---
title: "Без названия"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/bez-nazvaniya-2340"
---

## Без названия

# Документ 24045


<a id="p100001"></a>**МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ**

<a id="p100002"></a>**ОБЩАЯ ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ**


| <a id="p100003"></a>Валидация аналитических методик | <a id="p100004"></a>ОФС.1.1.0012.15<br>Вводится впервые |
| --- | --- |


<a id="p100005"></a>Валидация аналитической методики - это экспериментальное доказательство того, что методика пригодна для решения предполагаемых задач.
<a id="p100006"></a>Настоящая общая фармакопейная статья регламентирует характеристики аналитических методик, определяемые с целью их валидации, и соответствующие критерии пригодности валидируемых методик, предназначенных для контроля качества лекарственных средств: фармацевтических субстанций и лекарственных препаратов.
<a id="p100007"></a>Валидации подлежат методики количественного определения, в том числе методики определения примесей и методики определения предела содержания. Методики проверки подлинности подвергаются валидации при необходимости подтвердить их специфичность.
<a id="p100008"></a>При валидации проводится оценка аналитической методики по перечисленным ниже характеристикам, выбираемым с учетом типовых рекомендаций, приведенных в таблице:
- <a id="p100009"></a>специфичности (specificity);
- <a id="p100010"></a>пределу обнаружения (detection limit);
- <a id="p100011"></a>пределу количественного определения (quantitation limit);
- <a id="p100012"></a>аналитической области (range);
- <a id="p100013"></a>линейности (linearity);
- <a id="p100014"></a>правильности (trueness);
- <a id="p100015"></a>прецизионности (precision);
- <a id="p100016"></a>устойчивости (robustness).

<a id="p100017"></a>Таблица 1

<a id="p100018"></a>Характеристики методик, определяемые при валидации


<table>
<colgroup><col width="25%"><col width="15%"><col width="12%"><col width="12%"><col width="17%"><col width="17%"></colgroup>
<tr><td rowspan="3"><a id="p100019"></a>Наименование характеристики</td><td colspan="5"><a id="p100020"></a>Основные типы методик</td></tr>
<tr><td rowspan="2"><a id="p100021"></a>Испытание на подлинность</td><td colspan="2"><a id="p100022"></a>Посторонние примеси</td><td colspan="2"><a id="p100023"></a>Количественное определение</td></tr>
<tr><td><a id="p100024"></a>Количественные методики</td><td><a id="p100025"></a>Предел содержания</td><td><a id="p100026"></a>Основного действующего вещества, нормируемых компонентов</td><td><a id="p100027"></a>Действующего вещества в тесте "Растворение"</td></tr>
<tr><td><a id="p100028"></a>Специфичность &lt;**&gt;</td><td><a id="p100029"></a>Да</td><td><a id="p100030"></a>Да</td><td><a id="p100031"></a>Да</td><td><a id="p100032"></a>Да</td><td><a id="p100033"></a>Да</td></tr>
<tr><td><a id="p100034"></a>Предел обнаружения</td><td><a id="p100035"></a>Нет</td><td><a id="p100036"></a>Нет</td><td><a id="p100037"></a>Да</td><td><a id="p100038"></a>Нет</td><td><a id="p100039"></a>Нет</td></tr>
<tr><td><a id="p100040"></a>Предел количественного определения</td><td><a id="p100041"></a>Нет</td><td><a id="p100042"></a>Да</td><td><a id="p100043"></a>Нет</td><td><a id="p100044"></a>Нет</td><td><a id="p100045"></a>Нет</td></tr>
<tr><td><a id="p100046"></a>Аналитическая область</td><td><a id="p100047"></a>Нет</td><td><a id="p100048"></a>Да</td><td><a id="p100049"></a>Нет</td><td><a id="p100050"></a>Да</td><td><a id="p100051"></a>Да</td></tr>
<tr><td><a id="p100052"></a>Линейность</td><td><a id="p100053"></a>Нет</td><td><a id="p100054"></a>Да</td><td><a id="p100055"></a>Нет</td><td><a id="p100056"></a>Да</td><td><a id="p100057"></a>Да</td></tr>
<tr><td><a id="p100058"></a>Правильность</td><td><a id="p100059"></a>Нет</td><td><a id="p100060"></a>Да</td><td><a id="p100061"></a>&lt;*&gt;</td><td><a id="p100062"></a>Да</td><td><a id="p100063"></a>Да</td></tr>
<tr><td><a id="p100064"></a>Прецизионность:</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td><a id="p100065"></a>- повторяемость (сходимость)</td><td><a id="p100066"></a>Нет</td><td><a id="p100067"></a>Да</td><td><a id="p100068"></a>Нет</td><td><a id="p100069"></a>Да</td><td><a id="p100070"></a>Да</td></tr>
<tr><td><a id="p100071"></a>- промежуточная (внутрилабораторная) прецизионность</td><td><a id="p100072"></a>Нет</td><td><a id="p100073"></a>Да</td><td><a id="p100074"></a>Нет</td><td><a id="p100075"></a>Да</td><td><a id="p100076"></a>Нет</td></tr>
<tr><td><a id="p100077"></a>Устойчивость</td><td><a id="p100078"></a>Нет</td><td><a id="p100079"></a>&lt;*&gt;</td><td><a id="p100080"></a>&lt;*&gt;</td><td><a id="p100081"></a>&lt;*&gt;</td><td><a id="p100082"></a>&lt;*&gt;</td></tr>
</table>



