---
title: "Без названия"
status: действует
canonical: "https://bukva.ai/docs/bez-nazvaniya-1277"
---

## Без названия

# Документ 13456


<div align="right">

<a id="p100001"></a>Утверждаю<br>
Заместитель Главного<br>
государственного<br>
санитарного врача СССР<br>
**А.И.ЗАИЧЕНКО**

</div>

<div align="center">

28 января 1980 г. N 2142-80

</div>


<a id="p100002"></a>**МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ**
**ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ХЛОРОРГАНИЧЕСКИХ ПЕСТИЦИДОВ**
**В ВОДЕ, ПРОДУКТАХ ПИТАНИЯ, КОРМАХ И ТАБАЧНЫХ**
**ИЗДЕЛИЯХ ХРОМАТОГРАФИЕЙ В ТОНКОМ СЛОЕ**

<a id="p100003"></a>Данная методика апробирована и рекомендована в качестве официальной группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками при МСХ СССР.

<a id="p100004"></a>Настоящие Методические указания распространяются на определение содержания ДДТ, ДДЭ, ДДД, гексахлорана, альдрина, кельтана, гептахлора, метоксихлора, дактала, тедиона и эфирсульфоната в воде, почве, вине, овощах, фруктах, грибах, зерне, комбикормах, корнеклубнеплодах и зеленых кормах, рыбе, мясе, мясопродуктах, внутренних органах, молоке и молочных продуктах, животном жире, сливочном и растительных маслах, жмыхах, шротах, лузге, меде, сахаре, яйцах и яйцепродуктах, а также в табачных изделиях.
1. <a id="p100005"></a>Характеристика анализируемых пестицидов
<a id="p100006"></a>Краткая характеристика препаратов представлена в табл. 1.

<a id="p100007"></a>Таблица 1

<a id="p100008"></a>**ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ПЕСТИЦИДОВ**


<table>
<colgroup><col width="5%"><col width="16%"><col width="19%"><col width="16%"><col width="8%"><col width="10%"><col width="8%"><col width="7%"><col width="11%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">N п/п</td><td rowspan="2">Пестицид</td><td rowspan="2">Химическое название</td><td rowspan="2">Эмпирическая формула</td><td rowspan="2">Мол. масса</td><td colspan="2">Темп., град. C</td><td colspan="2">Растворимость</td></tr>
<tr><td>плавления</td><td>кип., мм рт. ст.</td><td>в воде</td><td>в орг. растворе</td></tr>
<tr><td>1.</td><td>Альдрин</td><td>1,2,3,4,10,10- гексахлор-1, 4-эндо-5, 8-экзо-диметилен-1,4,4а,5,8, 8а-гексагидронафталин</td><td>C12H8Cl6</td><td>364,92</td><td>104 - 105</td><td></td><td>н</td><td>гексан, бензол, ацетон, спирты и др.</td></tr>
<tr><td>2.</td><td>Гексахлоран</td><td>1,2,3,4,5,6- гексахлорциклогексан</td><td>C6H6Cl6</td><td>290,82</td><td></td><td></td><td></td><td></td></tr>
<tr><td>3.</td><td>Гексахлорбензол</td><td>1,2,3,4,5,6- гексахлорбензол</td><td>C6Cl6</td><td>264,8</td><td>231</td><td>322</td><td>тр-р</td><td>бензол, спирты, четыреххлорист. углерод, керосин, бензол</td></tr>
<tr><td>4.</td><td>Гептахлор</td><td>1,4,5,6,7,8- гептахлор-4, 7-эндо-метилен- 3а,4,7,7а-тетрагидроинден</td><td>C10H5Cl7</td><td>373,5</td><td>95 - 96</td><td>117 - 196 (0,05)</td><td>н</td><td>циклогексан, ксилол, четыреххлор. углерод, керосин, бензол</td></tr>
<tr><td>5.</td><td>п,п' ДДД</td><td>4,4'-дихлордифенилдихлорметилметан</td><td>C14H10Cl4</td><td>320,0</td><td>112</td><td></td><td>н</td><td>ацетон, бензол, гексан и др.</td></tr>
<tr><td>6.</td><td>п,п' ДДТ</td><td>4,4'-дихлордифенилтрихлорметилметан</td><td>C14H9Cl5</td><td>354,5</td><td>108,5 - 109</td><td>185 (1)</td><td>0,001</td><td>ацетон, бензол, гексан, спирты и др.</td></tr>
<tr><td>7.</td><td>п,п' ДДЭ</td><td>4,4-дихлордифенилдихлорэтилен</td><td>C14H9Cl4</td><td>318,0</td><td></td><td></td><td>0,014</td><td>ацетон, гексан, бензол</td></tr>
<tr><td>8.</td><td>Дактал</td><td>Диметилтетрахлортерефталат</td><td>C10H604Cl4</td><td>332,0</td><td>156</td><td></td><td></td><td>ацетон, гексан, бензол, хлороформ</td></tr>
<tr><td>9.</td><td>Кельтан (Хлорэтанол) Кетан</td><td>4,4'-дихлордифенилтрихлорметилкарбинол</td><td>C14H9OCl5</td><td>370,4</td><td>78,5 - 79</td><td>225</td><td>н</td><td>толуол, хлороформ, серный эфир, гексан, бензол, спирты</td></tr>
<tr><td>10.</td><td>Метоксихлор</td><td>4,4'-диметоксидифенилтрихлорметилметан</td><td>C16H15O2Cl3</td><td>345,65</td><td>70 - 85</td><td></td><td>тр-р</td><td>ацетон, четыреххлористый углерод, хлороформ, бензол и др.</td></tr>
<tr><td>11.</td><td>Тедион</td><td>4-Хлорфенил- 2,4,5-трихлорфенилсульфон</td><td>C12H6O2Cl4S</td><td>356,07</td><td>146 - 147</td><td></td><td>0,02 (56)</td><td>бензол, ксилол, толуол, хлороформ</td></tr>
<tr><td>12.</td><td>Эфирсульфонат</td><td>4-хлорфенил- 4-хлорбензол сульфонат</td><td>C12H8Cl2SO3</td><td>303,06</td><td>86,5</td><td></td><td>н</td><td>ацетон, дихлорэтан, ксилол, циклогексан, четыреххлористый углерод</td></tr>
</table>


<a id="p100022"></a>2.1. Принцип метода. Метод основан на хроматографии хлорсодержащих пестицидов в тонком слое окиси алюминия, силикагеля или пластинок "Силуфол" в различных системах подвижных растворителей после экстракции их из исследуемых образцов и очистке экстрактов. Подвижным растворителем служит н-гексан или н-гексан в смеси с ацетоном. Места локализации препаратов обнаруживают после опрыскивания пластинок раствором аммиаката серебра с последующим ультрафиолетовым облучением или после облучения ультрафиолетовым светом пластинок "Силуфол", содержащих о-толидин.

