--- title: "Без названия" status: действует canonical: "https://bukva.ai/docs/bez-nazvaniya-5027" --- ## Без названия # Документ 47983 > [!NOTE] > ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ ```mermaid flowchart LR n0["ГОСТ Р ИСО 14852-2022"]:::doc n1["ГОСТ ISO 14852-2025"]:::notEnt n0 --> n1 classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000; classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000; classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000; ``` Введен в действие Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 24 августа 2026 г. N 1009-ст **МЕЖГОСУДАРСТВЕННЫЙ СТАНДАРТ** **ПЛАСТМАССЫ** **ОПРЕДЕЛЕНИЕ СПОСОБНОСТИ К ПОЛНОМУ АЭРОБНОМУ** **БИОЛОГИЧЕСКОМУ РАЗЛОЖЕНИЮ В ВОДНОЙ СРЕДЕ.** **МЕТОД АНАЛИЗА КОЛИЧЕСТВА ВЫДЕЛЯЕМОГО ДИОКСИДА УГЛЕРОДА** Plastics. Determination of the ultimate aerobic biodegradability in an aqueous medium. Method by analysis of evolved carbon dioxide (ISO 14852:2021, Determination of the ultimate aerobic biodegradability of plastic materials in an aqueous medium - Method by analysis of evolved carbon dioxide, IDT) **ГОСТ ISO 14852-2025** **МКС 83.080** Дата введения 1 сентября 2027 года с правом досрочного применения Предисловие Цели, основные принципы и общие правила проведения работ по межгосударственной стандартизации установлены ГОСТ 1.0 "Межгосударственная система стандартизации. Основные положения" и ГОСТ 1.2 "Межгосударственная система стандартизации. Стандарты межгосударственные, правила и рекомендации по межгосударственной стандартизации. Правила разработки, принятия, обновления и отмены" Сведения о стандарте 1 ПОДГОТОВЛЕН Научно-производственным республиканским унитарным предприятием "Белорусский государственный институт стандартизации и сертификации" (БелГИСС) на основе собственного перевода на русский язык англоязычной версии стандарта, указанного в пункте 5 2 ВНЕСЕН Государственным комитетом по стандартизации Республики Беларусь 3 ПРИНЯТ Межгосударственным советом по стандартизации, метрологии и сертификации по результатам голосования в АИС МГС (протокол от 30 сентября 2025 г. N 189-П) За принятие проголосовали: | Краткое наименование страны по МК (ИСО 3166) 004-97 | Код страны по МК (ИСО 3166) 004-97 | Сокращенное наименование национального органа по стандартизации | | --- | --- | --- | | Армения | AM | ЗАО "Национальный орган по стандартизации и метрологии" Республики Армения | | Беларусь | BY | Госстандарт Республики Беларусь | | Казахстан | KZ | Госстандарт Республики Казахстан | | Киргизия | KG | Кыргызстандарт | | Россия | RU | Росстандарт | | Таджикистан | TJ | Таджикстандарт | | Узбекистан | UZ | Узбекское агентство по техническому регулированию | 4 Приказом Федерального агентства по техническому регулированию и метрологии от 24 августа 2026 г. N 1009-ст межгосударственный стандарт ГОСТ ISO 14852-2025 введен в действие в качестве национального стандарта Российской Федерации с 1 сентября 2027 г. с правом досрочного применения 5 Настоящий стандарт идентичен международному стандарту ISO 14852:2021 "Определение способности к полному аэробному биоразложению пластмассовых материалов в водной среде. Метод анализа выделяемого диоксида углерода" ("Determination of the ultimate aerobic biodegradability of plastic materials in an aqueous medium - Method by analysis of evolved carbon dioxide", IDT). Международный стандарт разработан подкомитетом SC 14 "Аспекты окружающей среды" Технического комитета ISO/TC 61 "Пластмассы" Международной организации по стандартизации (ISO). Наименование настоящего стандарта изменено относительно наименования указанного международного стандарта для увязки с наименованиями, принятыми в существующем комплексе межгосударственных стандартов. При применении настоящего стандарта рекомендуется использовать вместо ссылочного международного стандарта соответствующий ему межгосударственный стандарт, сведения о котором приведены в дополнительном приложении ДА **6 ВВЕДЕН ВПЕРВЫЕ** Информация о введении в действие (прекращении действия) настоящего стандарта и изменений к нему на территории указанных выше государств публикуется в указателях национальных стандартов, издаваемых в этих государствах, а также в сети Интернет на сайтах соответствующих национальных органов по стандартизации. В случае пересмотра, изменения или отмены настоящего стандарта соответствующая информация будет опубликована на официальном интернет-сайте Межгосударственного совета по стандартизации, метрологии и сертификации в каталоге "Межгосударственные стандарты" Введение В связи с расширением области применения пластмасс возникла проблема их переработки и захоронения. Первоочередной задачей является переработка пластмасс. Однако их полная переработка является затруднительной. Одним из доступных вариантов, позволяющих решить существующие экологические проблемы, является использование биоразлагаемых пластмасс. Ожидается, что пластмассы, например изделия или упаковочные материалы из пластика, которые отправляют на объекты компостирования, будут потенциально биоразлагаемыми. Поэтому очень важно определить потенциальную способность таких материалов к биоразложению и получить информацию об их способности к биоразложению в окружающей среде. Предупреждение - Сточные воды, активный ил, почва и компост могут содержать потенциально патогенные организмы. Поэтому при обращении с ними должны быть соблюдены соответствующие меры предосторожности. Необходимо также соблюдать меры безопасности при работе с токсичными веществами, свойства которых не полностью изучены. 1 Область применения Настоящий стандарт устанавливает метод определения степени аэробного биоразложения пластмасс, в том числе содержащих составные добавки, путем измерения количества выделяемого диоксида углерода. Испытуемый материал в синтетической среде в стандартных лабораторных условиях подвергают воздействию инокулята из активного ила, зрелого компоста или почвы в аэробных условиях. Условия проведения испытания, установленные настоящим стандартом, могут не соответствовать условиям, при которых достигается максимальная степень биоразложения, однако метод, приведенный в настоящем стандарте, предназначен для оценки потенциальной способности пластмасс к биоразложению и анализу их потенциальной биоразлагаемости. Метод, приведенный в настоящем стандарте, позволяет осуществить оценку способности к биоразложению путем вычисления углеродного баланса (см. приложение C). Метод применяют для следующих материалов: - природных и/или синтетических полимеров и сополимеров, а также их смесей; - пластмасс, содержащих добавки, например пластификаторы, красители и др.; - водорастворимых полимеров; - материалов, которые в условиях проведения испытаний не подавляют активность микроорганизмов, присутствующих в инокуляте. Ингибирующее воздействие можно определить при помощи оценки ингибирования или другим соответствующим методом (см., например, [1]). Если испытуемый материал подавляет активность микроорганизмов в инокуляте, следует использовать более низкую концентрацию испытуемого материала, другой тип зрелого компоста или предварительно выдержанный компост. 2 Нормативные ссылки В настоящем стандарте использована нормативная ссылка на следующий стандарт [для датированной ссылки применяют только указанное издание ссылочного стандарта, для недатированной - последнее издание (включая все изменения)]: ISO 8245, Water quality - Guidelines for the determination of total organic carbon (TOC) and dissolved organic carbon (DOC) (Качество воды. Руководство по определению суммарного количества органического углерода (TOC) и растворенного органического углерода (DOC)) 3 Термины и определения В настоящем стандарте применены следующие термины с соответствующими определениями. ISO и IEC поддерживают терминологические базы данных для использования в целях стандартизации по следующим адресам: - платформа онлайн-просмотра ISO, доступна по адресу: http://www.iso.org/obp; - Электропедия IEC, доступна по адресу: http://www.electropedia.org/. 