<a id="p100083"></a>

---

<a id="p100084"></a><*> Может определяться при необходимости;
<a id="p100085"></a><**> Отсутствие специфичности одной аналитической методики может быть компенсировано использованием другой аналитической методики.

<a id="p100086"></a>Ревалидацию (повторную валидацию) методик проводят при изменении:
- <a id="p100087"></a>технологии получения объекта анализа;
- <a id="p100088"></a>состава лекарственного средства (объекта анализа);
- <a id="p100089"></a>ранее утвержденной методики анализа.


## 1. <a id="p100090"></a>СПЕЦИФИЧНОСТЬ


<a id="p100091"></a>Специфичность - это способность аналитической методики однозначно оценивать определяемое вещество в присутствии сопутствующих компонентов.
<a id="p100092"></a>Доказательство специфичности валидируемой методики обычно основывается на рассмотрении полученных с ее использованием данных анализа модельных смесей известного состава.
<a id="p100093"></a>Специфичность валидируемой методики может быть доказана также соответствующей статистической обработкой результатов анализов реальных объектов, выполненных с ее использованием и, параллельно, с использованием другой, заведомо специфичной, методики (методики, специфичность которой доказана).


### <a id="p100094"></a>1.1. Для методик испытаний на подлинность

<a id="p100095"></a>Валидируемая методика (или совокупность методик) должна обеспечивать достоверную информацию о присутствии данного действующего вещества в субстанции или лекарственной форме при наличии в ее составе предусмотренных рецептурой компонентов, что подлежит экспериментальному подтверждению,
<a id="p100096"></a>Подлинность действующего вещества в фармацевтической субстанции или лекарственном препарате устанавливают в сравнении со стандартным образцом или по физико-химическим или химическим свойствам, не характерным для других компонентов.


### <a id="p100097"></a>1.2. Для методик количественного определения и испытания на примеси

<a id="p100098"></a>Для валидируемой методики количественного определения и испытаний на примеси применяют одинаковые подходы - должна быть оценена ее специфичность в отношении определяемого вещества, т.е. должно быть экспериментально подтверждено, что присутствие сопутствующих компонентов не влияет непредусмотренным образом на результат анализа.
<a id="p100099"></a>Допускается оценка специфичности валидируемой методики как путем анализа модельных смесей известного состава, содержащих определяемое вещество, так и путем сравнения результатов анализов реальных объектов, полученных одновременно с использованием валидируемой и другой, заведомо специфичной методики. Результаты соответствующих экспериментов должны быть статистически обработаны.
<a id="p100100"></a>Недостаток специфичности испытания может быть компенсирован другим (другими) дополнительным испытанием.
<a id="p100101"></a>При валидации методик, если это целесообразно, могут использоваться образцы лекарственных средств, подвергнутые, с целью накопления в них примесей, воздействию экстремальных условий (света, температуры, влажности) или химически модифицированные любым подходящим способом.
<a id="p100102"></a>Для хроматографических методик показывают разрешение между двумя наиболее близко элюирующимися веществами при соответствующих концентрациях.