#### <a id="p100023"></a>2.2 Метрологическая характеристика метода

<a id="p100024"></a>Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 2.

<a id="p100025"></a>Таблица 2

<div align="center">

<a id="p100026"></a>**МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА**

</div>

**МЕТОДА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ХЛОРОРГАНИЧЕСКИХ ПЕСТИЦИДОВ**

<a id="p100027"></a>Диапазон определяемых концентраций 0,005 - 2,0 мг/кг или мг/л


| Анализируемая проба | Предел обнаружения мг/л или мг/кг | Число параллельных определений | Размах варьирования, % | Среднее значение определения, % | Стандартное отклонение, % | Относительное стандартное отклонение, % | Доверительный интервал |
| --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- | --- |
| Вода | 0,005 | 7 | 20 | 93 | 10 | 10,7 | 7,7 |
| Вино | 0,005 | 7 | 25 | 90 | 12 | 13,3 | 9,0 |
| Овощи | 0,05 | 7 | 20 | 83 | 12 | 14,4 | 9,0 |
| Фрукты | 0,05 | 6 | 20 | 81 | 9 | 11,1 | 7,4 |
| Зерно | 0,05 | 7 | 25 | 75 | 10 | 13,3 | 7,5 |
| Трава | 0,025 | 10 | 30 | 74 | 12 | 16,2 | 7,6 |
| Рыба | 0,05 | 10 | 24 | 83 | 12 | 14,4 | 7,6 |
| Мясо | 0,05 | 10 | 30 | 87 | 15 | 17,2 | 9,5 |
| Животный жир | 0,04 | 6 | 26 | 82 | 12 | 14,6 | 9,9 |
| Молоко, сливки, творог | 0,04 | 13 | 30 | 86 | 16 | 18,6 | 8,9 |
| Сливочное масло | 0,05 | 8 | 30 | 83 | 17 | 20,0 | 12,0 |
| Сахар | 0,02 | 6 | 6 | 97 | 5 | 5,1 | 4,1 |
| Почва | 0,06 |  |  | 70 | 9 |  | 7,9 |



#### <a id="p100044"></a>2.3 Реактивы и растворы

<a id="p100045"></a>Ацетон хч, ГОСТ 2603-71
<a id="p100046"></a>Аммиак водный хч, ГОСТ 3760-64
<a id="p100047"></a>Алюминия окись 2 ст. активности для хроматографии, ч, МРТУ 6-09-5296-68. Просеивают через сито 100 меш.
<a id="p100048"></a>Алюминия окись, пропитанная серной кислотой. Две весовые части окиси алюминия (или окиси кремния) помещают в фарфоровую ступку, заливают одной объемной частью серной кислоты и тщательно перемешивают. Смесь готовят непосредственно перед подготовкой колонок для очистки экстрактов из проб шротов, жмыха, лузги
<a id="p100049"></a>Бензол хч, ГОСТ 5955-68
<a id="p100050"></a>Н-гексан ч, МРТУ 6-09-2937-66
<a id="p100051"></a>Калий щавелевокислый чда, ГОСТ 5868-68
<a id="p100052"></a>Кальций сернокислый чда, ГОСТ 3210-66. Просушивают 6 часов в сушильном шкафу при 160 град. C. Просеивают через сито 100 меш.
<a id="p100053"></a>Кремния окись для люминофоров ч, МРТУ 6-09-4875-67
<a id="p100054"></a>Натрий сернокислый безводный ч, ГОСТ 4166-66
<a id="p100055"></a>Натрий углекислый кислый хч, ГОСТ 4201-66, 0,5 н. раствор
<a id="p100056"></a>Натрий хлористый хч, ГОСТ 4233-66, насыщенный раствор
<a id="p100057"></a>Петролейный эфир (темп. кип. 40 - 70 град.)
<a id="p100058"></a>Перекись водорода хч (30% водный раствор), ГОСТ 10929-64
<a id="p100059"></a>Проявляющие реактивы:
<a id="p100060"></a>Проявляющий реактив N 1. 0,5 г азотнокислого серебра растворяют в 5 мл дистиллированной воды, прибавляют 7 мл аммиака и доводят объем раствора до 100 мл ацетоном; в готовый раствор можно добавить 0,2 мл перекиси водорода. Раствор следует хранить в колбе с притертой пробкой в темном месте в течение 3-х дней. На пластинку 9 x 12 см расходуется 8 - 10 мл раствора.
<a id="p100061"></a>Проявляющий реактив N 2. 0,5 г азотнокислого серебра растворяют в 5 мл дистиллированной воды, добавляют 10 мл 2-феноксиэтанола и доводят объем раствора до 200 мл ацетоном, затем добавляют 6 капель 30-процентной перекиси водорода.
<a id="p100062"></a>Серебро азотнокислое чда, ГОСТ 1277-63
<a id="p100063"></a>Серная кислота ч, ГОСТ 4204-66
<a id="p100064"></a>Силикагель АСК (Воскресенского химкомбината Московской обл.)
<a id="p100065"></a>Силикагель КСК, просеянный через сито 100 меш.
<a id="p100066"></a>Стандартные образцы:
<a id="p100067"></a>ДДТ, ДДД, ДДЭ, альдрин, изомеры ГХЦГ, гептахлор, метоксихлор, кельтан, эфирсульфонат, дактал, тедион хч.
<a id="p100068"></a>Стандартные растворы: 10 мг соответствующего пестицида растворяют в мерной колбе на 100 мл в н-гексане и доводят до метки этим растворителем. Стандартные растворы необходимо хранить в стеклянной посуде с притертыми пробками в холодильнике.
<a id="p100069"></a>Стеклянная вата, очищенная конц. серной кислотой, промытая дистиллированной водой и высушенная
<a id="p100070"></a>о-Толидин ч, МРТУ 6-09-6337-69, 1% раствор в ацетоне
<a id="p100071"></a>2-феноксиэтанол
<a id="p100072"></a>Этиловый спирт, ректификат, ТУ 19-11-39-69
<a id="p100073"></a>Хлороформ хч, ГОСТ 200-15-74
<a id="p100074"></a>Четыреххлористый углерод хч, ГОСТ 20228-74
<a id="p100075"></a>Этиловый эфир (для наркоза), Фармакопея СССР
<a id="p100076"></a>Натрий сернокислый, 2% водный раствор
<a id="p100077"></a>Натрий сернокислый, насыщенный раствор