3.1 полная аэробная биоразлагаемость (ultimate aerobic biodegradation): Способность к биоразложению, выражаемая в процентах, органического соединения, которое преобразуется микроорганизмами в присутствии кислорода в углекислый газ, воду и минеральные соли любых других присутствующих элементов (минерализация) с образованием новой биомассы. 3.2 активный ил (activated sludge): Биомасса, сформированная в сточной воде, прошедшей очистку в аэробных условиях, в результате роста бактерий и других микроорганизмов в присутствии растворенного кислорода. 3.3 концентрация взвешенных веществ (concentration of suspended solids): Количество твердых частиц, полученных в результате фильтрования или центрифугирования известного объема активного ила (3.2) и высушивания до постоянной массы при температуре примерно 105 °C. 3.4 растворенный неорганический углерод; DIC (dissolved inorganic carbon, DIC): Часть неорганического углерода в воде, которую нельзя удалить установленным методом фазового разделения. *Примечание* 1 - Фазовое разделение может быть достигнуто, например, центрифугированием при 40 000 м·с-2 в течение 15 мин или мембранной фильтрацией с использованием мембран с диаметром пор от 0,2 до 0,45 мкм. 3.5 теоретическое количество выделяемого диоксида углерода; ThCO2 (theoretical amount of evolved carbon dioxide ThCO2): Максимальное теоретическое количество диоксида углерода, которое выделяется после полного окисления органического соединения, рассчитанное из его молекулярной формулы. *Примечание* 1 - Рассчитывается по молекулярной формуле. *Примечание* 2 - Выражается в мг выделяющегося углекислого газа на мг или г испытуемого соединения. 3.6 общий органический углерод; TOC (total organic carbon, TOC): Количество углерода, связанного в органическом соединении. *Примечание* 1 - Выражается в мг потребленного кислорода на мг или г испытуемого материала. [ISO 17556:2012 (терминологическая статья 3.14)] 3.7 растворенный органический углерод; DOC (dissolved organic carbon, DOC): Часть органического углерода в воде, которую нельзя удалить установленным методом. *Примечание* 1 - Фазовое разделение может быть достигнуто, например, центрифугированием при 40 000 м·с-2 в течение 15 мин или мембранной фильтрацией с использованием мембран с диаметром пор от 0,2 до 0,45 мкм. 3.8 фаза задержки (lag phase): Период времени, выраженный в сутках, от начала испытания до наступления адаптации микроорганизмов и/или их разрушения, за который степень биоразложения химического соединения или органического вещества увеличивается примерно до 10% от максимального уровня биоразложения (см. 3.9). 3.9 максимальный уровень биоразложения (maximum level of biodegradation): Степень биоразложения химического соединения или органического вещества, при достижении которой не происходит дальнейшего биоразложения в процессе испытания. *Примечание* 1 - Выражается в процентах. 3.10 фаза биоразложения (biodegradation phase): Период времени от окончания периода фазы задержки (3.8) до достижения фазы плато (см. 3.11). *Примечание* 1 - Выражается в сутках. 3.11 фаза плато (plateau phase): Период времени от завершения фазы биоразложения (см. 3.10) до окончания испытания. *Примечание* 1 - Выражается в сутках. 3.12 предварительная выдержка (pre-exposure): Предварительная выдержка инокулята (3.14) в присутствии испытуемого химического соединения или органического вещества с целью повышения способности почвы к биоразложению испытуемого материала путем адаптации и/или отбора микроорганизмов. 3.13 предварительное кондиционирование (pre-conditioning): Предварительная выдержка инокулята (см. 3.14) в условиях последующих испытаний при отсутствии испытуемого химического соединения или органического вещества с целью увеличения результативности испытания путем адаптации микроорганизмов к условиям испытания. 3.14 инокулят (inoculum): Микроорганизмы или другой материал, используемые для инокуляции (3.15). *Примечание* 1 - Также называется инокулянтом. 3.15 инокуляция (inoculation): Введение микроорганизмов в питательную среду для запуска биологического процесса. 4 Сущность метода Биоразлагаемость пластмасс определяют под воздействием аэробных, мезофильных микроорганизмов в водной среде. Испытуемая смесь содержит неорганическую среду, органический испытуемый материал (являющийся единственным источником углерода и энергии) с концентрацией органического углерода от 100 до 2000 мг/л и активный ил в качестве инокулята. При использовании испытуемого материала в более высоких концентрациях следует применять оптимизированную испытательную среду. *Примечание* 1 - Более низкие концентрации, от 20 до 40 мг/л органического углерода, прошли оценку, в результате которой были признаны подходящими. Смесь перемешивают в колбах и аэрируют с использованием воздуха, не содержащего диоксида углерода, в течение определенного периода времени, определяемого в зависимости от скорости протекания биоразложения, но не превышающего 2 мес. Количество выделившегося в процессе микробиологического разложения диоксида углерода определяют одним из подходящих аналитических методов, примеры которых приведены в приложениях A и B. Степень биоразложения определяют путем сравнения количества выделившегося диоксида углерода с теоретическим количеством выделяемого диоксида углерода (ThCO2) и выражают в процентах. За результат испытания принимают максимальный уровень биоразложения, соответствующий фазе плато на кривой биоразложения. При необходимости для получения дополнительной информации о биоразложении осуществляют расчет углеродного баланса (см. приложение C). В отличие от ISO 9439, который применяется для различных органических соединений, настоящий стандарт предназначен для определения способности к биоразложению пластмасс. При выборе инокулята и испытательной среды необходимо соблюдать установленные требования. Расчет углеродного баланса также позволяет повысить результативность оценки биоразлагаемости пластмасс. 5 Условия испытания Инкубацию проводят в темноте или при диффузном освещении в камере, в которой не содержатся пары, замедляющие активность микроорганизмов, и поддерживается постоянная температура от 20 °C до 25 °C с точностью +/- 1 °C. 6 Реактивы Следует использовать реактивы только аналитической степени чистоты. 6.1 Дистиллированная или деонизованная вода, не содержащая токсичные вещества (особенно медь), концентрация DOC в которой составляет менее 2 мг/л. #### 6.2 Испытательная среда В зависимости от цели испытания можно использовать различные испытательные среды. Если испытуемый материал используют в более высоких концентрациях, то применяют оптимизированную испытательную среду (см. 6.2.2) с более высокой буферной способностью и концентрацией питательных веществ. ##### 6.2.1 Стандартная испытательная среда ###### 6.2.1.1 Раствор A Растворяют в воде (см. 6.1) следующие компоненты и доводят объем до 1000 мл: - безводный дигидрофосфат калия KH2PO4 - 8,5 г; - безводный гидроортофосфат калия K2HPO4 - 21,75 г; - динатрия гидрофосфат дигидрат Na2HPO4·2H2O - 33,4 г; - хлорид аммония NH4Cl - 0,5 г. Правильный состав раствора можно проверить, измерив pH, который должен составлять 7,4. ###### 6.2.1.2 Раствор B 22,5 г гептагидрата сульфата магния MgSO4·7H2O растворяют в воде и доводят объем раствора до 1000 мл. ###### 6.2.1.3 Раствор C 36,4 г дигидрата хлорида кальция CaCl2·2H2O растворяют в воде и доводят объем раствора до 1000 мл. ###### 6.2.1.4 Раствор D 0,25 г