---
title: "Без названия"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/bez-nazvaniya-2326"
---

## Без названия

# Документ 24003


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Руководитель Федеральной службы<br>
по надзору в сфере защиты прав<br>
потребителей и благополучия человека,<br>
Главный государственный санитарный<br>
врач Российской Федерации<br>
**Г.Г.ОНИЩЕНКО**<br>
18 июня 2012 г.

<a id="p100002"></a>Дата введения:

</div>

с момента утверждения


#### <a id="p100003"></a>4.2 МЕТОДЫ КОНТРОЛЯ.

**БИОЛОГИЧЕСКИЕ И МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЕ ФАКТОРЫ**

<a id="p100004"></a>**ОРГАНИЗАЦИЯ И ПРОВЕДЕНИЕ ЛАБОРАТОРНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ**
**НА ИЕРСИНИОЗЫ НА ТЕРРИТОРИАЛЬНОМ, РЕГИОНАЛЬНОМ**
**И ФЕДЕРАЛЬНОМ УРОВНЯХ**

<a id="p100005"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**МУК 4.2.3019-12**

1. <a id="p100006"></a>Разработаны Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека (Е.Б.Ежлова, Ю.В.Демина, Н.В.Шеенков); Федеральным бюджетным учреждением науки "Санкт-Петербургский научно-исследовательский институт эпидемиологии и микробиологии им. Пастера" Роспотребнадзора (Г.Я.Ценева, Е.А.Воскресенская, Г.И.Кокорина, Е.А.Богумильчик); Федеральным казенным учреждением здравоохранения "Иркутский научно-исследовательский противочумный институт Сибири и Дальнего Востока" Роспотребнадзора (М.В.Чеснокова, С.В.Балахонов, В.Т.Климов, К.А.Тирских, М.Б.Черепанова); Федеральным бюджетным учреждением здравоохранения (Центр гигиены и эпидемиологии в Новосибирской области" (Т.В.Каримова, О.В.Якунина).
2. <a id="p100007"></a>Утверждены Руководителем Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека. Главным государственным санитарным врачом Российской Федерации Г.Г.Онищенко 18 июня 2012 г.
3. <a id="p100008"></a>Введены в действие с момента утверждения.
4. <a id="p100009"></a>Введены впервые.


### 1. <a id="p100010"></a>Область применения


<a id="p100011"></a>1.1. Настоящие методические указания (далее - МУ) определяют организацию и порядок проведения исследований на иерсиниозы в лабораториях территориального, регионального и федерального уровней.
<a id="p100012"></a>1.2. МУ предназначены для специалистов органов и организаций Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека, а также могут быть использованы медицинскими и другими организациями, независимо от организационно-правовой формы и формы собственности.


### 2. <a id="p100013"></a>Нормативные и методические документы


<a id="p100014"></a>В настоящих методических указаниях использованы ссылки и положения следующих нормативных и методических документов:
<a id="p100015"></a>2.1. Федеральный закон от 03.03.1999 N 52-ФЗ "О санитарно-эпидемиологическом благополучии населения".
<a id="p100016"></a>2.2. Постановление Правительства Российской Федерации от 16.04.2012 N 317 "О лицензировании деятельности в области использования возбудителей инфекционных заболеваний человека и животных (за исключением случая, если указанная деятельность осуществляется в медицинских целях) и генно-инженерно-модифицированных организмов III-IV степени потенциальной опасности, осуществляемой в замкнутых системах".
<a id="p100017"></a>2.3. Постановление Главного государственного санитарного врача Российской Федерации от 24.02.2009 N 11 "О представлении внеочередных донесений о чрезвычайных ситуациях в области общественного здравоохранения санитарно-эпидемиологического характера".
<a id="p100018"></a>2.4. Приказ Министерства здравоохранения и социального развития Российской Федерации от 07.07.2009 N 415н "Об утверждении квалификационных требований к специалистам с высшим и послевузовским медицинским и фармацевтическим образованием в сфере здравоохранения".
<a id="p100019"></a>2.5. Приказ Федеральной службы по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека от 17.03.2008 N 88 "О мерах по совершенствованию мониторинга за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней".
<a id="p100020"></a>2.6. СанПиН 2.1.7.2790-10 "Санитарно-эпидемиологические требования к обращению с медицинскими отходами".
<a id="p100021"></a>2.7. СП 1.3.1318-03 "Порядок выдачи санитарно-эпидемиологического заключения о возможности проведения работ с возбудителями инфекционных заболеваний человека I-IV групп патогенности (опасности), генно-инженерно-модифицированными микроорганизмами, ядами биологического происхождения и гельминтами".
<a id="p100022"></a>2.8. СП 1.3.2322-08 "Санитарно-эпидемиологические правила "Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней".
<a id="p100023"></a>2.9. СП 1.3.2518-09 "Санитарно-эпидемиологические правила "Безопасность работы с микроорганизмами III-IV групп патогенности (опасности) и возбудителями паразитарных болезней. Дополнения и изменения N 1 к СП 1.3.2322-08".
<a id="p100024"></a>2.10. МУ 1.3.2569-09 "Организация работы лабораторий, использующих методы амплификации нуклеиновых кислот при работе с материалом, содержащим микроорганизмы I-IV групп патогенности".
<a id="p100025"></a>2.11. МУК 4.2.2316-08 "Методы контроля бактериологических питательных сред".
<a id="p100026"></a>2.12. МУ 3.1.2438-09 "Эпидемиологический надзор и профилактика псевдотуберкулеза и кишечного иерсиниоза".
<a id="p100027"></a>2.13. МУК 4.2.2746-10 "Порядок применения молекулярно-генетических методов при обследовании очагов острых инфекций с групповой заболеваемостью".

#### <a id="p100028"></a>2.14 СП 3.1.7.2615-10 "Профилактика иерсиниозов".



### 3. <a id="p100029"></a>Перечень сокращений


<a id="p100030"></a>БХ - бульон Хоттингера
<a id="p100031"></a>ЗФР - забуференный физиологический раствор
<a id="p100032"></a>ИФА - иммуноферментный анализ
<a id="p100033"></a>ЛПО - лечебно-профилактические организации
<a id="p100034"></a>МО - медицинские организации
<a id="p100035"></a>ОРА - ориентировочная реакция агглютинации
<a id="p100036"></a>ПУС - полиуглеводная среда
<a id="p100037"></a>ПК - пептонно-калиевая среда
<a id="p100038"></a>ПЦР - полимеразная цепная реакция
<a id="p100039"></a>РА - реакция агглютинации
<a id="p100040"></a>РНГА - реакция непрямой гемагглютинации
<a id="p100041"></a>СанПиН - санитарные правила и нормы
<a id="p100042"></a>СБТС - среда с бромтимоловым синим
<a id="p100043"></a>СП - санитарно-эпидемиологические правила
<a id="p100044"></a>УСС - универсальный скошенный столбик


### 4. <a id="p100045"></a>Общие положения


<a id="p100046"></a>Yersinia pseudotuberculosis (возбудитель псевдотуберкулеза) и Yersinia enlerocolitica (возбудитель кишечного иерсиниоза) - энтеропатогенные иерсинии, относимые к возбудителям зооантропонозных инфекций. Заражение) Y. pseudotuberculosis происходит через инфицированные продукты питания (преимущественно овощи), Y. enierocolitica - чаше при употреблении в пищу молочных и мясных продуктов.
<a id="p100047"></a>Иерсиниозы широко распространены в мире. В ряде стран Европы кишечный иерсиниоз занимает третье место по заболеваемости среди кишечных инфекций, после кампилобактериоза и сальмонеллеза. Заболеваемость псевдотуберкулезом в Российской Федерации регистрируется практически повсеместно, преимущественно в виде вспышек, кишечным иерсиниозом - в виде спорадических случаев.
<a id="p100048"></a>Характеристика иерсиний
<a id="p100049"></a>Род Yersinia включает группу грамотрицательных, не образующих спор, палочковидных (кокки или овоиды) факультативно-анаэробных микроорганизмов, относящихся к семейству Enterobacteriaceae. Среди 17 видов, входящих в род Yersinia, три отнесены к патогенным для человека и животных - возбудитель чумы Y. pestis, возбудитель псевдотуберкулеза Y. pseudotuberculosis и 11 представителей вида Y. enierocolitica патогенных биотипов 1В и 2-5.
<a id="p100050"></a>Y. enierocolitica биотипа 1А относят к непатогенным, однако они могут быть возбудителями оппортунистических инфекций. Также непатогенными являются 13 видов иерсиний: Y. aldovae, Y. bercovieri, Y. frederiksenii, Y. intermedia, Y. kristensenii, Y. mollaretii, Y. rohdei, Y. ruckeri, Y. aleksiciae, Y. similis, Y. massiliensis, Y. nurmii, Y. pekkanenii, Y. entomophaga.
<a id="p100051"></a>Основные биохимические свойства Y. pseudotuberculosis и Y. enterocolitica и некоторых других представителей Enterobacteriaceae, которые используются в практической работе при первичном изучении выделенных культур, представлены в табл. 1 и 2.
<a id="p100052"></a>По О-антигену известен 21 серотип Y. pseudotuberculosis. Среди Y. enterocolitica различают 6 биотипов и 30 серотипов, из них 9 наиболее часто ассоциируются с заболеваниями человека: 0:3; 0:4; 0:5,27; 0:9; 0:8; 0:13; 0:18; 0:20; 0:21 (табл. 3).
<a id="p100053"></a>Антигенное родство (по О-антигену) Y. pseudotuberculosis и большинства серотипов Y. enterocolitica выражено слабо. Значительное сходство по антигенной структуре выявлено у Y. pseudotuberculosis серотипа 0:1 и Y. enterocolitica "американских" серотипов 0:8; 0:18 и 0:21.

<a id="p100054"></a>Таблица 1

<div align="center">

<a id="p100055"></a>Основные дифференциальные признаки Y. pseudotuberculosis,<br>
Y. enterocolitica и других представителей

</div>

семейства Enterobacteriaceae


<table>
<colgroup><col width="16%"><col width="12%"><col width="13%"><col width="13%"><col width="10%"><col width="11%"><col width="12%"><col width="11%"></colgroup>
<tr><td colspan="2">Признаки</td><td>Y. pseudotuberculosis</td><td>Y. enterocolitica</td><td>Shigella spp.</td><td>Salmonella spp.</td><td>Escherichia spp.</td><td>Proteus spp.</td></tr>
<tr><td colspan="2">1</td><td>2</td><td>3</td><td>4</td><td>5</td><td>6</td><td>7</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Рост на универсальном скошенном столбике (УСC)</td><td>Окраска столбика среды</td><td>Малиновый</td><td>Желтый, по уколу черно-бурая полоска</td><td>Желтый</td><td>Желтый или черный + газ</td><td>Желтый + газ</td><td>Малиновый</td></tr>
<tr><td>Окраска скошенной поверхности среды</td><td>Малиновая</td><td>Желтая</td><td>Красная</td><td>Красная</td><td>Желтая</td><td>Желтая или малиновая, верх черный</td></tr>
<tr><td>Рост на трехсахарном агаре с мочевиной</td><td>Окраска столбика среды</td><td>Малиновый (через 20 ч. Желтый)</td><td>Малиновый (через 20 ч. Желтый)</td><td>Желтый</td><td>Желтый или черный + газ</td><td>Желтый + газ</td><td>Малиновый или черный</td></tr>
<tr><td>(среде И.С.Олькеницкого)</td><td>Окраска скошенной поверхности среды</td><td>Малиновая</td><td>Малиновая</td><td>Красная</td><td>Красная</td><td>Желтая</td><td>Малиновая</td></tr>
<tr><td>Рост на трехсахарном агаре с мочевиной</td><td>Окраска столбика среды</td><td>Малиновый со дна пробирки</td><td>Малиновый со дна пробирки</td><td>Желтый/ зеленый</td><td>Желтый, + газ</td><td>Желтый, + газ</td><td>Малиновый, + газ</td></tr>
<tr><td>(среде Ресселя I)</td><td>Окраска скошенной поверхности среды</td><td>Сиреневая</td><td>Сиреневая</td><td>Сиреневая</td><td>Сиреневая</td><td>Желтый/ зеленый</td><td>Сиреневая</td></tr>
<tr><td>Рост на трехсахарном агаре с сахарозой и маннитом</td><td>Окраска столбика среды</td><td>Желтый</td><td>Желтый, газ</td><td>Желтый/ Красный</td><td>Желтый, почернение по уколу</td><td>Желтый, +/- газ</td><td>Желтый/ Красный, почернение по уколу</td></tr>
<tr><td>(среде Ресселя II)</td><td>Окраска скошенной поверхности среды</td><td>Малиновая</td><td>Желтая</td><td>Желтая</td><td>Желтая/ Красная</td><td>Желтая/ Красная</td><td>Желтая/ Красная</td></tr>
<tr><td rowspan="5">Ферментация углеводов</td><td>Сахароза</td><td>-</td><td>+</td><td>-</td><td>-</td><td>x</td><td>x</td></tr>
<tr><td>Рамноза</td><td>+</td><td>-</td><td>-/+</td><td>+</td><td>+/-</td><td>-/+</td></tr>
<tr><td>Раффиноза</td><td>-/+</td><td>-</td><td>-/+</td><td>-</td><td>x</td><td>-/+</td></tr>
<tr><td>Маннит</td><td>+</td><td>+</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>-/+</td></tr>
<tr><td>Сорбит</td><td>-</td><td>+</td><td>-/+</td><td>+</td><td>+/-</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Наличие орнитиндекарбоксилазы</td><td></td><td>-</td><td>+</td><td>-/+</td><td>+</td><td>x</td><td>-/+</td></tr>
<tr><td>Утилизация цитрата</td><td></td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>+/-</td><td>-</td><td>x</td></tr>
<tr><td>Дезаминирование фенилаланина</td><td></td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>+</td></tr>
<tr><td>Реакция Фогис- Проскауэра (37 +/- 1) °С</td><td></td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-/+</td></tr>
<tr><td colspan="8">Примечание: "+" - положительная реакция; "-" - отрицательная реакция; "+/-" - большинство штаммов позитивно, но некоторые негативно; "-/+" - большинство культур негативно, некоторые штаммы позитивны; "х" - разные реакции.</td></tr>
</table>


