Методические указания по измерению концентраций клофентезина в воздухе рабочей зоны хроматографическими методами
(утв. Минздравом СССР 29.07.1991 № 6141-91)
29 июля 1991 г. № 6141-91
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ КЛОФЕНТЕЗИНА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ
Калинин В.А. — к.с.н., профессор, зав. кафедры ТСХА; Пушкина Г.П. — к.б.н.
Российский институт лекарственных культур: Борисов Г.С. — зав. КТЛ РРСТАЗР: Федорова Н.Е. — к.х.н., МНИИГ им. Эрисмана.
Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.
1. КРАТКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПРЕПАРАТА
Клофентезин-3,6-Бис(2-хлорфенил)-1,2,4,5-тетразин является действующим веществом акарицидного препарата «Аполло», фирма Агрево, Германия.
Эмпирическая формула: C_{14}H_{8}Cl_{2}N_{4} .
Красное кристаллическое вещество без запаха, Т. пл. 182 — 186 °C. Растворимость (в г/л) при 25 °C: в хлороформе 50, в бензоле 2,5, в ацетоне 5, в циклогексане 1,7, в этаноле 1, в гексане 1, в воде < 0,001. Давление паров 13 фПа (25 °C). Коэффициент распределения октанол-вода 150. Слабо воспламеняем. Действующее вещество и препаративная форма акарицида стабильны на свету, воздухе и при нагревании.
Выпускается в виде 50%-ного с.п. и 50%-ного суспензионного концентрата. Применяется для борьбы с травоядными клещами на фруктовых деревьях, цитрусовых, виноградниках и декоративных культурах при нормах расхода 0,2 — 0,6 г/га, на хлопчатнике 0,5 — 1,0 кг/га.
\text{ЛД}_{50} для крыс < 3200 мг/л. Нетоксичен для пчел, малотоксичен для птиц.
2. МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ КЛОФЕНТИЗИНА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИМИ МЕТОДАМИ
2.1. Основные положения
2.1.1 Принцип метода
Метод основан на определении клофентизина газожидкостной и тонкослойной хроматографией после концентрирования его из воздуха на фильтре и экстракции органическим растворителем.
2.1.2 Избирательность метода
Определению не мешают наполнители технического препарата.
2.1.3 Метрологическая характеристика метода
Предел измерения в анализируемом объеме экстракта методом ГЖХ — 2 нг, методом ТСХ — 3 мкг. Чувствительность определения в воздухе (при отборе 100 л) — 0,01 мг/м3. Диапазон измеряемых концентраций 0,01 — 0,1 мг/м3.
Граница суммарной погрешности +/- 18%.
2.2. Реактивы, растворы, материалы
Азот особой чистоты газообразный, ГОСТ 9293-74.
Хроматон N-AW-DMCS (0,16 — 0,20 мм) с 5% SE-30.
Натрий сульфат безводный, ч.д.а., ГОСТ 4166-76.
Клофентизин, ан. стандарт, фирма АгрЕво.
Фильтры бумажные «синяя лента», ТУ 6-09-1678-77.
Стандартный раствор клофентизина, содержащий 100 мкг/мл вещества, готовят растворением в ацетоне 10 мг препарата в мерной колбе на 100 мл. Хранят в холодильнике не более 2-х месяцев.
Аммиак водный, 25%, ч.д.а., ГОСТ 3760-79.
Гексан, х.ч., ТУ 6-09-3375-78.
Нитрат серебра, ч., ГОСТ 1277-75.
Пластинки «Силуфол» (Хемапол, ЧССР).
Сульфат натрия безводный, ч.д.а., ГОСТ 4166-76.
Фильтры бумажные «синяя лента», ТУ 6-09-1678-77.
Подвижная фаза гексан — ацетон (4:1 по объему).
Проявляющий реагент: 0,5\text{г }AgNO_{3} растворяют в 5 мл дистиллированной воды, прибавляют 7 — 10 мл аммиака (d = 0,90 г/см3) и доводят объем раствора до 200 мл ацетоном.
