Документ 24338

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Лопуха корни Arctii radices	ФС.2.5.0025.15 Взамен ФС 42-0143-05

Собранные осенью или ранней весной, очищенные от остатков стеблей, листьев, тонких корней, отмытые от земли, разрезанные на куски и высушенные корни двулетних травянистых растений лопуха большого — Arctium lappa L., лопуха паутинистого (войлочного) — Arctium tomentosum Mill., лопуха малого — Arctium minus {Mill.) Bernh., сем. астровых — Asteraceae.

ПОДЛИННОСТЬ

Внешние признаки. Цельное сырье. Цельные или разрезанные на куски корни, длиной 20-40 см (у лопуха большого и лопуха паутинистого) и 10-30 см (у лопуха малого), толщиной 2,0-3,5 см (у лопуха большого и лопуха паутинистого) и 1,5-2,5 см (у лопуха малого). Корни глубоко морщинистые, конусовидной формы, иногда спирально перекрученные. Излом неровный. Цвет снаружи темно-коричневый, на изломе желтовато-серый. На поперечном разрезе под лупой (10x) или стереомикроскопом (16x) видна небольшая светлая кора, темная линия камбия и широкая желтоватая древесина пористо-лучевого строения. Запах слабый, своеобразный. Вкус водного извлечения горьковатый.

Измельченное сырье. При рассмотрении измельченного сырья под лупой (10x) или стереомикроскопом (16x) видны кусочки различной формы, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 7 мм.

Цвет желтовато-серый, иногда с частично сохранившейся морщинистой пробкой коричневого или темно-коричневого цвета. Запах слабый, своеобразный. Вкус водного извлечения горьковатый.

Порошок. При рассмотрении порошка под лупой (10x) или стереомикроскопом (16x) видны кусочки корней, проходящие сквозь сито с отверстиями размером 2 мм. При рассмотрении сырья под лупой (10x) или стереомикроскопом (16x) видны бесформенные кусочки корней желтовато-серого цвета, иногда с частично сохранившейся морщинистой пробкой коричневого или темно-коричневого цвета.

Цвет порошка от желтовато-серого до темно-коричневого. Запах слабый, своеобразный. Вкус водного извлечения горьковатый.

Микроскопические признаки. Цельное сырье. На поперечном срезе корня видна покровная ткань — пробка, представленная 2-3 рядами клеток темно-коричневого цвета. Клетки паренхимы коры крупные, тангентально-вытянутые со слегка утолщенными оболочками. Среди них хорошо виден ровный ряд клеток, иногда со светлым содержимым, окрашивающимся Суданом III в оранжевый цвет. В ряду этих клеток встречаются секреторные образования (ходы) округлой или овальной формы с коричневым содержимым. Клетки паренхимы внутренней части коры округлые; у более крупных корней паренхима коры рыхлая. Проводящие элементы луба образуют небольшие участки конусовидной формы, разделенные сердцевинными лучами. Лубяные волокна многочисленные, с утолщенными стенками и широкой полостью, расположены большими и малыми группами или диффузно среди элементов флоэмы. Линия камбия четкая, состоит из нескольких рядов клеток. В древесине видны одиночные или радиально расположенные группы пористых и сетчатых широкополосных сосудов, окруженных трахеидами, отдельные группы трахеид; клетки паренхимы мелкие. Встречаются сосуды, заполненные коричневым содержимым. Сердцевинные лучи одно- или многорядные, клетки их округлые. Паренхимные клетки внутренней части коры, древесины и сердцевинных лучей содержат глыбки инулина (препарат без нагревания). Иногда паренхима древесины разрушена по сердцевинным лучам и имеет узкие радиально вытянутые полости, доходящие до линии камбия.