## 2. <a id="p100103"></a>ПРЕДЕЛ ОБНАРУЖЕНИЯ


<a id="p100104"></a>Предел обнаружения - это наименьшее количество (концентрация) определяемого вещества в образце, которое может быть обнаружено (или приближенно оценено) с использованием валидируемой методики.
<a id="p100105"></a>Предел обнаружения в случаях, указанных в таблице, обычно выражается как концентрация определяемого вещества (в % относительных или долях на миллион - ppm).
<a id="p100106"></a>В зависимости от типа методики (визуальная или инструментальная) используют разные способы определения предела обнаружения.


### <a id="p100107"></a>2.1. Для методик с визуальной оценкой результата анализа

<a id="p100108"></a>Проводят испытания образцов с различными известными количествами (концентрациями) определяемого вещества и устанавливают минимальное значение, при котором результат анализа может быть оценен визуально. Это значение является оценкой предела обнаружения.


### <a id="p100109"></a>2.2. Для методик с инструментальной оценкой результата анализа


##### <a id="p100110"></a>2.2.1 По соотношению сигнал/шум

<a id="p100111"></a>Этот подход применим к методам, для которых наблюдается шум базовой линии. Сравнивают величины сигналов, полученных для контрольного опыта и для образцов с низкими концентрациями анализируемого вещества. Устанавливают минимальное количество (концентрацию) определяемого вещества в образце, при котором величина отношения аналитического сигнала к уровню шумов равна 3.
<a id="p100112"></a>Найденная величина является оценкой предела обнаружения.

##### <a id="p100113"></a>2.2.2 По величине стандартного отклонения сигнала и угловому коэффициенту калибровочного графика

<a id="p100114"></a>Предел обнаружения (ПО) находят по уравнению:

<a id="p100115"></a>ПО = 3,3 · S/b,

<a id="p100116"></a>где, S - стандартное отклонение аналитического сигнала;
<a id="p100117"></a>b - коэффициент чувствительности, представляющий собой отношение аналитического сигнала к определяемой величине (тангенс угла наклона калибровочной кривой).

<a id="p100118"></a>При наличии экспериментальных данных в широком диапазоне измеряемой величины S и b могут быть оценены методом наименьших квадратов.
<a id="p100119"></a>Для линейного калибровочного графика значение S принимают равным стандартному отклонению Sa свободного члена уравнения этого графика. Полученное значение предела обнаружения при необходимости может быть подтверждено прямым экспериментом при количествах (концентрациях) определяемого вещества, близких к найденному значению предела обнаружения.
<a id="p100120"></a>Как правило, если имеются данные о пригодности методики для надежного определения вещества в концентрациях, лежащих как выше, так и ниже нормы его содержания, установленной спецификацией, определять реальный предел обнаружения для такой методики не требуется.


## 3. <a id="p100121"></a>ПРЕДЕЛ КОЛИЧЕСТВЕННОГО ОПРЕДЕЛЕНИЯ


<a id="p100122"></a>Предел количественного определения - это наименьшее количество (концентрация) вещества в образце, которое может быть количественно оценено с использованием валидируемой методики с требуемой правильностью и внутрилабораторной (промежуточной) прецизионностью.
<a id="p100123"></a>Предел количественного определения является необходимой валидационной характеристикой методик, используемых для оценки малых количеств (концентраций) веществ в образце и, в частности, для оценки содержания примесей.
<a id="p100124"></a>В зависимости от типа методики используют следующие способы нахождения предела количественного определения.