<a id="p100072"></a>Таблица 2

<div align="center">

<a id="p100073"></a>Основные биохимические свойства бактерий

</div>

рода Yersinia (26 +/- 2) °С


<table>
<colgroup><col width="11%"><col width="11%"><col width="5%"><col width="6%"><col width="3%"><col width="3%"><col width="3%"><col width="3%"><col width="3%"><col width="3%"><col width="5%"><col width="5%"><col width="5%"><col width="4%"><col width="5%"><col width="4%"><col width="5%"><col width="5%"><col width="5%"><col width="5%"></colgroup>
<tr><td colspan="2" rowspan="4">Тест или субтрат</td><td rowspan="4">Y. pestis</td><td rowspan="4">Y. pseudotuberculosis</td><td colspan="6">Y. enterocolitica</td><td rowspan="4">Y. frederiksenii</td><td rowspan="4">Y. intermedia</td><td rowspan="4">Y. kristensenii</td><td rowspan="4">Y. ruckeri</td><td rowspan="4">Y. aldovae</td><td rowspan="4">Y. rohdei</td><td rowspan="4">Y. mollaretti</td><td rowspan="4">Y. bercovieri</td><td rowspan="4">Y. aleksiciae</td><td rowspan="4">Y. similis</td></tr>
<tr><td colspan="6">Биотипы</td></tr>
<tr><td colspan="2">I</td><td>II</td><td>III</td><td>IV</td><td>V</td></tr>
<tr><td>1А</td><td>1В</td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td colspan="2">1</td><td>2</td><td>3</td><td>4</td><td>5</td><td>6</td><td>7</td><td>8</td><td>9</td><td>10</td><td>11</td><td>12</td><td>13</td><td>14</td><td>15</td><td>16</td><td>17</td><td>18</td><td>19</td></tr>
<tr><td colspan="2">Гидролиз мочевины</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>[+]</td><td>[+]</td><td>[+]</td><td>-</td><td>[+]</td><td>В</td><td>[-]</td><td>В</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td colspan="2">Образование индола</td><td>-</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>В</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>В</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>+</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Подвижность</td><td>(22 +/- 2) °С</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>В</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>(22 +/- 2) °С</td><td>(37 +/- 1) °С</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td rowspan="2">Реакция Фогеса- Проскауэра</td><td>(26 +/- 2) °С</td><td>-</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>-</td><td>-</td><td>+</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td>(37 +/- 1) °С</td><td></td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td colspan="2">Фенилаланиндезаминаза</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td colspan="2">Орнитиндекарбоксилаза</td><td>-</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>В</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>В</td><td>[-]</td><td>[+]</td><td>[+]</td><td>+</td><td>-</td></tr>
<tr><td colspan="2">Лизиндекарбоксилаза</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>В</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>+</td><td>-</td></tr>
<tr><td colspan="2">Липаза (Твин-80)</td><td>-</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>В</td><td>В</td><td>В</td><td>В</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td colspan="2">Цитрат Симмонса</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>В</td><td>+</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td colspan="2">Гидролиз эскулина</td><td>В</td><td>+</td><td>[+]</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>[+]</td><td>+</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>[-]</td><td>-</td><td>+</td></tr>
<tr><td colspan="2">Образование кислоты из:</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td colspan="2">D-ксилозы</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>-</td><td>В</td><td>+</td><td>+</td><td>[+]</td><td>-</td><td>В</td><td>В</td><td>В</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td colspan="2">мальтозы</td><td>[+]</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>-</td><td>-</td><td>В</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td colspan="2">мелибиозы</td><td>[-]</td><td>В</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>[+]</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>В</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td colspan="2">L-рамнозы</td><td>-</td><td>В</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>+</td></tr>
<tr><td colspan="2">рафинозы</td><td>-</td><td>[-]</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>В</td><td>В</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>В</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td colspan="2">салицина</td><td>В</td><td>[-]</td><td>+</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>[-]</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>[-]</td><td>[-]</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td colspan="2">сахарозы</td><td>-</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>В</td><td>+</td><td>+</td><td>-</td><td>-</td><td>[-]</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td colspan="2">D-сорбитола</td><td>В</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>В</td><td>В</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>-</td></tr>
<tr><td colspan="2">трегалозы</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>[+]</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td colspan="20">"+" - положительная реакция у 90% и более штаммов; "[+]" - положительная реакция у 76-89% штаммов; "В" - положительная реакция у 26-75% штаммов; "[-]" - положительная реакция у 11-25% штаммов; "-" - отрицательная реакция у 90% и более штаммов.</td></tr>
</table>


<a id="p100099"></a>Таблица 3

<a id="p100100"></a>Био- и серотипы Y. enterocolitica и их связь с патогенностью


| Патогенные свойства | Биотип | Серотип |
| --- | --- | --- |
| есть | 1В 2 3 4 5 | О:8; О:4; О:13а; О:18; О:20; О:21; О:9; О:5,27; О:1,2,3; О:5,27; О:3; О:2,3 |
| нет | 1А | О:5; О:6.30; О:6,31; О:7,8; О:10; О:13,7; О:14; О:16; О:19.8; О:22; О:36; О:41,42; О:41,43; О:46; О:63; О:64; О:65; О:66; О:72 |


<a id="p100104"></a>Температурный фактор является одним из важнейших определяющих изменчивость микробов и устойчивость их во внешней среде. Оптимальная температура для жизнедеятельности иерсиний - 28-30 °С, однако они могут, хотя и гораздо медленнее, размножаться при температуре 4-1 °С.
<a id="p100105"></a>Достаточно долго иерсинии выживают на различных продуктах питания и даже могут на них размножаться (например, на овощах, особенно приготовленных в виде салатов). В молоке сохраняются до 18 суток, в сливочном масле - до 145 суток, на хлебе, кондитерских изделиях - от 16 до 24 суток. Иерсинии чувствительны к высокой температуре; при 100 °С погибают в течение нескольких секунд, однако при температуре 50-60 °С способны выживать до 20-30 мин., переносят большие (до 10%) концентрации раствора натрия хлорида, особенно при низких температурах. На микробы губительно действует прямая солнечная радиация, чувствительны иерсинии и к высыханию. Во влажной среде и невысокой температуре (14-18 °С) выживают длительно. Кислотность среды (при уровнях рН 3,6-4,0) также губительна для иерсиний. В дезинфицирующих растворах в стандартных разведениях микробы Yersinia погибают в течение 5-10 мин. Раствор перманганата калия в концентрации 0,5-0,3% вызывает гибель бактерий через 3 мин.
<a id="p100106"></a>Патогенные Y. pseudotuberculosis и Y. enterocolitica обладают широким набором факторов патогенности, детерминируемых хромосомными и плазмидными генами.
<a id="p100107"></a>Способность Y. pseudotuberculosis к адгезии и инвазии в клетки эпителия кишечника зависит от экспрессии хромосомного inv-гена, кодирующего синтез белка наружной мембраны инвазина с молекулярной массой 108 кДа. Диссеминация микроба в организме хозяина связана с функционированием группы хромосомных генов, ответственных за ассимиляцию ионов железа ("остров высокой патогенности", HPI). Штаммы Y. pseudotuberculosis, содержащие HPI, редко выделяются в России (3,9%), в основном они циркулируют в Европе, Австралии, Северной Америке.
<a id="p100108"></a>Важным фактором патогенности Y. pseudotuberculosis является синтез суперантигена (YPM), ответственного за поликлональную активацию Т-лимфоцитов и гиперпродукцию провоспалительных цитокинов. Клинически это выражается развитием синдрома токсического шока. У 98% штаммов этого вида, выделенных от больных в России, Японии, Корее, обнаруживается суперантиген, вызывающий системное поражение органов и тканей.
<a id="p100109"></a>Патогенные Y. enterocolitica также имеют факторы патогенности, обеспечивающие им адгезивные и инвазивные свойства (ген ail).
<a id="p100110"></a>Гены НРI не выявляются у непатогенных Y. enterocolitica биотипа 1А и у низкопатогенных штаммов биотипов 2-5, но они определяются у всех высокопатогенных штаммов биотипа 1В. Энтеротоксигенность Y. enterocolitica биотипов 1В и 2-5 связана с экспрессией хромосомного гена ystA. У непатогенных представителей биотипа 1А обнаружен ген ystB.
<a id="p100111"></a>Плазмидой вирулентности иерсиний pYV 42-48 MDa обладают все штаммы Y. pseudotuberculosis и Y. enterocolitica 1В, 2-5 биотипов. Основная функция плазмиды pYV - нейтрализация факторов иммунитета макроорганизма.
<a id="p100112"></a>Плазмида с молекулярной массой 82 MDa (pVM) обнаружена только у Y. pseudotuberculosis 1 серотипа. Штаммы, имеющие плазмиду pVM, вызывают более тяжелое течение псевдотуберкулеза.


### 5. <a id="p100113"></a>Порядок организации и проведения лабораторных исследований на иерсиниозы для лабораторий территориального уровня



#### <a id="p100114"></a>5.1. Рекомендованный порядок организации и проведения лабораторных исследований на иерсиниозы в материале от людей в лабораториях лечебно-профилактических организаций



##### <a id="p100115"></a>5.1.1. Требования к лабораториям, осуществляющим исследования на иерсиниозы

<a id="p100116"></a>Наличие разрешительных и регламентирующих работу документов.
<a id="p100117"></a>Лаборатории, которые осуществляют исследования на иерсиниозы, должны иметь разрешительные документы на этот вид деятельности согласно действующему законодательству.
<a id="p100118"></a>Проведение исследований на всех этапах: взятие проб, их хранение, доставка в лабораторию, регистрация, порядок исследования, выдача результатов должны соответствовать требованиям действующих нормативных и методических документов.
<a id="p100119"></a>Обеззараживание отходов должно осуществляться в соответствии с действующими нормативными и методическими документами по обращению с медицинскими отходами.
<a id="p100120"></a>Требования к специалистам и вспомогательному персоналу, участвующим в выполнении исследований на иерсиниозы.
<a id="p100121"></a>Исследования на иерсиниозы могут выполнять специалисты не моложе 18 лет с высшим и средним медицинским образованием, имеющие допуск к работе с ПБА III-IV групп патогенности на основании приказа руководителя учреждения, окончившие курсы по специальности "Бактериология", знающие правила работы с ПБА III-IV группы патогенности. Специалисты должны проходить профессиональную переподготовку не реже одного раза в пять лет. Лица, имеющие высшее (среднее) медицинское образование должны иметь сертификат специалиста ("Бактериология"/"Лабораторное дело").
<a id="p100122"></a>Инженерно-технический персонал, дезинфекторы и санитарки проходят специальную подготовку по месту работы в соответствии с должностными обязанностями.
<a id="p100123"></a>Необходимый уровень подготовки специалистов лабораторий представлен в прилож. 1.
<a id="p100124"></a>Требования к знаниям и умениям специалистов лабораторий приведены в прилож. 2.
<a id="p100125"></a>Требования к обеспечению безопасности работы персонала.
<a id="p100126"></a>Каждая бактериологическая лаборатория должна иметь пакет нормативно-методической документации и инструкций, определяющих режим безопасной работы сотрудников с учетом характера работ, особенностей технологии, свойств микроорганизмов. Результаты проверок знаний правил техники безопасности персонала при проведении работ фиксируются в специальном журнале.
<a id="p100127"></a>Все сотрудники должны выполнять требования по обеспечению безопасности работы с материалом, подозрительным или зараженным возбудителями инфекционных болезней III-IV групп патогенности (опасности) в соответствии с действующими нормативными документами.
<a id="p100128"></a>Порядок организации внутреннего и внешнего контроля качества лабораторных исследований.
<a id="p100129"></a>Контроль качества исследований на иерсиниозы в лабораториях включает:
- <a id="p100130"></a>контроль качества питательных сред, диагностических препаратов и тест-систем, дезинфицирующих средств и химических реактивов;
- <a id="p100131"></a>своевременную поверку средств измерений, аттестацию испытательного оборудования;
- <a id="p100132"></a>контроль качества стерилизации лабораторной посуды;
- <a id="p100133"></a>контроль работы паровых и суховоздушных стерилизаторов;
- <a id="p100134"></a>контроль температурного режима работы холодильников и термостатов;
- <a id="p100135"></a>контроль работы бактерицидных ламп;
- <a id="p100136"></a>проверку состояния воздуха производственных помещений и боксов, температурного режима, влажности;
- <a id="p100137"></a>проверку санитарного состояния помещений, включая условия уборки, дезинфекции, контроля смывов с поверхностей и оборудования.
<a id="p100138"></a>Результаты контроля фиксируют в специальных журналах, формулярах или других учетных документах.
<a id="p100139"></a>Внешний контроль качества лабораторных исследований включает:
- <a id="p100140"></a>участие в межлабораторных сличительных испытаниях (МСИ);
- <a id="p100141"></a>участие в Федеральной системе внешней оценки качества (ФСВОК);
- <a id="p100142"></a>приобретение шифрованных образцов для идентификации иерсиний.
<a id="p100143"></a>Правила ведения документации.
<a id="p100144"></a>Ведение лабораторной документации, включая состояние регистрационных и рабочих журналов, осуществляют ежедневно в соответствии с требованиями действующих нормативных и методических документов.
<a id="p100145"></a>Требования к материальным ресурсам, необходимым для выполнения исследований на иерсиниозы
<a id="p100146"></a>Для проведения исследований на иерсиниозы в лабораториях должны быть в наличии:
- <a id="p100147"></a>питательные среды, зарегистрированные в установленном порядке (прилож. 3 к МУ);
- <a id="p100148"></a>диагностические препараты, тест-системы, зарегистрированные в установленном порядке (прилож. 4 к МУ);
- <a id="p100149"></a>химические реактивы (прилож. 5 к МУ);
- <a id="p100150"></a>приборы и оборудование (прилож. 6 к МУ);

##### <a id="p100151"></a>5.1.2. Номенклатура и объем исследований

<a id="p100152"></a>В лабораториях МО проводят:
- <a id="p100153"></a>диагностические исследования материала от госпитализированных в стационар и амбулаторных больных с целью дифференциальной диагностики и установления этиологии заболевания при спорадической и вспышечной заболеваемости;
- <a id="p100154"></a>исследования патологоанатомического материала.
<a id="p100155"></a>В лабораториях МО проводят исследования материала в следующем объеме:
1) <a id="p100156"></a>посев на среды накопления, "холодовое обогащение" с периодическими высевами на дифференциально-диагностические среды, отсев характерных по морфологическим свойствам колоний иерсиний на ПУС;
2) <a id="p100157"></a>идентификация и дифференциация выделенных культур до вида по морфологическим, биохимическим и антигенным свойствам, в том числе с использованием полу- или автоматизированных систем идентификации ("Vitek-2", "Mini API", "Микроб-2", "Микроб-Автомат" и др.) при наличии оборудования и тест-систем;
3) <a id="p100158"></a>выявление антител в парных сыворотках (РА, РНГА, ИФА);
4) <a id="p100159"></a>экспрессные методы исследования (ПЦР) - при наличии оборудования.

##### <a id="p100160"></a>5.1.3. Порядок лабораторных исследований на иерсиниозы

<a id="p100161"></a>5.1.3.1. Правила отбора и транспортирования проб клинического материала.
<a id="p100162"></a>При проведении бактериологического анализа на иерсиниозы исследуется клинический материал: испражнения, моча, кровь, мазки из зева, операционный или секционный материал: аппендикулярные отростки, мезентериальные лимфоузлы и патологически измененные органы и ткани, сгустки крови, желчь, содержимое кишечника.
<a id="p100163"></a>Материал от больного (подозрительного на заболевание) отбирает медицинский персонал МО немедленно при выявлении больного (подозрительного на заболевание) до начала лечения антибиотиками.
<a id="p100164"></a>При совместном использовании бактериологического и ПЦР методов отбор материала осуществляется в одноразовую посуду.
<a id="p100165"></a>Правила отбора материала от больных (подозрительных на заболевание):
- <a id="p100166"></a>испражнения <*> берут на протяжении всего периода заболевания в количестве 0,5-1,0 г стерильной ложечкой из судна и помещают в стерильный широкогорлый флакон с 5,0-10,0 мл среды накопления;

<a id="p100167"></a>

---

<a id="p100168"></a><*> Высеваемость иерсиний наиболее высока в первые 3-5 дней болезни и до назначения антибиотиков, результаты бактериологического исследования улучшаются, если взятие материала производится 3-кратно в течение первой недели болезни (госпитализации).