#### <a id="p100078"></a>2.4 Приборы и посуда

<a id="p100079"></a>Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76
<a id="p100080"></a>Вакуумно-ротационный испаритель, ИР ТУ 25-11-310-69 или прибор для отгонки растворителей, МРТУ 25-11-67-67
<a id="p100081"></a>Воронки химические, диам. 6 см, ГОСТ 86-13-64
<a id="p100082"></a>Воронки делительные, емкостью 100, 250, 500 мл, ГОСТ 10054-75
<a id="p100083"></a>Воронки Бюхнера, ГОСТ 9147-69
<a id="p100084"></a>Гомогенизатор или измельчитель тканей
<a id="p100085"></a>Камера для опрыскивания, ТУ 25-11-430-70
<a id="p100086"></a>Камера для хроматографирования, размером 150 x 200, 105 x 165 мм, ГОСТ 10565-63
<a id="p100087"></a>Колбы Бунзена, ТУ 25-11-135-69
<a id="p100088"></a>Колбы мерные, емкостью 50, 100 мл, ГОСТ 1770-74
<a id="p100089"></a>Колбы нш, емкостью 100, 250, 500 мл, ГОСТ 10394-63
<a id="p100090"></a>Колбы круглодонные нш, емкостью 150, 250, 500 мл, ГОСТ 10394-63
<a id="p100091"></a>Микропипетки, ГОСТ 1770-74 (для нанесения стандартных растворов)
<a id="p100092"></a>Пипетки или шприцы для нанесения проб
<a id="p100093"></a>Пипетки емкостью 1, 5, 10 мл, ГОСТ 1770-74
<a id="p100094"></a>Прибор для встряхивания, МРТУ 2451-64
<a id="p100095"></a>Пластинки стеклянные 9 x 12, 13 x 18 см
<a id="p100096"></a>Пульверизаторы стеклянные для опрыскивания пластинок
<a id="p100097"></a>Сито на 100 меш (диаметр отверстий 0,147 мм)
<a id="p100098"></a>Стеклянные хроматографические колонки (диаметр - высота), 20 x 400, 15 x 150
<a id="p100099"></a>Ртутно-кварцевая лампа
<a id="p100100"></a>Цилиндры мерные емкостью 25, 50, 100, 250, 500 мл, ГОСТ 1770-74
<a id="p100101"></a>Чашки выпарительные N 3, N 1, ГОСТ 9147-69

<a id="p100102"></a>Приготовление пластинок для хроматографии

<a id="p100103"></a>Тщательно промытую хромовой смесью, раствором соды, дистиллированной водой и высушенную пластинку протирают этиловым спиртом или эфиром и покрывают сорбционной массой. Массу готовят следующим образом:
<a id="p100104"></a>а) 50 г просеянной через сито 100 меш. окиси алюминия смешивают в фарфоровой ступке с 5 г сернокислого кальция, прибавляют 75 мл дистиллированной воды и перемешивают в ступке или колбе до образования однородной массы. На пластинку 9 x 12 см наносят 10 г сорбционной массы (на пластинку 13 x 18 см - 20 г) и, покачивая, равномерно распределяют по всей пластинке. Пластинки сушат при комнатной температуре 18 - 20 часов, можно сушить их 20 минут при комнатной температуре, а затем 45 минут в сушильном шкафу при температуре 110 град. C.
<a id="p100105"></a>б) 35 г силикагеля КСК, просеянного через сито 100 меш., смешивают с 2 г сернокислого кальция и 90 мл дистиллированной воды и перемешивают в ступке или колбе до однородной массы. Наносят на пластинки и сушат, как указано выше. Порция рассчитана на 10 пластинок.
<a id="p100106"></a>Если пластинки с тонким слоем силикагеля темнеют после облучения УФ-светом, силикагель перед употреблением следует очистить от примесей. Для этого силикагель заливают на 18 - 20 часов разбавленной соляной кислотой (1:1), кислоту сливают, промывают силикагель водой и кипятят в круглодонной колбе 2 - 3 часа с разбавленной азотной кислотой (1:1), промывают проточной водопроводной, затем дистиллированной водой до нейтральной реакции промывных вод, сушат в сушильном шкафу 4 - 6 часов при температуре 130 град. Силикагель дробят и просеивают через сито 100 меш.
<a id="p100107"></a>Пластинки для хроматографии "Силуфол" UV-254 производства ЧССР перед использованием импрегнируют о-толидином. Для этого каждую пластинку опускают на 0,5 см в 0,1% раствор о-толидина в ацетоне, налитый в камеру для хроматографирования. После того как фронт растворителя поднимется до верхнего края пластинки, ее вынимают и высушивают на воздухе, избегая прямого солнечного света. После этого пластинки готовы к употреблению. Пластинки, импрегнированные о-толидином, хранят в эксикаторе. Используют при анализе кормов.
<a id="p100108"></a>Пластинки "Силуфол" UV-254 производства ЧССР предварительно промывают дистиллированной водой в хроматографической камере, высушивают на воздухе и непосредственно перед использованием активизируют в сушильном шкафу при температуре 65 град. в течение 4 минут.
<a id="p100109"></a>Подготовка хроматографических колонок для очистки экстрактов
<a id="p100110"></a>Хроматографическая колонка для очистки от молочного жира. В нижнюю часть хроматографической колонки (размером 20 x 400 мм) помещают стекловату или 500 мг обезжиренной ваты. Затем засыпают в колонку силикагель АСК (75 мл для очистки экстрактов из проб свиного жира и 70 мл для всех остальных проб) и уплотняют силикагель постукиванием по колонке. Колонку промывают 50 мл н-гексана или петролейного эфира, и прошедший через нее растворитель отбрасывают. После этого колонка готова для хроматографической очистки экстрактов из проб рыбы, мяса и мясопродуктов, молока и молокопродуктов, меда, яиц и т.д.
<a id="p100111"></a>Хроматографическая колонка для очистки экстрактов из проб шротов (необогащенных липидами) и лузги.
<a id="p100112"></a>Хроматографическую колонку заполняют на высоту 1 см стеклянной ватой, затем в колонку вносят просеянную окись алюминия (I) слоем 2,5 см или окись кремния - 3,5 см. Далее засыпают, не утрамбовывая, комочки окиси алюминия (кремния), пропитанные серной кислотой, высота слоя (II) 2,5 см. Каждый слой последовательно промывают гексаном (всего 20 - 30 мл).
<a id="p100113"></a>Для анализа жмыхов и шротов, обогащенных липидами, слои окиси алюминия следует увеличить до 5 см (I) и 3 см (II) соответственно, в случае использования окиси кремния - 6 см (I) и 3 см (II).

