Методические указания по хроматографическому измерению содержания гексаметилендиамина на коже методом тонкослойной хроматографии

№ 5109-89Действующий акт

(утв. Минздравом СССР 28.09.1989 № 5109-89)

Примечание

Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 № 01/14262-8-32).

Утверждаю
Заместитель Главного
государственного
санитарного врача СССР
В. И. Чибураев

28 сентября 1989 г. № 5109-89

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ СОДЕРЖАНИЯ ГЕКСАМЕТИЛЕНДИАМИНА НА КОЖЕ МЕТОДОМ

ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ

    H N(CH ) NH                                                 М.м. 116,20
     2    2 6  2

Гексаметилендиамин (1,6-диаминогексан) — бесцветное кристаллическое вещество, легко поглощает из воздуха углекислый газ, хорошо растворяется в воде, спирте, эфире, хлороформе, бензоле. Т. пл. 40 — 43 °C. Т. кип. 205 °C.

Гексаметилендиамин обладает раздражающим действием.

1. Характеристика метода

Метод основан на хроматографическом выделении гексаметилендиамина в тонком слое сорбента «силуфол» с последующим проявлением хроматограмм 0,2% раствором нингидрина в этиловом спирте при температуре 110 °C.

В качестве смывающей жидкости используется этиловый спирт.

Диапазон измеряемого содержания 0,0012 — 0,04 мг/кв. см.

Определению не мешают амины, гексаметилендиаммоний себацинат.

Суммарная погрешность определения не более +/- 25%.

ПДУ гексаметилендиамина на коже не установлен.

2. Реактивы и растворы

Гексаметилендиамин, ТУ 6-03-417-77, х.ч.

Аммиак водный, ГОСТ 3760-79, х.ч., 25% раствор.

Ацетон, ГОСТ 2603-79, х.ч.

Этиловый спирт, ГОСТ 5963-67, х.ч.

Нингидрин, МРТУ 6-09-2726-65, ч.

Стандартный раствор гексаметилендиамина с концентрацией 100 мкг/мл готовят растворением 0,01 г вещества в этиловом спирте в мерной колбе вместимостью 100 мл. Раствор устойчив более 1 месяца.

Система растворителей: ацетон-аммиак (9:3).

Проявляющий реактив: 0,2% раствор нингидрина в этиловом спирте.

Хроматографические пластинки «силуфол» ЧССР (150 х 150) мм.

Вата гигроскопическая, ГОСТ 6656-81.

Фильтры бумажные беззольные «розовая лента».

3. Приборы и посуда

Колба мерная, ГОСТ 1770-74, вместимостью 100 мл.

Склянки стеклянные с крышками вместимостью 50 мл.

Стаканы химические стеклянные, ГОСТ 2770-74, вместимостью 100 мл.

Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 50 мл.

Воронки стеклянные, ГОСТ 8613-75, диаметром 6 см.

Чашка фарфоровая, ГОСТ 9147-73, диаметром 12 см.

Палочки стеклянные.

Микрошприц МШ-10, ГОСТ 8043-74.

Микрошприц МШ-1, ГОСТ 8305-74.

Камера для хроматографирования, ГОСТ 10565-63.

Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 19391-65.

Сушильный шкаф, ТУ 64-1-1411-76.

4. Проведение измерения

Условия проведения смыва

Смыв с кожных покровов проводится способом обмыва. Для этого в фарфоровую чашку наливают 30 мл этилового спирта. Ватным тампоном 0,3 г, смоченным в спирте, обмывают участок кожного покрова (110 кв. см) сверху вниз. При этом тампон несколько раз опускают в чашку с этиловым спиртом. Смыв переносят в склянку. Одновременно проводят смыв с кожи у рабочих, не контактирующих с определяемым веществом.

Условия анализа

Ватный тампон тщательно отжимается стеклянной палочкой, переносится в воронку с фильтром. Далее промывают 10 мл этилового спирта (дробными порциями), присоединяя жидкость к основному смыву. Измеряют объем смыва. Общий объем пробы составляет 40 мл.

Для анализа 100 мкл пробы микрошприцем наносят на стартовую линию пластинки таким образом, чтобы диаметр пятна не превышал 0,5 см. Одновременно на пластинку наносят 3 мкл, 4 мкл, 6 мкл, 100 мкл стандартного раствора, что соответствует 0,3; 0,4; 0,6... 10 мкг гексаметилендиамина и 100 мкл контрольной пробы. Пластинку помещают в камеру для хроматографирования, куда за 30 мин. до

хроматографирования  наливают  систему  растворителей  ацетон-аммиак (9:3).
После  того как фронт растворителя поднимется на 10 см, пластинку извлекают
из  камеры, сушат на воздухе до полного испарения растворителя, опрыскивают
0,2%   раствором  нингидрина  в  этиловом  спирте.  Обработанную  пластинку
помещают  в  сушильный  шкаф  при  110  °C  на  10  мин. Гексаметилендиамин
проявляется на хроматограмме в виде розового пятна с R  0,7 +/- 0,01.

Количественное измерение содержания гексаметилендиамина в пробе проводят путем измерения площади пятен пробы и стандартов с помощью планиметра.

Содержание гексаметилендиамина (мкг) в анализируемом объеме пробы вычисляют по формуле:

                                (m х S )
                                      x

M = --------, S st

где m — содержание гексаметилендиамина на пятне стандарта, мкг;

S — площадь пятна пробы, кв. мм; x

S — площадь пятна стандарта, кв. мм. st

Содержание (C) гексаметилендиамина на коже мг/кв. см вычисляют по формуле:

C = -, S

где Q — количество гексаметилендиамина во всем смыве, мг;

S — площадь исследуемой части тела, кв. см.