Временные методические указания по определению диметипина в воде, почве, семенах льна и хлопчатника газожидкостной хроматографией

(утв. Минздравом СССР 29.07.1991 № 6140-91)

29 июля 1991 г. № 6140-91

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ДИМЕТИПИНА В ВОДЕ, ПОЧВЕ, СЕМЕНАХ ЛЬНА И ХЛОПЧАТНИКА ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ

Редакционная коллегия:

Калинин В.А. — к.с.н., профессор, зав. кафедры ТСХА; Пушкина Г.П. — к.б.н.

Российский институт лекарственных культур: Борисов Г.С. — зав. КТЛ РРСТАЗР: Федорова Н.Е. — к.х.н., МНИИГ им. Эрисмана.

Настоящие методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава РФ, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Минсельхозпрода РФ и лабораторий других ведомств, занимающихся определением остаточных количеств пестицидов, регуляторов роста растений и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госхимкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками.

1. КРАТКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА ПРЕПАРАТА

Диметипин-2,3-дигидро-5,6-диметил-1,4-дитин-1,1,4,4-тетраоксид является действующим веществом дефолианта «Харвейд» Юнироял, США.

Эмпирическая формула: C_{6}H_{10}O_{4}S_{2} .

Молекулярная масса 210,3.

В чистом виде — белое кристаллическое вещество, Т. пл. 162 — 167 °C. Растворимость: (г/100 г растворителя при 25 °C) в хлороформе — 6,8; дихлорметане — 13,9; диоксане — 13,9; этилацетате — 6,7; ацетоне — 18,6; толуоле — 1,7; этаноле — 1,5; воде — 0,3.

Рекомендуется в качестве дефолианта на хлопчатнике, льне, подсолнечнике. МДУ и ПДК не установлены.

\text{ЛД}_{50} для крыс 1180 мг/кг.

2. МЕТОДИКА ОПРЕДЕЛЕНИЯ ДИМЕТИПИНА В ВОДЕ, ПОЧВЕ, СЕМЕНАХ ЛЬНА И ХЛОПЧАТНИКА ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИЕЙ

2.1. Основные положения

2.1.1 Принцип метода

Метод основан на извлечении диметипина из воды хлороформом, почвы — водой, семян — смесью ацетонитрил-вода, очистке экстракта перераспределением в органический растворитель, дополнительной очистке экстрактов из семян на колонке с окисью алюминия с последующим определением препарата методом ГЖХ с детектором постоянной скорости рекомбинации электронов.

2.1.2 Метрологическая характеристика метода.

Минимально детектируемое количество — 0,5 нг (чувствительность детектора). Линейный динамический диапазон — 0,5 — 4 нг.

Нижний предел определения, мг/кг, мг/л

вода — 0,0015

почва — 0,01

льносемена — 0,02

семена хлопчатника — 0,02.

Среднее значение определения, %

вода — 94,6

почва — 86,3

льносемена — 78,6

семена хлопчатника — 76,4.

Стандартное отклонение, %

вода — 3,6

почва — 7,4

льносемена — 8,6

семена хлопчатника — 8,9.

Относительное стандартное отклонение, %

вода — 2,8

почва — 4,1

льносемена — 4,3;

семена хлопчатника — 4,9.

Доверительный интервал при P = 0,95, n = 15, %

вода — 94,6 +/- 3,4

почва — 86,3 +/- 5,7

льносемена — 78,6 +/- 6,0

семена хлопчатника — 76,4 +/- 7,2.

2.2. Растворы и реактивы

Дистиллированная вода.

Хлороформ, х.ч., ТУ 6-11-8-71.

Этилацетат, ч.д.а., ГОСТ 22300-76.

Ацетонитрил, х.ч., МРТУ 6-09-3534-74.

Ацетон, ч.д.а., ГОСТ 2603-79.

Окись алюминия нейтральная, Хемапол.

Сульфат натрия, безводный, ГОСТ 4166-76.

Хроматон N-супер (0,125 — 0,160 мм) с 3% OV-120, Хемапол.

Диметипин, ан. стандарт, фирма Юнироял.

Стандартный раствор диметипина в ацетоне с концентрацией 100 мкг/мл. Рабочий раствор с концентрацией 0,5 мкг/мл получают путем соответствующего разбавления стандартного раствора (100 мкг/мл).

2.3. Приборы и посуда

Хроматограф «Цвет-106» с детектором постоянной скорости рекомбинации электронов.

Аппарат для встряхивания АВУ-1, ТУ 64-1-1081-73.

