Методические указания по хроматографическому измерению концентраций новых синтетических пиретроидов (данитол, фастак, циболт, карате) в воздухе рабочей зоны
(утв. Минздравом СССР 08.06.1989 № 4970-89)
8 июня 1989 г. № 4970-89
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ НОВЫХ СИНТЕТИЧЕСКИХ ПИРЕТРОИДОВ (ДАНИТОЛ, ФАСТАК,
ЦИБОЛТ, КАРАТЕ) В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ <*>
<*> Разработаны Д.Б. Гиренко, М.А. Клисенко (ВНИИГИНТОКС).
Краткая характеристика препаратов приведена в Методических указаниях № 4344-87. При применении могут находиться в воздухе в виде аэрозоля.
Принцип метода. Определение основано на хроматографировании анализируемых соединений на неподвижной фазе SE-30 с ДПР и в тонком слое силикагеля с последующим обнаружением зон локализации препаратов путем обработки раствором нитрата серебра (фастак) или бромфенолового синего.
Пробы отбирают с концентрированием (бумажный фильтр «синяя лента» или стеклянный фильтр с пористой пластинкой).
Метрологическая характеристика метода. Предел измерения в анализируемом объеме пробы методом ГЖХ 2 нг, методом ТСХ — 2 мкг. Предел измерения в воздухе (при отборе 40 л воздуха) методом ГЖХ 0,05 мг/куб. м, методом ТСХ — 0,1 мг/куб. м. Диапазон измеряемых концентраций методом ГЖХ 0,05 — 0,1 мг/куб. м, методом ТСХ — 0,1 — 0,5 мг/куб. м. Граница суммарной погрешности измерения: методом ГЖХ — 14,8 — 16,7%, методом ТСХ — 17,5 — 19,5%.
Избирательность метода. Определению не мешают наполнители технического препарата.
Реактивы и растворы. Ацетон ч. н-Гексан ч. Безводный сульфат натрия х.ч. свежепрокаленный. Фильтры бумажные «синяя лента». Аммиак 25-процентный водный. Нитрат серебра х.ч. Лимонная кислота, 2-процентный раствор. Бромфеноловый синий (индикатор). Пластинки «Силуфол». Подвижная фаза гексан — ацетон (4:1).
№ 1 — 0,5 г нитрата серебра растворяют в 5 мл дистиллированной воды, прибавляют 7 мл аммиака и доводят объем до 100 мл ацетоном. Для обработки одной пластинки расходуют 10 мл. После обработки облучают УФ-светом в течение 30 — 40 мин.;
№ 2 — раствор а: 50 мг бромфенолового синего растворяют в 10 мл ацетона; раствор б: 0,5 г нитрата серебра растворяют в 20 мл воды и приливают 60 мл дистиллированной воды. Раствор б приливают к раствору а и доводят объем раствора до 100 мл ацетоном. На обработку одной пластинки расходуют 10 мл. После обработки бромфеноловым реагентом фон пластинки обесцвечивают 2-процентным раствором лимонной кислоты.
Стандартный раствор № 1 (данитола, фастака, циболта, карате), содержащий 100 мкг/мл вещества, готовят растворением 10 мг препарата в мерной колбе с притертой пробкой в 100 мл гексана. Хранят в холодильнике не дольше 2 мес.
Для ГЖХ. Носитель — хроматон N-AW с 5% SE-30 (0,16 — 0,20 мм). Азот газообразный особой чистоты. Стандартный раствор препарата № 2. Для приготовления раствора с концентрацией препарата 2 мкг/мл вносят 2 мл раствора № 1 в мерную колбу на 100 мл и доводят объем до метки гексаном. Хранят в холодильнике не дольше 2 мес.
Приборы и посуда. Аспиратор для отбора проб воздуха. Фильтродержатели. Ротационный вакуумный испаритель для отгонки растворителей. Водяная баня. Колбы: конические на 100 мл; грушевидные; мерные на 50 мл. Воронки химические.
Для ТСХ. Пластинки для хроматографии «Силуфол». Камера хроматографическая. Пульверизатор стеклянный.