гексагидрата хлорида железа (III) FeCl3·6H2O растворяют в воде (см. 6.1) и доводят объем раствора до 1000 мл. Используют свежеприготовленный непосредственно перед испытанием раствор во избежание выпадения осадка или добавляют каплю концентрированной соляной кислоты HCl или каплю водного раствора этилендиаминтетрауксусной кислоты (EDTA) концентрацией 0,4 г/л. ###### 6.2.1.5 Приготовление Чтобы приготовить 1 л испытательной среды, к 500 мл воды (см. 6.1) добавляют следующие компоненты: - 10 мл раствора A (см. 6.2.1.1); - 1 мл каждого из растворов: B (см. 6.2.1.2), C (см. 6.2.1.3), D (см. 6.2.1.4). Объем полученной смеси доводят водой (см. 6.1) до 1000 мл. Используют испытательную среду, свежеприготовленную непосредственно перед испытанием. Растворы A - C допускается хранить в темном месте при комнатной температуре не более 6 мес. Данные рекомендации применяются и к раствору D в случае добавления HCl или EDTA. ##### 6.2.2 Оптимизированная испытательная среда Данная оптимизированная среда имеет высокую буферную способность и содержит большее количество неорганических питательных веществ. Это необходимо для поддержания постоянного уровня pH в системе во время испытания, даже при высоких концентрациях испытуемого материала. Данная среда содержит примерно 2400 мг/л фосфора и 50 мг/л азота и может применяться для испытаний материалов с концентрацией органического углерода менее 2000 мг/л. Если концентрация органического углерода имеет более высокое значение, увеличивают или уменьшают содержание азота для поддержания соотношения углерода и азота (C:N) примерно 40:1. ###### 6.2.2.1 Раствор E Растворяют в воде (см. 6.1) следующие компоненты и доводят объем до 1000 мл: - безводный дигидрофосфат калия KH2PO4 - 37,5 г; - динатрия гидрофосфат дигидрат Na2HPO4·2H2O - 87,3 г; - хлорид аммония NH4Cl - 2,0 г. ###### 6.2.2.2 Раствор F (допускается использовать растворы с незначительным количеством примесей) Растворяют в 10 мл водного раствора HCl (25%, 7,7 моль/л) в следующей последовательности: a) 70 мг ZnCl2; b) 100 мг MnCl2·4H2O; c) 6 мг H3BO3; d) 190 мг CoCl2·6H2O; e) 3 мг CuCl2·2H2O; f) 240 мг NiCl2·6H2O; g) 36 мг Na2MoO4·2H2O; h) 33 мг Na2WO4·2H2O; i) 26 мг Na2SeO3·5H2O. Объем раствора доводят водой (см. 6.1) до 1000 мл. ###### 6.2.2.3 Раствор G (раствор витаминов, применение не является обязательным) Растворяют в 100 мл воды (см. 6.1) 0,6 мг биотина, 2,0 мг никотинамида, 2,0 мг п-аминобензоата, 1,0 мг пантотеновой кислоты, 10,0 мг гидрохлорида пиридоксаля, 5,0 мг цианокобаламина, 2,0 мг фолиевой кислоты, 5,0 мг рибофлавина, 5,0 мг DL-липоевой кислоты и 1,0 мг двухлористого тиамина или используют раствор, приготовленный из 15 мг дрожжевого экстракта, растворенного в 100 мл воды (см. 6.1). Раствор для стерилизации фильтруют через мембранные фильтры (см. 7.7). Растворы F и G являются необязательными и не требуются, если используется достаточная концентрация инокулята, например активного ила. Рекомендуется готовить порции по 1 мл и хранить их в холодильнике при температуре от 2 °C до 8 °C до использования. ###### 6.2.2.4 Приготовление Чтобы приготовить 1 л испытательной среды, к 800 мл воды (см. 6.1) добавляют следующие компоненты: - 100 мл раствора E (см. 6.2.2.1); - 1 мл каждого из растворов: B (см. 6.2.1.2), C (см. 6.2.1.3), D (см. 6.2.1.4) и при необходимости F (см. 6.2.2.2) и G (см. 6.2.2.3). Объем полученной смеси доводят водой (см. 6.1) до 1000 мл и определяют pH. Правильный состав испытательной среды можно определить, измерив pH, который должен составлять (7,0 +/- 0,2) ед. pH. 7 Оборудование 7.1 Необходимо обеспечить, чтобы все стеклянное оборудование было тщательно вымыто, и в частности не содержало органических или токсичных веществ. Требуется стандартное лабораторное оборудование, а также приведенное ниже. #### 7.2 Колбы для испытания Стеклянные сосуды (например, бутыли или конические колбы), предназначенные для продувки газом, встряхивания или перемешивания и оснащенные трубками, не проницаемыми для CO2. Сосуды должны находиться в помещении с постоянной температурой или в термостатируемом устройстве (например, в водяной бане). 7.3 Система получения воздуха, не содержащего CO2, способная подавать в каждую колбу воздух, не содержащий CO2, со скоростью подачи от 50 до 100 мл/мин, которая поддерживается постоянной с точностью до +/- 10% (см. пример системы, включая сосуды для испытаний, приведенный в приложении A). 7.4 Аналитический прибор для определения содержания диоксида углерода, включающий любой подходящий прибор с достаточной точностью, например анализатор CO2, или анализатор растворенного неорганического углерода (DIC), или прибор для титриметрического определения после полного поглощения в основном растворе (см. примеры в приложении B). Следует отметить, что если используется, например, анализатор с инфракрасным детектором, то необходимость в воздухе без содержания CO2 отсутствует. 7.5 Аналитическое оборудование для измерения содержания общего органического углерода (TOC) и растворенного органического углерода (DOC) в соответствии с ISO 8245. #### 7.6 Аналитические весы. 7.7 Центрифуга или устройство для фильтрации с мембранными фильтрами (с диаметром пор 0,45 мкм), которые не адсорбируют, а также не пропускают органический углерод в значительных количествах. 7.8 pH-метр. #### 7.9 Магнитная мешалка или устройство для встряхивания. 8 Проведение испытания #### 8.1 Испытуемый материал Испытуемый материал должен иметь известную массу и содержать достаточное количество углерода для получения CO2, которое можно измерить с достаточной точностью при помощи используемой аналитической системы. Вычисляют TOC по химической формуле или определяют соответствующим аналитическим методом (методом элементного анализа или в соответствии с ISO 8245) и вычисляют ThCO2. Используют испытуемый материал концентрацией не менее 30 мг/л, предпочтительной является концентрация 100 мг/л. Максимальное количество испытуемого материала ограничено подводом кислорода в систему для испытания и испытательную среду. При использовании более высокого количества испытуемого материала применяют оптимизированную испытательную среду (см. 6.2.2), при этом концентрация испытуемого материала должна быть такой, чтобы значение TOC не превышало примерно 2000 мг/л, т.е. соотношение C:N должно быть примерно 40:1. Если для проведения испытания требуются высокие концентрации, то увеличивают количество азота в испытательной среде. *Примечание* - Более низкое содержание испытуемого материала, соответствующее концентрации TOC от 20 до 40 мг/л, допускается, если в результате анализа данное количество материала было признано подходящим. Испытуемый материал рекомендуется использовать в форме порошка, но допускается также использовать для испытания кусочки пленки или фрагменты изделий. Форма и геометрические размеры испытуемого материала способны оказывать влияние на его биоразлагаемость. При сравнительном анализе разных видов пластмасс рекомендуется, чтобы они имели похожую форму. Если испытуемый материал имеет порошкообразную форму, для испытания используют мелкие частицы, расположенные на небольшом расстоянии друг от друга. Рекомендуется, чтобы максимальный гранулометрический состав материала соответствовал диаметру частиц 250 мкм. Кроме того, размер используемого испытательного оборудования может зависеть от формы испытуемого материала. Следует убедиться, что в испытуемом материале не возникает нежелательных изменений, вызванных конструкцией используемого оборудования, например устройства для измельчения. Обычно способ обработки испытуемого материала не оказывает значительного влияния на процесс разложения материала (например, использование порошкообразных материалов в случае композиционных