Методические указания по измерению концентраций фенапанила в воздухе рабочей зоны тонкослойной хроматографией
(утв. Минздравом СССР 29.07.1991 № 6256-91)
29 июля 1991 г. № 6256-91
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ФЕНАПАНИЛА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ
Калинин В.А. — к.с.н., профессор, зав. кафедры ТСХА; Пушкина Г.П. — к.б.н.
Российский институт лекарственных культур: Борисов Г.С. — зав. КТЛ РРСТАЗР: Федорова Н.Е. — к.х.н., МНИИГ им. Эрисмана.
Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
1. КРАТКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПРЕПАРАТА
Фенапанил является действующим веществом препарата «Систан», ф. Ром Хаас, США. Название по номенклатуре ИЮПАК: альфа-n-бутил-альфа фенил-1Н-имидазол-1-пропан-нитрил.
Эмпирическая формула: C_{16}H_{18}N_{3} .
Т. кип. 200 °C (75 мм рт. ст). Растворимость: вода — 1%; ксилол, ацетон > 50%; этиленгликоль > 25%. Давление паров — 1 \cdot 10^{- 3}\text{мм рт}.\text{ст}. (25 °C). \text{ЛД}_{50} технического продукта для крыс — 1590 мг/кг.
Фунгицид и протравитель семян с широким спектром действия.
2. МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ФЕНАПАНИЛА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ
2.1. Основные положения
2.1.1 Принцип метода
Определение основано на хроматографировании анализируемого соединения в тонком слое силикагеля с последующим обнаружением зон локализации раствором бромфенолового синего (БФС).
2.1.2 Метрологическая характеристика метода
Предел измерения в анализируемом объеме пробы — 5 мкг.
Предел измерения в воздухе — 0,05 мг/м3 (при отборе 100 л воздуха).
Диапазон измеряемых концентраций — 0,05 — 5 мг/м3.
Определению не мешают наполнители технического препарата.
2.2. Реактивы и растворы
н-Гексан, х.ч., ТУ 6-09-3375-78.
Фенапанил, аналитический стандарт, фирма Ром Хаас.
Сульфат натрия безводный, ч., ГОСТ 4166-81.
Проявляющий реактив — раствор бромфенолового синего и нитрата серебра.
Раствор А: 100 мг бромфенолового синего растворяют в 10 мл ацетона.
Раствор Б: 1 г нитрата серебра растворяют в 40 мл воды и добавляют 120 мл ацетона.
Растворы А и Б сливают в мерную колбу на 200 мл и доводят ацетоном до метки. После обработки БФС пластинку обесцвечивают 2%-ным раствором лимонной кислоты.
Стандартный раствор фенапанила с концентрацией 200 мкг/мл в ацетоне. Хранят в холодильнике не более 2-х месяцев.
Пенополиуретановая прокладка — диаметр 5 — 7 см (по размеру фильтродержателя), толщина — 1,5 — 2 см. Предварительная подготовка прокладки — подготовленные по размеру прокладки помещают в стакан, заливают ацетоном на 2 — 4 часа, затем сливают ацетон, отжимают и высушивают на воздухе. Прокладки можно использовать несколько раз.
2.3. Приборы и посуда
Электроаспиратор для отбора проб воздуха, ТУ 64-1-862-77.
Поглотитель Зайцева емкостью 250 мл.
Ротационный вакуумный испаритель для отгонки растворителей с набором колб, ИР-1М, ТУ 64-18-77 (или аналогичного типа).
Облучатель ртутно-кварцевый, ТУ 64-1-1618-72.
Воронки химические диаметром 6 см, ГОСТ 8613-75.
Воронки делительные емкостью 250 мл, ГОСТ 10054-75.
Посуда мерная по ГОСТ 1770-74.
Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-74.
2.4. Условия отбора проб
Фильтр (или пенополиуретановую прокладку) плотно закрепляют в фильтродержателе. Последовательно подсоединяют поглотитель Зайцева, заполненный 100 мл смеси ацетон-вода (1:1). Подсоединяют систему к аспирационному устройству и протягивают воздух со скоростью 5 л/мин в течение 20 мин.
2.5. Условия анализа
Бумажный фильтр (или пенополиуретановую прокладку) помещают в коническую колбу и заливают 50 мл ацетона на 30 мин. Экстракцию повторяют дважды. Объединяют фильтрат, сливают в колбу для отгонки растворителей. Упаривают до объема 0,2 — 0,3 мл.
Смесь ацетон-вода переносят из поглотителя Зайцева в делительную воронку, прибавляют 100 мл дистиллированной воды, перемешивают и препарат экстрагируют хлороформом дважды по 30 мл. Объединяют хлороформный слой, сушат безводным сульфатом натрия и упаривают до объема 0,2 — 0,3 мл.
Подготовленные пробы (экстракт из фильтра и экстракт из поглотителя) количественно наносят при помощи капиллярной пипетки на хроматографическую пластинку так, чтобы диаметр пятна не превышал 1 см. Центр пятна должен быть на расстоянии 2 см от нижнего края пластинки. Колбу с экстрактом 2 — 3 раза смывают небольшими порциями хлороформа, который также наносят в центр пятна. Справа и слева от пробы наносят серию стандартных растворов, содержащих 3; 5; 10 мкг препарата. Пластинку с нанесенными растворами помещают в хроматографическую камеру, содержащую смесь растворителей хлороформ-ацетон 5:1. После поднятия фронта растворителя на 10 см пластинку вынимают и оставляют на несколько минут на воздухе для испарения подвижного растворителя. Затем пластинку обрабатывают раствором бромфенолового синего. Фон пластинки обесцвечивают 2%-м раствором лимонной кислоты (уксусной кислоты). Систан проявляется в виде пятна голубого цвета. Величина R_{f} = 0,45 \pm 0,0\% .
Количественное определение пестицида проводят путем сравнения интенсивности окраски и площади пятна пробы и стандартного раствора. Прямолинейная зависимость между площадью и интенсивностью окраски пятна и концентрацией препарата в пятне соблюдается в интервале 3 — 10 мкг.
Концентрацию фенапанила (X) в воздухе в мг/м3 вычисляют по формуле:
где G — количество фенапанила, найденное в хроматографируемом объеме, мкг;
V_{20} — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к нормальным условиям, л.
3. ТРЕБОВАНИЯ ТЕХНИКИ БЕЗОПАСНОСТИ
Необходимо соблюдать общепринятые правила техники безопасности при работе с органическими растворителями, токсическими веществами и ртутно-кварцевыми приборами.