Методические указания по определению маврика в воде, плодовых и овощных культурах методами газожидкостной и тонкослойной хроматографии
(утв. Минздравом СССР 08.06.1989 № 5008-89)
8 июня 1989 г. № 5008-89
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ МАВРИКА В ВОДЕ, ПЛОДОВЫХ И ОВОЩНЫХ КУЛЬТУРАХ МЕТОДАМИ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ И ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>
<*> Разработаны Д.Б. Гиренко (ВНИИГИНТОКС).
Краткая характеристика препарата. Маврик - (R)-3-метил-2- (4-трифторметил-2-хлорфениламино)-бутановой кислоты (R,S)-3-фенокси-альфа- цианобензиловый эфир. Брутто-формула C H ClF N O . Молекулярная масса 26 22 3 2 3
503. Общепринятое название — флувалинат. Вязкая жидкость желтоватого цвета. Растворим в органических растворителях, практически нерастворим в воде.
Принцип метода. Метод основан на определении маврика газожидкостной и тонкослойной хроматографией после извлечения его из исследуемой пробы органическим растворителем, очистке от коэкстрактивных веществ в системе жидкость-жидкость.
Метрологическая характеристика метода. Диапазон определяемых концентраций 0,005 — 0,1 мг/кг (мг/л). Остальные параметры приведены в таблице 68.
(p = 0,95, n = 5)
| Анализируемый объект | Среднее значение определения при n = 15, % | Стандартное отклонение, % | Доверительный интервал среднего, % |
| ГЖХ | |||
| Вода | 85,6 | +/- 2,3 | +/- 2,8 |
| Яблоки | 76,0 | +/- 5,5 | +/- 6,6 |
| Картофель | 79,7 | +/- 2,1 | +/- 2,5 |
| ТСХ | |||
| Вода | 83,8 | +/- 2,6 | +/- 3,1 |
| Яблоки | 75,4 | +/- 2,4 | +/- 2,9 |
| Картофель | 78,8 | +/- 5,8 | +/- 7,0 |
Избирательность метода. В условиях определения методом ГЖХ могут мешать препараты из группы синтетических пиретроидов, при определении методом ТСХ мешают препараты, обнаруживаемые с помощью аммиаката серебра.
Реактивы и растворы. Для экстракции. Ацетон х.ч. н-Гексан ч. Сульфат натрия ч.
Для ГЖХ. Неподвижная фаза 5% SE-30 на хроматоне N-AW (0,16 — 0,20 мм). Азот газообразный особой чистоты. Стандартный раствор маврика (5 мкг/мл). Хранят в холодильнике не более 5 дней.
Для ТСХ. Серебра нитрат х.ч. Пластинки «Силуфол». Подвижная фаза — гексан-ацетон (4:1). Проявляющий реагент — раствор аммиаката серебра. 0,5 г AgNO растворяют в 5 мл дистиллированной воды, прибавляют 7 — 10 мл аммиака 3
(22,5%) и доводят объем раствора до 200 мл ацетоном. Основной раствор маврика (200 мкг/мл) в ацетоне. Хранят в холодильнике не более 2 мес.
Водный раствор йода 0,1 — 0,2-процентный.
Приборы и посуда. Посуда мерная (колбы конические, пипетки, цилиндры и др.). Воронки делительные и конические. Колбы грушевидные, круглодонные на 25; 50 и 250 мл. Аппарат для встряхивания. Лампа ртутно-кварцевая. Камера хроматографическая. Пульверизаторы стеклянные. Ротационный вакуумный испаритель. Хроматограф «Цвет» или другой марки, снабженный ДПР. Микрошприц на 10 мкл. Колонка стеклянная длиной 1 м с внутренним диаметром 3 мм, заполненная носителем на высоту 0,5 — 0,6 м.
Ход анализа. Экстракция и очистка экстрактов. Пробу воды (500 мл) помещают в делительную воронку и экстрагируют маврик дважды н-гексаном порциями по 30 мл. Объединенные гексановые экстракты сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют на ротационном испарителе при температуре бани 40 °C до объема 0,3 — 0,5 мл. Досуха отгоняют на воздухе. Остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона и хроматографируют.
Навеску 25 г растительного материала (яблок, картофеля) помещают в коническую колбу, приливают 50 мл смеси ацетон-вода (7:3) и встряхивают 30 мин. Экстракцию повторяют дважды, объединяют ацетоно-водные экстракты, фильтруют и переносят в делительную воронку, прибавляют 300 мл дистиллированной воды, хорошо перемешивают и экстрагируют маврик дважды гексаном порциями по 30 мл. Объединенные гексановые экстракты сушат безводным сульфатом натрия, концентрируют на ротационном испарителе. Сухой остаток в колбе растворяют в 1 мл ацетона и далее хроматографируют.
Условия хроматографирования. При определении маврика методом ГЖХ используют стеклянную колонку длиной 1 м с внутренним диаметром 3 мм, заполненную носителем на 0,5 — 0,6 м.
Носитель хроматон N-AW (0,16 — 0,20 мм) с 5% SE-30. Скорость потока -12
газа-носителя (азота) 50 мл/мин. Шкала электрометра 20 x 10 А. Температура (°C): колонки - 220, испарителя - 240, детектора - 240. Вводимый объем 5 мкл. Время удерживания 12 мин. 36 с. Линейный диапазон
детектирования 5 — 50 нг. Минимально детектируемое количество 5 нг.
Метод тонкослойной хроматографии. Пробу, сконцентрированную до объема 0,1 - 0,2 мл, количественно наносят на пластинку "Силуфол". Параллельно наносят серию стандартных растворов с содержанием маврика 5; 10; 15 мкг. Хроматографируют в смеси растворителей гексан-ацетон (4:1). После высушивания пластинку обрабатывают водным раствором йода (0,1 - 0,2%), высушивают на воздухе, затем помещают в сушильный шкаф на 10 мин. при температуре 100 °C. После охлаждения обрабатывают пластинку раствором аммиаката серебра и облучают УФ-светом. Маврик обнаруживается в виде пятна серо-черного цвета. Величина R составляет 0,45 +/- 0,05.
f
Обработка результатов анализа. Для количественного определения измеряют площадь основного пика в пробе и стандартного раствора (при условии, что пики близки по величине и определение ведется в диапазоне линейности детектора).
При использовании метода ГЖХ содержание препарата в пробе (X, мг/кг, мг/л) рассчитывают по формуле:
C V S
ст 2 пр
где:
C — количество препарата во введенном в хроматограф стандартном ст растворе, нг;
S — площадь пика исследуемого раствора, кв. мм; пр
S — площадь пика стандартного раствора препарата, введенного в ст хроматограф, кв. мм;
V — объем экстракта, введенный в хроматограф, мкл; 1
V — общий объем экстракта после упаривания, мл; 2
P — масса (объем) анализируемой пробы, г (мл).
При использовании метода ТСХ содержание маврика в пробе (X, мг/кг, мг/л) вычисляют по формуле:
A
где:
A — количество препарата, найденное на пластинке в пробе, мкг;
Требования безопасности. Необходимо соблюдать общепринятые правила безопасности при работе с органическими растворителями и токсичными веществами.