#### <a id="p100114"></a>2.5 Проведение определения

<a id="p100115"></a>Вода, вино. 200 мл пробы помещают в делительную воронку и экстрагируют пестициды, встряхивая в течение 3-х минут н-гексаном или петролейным эфиром тремя порциями по 30 мл или диэтиловым эфиром тремя порциями по 50 мл. В объединенные экстракты насыпают 10 г безводного сернокислого натрия или фильтруют через воронку, заполненную на 2/3 сернокислым натрием. Экстракты переносят в прибор для отгонки растворителей и отгоняют растворитель до объема 0,2 - 0,3 мл. В случае необходимости экстракт чистят серной кислотой.
<a id="p100116"></a>Овощи, фрукты. 20 г измельченной пробы помещают в колбу с притертой пробкой и проводят экстрагирование пестицидов трижды в течение 15 минут на аппарате для встряхивания н-гексаном или петролейным эфиром порциями по 30 мл. Объединенные экстракты сушат безводным сернокислым натрием, переносят в прибор для отгонки растворителей, отгоняют растворитель до объема 0,2 - 0,3 мл и наносят на пластинку.
<a id="p100117"></a>Зерно, грибы. Из измельченных проб отбирают 20 г зерна, 50 г сырых или 10 г сухих грибов и помещают в колбы с притертыми пробками. Экстракцию пестицидов проводят трижды на приборе для встряхивания н-гексаном или петролейным эфиром порциями по 30 мл. Объединенные экстракты переносят в делительную воронку, прибавляют 10 мл насыщенного раствора безводного сернокислого натрия в серной кислоте и осторожно встряхивают несколько раз. Отделяют органический слой и повторяют обработку до тех пор, пока кислота не станет бесцветной. Экстракт промывают дистиллированной водой, сушат безводным сернокислым натрием и отгоняют растворитель.
<a id="p100118"></a>Яблоки, капуста, трава, сено. 20 г измельченных яблок, 20 г капусты, 40 г травы и 20 г сена заливают 100 мл ацетона в колбе с притертой пробкой. Встряхивают 2 - 3 минуты, прибавляют 20 мл дистиллированной воды и охлаждают на льду 30 минут. Экстракт сливают и фильтруют холодным, экстракцию повторяют. Из объединенных водно-ацетоновых экстрактов отгоняют ацетон, а из водного остатка экстрагируют препараты н-гексаном тремя порциями по 10 мл в течение 10 минут. Гексановые экстракты очищают серной кислотой, насыщенной безводным сернокислым натрием. Сушат безводным сернокислым натрием. Отгоняют растворитель до небольшого объема и наносят на пластинку. Если очистка неполная (после испарения растворителя на колбе остается белый налет), экстракт испаряют досуха, остаток смывают холодным ацетоном 3 раза порциями по 0,2 мл и сразу наносят на пластинку.
<a id="p100119"></a>Комбикорма. Для исследования берут навеску 40 г, увлажняют ее в колбе 60 мл дистиллированной воды. Увлажненную навеску оставляют на ночь в колбе, закрытой пробкой. Экстракцию пестицидов проводят дважды 50 - 100 мл смеси гексан - ацетон 1:1 при встряхивании в течение 2 часов. Экстракты объединяют в делительной воронке на 500 мл, прибавляют дважды по 50 мл дистиллированной воды и, после разделения слоев, нижний водный слой сливают в другую делительную воронку и экстрагируют пестициды 40 мл гексана. Водный слой сливают. Гексановые экстракты объединяют, фильтруют через воронку с бумажным фильтром, заполненным на 2/3 безводным сернокислым натрием. Экстракты упаривают на ротационном испарителе до объема 20 - 30 мл или досуха, растворяя затем сухой остаток в 20 - 30 мл гексана или петролейного эфира. Экстракт переносят в делительную воронку и производят очистку серной кислотой, как описано выше.
<a id="p100120"></a>Шрот, лузга, жмых. Навески: 15 г обогащенного липидами шрота или жмыха; 20 г не обогащенного липидами шрота или лузги делят на равные части и помещают в колбы емкостью 100 - 250 мл с притертыми пробками, заливают гексаном (три объема гексана на одну весовую часть шрота), встряхивают на приборе для встряхивания 30 минут. Экстракт фильтруют через воронку Бюхнера, не перенося осадок на воронку. В колбу повторно заливают указанное количество гексана, встряхивают 30 минут, фильтруют, количественно переносят осадок на воронку Бюхнера с помощью 30 мл гексана (3 раза по 10 мл). Полученный экстракт выпаривают до 30 мл на ротационном испарителе или в токе воздуха при температуре не выше 40 град., остаток делят на две равные части и помещают в морозильную камеру холодильника на 1 час (не менее). Каждую часть пропускают через отдельную колонку с окисью алюминия со скоростью 2 мл/минуту, промывают колбу и колонку 50 мл охлажденной смеси этилового эфира с гексаном (15:85). Эту операцию необходимо проводить без перерыва, не оставляя на следующий день. Очищенные экстракты объединяют и упаривают до объема 1 мл. Остаток из колбы переносят количественно микропипеткой с помощью резиновой груши в пробирку на 1 мл, колбу и микропипетку 2 - 3 раза промывают небольшим количеством гексана (всего 0,3 - 0,5 мл), сливая его в ту же пробирку. Затем осторожно выпаривают гексан из пробирки на водяной бане при температуре 50° почти досуха (конечный объем приблизительно 2 - 3 капли). Если общий объем экстракта и промывной жидкости превышает 1 мл, то сначала выпаривают экстракт, постепенно прибавляя к нему промывную жидкость. При наличии в упаренном экстракте белого мазеобразного осадка в пробирку добавляют 5 - 6 капель гексана и помещают ее на 15 - 20 минут в морозильную камеру холодильника, затем декантируют дважды таким же количеством гексана и снова упаривают до конечного объема 2 - 3 капли.
<a id="p100121"></a>Параллельно с исследуемыми образцами готовят два модельных экстракта. Каждый экстракт получают из одного грамма шрота, не содержащего пестицидов (соотношение сухого вещества и пестицида то же, что и в исследуемых образцах). В один из экстрактов перед очисткой на колонках вносят микрошприцем (микропипеткой) определяемые пестициды в количестве 3 мкг, в другой - 0,75 мкг. Упаренные исследуемые и модельные экстракты с помощью микропипетки или микрошприца количественно наносят на пластинку, трижды смывая пробирку небольшим количеством гексана.
