Методические указания по определению хлорорганических инсектицидов в гуза-пае и хлопковой шелухе хроматографическими методами

(утв. Минздравом СССР 11.10.1988 № 9712-88)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ХЛОРОРГАНИЧЕСКИХ ИНСЕКТИЦИДОВ В ГУЗА-ПАЕ

Краткая характеристика препаратов приведена в Методических указаниях.

Методика определения ГХЦГ, ДДТ и метаболитов в гуза-пае<*>

---

<*> Разработана Р.И. Шейниной, Я.А. Коневой, Г.Г. Подгорновой (СредазНИПКИпищепром).

Принцип метода. Методика основана на извлечении ХОИ из измельченной пробы парами органического растворителя, очистке экстракта методом колоночной хроматографии, концентрировании его и последующем определении с помощью ГЖХ или ТСХ.

Хроматографическое определение в тонком слое проводят на пластинках «Силуфол» в н-гексане. Пластинки проявляют раствором азотнокислого серебра с последующим облучением их УФ-светом. Для определения методом ГЖХ используют ДЭЗ.

Метрологическая характеристика метода приведена в таблице 8.

Таблица 8

МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДОВ ОПРЕДЕЛЕНИЯ ХЛОРОРГАНИЧЕСКИХ ПЕСТИЦИДОВ

Пестицид	Минимально детектируемое количество	Предел определения, мг/кг	Среднее значение определения, %	Стандартное отклонение, %	Средняя квадратичная ошибка среднего арифметического, %	Доверительный интервал при p = 0,95, %
Газожидкостная хроматография
4,4'-ДДТ	0,06 нг	0,007	89,4	10,2	3,4	8,6
4,4'-ДДЭ	0,01 нг	0,003	87,3	15,5	5,2	13,5
альфа-ГХЦГ	0,001 нг	0,002	92,5	16,4	5,5	13,4
гамма-ГХЦГ	0,001 нг	0,001	94,2	13,8	4,6	11,0
Тонкослойная хроматография
гамма-ГХЦГ	0,01 мкг	0,01	89,4	4,3	1,4	3,5
ДДТ	0,01 мкг	0,05	85,2	5,4	1,8	4,8

Избирательность метода. Метод избирателен в присутствии остаточных количеств ФОП и коэкстрактивных веществ. Если в пробах присутствуют полихлорированные бифенилы, проводят дополнительное дегидрохлорирование.

Реактивы и растворы. н-Гексан ч. Петролейный эфир (40 — 70 °C). Ацетон ч. Серная кислота х.ч. Сульфат натрия безводный х.ч. Силикагель КСКГ, измельченный, просеянный через сито 100 меш (0,14 мм). Нитрат серебра х.ч. Аммиак водный 25-процентный. Пероксид водорода х.ч. Вода дистиллированная. Хлорид кальция х.ч. Газ-носитель — азот особой чистоты. Твердый носитель N-AW-DMCS (80 — 100 меш) с 5% SE-30. Бумага фильтровальная.

Приборы и посуда. Весы лабораторные второго класса точности с предельной нагрузкой 200 г. Пластины для хроматографии «Силуфол» (15 x 15 см). Аппарат Нааба или Сокслета <*>. Колонки хроматографические. Ротационный вакуумный испаритель. Пульверизатор стеклянный. Электроплитка бытовая. Микрошприцы на 10 мкл МШ-10. Набор пипеток и микропипеток. Цилиндры мерные. Камера для хроматографирования. Осветитель ОКН-11 (или ртутно-кварцевая лампа ДРТ-230). Хроматограф «Газохром-1109» или любой другой с ДЭЗ.

---

<*> Руководство по методам исследования, технологическому контролю и учету производства в масложировой промышленности. Л.: ВНИИЖ, 1965.

Подготовка к определению. Насыщенный раствор сульфата натрия в серной кислоте: 20 г соли заливают 200 мл концентрированной серной кислоты. Хранят не более 1 мес. в плотно закрытой склянке.

Силикагель КСКГ, пропитанный серной кислотой: в ступке заливают силикагель раствором, приготовленным из 40 г сульфата натрия и 20 мл концентрированной серной кислоты, готовят перед использованием.

Проявляющий реагент. 0,1 г нитрата серебра растворяют в 2 мл 25-процентного аммиака и доводят объем до 50 мл ацетоном, затем добавляют 0,1 мл пероксида водорода, раствор перемешивают и хранят в темном месте.