Рисунок — Лопуха корни. 1 — фрагмент поперечного среза (60x); 2 — фрагмент поперечного среза: клетки пробки, секреторный ход с коричневым содержимым, клетки паренхимы коры (200x); 3 — клетки паренхимы коры с глыбками инулина (300x); 4 — сосуды и трахеиды ксилемы, сердцевинные лучи (200x); 5 — сосуды ксилемы, клетки камбия, сердцевинный луч, клетки флоэмы (200x); 6 — волокна флоэмы (200x); 7-10 — фрагменты давленого препарата: 7 — клетки пробки (120x), 8 — секреторные ходы с коричневым содержимым в паренхиме коры (120x), 9 — проводящие элементы ксилемы (сосуды и трахеиды) (200x), 10 — лубяные волокна (200x)

Измельченное сырье. При рассмотрении «давленых» препаратов должны быть видны фрагменты пробки темно-коричневого цвета, фрагменты паренхимы коры с секреторными образованиями (ходами) с коричневым содержимым; фрагменты паренхимы с глыбками инулина; группы лубяных волокон с утолщенными стенками или их фрагменты; фрагменты пористых и сетчатых широкополосных сосудов и трахеид.

Порошок. При рассмотрении микропрепарата порошка должны быть видны фрагменты пробки темно-коричневого цвета, фрагменты паренхимы с глыбками инулина, фрагменты лубяных волокон с утолщенными стенками, фрагменты пористых и сетчатых широкополосных сосудов.

Определение основных групп биологически активных веществ

1. Тонкослойная хроматография.

Раствор стандартного образца (CO) фруктозы. Около 0,1 г фруктозы помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, растворяют в 85 мл воды, доводят объем раствора тем же растворителем до метки и перемешивают. Срок годности раствора 10 сут. при хранении в хорошо укупоренной упаковке, в прохладном защищенном от света месте.

Около 0,1 г сырья, измельченного до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм, помещают в колбу со шлифом вместимостью 50 мл и прибавляют 10 мл воды. Колбу присоединяют к обратному холодильнику, нагревают на плитке в течение 1 ч, периодически встряхивая для смывания частиц сырья со стенок. Затем колбу с содержимым охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через бумажный фильтр (испытуемый раствор).

На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем силикагеля на полимерной подложке размером 10x15 см наносят 10 мкл испытуемого раствора, рядом — 5 мкл раствора CO фруктозы. Пластинку с нанесенными пробами сушат на воздухе, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение 30 мин смесью растворителей н-бутанол-уксусная кислота-эфир-вода (9:6:3:1), и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80-90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают и сушат до удаления следов растворителей. Пластинку последовательно обрабатывают тимола раствором спиртовым 20%, затем серной кислотой разведенной 16% и выдерживают в сушильном шкафу при температуре 100-105 °С в течение 3 мин.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться 2 зоны адсорбции оранжево-красного цвета, одна из которых на уровне зоны на хроматограмме раствора CO фруктозы, другая — ниже; допускается обнаружение 3-5 других зон адсорбции оранжево-красного цвета (сахара).

2. При нанесении на поперечный срез корня лопуха (л.) большого, л. малого или л. пятнистого, на соскоб частиц измельченных корней или порошок 2-3 капель тимола раствора спиртового 20% и 1 капли серной кислоты концентрированной должно наблюдаться оранжево-красное окрашивание (инулин).

ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок — не более 14%.

Зола общая. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок — не более 11%.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок — не более 4,5%.

Измельченность сырья. Цельное сырье: частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, — не более 5%. Измельченное сырье: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 7 мм, — не более 5%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,5 мм, — не более 5%. Порошок: частиц, не проходящих сквозь сито с отверстиями размером 2 мм, — не более 5%; частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 0,18 мм, — не более 5%.

Посторонние примеси

Корни, потемневшие на изломе. Цельное сырье, измельченное сырье — не более 5%.

Остатки стеблей, в том числе отделенные при анализе, и другие части. Цельное сырье, измельченное сырье — не более 5%.