- <a id="p100169"></a>мочу исследуют в первые 7 дней болезни, берут 20-30 мл средней порции утренней мочи в стерильную посуду. Осадок после центрифугирования помещают в 5,0 мл среды накопления;
- <a id="p100170"></a>смыв из зева берут в первые 3 дня болезни натощак с задней стенки глотки и корня языка тампоном, смоченном в физиологическом растворе и помещают в 5,0 мл среды накопления;
- <a id="p100171"></a>кровь исследуют в течение болезни на высоте лихорадки, весь лихорадочный период и в период рецидива болезни. Кровь забирают натощак в количестве 5-10 мл из локтевой вены с соблюдением правил асептики, выдерживают при комнатной температуре в наклонном положении (под углом 30-45°) до образования сгустка (30-40 мин.), после чего сгусток отделяют от стенки, сыворотку переносят в пробирку для серологических реакций, а сгусток помещают в 5,0 мл среды накопления.
<a id="p100172"></a>Правила отбора операционного или секционного материала:
- <a id="p100173"></a>Аппендикулярный отросток. Стерильно ножницами измельчают 1,0-2,0 г пробы и помещают в 5,0-10,0 мл среды накопления.
- <a id="p100174"></a>Мезентериальные лимфоузлы, другие органы и ткани. Стерильно ножницами измельчают 1.0-2,0 г пробы и помещают в 5,0-10,0 мл среды накопления.
- <a id="p100175"></a>Желчь. В 5,0 мл среды накопления помещают 0,5-1,0 мл.
- <a id="p100176"></a>Содержимое кишечника. В 5,0 мл среды накопления помещают 0,5-1,0 мл.
- <a id="p100177"></a>Сгусток крови. Стерильно измельчают 0,5-1,0 мл пробы и помещают в 5,0 мл среды накопления.
<a id="p100178"></a>Пробы этикетируют, обрабатывают снаружи дезинфицирующим раствором, упаковывают в полиэтиленовый пакет с застежкой-молнией, заполняют бланк направления и помещают в контейнер для транспортирования биологического материала на исследование.
<a id="p100179"></a>Транспортирование материала в лабораторию осуществляется при температуре (4-12) °С в течение двух часов после взятия.


###### <a id="p100180"></a>I этап исследования

(пробоподготовка и посев нативного материала)

<a id="p100181"></a>Проводят "холодовое обогащение" исследуемого материала: внесенный в среду ПК, в ЗФР или 1%-ю пептонную воду (среды накопления) материал помещают в холодильник (6 +/- 2) °С и выдерживают в нем до первого положительного высева на 2-3, 5-7 или 10-15 сутки.
<a id="p100182"></a>Постановка ускоренных методов исследования нативного материала: ПЦР или ИФА для выявления антигенов иерсиний псевдотуберкулеза 1 серотипа <*>. При получении положительного результата выдают предварительный положительный ответ.

<a id="p100183"></a>

---

<a id="p100184"></a><*> Производственный выпуск "Тест-системы иммуноферментной для выявления антигенов иерсиний псевдотуберкулеза 1 серотипа" будет осуществляться в НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Пастера с 2012 г.


###### <a id="p100185"></a>II этап исследования

(на 2-3 сутки от начала исследования)

<a id="p100186"></a>Проводят высев со сред накопления (2-3 сутки "холодового обогащения") на плотные дифференциально-диагностические среды (СБТС, Эндо) или другие коммерческие дифференциальные среды для диагностики иерсиниозов, разрешенные к применению на территории Российской Федерации (среда Мак-Конки и др.) - петлей из верхней трети слоя среды (но не с поверхности!), не взбалтывая пробирки (!).
<a id="p100187"></a>Для инактивации посторонней микрофлоры перед каждым высевом на плотную питательную среду проводят щелочную обработку материала 0,72%-м раствором гидроксида калия в 0,5%-м растворе хлорида натрия (30-60 с) или 5%-м раствором тринатрий фосфата. Посевы инкубируют при (26 +/- 2) °С 48 ч. (на среде СБТС) или (на среде Эндо) 24 ч. (не более 30 ч.!).
<a id="p100188"></a>Ускоренные методы исследования материала из сред накопления (2-3-и сутки "холодового обогащения"): ПЦР или ИФА для выявления антигенов иерсиний псевдотуберкулеза 1 серотипа. При получении положительного результата выдают подтверждение предварительного положительного ответа и продолжают бактериологическое исследование пробы до выделения культуры. При отрицательных результатах ПЦР на этапах I-II дальнейшее бактериологическое исследование пробы прекращают.


###### <a id="p100189"></a>III этап исследования

(4-5-е сутки от начала исследования)

<a id="p100190"></a>Просмотр посевов на дифференциально-диагностических средах, засеянных на этапе II исследования, и учет морфологии колоний.
<a id="p100191"></a>Проводят отбор характерных для Y. pseudotuberculosis и Y. enterocolitica колоний на дифференциальную среду с мочевиной (среду Олькеницкого, УСС или среды Ресселя I и II) <*> и той же колонии - на скошенные столбики (или сектора) МПА (АХ) для накопления бактериальной массы. Посевы инкубируют на средах Олькеницкого, УСС, Ресселя I при (37 +/- 1) °С, на МПА (АХ), среде Ресселя II - при (26 +/- 2) °С. При наличии сложности отбора колонии на две среды возможен первичный отбор колоний на среды с мочевиной с последующим пересевом уреазоположительных культур на МПА (АХ), среду Рессель II.

<a id="p100192"></a>

---

<a id="p100193"></a><*> Прописи сред и способ приготовления представлены в прилож. 8.


###### <a id="p100194"></a>IV этап исследования

(5-6-е сутки от начала исследования)

<a id="p100195"></a>Проводят идентификацию и дифференциацию уреазоположительных культур из пробирки (или чашки) с МПА, засеянных на этапе II исследования (2-3 сутки "холодового обогащения"):
- <a id="p100196"></a>микроскопия мазка, окрашенного по Граму;
- <a id="p100197"></a>тест на цитохромоксидазу;
- <a id="p100198"></a>ферментативная активность на средах Гисса <*> (26 +/- 2) °С: маннитол, сахароза, рамноза, раффиноза, сорбитол, мелибиоза, салицин, ксилоза;

<a id="p100199"></a>

---

<a id="p100200"></a><*> При использовании сред Ресселя I и II проводят постановку следующих биохимических тестов - сахароза, рамноза, раффиноза, салицин, ксилоза, сорбит, индол.

- <a id="p100201"></a>реакция Фогеса-Проскауэра (среда Кларка) при (20 +/- 2) °С и (37 +/- 1) °С;
- <a id="p100202"></a>декарбоксилирование орнитина (среда Биргера-Крушинской) при (37 +/- 1) °С;
- <a id="p100203"></a>утилизация цитрата (среда Симмонса) при (37 +/- 1) °С;
- <a id="p100204"></a>дезаминирование фенилаланина (агар с фенилаланином) при (37 +/- 1) °С;
- <a id="p100205"></a>образование индола (0,3% полужидкий агар) при (20 +/- 2) °С и (37 +/- 1) °C;
- <a id="p100206"></a>проба с псевдотуберкулезным фагом (агар Хоттингера, МПА) при (26 +/- 2) °С;
- <a id="p100207"></a>постановка ОРА на стекле с псевдотуберкулезной и иерсиниозной сыворотками - культуры с МПА (АХ), среды Ресселя II;
- <a id="p100208"></a>идентификация возбудителя с использованием полу- или автоматизированных систем идентификации ("Vitek-2", "Mini API", "Микроб-2", "Микроб-Автомат" или аналоги) - при наличии оборудования и тест-систем.


###### <a id="p100209"></a>V этап исследования

(5-7-е сутки от начала исследования)

<a id="p100210"></a>Проводят высев со сред накопления (5-7-е сутки "холодового обогащения") на плотные дифференциально-диагностические среды после предварительной щелочной обработки.
<a id="p100211"></a>Проводят учет результатов биохимической идентификации и дифференциации Y. pseudotuberculosis и Y. enterocolitica, проведенных на IV этапе исследования (2-3-и сутки "холодового обогащения"), определяют биотип Y. enterocolitica.
<a id="p100212"></a>Проводят реакцию агглютинации на стекле с сывороткой к вирулентным иерсиниям.
<a id="p100213"></a>Выдача окончательного положительного ответа.


###### <a id="p100214"></a>VI этап исследования

(7-8-е сутки от начала исследования)

<a id="p100215"></a>Просмотр посевов на дифференциально-диагностических средах, засеянных на V этапе исследования (5-7-е сутки "холодового обогащения").
<a id="p100216"></a>Проводят отбор характерных для Y. pseudotuberculosis и) Y. Enterocolitica колоний на дифференциальную среду с мочевиной (среду Олькеницкого, УСС или среды Ресселя I и II) и МПА (АХ).


###### <a id="p100217"></a>VII этап исследования

(8-10-е сутки от начала исследования)

<a id="p100218"></a>Проводят идентификацию и дифференциацию уреазоположительных культур, засеянных на VI этапе исследования (5-7-е сутки "холодового обогащения") по тестам, предусмотренным на IV этапе исследования.


###### <a id="p100219"></a>VIII этап исследования

(9-11-е сутки от начала исследования)

<a id="p100220"></a>Проводят учет результатов биохимической идентификации и дифференциации Y. pseudotuberculosis и Y. enterocolitica, проведенных на VII этапе исследования (5-7-е сутки "холодового обогащения"), определяют биотип Y. enterocolitica.
<a id="p100221"></a>Проводят реакцию агглютинации на стекле с сывороткой к вирулентным иерсиниям.
<a id="p100222"></a>Выдача окончательного положительного ответа.


###### <a id="p100223"></a>IX этап исследования

(10-е сутки от начала исследования)

<a id="p100224"></a>Проводят высев со сред накопления на дифференциально-диагностические среды после предварительной щелочной обработки (10-е сутки "холодового обогащения").


###### <a id="p100225"></a>X этап исследования

(12-е сутки от начала исследования)

<a id="p100226"></a>Просмотр посевов на дифференциально-диагностических средах, засеянных на IХ-м этапе исследования (10-е сутки "холодового обогащения"), отбор характерных для Y. pseudotuberculosis и Y. enterocolitica колоний на дифференциальную среду с мочевиной (среду Олькеницкого, УСС или среды Ресселя I и II) и агар МПА (АХ).


###### <a id="p100227"></a>XI этап исследования

(13-е сутки от начала исследования)

<a id="p100228"></a>Проводят идентификацию и дифференциацию уреазоположительного изолята, засеянного на Х-м этапе исследования (10-е сутки "холодового обогащения"), по набору биохимических тестов, предусмотренных на IV-м этапе исследования.


###### <a id="p100229"></a>XII этап исследования

(14-е сутки от начала исследования)

<a id="p100230"></a>Проводят учет результатов биохимической идентификации и дифференциации Y. pseudotuberculosis и Y. enterocolitica, проведенных на XI-м этапе исследования (10-е сутки "холодового обогащения").
<a id="p100231"></a>Выдача окончательного положительного ответа.

<a id="p100232"></a>Передача выделенной культуры для дальнейшей идентификации в специализированную лабораторию возможна на любом этапе исследования.

###### <a id="p100233"></a>5.1.3.2 Полимеразная цепная реакция.

<a id="p100234"></a>Для выявления ДНК иерсиний используют наборы для ПЦР, зарегистрированные в установленном порядке. Постановку и учет реакции осуществляют в соответствии с инструкцией по применению. Материал для исследования отбирается в одноразовую пробирку (или контейнер) в соответствии с п. 5.1.3.1 в среду накопления ЗФР (рН 7,2-7,4).
<a id="p100235"></a>Наиболее информативным для ПЦР являются испражнения и кровь в период лихорадки. Материал забирается немедленно при выявлении больного и до назначения антибиотиков (!).
<a id="p100236"></a>Исследование проб проводят в первые сутки их получения и на 2-3 сутки после "холодового обогащения" в ЗФР. Непосредственно перед исследованием проводят пробоподготовку материала, используя набор для выделения ДНК.
<a id="p100237"></a>При использовании этих методов при пробоподготовке получают препарат суммарной ДНК всех содержащихся в пробе микроорганизмов, что может вызвать ингибирование ПЦР и снижение ее чувствительности. Разработан способ подготовки проб, основанный на использовании щелочной обработки материала, при котором большая часть индигенной микрофлоры погибает и удаляется как супернатант при центрифугировании, а относительно устойчивые к щелочи иерсинии выживают (патент от 27.07.2000 N 2153671):
1. <a id="p100238"></a>Исследуемый материал (нативный) центрифугируют при 500-1000 об./мин. 1,5-2,0 мин. для осаждения грубых частиц или отстаивают 2-3 ч. при комнатной температуре.
2. <a id="p100239"></a>Переносят 0,2-0,5 мл верхней фазы (в том числе, после "холодового обогащения" в течение 2-3 суток) в лунки полистиролового планшета для серологических реакций и смешивают с 0.72% КОН в таком же объеме.
3. <a id="p100240"></a>После 30-60 с. экспозиции проводят посев материала на дифференциально-диагностические среды и сразу же в лунки планшета добавляют 0,2-0,5 мл БХ для прекращения действия щелочи как селективного агента.
4. <a id="p100241"></a>Материал из лунки переносят в пробирку типа "Эппендорф" и центрифугируют на микроцентрифуге при 10000-12000 об./мин. 3-5 мин.
5. <a id="p100242"></a>Надосадочную жидкость удаляют, осадок дважды промывают дистиллированной водой путем центрифугирования.
6. <a id="p100243"></a>К осадку добавляют 20 мкл деионизованной воды, прогревают 10 мин. при 100 °С, центрифугируют при 12000 об./мин. 2 мин. Для ПЦР используют 1-3 мкл надосадочной жидкости.

###### <a id="p100244"></a>5.1.3.3 Иммунологические методы выявления специфических антигенов.

<a id="p100245"></a>Для выявления антигенов иерсиний используют тест-систему иммуноферментную для выявления антигенов иерсиний псевдотуберкулеза I серотипа.
<a id="p100246"></a>Материал для исследования, сроки и правила его взятия аналогичны п. 5.1.3.1.
<a id="p100247"></a>Исследование проб проводят в первые сутки их получения и затем на 3-5-е сутки после "холодового обогащения" в среде ПК. Непосредственно перед исследованием материал инактивируют 30 мин. при (56 +/- 1) °С, центрифугируют при 3000 об./мин. и берут для исследования надосадочную жидкость. Постановку и учет реакции осуществляют в соответствии с инструкцией по применению.