<a id="p100122"></a>Рыба, мясо и мясопродукты. Мясо, мясопродукты пропускают через мясорубку. Рыбу очищают от чешуи, внутренних органов и тоже пропускают через мясорубку. 20 г пробы перемешивают с безводным сернокислым натрием и помещают в колбу с притертой пробкой. Пестициды экстрагируют дважды смесью гексан - ацетон или петролейный эфир - ацетон в соотношении 1:1 порциями по 50 мл в течение 1,5 часов при встряхивании. Экстракт фильтруют через воронку с бумажным фильтром, заполненным на 2/3 безводным сернокислым натрием, затем растворитель отгоняют, сухой остаток растворяют в 20 мл н-гексана и вносят его в колонку с силикагелем АСК. После впитывания экстракта в сорбент пестицид элюируют 110 мл смеси бензола с гексаном в соотношении 3:8 порциями по 25 - 30 мл. Элюат собирают в круглодонную колбу со шлифом емкостью 250 - 300 мл. Через 10 минут после впитывания последней порции растворителя сорбент отжимают с помощью груши. Элюат отгоняют до объема 0,1 мл и наносят на хроматографическую пластинку.
<a id="p100123"></a>В том случае, если пробы мяса или рыбы содержат большое количество жира, после испарения первого экстрагента (смеси ацетона с гексаном) и растворения сухого остатка в гексане следует провести очистку гексанового экстракта серной кислотой, а затем колоночную очистку, как описано выше.
<a id="p100124"></a>Животный жир, яйца, яичный порошок. Жир измельчают на мясорубке, яичный порошок тщательно перемешивают, яйца - отделяют желток от белка, взвешивают желток и белок, а для анализа берут только желток. Конечный результат о содержании хлорорганических пестицидов в яйце приводят на все яйцо. Желток тщательно перемешивают.
<a id="p100125"></a>25 г подготовленного образца заливают 50 мл ацетона, перемешивают и нагревают на горячей водяной бане до закипания растворителя. Колбу охлаждают, добавляют в нее 10 мл охлажденного 2% раствора сернокислого натрия, перемешивают и охлаждают 45 минут на ледяной бане. Затем сливают ацетоновый слой в круглодонную колбу через слой обезжиренной ваты. Экстракцию ацетоном с последующим вымораживанием жира повторяют еще два раза. Из объединенных экстрактов отгоняют ацетон на ротационном испарителе или в приборе для отгонки растворителей (температура бани не более 70 град. +/- 2 град.) и трижды экстрагируют петролейным эфиром порциями 20, 10 и 10 мл. Продолжительность первой экстракции 1 час, последующих - 15 минут. Петролейный эфир переносят в делительную воронку с 40 мл 2% водного раствора сернокислого натрия, перемешивают содержимое в течение 2-х минут, дают слоям разделиться и водную фазу отбрасывают. Для улучшения разделения слоев можно добавить несколько мл насыщенного раствора сернокислого натрия. Операцию промывки экстракта повторяют еще два раза, после чего петролейный эфир сливают в стакан с 20 г безводного сернокислого натрия, споласкивают делительную воронку дважды 5 мл петролейного эфира. Подсушенный экстракт количественно переносят в мерный цилиндр на 50 мл и доводят объем раствора петролейным эфиром до 30 мл. Далее наносят 30 мл экстракта в колонку с силикагелем АСК, как указано выше. Для проб свиного жира насыпают 75 мл силикагеля АСК, для всех остальных проб - 70 мл. Очистку экстрактов проводят, как описано для проб мяса. Элюат собирают в круглодонную колбу на 150 мл, растворитель упаривают до объема нескольких капель и наносят на хроматографическую пластинку.
<a id="p100126"></a>Мед. 30 г меда смешивают с 3 г безводного сернокислого натрия и трижды экстрагируют пестициды гексаном порциями по 30 мл каждый раз по 15 минут, тщательно растирая мед стеклянной палочкой в узком химическом стакане. Экстракты объединяют и отгоняют гексан до объема 30 мл или до меньшего объема, далее доводя экстракт до 30 мл гексаном. 30 мл экстракта вносят в хроматографическую колонку с силикагелем АСК и проводят очистку экстракта и испарение растворителя, как описано выше.
<a id="p100127"></a>Сахар. Из навески 50 г сахара, предварительно растворенного в воде, пестициды экстрагируют в делительной воронке на 250 мл н-гексаном. Экстракцию пестицидов проводят трижды по 50, 25 и 25 мл растворителя каждый раз встряхивая по 5 минут. Объединенные гексановые экстракты очищают от коэкстрактивных веществ (красящие, аминокислоты, липиды) сернокислотным способом.
<a id="p100128"></a>Молоко и молочные продукты. Для подготовки проб можно использовать один из приведенных способов.
<a id="p100129"></a>Первый способ. Сливки, сметана, молоко и др. цельномолочные продукты. Для анализа берут 20 г сливок и сметаны, предварительно разведенных равным объемом дистиллированной воды, 50 мл молока, кефира и т.п., прибавляют концентрированную серную кислоту (30 - 40 мл) до полного почернения пробы. Охлажденный до 10 - 15 град. раствор переносят в делительную воронку и экстрагируют препараты гексаном 2 раза порциями по 25 мл. Для полного извлечения воронку встряхивают 2 минуты, затем оставляют ее на 30 минут до полного разделения слоев. Если образуется эмульсия, прибавляют 1 - 2 мл этилового спирта. К объединенным экстрактам в делительной воронке прибавляют 10 мл концентрированной серной кислоты, насыщенной сернокислым натрием, и осторожно встряхивают несколько раз. Очистку продолжают до получения бесцветной серной кислоты.
<a id="p100130"></a>Творог, сыр. 50 г творога или 10 г измельченного на терке сыра заливают 40 мл гексана или петролейного эфира, непрерывно встряхивают 2 - 3 минуты и оставляют на 30 минут. Экстракцию повторяют. Объединенные экстракты в делительной воронке очищают серной кислотой, как указано выше.
<a id="p100131"></a>Второй способ. Молоко, кефир, простокваша, кумыс и другие цельномолочные продукты. 25 мл продукта помещают в делительную воронку на 300 мл, приливают по 5 мл щавелевокислого калия и насыщенного раствора хлористого натрия, перемешивают, приливают 100 мл ацетона, встряхивают 2 минуты. Приливают 100 мл хлороформа и встряхивают 2 мин. Воронку оставляют до полного разделения слоев. Верхнюю фазу отбрасывают, а нижнюю выливают в круглодонную колбу со шлифом и испаряют растворитель досуха. Остаток смывают 30 мл гексана.
