерионосителей, факторов персистенции; предложены новые средства санации; масляный раствор витамина А, микроклимат спелеошахты, препарат электролизного водного раствора гипохлорита натрия.

Методические рекомендации предназначены для бактериологов, эпидемиологов, инфекционистов и врачей других специальностей.

Рекомендации разработаны сотрудниками Оренбургской государственной медицинской академии и Оренбургского института клеточного и внутриклеточного симбиоза УрО РАН (член — корреспондент РАН и РАМН, профессор О. В. Бухарин, профессор Б. Я. Усвяцов, доктор биологических наук О. Л. Карташов, кандидат биологических наук С. Б. Киргизова, кандидат медицинских наук Л. И. Паршута).

ВВЕДЕНИЕ

Настоящие методические рекомендации посвящены проблеме профилактики стафилококкового бактерионосительства.

В этиологической структуре внутрибольничных инфекций, возникающих в акушерских и хирургических стационарах, большая роль принадлежит стафилококкам. Основным источником гнойной стафилококковой инфекции являются бактерионосители.

Работами сотрудников Оренбургской медицинской академии и Института клеточного и внутриклеточного симбиоза УрО РАН (1989-1997) установлено, что факторы персистенции стафилококков (антилизоцимная, антиинтерфероновая, антикомплементарная активности), направленные на инактивацию защитных механизмов хозяина, обеспечивают длительное переживание бактерий и создают основу резидентного бактерионосительства.

В представленных методических рекомендациях предлагаются новые подходы к профилактике стафилококковых инфекций, включающие: цитоскопический метод выявления бактерионосителей; питательную среду, позволяющую избирательно выделять стафилококки с персистентными свойствами; способ дифференциации резидентной и транзиторной стафилококковой микрофлоры, основанный на определении факторов персистенции у штаммов, выделенных от бактерионосителей.

Учитывая то обстоятельство, что подавление персистирующих свойств возбудителя затрудняет его паразитирование и, тем самым, повышает эффективность лекарственных воздействий, разработаны эффективные способы санации через снижение персистентных характеристик стафилококка.

Апробация предлагаемых методик в лечебно — профилактических учреждениях города показала их преимущество по сравнению с классическими методами профилактики.

Приоритетность способов диагностики и санации стафилококковых бактерионосителей подтверждена 2 авторскими свидетельствами и 4 патентами РФ на изобретения.

ДИАГНОСТИКА СТАФИЛОКОККОВЫХ БАКТЕРИОНОСИТЕЛЕЙ

Предлагаемый метод диагностики стафилококкового бактерионосительства отличается от существующих принципиально новой схемой исследования, включающей в себя: цитоскопический метод выявления бактерионосителей стафилококков; посев на питательную среду, позволяющую избирательно выделять стафилококки с персистентными свойствами (патент РФ № 2088668 «Питательная среда для выделения стафилококков с персистентными характеристиками»); способ дифференциации резидентной и транзиторной стафилококковой микрофлоры, основанный на определении факторов персистенции у штаммов, выделенных от бактерионосителей.

Цитоскопический метод

1.1. Среда-199 — официнальная среда для сохранения культуры клеток, производится в Свердловском НИИ вирусных инфекций.

1.2 Пробирки, ГОСТ 10515, диаметр 15 мм, высота 145-150 мм.

1.3 Термостат.

1.4 Пастеровские пипетки.

1.5 Предметное стекло.

1.6 Метанол.

1.7 Ватный тампон, укрепленный на проволоке.

2.1. Исследуемый материал (клетки эпителия слизистой оболочки переднего отдела носа) забирают с помощью стерильных ватных тампонов, смоченных в физиологическом растворе.

2.2. Тампон погружают в стерильную пробирку с 1,0 мл среды-199, встряхивают в течение 15 минут, тампон отжимают о стенки пробирки и удаляют.

2.3. Содержимое пробирки инкубируют в течение 1-2 часов при 37 град. С в термостате (для сохранения жизнеспособности эпителиальных клеток и размножения в них стафилококков).