### <a id="p100125"></a>3.1. Для методик с визуальной оценкой результата анализа

<a id="p100126"></a>Проводят испытания образцов с различными известными количествами (концентрациями) анализируемого вещества и устанавливают минимальное значение, при котором результат анализа может быть получен визуально с требуемой правильностью и внутрилабораторной (промежуточной) прецизионностью.


### <a id="p100127"></a>3.2. Для методик с инструментальной оценкой результата анализа


##### <a id="p100128"></a>3.2.1 По соотношению сигнал/шум

<a id="p100129"></a>Устанавливают минимальную концентрацию определяемого вещества в образце, при которой величина отношения аналитического сигнала к уровню шума составляет около 10:1.

##### <a id="p100130"></a>3.2.2 По величине стандартного отклонения сигнала и угловому коэффициенту калибровочного графика

<a id="p100131"></a>Предел количественного определения (ПКО) рассчитывают по уравнению:

<a id="p100132"></a>ПКО = 10 · S/b,

<a id="p100133"></a>где, S - стандартное отклонение аналитического сигнала;
<a id="p100134"></a>b - коэффициент чувствительности, представляющий собой отношение аналитического сигнала к определяемой величине.

<a id="p100135"></a>При наличии экспериментальных данных в широком диапазоне измеряемой величины S и b могут быть оценены методом наименьших квадратов.
<a id="p100136"></a>Для линейного калибровочного графика значение S принимают равным стандартному отклонению Sa свободного члена уравнения этого графика, Полученное значение предела количественного определения при необходимости может быть подтверждено прямым экспериментом при количествах (концентрациях) определяемого вещества, близких к найденному значению предела количественного определения.
<a id="p100137"></a>Если имеются данные о способности методики надежно определять анализируемое вещество в концентрации выше и ниже установленной в спецификации нормы его содержания, определять реальное значение предела количественного определения для такой методики, как правило, не требуется.


## 4. <a id="p100138"></a>АНАЛИТИЧЕСКАЯ ОБЛАСТЬ МЕТОДИКИ


<a id="p100139"></a>Аналитическая область методики - это интервал между верхним и нижним значением аналитических характеристик определяемого компонента в объекте анализа (его количества, концентрации, активности и т.п.). В этом интервале результаты, получаемые с использованием валидируемой методики, должны иметь приемлемый уровень правильности и внутрилабораторной (промежуточной) прецизионности.
<a id="p100140"></a>К величине аналитической области методик предъявляются следующие требования:
- <a id="p100141"></a>методики количественного определения должны быть применимы в интервале от 80 до 120% от номинального значения определяемой аналитической характеристики;
- <a id="p100142"></a>методики оценки однородности дозирования должны быть применимы в интервале от 70 до 130% от номинальной дозы;
- <a id="p100143"></a>методики количественного определения, используемые при проведении теста "Растворение", обычно должны быть применимы в пределах от 50 до 120% от ожидаемой концентрации действующего вещества в среде растворения;
- <a id="p100144"></a>методики испытаний на чистоту должны быть применимы в интервале от "Предела количественного определения" или "Предела обнаружения" до 120% от допустимого содержания определяемой примеси.
<a id="p100145"></a>Аналитическая область методики может быть установлена по диапазону экспериментальных данных, удовлетворяющих линейной модели.


## 5. <a id="p100146"></a>ЛИНЕЙНОСТЬ


<a id="p100147"></a>Линейность методики - это наличие линейной зависимости аналитического сигнала от концентрации или количества определяемого вещества в анализируемой пробе в пределах аналитической области методики.
<a id="p100148"></a>При валидации методики ее линейность в аналитической области проверяют экспериментально измерением аналитических сигналов для не менее чем 5 проб с различными количествами или концентрациями определяемого вещества. Экспериментальные данные обрабатывают методом наименьших квадратов с использованием линейной модели:

<a id="p100149"></a>y = b · x + a,

<a id="p100150"></a>где, x - количество или концентрация определяемого вещества;
<a id="p100151"></a>y - величина отклика;
<a id="p100152"></a>b - угловой коэффициент;
<a id="p100153"></a>a - свободный член (ОФС "Статистическая обработка результатов химического эксперимента").