материалов). При необходимости определяют содержание водорода, кислорода, азота, фосфора и серы, а также молекулярную массу испытуемого полимерного материала, используя, например, эксклюзионную хроматографию (см., например, [7] или другой подходящий стандартизированный метод). Рекомендуется проводить испытания с использованием пластмасс, не содержащих добавки, например пластификаторы. Если испытуемый материал все же содержит такие добавки, для оценки его биоразлагаемости необходимо предоставить информацию о биоразлагаемости входящих в его состав добавок. Более подробная информация об обращении с соединениями, имеющими ограниченную растворимость в воде, приведена в ISO 10364. #### 8.2 Контрольный материал В качестве контрольного материала используют четко определенный биоразлагаемый полимерный материал (например, порошок микрокристаллической целлюлозы, беззольные целлюлозные фильтры или поли-бета-гидроксибутират). Рекомендуется, чтобы значение TOC, форма и размер контрольного материала совпадали со значением TOC, формой и размером испытуемого материала. В качестве отрицательного контрольного образца можно использовать не поддающийся биоразложению полимерный материал, предпочтительно с формой частиц, соответствующей форме частиц испытуемого материала. #### 8.3 Приготовление инокулята ##### 8.3.1 Общие требования Активный ил, собранный на станции очистки сточных вод, на которой обрабатываются преимущественно хозяйственно-бытовые сточные воды, является подходящим источником инокулята. Его получают из активной аэробной среды, и он доступен в широком географическом диапазоне, в котором необходимо провести испытания широкого спектра пластмасс. Если необходимо определить биоразложение на конкретном заводе по переработке отходов, собирают инокулят из этой среды. Инокулят готовят в соответствии с 8.3.2, чтобы получить микрофлору, представленную различными видами микроорганизмов в достаточном количестве и имеющую активность, создающую условия для протекания биоразложения. Если эндогенная респирация инокулята слишком высока, то перед применением инокулят стабилизируют методом аэрации. Температуру испытания устанавливают в соответствии с используемым инокулятом (см. раздел 5). ##### 8.3.2 Инокулят, отобранный на станции очистки сточных вод Отбирают пробу активного ила, собранного на эксплуатируемой надлежащим образом станции очистки сточных вод или на лабораторной установке, работающей преимущественно с хозяйственно-бытовыми сточными водами. Пробу тщательно перемешивают, хранят в аэробных условиях и используют предпочтительно в день отбора (в течение не более 72 ч). Перед использованием определяют концентрацию взвешенных твердых частиц (например, в соответствии с [4]). При необходимости ил концентрируют путем осаждения так, чтобы объем ила, добавляемый в ходе анализа при испытании, был минимальным. Добавляют объем, необходимый для получения концентрации взвешенных твердых частиц в окончательной смеси, составляющей от 30 до 1000 мг/л. Если необходимо определить углеродный баланс (см. приложение C), рекомендуется использовать инокулят с концентрацией твердых частиц 30 мг/л. Поскольку присутствие твердых веществ способно затруднять определение углеродного баланса, рекомендуется соблюдать следующую процедуру приготовления инокулята. Отбирают 500 мл активного ила и гомогенизируют в течение 2 мин на средней скорости в измельчителе или соответствующем высокоскоростном перемешивающем устройстве. Отстаивают инокулят до тех пор, пока надосадочная жидкость не будет содержать достаточное количество взвешенных частиц, однако в любом случае продолжительность отстаивания должна быть не менее 30 мин. Декантируют достаточный объем надосадочной жидкости и переносят в колбы так, чтобы объемная концентрация в испытательной среде составляла от 1% до 5%. Следует избегать переноса частиц ила. Инокулят может быть подвергнут предварительному кондиционированию, но, как правило, предварительно кондиционированный инокулят для испытаний не используют, особенно в случае, когда процесс биоразложения осуществляется в естественных условиях окружающей среды. В зависимости от цели испытания допускается использование инокулята, подвергнутого предварительному воздействию, при условии, что это указывается в протоколе испытаний (степень биоразложения = x% с использованием инокулята, подвергнутого предварительному воздействию) с подробным описанием метода воздействия. Инокулят, подвергнутый предварительному воздействию, может быть получен при проведении соответствующих лабораторных испытаний на биоразложение (см. ISO/TR 15462), осуществляемых в различных условиях, или из проб, отобранных в местах с определенными условиями окружающей среды (например, загрязненные участки или промышленные очистные сооружения). #### 8.4 Проведение испытания Для проведения испытаний требуется следующее количество емкостей: a) три колбы для испытуемого материала (условное обозначение FT); b) три колбы для контрольной пробы (условное обозначение FB); c) две колбы для контроля активности инокулята с использованием контрольного материала (условное обозначение FC). При проведении скрининговых испытаний вместо трех допускается использовать две колбы для испытуемого материала - контрольной пробы и контрольного материала. В случае необходимости также используется: d) одна колба для оценки возможности возникновения абиотического разложения или изменений небиологического характера в испытуемом материале (условное обозначение FS). Раствор для испытания в FS следует стерилизовать, например, в автоклаве или путем добавления подходящего неорганического токсичного соединения, чтобы предотвратить микробную активность. Используют, например, 5 мл/л раствора хлорида ртути (II) HgCl2 концентрацией 10 г/л. При необходимости добавляют такое же количество токсичного вещества во время испытания; e) одна колба для отрицательного контроля (условное обозначение FN) с использованием небиоразлагаемого полимерного материала (например, полиэтилена), находящегося в той же форме, что и испытуемый материал; f) одна колба для оценки ингибирующего действия, которое может оказывать испытуемый материал (условное обозначение FI). Следует учитывать, что соотношение углерода в испытуемом и контрольном материале и азота в среде C:N должно быть не менее 40:1. При необходимости добавляют азот. В колбы добавляют необходимое количество испытательной среды (см. 6.2) и инокулята (см. 8.3) в соответствии с таблицей 1. Таблица 1 Окончательное распределение испытуемого и контрольного материалов | | Колба | Испытуемый материал | Эталонный материал | Испытуемая почва | | --- | --- | --- | --- | --- | | FT | Испытуемый материал | + | - | + | | FB | Контрольная проба | - | - | + | | FC | Оценка активности инокулята | - | + | + | | FS | Оценка абиотического разложения
