Методические указания по методам измерения концентраций триамелона в воздухе рабочей зоны
(утв. Минздравом СССР 08.06.1989 № 4971-89)
8 июня 1989 г. № 4971-89
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО МЕТОДАМ ИЗМЕРЕНИЯ КОНЦЕНТРАЦИЙ ТРИАМЕЛОНА
В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ <*>
<*> Разработаны Л.Г. Александровой (КНИИГТиПЗ), Е.А. Суваловой (ИОХ АН УССР).
Краткая характеристика препарата. Химически чистый препарат представляет собой белый сыпучий порошок, негигроскопичный, без запаха, желтеющий на свету. При нагревании на воздухе при температуре более 170 °C разлагается. Хорошо растворяется в воде, мало — в хлороформе, этаноле и его смесях с водой. Практически нерастворим в ацетоне, керосине, бензине, масле. Устойчив при длительном хранении при температуре 20 +/- 5 °C и влажности не более 80%.
Препарат предложен как высокоэффективный регулятор роста дынь. Малотоксичен для теплокровных животных: ЛД более 4000 мг/кг для 50 белых мышей при введении перорально. ОБУВ 1 мг/куб. м.
Принцип метода. При использовании тонкослойной хроматографии определение основано на хроматографировании пробы в тонком слое силикагеля с последующим обнаружением зон локализации препарата с помощью реактива Драгендорфа, йода или йодкрахмального реактива.
При использовании фотометрического метода определение основано на измерении оптической плотности исследуемого йодкрахмального комплекса на фотоколориметре с желто-зеленым светофильтром или визуальной колориметрии путем сравнения проб и стандартной шкалы. Пробы отбирают с концентрированием (стеклянный фильтр с пористой пластинкой).
Избирательность методов. Определению не мешают пестициды, применяемые при возделывании бахчевых культур.
Метрологическая характеристика методов представлена в табл. 195.
МЕТРОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА МЕТОДОВ
| Метод определения | Нижний предел измерения в анализируемой пробе, мкг | Нижний предел измерения в воздухе, мг/куб. м (при отборе воздуха, л) | Диапазон измеряемых концентраций, мг/куб. м | Граница суммарной погрешности, % |
|---|---|---|---|---|
| ТСХ на пластинках «Силуфол» ТСХ на пластинках с силикагелем КСК Фотометрия Качественный (визуальный) | 1 2 70 0,2 | 0,25 (500 л) 0,5 (500 л) 0,5 (350 л) 0,13 | 0,25 — 1,25 0,5 — 5,0 0,5 — 1,4 - | +/- 20 +/- 20 +/- 15,5 - |
Реактивы и растворы. Триамелон (ФАМ). Кислота хлороводородная, водный раствор (1:3). Подвижная фаза № 1: уксусная кислота — ацетон — HCl (5:2:5). Подвижная фаза № 2: этанол — этилацетат — вода (15:1:0,5). Ацетон ч.д.а. Нитрат висмута (основной) ч.д.а. Хроматографические пластинки «Силуфол» (15 x 15 см). Йодид калия ч.д.а. Гипс медицинский, просушенный в течение 2 ч при 160 °C. Безводный сульфат кальция. Кислота уксусная ледяная х.ч. Силикагель марки ЛС 5/40 или марки КСК. Крахмал растворимый для йодометрии, 2-процентный раствор.
№ 1. Реактив Драгендорфа. Основной раствор готовят, смешивая растворы А и Б (1:1). А: 1,7 г нитрата висмута растворяют в 80 мл воды. Б: 32 г йодида калия растворяют в 80 мл дистиллированной воды. Готовый раствор устойчив при температуре 4 +/- 1 °C и влажности не выше 80% (в холодильнике). Рабочий раствор готовят, смешивая 2 мл основного раствора с 2 мл ледяной уксусной кислоты и 6 мл воды.
№ 2. Раствор йода в хлороформе 1-процентный.
№ 3. Для приготовления проявляющего реагента к 30 +/- 1 мл раствора крахмала с массовой долей 0,2% прибавляют 0,003 +/- 0,001 г калия йодноватокислого и подкисляют раствор одной каплей концентрированной серной кислоты. Перемешивают до полного растворения йодноватокислого калия. Полученный проявляющий реагент устойчив в течение 1 сут. при температуре 20 +/- 5 °C.
Дистиллированная вода. Стандартный раствор ФАМ концентрацией 100 мг/кг в дистиллированной воде. Хранят в холодильнике в течение недели. Натрия нитрит ч.д.а., 10-процентный раствор. Применяют свежеприготовленным.
Приборы и посуда. Ротационный испаритель с набором колб или вакуумный испаритель для отгонки растворителей. Пробирки гранулированные со шлифом вместимостью 10 — 15 мл. Спектрофотометр или фотоэлектроколориметр. Стеклянные пластины размером 5 x 7 мм. Колбы мерные на 50 и 100 мл. Стеклянные бюксы. Цилиндры мерные на 25, 50 и 100 мл. Прибор для встряхивания. Стеклянный фильтр Пор 100. Устройство для отбора проб воздуха. Камера для хроматографирования. Камера для опрыскивания пластинок. Микропипетки мерные на 0,1 и 0,2 мг. Пипетки мерные вместимостью 1, 2 и 5 мл. Источник УФ-света (ртутно-кварцевая лампа). Пульверизатор стеклянный. Планиметр, линейка. Воронки. Денситометр БИАН-170. Пробирки колориметрические.
Отбор проб. Воздух со скоростью 20 л/мин. аспирируют через стеклянный фильтр в течение 25 мин. при проведении ТСХ и 17,5 — при фотометрии. Для определения триамелона на уровне 1/2 ОБУВ по расчету следует отобрать: для определения методом ТСХ — 500 л воздуха, фотометрии — 350 л.