###### <a id="p100248"></a>5.1.3.4 Серологическое исследование на иерсиниозы.

<a id="p100249"></a>Для исследования требуется две пробы крови, взятые в разные периоды заболевания (парные сыворотки!): 1-я неделя начала заболевания и конец 2-й, начало 3-й недели болезни.
<a id="p100250"></a>Серологическая диагностика основывается на появлении или нарастании титра антител в течение болезни. Достоверным считается 2-4-кратное и выше нарастание титра антител при исследовании парных сывороток.
<a id="p100251"></a>Реакция агглютинации (РА). Для постановки РА используют стандартные иерсиниозные антигены распространенных серотипов, представляющие собой 10 млрд взвесь иерсиний эталонных штаммов в S-форме, убитых формалином и суспендированных в 0,9%-м растворе хлорида натрия. Перед постановкой микробную взвесь разводят в 10 раз до рабочей концентрации 1 млрд/мл. Реакцию ставят методом равных объемов (0,5 мл сыворотки + 0,5 мл взвеси). Диагностический титр - 1:160.
<a id="p100252"></a>Реакция непрямой гемагглютинации (РНГА). Для постановки РНГА используют коммерческие эритроцитарные диагностикумы к Y. pseudotuberculosis I серотипа и Y. enterocolitica серотипов О:3 и О:9, представляющие собой полисахаридные антигены иерсиний, фиксированные на поверхности формалинизированных бараньих эритроцитов. Методика постановки и учета РНГА приведена в инструкции по применению. При постановке РНГА с псевдотуберкулезным диагностикумом диагностический титр равен 1:100, кишечноиерсиниозными - 1:200.
<a id="p100253"></a>Для повышения диагностической эффективности РНГА и исключения ложноположительных результатов рекомендуется соблюдать следующие правила при постановке:
1. <a id="p100254"></a>Непосредственно перед постановкой РНГА чистые полистироловые пластины ополаскивают дистиллированной водой, а затем высушивают.
2. <a id="p100255"></a>Накануне постановки РНГА эритроцитарный диагностикум разводят 10 мл ЗФР (рН 7,2) и помешают в холодильник на ночь (для регидратации эритроцитов). Диагностикум, используемый сразу после разведения, часто дает нечеткий результат.
3. <a id="p100256"></a>Исследуемые сыворотки крови, разведенные ЗФР в соотношении 1:25, необходимо прогреть при 56 °С в течение 30 мин. для устранения неспецифических гемагглютининов, которые могут содержаться в сыворотках крови людей.
4. <a id="p100257"></a>Поскольку некоторые сыворотки крови человека содержат антитела к эритроцитам барана (последние используются для конструирования коммерческого диагностикума), рекомендуется предварительно перед использованием провести адсорбцию каждой сыворотки 50%-й взвесью бараньих эритроцитов (0,1 мл на 1 мл сыворотки) в течение ночи при температуре холодильника.
<a id="p100258"></a>Иммуноферментный анализ (ИФА). Для постановки ИФА используют тест-системы "Иерсиниоз-ИФА-IgA", "Иерсиниоз-ИФА-IgM", "Иерсиниоз-ИФА-IgG", предназначенные для выявления антител классов A, M и G к возбудителям кишечного иерсиниоза и псевдотуберкулеза. Постановку и учет реакции осуществляют в соответствии с инструкцией по применению.

##### <a id="p100259"></a>5.1.4. Регистрация и оформление результатов исследования

<a id="p100260"></a>Данные о проведении исследований (испытаний) регистрируются в учетной документации, включающей:
- <a id="p100261"></a>направления на проведение исследований;
- <a id="p100262"></a>журналы регистрации образцов, поступивших на исследование;
- <a id="p100263"></a>журналы регистрации результатов исследований.
<a id="p100264"></a>Результаты каждого исследования (испытания) оформляются по унифицированным формам.


#### <a id="p100265"></a>5.2. Порядок организации и проведения лабораторных исследований на иерсиниозы в ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в муниципальном образовании (городе, административном районе) в субъекте Российской Федерации



##### <a id="p100266"></a>5.2.1. Требования к лабораториям филиалов (отделений) ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в муниципальном образовании (городе, административном районе) в субъекте Российской Федерации, осуществляющим исследования на иерсиниозы

<a id="p100267"></a>Согласно п. 5.1.1.

##### <a id="p100268"></a>5.2.2. Номенклатура и объем исследований

<a id="p100269"></a>Микробиологические лаборатории филиалов (отделений) ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в муниципальном образовании (городе, административном районе) в субъекте Российской Федерации при проведении эпидемиологического надзора в соответствии с требованиями СП 3.1.2615-10 "Профилактика иерсиниозов" осуществляют в плановом порядке:
- <a id="p100270"></a>исследование проб с эпидемически значимых объектов ("объекты риска"): смывы с оборудования, инвентаря, овощей, пищевых продуктов в овощехранилищах, мясо- и молокоперерабатывающих предприятиях, объектах торговли продуктами растительного происхождения, пищеблоках объектов общественного питания, общеобразовательных учреждениях, детских и медицинских организациях;
- <a id="p100271"></a>исследования продуктов животноводства, птицеводства, плодоовощной продукции в разрезе Программы производственного контроля (по согласованию);
- <a id="p100272"></a>лабораторные исследования материала от больных (подозрительных на заболевание) - осуществляются по согласованию.
<a id="p100273"></a>По эпидпоказаниям исследованию подлежат:
- <a id="p100274"></a>материал от людей, находящихся в одинаковых с больными условиях по риску заражения, в эпидемических очагах при проведении эпидемиологического расследования и санитарно-противоэпидемических (профилактических) мероприятий;
- <a id="p100275"></a>в эпидемических очагах иерсиниозов или при неблагополучной эпидемиологической ситуации:
<a id="p100276"></a>смывы с овощей, фруктов и других продуктов, не подвергающихся термической обработке;
<a id="p100277"></a>смывы с поверхности оборудования, инвентаря и тары в овощехранилищах, пищеблоках организованных коллективов, домашних очагах;
<a id="p100278"></a>остатки подозреваемых пищевых продуктов (салаты, сок домашнего приготовления, фляжное молоко, творог домашнего приготовления, сырое свиное мясо, субпродукты и т.д.);
<a id="p100279"></a>экскременты домашних и сельскохозяйственных животных, смывы с их подстилок:
<a id="p100280"></a>помет мелких млекопитающих;
<a id="p100281"></a>вода открытых водоемов и из емкостей для хранения.
<a id="p100282"></a>В лабораториях филиалов (отделений) ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в муниципальном образовании (городе, административном районе) в субъекте Российской Федерации проводят диагностические исследования материала в следующем объеме:
1) <a id="p100283"></a>посев на среды накопления, "холодовое обогащение" с периодическими высевами на дифференциально-диагностические среды, отсев характерных по морфологическим свойствам колоний иерсиний на ПУС;
2) <a id="p100284"></a>идентификация и дифференциация выделенных культур до вида возбудителя по морфологическим, биохимическим и серологическим свойствам;
3) <a id="p100285"></a>выявление антител в парных сыворотках (РНГА, ИФА).

##### <a id="p100286"></a>5.2.3. Порядок лабораторных исследований на иерсиниозы в филиалах (отделениях) ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в муниципальном образовании (городе, административном районе) в субъекте Российской Федерации

<a id="p100287"></a>5.2.3.1. Правила отбора и транспортирования проб из объектов окружающей среды.
<a id="p100288"></a>Отбор проб и доставку осуществляют специалисты, владеющие методами отбора проб из объектов окружающей среды филиалов (отделений) ФБУЗ "ЦГиЭ".
- <a id="p100289"></a>Пищевые продукты. В стерильную емкость помещают 25 г каждого продукта.
- <a id="p100290"></a>Овощи. Одним влажным стерильным тампоном делают смыв не менее чем 10 экз. каждого вида овощей на границе здоровой и загнивающей части, помещают тампон в 5,0-10,0 мл среды накопления.
- <a id="p100291"></a>Смывы с оборудования, инвентаря, тары. Одним влажным тампоном производят смыв с одноименных поверхностей площадью 100 кв. см каждая, тампон помещают в 5,0-10,0 мл среды накопления.
- <a id="p100292"></a>Вода из емкостей для хранения и открытых водоемов. В стерильные флаконы забирают 1-2 л воды.
- <a id="p100293"></a>Помет. Собирают стерильной палочкой 1-2 г и помещают в 5,0 мл среды накопления.
<a id="p100294"></a>Пробы маркируют, обрабатывают снаружи дезинфицирующим раствором, упаковывают в полиэтиленовый пакет с застежкой-молнией, заполняют бланк-направление и помещают в контейнер для транспортирования материала для исследования. Транспортирование осуществляют при температуре 4-12 °С в течение двух часов после забора.
<a id="p100295"></a>5.2.3.2. Правила отбора и транспортирования проб от больных (подозрительных на заболевание) и лиц, находящихся с ними в одинаковых условиях по риску заражения.
<a id="p100296"></a>Материал от больных (подозрительных на заболевание) и лиц, находящихся с ними в одинаковых условиях по риску заражения, забирает медицинский персонал МО немедленно при выявлении больного, до начала лечения антибиотиками.
<a id="p100297"></a>Пробы маркируют, обрабатывают снаружи дезинфицирующим раствором, упаковывают в полиэтиленовый пакет с застежкой-молнией и вместе с бланком-направлением транспортируют при 4-12 °С в лабораторию МО или филиал (отделение) ФБУЗ "ЦГиЭ" (по договоренности) в течение двух часов после забора.
<a id="p100298"></a>Взятие материала осуществляют согласно п. 5.1.3.1.
<a id="p100299"></a>5.2.3.3. Порядок проведения лабораторного исследования на иерсиниозы объектов окружающей среды и материала от людей.
<a id="p100300"></a>Исследование проб объектов окружающей среды, исследование клинического материала на иерсиниозы, видопринадлежность выделенных культур осуществляют в соответствии с п. 5.1.3.

##### <a id="p100301"></a>5.2.4. Регистрация и оформление результатов исследования

<a id="p100302"></a>Регистрация результатов анализа производится по учетным формам филиалов (отделений) ФБУЗ "ЦГиЭ" согласно п. 5.1.4.

##### <a id="p100303"></a>5.2.5. Порядок передачи информации и выделенных культур лабораториями филиалов (отделений) ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в муниципальном образовании в ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации

<a id="p100304"></a>Информация о выделенных штаммах Y. pseudotuberculosis и Y. enterocolitica в лабораториях филиалов (отделений) ФБУЗ "ЦГиЭ" от людей и объектов окружающей среды передается в ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации.
<a id="p100305"></a>Культуры Y. pseudotuberculosis и Y. enterocolitica направляются в лаборатории ФБУЗ "ЦГиЭ" в субъекте Российской Федерации. Передача и транспортирование осуществляются в соответствии с действующими санитарными правилами по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности. Прилагается паспорт на культуру в одном экземпляре (прилож. 7 к МУ), сопроводительное письмо, акт передачи живых культур.


#### <a id="p100306"></a>5.3. Порядок организации и проведения лабораторных исследований на иерсиниозы в лабораториях ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации



##### <a id="p100307"></a>5.3.1. Требования к лабораториям ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации

<a id="p100308"></a>Согласно п. 5.1.1.

##### <a id="p100309"></a>5.3.2. Номенклатура и объем исследований

<a id="p100310"></a>Микробиологические лаборатории ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации проводят в плановом порядке:
- <a id="p100311"></a>исследования проб с эпидемиологически значимых объектов "объектов риска" (смывы с оборудования, инвентаря, овощей, пищевых продуктов в овощехранилищах, мясо- и молокоперерабатывающих предприятиях, объектах торговли продуктами растительного происхождения, пищеблоках объектов общественного питания, общеобразовательных учреждениях, детских и медицинских организациях);
- <a id="p100312"></a>исследования продуктов животноводства, птицеводства, плодоовощной продукции в разрезе Программы производственного контроля (по согласованию);
- <a id="p100313"></a>исследования материала от больных (подозрительных на заболевание) (по согласованию);
- <a id="p100314"></a>подтверждение и идентификацию культур иерсиний, выделенных лабораториями МО и филиалами (отделениями) ФБУЗ "ЦГиЭ" по морфологическим, культурально-биохимическим и серологическим свойствам.
<a id="p100315"></a>По эпидпоказаниям исследованию подлежат:
- <a id="p100316"></a>материал от людей, находящихся в одинаковых с больными условиях по риску заражения, в эпидемических очагах при проведении санитарно-противоэпидемических мероприятий;
- <a id="p100317"></a>смывы с овощей, фруктов и других продуктов, не подвергающихся термической обработке;
- <a id="p100318"></a>смывы с поверхности оборудования, инвентаря и тары в овощехранилищах, пищеблоках организованных коллективов, домашних очагах;
- <a id="p100319"></a>остатки подозреваемых пищевых продуктов (салаты, сок домашнего приготовления, фляжное молоко, творог домашнего приготовления, сырое свиное мясо, субпродукты и т.д.);
- <a id="p100320"></a>экскременты домашних и сельскохозяйственных животных, смывы с их подстилок;
- <a id="p100321"></a>помет мелких млекопитающих;
- <a id="p100322"></a>вода открытых водоемов и из емкостей для хранения;
- <a id="p100323"></a>исследование проб, собранных в ходе эпизоотологического обследования (тонкий кишечник мелких млекопитающих и птиц, брыжейка и мезентеральные лимфоузлы, гнезда грызунов, почва).
<a id="p100324"></a>В лабораториях ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации проводят исследования материала в следующем объеме:
1) <a id="p100325"></a>посев на среды накопления, "холодовое обогащение" с периодическими высевами на дифференциально-диагностические среды, отсев характерных для иерсиний колоний на ПУС с одновременным выполнением экспресс-методов диагностики иерсиниозов (ПЦР, Real-time ПЦР);
2) <a id="p100326"></a>идентификация и дифференциация выделенных культур до вида по морфологическим, биохимическим и антигенным свойствам, в том числе с использованием полу- или автоматизированных систем идентификации ("Vitek-2". "Mini API". "Микроб-2", "Микроб-Автомат" или аналоги) при наличии оборудования и тест-систем;
3) <a id="p100327"></a>индикация и идентификация культур иерсиний с использованием ПЦР, Real-time ПЦР;
4) <a id="p100328"></a>выявление антител в парных сыворотках (РНГА, ИФА, РА).

##### <a id="p100329"></a>5.3.3. Порядок лабораторных исследований на иерсиниозы в ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации

<a id="p100330"></a>5.3.3.1. Правила отбора и транспортирования проб из объектов окружающей среды.
<a id="p100331"></a>Отбор и транспортирование материала осуществляют согласно п. 5.2.3.1.