Органическая примесь. Цельное сырье, измельченное сырье — не более 0,5%.

Минеральная примесь. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок — не более 1%.

Тяжелые металлы. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Цельное сырье, измельченное сырье, порошок: сумма полисахаридов в пересчете на фруктозу — не менее 8%; экстрактивных веществ, извлекаемых водой, — не менее 35%.

Полисахариды

Приготовление растворов.

Хлористоводородной кислоты раствор 30%. Смешивают хлористоводородную кислоту концентрированную с водой в соотношении (5:1).

Резорцина раствор спиртовой 0,1%. 0,1 г резорцина растворяют в 70 мл спирта 96% в мерной колбе вместимостью 100 мл, доводят объем спиртом 96% до метки и перемешивают. Срок годности раствора не более 10 сут. при хранении в прохладном и защищенном от света месте.

Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 1 мм. Около 1,0 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в колбу со шлифом вместимостью 250 мл, прибавляют 60 мл воды и нагревают на плитке в течение 30 мин. Полученное извлечение охлаждают до комнатной температуры и фильтруют через бумажный фильтр в мерную колбу вместимостью 200 мл, избегая попадания сырья на фильтр. Экстракцию повторяют еще дважды, каждый раз используя по 30 мл воды: первый раз в течение 30 мин, а второй — в течение 15 мин.

Сырье переносят на бумажный фильтр, промывают колбу, а затем промывают остаток на фильтре, используя каждый раз по 10 мл воды. К полученному извлечению прибавляют 2 мл свинца ацетата раствора 10%, перемешивают и оставляют на 10 мин. Затем прибавляют 2 мл натрия фосфорнокислого двузамещенного раствора 5%, перемешивают и оставляют на 5 мин. Затем доводят объем раствора водой до метки и перемешивают. Раствор фильтруют через бумажный фильтр, отбрасывая первые 10-15 мл фильтрата (раствор А).

5,0 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 100 мл, доводят объем раствора водой до метки и перемешивают (раствор Б).

В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мл резорцина раствора спиртового 0,1%, прибавляют 5,0 мл раствора Б, доводят объем хлористоводородной кислоты раствором 30% до метки и перемешивают (раствор В).

В мерную колбу вместимостью 25 мл помещают 5 мл резорцина раствора спиртового 0,1%, прибавляют 5 мл воды, доводят объем хлористоводородной кислоты раствором 30% до метки и перемешивают (раствор сравнения).

Колбы с раствором сравнения и раствором В нагревают на водяной бане при температуре 80 °С в течение 20 мин, охлаждают, доводят объем извлечений в колбах тем же растворителем до метки.

Оптическую плотность раствора В измеряют на спектрофотометре при длине волны 482 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм относительно раствора сравнения.

Содержание суммы полисахаридов в пересчете на фруктозу вычисляют с использованием удельного показателя поглощения продуктов реакции фруктозы с резорцином в кислой среде, в абсолютно сухом сырье в процентах (X) по формуле:

,

где: A0 — оптическая плотность раствора В;

• удельный показатель поглощения продуктов реакции фруктозы с резорцином в кислой среде при длине волны 482 нм, равный 298;

a — навеска сырья, г;

W — влажность сырья, %.

Экстрактивные вещества. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания экстрактивных веществ в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах» (метод 1, экстрагент — вода).

Примечание. Определение суммы полисахаридов в пересчете на фруктозу и экстрактивных веществ, извлекаемых водой, проводят для сырья, предназначенного для производства лекарственных растительных препаратов (пачки, фильтр-пакеты).

Упаковка, маркировка и транспортирование. В соответствии с требованиями ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Хранение. В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

---

Иллюстрации

X = \frac{A \cdot 200 \cdot 100 \cdot 25 \cdot 100}{A_{1\text{см}}^{1\%} \cdot a \cdot 5 \cdot 5 \cdot (100 - W)}

A_{1\text{см}}^{1\%}