2.4. Верхний слой жидкости удаляют при помощи пастеровской пипетки, из осадка делают мазок на чистое, хорошо обезжиренное стекло (стекла обезжиривают при помощи смеси Никифорова).

2.5. После подсыхания мазок фиксируют метанолом в течение 5 минут и окрашивают одним из принятых методов (синькой Мансона, по Романовскому — Гимзе и др.).

2.6. При микроскопии мазков просматривают не менее 30 эпителиальных клеток (учитывают клетки с хорошо видимым ядром). В том случае, если обнаруживают 5 и более клеток, содержащих микроколонии стафилококков (группа из 4 и более кокков), то делают заключение о резидентном бактерионосительстве.

2.7. Для уточнения видовой характеристики стафилококков проводят бактериологическое исследование.

Бактериологический метод

А. Выделение чистой культуры стафилококка с персистентными свойствами путем посева на элективную питательную среду с фузидином

1.1 Чашки Петри, ГОСТ 7900-56.

1.2. Натрий хлористый, ГОСТ 4233-77 (Михайловский завод химреактивов).

1.3 Куриное яйцо.

1.4. Фузидин-натрий-натриевая соль фузидиевой кислоты (Пензенский комбинат медицинских препаратов «Биосинтез»).

1.5. Питательный агар для культивирования микроорганизмов, сухой, код ОКП 93 8511 0197 ФС 42-188 ВС-88 (НПО «Питательные среды», Махачкала).

1.6 Физиологический раствор (9 г NaCl на 1 л воды).

1.7 Ватный тампон, укрепленный на проволоке.

2.1. Приготовление элективной среды: к 850 мл расплавленного мясо — пептонного агара добавляют 85 мл NaCI, затем среду стерилизуют, остужают до 50 градусов и добавляют 150 г желточной взвеси (желток асептически извлекают из яйца, взбалтывают с 200 мл изотонического раствора хлорида натрия). Перед заливкой чашек Петри во флаконы вносят 0,0002 г/л антибиотика фузидина. Все тщательно перемешивают, готовую среду разливают в стерильные чашки, подсушивают в термостате при 37 град. С в течение 10 минут.

2.2. На поверхность среды засевают исследуемый материал (клетки эпителия слизистой оболочки носа), который забирают с помощью стерильных ватных тампонов, смоченных в физиологическом растворе, и учитывают результаты через 24 часа инкубации в термостате при 37 град. С.

2.3. Рост колоний на данной среде позволяет отнести бактерионосителя к резидентному типу, т.к. имеет место преимущественный рост стафилококка с персистентными свойствами.

Б. Идентификация чистой культуры: определение резидентной стафилококковой микрофлоры

При дифференциации резидентной стафилококковой микрофлоры от транзиторной, кроме учета микробной обсемененности, рекомендуется определять у выделенных штаммов чувствительность к фузидину, а также персистентные свойства (антилизоцимная, антиинтерфероновая, антикомплементарная активности), как наиболее информативные биологические характеристики (А.с. СССР № 1449587 «Способ выявления возбудителя при гнойно — воспалительных процессах»; патент РФ № 2010860 «Способ определения антикомплементарной активности микроорганизмов»).

1.1 Чашки Петри, ГОСТ 7900-56.

1.2. Питательный агар для культивирования микроорганизмов, сухой, код ОКП 93 8511 0197 ФС 42-188 ВС-88 (НПО «Питательные среды», Махачкала).

1.3 Физиологический раствор (9 г NaCl на 1 л воды).

1.4. Официнальные диски с фузидином (Минмедпром РФ объединение «Мосмедпрепарат» им. А. Я. Карпова).

1.5. Яичный лизоцим, регистрационный номер 76/506/6 (Фармацевтическое акционерное общество «Ферейн», Москва).

1.6. Культура Micrococcus luteus (N 211001 по каталогу ГИСК им. Л. А. Тарасевича).