Стандартные растворы ХОП готовят растворением навески химически чистых препаратов в н-гексане. Растворы с концентрацией 100 мкг/мл хранят не дольше одного года. Раствор смеси препаратов, взятых в соотношении ДДТ:ДДЭ:альфа-ГХЦГ:гамма-ГХЦГ, равном 6:2:1:1, с концентрацией по ДДТ 3 мкг/мл, хранят не дольше 5 — 6 мес. Рабочий раствор готовят путем разбавления раствора смеси пестицидов до требуемой концентрации и используют для калибровки прибора.

Подготовка хроматографической колонки. Колонку заполняют стекловатой на высоту 1 см, затем силикагелем КСКГ на высоту 3,5 см и силикагелем КСКГ, пропитанным серной кислотой, на высоту 4,5 см. Колонку промывают 30 мл н-гексана или петролейного эфира.

Ход анализа. Навеску гуза-паи (50 г) делят на две равные части, помещают в патроны из фильтровальной бумаги и проводят экстракцию каждой части в аппарате Нааба или Сокслета 150 — 300 мл н-гексана (для ГЖХ) или петролейного эфира (для ТСХ) в течение 3 — 4 ч. Экстракт охлаждают и элюируют через хроматографическую колонку с сорбентами. После прохождения экстракта колбу и колонку промывают 50 мл н-гексана или петролейного эфира. Полученные элюаты от одной пробы объединяют, отгоняют растворитель до 1 — 2 мл (ГЖХ) или 0,2 — 0,3 мл (ТСХ).

Параллельно с анализируемой пробой при анализе методом ТСХ готовят два модельных экстракта, каждый из которых получают из 5 г того же образца. В них вносят стандартный раствор пестицидов определенной концентрации. При анализе методом ГЖХ аликвоты по 2 — 6 мкл вводят в хроматограф.

    Хроматографирование      (ГЖХ).     Используют     хроматограф
"Газохром-1109"  или  любой  другой  с  ДЭЗ.  Твердый  носитель  -

хроматон N-AW-DMCS (0,12 — 0,16 мм) с 5% SE-30. Длина колонки 2 м. Расход газа-носителя через колонку 45 мл/мин.; на продувку детектора — 75 — 80 мл/мин. Температура (°C): колонки — 210 — 220, испарителя — 225, детектора — 240. Объем вводимой пробы 2 — 6 мкл. Скорость протяжки ленты самописца 60 мм/мин. Рабочая шкала -10

электрометра  2  x  10     А. Время выхода ДДЭ принято за 1, время
выхода   остальных   препаратов   определяют   относительно   ДДЭ:

альфа-ГХЦГ — 0,25; гамма-ГХЦГ — 0,41; ДДД — 1,25; ДДТ — 1,58.

Содержание ХОП в гуза-пае (X, мг/кг) определяют по формуле:

                           AH V
                             2 2

X = -----, H V P 1 1

где:

A — содержание пестицидов в стандартном растворе, введенном в хроматограф, нг;

    H ,  H   - высоты пиков соответственно стандартного раствора и
     1    2

анализируемой пробы, мм;

V — объем аликвоты экстракта, введенной в хроматограф, мкл; 1

V — конечный объем экстракта пробы, мл; 2

P — навеска пробы, г.

Хроматографирование (ТСХ). На хроматографическую пластинку количественно переносят пробу и модельные экстракты. Хроматографируют в н-гексане, просушивают и обрабатывают пластину раствором проявляющего реагента, затем облучают УФ-светом в течение 10 — 15 мин., помещая пластинку на расстоянии 20 см от источника. Пятна препаратов окрашены в черно-серый цвет и расположены от стартовой линии в следующем порядке: гамма-ГХЦГ; 4,4'-ДДТ; 2,4'-ДДТ. Содержание препаратов в пробе (X, мг/кг) определяют сравнением размера и окраски пятен проб и модельных экстрактов. Расчет ведут по общепринятой формуле:

                              A

X = -, P

где:

A — содержание препарата в экстракте гуза-паи, найденное на хроматограмме, мкг;

P — навеска пробы, кг.

Требования безопасности. Необходимо соблюдать правила безопасности при работе с органическими растворителями и токсичными веществами.

Методика определения гамма-ГХЦГ и ДДТ в хлопковой шелухе методом тонкослойной хроматографии <*>

---

<*> Разработана Р.И. Шейниной, Я.А. Коневой, О.И. Панченко (СредазНИПКИпищепром), А.Б. Беловой, Л.В. Новиковой (ВНИИЖ).

Принцип метода. Метод основан на экстракции ХОИ парами органического растворителя, последующей очистке экстракта методом колоночной хроматографии, концентрировании и идентификации анализируемых веществ методом ТСХ.

---