Методические указания по определению ТМТД и продуктов его превращения в воде, зерновых культурах и растительном материале методом тонкослойной хроматографии

(утв. Минздравом СССР 08.06.1989 № 5044-89)

МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТМТД И ПРОДУКТОВ ЕГО ПРЕВРАЩЕНИЯ В ВОДЕ, ЗЕРНОВЫХ КУЛЬТУРАХ И РАСТИТЕЛЬНОМ МАТЕРИАЛЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>

---

<*> Разработаны Д.Б. Гиренко, Л.Г. Морару (ВНИИГИНТОКС).

Краткая характеристика препаратов приведена в таблице 94.

Таблица 94

ФИЗИКО-ХИМИЧЕСКИЕ СВОЙСТВА ДИТИОКАРБАМАТОВ

Препарат	Структурная формула	Молекулярная масса	Т , °C пл.	Растворимость в воде
ТМТД (тетраметилурамдисульфид) ТМТМ (тетраметилтиомочевина)	Не приводится Не приводится	240,4 130,4	146 — 148 -	Хлороформ, ацетон (нерастворимы) Хлороформ (нерастворим)

Принцип метода определения. Метод основан на хроматографировании исследуемых соединений в слое сорбента (силикагель, пластинки «Силуфол») после извлечения их органическим растворителем из анализируемой пробы.

Метрологическая характеристика метода. Диапазон определяемых концентраций 0,01 — 0,5 мг/кг. Нижний предел определения (ТМТД): вода — 0,01 мг/л; зерновые, растения — 0,01 — 0,5 мг/кг. Среднее значение определения: в воде 80%, зерне 70, растительном материале 7,1%. Доверительный интервал среднего +/- 8, +/- 7 и +/- 9% соответственно. Для ТМТД СД 0,005 мг/кг, во всех пищевых продуктах содержание ТМТД не допускается.

Избирательность метода. Определению не мешают хлор- и фосфорорганические пестициды, могут мешать азотсодержащие соединения.

Реактивы, растворы. Хлороформ х.ч. Ацетон ч. Гидроксид натрия ч.д.а. Сульфат натрия безводный, ч.д.а. Бензол х.ч. Серная кислота х.ч. Нитрат висмута основной, ч.д.а. Йодид калия х.ч. Сульфат меди ч. Уксусная кислота ледяная, х.ч. Хроматографические пластинки. Стандартные растворы препарата (готовят отдельно каждый раствор): 10 мг вещества растворяют в 100 мл хлороформа. Хранят в холодильнике. Срок хранения до 6 мес. Проявляющий реагент № 1 — реактив Драгендорфа. Основной раствор А (3,85 г основного нитрата висмута растворяют в 55 мл дистиллированной воды и прибавляют 25 мл ледяной уксусной кислоты); основной раствор Б (8 г йодида калия растворяют в 20 мл дистиллированной воды). Растворы А и Б сливают. Срок хранения в темном месте до 6 мес. Рабочий раствор для обработки пластинок (к 7 мл основного раствора прибавляют 50 мл дистиллированной воды и 10 мл ледяной уксусной кислоты). Срок хранения в темном месте до 10 дней. Проявляющий реагент № 2 — 1-процентный водный раствор сульфата меди.

Приборы, посуда. Колбы: конические на 100 мл, мерные на 100 мл, грушевидные для отгонки растворителей. Воронки: делительные на 250 мл, химические. Ротационный вакуумный испаритель. Камера хроматографическая. Пульверизатор стеклянный.

Ход анализа. Экстракция. К 200 мл воды прибавляют 300 мл хлороформа, встряхивают 15 мин. в делительной воронке. Экстракцию повторяют дважды. Объединяют хлороформные экстракты, сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют до объема 0,2 — 0,3 мл и остатки количественно наносят на хроматографическую пластинку.

К 25 г пробы из зерновых и растительных культур прибавляют 2 мл серной кислоты (1:1), перемешивают. Пробу заливают 30 — 40 мл смеси хлороформ-ацетон (2:1), встряхивают 30 мин. Отделяют раствор, экстракцию повторяют дважды. Объединяют фильтрат, сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют до объема 0,2 — 0,3 мл. При анализе проб с pH клеточного сока ниже 4 (томаты, вишня и др.) пробу без прибавления серной кислоты экстрагируют смесью хлороформ-ацетон (2:1). Далее поступают так, как описано выше.

Ход анализа при ТСХ. Пробу, концентрированную до 0,2 — 0,3 мл, количественно наносят на пластинку «Силуфол», смывая остаток в колбе смесью хлороформ-ацетон (2:1). Рядом наносят 2 — 10 мкг стандартного раствора препаратов. Пластинку хроматографируют в системе бензол-ацетон (49:0,5). После того, как фронт растворителя поднимется на 10 см, пластинку вынимают, сушат на воздухе. Для обнаружения препаратов пластинку обрабатывают проявляющим реагентом № 1 или № 2.

При обработке реагентом № 1 препараты обнаруживаются: ТМТД — пятно синего цвета, ТМТМ — пятно оранжевого цвета на светло-коричневом фоне. Окраска устойчива в течение 15 — 20 мин.

    При  обработке  реагентом  N 2  препараты  обнаруживаются: ТМТД - пятно
ярко-зеленого  цвета;  ТМТМ  -  пятно  красно-черного цвета (окраска быстро
исчезает). Величина R  составляет: ТМТД - 0,7; ТМТМ - 0,3.

                 f

Обработка результатов анализа. Содержание препарата в пробе (X, мг/кг или мл/л) вычисляют по формуле:

                                  A

X = -, P

где:

A — количество препарата, найденное путем сравнения размера и интенсивности пятен пробы и стандартного раствора, мг;

---