(не является обязательной) | + | - | - | | FI | Оценка ингибирования (не является обязательной) | + | + | + | | FN | Отрицательный контроль | - | + | + | Колбы соединяют с системой, обеспечивающей получение воздуха, не содержащего CO2 (см. приложение A). При заданной температуре испытания (см. раздел 5) выполняют инкубацию и аэрируют колбы в течение 24 ч, чтобы очистить систему от диоксида углерода. При более высоких температурах необходимо предотвращать попадание или потерю жидкости путем использования соответствующего оборудования. Осуществляют перемешивание в течение всего периода испытания с использованием магнитной мешалки или устройства для встряхивания. Если наблюдается чрезмерное вспенивание, продувание воздухом заменяют аэрацией в верхней части с перемешиванием. По завершении процесса предварительной аэрации подсоединяют выходное отверстие для воздуха каждой колбы к системе улавливания или измерения диоксида углерода. Если необходимо определить углеродный баланс (см. приложение C), то в начале и в конце периода инкубации удаляют известный достаточный объем инокулированной испытательной среды из каждой колбы или из дополнительных колб для определения DOC и биомассы. Объем удаленной испытательной среды учитывают при регулировании окончательного объема и при вычислении результатов испытания. Испытуемый материал (см. 8.1), контрольный материал и материал для отрицательного контроля (см. 8.2) добавляют в соответствующие колбы согласно таблице 1 и начинают испытание, обеспечивая достаточное количество воздуха, не содержащего CO2, в колбах в процессе испытания путем барботирования с рекомендуемой скоростью от 50 до 100 мл/мин. Количество диоксида углерода измеряют через равные промежутки времени, зависящие от интенсивности выделения диоксида углерода, используя подходящий метод с необходимой точностью измерений (см. приложение B). При достижении постоянного уровня выделяемого диоксида углерода (достижении фазы плато) и прекращении процесса биоразложения испытание считают завершенным. Период испытания обычно не должен превышать 2 мес. Однако если значительное биоразложение все же наблюдается и фаза плато не достигнута по истечении этого периода времени, то испытание можно продлить, но не более чем до 6 мес. Если продолжительность испытания превышает установленный срок, необходимо провести анализ испытания с технической точки зрения (например, проверить герметичность сосудов для испытания и их соединения и исключить попадание диоксида углерода и его утечки). В последний день испытания измеряют уровень pH, подкисляют содержимое всех сосудов, используя 1 мл концентрированной соляной кислоты, для разложения карбонатов и бикарбонатов, а также выполняют продувание для удаления диоксида углерода. Продолжают аэрацию в течение еще 24 ч и измеряют количество выделяемого диоксида углерода в каждой серии колб (FT, FB, FC и т.д.). 9 Вычисление и оформление результатов #### 9.1 Вычисление ##### 9.1.1 Теоретическое количество диоксида углерода, выделяемого испытуемым материалом Теоретическое количество выделяемого диоксида углерода (ThCO2), мг, вычисляют по формуле (1) , (1) где m - масса испытуемого материала, вводимого в испытательную систему, мг; XC - содержание углерода в испытуемом материале, определенное по химической формуле или рассчитанное путем элементного анализа и выраженное как массовая доля; 44 - молекулярная масса диоксида углерода; 12 - молекулярная масса углерода. Аналогично вычисляют теоретическое количество диоксида углерода, выделяемого контрольным материалом в колбе FC и смесью испытуемого и контрольного материалов в колбе FI. ##### 9.1.2 Степень биоразложения Вычисляют степень биоразложения Dt, %, для каждой колбы FT исходя из количества диоксида углерода, выделившегося в течение каждого интервала времени, по формуле (2): , (2) где - количество диоксида углерода, выделившегося из колбы с исследуемым образцом FT за период от начала испытания до времени t, мг; - количество диоксида углерода, выделившегося из колбы с контрольной пробой FB за период от начала испытаний до времени t, мг; ThCO2 - теоретическое количество диоксида углерода, выделяемого испытуемым материалом, г. Если возможно, вычисляют среднее значение степени биоразложения для трех колб данной серии. Аналогично вычисляют степень биоразложения контрольного материала в колбе FC для оценки активности инокулята, а также при необходимости степень биоразложения смеси испытуемого материала и контрольного материала в колбе FI для оценки ингибирования, степень биоразложения испытуемого материала в колбе FS для оценки абиотического разложения и в колбе FN для отрицательного контроля. Если необходимо рассчитать углеродный баланс, вычисляют степень биоразложения испытуемого материала с использованием значений количества выделяемого диоксида углерода и содержания углерода в биомассе, образовавшейся во время испытания (см. приложение C). #### 9.2 Выражение и интерпретация результатов Составляют таблицу, в которой приводят количество выделившегося диоксида углерода и степень биоразложения, %, для каждого промежутка времени, в который проводились измерения, и для каждой колбы для испытаний. Для каждой колбы строят график зависимости количества выделившегося диоксида углерода и график зависимости степени биоразложения, %, от времени. Если для трех колб были получены сопоставимые результаты, для построения графика используют средние значения. Степень биоразложения испытуемого материала определяют как максимальный уровень биоразложения, соответствующий среднему значению в фазе плато на графике биоразложения, или наибольшее значение, т.е. значение, до достижения которого кривая убывает, а после достижения начинает медленно возрастать в фазе плато. Если углеродный баланс был определен, то результат данного определения характеризует полную степень биоразложения. Способность к смачиванию испытуемого материала и форма его частиц могут оказывать влияние на результаты испытаний, вследствие чего процедура испытания может быть ограничена сравнением пластиков, имеющих аналогичную химическую структуру. Наличие сведений о токсичности испытуемого материала может быть полезным при интерпретации результатов испытаний, указывающих на низкую биоразлагаемость. 10 Достоверность результатов испытаний Результаты испытаний считают достоверными, если: a) степень биоразложения контрольного материала (колба для оценки активности инокулята FC) в конце испытания составляет более 60%; b) количество диоксида углерода, выделившегося из колб с контрольной пробой FB в конце испытания, не превышает верхнего предельного значения, полученного в результате испытаний (это значение зависит от количества инокулята и составляет, например, в случае 30 мг/л сухого вещества около 90 мг/л, как показали межлабораторные испытания); c) количество углекислого газа, выделившегося из трех колб с контрольной пробой FB и из трех колб с испытательным материалом FT, находится в пределах 20% от среднего значения на стадии плато или в конце испытания. Если в колбе FI (если выполнялась оценка ингибирования) степень биоразложения составляет менее 25% и не наблюдается значительного разложения испытуемого материала, то можно предположить, что испытуемый материал является ингибирующим. Если в колбе FS (если выполнялась оценка абиотического разложения) количество выделившегося диоксида углерода является существенным (составляет более 10%), это указывает на возможность протекания абиотических процессов разложения. Если использовалась колба FN (для отрицательного контроля), количество выделившегося диоксида углерода не должно быть существенным (составлять более 10%). Если вышеуказанные условия не выполнены, испытание повторяют, используя инокулят, прошедший предварительное кондиционирование или предварительную выдержку. 