Микроразмельчитель тканей РТ-2, ТУ 64-1-1505-73.

Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.

Делительные воронки на 500, 100 мл, ГОСТ 10054-75.

Колбы плоскодонные, конические на 250, 500 мл, ГОСТ 10394-72.

Колбы круглодонные на 100 мл, ГОСТ 10394-72.

Мерные цилиндры на 100 мл, ГОСТ 1770-74.

Пипетки на 0,1 и 1 мл, ГОСТ 1770-74.

Колбы грушевидные на 50 мл, ГОСТ 10384-72.

2.4. Подготовка к определению

2.4.1 Отбор проб

Пробы для анализа отбирают согласно «Унифицированным правилам отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденным зам. Главного государственного санитарного врача СССР 21.08.1979 г., № 2051-79.

2.5. Проведение определения

Почва. 10 г воздушно-сухой, просеянной через сито 2 мм почвы, гомогенизируют с 200 мл дистиллированной воды в микроразмельчителе тканей в течение 3-х минут при скорости вращения ножа-размельчителя 5000 об/мин. Затем суспензию центрифугируют при 3000 об/мин в течение 5 минут, фильтруют, а твердый остаток повторно гомогенизируют с 200 мл воды, центрифугируют, фильтруют и фильтраты объединяют в делительной воронке.

Из водного раствора диметипин извлекают этилацетатом (хлороформом) дважды по 100 мл. Объединенный этилацетат осушают и упаривают, на ротационном испарителе досуха при температуре не более 40 °C. Остаток растворяют в 1 мл ацетона и аликвоту 2 — 5 мкл хроматографируют.

Вода. 100 мл воды экстрагируют этилацетатом (хлороформом) дважды по 100 мл и в дальнейшем поступают так, как описано для почвы.

Семена (лен, хлопчатник). 5 г измельченных льносемян экстрагируют 100 мл смеси ацетонитрил-вода (2:1) при встряхивании в течение часа. Раствор фильтруют, промывают остаток в колбе 50 мл смеси ацетонитрил-вода и фильтруют. Объединенный фильтрат переносят в делительную воронку, добавляют 150 мл воды и препарат экстрагируют хлороформом дважды по 100 мл. Хлороформ сушат над безводным сульфатом натрия и растворитель упаривают на ротационном испарителе до объема 1 — 2 мл. Для очистки образца в широкий бюкс присыпают 10 г окиси алюминия и количественно переносят хлороформный экстракт на сорбент. Растворитель удаляют в вытяжном шкафу, помещая бюкс на песочную баню с температурой 40 °C. Сорбент тщательно перемешивают и переносят в хроматографическую колонку с ватным тампоном. Диметипин элюируют 300 мл воды со скоростью вытекания элюата из колонки 90 — 100 капель в минуту (скорость регулируют с помощью вакуума, создаваемого водоструйным насосом). Из водного раствора диметипин экстрагируют этилацетатом (хлороформом) дважды по 100 мл. Дальнейшие процедуры аналогичны описанным для почвы.

Условия хроматографирования.

Колонка спиральная 1800 x 3 мм, заполненная хроматоном N-супер с 3% OV-210.

Расход носителя (азот ос.ч.) — 30 мл/мин.

Продувка детектора — 150 мл/мин.

Температура колонки — 180 °C.

Температура испарителя — 240 °C.

Температура детектора — 280 °C.

Время удерживания — 10 минут.

Линейный динамический диапазон — 0,5 — 4 нг.

Скорость диаграммной ленты — 240 мм/час.

2.6. Обработка результатов анализа

Количественное определение проводят методом абсолютной калибровки.

X = \frac{C \cdot H_{2} \cdot V_{2}}{H_{1} \cdot V_{1} \cdot P} , где

X — количество диметипина, мг/л, мг/кг;

C — количество диметипина в стандартном растворе, введенного в хроматограф;

H_{1} — высота пика стандартного раствора, введенного в хроматограф, мм;

H_{2} — высота пика препарата в анализируемой пробе, мм;

V_{1} — объем экстракта, введенного в хроматограф, мкл;

V_{2} — объем анализируемой пробы, мкл;

3. ТЕХНИКА БЕЗОПАСНОСТИ

Необходимо соблюдать общепринятые правила техники безопасности при работе с органическими растворителями и токсическими веществами.

Разработчики: А.Ф. Скурьят, Л.В. Зубкевич, Н.В. Петрашкевич, Н.В. Петрученя, Г.К. Карченя (Белорусский НИИ защиты растений).

---