<a id="p100154"></a>Должны быть рассчитаны и представлены величины b, a и коэффициент корреляции r. В большинстве случаев используют линейные зависимости, отвечающие условию , и только при анализе следовых количеств рассматривают линейные зависимости, для которых .
<a id="p100155"></a>В отдельных случаях возможность линейной аппроксимации экспериментальных данных обеспечивается лишь после их математического преобразования (например, логарифмирования).
<a id="p100156"></a>Для некоторых методик анализа, в основу которых в принципе не может быть положена линейная зависимость между экспериментальными данными, определение концентрации или количества вещества проводят с использованием нелинейных калибровочных графиков. При этом график зависимости аналитического сигнала от количества или концентрации определяемого вещества может быть аппроксимирован подходящей нелинейной функцией с использованием метода наименьших квадратов, что выполнимо при наличии соответствующего валидированного программного обеспечения.


## 6. <a id="p100157"></a>ПРАВИЛЬНОСТЬ


<a id="p100158"></a>Правильность методики характеризуется отклонением среднего результата определений, выполненных с ее использованием, от значения, принимаемого за истинное.
<a id="p100159"></a>Валидируемая методика признается правильной, если значения, принимаемые за истинные, лежат внутри доверительных интервалов соответствующих средних результатов анализов, полученных экспериментально по данной методике.
<a id="p100160"></a>Для оценки правильности методик количественного определения применимы следующие подходы:
<a id="p100161"></a>а) анализ с использованием валидируемой методики стандартных образцов или модельных смесей с известным содержанием (концентрацией) определяемого вещества;
<a id="p100162"></a>б) сравнение результатов, полученных с использованием валидируемой методики и образцовой методики, правильность которой ранее установлена;
<a id="p100163"></a>в) рассмотрение результатов изучения линейности валидируемой методики: если свободный член в уравнении, приведенном в разделе 5, статистически достоверно не отличается от нуля, то использование такой методики дает результаты, свободные от систематической ошибки.
<a id="p100164"></a>Для подходов "а" и "б" возможно представление полученных данных в виде уравнения линейной зависимости (регрессии) между экспериментально найденными и истинными величинами. Для этого уравнения проверяются гипотезы о равенстве единице тангенса угла наклона b и о равенстве нулю свободного члена a. Как правило, если эти гипотезы признаются верными при степени надежности, равной 0,05, то использование валидируемой методики дает правильные, т.е. свободные от систематической ошибки, результаты.


## 7. <a id="p100165"></a>ПРЕЦИЗИОННОСТЬ


<a id="p100166"></a>Прецизионность методики характеризуется рассеянием результатов, получаемых с ее использованием, относительно величины среднего результата. Мерой такого рассеяния является величина стандартного отклонения результата отдельного определения, полученная для выборки достаточно большого объема.
<a id="p100167"></a>Прецизионность оценивается для любой методики количественного определения по результатам не менее трех определений для каждого из трех уровней определяемых величин (нижнего, среднего и верхнего), лежащих в пределах аналитической области методики. Повторяемость также может оцениваться для любой методики количественного определения по результатам не менее шести определений для образцов с содержанием определяемого вещества, близким к номинальному. Во многих случаях оценка прецизионности может быть проведена по результатам обработки экспериментальных данных методом наименьших квадратов, как указано в ОФС "Статистическая обработка результатов химического эксперимента".
<a id="p100168"></a>Прецизионность должна исследоваться на однородных образцах и может оцениваться в трех вариантах:
- <a id="p100169"></a>как повторяемость (сходимость);
- <a id="p100170"></a>как внутрилабораторная (промежуточная) прецизионность;
- <a id="p100171"></a>как межлабораторная прецизионность (воспроизводимость).
<a id="p100172"></a>Результаты оценки методики анализа по каждому из вариантов прецизионности обычно характеризуются соответствующим значением величины стандартного отклонения результата отдельного определения.
<a id="p100173"></a>Обычно при разработке оригинальной методики определяется повторяемость (сходимость) результатов, получаемых с ее использованием. При необходимости включения разработанной методики в нормативную документацию дополнительно определяется ее внутрилабораторная (промежуточная) прецизионность. Межлабораторная прецизионность (воспроизводимость) методики оценивается при предполагаемом ее включении в проект общей фармакопейной статьи, фармакопейной статьи или в нормативную документацию на фармакопейные стандартные образцы.