11 Протокол испытаний Протокол испытаний должен содержать: a) ссылку на настоящий стандарт; b) всю информацию, необходимую для идентификации испытуемого и контрольного материалов, в том числе TOC, ThCO2, химический состав и формулу (если известно), тип, форму частиц, количество/концентрацию в пробах; c) основные параметры испытания, в том числе испытуемый объем, используемую испытуемую среду, температуру инкубации и окончательный уровень pH; d) источник и количество инокулята, в том числе сведения о любом предварительном воздействии на инокулят; e) информацию о применяемых аналитических методах испытания, в том числе методы определения количества выделяемого диоксида углерода, TOC, DOC, а также определения биомассы; f) результаты испытаний, полученные для испытуемого и контрольного материалов (в форме графиков и таблиц), в том числе измеренное значение выделившегося диоксида углерода, степень биоразложения, %, значения указанных характеристик и графики их зависимости от времени; g) продолжительность фазы задержки и фазы разложения, максимальный уровень биоразложения, а также общую продолжительность испытания; h) любые отклонения от методики проведения испытания; i) любые наблюдаемые необычные признаки; j) дату проведения испытания; а также дополнительные сведения (при наличии): k) результаты оценки абиотического разложения FS, оценки ингибирования FI и отрицательного контроля FN; l) результаты определения углеродного баланса, включая, например: 1) количество углерода в испытуемом материале, окисленного до диоксида углерода; 2) повышение DOC в испытательной среде во время периода инкубации из-за присутствия растворимых в воде веществ; 3) повышение органического углерода в биомассе в процессе испытания; 4) содержание углерода в остаточных полимерных материалах в конце испытания; 5) суммарное измеренное количество углерода, выраженное в % от количества углерода, введенного в качестве испытуемого материала; m) колониеобразующие единицы (КОЕ/мл) в инокулированных испытуемых смесях; n) иные сведения, связанные с испытанием (например, начальная молекулярная масса пробы, молекулярная масса остаточных полимерных материалов). Приложение A (справочное) **ПРИНЦИП РАБОТЫ СИСТЕМЫ ДЛЯ ИЗМЕРЕНИЯ КОЛИЧЕСТВА** **ВЫДЕЛЯЕМОГО ДИОКСИДА УГЛЕРОДА (ПРИМЕР)** Колбы устанавливают последовательно, как показано на рисунке A.1, и соединяют друг с другом при помощи газонепроницаемых трубок. Через систему пропускают воздух, не содержащий CO2, со скоростью от 50 до 100 мл/мин при постоянном низком давлении. Подсчитывают пузырьки воздуха или используют подходящий регулятор расхода воздуха, чтобы контролировать скорость потока воздуха. Используют искусственный воздух без содержания CO2 или сжатый воздух. В случае применения сжатого воздуха удаляют CO2, пропуская воздух через колбу, содержащую сухую натровую известь, или как минимум через две колбы для промывания газа, содержащие, например, 500 мл водного раствора гидроксида калия концентрацией 10 моль/л. Для предотвращения переноса жидкости между индикатором и следующей колбой может быть установлена пустая колба. Если происходит биоразложение, то CO2 образуется в колбе для испытаний и абсорбируется в последующих колбах для поглощения, как описано в приложении B. 1 - сжатый воздух; 2 - регулятор расхода воздуха; 3 - ловушка диоксида углерода (например, две промывные колбы, содержащие щелочь); 4 - индикатор диоксида углерода Ba(OH)2; 5 - колба для испытаний; 6 - мешалка Рисунок A.1 - Пример системы для определения количества выделяемого диоксида углерода Приложение B (справочное) **ПРИМЕРЫ МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОЛИЧЕСТВА** **ВЫДЕЛЯЕМОГО ДИОКСИДА УГЛЕРОДА** B.1 Определение количества CO2 путем измерения растворенного неорганического углерода Выделяемый диоксид углерода абсорбируют в растворе гидроксида натрия NaOH и определяют его количество, выраженное как количество растворенного неорганического углерода (DIC), например, при помощи анализатора DOC без сжигания. Готовят раствор NaOH в деионизированной воде концентрацией 0,05 моль/л. Определяют DIC данного раствора и используют данное значение при вычислении количества выделяемого CO2 для контрольной пробы. К колбе для испытания последовательно присоединяют две колбы для поглощения, каждая из которых содержит 100 мл раствора NaOH. Закрывают выпускной клапан последней колбы небольшим сифоном, чтобы предотвратить попадание CO2 из воздуха в раствор NaOH. Когда будет определено количество CO2, извлекают колбу для поглощения, находящуюся рядом с колбой для испытания, и отбирают пробу объемом, достаточным для определения DIC (например, 10 мл). Колбу заменяют на другую и добавляют новую колбу со свежеприготовленным раствором NaOH. В день завершения испытания измеряют DIC в обеих колбах после окисления испытуемого раствора. Количество выделившегося CO2 определяют по формуле (B.1): , (B.1) где m(CO2)T - масса выделяемого CO2, мг; DICT - измеренное значение DIC, мг; DICB - DIC контрольной пробы, определяемый для раствора NaOH, мг; 3,67 - отношение молекулярной массы CO2 (44) к атомной массе углерода (12); 10 - поправочный коэффициент, учитывающий, что было использовано 100 мл раствора NaOH. B.2 Титриметрический метод с использованием раствора гидроксида бария Выделяемый CO2 вступает в реакцию с гидроксидом бария Ba(OH)2 с образованием осадка карбоната бария BaCO3 (см. формулу B.2). Количество выделяемого CO2 определяется методом титрования оставшегося Ba(OH)2 соляной кислотой HCl (см. формулу B.3): , (B.2) . (B.3) 4,0 г Ba(OH)2·8H2O растворяют в деионизированной или дистиллированной воде и доводят объем раствора до 1000 мл, чтобы получить раствор концентрацией 0,012 5 моль/л. Рекомендуется приготавливать достаточное количество раствора для каждой серии испытаний, например 5 л. Раствор пропускают через фильтр, для того чтобы освободить от твердых веществ, и определяют точную концентрацию остатка гидроксида бария методом титрования HCl. Для определения конечной точки титрования применяют индикатор фенолфталеин либо автоматический титратор. Чистый раствор хранят в закрытой колбе для избежания попадания CO2 из воздуха. 50 мл раствора HCl концентрацией 1 моль/л и плотностью 36,5 г/л разбавляют деионизированной или дистиллированной водой в количестве, необходимом для получения раствора объемом 1000 мл и концентрацией 0,05 моль/л. В начале испытания в каждую колбу для поглощения вносят по 100 мл раствора Ba(OH)2. В зависимости от природы и количества испытуемого материала применяют модификацию, подходящую для улавливаемого объема. Колбу, находящуюся ближе к испытуемой емкости, периодически извлекают. Колбу извлекают по мере необходимости, например когда в первой колбе происходит помутнение, а во второй - еще не успел образоваться осадок BaCO3. На начальном этапе испытания титрование рекомендуется осуществлять с периодичностью один раз в двое суток, а при достижении фазы плато - каждые пятые сутки. После извлечения колбы для поглощения незамедлительно закрывают ее заглушкой, чтобы избежать попадания CO2 из воздуха. Две оставшиеся колбы перемещают на одну позицию ближе к колбе для испытания и в конце серии колб добавляют новую, наполненную свежеприготовленным раствором Ba(OH)2. При проведении испытаний большей продолжительностью определяют точную концентрацию раствора. Манипуляции со всеми колбами, содержащими испытуемый материал, контрольный материал, контрольную пробу, колбу для оценки ингибирования и колбу для оценки инокулята, должны осуществляться аналогичным образом. После извлечения колб незамедлительно приступают к титрованию двух или трех порций аликвоты раствора Ba(OH)2 раствором HCl. Записывают объемы раствора HCl, необходимые для нейтрализации. Вычисляют массу CO2, оказавшегося в колбе для поглощения, по формуле (B.4): , (B.4) где m - масса CO2, оказавшегося в колбе для поглощения, мг; cA - точная концентрация раствора HCl, моль/л; cB - точная концентрация раствора Ba(OH)2, моль/л; VBO - объем раствора Ba(OH)2 в начале испытания, мл; VBt - объем раствора Ba(OH)2 в момент времени t перед титрованием, мл; VBZ - объем аликвот раствора Ba(OH)2, используемый для титрования, мл; VA - объем раствора HCl, израсходованный (пошедший) на титрование, мл; 22 - половина молекулярной массы CO2. При условии соблюдения следующих условий: - объем раствора Ba(OH)2 до и после поглощения составляет ровно 100 мл; - для титрования используется весь раствор (VBO = VBt = VBZ); - концентрация cB раствора Ba(OH)2 составляет ровно 0,012 5 моль/л; - концентрация cA раствора HCl составляет ровно 