1.7. Препарат человеческого лейкоцитарного интерферона (ПО «Иммунопрепарат», Уфа).

1.8. Культура Corynebacterium xerosis (N 181 по каталогу ГИСК им. Л. А. Тарасевича).

1.9 Сыворотка крови доноров (станция переливания крови).

1.10 Культура Е. coli (N 212 по каталогу ГИСК им. Л. А. Тарасевича).

1.11. Хлороформ фармакопейный ФС Х — 160 (Проблемная лаборатория органического синтеза, Башкортостан).

1.12 Пробирки, ГОСТ 10515, диаметр 15 мм, высота 145-150 мм.

1.13 Термостат.

1.14 Центрифуга ЦЛС-3.

2.1 Чувствительность к фузидину

2.1.1. Чувствительность стафилококков к фузидину (ФУЗ) определяют методом диффузии в агар с использованием официнальных дисков согласно «Методическим указаниям по определению чувствительности микроорганизмов к антибиотикам» (МЗ СССР 10.03.83 № 267583).

2.1.2. Определяют диаметр стерильной зоны вокруг дисков в мм и учитывают результаты следующим образом: <= 12 — устойчивые, (13-19) — умеренно — устойчивые, >= 20 — чувствительные.

2.2 Антилизоцимная активность (АЛА)

2.2.1. Антилизоцимную активность определяют чашечным методом, для этого готовят разведение лизоцима: взвешивают 10 мг лизоцима, добавляют 10 мл физиологического раствора. К 0,5 мл полученного разведения добавляют 9,5 мл физиологического раствора (50 мкг/мл). Готовят разведения лизоцима: к 0,1 мл полученного разведения добавляют 0,9 мл физиологического раствора (1 мкг/мл); к 0,2 мл — 0,8 мл физиологического раствора (2 мкг/мл); к 0,3 мл разведения лизоцима — 0,7 мл физиологического раствора (3 мкг/мл) и т.д.

2.2.2. Заливают чашки Петри, добавляя к каждому разведению 4 мл 1,5%-ного питательного агара.

2.2.3. Готовят контроль, добавляя 1 мл физиологического раствора к 4 мл 1,5%-ного питательного агара.

2.2.4. Чашки подсушивают в термостате при 37 град. С в течение 10-15 минут.

2.2.5. Готовят 1 млрд. взвесь исследуемых культур в физиологическом растворе и наносят в виде бляшек на поверхность приготовленных сред.

2.2.6 Чашки помещают в термостат при 37 град. С на 18-24 часа.

2.2.7. Выросшие макроколонии обрабатывают парами хлороформа, наливая его в крышку чашки Петри (в течение 10 минут).

2.2.8. Готовят 1 млрд. взвесь суточной агаровой культуры Micrococcus luteus в физиологическом растворе, разливают по 0,1 мл в пробирки и заливают каждую чашку вторым слоем, добавляя к индикаторной культуре микрококка 3 мл 0,7%-ного питательного агара.

2.2.9. Чашки помещают в термостат на 24 часа при 37 град. С и проводят учет результатов опыта по наличию роста микрококка вокруг колоний исследуемых культур. Учитывают уровень выраженности признака по принятой градации: 0 мкг/мл, 1 мкг/мл, 2 мкг/мл, 3 мкг/мл, 4 мкг/мл, 5 мкг/мл. За уровень антилизоцимной активности исследуемых культур принимают максимальное значение концентрации лизоцима в среде, при которой еще наблюдается рост индикаторного штамма.

2.3 Антиинтерфероновая активность (АИА)

2.3.1 Ампулу интерферона разводят в 4 мл физиологического раствора.

2.3.2. Готовят рабочие разведения: 1,0 мл разведенного интерферона (10 усл. ед.); к 0,5 мл разведения интерферона добавляют 0,5 мл физиологического раствора (5 усл. ед.); к 0,25 мл — 0,75 мл (2 усл. ед.); к 0,125 мл — 0,875 мл (1 усл. ед.).

