Документ 23694

ИСТОРИЯ ИЗМЕНЕНИЙ НОРМАТИВНО-ТЕХНИЧЕСКИХ АКТОВ

flowchart LR
  n0["Государственная фармакопея СССР. XI издание. Выпуск..."]:::rst
  click n0 "https://bukva.ai/docs/gf-xi-minzdrav-sssr-ministerstvo" "Государственная фармакопея СССР. XI издание. Выпуск 2. Общие методы анализа. Лекарственное растительное сырье"
  n1["ФС.2.5.0050.15"]:::doc
  n0 --> n1
classDef rst fill:#FFEBEB,stroke:#8B0000,color:#000;
classDef doc fill:#EBFFEB,stroke:#006400,color:#000;
classDef notEnt fill:#FFFFEB,stroke:#FF8C00,color:#000;

МИНИСТЕРСТВО ЗДРАВООХРАНЕНИЯ РОССИЙСКОЙ ФЕДЕРАЦИИ

ФАРМАКОПЕЙНАЯ СТАТЬЯ

Собранные зрелые и высушенные плоды дикорастущего и культивируемого многолетнего кустарника черники обыкновенной — Vaccinium myrtillus L., сем. вересковых — Ericaceae.

ПОДЛИННОСТЬ

Внешние признаки. Цельное сырье. Плоды — ягоды диаметром 3-6 мм, бесформенные, сильно сморщенные, в размоченном виде шаровидные. На верхушке плодов виден остаток чашечки в виде небольшой кольцевой оторочки, окружающей вздутый диск с остатком столбика в центре или с небольшим углублением на месте его отпадания. В мякоти плода — многочисленные (до 30 штук) семена, коричневые, неясно-крупносетчатые, сжатые с боков и выпуклые по спинке. У основания плода иногда имеется короткая плодоножка.

Цвет плодов с поверхности — черный с красноватым оттенком, матовый или слегка блестящий; мякоти — красно-фиолетовый; семян — красно-коричневый. Запах слабый. Вкус водного извлечения кисловато-вяжущий.

Микроскопические признаки. Клетки эпидермиса плодов сгруппированы и разграничены между собой более толстыми клеточными стенками (окончатого типа).

Рисунок 1. Черника обыкновенная плоды. Эпидермис плодов (100x) 1 — клетки эпидермиса; 2 — клеточная стенка; 3 — протопласт клеток эпидермиса

Рисунок 2. Черника обыкновенная плоды. Эпидермис плодов (400x). А — Эпидермис диска; Б — Эпидермис остальной части плода. 1 — замыкающие клетки устьиц, 2 — околоустьичные клетки, 3 — клетки эпидермиса

Эпидермальные клетки и 2-3 ряда подстилающих клеток вытянуты в тангентальном направлении. Наружная стенка эпидермальных клеток утолщена сильнее остальных. Кутикула тонкая, покрыта восковым слоем. 2-3 ряда субэпидермальных клеток имеют слабоколленхиматозный характер. К центру плода оболочки клеток становятся более тонкими.

Устьица на зрелом плоде встречаются редко, обычно они деформированы. Эпидермис диска отличается от остальной поверхности плода более мелкими клетками и наличием хорошо сохранившихся устьиц. Устьица окружены 4-5 околоустьичными клетками (аномоцитного типа).

Мезокарпий представлен рыхлой паренхимой, клетки которой окрашены антоцианами. Проводящие пучки очень тонкие, в основном представлены спиральными сосудами. Встречаются друзы оксалата кальция, которые преимущественно локализуются в эндокарпии.

Эндокарпий состоит из большого числа толстостенных, полигональных, пористых клеток (склереид).

Рисунок 3. Черника обыкновенная плоды. Фрагменты перикарпия плодов черники (400x). Давленый препарат. А — Фрагменты экзокарпия; Б — фрагменты эндокарпия. 1 — кутикула, 2 — клетки эпидермиса; 3 — колленхима, 4 — клетки мезокарпия, 5 — брахисклереиды мезокарпия, 6 — склереиды эндокарпия

Рисунок 4. Черника обыкновенная плоды. Фрагменты перикарпия плодов черники (400x). А — Мезокарпий плода. Сосудистые пучки. Б — Фрагмент эндокарпия. 1 — клетки паренхимы мезокарпия, 2 — кольчатые сосуды; 3 — спиральные сосуды, 4 — толстостенные клетки (склереиды); 5 — друзы оксалата кальция

Рисунок 5. Черника обыкновенная плоды. Семенная кожура плодов черники (400x). А — Продольный срез; Б — эпидермис с поверхности. 1 — ослизняющиеся стенки эпидермальных клеток семени; 2 — кожура семени; 3 — спавшаяся паренхима семенной кожуры; 4 — эндосперм

Рисунок 6. Черника обыкновенная плоды. Семя черники. Зародыш. А — Продольный срез (40x); Б — поперечный срез (100x). 1 — семенная кожура, 2 — эндосперм, 3 — зародыш, 4 — место локализации зародыша (на продольном срезе семени)

Семена состоят из семенной кожуры, эндосперма, зародыша. Эпидермис семенной кожуры хорошо выражен, остальные клетки спадаются. Эпидермальные клетки вытянуты вдоль семени, внутренняя и боковая стенки склерефицированы, пронизаны порами. Ослизняется только наружная стенка эпидермальных клеток. Эндосперм мощный, зародыш небольшой. Клетки зародыша и эндосперма содержат алейроновые зерна и жирное масло.