### <a id="p100174"></a>7.1. Повторяемость (сходимость)

<a id="p100175"></a>Повторяемость аналитической методики оценивают по независимым результатам, полученным в одинаковых регламентированных условиях в одной лаборатории (один и тот же исполнитель, одно и то же оборудование, один и тот же набор реактивов) в пределах короткого промежутка времени.


### <a id="p100176"></a>7.2. Внутрилабораторная (промежуточная) прецизионность

<a id="p100177"></a>Внутрилабораторная (промежуточная) прецизионность валидируемой методики оценивается в условиях работы одной лаборатории (разные дни, разные исполнители, разное оборудование и т.д.).


### <a id="p100178"></a>7.3. Межлабораторная прецизионность (воспроизводимость)

<a id="p100179"></a>Межлабораторная прецизионность (воспроизводимость) валидируемой методики оценивается при проведении испытаний в разных лабораториях.


## 8. <a id="p100180"></a>УСТОЙЧИВОСТЬ


<a id="p100181"></a>Устойчивость валидируемой методики - это способность сохранять найденные для нее в оптимальных (номинальных) условиях характеристики, приведенные в таблице, при вероятных небольших отклонениях от этих условий проведения анализа.
<a id="p100182"></a>Устойчивость методики не следует определять по отношению к легко контролируемым условиям проведения анализа. Это резко сокращает необходимость в специальном изучении устойчивости.
<a id="p100183"></a>Устойчивость должна изучаться только в тех случаях, когда валидируемая методика основана на использовании особо чувствительных к внешним условиям методов анализа" таких как различные виды хроматографии и функционального анализа. При необходимости оценка устойчивости методики проводится на стадии ее разработки. Если вероятна невысокая устойчивость методики, проверка ее пригодности осуществляется в обязательном порядке непосредственно в процессе практического использования.


### <a id="p100184"></a>Проверка пригодности аналитической системы


<a id="p100185"></a>Проверка пригодности аналитической системы - это проверка выполнения основных требований, предъявляемых к. ней. Система, пригодность которой проверяется, представляет собой совокупность конкретных приборов, реактивов, стандартов и анализируемых образцов. Требования к такой системе обычно конкретизированы в общей фармакопейной статье на соответствующий аналитический метод. Таким образом, проверка пригодности аналитической системы становится процедурой, включаемой в валидируемую методику.


### <a id="p100186"></a>Представление результатов валидации


<a id="p100187"></a>Протокол валидации аналитической методики должен содержать:
- <a id="p100188"></a>ее полное описание, достаточное для воспроизведения и отражающее все условия, необходимые для выполнения анализа;
- <a id="p100189"></a>оцениваемые характеристики;
- <a id="p100190"></a>все первичные результаты, которые вошли в статистическую обработку данных;
- <a id="p100191"></a>результаты статистической обработки данных, полученных экспериментально при разработке или проверке валидируемой методики;
- <a id="p100192"></a>иллюстративные материалы, такие как копии хроматограмм, полученных методами высокоэффективной жидкостной хроматографии или газовой хроматографии; электрофореграмм, электронных и инфракрасных спектров; фотографии или рисунки хроматограмм, полученных методами тонкослойной или бумажной хроматографии; рисунки кривых титрования, калибровочные графики;
- <a id="p100193"></a>заключение о пригодности валидируемой методики для включения в нормативный документ.
<a id="p100194"></a>Материалы валидации отдельных аналитических методик целесообразно оформлять в виде объединенного отчета о валидации.



<a id="p100195"></a>

---



## Иллюстрации

$|r| \geq 0,99$

$|r| \geq 0,9$