2.3.3. Заливают чашки Петри, добавляя к каждому разведению 4 мл 1,5%-ного питательного агара.

2.3.4. Готовят контроль, добавляя 1 мл физиологического раствора к 4 мл 1,5%-ного питательного агара.

2.3.5. Чашки подсушивают в термостате при 37 град. С в течение 10-15 минут.

2.3.6. Готовят 1 млрд. взвесь исследуемых культур в физиологическом растворе и наносят в виде бляшек на поверхность приготовленных сред.

2.3.7 Чашки помещают в термостат при 37 град. С на 24 часа.

2.3.8. Выросшие макроколонии обрабатывают парами хлороформа, наливая его в крышку чашки Петри (в течение 10 минут).

2.3.9. Готовят 1 млрд. взвесь суточной агаровой культуры Corynebacterium xerosis в физиологическом растворе, разливают по 0,1 мл в пробирки и заливают каждую чашку вторым слоем, добавляя к индикаторной культуре микрококка 3 мл 0,7%-ного питательного агара.

2.3.10. Чашки помещают в термостат на 24 часа при 37 град. С и проводят учет результатов опыта по наличию роста коринебактерии вокруг колоний исследуемых культур. Учитывают уровень выраженности признака по принятой градации: 0 усл. ед., 1 усл. ед., 2 усл. ед., 5 усл. ед., 10 усл. ед. За уровень «антиинтерфероновой» активности исследуемых культур принимают максимальное значение концентрации интерферона в среде, при которой еще наблюдается рост индикаторного штамма.

2.4 Антикомплементарная активность (АКА)

2.4.1. В чашки Петри разливают 1,5% агар по 5 мл. Чашки подсушивают в термостате при 37 град. С в течение 10-15 минут. Готовят 1 млрд. взвесь исследуемых культур в физиологическом растворе и наносят в виде бляшек на поверхность приготовленных сред.

2.4.2 Чашки помещают в термостат при 37 град. С на 18-24 часа.

2.4.3. Выросшие макроколонии обрабатывают парами хлороформа, наливая его в крышку чашки Петри (в течение 10 минут) и заливают чашки вторым слоем, содержащим 1,5 мл 1,5%-ного агара и 1 мл комплемента (смесь пула сывороток 15-20 доноров, оттитрованная в гемолитической системе до активности 50 ед., 25 ед., 12,5 ед/мл), конечная концентрация комплемента будет составлять соответственно 20; 10 и 5 гем. ед/мл.

2.4.4 Чашки инкубируют при 37 град. С в течение 1 часа.

2.4.5. Готовят 1 млрд. взвесь суточной агаровой культуры Е. coli 212 в физиологическом растворе, разливают по 0,1 мл в пробирки и заливают каждую чашку вторым слоем, добавляя к индикаторной культуре эшерихии 3 мл 0,7%-ного питательного агара.

2.4.6. Чашки инкубируют в термостате при 37 град. С в течение 18-24 часов.

2.4.7. Об антикомплементарной активности судят по наличию роста индикаторного штамма вокруг исследуемых культур тех штаммов стафилококков, где произошла инактивация комплемента. Учитывают уровень выраженности признака по принятой градации: 0 усл. ед., 5 усл. ед., 10 усл. ед. и 20 усл. ед.

Для приведения значений всех изученных признаков к единому измерению полученные показатели переводят в баллы (табл. 1) и оценивают штамм стафилококка с помощью диагностической модели по формуле:

            Д = х а  + х а  + ... + ... + х а  + С, где
                 1 1    2 2                n n

Д — дискриминантная функция, характеризующая резидентный или транзиторный тип стафилококковой микрофлоры;

x — значение признака в баллах;

a — коэффициент признака;

С — поправочная константа.