0,05 моль/л; используют формулу (B.5): m = 1,1·(50 - VA). (B.5) Приложение C (справочное) *ПРИМЕР* ОПРЕДЕЛЕНИЯ УГЛЕРОДНОГО БАЛАНСА C.1 Сущность метода Пластмассы обычно имеют более сложный состав, чем вещества с низкими молекулярными массами. Для характеристики и количественного определения биоразлагаемости зачастую недостаточно определить количество выделившегося CO2 или значение BOD. В процессе биоразложения с участием микроорганизмов происходит формирование новой биомассы, в результате которого часть углерода в испытуемом материале преобразуется в биомассу, но при этом не подвергается биохимическому окислению. Поэтому такие аналитические показатели, как количество выделившегося CO2 и значение BOD, даже при условии полного биоразложения испытуемого материала, как правило, не совпадают на 100% со своими теоретическими значениями, вследствие чего результаты испытаний способны ложно указывать на недостаточное биоразложение. В подобных случаях для подтверждения полной биоразлагаемости материалов определяют общий углеродный баланс в соответствии с указаниями, приведенными в настоящем приложении. Определение общего углеродного баланса основано на суммировании значений, соответствующих измеренному количеству: углерода, выделившегося в форме диоксида углерода, углерода, вошедшего в состав новой биомассы, углерода, преобразованного в растворимые в воде органические метаболиты, углерода, определенного как DOC, и остаточного углерода, находящегося в составе неразложившегося полимерного материала. Полученную сумму значений, соответствующих количеству углерода, сравнивают с количеством углерода, введенного в испытательную систему. C.2 Проведение испытания Определяют количество выделившегося диоксида углерода в соответствии с 8.4. Отбирают пробы инокулированной среды в начале испытания, перед добавлением испытуемого материала и в конце периода инкубации. Отбор проб необходимо проводить надлежащим образом, чтобы получить представительные пробы. Пробы пропускают через мембранный фильтр или центрифугируют их со скоростью примерно 40 000 м·с-2. Для каждой пробы определяют количество биомассы в фильтрате или центрифугате с применением соответствующих методов, например метода измерения белка. Определяют или оценивают количество углерода в биомассе и по разности полученных значений рассчитывают увеличение количества органического углерода в биомассе. В фильтрате каждой пробы определяют DOC в соответствии с ISO 8245 и рассчитывают увеличение количества органического углерода. Если возможно, определяют вещества, образующие DOC, чтобы подтвердить образование растворимых в воде метаболитов. Определяют количество углерода в остаточных полимерах в конце испытания, используя в полном объеме каждую оставшуюся пробу. Как правило, это сложная процедура, и ее можно выполнить либо напрямую, если имеется возможность проведения анализа, специфичного для полимеров (см. приложение D), либо косвенно. В первом случае извлекают и взвешивают остаточные полимеры и по их известному составу вычисляют количество углерода. Один из возможных методов косвенного определения заключается в промывании, сушке, взвешивании остатка и определении общего органического углерода (TOC). Затем от значения TOC отнимают количество углерода в биомассе (см. выше), чтобы получить количество углерода в остаточных полимерах. Другой метод заключается во взвешивании остатка и его последующей обработке с использованием метода, который оказывает разрушающее действие на биомассу, но не на полимеры (что должно быть проверено заранее). Используют, например, гипохлорит натрия для удаления растворимой части и снова взвешивают пробу. Когда есть основание полагать, что вся биомасса была полностью удалена, по значению полученной массы полимера вычисляют содержание полимера в остатке. C.3 Расчет углеродного баланса Количество биохимически окисленного углерода , мг/л, в испытуемом материале, который вносят в испытательную систему (содержание углерода CMAT), вычисляют по степени биоразложения Dt, определенной при испытании в респирометре (см. 9.1.2), по формуле (C.1): , (C.1) Увеличение содержания углерода в биомассе в колбах, содержащих испытуемый материал CBIO, мг/л, определяют путем сравнения биомасс в начале и конце периода инкубации по разности измеренного или рассчитанного количества углерода в биомассе CBs и CBe по формуле (C.2): CBIO = CBs - CBe. (C.2) Увеличение значения DOC в период инкубации CDOC, мг/л, определяют по разности концентраций в конце CDs и в начале CDe испытания по формуле (C.3): CDOC = CDe - CDs. (C.3) Определяют количество органического углерода в остаточных полимерах в конце испытания CPOL. Вычисляют различные количества преобразованного углерода, % от внесенного углерода CMAT, и суммируют эти значения, чтобы получить расчетное количество углерода CCALC, %, по формуле (C.4): **CРАСЧ = CBOD + CBIO + CDOC + CPOL. (C.4)** C.4 Углеродный баланс: Введение испытуемого материала: CMAT = 600 мг/л = 334,8 мг/л углерода. Степень биоразложения: Dr = 78%. | Параметр | CBs | CBe | CBIO | CDs | CDe | CDOC | | | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | | мг/л | 3,2 | 61,0 | 57,8 | 2,0 | 22,0 | 20,0 | 261 | | % CMAT | | | 17,2 | | | 6,0 | 78 | Расчетный баланс углерода: CCALC = 78% + 17% + 6% = 101% CMAT. Этот пример приведен из [9]. Приложение D (справочное) *ПРИМЕР* ОПРЕДЕЛЕНИЯ КОЛИЧЕСТВА И МОЛЕКУЛЯРНОЙ МАССЫ **НЕРАСТВОРИМОГО В ВОДЕ ОСТАТКА ПОЛИМЕРНОГО МАТЕРИАЛА** **В КОНЦЕ ИСПЫТАНИЯ НА БИОРАЗЛОЖЕНИЕ** Рекомендуется применять процедуру определения количества и молекулярной массы остатка полимерного материала в конце испытания на биоразложение. Допускается применение приведенного ниже или другого подходящего метода анализа полимеров, нерастворимых в воде и растворимых в органических растворителях, которые не смешиваются с водой. a) Испытуемую смесь помещают в отдельную воронку, добавляют подходящий органический растворитель и встряхивают в течение 10 - 20 мин, чтобы извлечь оставшиеся полимеры. Слой органического растворителя отделяют от водного. Добавляют свежий растворитель и повторяют процедуру. b) Объединяют органические экстракты и выпаривают растворитель до тех пор, пока он полностью не растворится. Растворяют твердую пробу в соответствующем объеме подходящего элюента. c) Необходимое количество полученного раствора при помощи шприца вводят в аппарат для высокоэффективной жидкостной хроматографии (ВЭЖХ), имеющий колонку, заполненную гелем для эксклюзионной хроматографии. Начинают анализ и записывают хроматограмму. d) Количество полимерного материала определяют при помощи калибровочной кривой. e) Определяют молекулярную массу полимерного материала путем введения в хроматограф того же полимера или полимеров с аналогичной структурой и известной молекулярной массой. Зависимость времени удерживания от молекулярной массы получают из итоговой хроматограммы. Используя данную зависимость, определяют молекулярную массу. Абсолютная молекулярная масса испытуемого полимерного материала также может быть определена методом ВЭЖХ с использованием комбинированного детектора малоуглового лазерного рассеяния света (LALLS) и дифференциального рефрактометрического детектора (RI). Приложение ДА (справочное) **СВЕДЕНИЯ О СООТВЕТСТВИИ ССЫЛОЧНОГО МЕЖДУНАРОДНОГО СТАНДАРТА** **МЕЖГОСУДАРСТВЕННОМУ СТАНДАРТУ** Таблица ДА.1
Обозначение ссылочного международного стандартаСтепень соответствияОбозначение и наименование соответствующего межгосударственного стандарта
ISO 8245NEQГОСТ 31958-2012 "Вода. Методы определения содержания общего и растворенного органического углерода"
Примечание - В настоящей таблице использовано следующее условное обозначение степени соответствия стандарта:
- NEQ - неэквивалентный стандарт.