###### <a id="p100332"></a>5.3.3.2 Правила отбора и транспортирования клинического материала.

<a id="p100333"></a>Отбор и транспортирование материала осуществляют согласно пп. 5.1.3.1 и 5.2.3.2.
<a id="p100334"></a>5.3.3.3. Правила отбора проб материала от животных, собранных при обследовании природных или антропоургических очагов иерсиниозов.
<a id="p100335"></a>Материал, собранный в ходе обследования природных и антропургических очагов, должен быть свежим, поэтому органы животных следует забирать в максимально короткие сроки или соблюдать низкотемпературный режим для транспортировки и хранения полевого материала. Лабораторному исследованию подвергают: тонкий кишечник мелких млекопитающих, птиц, сельскохозяйственных и домашних животных, субстрат гнезд грызунов:
- <a id="p100336"></a>Тонкий кишечник. 1,0-2,0 г в месте перехода тонкой кишки в толстую с содержимым забирают стерильно и помещают в 5,0 мл среды накопления.
- <a id="p100337"></a>Брыжейка, мезентеральные лимфоузлы. 1,0-2,0 г стерильно измельчают, 1 мл суспензии помещают в 5,0 мл среды накопления.
- <a id="p100338"></a>Гнезда грызунов. Субстраты гнезд (примерно 10 г каждого) растирают в ступке пестиком с фосфатно-буферным раствором, 1,5 мл взвеси вносят в 15,0 мл среды накопления.
<a id="p100339"></a>5.3.3.4. Порядок проведения лабораторного исследования на иерсиниозы объектов окружающей среды, материала от людей, полевого материала, выделенных культур.
<a id="p100340"></a>Исследование материала от людей с диагностической целью и по эпидпоказаниям, проб из объектов окружающей среды по эпидпоказаниям проводят в соответствии с п. 5.1.3. При осуществлении планового эпизоотологического мониторинга за природными очагами иерсиниозов высевы со сред накопления рекомендуется проводить до 21 суток.
<a id="p100341"></a>Идентификация выделенной культуры проводится по следующим тестам:
- <a id="p100342"></a>характерная морфология колоний;
- <a id="p100343"></a>типичные биохимические свойства;
- <a id="p100344"></a>чувствительность к псевдотуберкулезному фагу;
- <a id="p100345"></a>серологическое типирование с использованием диагностических сывороток к Y. pseudotuberculosis и Y. enterocolitica;
- <a id="p100346"></a>биотипирование Y. enterocolitica по набору тестов (ферментация салицина, липазная активность, образование индола, ферментация ксилозы, нитратредуктазная активность, реакция Фогес-Проскауэра);
- <a id="p100347"></a>определение вирулентности иерсиний по фенотипическим признакам (тест на аутоагглютинацию, определение кальцийзависимости роста иерсиний);
- <a id="p100348"></a>РА на стекле с сывороткой к вирулентным иерсиниям.

##### <a id="p100349"></a>5.3.4. Регистрация и оформление результатов исследования

<a id="p100350"></a>Регистрация результатов анализа производится по учетным формам ФБУЗ "ЦГиЭ" согласно п. 5.1.4.

##### <a id="p100351"></a>5.3.5. Порядок передачи информации и выделенных культур лабораториями ФБУЗ "Центр гигиены эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации в Региональные центры по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней II-IV групп патогенности

<a id="p100352"></a>Информация о выделенных или идентифицированных культурах Y. pseudotuberculosis и Y. enterocolitica передается в Региональные центры по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней II-IV групп патогенности.
<a id="p100353"></a>Культуры иерсиний, выделенных от людей, мелких млекопитающих и объектов окружающей среды, и идентифицированные в лабораториях ФБУЗ "Центр гигиены и эпидемиологии" в субъекте Российской Федерации передаются в установленном порядке в Региональные центры по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней II-IV групп патогенности. Передачу и транспортирование осуществляют в соответствии с СП по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов II-IV групп патогенности. Прилагается паспорт на культуру, сопроводительное письмо и акт передачи патогенных биологических агентов III-IV групп за пределы организации.


### 6. <a id="p100354"></a>Порядок организации и проведения исследований на иерсиниозы для лабораторий регионального уровня



#### <a id="p100355"></a>6.1. Порядок организации и проведения исследований на иерсиниозы в лабораториях Региональных центров по мониторингу возбудителей инфекционных и паразитарных болезней II-IV групп патогенности в федеральных округах



##### <a id="p100356"></a>6.1.1. Требования к лабораториям Региональных центров по мониторингу возбудителей инфекционных и паразитарных болезней II-IV групп патогенности

<a id="p100357"></a>Согласно п. 5.1.1.

##### <a id="p100358"></a>6.1.2. Номенклатура и объем исследования

<a id="p100359"></a>Лаборатории Региональных центров по мониторингу за возбудителями инфекционных и паразитарных болезней II-IV групп патогенности проводят:
- <a id="p100360"></a>верификацию культур иерсиний и их расширенную идентификацию;
- <a id="p100361"></a>диагностические исследования материала от больных и объектов окружающей среды - в случае отсутствия диагностических возможностей на местах, трудности дифференциальной диагностики, наличия тяжелых и атипичных форм инфекции и т.д.;
- <a id="p100362"></a>исследование проб, собранных в ходе эпизоотологического обследования природных и антропургических очагов иерсиниозов;
- <a id="p100363"></a>контроль качества питательных сред.
<a id="p100364"></a>Лаборатории Региональных центров по мониторингу возбудителей инфекционных и паразитарных болезней II-IV групп патогенности проводят исследования в следующем объеме:
- <a id="p100365"></a>идентификация культур, доставленных (определение биотипа, серотипа возбудителя, определение вирулентности культуры по фенотипическим признакам);
- <a id="p100366"></a>индикация и идентификация культур иерсиний при использовании ПЦР, Real-time ПЦР;
- <a id="p100367"></a>посев на среды накопления с одновременным выполнением экспресс-методов диагностики (ПЦР, Real-time ПЦР);
- <a id="p100368"></a>высев со сред накопления на дифференциально-диагностические среды, отсев подозрительных колоний для последующей родовой и видовой дифференциации;
- <a id="p100369"></a>идентификация возбудителя с использованием полу- или автоматизированных систем идентификации ("Vitek-2", "Mini API", "Микроб-2", "Микроб-Автомат" или аналоги) при наличии оборудования.

##### <a id="p100370"></a>6.1.3. Организация и обеспечение исследований на иерсиниозы в лабораториях Региональных центров по мониторингу возбудителей инфекционных и паразитарных болезней II-IV групп патогенности

<a id="p100371"></a>Порядок исследований клинического материала, проб из объектов окружающей среды, грызунов, птиц, материала от сельскохозяйственных и домашних животных проводят в соответствии с п. 5.1.3.
<a id="p100372"></a>К подтверждающим тестам относительно Y. pseudotuberculosis/Y. enterocolitica относятся:
- <a id="p100373"></a>характерная морфология колоний;
- <a id="p100374"></a>типичные биохимические свойства;
- <a id="p100375"></a>чувствительность к псевдотуберкулезному бактериофагу:
- <a id="p100376"></a>серологическое типирование с использованием диагностических сывороток к Y. enterocolitica и Y. pseudotuberculosis;
- <a id="p100377"></a>биотипирование Y. enterocolitica по набору тестов (ферментация салицина, ксилозы, образование индола, редукция нитратов, реакция Фогес-Проскауэра);
- <a id="p100378"></a>тест на аутоагглютинацию, определение кальцийзависимости роста иерсиний, определение температурозависимой морфологии колоний; РА на стекле для выявления вирулентных иерсиний с СВИ;
- <a id="p100379"></a>определение чувствительности к антибиотикам диско-диффузионным методом;
- <a id="p100380"></a>определение видоспецифических ДНК-мишений методом ПЦР.

##### <a id="p100381"></a>6.1.4. Регистрация и оформление результатов исследования

<a id="p100382"></a>Регистрация результатов исследования оформляется согласно п. 5.1.4.

##### <a id="p100383"></a>6.1.5. Порядок передачи информации и выделенных культур лабораториями Региональных центров по мониторингу возбудителей инфекционных и паразитарных болезней II-IV групп патогенности в Референс-центры

<a id="p100384"></a>Информация о выделенных и идентифицированных культурах Y. pseudotuberculosis и патогенных Y. enterocolitica передается в Референс-центр по мониторингу за возбудителями иерсиниозов (ФБУН "Санкт-Петербургский НИИ эпидемиологии и микробиологии имени Пастера" Роспотребнадзора) и Референс-центр по мониторингу за возбудителями природно-очаговых инфекций (ФКУЗ "Иркутский НИПЧИ Сибири и Дальнего Востока" Роспотребнадзора).
<a id="p100385"></a>При невозможности проведения диагностических исследований для установления причинно-следственной связи при работе в эпидемическом очаге, верификации и расширенной идентификации культур в Региональном центре по мониторингу за возбудителями II-IV групп патогенности лабораторные исследования (пп. 6.1.2 и 6.1.3) проводятся в других Региональных центрах по мониторингу за возбудителями II-IV групп патогенности по согласованию с Референс-центром по иерсиниозам (Региональные опорные базы-консультантов). Лаборатории данных центров должны соответствовать требованиям, изложенным в п. 5.1.1.
<a id="p100386"></a>Культуры Y. pseudotuberculosis и патогенных Y. enterocolitica от людей, грызунов и объектов окружающей среды, идентифицированные в лабораториях ФБУЗ "ЦГиЭ" в субъекте РФ, Региональных центрах по мониторингу возбудителей II-IV групп патогенности и в Региональных опорных базах - консультантов в федеральных округах передаются в установленном порядке в Референс-центр по иерсиниозам, а для территорий Сибирского и Дальневосточного федеральных округов - в Референс-центр по природно-очаговым инфекционным болезням.
<a id="p100387"></a>Передачу и транспортирование осуществляют в соответствии с действующими СП по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов II-IV групп патогенности. Прилагается паспорт на культуру (прилож. 7 к МУ), сопроводительное письмо и акт передачи патогенных биологических агентов III-IV групп за пределы организации.


### 7. <a id="p100388"></a>Порядок организации и проведения исследований на иерсиниозы в лабораториях федерального уровня (Референс-центр по мониторингу за иерсиниозами, Референс-центр по мониторингу за возбудителями природно-очаговых инфекционных болезней)



#### <a id="p100389"></a>7.1. Требования к лабораториям Референс-центра по мониторингу за иерсиниозами и Референс-центра по мониторингу за возбудителями природно-очаговых инфекционных болезней


<a id="p100390"></a>Согласно п. 5.1.1.


#### <a id="p100391"></a>7.2. Номенклатура и объем исследований


<a id="p100392"></a>Диагностические лаборатории Референс-центров проводят:
- <a id="p100393"></a>расширенную идентификацию и изучение биологических, биохимических, молекулярно-генетических характеристик иерсиний, в том числе культур с атипичными свойствами;
- <a id="p100394"></a>проводят генотипирование иерсиний современными методами;
- <a id="p100395"></a>проводят исследования клинического материала, проб из объектов окружающей среды и проб полевого материала - на договорной основе;
- <a id="p100396"></a>оказывают консультативно-методическую помощь по проведению лабораторных исследований на иерсиниозы организациям Роспотребнадзора и здравоохранения в субъектах Российской Федерации;
- <a id="p100397"></a>обеспечивают повышение профессиональной подготовки специалистов лабораторного звена организаций Роспотребнадзора и здравоохранения при наличии соответствующих разрешительных документов;
- <a id="p100398"></a>направляют в Государственные коллекции штаммы иерсиний в установленном порядке;
- <a id="p100399"></a>организуют работы по внешнему контролю качества лабораторных исследований и мониторинга за иерсиниями по согласованию с Федеральной службой по надзору в сфере защиты прав потребителей и благополучия человека.


#### <a id="p100400"></a>7.3. Организация и обеспечение деятельности при мониторинге за иерсиниозами


<a id="p100401"></a>Материалом для исследования служат культуры иерсиний, в том числе культуры с атипичными свойствами, выделенные в лабораториях территориального (муниципального) и регионального уровней; клинический материал, сыворотка крови больных иерсиниозами и подозрительных на инфекцию лиц, пробы из объектов окружающей среды и полевой материал по эпидпоказаниям и на договорной основе.
<a id="p100402"></a>При исследовании культур возбудителей иерсиниозов, в том числе культур с атипичными свойствами, используют биологические и современные высокотехнологичные методы бактериологического, иммуносерологического и молекулярно-генетического анализа, а также современные серологические методы исследования сывороток крови больных иерсиниозами и подозрительных на эти инфекции, обследуемых по эпидпоказаниям.
<a id="p100403"></a>Порядок исследования клинического материала, проб из объектов окружающей среды, мелких млекопитающих на иерсиниозы соответствуют п. 5.1.3.
<a id="p100404"></a>Идентификация поступивших культур осуществляется по полной схеме:
- <a id="p100405"></a>характерная морфология колоний;
- <a id="p100406"></a>изучение биохимических свойств на расширенной биохимической панели, определение биотипа Y. enterocolitica;
- <a id="p100407"></a>постановка развернутой реакции агглютинации с иерсиниозными агглютинирующими сыворотками (к Y. enterocolitica серотипов О:3; О:5,27; О:8; О:9 и др.; к Y. pseudotuberculosis серотипов О:1, О:3);
- <a id="p100408"></a>определение детерминант патогенности в ПЦР (гены "острова высокой патогенности" HPI; "острова патогенности" YAPI; гены адгезии - инвазии inv, ail, гены энтеротоксинов ystA, ystB, гены плазмиды вирулентности иерсиний);
- <a id="p100409"></a>определение чувствительности к антибиотикам (диско-диффузионным методом, методом разведений в агаре и бульоне);
- <a id="p100410"></a>определение плазмидного спектра выделенных штаммов;
- <a id="p100411"></a>определение серо-генотипа ПЦР (в случае отсутствия диагностических сывороток);
- <a id="p100412"></a>электрофорез в пульсирующем поле (PFGE) - определение пульсотипа;
- <a id="p100413"></a>мультилокусный вариабельный анализ (MLVA);
- <a id="p100414"></a>определение вирулентности Y. pseudotuberculosis (определение LD50 при пероральном заражении белых мышей с помощью зонда; постановка кератоконъюнктивальной пробы на морских свинках).
<a id="p100415"></a>При идентификации культур иерсиний с атипичными свойствами используют дополнительные биохимические, серологические, иммунологические и другие методы для подтверждения принадлежности культур к роду Yersinia и известным видам:
- <a id="p100416"></a>расширенная панель биохимических тестов;
- <a id="p100417"></a>ПЦР с использованием дополнительных специфических праймеров;
- <a id="p100418"></a>постановка иммуносерологических реакций с использованием моноклональных антител.
<a id="p100419"></a>Окончанием идентификации должно быть составление молекулярного профиля возбудителя.


#### <a id="p100420"></a>7.4. Порядок взаимодействия лабораторий Референс-центра по мониторингу за иерсиниозами с организациями Роспотребнадзора


<a id="p100421"></a>Информация об идентифицированных культурах иерсиний направляется в Региональные центры по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней II-IV групп патогенности по согласованию с Референс-центром по иерсиниозам. Оригинальные штаммы иерсиний, идентифицированные в бактериологических лабораториях Референс-центров, передаются в Государственную коллекцию штаммов микроорганизмов Национального центра верификации диагностической деятельности ФКУЗ "РосНИПЧИ "Микроб" Роспотребнадзора.
<a id="p100422"></a>Передачу и транспортирование осуществляют в соответствии с СП по порядку учета, хранения, передачи и транспортирования микроорганизмов I-IV групп патогенности. Прилагается паспорт на культуру в одном экземпляре, сопроводительное письмо, акт передачи патогенных биологических агентов III-IV групп за пределы организации.