Признаки	Баллы
	1	2	3	4
Микробная обсемененность <*>	1 <10 КОЕ/мл	2 10 КОЕ/мл	3 10 КОЕ/мл	4 >10 КОЕ/мл
Чувствительность к фузидину	Устойчивые	Умеренно — чувствительные	Чувствительные	-
Антиинтерфероновая активность	1 усл. ед.	2 усл. ед.	5 усл. ед.	10 усл. ед.
Антилизоцимная активность	1 мкг/мл	2 мкг/мл	3 мкг/мл	4 мкг/мл
Антикомплементарная активность	от 2,5 до 5,0 усл.ед.	от 5,0 до 10,0 усл.ед.	>10,0 усл. ед.	-
<*> Учет проводят в соответствии с методическими рекомендациями по выделению и идентификации бактерий рода Staphylococcus (Москва, 1990)

В данную формулу подставляют полученные значения, коэффициенты для каждого признака и поправочные константы, представленные в табл. 2.

Тип штамма	Коэффициенты признаков
	ОБС	АЛА	АИА	ФУЗ	АКА	С
S. aureus резидентный	1639,88	782,2	249,57	7035,04	1255,56	-12331,79
S. aureus транзиторный	577,38	-83,43	82,20	11324,36	76,99	-17593,07
S. epidermidis резидентный	1666,79	2527,1	54,27	6778,55	1346,29	-16178,03
S. epidermidis транзиторный	656,61	665,73	-6,9	11302,4	22,13	-17987,33
Условные обозначения: ОБС — микробная обсемененность слизистой оболочки переднего отдела носа, АЛА — антилизоцимная активность, АИА — антиинтерфероновая активность, ФУЗ — чувствительность к фузидину, АКА — антикомплементарная активность, С — поправочная константа

Расчет проводится по всем строкам соответствующей таблицы. Наибольшая величина из всех полученных будет в 95% случаев соответствовать обозначенному на данной строке типу штамма.

Примеры установления принадлежности штамма к виду (S. aureus или S. epidermidis) и к определенному типу (резидентному или транзиторному):

Пример 1. Исследуемый штамм стафилококка характеризуется 4

следующими показателями:  микробная обсемененность  10  КОЕ/мл  (4
балла),   антилизоцимная   активность   -   1   мкг/мл  (1  балл),
антиинтерфероновая  активность  -   5   усл.   ед.   (5   баллов),
антикомплементарная активность - 2,5 усл.  ед.  (1 балл), умеренно
устойчив  к  фузидину  (2  балла).  Расчет  математической  модели

дифференциации штамма по строкам таблицы следующий:

Д1 = 1639,88 х 4 + 782,2 х 1 + 249,57 x 5 + 7035,04 x 2 + 1255,56 x 1 + -12331,79 = 11583,42

Д2 = 577,38 х 4 + -83,43 x 1 + 82,20 х 5 + 11324,36 х 2 + 76,99 х 1 + -17593,07 = 7769,73

Д3= 1666,79 х 4 + 2527,1 х 1 + 54,27 x 5 + 6778,55 x 2 + 1346,29 х 1 + -16178,03 = 8190,97

Д4= 656,61 x 4 + 665,73 х 1 + 6,9 x 5 + 11302,4 x 2 + 22,13 х 1 + -17987,33 = 7897,27

В результате проведенного расчета максимальная величина установлена на первой строке (Д1), что позволяет отнести исследуемый штамм к виду S. aureus и к резидентному типу.

Пример 2. Исследуемый штамм стафилококка характеризуется 2

следующими показателями:  микробная обсемененность  10  КОЕ/мл  (2
балла),    антилизоцимная   активность   2   мкг/мл   (2   балла),
антиинтерфероновая  активность   -   2   усл.   ед.   (2   балла),

антикомплементарная активность 2,5 усл. ед. (1 балл), чувствителен к фузидину 3 балла. Расчет математической модели дифференциации штамма по строкам таблицы следующий:

Д1 = 1639,88 х 2 + 782,2 х 2 + 249,57 х 2 + 7035,04 х 3 + 1255,56 х 1 + -12331,79 = 15372,19