**БИБЛИОГРАФИЯ**
[1]ISO 8192Water quality - Test for inhibition of oxygen consumption by activated sludge for carbonaceous and ammonium oxidation (Качество воды. Испытание на ингибирование поглощения кислорода активированным илом для окисления углерода и аммония)
[2]ISO 9439 <1>Water quality - Evaluation of ultimate aerobic biodegradability of organic compounds in aqueous medium - Carbon dioxide evolution test (Качество воды. Оценка способности органических соединений к конечному аэробному биологическому разложению в водной среде. Метод анализа выделенного диоксида углерода)
[3]ISO 10634 <2>Water quality - Preparation and treatment of poorly water-soluble organic compounds for the subsequent evaluation of their biodegradability in an aqueous medium (Качество воды. Подготовка и обработка малорастворимых в воде органических соединений для последующей оценки их биоразложения в водной среде)
[4]ISO 11923Water quality - Determination of suspended solids by filtration through glass-fibre filters (Качество воды. Определение взвешенных твердых частиц путем фильтрации через стекловолоконные фильтры)
[5]ISO/TR 15462 <3>Water quality - Selection of tests for biodegradability (Качество воды. Выбор испытаний для оценки способности к биологическому разложению)
[6]ISO 17556:2012Plastics - Determination of the ultimate aerobic biodegradability of plastic materials in soil by measuring the oxygen demand in a respirometer or the amount of carbon dioxide evolved (Пластмассы. Определение полного аэробного биологического разложения пластмасс в почве путем измерения потребления кислорода в респирометре или количества выделяемого диоксида углерода)
[7]ASTM D 3536-91 <4>Molecular Weight Averages and Molecular Weight Distribution by Liquid Exclusion Chromatography (GEL Permeation Chromatography - GPC) (Усредненные молекулярные массы и молекулярно-массовое распределение методом жидкостной эксклюзионной хроматографии (гельпроникающая хроматография - GPC)
[8]R.-J., Augusta J., Pantke M. An Interlaboratory Investigation into Biodegradation of Plastics; Part 1: A Modified Sturm Test. Material and Organisms. 1992, 27 (3) pp. 179 - 189 (Межлабораторное исследование биоразложения пластмасс. Часть 1. Модифицированный метод Штурма. Материал и организмы)
[9]P., Mueller W.R., Bardtke D. Assessing the Biodegradation Potential of Polymers in Screening and Long-Term Test Systems. J. Environ. Polym. Degrad. 1995, 3 pp. 133 - 143 (Оценка способности к биоразложению полимеров в системах скрининговых и длительных испытаний)
[10]P. (1994) Screening-Testmethoden zur Abbaubarkeit von Kunststoffen unter aeroben und anaeroben Bedingungen, Dissertation, Stuttgart University Bauingenieurwesen, Stuttgarter Berichte zur Abfallwirtschaft, 59, Erich Schmidt Verlag, Berlin (Методы скрининговых испытаний на способность пластмасс к разложению в аэробных и анаэробных условиях)
[11]Sperandio A. and P. Bestimmung der Gesamtproteine als Biomasse-Parameter in Kulturen und auf aus Bio-Reaktoren, gwf Wasser. Abwasser. 1993, 134 pp. 482 - 485 (Определение общего количества белка как характеристики биомассы в водных культурах и на материалах-носителях из биореакторов)
[12]Urstadt S., Augusta J., R.-J., Deckwer W.-D. Calculation of Carbon Balances for the Evaluation of Biodegradability of Polymers. J. Environ. Polym. Degrad. 1995, 3 (3) pp. 121 - 131 (Расчет углеродных балансов для оценки способности полимеров к биоразложению)
--- <1> В Российской Федерации действует ГОСТ Р ИСО 9439-2016 "Качество воды. Оценка биоразлагаемости органических соединений в водной среде. Метод оценки полной аэробной биоразлагаемости путем измерения количества выделенного диоксида углерода". <2> В Российской Федерации действует ГОСТ Р ИСО 10634-2024 "Качество воды. Оценка биоразлагаемости органических соединений в водной среде. Подготовка и обработка малорастворимых в воде органических соединений для последующей оценки". <3> В Российской Федерации действует ГОСТ Р 56989-2016 "Качество воды. Оценка биоразлагаемости органических соединений в водной среде. Выбор метода оценки". <4> Отменен. Действует ASTM D 5296-19 "Стандартный метод определения средней молекулярной массы и молекулярно-массового распределения полистирола методом высокоэффективной эксклюзионной хроматографии".
УДК 678.5:691.175:006.354МКС 83.080IDT
Ключевые слова: пластмассы, определение способности к аэробному биоразложению, диоксид углерода, водная среда, углеродный баланс
--- ## Иллюстрации $ThCO_{2} = m \cdot X_{C} \cdot \frac{44}{12}$ $D_{t} = \frac{\sum (CO_{2})_{T} - \sum (CO_{2})_{B}}{ThCO_{2}} \cdot 100$ $\sum (CO_{2})_{T}$ $\sum (CO_{2})_{B}$ ![](https://i.bukva.ai/jAWmKcPz/img_0.png) $m(CO_{2})_{T} = \frac{(DIC_{T} - DIC_{B}) \cdot 3,67}{10}$ $CO_{2} + Ba(OH)_{2} \rightarrow BaCO_{3} + H_{2}O$ $Ba(OH)_{2} + 2HCl \rightarrow BaCl_{2} + 2H_{2}O$ $m = (\frac{2c_{B} \cdot V_{BO}}{c_{A}} - V_{A} \cdot \frac{V_{Bt}}{V_{BZ}}) \cdot c_{A} \cdot 22$ $C_{CO_{2}}$ $C_{CO_{2}} = \frac{C_{MAT} \cdot D_{t}}{100}$ $\text{поли}(\beta - \text{гидроксибутирата})$ $C_{CO_{2}}$ - `Müller` - `Püchner` - `Püchner` - `Fakultät` - `für` - `Püchner` - `wäßrigen` - `Trägermaterialien` - `Müller`