Определение основных групп биологически активных веществ

1. Тонкослойная хроматография.

Около 2,0 г плодов помещают в коническую колбу со шлифом, прибавляют 10 мл спирта 96%, содержащего хлористоводородной кислоты раствора 1%, закрывают пробкой и перемешивают в течение 30 мин. Извлечение фильтруют через бумажный фильтр (испытуемый раствор).

На линию старта аналитической хроматографической пластинки со слоем силикагеля с флуоресцентным индикатором на алюминиевой подложке размером 10x15 см наносят 20 мкл испытуемого раствора. Пластинку с нанесенной пробой сушат на воздухе, помещают в камеру, предварительно насыщенную в течение 5 ч смесью растворителей н-бутанол-уксусная кислота ледяная-вода (4:1:2), и хроматографируют восходящим способом. Когда фронт растворителей пройдет около 80-90% длины пластинки от линии старта, ее вынимают из камеры, сушат до удаления следов растворителей и просматривают при дневном свете.

На хроматограмме испытуемого раствора должны обнаруживаться зона адсорбции фиолетового цвета и выше — зона адсорбции розового цвета; допускается обнаружение других зон адсорбции.

2. При прибавлении к отвару 2 капель железа(III) аммония сульфата раствора 10% (железоаммонийных квасцов) образуется черно-зеленое окрашивание (дубильные вещества).

ИСПЫТАНИЯ

Влажность. Цельное сырье — не более 14%.

Зола общая. Цельное сырье — не более 3%.

Зола, нерастворимая в хлористоводородной кислоте. Цельное сырье — не более 0,8%.

Посторонние примеси

Другие части растения (листья, кусочки стеблей). Цельное сырье — не более 0,25%.

Плоды, недозрелые, твердые и пригоревшие. Цельное сырье — не более 1%.

Органическая примесь. Цельное сырье — не более 2%.

Минеральная примесь. Цельное сырье — не более 0,3%.

Тяжелые металлы. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания тяжелых металлов и мышьяка в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Радионуклиды. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания радионуклидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Остаточные количества пестицидов. В соответствии с требованиями ОФС «Определение содержания остаточных пестицидов в лекарственном растительном сырье и лекарственных растительных препаратах».

Микробиологическая чистота. В соответствии с требованиями ОФС «Микробиологическая чистота».

Количественное определение. Цельное сырье: сумма антоцианов в пересчете на цианидин-3-гликозид — не менее 0,5%.

Спирт 60%, содержащий хлористоводородной кислоты 1%. К 126 мл спирта 96% прибавляют 5,5 мл хлористоводородной кислоты концентрированной, доводят объем раствора водой до 200 мл.

Аналитическую пробу сырья измельчают до величины частиц, проходящих сквозь сито с отверстиями размером 3 мм. Около 1,0 г (точная навеска) измельченного сырья помещают в коническую колбу со шлифом вместимостью 250 мл, прибавляют 50 мл спирта 60%, содержащего хлористоводородной кислоты 1%. Колбу закрывают пробкой и взвешивают с точностью до г, затем присоединяют к обратному холодильнику и нагревают на кипящей водяной бане в течение 60 мин, затем охлаждают до комнатной температуры, закрывают той же пробкой, снова взвешивают и восполняют недостающий экстрагент спиртом 60%, содержащим хлористоводородной кислоты 1%. Извлечение фильтруют через бумажный фильтр (раствор А).

1,0 мл раствора А помещают в мерную колбу вместимостью 25 мл, доводят объем раствора спиртом 96%, содержащим хлористоводородную кислоту 1%, до метки и перемешивают (раствор Б).

Оптическую плотность раствора Б измеряют на спектрофотометре при длине волны 546 нм в кювете с толщиной слоя 10 мм. В качестве раствора сравнения используют раствор, состоящий из 1 мл спирта 60%, доведенный спиртом 96% содержащим хлористоводородной кислоты 1% до метки в мерной колбе вместимостью 25 мл.

Содержание суммы антоцианов в пересчете на цианидин-3-О-гликозид в абсолютно сухом сырье в процентах (X) вычисляют по формуле:

,

где: A — оптическая плотность раствора Б;

см - удельный показатель поглощения цианидин-3-О-гликозида при длине волны 546 нм, равный 600;

a — навеска сырья, г;

W — влажность, %.

Упаковка, маркировка и транспортирование. В соответствии с требованиями ОФС «Упаковка, маркировка и транспортирование лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Хранение. В соответствии с требованиями ОФС «Хранение лекарственного растительного сырья и лекарственных растительных препаратов».

Иллюстрации

\pm 0,01

X = \frac{A \cdot 50 \cdot 25 \cdot 100}{A_{1\text{см}}^{1\%} \cdot a \cdot 1 \cdot (100 - W)}