<a id="p100423"></a>Приложение 1

<div align="center">

<a id="p100424"></a>**ПОДГОТОВКА КАДРОВ**

</div>

**ПО ЛАБОРАТОРНЫМ ИССЛЕДОВАНИЯМ ИЕРСИНИОЗОВ**


<table>
<colgroup><col width="5%"><col width="21%"><col width="10%"><col width="9%"><col width="10%"><col width="8%"><col width="9%"><col width="8%"><col width="10%"><col width="9%"></colgroup>
<tr><td rowspan="3">N п/п</td><td rowspan="3">Перечень бактериологических лабораторий с учетом уровней</td><td colspan="8">Уровни подготовки</td></tr>
<tr><td colspan="2">Профессиональная переподготовка по специальности "Бактериология" ("Лабораторное дело") (не менее 500 ч.)</td><td colspan="2">Повышение квалификации каждые 5 лет (не менее 144 ч.)</td><td colspan="2">Сертификационный цикл</td><td colspan="2">Другие виды подготовки (тематические семинары, рабочие места в лабораториях Референсцентрах (по согласованию)</td></tr>
<tr><td>врачи, биологи</td><td>лаборанты</td><td>врачи, биологи</td><td>лаборанты</td><td>врачи</td><td>лаборанты</td><td>врачи, биологи</td><td>лаборанты</td></tr>
<tr><td>1</td><td>2</td><td>3</td><td>4</td><td>5</td><td>6</td><td>7</td><td>8</td><td>9</td><td>10</td></tr>
<tr><td colspan="10">Территориальный уровень</td></tr>
<tr><td>1.</td><td>ЛПО</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+ &lt;*&gt;</td><td>+ &lt;*&gt;</td></tr>
<tr><td>2.</td><td>Филиалы (отделения) ФБУЗ ЦГиЭ</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+ &lt;*&gt;</td><td>+ &lt;*&gt;</td></tr>
<tr><td>3.</td><td>ФБУЗ ЦГиЭ</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+ &lt;*&gt;</td><td>+ &lt;*&gt;</td></tr>
<tr><td colspan="10">Региональный уровень</td></tr>
<tr><td>1.</td><td>Региональные центры по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней II-IV групп патогенности</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td>2.</td><td>Опорные базы - консультантов, сотрудничающие по согласованию с Референсцентром по иерсиниозам</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td colspan="10">Федеральный уровень</td></tr>
<tr><td>1.</td><td>Референс-центр по мониторингу за возбудителями природноочаговых инфекционных болезней</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td></td><td>Референс-центр по мониторингу за иерсиниозами</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>-</td><td>-</td></tr>
<tr><td colspan="10">+ - обязательный уровень подготовки; - - не требуется подготовка для такого уровня; &lt;*&gt; - подготовка для такого уровня рекомендуется, но не является обязательной.</td></tr>
</table>






<a id="p100441"></a>Приложение 2

<a id="p100442"></a>**ТРЕБОВАНИЯ**
**К ПРОФЕССИОНАЛЬНЫМ НАВЫКАМ СПЕЦИАЛИСТОВ, ОСУЩЕСТВЛЯЮЩИХ**
**ЛАБОРАТОРНЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ ИЕРСИНИОЗОВ**


### 1. <a id="p100443"></a>Требования к знаниям и умениям специалистов МО, выполняющих исследования на иерсиниозы



#### <a id="p100444"></a>1.1 Врачи-бактериологи, врачи-лаборанты ПЦР-лаборатории должны знать:

- <a id="p100445"></a>основные положения клинико-эпидемиологических проявлений иерсиниозов и характеристику иерсиний, особенности лабораторного обследования больного в соответствии с клиническими формами заболеваний;
- <a id="p100446"></a>нормативные документы, регламентирующие проведение исследований на иерсиниозы;
- <a id="p100447"></a>требования биологической безопасности при работе с материалом, подозрительным на зараженность возбудителями III-IV групп патогенности;
- <a id="p100448"></a>порядок сбора, хранения, обеззараживания, утилизации биологических отходов;
- <a id="p100449"></a>порядок доставки, приема, регистрации клинического материала:
- <a id="p100450"></a>порядок проведения работ, обеспечивающих лабораторное исследование (подготовка диагностических препаратов, химических реактивов, расходных материалов, лабораторной посуды, сред, пробоподготовка клинического материала);
- <a id="p100451"></a>этапы лабораторного исследования;
- <a id="p100452"></a>методы лабораторного исследования;
- <a id="p100453"></a>морфологические, культуральные, серологические, биохимические, вирулентные, молекулярно-биологические свойства иерсиний;
- <a id="p100454"></a>порядок работы на лабораторном оборудовании;
- <a id="p100455"></a>порядок выдачи результатов лабораторного исследования;
- <a id="p100456"></a>порядок, сроки передачи культур иерсиний в специализированную лабораторию для дальнейшего изучения;
- <a id="p100457"></a>требования биологической безопасности при передаче ПБА.

#### <a id="p100458"></a>1.2 Врачи-бактериологи должны уметь:

- <a id="p100459"></a>проводить отбор типичных для иерсиний колоний с питательных сред:
- <a id="p100460"></a>проводить пересев колоний на полиуглеводные среды;
- <a id="p100461"></a>проводить биотипирование выделенных культур Y. enterocolitica;
- <a id="p100462"></a>проводить с выделенными культурами Y. etiterocolitica РА с сывороткой к вирулентным иерсиниям;
- <a id="p100463"></a>проводить учет полученных морфологических, культуральных, серологических, биохимических, вирулентных свойств исследуемого микроорганизма;
- <a id="p100464"></a>проводить учет серологического исследования крови;
- <a id="p100465"></a>выдавать ответ по результатам исследований;
- <a id="p100466"></a>готовить культуры, материал для передачи в специализированную лабораторию;
- <a id="p100467"></a>вести необходимую документацию.

#### <a id="p100468"></a>1.3 Врачи-лаборанты ПЦР-лаборатории должны уметь:

- <a id="p100469"></a>готовить рабочее место для проведения ПЦР-исследования;
- <a id="p100470"></a>проводить выделение нуклеиновых кислот, амплификацию, учет результатов;
- <a id="p100471"></a>проводить обеззараживание рабочего места после окончания работ;
- <a id="p100472"></a>выдавать ответ по результатам исследований;
- <a id="p100473"></a>вести необходимую документацию.

#### <a id="p100474"></a>1.4 Лаборанты-бактериологи должны знать:

- <a id="p100475"></a>нормативные документы, регламентирующие проведение исследований на иерсиниозы;
- <a id="p100476"></a>требования биологической безопасности при работе с материалом, подозрительным на зараженность возбудителями III-IV групп патогенности;
- <a id="p100477"></a>порядок сбора, хранения, обеззараживания, утилизации биологических отходов;
- <a id="p100478"></a>порядок доставки, приема, регистрации клинического материала:
- <a id="p100479"></a>порядок проведения работ, обеспечивающих лабораторное исследование (подготовка диагностических препаратов, химических реактивов, расходных материалов, лабораторной посуды, сред, пробоподготовка клинического материала);
- <a id="p100480"></a>этапы лабораторного исследования;
- <a id="p100481"></a>методы лабораторного исследования;
- <a id="p100482"></a>порядок работы на лабораторном оборудовании.

#### <a id="p100483"></a>1.5 Лаборанты-бактериологи должны уметь:

- <a id="p100484"></a>принимать, регистрировать клинический материал, оценивать соблюдение требований доставки клинического материала;
- <a id="p100485"></a>проводить подготовку диагностических препаратов, химических реактивов, расходных материалов, лабораторной посуды, сред, пробоподготовку клинического материала;
- <a id="p100486"></a>выполнять первичные посевы клинического материала, пересевы со сред обогащения, проведение биохимических тестов;
- <a id="p100487"></a>выполнять постановку серологических реакций (РА, ИФА, РНГА);
- <a id="p100488"></a>готовить дезинфицирующие средства, обеззараживать посевы, биологические отходы;
- <a id="p100489"></a>готовить культуры, материал для передачи в специализированную лабораторию;
- <a id="p100490"></a>готовить рабочие места врача и лаборанта, после окончания работ проводить обеззараживание;
- <a id="p100491"></a>вести необходимую документацию.

#### <a id="p100492"></a>1.6 Лаборанты ПЦР-лаборатории должны уметь:

- <a id="p100493"></a>принимать, регистрировать клинический материал, оценивать соблюдение требований забора, доставки клинического материала;
- <a id="p100494"></a>готовить рабочее место для проведения ПЦР-исследования;
- <a id="p100495"></a>проводить пробоподготовку клинического материала;
- <a id="p100496"></a>проводить выделение нуклеиновых кислот:
- <a id="p100497"></a>проводить обеззараживание рабочего места после окончания работ;
- <a id="p100498"></a>готовить дезинфицирующие средства, обеззараживать биологические отходы.


### 2. <a id="p100499"></a>Требования к знаниям и умениям специалистов филиалов (отделения) ФБУЗ ЦГиЭ, выполняющих исследования на иерсиниозы



#### <a id="p100500"></a>2.1 Врачи-бактериологи должны знать:

- <a id="p100501"></a>основные положения эпидемиологического надзора за иерсиниозами, в том числе контингент обследуемых, клинические формы заболеваний, виды исследуемых проб из объектов окружающей среды;
- <a id="p100502"></a>нормативные документы, регламентирующие проведение исследований на иерсиниозы;
- <a id="p100503"></a>требования биологической безопасности при работе с материалом, подозрительным на зараженность возбудителями III-IV групп патогенности;
- <a id="p100504"></a>порядок сбора, хранения, обеззараживания, утилизации биологических отходов;
- <a id="p100505"></a>порядок доставки, приема, регистрации клинического материала, проб из объектов окружающей среды;
- <a id="p100506"></a>порядок проведения работ, обеспечивающих лабораторное исследование (подготовка диагностических препаратов, химических реактивов, расходных материалов, лабораторной посуды, сред, пробоподготовка материала);
- <a id="p100507"></a>этапы лабораторного исследования;
- <a id="p100508"></a>методы лабораторного исследования;
- <a id="p100509"></a>морфологические, культуральные, серологические, биохимические, вирулентные свойства иерсиний;
- <a id="p100510"></a>порядок работы на лабораторном оборудовании;
- <a id="p100511"></a>порядок выдачи результатов лабораторного исследования;
- <a id="p100512"></a>порядок, сроки передачи культур иерсиний в специализированную лабораторию для дальнейшего изучения;
- <a id="p100513"></a>требования биологической безопасности при передаче ПБА в другую организацию.

#### <a id="p100514"></a>2.2 Врачи-бактериологи должны уметь:

- <a id="p100515"></a>проводить отбор типичных для иерсиний колоний с питательных сред;
- <a id="p100516"></a>проводить пересев колоний на полиуглеводные среды;
- <a id="p100517"></a>проводить биотипирование выделенных культур Y. enterocolitica:
- <a id="p100518"></a>проводить с выделенными культурами Y. enterocolitica РА с сывороткой к вирулентным иерсиниям;
- <a id="p100519"></a>проводить учет полученных морфологических, культуральных, серологических, биохимических свойств и маркеров вирулентности исследуемого микроорганизма;
- <a id="p100520"></a>проводить учет серологического исследования крови;
- <a id="p100521"></a>выдавать ответ по результатам исследований;
- <a id="p100522"></a>готовить культуры, материал для передачи в специализированную лабораторию;
- <a id="p100523"></a>вести необходимую документацию.

#### <a id="p100524"></a>2.3 Лаборанты должны знать:

- <a id="p100525"></a>нормативные документы, регламентирующие проведение исследований на иерсиниозы;
- <a id="p100526"></a>требования биологической безопасности при работе с материалом, подозрительным на зараженность возбудителями III-IV групп патогенности;
- <a id="p100527"></a>порядок сбора, хранения, обеззараживания, утилизации биологических отходов:
- <a id="p100528"></a>порядок доставки, приема, регистрации клинического материала, проб из внешней среды;
- <a id="p100529"></a>порядок проведения работ, обеспечивающих лабораторное исследование;
- <a id="p100530"></a>этапы лабораторного исследования;
- <a id="p100531"></a>методы лабораторного исследования;
- <a id="p100532"></a>порядок работы на лабораторном оборудовании.

#### <a id="p100533"></a>2.4 Лаборанты должны уметь:

- <a id="p100534"></a>принимать, регистрировать клинический материал, оценивать соблюдение требований доставки клинического материала;
- <a id="p100535"></a>проводить подготовку диагностических препаратов, химических реактивов, расходных материалов, лабораторной посуды, сред, пробоподготовку исследуемого материала;
- <a id="p100536"></a>выполнять первичные посевы клинического материала, пересевы со сред обогащения, проведение биохимических тестов, тестов на маркеры вирулентности иерсиний - аутоагглютинации, кальцийзависимости;
- <a id="p100537"></a>выполнять постановку серологических реакций (РА, ИФА, РНГА);
- <a id="p100538"></a>готовить дезинфицирующие средства, обеззараживать посевы, биологические отходы;
- <a id="p100539"></a>готовить рабочие места врача и лаборанта, после окончания работ проводить обеззараживание;
- <a id="p100540"></a>готовить культуры, материал для передачи в специализированную лабораторию;
- <a id="p100541"></a>вести необходимую документацию.


### 3. <a id="p100542"></a>Требования к знаниям и умениям специалистов региональных центров по мониторингу за возбудителями (II-IV групп патогенности), ФБУЗ ЦГиЭ, выполняющих исследования на иерсиниозы



#### <a id="p100543"></a>3.1 Врачи-бактериологи должны знать:

- <a id="p100544"></a>основные положения эпидемиологического надзора за иерсиниозами, в том числе контингенты обследуемых, клинические формы заболеваний, виды исследуемых проб от людей, из объектов окружающей среды;
- <a id="p100545"></a>порядок организации и обеспечения консультативной и практической помощи лабораториям ЛПУ, филиалов (отделения) ФБУЗ ЦГиЭ, ФБУЗ ЦГиЭ территориального уровня;
- <a id="p100546"></a>нормативные документы, регламентирующие проведение исследований на иерсиниозы;
- <a id="p100547"></a>требования биологической безопасности при работе с материалом, подозрительным на зараженность возбудителями III-IV групп патогенности;
- <a id="p100548"></a>порядок сбора, хранения, обеззараживания, утилизации биологических отходов;
- <a id="p100549"></a>порядок доставки, приема, регистрации клинического материала, проб из внешней среды;
- <a id="p100550"></a>порядок проведения работ, обеспечивающих лабораторное исследование (подготовка диагностических препаратов, химических реактивов, расходных материалов, лабораторной посуды, сред, пробоподготовка материала);
- <a id="p100551"></a>этапы лабораторного исследования;
- <a id="p100552"></a>методы лабораторного исследования;
- <a id="p100553"></a>морфологические, культуральные, серологические, биохимические, вирулентные, молекулярно-биологические свойства иерсиний;
- <a id="p100554"></a>порядок работы на лабораторном оборудовании;
- <a id="p100555"></a>порядок выдачи результатов лабораторного исследования;
- <a id="p100556"></a>порядок, сроки передачи культур иерсиний в Референс-центр по иерсиниозам для дальнейшего изучения;
- <a id="p100557"></a>требования биологической безопасности при передаче ПБА в другую организацию.