<a id="p100132"></a>Сгущенное молоко, 10 - 20% сливки. К 10 г продукта прибавляют 10 мл насыщенного раствора хлористого натрия и выливают в делительную воронку вместимостью 150 мл. К смеси приливают 40 мл ацетона, встряхивают 2 минуты, приливают 60 мл хлороформа, встряхивают 2 - 3 минуты и оставляют до разделения фаз. Далее поступают, как при определении пестицидов в молоке.
<a id="p100133"></a>Сгущенные молочные продукты. 10 г продукта помещают в стаканчик, заливают 10 мл воды с температурой 45 - 50 град. C, перемешивают и переносят в делительную воронку на 150 мл, добавляют 5 мл щавелевокислого калия. Содержимое воронки перемешивают, приливают 80 мл ацетона и встряхивают 2 - 3 минуты. Добавляют 100 мл хлороформа и встряхивают 5 - 7 минут. После разделения фаз нижнюю фазу сливают в круглодонную колбу, растворители отгоняют, а сухой остаток растворяют в 30 мл петролейного эфира.
<a id="p100134"></a>Сухие молочные продукты. 3 г сухих молочных продуктов (сливок 2 г) высыпают в стаканчик, приливают 15 мл дистиллированной воды с температурой 40 - 45 град. C, размешивают и переносят в делительную воронку вместимостью 300 мл, приливают по 5 мл щавелевокислого калия и насыщенного раствора хлористого натрия. Содержимое воронки перемешивают, добавляют 80 мл ацетона и встряхивают 3 - 5 минут, приливают 100 мл хлороформа, встряхивают 5 минут и оставляют на 3 - 5 минут (до разделения фаз). Нижнюю фазу сливают в круглодонную колбу, растворитель отгоняют, а остаток смывают 30 мл гексана.
<a id="p100135"></a>Сметана, 30 - 40% сливки. 5 г продукта отвешивают в стаканчик, приливают 10 мл насыщенного раствора хлористого натрия и переносят в делительную воронку вместимостью 150 мл. Стаканчик обмывают 40 мл ацетона, смывы переносят в делительную воронку, которую встряхивают 2 - 3 минуты, добавляют 70 мл хлороформа и встряхивают 2 мин. Воронку оставляют на несколько минут до разделения фаз, нижнюю фазу сливают в колбу для отгонки растворителей, растворитель отгоняют, а остаток смывают 30 мл гексана.
<a id="p100136"></a>Творог, сыр. 10 г творога или измельченного на терке сыра растирают с 10 мл насыщенного раствора хлористого натрия и переносят в делительную воронку на 250 - 300 мл. Прибавляют 80 мл ацетона, встряхивают 2 минуты, приливают 100 мл хлороформа и вновь встряхивают. Нижнюю фазу используют для анализа после отгонки растворителей, растворив остаток в 30 мл гексана.
<a id="p100137"></a>Далее проводят очистку экстрактов из проб молока и молочных продуктов от молочного жира, подготовленных по второму способу. Для этого 30 мл экстракта наносят в колонку с 70 мл силикагеля АСК. После впитывания экстракта в сорбент пестицид элюируют 110 мл смеси бензола с гексаном в соотношении 3:8 порциями по 25 - 30 мл. Элюат собирают в круглодонную колбу на 250 - 300 мл. Через 10 минут после впитывания последней порции растворителя сорбент отжимают с помощью резиновой груши. После очистки растворители отгоняют под вакуумом.
<a id="p100138"></a>Сливочное масло. 20 г сливочного масла растапливают на водяной бане в круглодонной колбе, прибавляют 50 мл ацетона, тщательно перемешивают до растворения жира, прибавляют 10 мл ледяной дистиллированной воды и охлаждают на льду до затвердевания жира (примерно 30 минут). Сливают ацетоновый экстракт, и процедуру повторяют еще 2 раза. Из объединенных экстрактов в круглодонной колбе ацетон отгоняют на водяной бане. Пестициды экстрагируют из оставшегося водного экстракта гексаном тремя порциями по 10 мл в течение 5 минут. Объединенные гексановые экстракты в делительной воронке обрабатывают серной кислотой с сернокислым натрием. Очищенный экстракт сушат безводным сернокислым натрием и упаривают.
<a id="p100139"></a>Почва. К навескам воздушно-сухой почвы (10 г), помещенным в конические колбы емкостью 250 мл, приливают 10 мл 1-процентного водного раствора хлористого аммония и оставляют на сутки закрытыми. Затем приливают смесь 30 мл ацетона и 30 мл гексана и встряхивают колбы в течение часа на встряхивающем устройстве. Содержимое колб переносят в центрифужные пробирки. После центрифугирования жидкую часть сливают в конические колбы, почву с помощью 10 мл 1-процентного раствора хлористого аммония и 30 мл ацетона переносят в исходные конические колбы, добавляют 30 мл гексана и проводят экстракцию еще в течение 30 минут. Затем экстракты объединяют. К объединенным экстрактам в делительной воронке приливают 180 мл дистиллированной воды, осторожно встряхивают в течение 5 - 7 минут, дают жидкостям расслоиться и нижний водный слой сливают в коническую колбу. Гексановый слой пропускают через безводный сульфат натрия (столовая ложка или 30 - 40 г сульфата натрия).
<a id="p100140"></a>Из водно-ацетонового слоя экстракцию пестицидов проводят еще дважды 15 и 10 мл гексана, который затем сушат через тот же сульфат натрия. Гексановые экстракты объединяют.
<a id="p100141"></a>Концентрирование экстрактов проводят либо на ротационно-вакуумном испарителе, либо при температуре бани не более 40 град. C и времени отгонки 9 - 11 минут, либо из колбочек с г-образным отводом при температуре водяной бани 72 - 75 град. C.
<a id="p100142"></a>Очистку сконцентрированных гексановых экстрактов из проб почв проводят серной кислотой, как описано выше для других проб, и испаряют растворитель.
<a id="p100143"></a>Табак и табачные изделия. 5 г табака помещают в стеклянный стакан на 500 мл, заливают 50 мл концентрированной серной кислоты и стеклянной палочкой тщательно размешивают до полного равномерного обугливания пробы. Спустя 10 - 15 минут в колбу добавляют 25 мл гексана, тщательно размешивают содержимое и прибавляют 20 мл четыреххлористого углерода. Экстракцию пестицидов из пробы проводят в течение 15 минут трижды, после чего экстракт последовательно переносят в делительную воронку для однократной или двукратной дополнительной очистки серной кислотой.

