Методика обнаружения пирогенобразующих микроорганизмов в дистиллированной воде, 0,9% раствора натрия хлорида и 5%, 10%, 25% или 40% растворах глюкозы (дополнение к методическим указаниям «Микробиологический контроль в аптеках» № 3182-84 от 29.12.1984)
(утв. Главным государственным санитарным врачом СССР 11.09.1990 № 5191-90)
Главного государственного
санитарного врача СССР
В. И. Чибураев
11 сентября 1990 г. № 5191-90
В ДИСТИЛЛИРОВАННОЙ ВОДЕ, 0,9% РАСТВОРА НАТРИЯ ХЛОРИДА
И 5%, 10%, 25% ИЛИ 40% РАСТВОРАХ ГЛЮКОЗЫ
(ДОПОЛНЕНИЕ К МЕТОДИЧЕСКИМ УКАЗАНИЯМ
«МИКРОБИОЛОГИЧЕСКИЙ КОНТРОЛЬ В АПТЕКАХ»
№ 3182-84 ОТ 24 ДЕКАБРЯ 1984 Г.)
Методические указания разработаны Всесоюзным научно-исследовательским институтом фармации (Брутко Л.И., Щедриной Л.Е., Потемкиной С.П.) совместно с Московской городской санэпидстанцией (Тарсковой Н.Н., Кашинцевой И.А.).
Предназначены для контрольно-аналитических лабораторий, бактериологических лабораторий санэпидстанций, лечебно-профилактических учреждений.
Причиной пирогенности дистиллированной воды, предназначенной для изготовления инъекционных растворов, а также самих инъекционных растворов является заражение их микроорганизмами и продуктами их распада.
Известно, что причиной пирогенности в подавляющем большинстве случаев является грамотрицательные (пирогенобразующие) микроорганизмы, в составе клеточной оболочки которых имеются липополисахариды. Грамположительные микроорганизмы, как правило, не вызывают пирогенной реакции — их пирогенная активность в 10000 — 100000 раз меньше, чем у грамотрицательных микроорганизмов.
При пересмотре нормативов предельного содержания микроорганизмов в растворах для инъекций была учтена избирательная идентификация грамотрицательных (пирогенобразующих) микроорганизмов.
Методика избирательного обнаружения грамотрицательных микроорганизмов, по количеству которых можно судить о пирогенности растворов, вводится как дополнение к пункту 3.1.1 вышеуказанных методических указаний.
Предлагаемая методика позволит бактериологическим лабораториям санэпидстанций, лечебно-профилактических учреждений, а также контрольно-аналитическим лабораториям, контролирующим растворы для инъекций, более целенаправленно проводить эти исследования.
обнаружения пирогенобразующих микроорганизмов в дистиллированной воде, 0,9% растворе натрия хлорида и 5%, 10%, 25% или 40% растворах глюкозы
1 мл исследуемого образца, взятого непосредственно перед стерилизацией, засевают по 0,5 мл на поверхность двух чашек Петри с мясо-пептонным агаром и термостатируют в течение 5 суток при температуре 30 — 35 °C. На предметные стекла пипеткой наносят капли 3% раствора гидроксида калия, одна капля служит контролем, а в другие петлей вносят каждый вид выросших колоний микроорганизмов и тщательно перемешивают. Если в течение 60 секунд происходит образование желеобразной массы, суспензия тянется за петлей, образуя нити, то исследуемый раствор содержит пирогенобразующие микроорганизмы. Если образования геля не происходит, раствор остается гомогенным, то в исследуемом растворе отсутствуют пирогенобразующие микроорганизмы.
ПРИМЕЧАНИЕ: применяемые предметные стекла, пипетки должны быть вымыты хромовой смесью и простерилизованы.
Нормативы предельно-допустимого содержания
непатогенных микроорганизмов в дистиллированной
воде и растворах для инъекций