#### <a id="p100558"></a>3.2 Врачи-бактериологи должны уметь:

- <a id="p100559"></a>проводить отбор типичных для иерсиний колоний с питательных
<a id="p100560"></a>сред;
- <a id="p100561"></a>проводить посев на полиуглеводные среды;
- <a id="p100562"></a>проводить типирование выделенных культур Y. enterocolitica на наличие маркеров вирулентности;
- <a id="p100563"></a>проводить с выделенными культурами Y. enterocolitica РА с сывороткой к вирулентным иерсиниям;
- <a id="p100564"></a>проводить серологическое типирование культур иерсиний;
- <a id="p100565"></a>проводить учет полученных морфологических, культуральных, серологических, биохимических свойств и маркеров вирулентности исследуемого микроорганизма;
- <a id="p100566"></a>проводить учет серологического исследования крови;
- <a id="p100567"></a>выдавать ответ по результатам исследований;
- <a id="p100568"></a>готовить культуры, материал для передачи в лаборатории Регионального центра по мониторингу за возбудителями I-II группы патогенности. Референс-центр по иерсиниозам;
- <a id="p100569"></a>вести необходимую документацию;

#### <a id="p100570"></a>3.3 Врачи ПЦР-лаборатории должны уметь:

- <a id="p100571"></a>готовить рабочее место для проведения ПЦР-исследования;
- <a id="p100572"></a>проводить выделение нуклеиновых кислот, амплификацию, учет результатов;
- <a id="p100573"></a>проводить обеззараживание рабочего места после окончания работ;
- <a id="p100574"></a>выдавать ответ по результатам исследований;
- <a id="p100575"></a>вести необходимую документацию.

#### <a id="p100576"></a>3.4 Лаборанты должны знать:

- <a id="p100577"></a>нормативные документы, регламентирующие проведение исследований на иерсиниозы;
- <a id="p100578"></a>требования биологической безопасности при работе с материалом, подозрительным на зараженность возбудителями III-IV групп патогенности;
- <a id="p100579"></a>порядок сбора, хранения, обеззараживания, утилизации биологических отходов;
- <a id="p100580"></a>порядок доставки, приема, регистрации клинического материала;
- <a id="p100581"></a>порядок проведения работ, обеспечивающих лабораторное исследование;
- <a id="p100582"></a>этапы лабораторного исследования;
- <a id="p100583"></a>методы лабораторного исследования.

#### <a id="p100584"></a>3.5 Лаборанты-бактериологи должны уметь:

- <a id="p100585"></a>принимать, регистрировать клинический материал, оценивать соблюдение требований забора, доставки клинического материала;
- <a id="p100586"></a>проводить подготовку диагностических препаратов, химических реактивов, расходных материалов, лабораторной посуды, сред, пробоподготовку клинического материала;
- <a id="p100587"></a>выполнять первичные посевы клинического материала, пересевы со сред обогащения, проведение биохимических тестов, тестов на маркеры вирулентности иерсиний - аутоагглютинации, кальцийзависимости;
- <a id="p100588"></a>выполнять постановку серологических реакций (РА, ИФА, РНГА);
- <a id="p100589"></a>готовить дезинфицирующие средства, обеззараживать посевы, биологические отходы;
- <a id="p100590"></a>готовить рабочие места врача и лаборанта, после окончания работ проводить обеззараживание;
- <a id="p100591"></a>вести необходимую документацию.

#### <a id="p100592"></a>3.6 Лаборанты ПЦР-лаборатории должны уметь:

- <a id="p100593"></a>принимать, регистрировать клинический материал, оценивать соблюдение требований забора, доставки клинического материала;
- <a id="p100594"></a>готовить рабочее место для проведения ПЦР-исследования;
- <a id="p100595"></a>проводить пробоподготовку клинического материала;
- <a id="p100596"></a>проводить обеззараживание рабочего места после окончания работ;
- <a id="p100597"></a>готовить дезинфицирующие средства, обеззараживать биологические отходы.


### 4. <a id="p100598"></a>Требования к знаниям и умениям специалистов МО, ФБУЗ ЦГиЭ (филиалов, отделения филиалов), осуществляющих отбор клинического материала, проб объектов окружающей среды для исследования на иерсиниозы



#### <a id="p100599"></a>4.1 Специалисты должны знать:

- <a id="p100600"></a>основные положения эпидемиологического надзора за иерсиниозами, в том числе контингенты обследуемых, клинические формы заболеваний, виды исследуемых проб от людей, из объектов окружающей среды;
- <a id="p100601"></a>нормативные документы, регламентирующие забор материала, проб для исследований на иерсиниозы;
- <a id="p100602"></a>требования биологической безопасности при заборе, доставке материала, подозрительного на зараженность возбудителями III-IV групп патогенности;
- <a id="p100603"></a>порядок доставки клинического материала, проб из внешней среды;
- <a id="p100604"></a>порядок заполнения сопроводительной документации.

#### <a id="p100605"></a>4.2 Специалисты должны уметь:

- <a id="p100606"></a>проводить отбор проб от людей, из объектов окружающей среды;
- <a id="p100607"></a>заполнять сопроводительную документацию;
- <a id="p100608"></a>доставлять клинический материал, пробы из внешней среды в лабораторию в соответствии с требованиями.





<a id="p100609"></a>Приложение 3

<div align="center">

<a id="p100610"></a>**ПИТАТЕЛЬНЫЕ СРЕДЫ,**<br>
**ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ ЛАБОРАТОРНЫХ**

</div>

**ИССЛЕДОВАНИЙ НА ИЕРСИНИОЗЫ**


<table>
<colgroup><col width="5%"><col width="19%"><col width="5%"><col width="12%"><col width="7%"><col width="13%"><col width="13%"><col width="13%"><col width="12%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">N п/п</td><td rowspan="2">Наименование питательных сред</td><td colspan="3">Территориальный уровень</td><td colspan="2">Региональный уровень</td><td colspan="2">Федеральный уровень</td></tr>
<tr><td>МО</td><td>Филиалы (отделения) ФБУЗ "ЦГиЭ"</td><td>ФБУЗ "ЦГиЭ"</td><td>Региональные центры по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней II-IV групп патогенности</td><td>Опорные базы - консультантов, сотрудничающие по согласованию с Референсцентром по иерсиниозам</td><td>Референсцентр по мониторингу за возбудителями природноочаговых инфекционных болезней</td><td>Референсцентр по мониторингу за иерсиниозами</td></tr>
<tr><td>1</td><td>2</td><td>3</td><td>5</td><td>6</td><td>7</td><td>8</td><td>9</td><td>10</td></tr>
<tr><td>1.</td><td>Мясопептонный бульон РН 7,6-7,8</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>2.</td><td>Бульон Хоттингера</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>3.</td><td>Мясопептонный агар</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>4.</td><td>Агар Хоттингера</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>5.</td><td>Фосфатно-буферный раствор РН 7,6-7,8</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>6.</td><td>Пептонно-калиевая среда рН 7,6-7,8</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>7.</td><td>Транспортная среда Кузнецова РН 7,2-7,4 &lt;*&gt; &lt;**&gt;</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td></tr>
<tr><td>8.</td><td>Питательная среда для определения чувствительности к антибактериальным препаратам (АГВ)</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>9.</td><td>Среда Эндо &lt;**&gt;</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>10.</td><td>Среда с бромтимоловым синим (СБТС) &lt;**&gt;</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>11.</td><td>Полужидкий агар (0,2-0,4%) для определения подвижности</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>12.</td><td>Среда Мак Конки &lt;**&gt;</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>13.</td><td>Бульон Кларка</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>14.</td><td>УСС (универсальный скошенный столбик) &lt;***&gt;</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>15.</td><td>Трехсахарный агар с мочевиной (среда Олькеницкого) &lt;***&gt;</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>16.</td><td>Трехсахарный агар с мочевиной (среда Ресселя I) &lt;*&gt; &lt;***&gt;</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td></tr>
<tr><td>17.</td><td>Трехсахарный агар с сахарозой и маниитом (среда Ресселя II) &lt;*&gt; &lt;***&gt;</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td></tr>
<tr><td>18.</td><td>Среда с мочевиной для определения уреазы</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>19.</td><td>Среда для определения гидролиза эскулина</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>20.</td><td>Среда с орнитином для определения орнитиндекарбоксилазы</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>21.</td><td>Среда с фенилаланином</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>22.</td><td>Среда с лизином для определения лизиндекарбоксилазы</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>23.</td><td>Среда для определения липазы</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>24.</td><td>Среда для определения индолобразования</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>25.</td><td>Среда Симмонса для определения способности утилизировать цитрат</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td></td><td colspan="8">Среды Гисса для определения ферментации углеводов</td></tr>
<tr><td>26.</td><td>Среда Гисса с сахарозой</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>27.</td><td>Среда Гисса с рамнозой</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>28.</td><td>Среда Гисса с раффинозой</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>29.</td><td>Среда Гисса с трегалозой</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>30.</td><td>Среда Гисса с сорбитом</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>31.</td><td>Среда Гисса с ксилозой</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>32.</td><td>Среда Гисса с салицином</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>33.</td><td>Среда Гисса с маннитом</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>34.</td><td>Среда Гисса с сорбозой</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>35.</td><td>Среда Гисса с мальтозой</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>36.</td><td>Среда Гисса с мелибиозой</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td colspan="9">+ - обязательное использование данных сред. +/- - использование данных сред рекомендовано, но не является обязательным. - - не используются. &lt;*&gt; Возможно применение данных сред при наличии в лабораториях ингредиентов для приготовления. &lt;**&gt; Используется любая из предложенных сред или другие среды для выращивания иерсиний коммерческого изготовления, разрешенные к применению на территории Российской Федерации. &lt;***&gt; Используется любая из предложенных полиуглеводных сред или другие дифференциальные иерсиниозные среды, в том числе коммерческого изготовления, разрешенные к применению на территории</td></tr>
<tr><td colspan="9">Российской Федерации.</td></tr>
</table>






<a id="p100656"></a>Приложение 4

<div align="center">

<a id="p100657"></a>**ДИАГНОСТИЧЕСКИЕ ПРЕПАРАТЫ, ТЕСТ-СИСТЕМЫ,**<br>
**ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ ЛАБОРАТОРНЫХ**

</div>

**ИССЛЕДОВАНИЙ НА ИЕРСИНИОЗЫ**


<table>
<colgroup><col width="5%"><col width="19%"><col width="5%"><col width="12%"><col width="7%"><col width="13%"><col width="13%"><col width="13%"><col width="12%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">N п/п</td><td>Наименование диагностических</td><td colspan="3">Территориальный уровень</td><td colspan="2">Региональный уровень</td><td colspan="2">Федеральный уровень</td></tr>
<tr><td>препаратов, тест-систем, биологических препаратов</td><td>МО</td><td>Филиалы (отделения) ФБУЗ "ЦГиЭ"</td><td>ФБУЗ "ЦГиЭ"</td><td>Региональные центры по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней II-IV групп патогенности</td><td>Опорные базы - консультантов, сотрудничающие по согласованию с Референсцентром по иерсиниозам</td><td>Референсцентр по мониторингу за возбудителями природноочаговых инфекционных болезней</td><td>Референсцентр по мониторингу за иерсиниозами</td></tr>
<tr><td>1</td><td>2</td><td>3</td><td>4</td><td>5</td><td>6</td><td>7</td><td>8</td><td>9</td></tr>
<tr><td>1.</td><td>Иммуноглобулины диагностические флуоресцирующие псевдотуберкулезные адсорбированные лошадиные, лиофилизат для диагностических целей</td><td>-</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>2.</td><td>Фаг диагностический псевдотуберкулезный сухой, лиофилизат для диагностических целей</td><td>-</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>3.</td><td>Тест-система иммуноферментная для выявления антигенов иерсиний I серотипа &lt;*&gt;</td><td>+</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>4.</td><td>Диагностикум псевдотуберкулезный эритроцитарный антигенный сухой</td><td>+</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>5.</td><td>Диагностикум эритроцитарный кишечноиерсиниозный О:9 антигенный сухой</td><td>+</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>6.</td><td>Диагностикум эритроцитарный кишечноиерсиниозный О:3 антигенный сухой</td><td>+</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>7.</td><td>Диагностические сыворотки псевдотуберкулезные моновалентные (содержат антитела к О-антигенам возбудителей псевдотуберкулеза сероваров I или III)</td><td>+/-</td><td>-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>8.</td><td>Тест-системы для выявления ДНК Yersinia pseudotuberculosis</td><td>+</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>9.</td><td>Тест-системы для выявления ДНК Yersinia enterocolitica</td><td>+</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>10.</td><td>Набор для подготовки проб (выделение ДНК)</td><td>+</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>11.</td><td>ПЦР-тест-системы для выявления генов вирулентности Yersinia pseudotuberculosis, Yersinia enterocolitica</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>12.</td><td>Диагностические системы, энтеротесты для идентификации энтеробактерий</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td colspan="9">+ - обязательное использование данных тест-систем. +/- - использование данных тест-систем рекомендовано, но не является обязательным. - - не используются. &lt;*&gt; Возможно применение данных тест-систем при наличии лабораторного оборудования. Используется любая из предложенных тест-систем или другие тест-системы коммерческого изготовления, разрешенные к применению на территории Российской Федерации.</td></tr>
</table>






<a id="p100676"></a>Приложение 5

<div align="center">

<a id="p100677"></a>**ХИМИЧЕСКИЕ РЕАКТИВЫ,**<br>
**ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ ЛАБОРАТОРНЫХ**

</div>

**ИССЛЕДОВАНИЙ НА ИЕРСИНИОЗЫ**


<table>
<colgroup><col width="5%"><col width="19%"><col width="5%"><col width="12%"><col width="7%"><col width="13%"><col width="13%"><col width="13%"><col width="12%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">N п/п</td><td>Наименование химических</td><td colspan="3">Территориальный уровень</td><td colspan="2">Региональный уровень</td><td colspan="2">Федеральный уровень</td></tr>
<tr><td>реактивов</td><td>МО</td><td>Филиалы (отделения) ФБУЗ "ЦГиЭ"</td><td>ФБУЗ "ЦГиЭ"</td><td>Региональные центры по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней II-IV групп патогенности</td><td>Опорные базы - консультантов, сотрудничающие по согласованию с Референсцентром по иерсиниозам</td><td>Референсцентр по мониторингу за возбудителями природноочаговых инфекционных болезней</td><td>Референсцентр по мониторингу за иерсиниозами</td></tr>
<tr><td>1</td><td>2</td><td>3</td><td>4</td><td>5</td><td>6</td><td>7</td><td>8</td><td>9</td></tr>
<tr><td>1.</td><td>Андредэ</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>2.</td><td>Бриллиантовый зеленый</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>3.</td><td>Бромтимоловый синий</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>4.</td><td>Генциан-виолет</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>5.</td><td>Конго красный</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>6.</td><td>Метиленовый синий</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>7.</td><td>Феноловый красный</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>8.</td><td>Фуксин</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>9.</td><td>Сахароза</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>10.</td><td>Рамноза</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>11.</td><td>Раффиноза</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>12.</td><td>Сорбит</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>13.</td><td>Ксилоза</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>14.</td><td>Сорбоза</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>15.</td><td>Фукоза</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>16.</td><td>Мальтоза</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>17.</td><td>Мелибиоза</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>18.</td><td>Крахмал</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>19.</td><td>Маннит</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>20.</td><td>Глюкоза</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>21.</td><td>Лактоза</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>22.</td><td>Салицин</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>23.</td><td>Эскулин</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>24.</td><td>Трегалоза</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>25.</td><td>Орнитин</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>26.</td><td>Цистин</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>27.</td><td>Фенилаланин</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>28.</td><td>альфа-Нафтол</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>29.</td><td>Диметилпарафенилендиамин (тетраметилпарафенилендиамин, оксалат)</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>30.</td><td>Тиосульфат натрия</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>31.</td><td>Йод кристаллический</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>32.</td><td>Сернистокислый натрий</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>33.</td><td>Хлористый натрий</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>34.</td><td>Калия гидрофосфат</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>35.</td><td>Тринатрий фосфат &lt;*&gt;</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>36.</td><td>Хлористый натрий</td><td></td><td></td><td></td><td></td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>37.</td><td>Гидроокись калия &lt;*&gt;</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>38.</td><td>Молибденовокислый аммоний</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>39.</td><td>Углекислый натрий безводный</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>40.</td><td>Железоаммонийные квасцы</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>41.</td><td>Мочевина</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>42.</td><td>Танин</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>43.</td><td>Леворин</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>44.</td><td>Грамицидин</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>45.</td><td>Желчь</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>46.</td><td>Масло вазелиновое</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>47.</td><td>Масло иммерсионное</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>48.</td><td>Масло иммерсионное нефлуоресцирующее</td><td>+/-</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>49.</td><td>Спирт этиловый</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>50.</td><td>Глицерин</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>51.</td><td>Хлорамин или другие дезинфектанты, активные в отношении иерсиний, разрешенные к применению на территории РФ</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>52.</td><td>ДП-2Т</td><td>+/-</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td colspan="9">+ - обязательное использование данных средств. +/- - использование данных средств рекомендовано, но не является обязательным. - - не используются.</td></tr>
</table>