Д2 = 577,38 х 2 + -83,43 х 2 + 82,20 х 2 + 11324,36 х 3 + 76,99 х 1 + — 17593,07 = 17609,30

Д3= 1666,79 x 2 + 2527,1 x 2 + 54,27 x 2 + 6778,55 х 3 + 1346,29 х 1 + — 16178,03 = 14000,23

Д4= 656,61 x 2 + 665,73 x 2 + -6,9 x 2 + 11302,4 x 3 + 22,13 х 1 + -17987,33 = 18572,88

По результатам проведенного расчета наибольшая величина установлена на четвертой строке (Д4), что позволяет отнести исследуемый штамм к виду S. epidermidis и к транзиторному типу.

Заключение

Разработанные способы диагностики стафилококкового бактерионосительства, в основу которых положено выявление штаммов с персистентными характеристиками (антилизоцимная, антиинтерфероновая, антикомплементарная активности) позволяют проводить однократное обследование и повысить эффективность диагностики на 15-20%.

Разработанным цитоскопическим методом обследовано 3307 человек, применение метода позволило повысить частоту выявления стафилококковых бактерионосителей на 14% по сравнению с имеющимся цитоскопическим методом (Стафилококковое носительство: Методические рекомендации: МЗ РСФСР. — Свердловск, 1983). Новый метод удобен для экспресс — диагностики при обследовании большого контингента.

Лабораторная апробация селективной среды с фузидином при посеве 303 проб исследуемого материала подтвердила возможность ее использования для выделения стафилококков, обладающих персистентными признаками.

Материалом для оценки диагностической модели при бактерионосительстве служили штаммы стафилококков, выделенные от 8400 человек. Статистическая обработка материала, проведенная посредством системы программ для многомерных критериев показала возможность дифференцировать данным способом резидентную стафилококковую микрофлору от транзиторной среди 95% штаммов, выделенных от бактерионосителей.

САНАЦИЯ СТАФИЛОКОККОВЫХ БАКТЕРИОНОСИТЕЛЕЙ

Предлагаемые средства для санации стафилококковых бактерионосителей: масляный раствор витамина А (А.с. СССР № 1571069 «Способ определения антистафилококковой активности препаратов»), микроклимат спелеошахты (патент РФ № 2100994 «Способ санации стафилококковых бактерионосителей»), препарат электролизного водного раствора гипохлорита натрия (патент РФ № 2114913 «Способ определения эффективной дозы антисептического препарата, электролизного раствора гипохлорита натрия, для лечения и профилактики гнойно — воспалительных заболеваний»), отличаются от существующих тем, что снижают персистентный потенциал возбудителя. Подавление персистентных свойств стафилококка затрудняет его паразитирование внутри клеток и, тем самым, повышает эффективность санации.

Санация раствором витамина А

Масляный раствор витамина А, являющийся активным антиоксидантом, наряду со снижением персистентных свойств стафилококков, оказывает репаративный и стабилизирующий эффекты на слизистую оболочку переднего отдела носа бактерионосителей. Противопоказаний к применению метода нет. Экспериментально установлена эффективная одноразовая доза масляного раствора витамина А для санации: 6-10 тысяч единиц.

1.1 Ватный тампон, укрепленный на проволоке.

1.2. Витамин А — ретинола ацетат 3,44% раствор в масле (Уманский витаминный завод).

1.3 Растительные масла или вазелиновое масло.

1.4 Масляный ингалятор.

1.5 Пипетки.

2.1. Для приготовления раствора нужной концентрации витамин А разводят оливковым, персиковым, вазелиновым или растительным маслом в соотношении 1:1. Формы проведения санации следующие:

а) Стерильным ватным тампоном, смоченным в 0,5 мл масляного раствора витамина А, протирают передние отделы носа.

б) Закапывают по 2 капли раствора в каждый носовой ход, используя глазные пипетки, после чего производят легкий массаж передних отделов носа.