Подготовка к определению. Для приготовления хроматографических пластинок со слоем силикагеля КСК предварительно очищают силикагель. Для этого его заливают на 18 — 20 ч водным раствором хлороводородной кислоты (1:1), затем кислоту сливают, промывают силикагель водой и кипятят его в течение 2 — 3 ч с разбавленной азотной кислотой (1:1). Обработанный таким образом силикагель промывают проточной водопроводной водой, а затем дистиллированной до нейтральной реакции и сушат в сушильном шкафу при температуре 113 +/- 2 °C в течение 4 — 6 ч. Дробят и просеивают через сито 1100 меш. Хранят в склянке с притертой пробкой.
Хроматографическую камеру за 2 ч до начала хроматографирования на пластинках «Силуфол» заполняют подвижной фазой № 2. Для равномерного заполнения камеры парами подвижной фазы ее обкладывают фильтровальной бумагой размером 18 x 22 см. Высота слоя подвижной фазы 0,7 — 1 см.
Очищенный силикагель КСК (или ЛС 5/40) массой 5 г просеивают через сито 100 меш, смешивают с 2 г гипса (или безводного сульфата кальция) и приливают постепенно 90 мл воды. Взбалтывают смесь до получения однородной суспензии и равномерно наносят тонким слоем на стеклянные пластинки размером 9 x 12 или 12 x 15 см. Сушат при комнатной температуре 8 — 10 ч. Хранят в эксикаторе.
Ход анализа. Метод ТСХ. Фильтр промывают небольшими порциями воды объемом 10 — 12 мл. Экстракт отгоняют на ротационном испарителе до объема 5 мл и наносят на хроматографическую пластинку 10 — 40 мкл раствора на линию старта. Параллельно наносят стандартные растворы триамелона, содержащие от 2 до 20 мкг вещества. Пластинку со слоем КСК помещают в хроматографическую камеру, куда предварительно (примерно на 1 ч) наливают подвижную фазу № 1, а пластинку «Силуфол» — в камеру с подвижной фазой № 2. После поднятия фронта растворителя на 10 см от линии старта пластинки извлекают и после улетучивания следов растворителя обрабатывают одним из проявляющих реагентов (N 1, 2 или 3).
После опрыскивания пластинок со слоем КСК проявляющим реагентом № 1 зоны локализации триамелона и исходного полупродукта
синтеза (примесь) окрашиваются в ярко-кирпичный цвет на светло-желтом фоне пластинки. Величина R триамелона составляет
f
0,37, примеси препарата - 0,85. Пластинку можно обработать проявляющим реагентом N 2. При этом триамелон и его примесь окрашиваются в красно-коричневый цвет на светло-желтом фоне пластинки. Цвет пятен сохраняется несколько дней, если накрыть
пластинку стеклом.
Если хроматографирование ведут на пластинках "Силуфол" в подвижной фазе N 2, то после развития хроматограмм и подсушивания пластинки в течение 1 мин. при 110 °C опрыскивают проявляющим реагентом N 3. В этом случае в диапазоне концентраций 1 - 5 мкг триамелон проявляется в виде интенсивно окрашенных пятен фиолетового цвета. Цвет устойчив несколько дней. Величина R 0,72.
f
Для количественного измерения сравнивают интенсивность окрашивания и вычисляют площадь пятен с помощью промасленной миллиметровой бумаги. Для расчета выбирают пятна стандартов, наиболее близкие по размерам к пробам.
Для определения содержания триамелона (ФАМ) может быть использован денситометр БИАН-170. Для этого снимают спектрофореграммы с хроматографических пластинок «Силуфол» при оранжевом светофильтре (скорость кимографа 15 мм/мин., скорость каретки 30 мм/мин.). Измеряют площади пиков и для расчета выбирают пик стандарта, наиболее близкий по размерам к пробе.
Фотометрический метод. Из концентрированного до 5 мл исследуемого раствора для анализа отбирают 2 мл, приливают 1 мл 10-процентного раствора нитрита натрия, перемешивают, приливают 1 мл ледяной уксусной кислоты, снова перемешивают и приливают 1 мл 2-процентного раствора крахмала. Растворы перемешивают. Через 15 мин. измеряют оптическую плотность растворов в кюветах шириной 10 мм на фотоэлектроколориметре при желто-зеленом фильтре.
Концентрацию триамелона в фотометрируемом объеме определяют по градуировочному графику. Для построения графика в колориметрические пробирки вносят 0, 70, 80, 100, 120, 140, 160, 180, 200 мкг триамелона, доводят объем раствора водой до 2 мл и далее поступают так же, как с пробой. Строят график по данным оптической плотности не менее чем трех стандартных шкал.
Качественное определение триамелона (ФАМ). На стеклянную пластинку тонким слоем насыпают крахмал или в маленькие пробирки диаметром 7 мм, высотой 2 см насыпают крахмал слоем высотой 1 см. Осторожно наносят на пластинку или вносят в пробирку до 50 мкл из 5 мл исследуемого водного раствора и по каплям (1 — 3 капли) 1-процентный раствор йода в хлороформе. Триамелон тотчас проявляется в виде сине-черного пятна. Чувствительность обнаружения 0,2 мкг, или 0,13 мг/куб. м.
Обработка результатов анализа. Содержание триамелона в воздухе (X, мг/куб. м) находят по формуле:
GV
2
G — количество препарата в анализируемом растворе, мкг;
V — анализируемый объем пробы, мл; 1
V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к 20 стандартным условиям, л.
Требования безопасности. Следует соблюдать общие правила безопасности, необходимые при работе с химическими реактивами и электронагревательными приборами.