<a id="p100735"></a>Приложение 6

<div align="center">

<a id="p100736"></a>**ПРИБОРЫ И ОБОРУДОВАНИЕ,**<br>
**ИСПОЛЬЗУЕМЫЕ ДЛЯ ПРОВЕДЕНИЯ ЛАБОРАТОРНЫХ**

</div>

**ИССЛЕДОВАНИЙ НА ИЕРСИНИОЗЫ**


<table>
<colgroup><col width="5%"><col width="19%"><col width="5%"><col width="12%"><col width="7%"><col width="13%"><col width="13%"><col width="13%"><col width="12%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">N п/п</td><td rowspan="2">Наименование оборудования, СИ</td><td colspan="3">Территориальный уровень</td><td colspan="2">Региональный уровень</td><td colspan="2">Федеральный уровень</td></tr>
<tr><td>МО</td><td>Филиалы (отделения) ФБУЗ "ЦГиЭ"</td><td>ФБУЗ "ЦГиЭ"</td><td>Региональные центры по мониторингу за возбудителями инфекционных болезней II-IV групп патогенности</td><td>Опорные базы - консультантов, сотрудничающие по согласованию с Референсцентром по иерсиниозам</td><td>Референсцентр по мониторингу за возбудителями природноочаговых инфекционных болезней</td><td>Референсцентр по мониторингу за иерсиниозами</td></tr>
<tr><td>1</td><td>2</td><td>3</td><td>4</td><td>5</td><td>6</td><td>7</td><td>8</td><td>9</td></tr>
<tr><td>1.</td><td>Весы электронные. Диапазон измерений до 600 г, класс точности или погрешность: +/- 10 мг</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>2.</td><td>Весы электронные. Диапазон измерений до 400 г, класс точности или погрешность: +/- 10 мг</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>3.</td><td>РН-метр. Диапазон измерений: 0-14 рН, погрешность: +/- 0,002 рН</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>4.</td><td>Дозатор пипеточный 1-канальный. Диапазон измерений: 25 мкл точность 1,5%, 50 мкл точность 1,0%</td><td>+</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>5.</td><td>Дозатор пипеточный 1-канальный. Диапазон измерений: 0,5-10 мкл ССП +/- (10,0- 2,5)% СКО 7,0-3,0%, 2-20 мкл СКО 6-3% ССП +/- 8-2%, 10-100 мкл ССП +/- 2,5-1,5% СКО 3,0-2,0%, 100-1000 мкл ССП +/- 1,5-1,0% СКО 2,0-1,0%</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>6.</td><td>Термостат электрический суховоздушный. Основные технические характеристики: 28-55 °С +/- 1 °С</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>7.</td><td>Термостат электрический суховоздушный с охлаждением. Основные технические характеристики: 5-60 °С +/- 1,5 °С или 5-70 °С +/- 0,5 °С</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>8.</td><td>Шкаф сушильный стерилизационный. Основные технические характеристики: 50-350 °С</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>9.</td><td>Стерилизатор паровой. Основные технические характеристики: 2,2 кгс/кв. см или 3,0 кгс/кв. см</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>10.</td><td>Центрифуга. Основные технические характеристики: N: не менее 3000 об.\мин.</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>11.</td><td>Аппарат для свертывания и инактивирования сыворотки. Основные технические характеристики: 50-90 °С +/- 0,5 °С</td><td>+</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>12.</td><td>Микроскоп стереоскопический с увеличением: х 3,3-100</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>13.</td><td>Микроскоп световой с увеличением: х 3,3-100</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>14.</td><td>Микроскоп люминесцентный с увеличением: х 3,3-100</td><td>+/-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>15.</td><td>Холодильник. Основные технические характеристики: t° до + 10 °С</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>16.</td><td>Морозильная камера. Основные технические характеристики: t° не менее - 18-20 °С</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>17.</td><td>Иммуноферментный анализатор</td><td>+</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>18.</td><td>Автоматический идентификатор</td><td>+/-</td><td>-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>19.</td><td>Бокс абактериальной воздушной среды "Ламинар-С" класса II А</td><td>+</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>20.</td><td>УФО-бокс</td><td>+</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>21.</td><td>Микроцентрифуга. Основные технические характеристики: N: не менее 12000 об.\мин.</td><td>+</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>22.</td><td>Вортексвстряхиватель. Основные технические характеристики: не менее 2000 об.\мин.</td><td>+</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>23.</td><td>Медицинский отсасыватель. Основные технические характеристики: 0,17 кгс/кв. см</td><td>+</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>24.</td><td>Твердотельный термостат. Основные технические характеристики: до 100 °С +/- 1 °С</td><td>+</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>25.</td><td>Экстрактор нуклеиновых кислот</td><td>+/-</td><td>-</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>26.</td><td>Амплификатор. Основные технические характеристики: 4-99 °С +/- 0,2 °С</td><td>+</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>27.</td><td>Термоциклер с гибридизационнофлуоресцентной детекцией в режиме реального времени</td><td>+</td><td>+/-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>28.</td><td>Аквадистиллятор. Основные технические характеристики: 3 25 дм /ч. +/- 10%</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>29.</td><td>Шейкер. Основные технические характеристики: 0-800 об./мин. max нагрузка 2 кг</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>30.</td><td>Аппарат для фильтрации</td><td>-</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td>31.</td><td>Плита электрическая</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td><td>+</td></tr>
<tr><td colspan="9">+ - обязательное использование данных средств. +/- - использование данных средств рекомендовано, но не является обязательным. - - не используются.</td></tr>
</table>






<a id="p100771"></a>Приложение 7

<a id="p100772"></a>                                  ПАСПОРТ
                       штамма бактерий рода Yersinia
        (для лабораторий территориального и регионального уровней)

1. <a id="p100773"></a>Видовое название штамма ________________________________________________
2. <a id="p100774"></a>Лабораторный номер штамма ______________________________________________
3. <a id="p100775"></a>Особое обозначение штамма (серотип, биотип) ____________________________
4. <a id="p100776"></a>Источник выделения штамма: _____________________________________________

#### <a id="p100777"></a>4.1 Ф.И.О.,  возраст,  N истории болезни, год,  МО,  окончательный диагноз

(основное заболевание, течение, осложнения) _______________________________
___________________________________________________________________________

#### <a id="p100778"></a>4.2 Вид животного ________________________________________________________


#### <a id="p100779"></a>4.3 Объект окружающей среды или продукт питания __________________________

5. <a id="p100780"></a>Субстрат, из которого выделен штамм ____________________________________
6. <a id="p100781"></a>Дата выделения _________________________________________________________
7. <a id="p100782"></a>Место выделения штамма (область, район, населенный пункт) ______________
___________________________________________________________________________
8. <a id="p100783"></a>Метод выделения ________________________________________________________
9. <a id="p100784"></a>Ф.И.О. лица, идентифицировавшего штамм _________________________________
10. <a id="p100785"></a>Культурально-морфологические и другие свойства штамма (рост на плотных,
жидких питательных средах и пр.) __________________________________________
___________________________________________________________________________
11. <a id="p100786"></a>Биохимическая активность штамма:


| Тест | Реакция | Образование кислоты из: | Реакция |
| --- | --- | --- | --- |
| Гидролиз мочевины |  | Глюкозы |  |
| Образование H2S |  | Лактозы |  |
| Фенилаланиндезаминаза |  | Маннитола |  |
| Орнитиндекарбоксилаза |  | Сахарозы |  |
| Лизиндекарбоксилаза |  | Рамнозы |  |
| Реакция Фогес-Проскауэра (26 +/- 2) °С |  | Раффинозы |  |
| Реакция Фогес-Проскауэра (37 +/- 1) °С |  | Мелибиозы |  |
| Липаза (Твин 80) |  | Ксилозы |  |
| Образование индола |  | Салицина |  |
| Подвижность (26 +/- 2) °С |  | Сорбитола |  |
| Подвижность (37 +/- 1) °С |  | Мальтозы |  |
| Гидролиз эскулина |  | Нитратредуктазная активность |  |


12. <a id="p100800"></a>Тесты патогенности:


| Наличие способности к аутоагглютинации |
| --- |
| Наличие кальцийзависимости |


13. <a id="p100803"></a>Другие тесты


| Серологический вариант |
| --- |
| Биотип |


14. <a id="p100806"></a>Дата последней проверки свойств штамма ________________________________
15. <a id="p100807"></a>Условия хранения и транспортирования __________________________________
16. <a id="p100808"></a>Дата отправки штамма, координаты отправителя (адрес, электронная почта,
тел./факс) ________________________________________________________________
___________________________________________________________________________





<a id="p100809"></a>Приложение 8

<div align="center">

<a id="p100810"></a>**СОСТАВ И ПРОПИСИ**

</div>

**ПИТАТЕЛЬНЫХ СРЕД ДЛЯ ПЕРВИЧНОГО ВЫДЕЛЕНИЯ КУЛЬТУР**


### <a id="p100811"></a>Трехсахарный агар с мочевиной (Рессель I)


<a id="p100812"></a>Состав:


| N п/п | Ингредиенты | Количество |
| --- | --- | --- |
| 1. | Сухой питательный агар | 25,0 г |
| 2. | Глюкоза | 1,0-1,5 г |
| 3. | Лактоза | 7,0-10,0 г |
| 4. | Мочевина | 3,0 г |
| 5. | Кальций хлористый | 2,0 г |
| 6. | Феноловый красный, 1%-й водный р-р | 2,0 мл |
| 7. | Метиленовый синий | 1,0 мл |
| 8. | Вода дистиллированная | 1 л |


<a id="p100822"></a>Приготовление

<a id="p100823"></a>Твердые ингредиенты помещают в дистиллированную воду в любой последовательности. После того, как растворится агар, смесь нагревают до кипения, добавляют индикаторы - феноловый красный и метиленовый синий. РН 7,0-7,2 (в горячем виде среда грязно-зеленого цвета), разливают по пробиркам (5-6 мл в каждую) и стерилизуют автоклавированием 15 мин. под давлением 0,5 атм.
<a id="p100824"></a>Свежестерилизованная среда приобретает желтый или желто-оранжевый цвет в результате восстановления (обесцвечивание) метиленового синего при автоклавировании.
<a id="p100825"></a>Осторожным встряхиванием (!) каждой пробирки в наклонном положении вновь придают еще горячей среде ее исходную грязно-серую окраску. Это происходит за счет окисления метиленового синего кислородом воздуха.
<a id="p100826"></a>Среду скашивают, оставляя столбик высотой 2 см и косую поверхность 4-5 см. Застывшая среда должна в течение 2-3 дней "дозреть", т.е. приобрести однотонную сиреневато-светло-коричневую окраску, что свидетельствует об окислении, т.е. о восстановлении цветности метиленового синего по всей глубине среды. Посев культуры осуществляют штрихами по скошенной поверхности и уколом в столбик среды.

<a id="p100827"></a>Трехсахарный агар с сахарозой и маннитом (Рессель II)

<a id="p100828"></a>Состав:


| N п/п | Ингредиенты | Количество |
| --- | --- | --- |
| 1. | Дистиллированная вода | 1 л |
| 2. | Сухой питательный агар | 25,0 г |
| 3. | Сухой пептон (Семипалатинский) | 10,0 г |
| 4. | Сахароза | 8,0-10,0 г |
| 5. | Маннит | 0,8-1,0 г |
| 6. | Цистин | 0,4 г |
| 7. | Тиосульфат натрия (гипосульфит) | 0,3 г |
| 8. | Железоаммониевые квасцы | 0,4 г |
| 9. | Феноловый красный, 1%-й водный р-р | 3,5-4,0 мл |
| 10. | Крахмал | 2,0 г |


<a id="p100840"></a>Приготовление

<a id="p100841"></a>Ингредиенты вводят в следующем порядке: в холодной воде растворить квасцы, затем добавить крахмал и сухой питательный агар, дать им хорошо раствориться, после чего внести остальные компоненты.
<a id="p100842"></a>Среду доводят до кипения, устанавливают рН 7,2-7,4, разливают в пробирки по 7-8 мл, автоклавируют при 0,5-0,7 атм. 15-20 мин. после чего скашивают. Цвет среды розово-красный.


### <a id="p100843"></a>Универсальный скошенный столбик


<a id="p100844"></a>Состав:


| N п/п | Ингредиенты | Количество |
| --- | --- | --- |
| 1. | Агар сухой питательный | 3,5 г |
| 2. | Лактоза | 0,4 г |
| 3. | Глюкоза | 0,08 г |
| 4. | Крахмал растворимый | 0,05 г |
| 5. | Сахароза | 1,5 г |
| 6. | Мочевина | 0,25 г |
| 7. | Уксуснокислый свинец | 0,03 г |
| 8. | Тиосульфат натрия | 0,03 г |
| 9. | Цистин | 0,003 г |
| 10. | Феноловый красный, 1%-й водный р-р | 2,5 мл |
| 11. | Дистиллированная вода | 100 мл |


<a id="p100857"></a>Приготовление

<a id="p100858"></a>Ингредиенты вносить в любом порядке. Количество питательного агара, вносимого в среду, зависит от его серии. Если на этикетке указано, что на 100 мл воды его надо брать 5 г, то в среду добавляют 3,5 г, если на этикетке имеется рекомендация 3,5 г на 100 мл, то добавляют 2,5 г. Среду кипятить в течение 10-15 мин., разливать в стерильные пробирки по 5 мл, автоклавировать при 0,5 атм. 15 мин., после чего скашивать. Цвет среды абрикосовый.



<a id="p100859"></a>

---