в) Ингалируют теплый масляный раствор при помощи масляного ингалятора. Время ингаляции устанавливают экспериментально, учитывая, что за одну ингаляцию в носовые ходы должно поступать не более 0,5 мл масла с содержанием витамина А 6 — 10 тысяч единиц. (Приготовление раствора для ингалятора ПАИ-2: к 10 мл витамина А добавляют 40 мл оливкового масла, ингаляцию проводят в течение 4 минут).

2.2. Санацию проводят в течение 6 дней. Эффективность санации оценивают на следующий день и через 7 дней после ее окончания при помощи цитоскопического метода.

Санация микроклиматом спелеошахты

Микроклимат спелеошахты, наряду со снижением персистентных свойств стафилококков, укрепляет антиинфекционную резистентность организма. Показания к применению: данный способ может использоваться для санации бактерионосителей, страдающих аллергическими заболеваниями. Противопоказаний к применению метода нет.

1.1 Спелеошахта с лечебной средой <*>

• количество кислорода 20,7%;
• углекислоты 0,03-0,4%;
• движение воздуха 0,1-0,2 м/с;
• барометрическое давление 750-775 мм рт. ст.;
• число микробных тел в куб. м не более 100;
• влажность воздуха 40-60%;
• температура 20-30 град. C.

---

<*> Распылением 20% раствора хлорида натрия через аппарат типа «Комфорт» в помещении создают лечебную среду: плотность хлористого натрия 3-8 мг/куб. м, размер частиц 3-8 ммк не менее 70-80%.

Бактерионосителя помещают в условия микроклимата спелеошахты на 20-30 минут ежедневно в течение 14 дней. По окончании санации проводят контрольное бактериологическое исследование с определением персистентных свойств у выделенных стафилококков. Об эффективности санации судят по отсутствию стафилококков и (или) снижению их персистентных свойств не менее, чем на 20%.

Санация препаратом электролизного водного раствора гипохлорита натрия

Электролизный водный раствор гипохлорита натрия (в концентрации 1,7-1,9 мг/л) — антисептик, обладающий антимикробным, детоксицирующим, иммуномодулирующим свойствами, его получают при помощи электролиза физиологического раствора на аппарате электрохимической детоксикации организма. При применении данного препарата для санации не отмечается дисбиотических изменений в микробиоценозе слизистой оболочки носовой полости. Противопоказаний к применению метода нет.

1.1 Изотонический раствор хлористого натрия (0,89%)

1.2. Электрохимический детоксикатор организма «ЭДО-4» (региональный центр научно — технических исследований — РЕГНАТИС, г. Москва).

1.3 Пипетки

2.1. Изотонический раствор хлорида натрия (0,89%) подвергается электролизу на электрохимическом детоксикаторе организма.

2.2. Полученный электролизный раствор с концентрацией 240 мг/л доводится физиологическим раствором с помощью метода серийных разведений до экспериментально установленной эффективной концентрации 1,7-1,9 мг/мл (готовится непосредственно перед применением).

2.3 Формы проведения санации следующие:

а) Препарат закапывают 4 раза в день по 5-6 капель в оба носовых хода в течение 2 недель.

б) Местная аппликация препарата на слизистую оболочку носовой полости с использованием ватных тампонов, пропитанных раствором гипохлорита натрия, закладываемых в оба носовых хода на 10-20 минут ежедневно в течение 2 недель.

2.4. По окончании санации проводят контрольное бактериологическое исследование с определением обсемененности слизистой оболочки переднего отдела носа стафилококками, а также вирулентных и персистентных свойств у выделенных штаммов.

Заключение

Рекомендуемые средства (масляный раствор витамина А, микроклимат спелеошахты, препарат электролизного водного раствора, снижая персистентные признаки стафилококков, повышают качество санации, обеспечивая положительный эффект в 78-91% случаев. Масляным раствором витамина А просанировано 200 человек, эффект санации составил 78%; препаратом электролизного водного раствора гипохлорита натрия просанировано 64 бактерионосителя с эффективностью 87,5%; в спелеошахте просанировано 250 человек, эффективность использования метода — 91%.

---