Методические указания по измерению концентраций этилового эфира ацетоуксусной кислоты в воздухе рабочей зоны методом тонкослойной хроматографии
(утв. Минздравом СССР 08.06.1989 № 4989-89)
8 июня 1989 г. № 4989-89
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ЭТИЛОВОГО ЭФИРА АЦЕТОУКСУСНОЙ КИСЛОТЫ В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>
<*> Разработаны Р.Д. Васягиной, М.А. Клисенко (ВНИИГИНТОКС).
Краткая характеристика препарата. Товарное название вещества — ацетоуксусный эфир. Брутто-формула C H O . Молекулярная масса 6 10 3
130,15. Представляет собой бесцветную легкоподвижную жидкость с приятным запахом. Т. кип. 180 °C (с частичным разложением). Растворим в этаноле, эфире и других органических растворителях, растворимость в воде 146,3 г на 100 мл. Является полупродуктом в
производстве буцида. В воздухе может находиться в виде паров. ОБУВ в воздухе 7,32 мг/куб. м.
Принцип метода. Метод основан на хроматографировании эфира ацетоуксусной кислоты в тонком слое сорбента с последующим проявлением хроматограмм раствором нитропруссида натрия в щелочной среде. Пробы отбирают с концентрированием в ацетоне.
Метрологическая характеристика метода. Нижний предел измерения в анализируемом объеме 2 мкг, в воздухе — 0,4 мг/куб. м (при отборе 5 л). Диапазон измеряемых концентраций в воздухе 0,4 — 10 мг/куб. м. Суммарная погрешность измерения не превышает +/- 22%. Время измерения, включая отбор проб, составляет 1 ч.
Избирательность метода. Измерению не мешают исходные продукты синтеза.
Реактивы и растворы. Пластинки для ТСХ «Силуфол» (15 x 15 см). Ацетон ч. н-Гептан для хроматографирования х.ч. Этанол ч. Безводный сульфат натрия ч. Проявляющий реагент — нитропруссид натрия ч.д.а., 0,5-процентный водный раствор. Гидроксид натрия ч., 10-процентный водно-этанольный (1:1) раствор. Подвижная фаза: н-гептан — ацетон (1:1). Стандартный раствор № 1: в мерную колбу с притертой пробкой вместимостью 25 мл вносят 5 мл ацетона и взвешивают. Добавляют 1 — 2 капли этилового эфира ацетоуксусной кислоты, взвешивают и доводят до метки ацетоном. По результатам двух взвешиваний рассчитывают концентрацию вещества в мкг/мл. Стандартный раствор № 2 с концентрацией 100 мкг/мл вещества готовят соответствующим разбавлением стандартного раствора № 1 ацетоном. Раствор устойчив в колбе с притертой пробкой. Хранят в холодильнике не более 1 мес.
Приборы и посуда. Электроаспиратор для отбора проб воздуха. Весы аналитические. Поглотительные приборы Зайцева. Ротационный вакуумный испаритель для отгонки растворителей. Водяная баня. Колбы: конические на 100 мл; мерные на 25 мл. Цилиндры мерные на 50 мл. Пипетки вместимостью 0,1 мл. Камера хроматографическая. Пульверизатор стеклянный.
Отбор проб. Воздух со скоростью 1 л/мин. аспирируют через два последовательно соединенных сосуда Зайцева, содержащих по 20 мл ацетона каждый. Поглотители Зайцева помещают в ледяную баню (для исследования отбирают не более 5 л воздуха). Для определения 1/2 ОБУВ по расчетам необходимо отобрать 0,55 л. Срок хранения отобранных проб в холодильнике не более 5 дней.
Ход анализа. Поглотительный раствор из каждого сосуда Зайцева переносят в конические колбы. Промывают каждый поглотительный прибор тремя порциями ацетона по 5 мл, собирая слив в те же конические колбы. Объединенный поглотительный раствор сушат над безводным сульфатом натрия (5 - 7 г) в течение 30 мин. - 1 ч и отгоняют растворитель на ротационном испарителе до объема 0,2 - 0,3 мл (не досуха!) при температуре водяной бани не выше 40 °C. Подготовленную пробу количественно наносят на хроматографическую пластинку таким образом, чтобы диаметр пятна не превышал 0,5 см.
Колбу с экстрактом 2 — 3 раза смывают небольшими порциями ацетона,
который также наносят в центр пятна. Одновременно на стартовую линию пластинки наносят стандартный раствор N 2 в количестве 0,05
- 0,2 мл, что соответствует 5 — 20 мкг вещества соответственно, и
проводят хроматографирование. Пластинку с нанесенными растворами помещают в хроматографическую камеру, в которую за 30 мин. до
хроматографирования налит подвижный растворитель — смесь ацетона с н-гептаном (1:1). После поднятия фронта растворителя на 10 см пластинку вынимают и подсушивают на воздухе. Затем ее обрабатывают из пульверизатора 0,5-процентным раствором нитропруссида натрия, а затем 10-процентным водно-этанольным раствором гидроксида натрия. Этиловый эфир ацетоуксусной кислоты проявляется на хроматограмме в виде желто-оранжевых пятен с величиной R 0,51 +/- 0,05. Окраска f устойчива в течение 10 — 15 мин.
Количественное измерение содержания препарата определяют сравнением интенсивности окраски и площади пятен проб и стандартного раствора. Площадь измеряют планиметром на отдельной пластинке. Строят градуировочный график зависимости количества препарата (мкг) от площади пятна. Прямолинейная зависимость между площадью пятна и содержанием препарата в пятне соблюдается в интервале 2 — 20 мкг. Если содержание препарата в пробе превышает верхнюю границу диапазона (20 мкг), то хроматографируют аликвоту экстракта.
Обработка результатов анализа. Концентрацию этилового эфира ацетоуксусной кислоты в воздухе (X, мг/куб. м) вычисляют по формуле:
GV
2
G — содержание этилового эфира ацетоуксусной кислоты, найденное в анализируемом объеме пробы, мкг;
V — объем пробы, взятый для анализа, мл; 1
V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к 20 стандартным условиям, л.
Требования безопасности. Необходимо соблюдать правила безопасности при работе с органическими растворителями и токсичными веществами.