<a id="p100144"></a>Хроматографирование

<a id="p100145"></a>На хроматографическую пластинку на расстоянии 1,5 см от ее края шприцем или пипеткой наносят исследуемую пробу в одну точку так, чтобы диаметр пятна не превышал 1 см. Остаток экстракта в колбочке смывают тремя порциями (по 0,2 мл) диэтилового эфира, которые наносят в центр первого пятна. Справа и слева от пробы на расстоянии 2 см наносят стандартные растворы, содержащие 10, 5, 1 мкг исследуемых препаратов (или другие количества, близкие к определяемым концентрациям).
<a id="p100146"></a>    Пластинки  с  нанесенными  растворами  помещают  в  камеру для
хроматографирования,   на  дно  которой  за  30  минут  до  начала
хроматографирования    наливают    подвижный   растворитель.   При
использовании   пластинок   с  тонким  слоем  окиси  алюминия  или
силикагеля  в  качестве подвижного растворителя применяют н-гексан
или  смесь гексана с ацетоном в соотношении 6:1, для препаратов, у
которых   величина  R   в  гексане  ниже  0,3.  При  использовании
                     f
пластинок  "Силуфол" подвижный растворитель - 1% раствор ацетона в
гексане, а пластинок  "Силуфол",  импрегнированных о-толидином,  -
гексан  с  диэтиловым  эфиром в соотношении 49:1. Край пластинки с
нанесенными   растворами   может   быть   погружен   в   подвижный
растворитель не более чем на 0,5 см.
<a id="p100147"></a>После того как фронт растворителя поднимется на 10 см, пластинку вынимают из камеры и оставляют на несколько минут для испарения растворителя. Далее пластинку орошают проявляющим реактивом и подвергают действию УФ света в течение 10 - 15 минут (лампа ПРК-4). Пластинки следует располагать на расстоянии 20 см от источника света.
<a id="p100148"></a>При наличии хлорорганических пестицидов на пластинке появляются пятна серо-черного цвета.
<a id="p100149"></a>При использовании для анализа пластинок "Силуфол", импрегнированных о-толидином, их непосредственно после хроматографирования подвергают УФ-облучению в течение нескольких минут. При наличии хлорорганических пестицидов в этом случае появляются пятна сине-голубого цвета.
<a id="p100150"></a>Количественное определение осуществляют сравнением площадей пятен пробы и стандартных растворов. Между количеством препарата в пробе, не превышающим 20 мкг, и площадью его пятна на пластинке существует прямая пропорциональная зависимость. При большем содержании препарата следует использовать пропорциональную часть исследуемого экстракта.

#### <a id="p100151"></a>2.6 Обработка результатов анализа

<a id="p100152"></a>Количество препарата в пробе вычисляют по формуле:

                               A x S
                                    2
<a id="p100153"></a>                           X = ------,
                               P x S
                                    1

<a id="p100154"></a>    где: X - содержание препарата в пробе, мг/кг или мг/л;
<a id="p100155"></a>    A - содержание препарата в стандартном растворе, мкг;
<a id="p100156"></a>    S  - площадь пятна стандартного раствора, кв. мм;
     1
<a id="p100157"></a>    S  - площадь пятна пробы, кв. мм;
     2
<a id="p100158"></a>    P - масса или объем исследуемой пробы, г или мл.

