Документ 24355

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Тополя почки Populi Gemmae	ФС.2.5.0042.15 Вводится впервые

Собранные с конца осени, зимой или ранней весной до начала распускания и высушенные боковые (пазушные) и верхушечные (терминальные) почки тополя черного — Populus nigra L., тополя бальзамического — Populus balsamifera L., тополя канадского — Populus canadensis Marsh., тополя лавролистного — Populus laurifolia Ledeb. и тополя душистого — Populus suaveolens Fisch., сем. ивовых — Salicaceae.

ПОДЛИННОСТЬ

Внешние признаки. Цельное сырье. При рассмотрении под лупой (10x) или стереомикроскопом (16x) почки вытянутые, конические, заостренные с округлым основанием, на ощупь клейкие. Верхушечные (терминальные) почки имеют яйцевидно-удлиненную форму и заостренную верхушку. Боковые (пазушные) почки имеют коническую форму с округлым основанием. Длина почек от 7 до 25 мм, в поперечнике — от 2 до 9 мм. С поверхности — почки гладкие, блестящие, у краев чешуи — смолистые. Чешуи располагаются по спирали, нижние коричневого цвета — мелкие, округлые, жесткие; верхние — более светлые с зеленоватым оттенком, крупные овальные, конически заостренные. Верхушечные почки имеют 9-12 кроющих чешуи, боковые — 5-7. Края чешуи прилегают плотно, кончики (верхушки) нижних и средних чешуи слегка отогнуты.

Запах сладковатый, смолистый, усиливающийся при разламывании почки. Вкус водного извлечения характерный, жгуче-горький.

Микроскопические признаки. При рассмотрении чешуи почки с поверхности должно быть видно, что клетки эпидермиса наружной стороны слегка вытянутые, с неравномерно утолщенными клеточными стенками и простыми порами, а клетки эпидермиса внутренней стороны — с тонкими прямыми стенками. На верхушке и по краям чешуи на клетках наружного эпидермиса встречаются простые одноклеточные толстостенные кутинизированные, часто обломанные волоски с гладкой поверхностью.

На поперечном срезе чешуи должен быть виден однослойный наружный эпидермис со слегка вытянутыми относительно продольной оси чешуи округлыми или шлемовидными клетками, стенки которых покрыты толстым слоем кутикулы и имеют четковидные утолщения. Внутренний эпидермис чешуи также однослойный, состоит из столбчатых клеток с тонкими стенками, некоторые клетки заполнены желтоватого цвета содержимым. Клетки внутреннего эпидермиса по краю чешуи — одревесневшие.

Под наружным и внутренним эпидермисом располагается пробка, представленная радиальными рядами клеток филлемы. Наиболее развита пробка в нижних чешуях, а также в верхушках верхних чешуи и центральной наружной части средних и верхних чешуи. У верхних чешуи встречается крайне слабо развитая (1-2 ряда клеток) наружная пробка, а внутренняя — часто отсутствует.

Основная ткань чешуи — рыхлая паренхима, состоящая из клеток с коричневым содержимым. В верхушках чешуи клетки паренхимы одревесневшие. В основной паренхиме чешуи встречаются группы склереид и друзы оксалата кальция.

Проводящие пучки — неполные и представлены в нижней и средней части чешуи трахеидами; в верхушках чешуи проводящие пучки отсутствуют.

Рисунок — Тополя почки. 1 — фрагмент эпидермиса чешуи (400x); 2 — фрагмент поперечного среза покровной чешуи: кутикула (а), гиподерма с пигментом (б), паренхима (в) (400x); 3 — простые одноклеточные волоски (400x); 4 — фрагмент поперечного среза покровной чешуи: склереиды (а), друзы оксалата кальция (б)(400x)

Определение основных групп биологически активных веществ

Тонкослойная хроматография.

На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем силикагеля с флуоресцентным индикатором на алюминиевой подложке размером 10x15 см наносят 2 мкл испытуемого раствора (см. раздел «Количественное определение». Сумма фенольных соединений» приготовление раствора А испытуемого раствора) и 2 мкл раствора стандартного образца (CO) пиностробина (см. раздел «Количественное определение». Сумма фенольных соединений» приготовление раствора А CO пиностробина). Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение 1 ч смесью растворителей хлороформ-спирт 96% (9:1), и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80-90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают в УФ-свете при длине волны 254 нм.

