Методические указания по определению смеси метафоса, байлетона и тилта в растениях пшеницы методом тонкослойной хроматографии
(утв. Минздравом СССР 08.06.1989 № 5036-89)
Примечание
Документ включен в Перечень методов (методик) определения остаточных количеств действующих веществ пестицидов в продукции (товарах), подлежащий государственному санитарно-эпидемиологическому надзору (контролю) на таможенной границе и таможенной территории Евразийского экономического союза (Решение Комиссии Таможенного союза от 28.05.2010 № 299).
8 июня 1989 г. № 5036-89
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ СМЕСИ МЕТАФОСА, БАЙЛЕТОНА И ТИЛТА
В РАСТЕНИЯХ ПШЕНИЦЫ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>
<*> Разработаны В.Н. Кавецким, Г.Г. Андриенко, В.А. Лесовой (УкрНИИЗР). Рекомендованы группой экспертов.
Краткая характеристика препаратов: метафоса — см. Унифицированную методику; байлетона — с. 453 (т. 1); тилта — с. 545 (т. 1).
Препараты рекомендуют применять в борьбе с возбудителями болезней и вредителями пшеницы при интенсивной технологии возделывания зерновых культур.
Принцип метода. Метод основан на извлечении смеси соединений хлороформом, упаривании экстракта досуха, растворении сухого остатка водой и переэкстракции препаратов из водного раствора
хлороформом с последующим хроматографическим определением в тонком слое на пластинках «Силуфол» УФ . 254
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДА
| Параметры | Метафос | Байлетон | Тилт |
|---|---|---|---|
| Минимально детектируемое количество, мкг | 0,1 | 0,1 | 0,1 |
| Нижний предел определения, мг/кг | 0,01 | 0,01 | 0,01 |
| Варьирование, % | 70 — 90 | 75 — 90 | 75 — 95 |
| Среднее значение определения, % | 81,0 | 83,5 | 85,7 |
| Стандартное отклонение, % | +/- 8,8 | +/- 9,2 | +/- 7,9 |
| Доверительный интервал среднего при p = 0,95 и n = 5 | 81,0 +/- 11,3 | 83,5 +/- 12,2 | 83,7 +/- 10,2 |
Избирательность метода. Метод специфичен, другие фосфорорганические соединения, применяемые при выращивании зерновых культур, определению байлетона, тилта и метафоса не мешают.
Реактивы и материалы. Ацетон особой чистоты. Гексан ч. Хлороформ х.ч. Безводный сульфат натрия ч. Индикатор бромфеноловый синий ч.д.а. Нитрат серебра ч.д.а. Лимонная кислота, 2,5-процентный раствор лимонной кислоты. Проявляющие реактивы: № 1
- 0,05-процентный раствор бромфенолового синего в 50-процентном
этаноле; N 2 - 1-процентный водный раствор нитрата серебра. Пластинки "Силуфол" УФ . Стандартные растворы (0,1 мг/мл):
254
метафоса в ацетоне; байлетона в этаноле; тилта в этаноле.
Приборы и посуда. Аппарат для встряхивания. Колбы круглодонные; мерные на 100 мл. Холодильник стеклянный для отгона растворителя. Баня водяная. Воронки химические; делительные. Цилиндры мерные. Пульверизатор стеклянный. Камера для хроматографирования (эксикатор). Капиллярные пипетки для нанесения проб. Микропипетки на 0,1 мл. Компрессорная установка УК-40-2.
Ход анализа. Экстракция. Навеску измельченного образца (50 г зеленого растения или соломы) помещают в коническую колбу, заливают 100 - 200 мл хлороформа до полного покрытия пробы. Экстрагируют 1 ч на аппарате для встряхивания. Экстракт фильтруют через слой безводного сульфата натрия, пробу трижды промывают
хлороформом, экстракты объединяют. На водяной бане при температуре
40 - 50 °C под вакуумом отгоняют растворитель до объема 0,1 - 0,5 мл. Остаток высушивают на воздухе. Высушенный остаток заливают 50 мл дистиллированной воды и оставляют на 1 ч, фильтруют через воронку с фильтром в делительную воронку. Колбу трижды промывают дистиллированной водой и присоединяют к водному раствору в делительной воронке. Из воды смесь препаратов экстрагируют трижды хлороформом порциями по 100, 50, 50 мл, энергично встряхивая
воронку в течение 3 мин. Экстракты фильтруют через слой безводного сульфата натрия в круглодонную колбу. Растворитель отгоняют на водяной бане при температуре 40 — 50 °C под вакуумом до объема 0,1
- 0,2 мл. Остаток наносят на пластинку «Силуфол» УФ . 254
Хроматографирование и проявление хроматограмм. Пластинку с нанесенной пробой и серией стандартов помещают в хроматографическую камеру. В качестве подвижной фазы используется
смесь н-гексана и ацетона в объемном соотношении 2,5:1. После того
как подвижная фаза поднимется на высоту 10 см, пластинку вынимают из камеры и сушат на воздухе до полного испарения растворителя. Опрыскивают пластинку проявляющими реагентами N 1 и 2 в соотношении 1:1, затем 2,5-процентным раствором лимонной кислоты для обесцвечивания фона. При наличии препаратов в исследуемой
пробе на пластинке проявляются пятна: метафоса — сине-фиолетовое с
R 0,48, байлетона - ярко-голубое с R 0,38 и тилта - синее с R f f f 0,30. Перед проявлением пластинку просматривают в УФ-свете спектроскопа. Пятна метафоса и тилта не светятся, байлетона
светятся сиреневым цветом.
Обработка результатов анализа. Количественную оценку проводят путем сравнения интенсивности окраски и площади пятен пробы и стандартов.
Содержание препарата в пробе (X, мг/кг) вычисляют по формуле:
A
A — количество препарата, найденное путем сравнения интенсивности окраски и площади пятен пробы и стандартных растворов, мкг;
P — масса исследуемой пробы, г.