3. <a id="p100159"></a>Требования безопасности
<a id="p100160"></a>Соблюдаются требования безопасности, обычно рекомендуемые для работы с химическими реактивами и хлорорганическими пестицидами.

<a id="p100161"></a>Таблица 3

<a id="p100162"></a>             ВЕЛИЧИНА R  ХЛОРОРГАНИЧЕСКИХ ПЕСТИЦИДОВ
                       f


<table>
<colgroup><col width="33%"><col width="40%"><col width="13%"><col width="13%"></colgroup>
<tr><td rowspan="2">Пестицид</td><td rowspan="2">Подвижный растворитель</td><td colspan="2">Величина R f</td></tr>
<tr><td>на окиси алюминия</td><td>на силикагеле</td></tr>
<tr><td>Гексахлорбензол Альдрин</td><td>Гексан Гексан</td><td>0,9 0,83</td><td>- 0,68</td></tr>
<tr><td>ДДЭ ДДЭ</td><td>-"- Гексан + ацетон (6:1)</td><td>0,78 0,87</td><td>0,66 -</td></tr>
<tr><td>Гептахлор</td><td>Гексан</td><td>0,76</td><td>0,65</td></tr>
<tr><td>2,4-ДДТ</td><td>-"-</td><td>0,67</td><td>0,54</td></tr>
<tr><td>4,4'-ДДТ</td><td>-"-</td><td>0,61</td><td>0,50</td></tr>
<tr><td>4,4'-ДДТ Линдан</td><td>Гексан + ацетон (6:1) Гексан</td><td>0,75 0,34</td><td>- 0,20</td></tr>
<tr><td>ДДД ДДД</td><td>-"- Гексан + ацетон (6:1)</td><td>0,30 0,62</td><td>0,40 -</td></tr>
<tr><td>Метоксихлор</td><td>Гексан</td><td>0,15</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Метоксихлор</td><td>Гексан + ацетон (6:1)</td><td>0,60</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Кельтан</td><td>Гексан</td><td>0,05</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Кельтан</td><td>Гексан + ацетон (6:1)</td><td>0,40</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Кельтан</td><td>Бензол</td><td>0,44</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Тедион</td><td>Гексан</td><td>0,03</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Тедион</td><td>Гексан + ацетон (6:1)</td><td>0,55</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Эфирсульфонат</td><td>Гексан</td><td>0,</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Эфирсульфонат</td><td>Гексан + ацетон (6:1)</td><td>0,45</td><td>-</td></tr>
<tr><td>Дактал</td><td>То же (2:1)</td><td>0,9</td><td>-</td></tr>
</table>


<a id="p100185"></a>В настоящих Методических указаниях обобщены следующие методики определения остаточных количеств хлорорганических пестицидов в пищевых продуктах:

1. <a id="p100186"></a>М.А. Клисенко, З.Ф. Юркова   Определение ДДТ, ДДЭ, ДДД,
   (ВНИИГИНТОКС)                альдрина, дильдрина, гептахлора,
   Л.А. Стемпковская (Киевский  метоксихлора, эфирсульфоната и
   НИИ гигиены питания)         др. ядохимикатов в воде, продуктах
   В.В. Молочников,             питания и биологических средах
   В.И. Мочалов,                хроматографией в тонком слое.
   А.П. Моргунова (ВНИИМП)      Утвержден 30.07.1973, N 1112-73.
                                Методические указания по
                                определению микроколичеств
                                пестицидов в продуктах питания,
                                кормах и внешней среде, часть VI,
                                М., 1974

2. <a id="p100187"></a>А.Б. Белова, Л.В. Новикова,  Определение ДДТ, ГХЦГ, альдрина и
   Н.И. Шадрина (ВНИИ жиров)    гексахлорбензола в обогащенных и
                                необогащенных липидами хлопковых
                                шротах. Утвержд. 30.07.1973,
                                N 1112-73.
                                Там же

3. <a id="p100188"></a>Э.И. Бабкина,                Методические указания по контролю
   Ц.И. Бобовникова,            загрязнения почв. Утв. 12.10.1977,
   В.В. Егоров, Г.В. Миронюк    N 1766. Гидрометеоиздат, 1977

4. <a id="p100189"></a>А.И. Шумкова, И.Н. Карпова,  Определение хлорорганических
   С.А. Ликунова,               пестицидов в животных жирах, мясе,
   Л.Д. Рузанкова (ВНИИМП)      яйцах и продуктах их переработки
   Н.В. Перетолчин,             хроматографией в тонком слое.
   Г.П. Угрюмова (ВНИИПП)       Утв. 23.01.1975, N 1222-75.
                                Методические указания по
                                определению микроколичеств
                                пестицидов в продуктах питания,
                                кормах и внешней среде, часть VII,
                                1977

5. <a id="p100190"></a>Л.Ф. Васьковская,            Методы определения ДДТ, его
   А.Л. Бурштейн (ВНИИГИНТОКС)  метаболитов и ГХЦГ в табачных
                                изделиях способом хроматографии в
                                тонком слое. Утв. 22.09.1975,
                                N 1350-75.
                                Там же

6. <a id="p100191"></a>В.Н. Полякова,               Определение ДДТ, ДДД, ДДЭ и гамма-
   Г.А. Трондина, Р.Д. Петухов  изомера ГХЦГ в мясе, рыбе, органах
   (ВИЭВ)                       и тканях животных, комбикормах,
                                меде и воде методом тонкослойной
                                хроматографии.
                                Справочная книга по ветеринарной
                                токсикологии, "Колос", 1976

<a id="p100192"></a>С введением в действие настоящих Методических указаний считать утратившими силу "Методы определения гептахлора в растениях методом тонкослойной хроматографии" и "Метод определения ДДТ, ГХЦГ, альдрина и гексахлорбензола в хлопковых шротах, обогащенных и необогащенных липидами", утвержденные зам. Главного санитарного врача СССР в 1971, а также "Методическое письмо об определении ДДТ, гамма-ГХЦГ, ДДД, альдрина, гептахлора и некоторых других хлорорганических пестицидов в воде, продуктах питания и биологических средах методом хроматографии в тонком слое", утвержденное заместителем Главного санитарного врача СССР в 1968 г.



<a id="p100193"></a>

---