На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции фиолетового цвета на уровне зоны адсорбции на хроматограмме раствора CO пиностробина.

Хроматограмму обрабатывают диазореактивом и выдерживают в сушильном шкафу при температуре 100-105 °С в течение 2 мин.

На хроматограмме испытуемого раствора должна обнаруживаться зона адсорбции желто-оранжевого цвета на уровне зоны адсорбции на хроматограмме раствора CO пиностробина, зона адсорбции оранжевого цвета ниже зоны пиностробина; допускается обнаружение других зон адсорбции.

ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Цельное сырье — не более 8%.

Зола общая. Цельное сырье — не более 10%.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Цельное сырье — не более 1%.

Посторонние примеси

Веточки, в том числе отделенные при анализе. Цельное сырье — не более 10%.

Почки, тронувшиеся в рост и распустившиеся. Цельное сырье — не более 2%.

Органическая примесь. Цельное сырье — не более 1%.

Минеральная примесь. Цельное сырье — не более 0,5%.

Тяжелые металлы. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Цельное сырье: сумма фенольных соединений в пересчете на пиностробин — не менее 15%.

Сумма фенольных соединений

Приготовление растворов.

Раствор CO пиностробина. Около 0,02 г (точная навеска) CO пиностробина помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, прибавляют 80 мл спирта 96%, растворяют при перемешивании на водяной бане при температуре 75 °С. Затем содержимое колбы охлаждают до комнатной температуры, доводят объем раствора спиртом 96% до метки и перемешивают (раствор А CO пиностробина).

1,0 мл раствора А CO пиностробина помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора спиртом 96% до метки и перемешивают (раствор Б CO пиностробина).

Срок годности растворов 30 сут.

Около 1,0 г (точная навеска) цельного сырья помещают в колбу с притертой пробкой вместимостью 100 мл и прибавляют 40 мл спирта 96%. Колбу закрывают пробкой, взвешивают с погрешностью г, присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 1 ч. Содержимое колбы охлаждают до комнатной температуры, взвешивают и доводят спиртом 96% до первоначальной массы. Извлечение фильтруют через бумажный фильтр (раствор А испытуемого раствора).

1,0 мл раствора А испытуемого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 50 мл, доводят объем раствора спиртом 96% до метки и перемешивают (раствор Б испытуемого раствора).

1,0 мл раствора Б испытуемого раствора помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора спиртом 96% до метки и перемешивают (раствор В испытуемого раствора).

Измеряют оптическую плотность раствора В испытуемого раствора на спектрофотометре при длине волны 289 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют спирт 96%.

Параллельно измеряют оптическую плотность раствора Б CO пиностробина в тех же условиях.

Содержание суммы фенольных соединений в пересчете на пиностробин в абсолютно сухом сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

,

где: A — оптическая плотность раствора В испытуемого раствора;

A0 — оптическая плотность раствора Б CO пиностробина;

a — навеска сырья, г;

a0 — навеска CO пиностробина, г;

P — содержание основного вещества в CO пиностробина, %;

W — влажность сырья, %.

Допускается содержание суммы флавоноидов в пересчете на пиностробин вычислять с использованием удельного показателя поглощения по формуле:

,

где: A — оптическая плотность раствора В испытуемого раствора;

• удельный показатель поглощения пиностробина при длине волны 289 нм, равный 700;

a — навеска сырья, г;

W — влажность сырья, %.

Упаковка, маркировка и транспортирование. В соответствии с требованиями ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Хранение. В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

---

Иллюстрации

\pm 0,01

X = \frac{A \cdot 40 \cdot 25 \cdot 50 \cdot a_{0} \cdot 1 \cdot P \cdot 100}{A_{0} \cdot a \cdot 1 \cdot 1 \cdot 100 \cdot 50 \cdot 100 \cdot (100 - W)} \cdot 100

X = \frac{A \cdot 40 \cdot 25 \cdot 50 \cdot 100}{A_{1\text{см}}^{1\%} \cdot a \cdot 1 \cdot 1 \cdot (100 - W)}

A_{1\text{см}}^{1\%}