2.3. Приборы и посуда
Газовый хроматограф с детектором постоянной скорости рекомбинации электронов (ДПР) типа «Цвет», «Кристалл» и др.
Электроаспиратор, ТУ 64-1-862-77.
Испаритель ротационный ИР-1М, ТУ 25-11-917-79.
Колонка стеклянная 1000 x 3 мм.
Микрошприц МШ 10 М на 10 мкл, ТУ 283-3-106.
Лампа ртутно-кварцевая, ТУ 61-1-16-18-77.
Посуда мерная по ГОСТ 1770-74.
Колбы грушевидные, круглодонные на 25, 50, 250 мл, ГОСТ 23932-79.
Камера хроматографическая, ГОСТ 23932-79.
Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-79.
2.4. Отбор и подготовка проб
Воздух со скоростью 5 л/мин аспирируют 20 мин через помещенный в фильтродержатель бумажный фильтр «синяя лента». Рекомендуется отобрать 3 параллельные пробы (хранят в холодильнике не более 2-х месяцев).
2.5. Описание определения
2.5.1 Газохроматографический метод
Бумажный фильтр из фильтродержателя после отбора пробы помещают в коническую колбу, заливают 20 мл ацетона и содержимое встряхивают в течение 20 мин. Экстракцию повторяют еще раз. Экстракты объединяют, ацетон сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют до 1 мл, аликвоту вводят в хроматограф, а оставшийся экстракт повторно концентрируют до объема 0,1 — 0,2 мл и наносят на хроматографическую пластинку.
Температура колонки — 220 °C, испарителя — 240 °C, детектора — 240 °C.
Шкала электрометра — 20 \cdot 10^{- 12}A .
Носитель — Хроматон N-AW-DMCS (0,16 — 0,20 мм).
При указанных условиях хроматографирования препарат дает три пика: один основной (t уд. 4,8 мин) и два других (t уд. 2,5 мин и 7,4 мин).
Линейный диапазон детектирования (по основному пику) 2 — 25 нг.
Минимально детектируемое количество (основной пик) — 2 нг.
Для количественного определения измеряют площадь основного пика в пробе и стандартном растворе (при условии, что пики близки по величине, определение ведется в линейном динамическом диапазоне детектора).
X = \frac{C_{\text{ст}} \cdot V_{\text{ст}} \cdot S_{\text{пр}} \cdot V_{\text{общ}}}{V_{\text{пр}} \cdot S_{\text{ст}} \cdot V_{20}} ,
где C_{\text{ст}} — концентрация клофентизина в стандартном растворе, мкг/мл;
S_{\text{ст}} — площадь пика стандарта, мм2;
S_{\text{пр}} — площадь пика пробы, мм2;
V_{\text{ст}} — объем стандарта, введенный в хроматограф, мкл;
V_{\text{пр}} — объем пробы, введенный в хроматограф, мкл;
V_{\text{общ}} — общий объем пробы после упаривания, мл;
V_{20} — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к нормальным условиям, л.
2.5.2 Метод тонкослойной хроматографии
Пробу, сконцентрированную до объема 0,1 — 0,2 мл, количественно наносят на пластинку «Силуфол». Параллельно наносят серию стандартных растворов с содержанием клофентизина 3,0; 5,0; 10,0 мкг. Образцы хроматографируют в смеси растворителей гексан — ацетон (4:1). Клофентизин в стандартном растворе и пробе обнаруживается на пластинке в виде пятна красного цвета.
Для повышения надежности идентификации пластинку после хроматографирования можно обработать водно-ацетоновым раствором аммиаката серебра и после этого поместить на 30 мин под УФ-облучение. Клофентизин обнаруживается в виде серо-черного пятна. Величина R_{f} = 0,47 \pm 0,05 .
X = \frac{A}{V} \text{мг}/\text{м}^{3} ,
где A — количество препарата, найденное по хроматограмме при сравнении со стандартом, мкг;
V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к нормальным условиям, л.
3. ТРЕБОВАНИЯ ТЕХНИКИ БЕЗОПАСНОСТИ
Необходимо соблюдать общепринятые правила техники безопасности при работе с органическими растворителями и токсичными веществами.