---
title: "Без названия"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/bez-nazvaniya-2549"
---
## Без названия
# Документ 24254
**МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ**
**ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ**
| Иммунодиффузия в геле | ОФС.1.8.2.0001.15
Вводится впервые |
| --- | --- |
Настоящая общая фармакопейная статья распространяется на метод, используемый для определения подлинности (видоспецифичности) лекарственных препаратов.
Принцип метода иммунодиффузии в геле заключается в том, что в результате реакции антигена с антителом, взятых в эквивалентном соотношении образуется преципитат в виде линий преципитации.
Подлинность (видоспецифичность) подтверждается образованием линии преципитации с антигенами сыворотки, содержащей только видоспецифичные белки (например, при подтверждении видоспецифичности препаратов крови человека с сывороткой, преципитирующей белки крови человека).
Проведение испытания
Обработанную спиртом стеклянную пластину размером 26x75 мм или 90x120 мм или стеклянную чашку Петри диаметром 100 мм (в соответствии с указаниями нормативной документации) помещают строго горизонтально на предметный столик. Расплавленный агар (температура () °С) наносят на стеклянную пластину (или стеклянную чашку Петри) в количестве, достаточном для формирования слоя толщиной 2,4-2,6 мм (например, на стекло размером 26x75 мм необходимо нанести 5,5-6,0 мл). Стеклянную пластину (или стеклянную чашку Петри) на 30-40 мин. помещают во влажную камеру эксикатора с небольшим количеством воды для застывания агара.
В застывшем агаровом геле по трафарету готовят лунки для реагентов (рис. 1), используя трубки-пробойники, изготовленные из латуни или нержавеющей стали, с заточенным концом со стороны внутреннего диаметра (2-3 мм) или используют стандартные штампы. Расстояние между внешними краями лунок должно быть равно 5-6 мм. Агаровые пробки из лунок аккуратно удаляют с помощью поперечно-срезанной пастеровской пипетки, не допуская отслаивания геля от стекла.
Лунки заполняют образцами в соответствии со схемой (рис. 1) в объеме, не превышающем объем лунки (объем вносимых образцов указывают в нормативной документации).
Рисунок 1. Схема нанесения реагентов
1 - сыворотка, преципитирующая видоспецифичные белки (например, белки крови человека при подтверждении видоспецифичности препаратов крови человека);
2 - стандартный реагент (например, контрольная сыворотка крови человека при подтверждении видоспецифичности препаратов крови человека);
3, 4, 6 - сыворотки, преципитирующие иные белки (например, белки крови лошади, свиньи, крупного рогатого скота при подтверждении видоспецифичности препаратов крови человека);
5 - отрицательный контроль (0,9% раствор натрия хлорида);
7 - исследуемый препарат.
Стеклянную пластину (или стеклянную чашку Петри) с агаровым гелем помещают во влажную камеру и выдерживают при комнатной температуре в течение 24 ч или при температуре () °С в течение 48 ч.
Учет результатов проводят визуально путем выявления линий преципитации. Подтверждением специфичности иммунодиффузии является наличие линии преципитации стандартного реагента и соответствующей сыворотки, преципитирующей видоспецифичные белки. Например, при подтверждении видоспецифичности препаратов крови человека должны выявляться линии преципитации сыворотки, преципитирующей белки крови человека, с исследуемым препаратом и с контрольной сывороткой крови человека (рис. 2).
Рисунок 2. Учет полученных результатов при подтверждении
видоспецифичности препаратов крови человека
1 - сыворотка, преципитирующая белки крови человека;
2 - контрольная сыворотка крови человека (стандартный реагент);
3 - сыворотка, преципитирующая белки крови лошади;
4 - сыворотка, преципитирующая белки крови свиньи;
5 - отрицательный контроль (0,9% раствор натрия хлорида);
6 - сыворотка, преципитирующая белки крови крупного рогатого скота;
7 - исследуемый препарат.
Примечание.
1. Приготовление агарового геля.
В химический стакан вместимостью 1000 мл вносят 12,5 г агара, добавляют 500 мл 0,9% раствора натрия хлорида и оставляют для набухания геля в течение 1 ч при комнатной температуре. Стакан с содержимым помещают в кипящую водяную баню и выдерживают до полного расплавления агара. Объем раствора геля доводят 0,9% раствором натрия хлорида до метки и перемешивают. Раствор агара фильтруют через марлю (2-3 слоя) и разливают во флаконы. Расплавленный агар должен быть прозрачным.
Срок годности охлажденного агарового геля 1 мес. при температуре хранения () °С.
Допустимо применение агарового геля иного состава в соответствии с указаниями в нормативной документации.
---
## Иллюстрации
$50 \pm 5$
$5 \pm 3$
$5 \pm 3$