Для ГЖХ. Хроматограф с ДПР (марки «Цвет», «Газохром» и др.). Микрошприцы МШ-10 на 10 мкл. Колонка стеклянная длиной 1 м с внутренним диаметром 3 мм.
Отбор проб. Воздух со скоростью 2 л/мин. аспирируют через помещенный в фильтродержатель бумажный фильтр «синяя лента» (или стеклянный фильтр Шотта) в течение 20 мин. Отбирают три параллельные пробы. Пробы хранят в холодильнике не дольше 2 сут.
Ход анализа. Бумажный фильтр, содержащий аэрозоль, из фильтродержателя переносят в коническую колбу и заливают 20 мл смеси гексана с ацетоном (9:1). Пестицид экстрагируют из фильтра в течение 30 мин., экстракцию повторяют дважды. Объединяют экстракты, сушат безводным сульфатом натрия, сливают в колбу для отгонки растворителей. Испаряют растворитель до объема 0,2 — 0,3 мл при температуре не выше 50 °C, а затем досуха на воздухе. Если для поглощения аэрозоля использовали стеклянный фильтр с пористой пластиной, то поверхность фильтра дважды смывают ацетоном порциями по 20 мл, тщательно обмывая стенки фильтра, сливают ацетон через слой сульфата натрия в колбу для отгонки растворителя, концентрируют до 0,2 — 0,3 мл, а затем испаряют досуха током воздуха. Сухой остаток растворяют в 1 мл гексана и проводят определение методом ГЖХ и ТСХ.
Условия хроматографирования при использовании метода ГЖХ. Длина набивки 0,5 м. Диаметр колонки 3 мм. Твердый носитель
хроматон N-AW (0,16 — 0,20 мм). Жидкая фаза 5% SE-30. Температура,
°C: колонки - 220, испарителя - 240, детектора - 250. Скорость потока газа-носителя (азота особой чистоты) 70 мл/мин. Скорость движения диаграммной ленты 240 мм/ч. Объем вводимой пробы 5 мкл.
-12
Рабочая шкала электрометра 20 x 10 А. Линейный диапазон детектирования 2 — 10 нг. Время удерживания приведено в табл. 190.
ХРОМАТОГРАФИЧЕСКИЕ ПАРАМЕТРЫ РАЗДЕЛЕНИЯ ПРЕПАРАТОВ
| Пестицид | Время удерживания | Величина R f (гексан — ацетон 4:1) |
|---|---|---|
| Данитол Фастак Циболт Карате (2 изомера) | 2 мин. 48 с 5 мин. 5 мин. 18 с 2 мин. | 0,7 0,6 0,4 0,7 и 0,6 |
Определение методом ТСХ. Пробу, сконцентрированную до объема 0,2 — 0,3 мл, количественно наносят при помощи капиллярной пипетки на хроматографическую пластинку, чтобы диаметр пятна не превышал 1 см. Центр пятна должен быть на расстоянии 1,5 см от нижнего края пластинки. Колбу с экстрактом 2 — 3 раза смывают диэтиловым эфиром порциями по 0,01 мл, который также наносят в центр пятна. Справа и слева от пробы наносят серию стандартных растворов пестицида, содержащих 2, 5, 7 и 10 мкг препарата.
Пластинку с нанесенными растворами помещают в хроматографическую камеру, в которую за 30 мин. до хроматографирования налита смесь гексана с ацетоном (4:1). После поднятия фронта подвижного растворителя на 10 см пластинку вынимают и оставляют на несколько минут на воздухе для испарения растворителя. Далее пластинку обрабатывают из пульверизатора раствором нитрата серебра, подсушивают и облучают УФ-светом в течение 15 — 20 мин. Фастак и карате проявляются в виде пятен серо-черного цвета. Для обнаружения данитола, циболта, фастака, карате можно использовать проявляющий реагент № 2. После обработки бромфеноловым синим и обесцвечивания пластинки раствором лимонной кислоты препараты проявляются в виде пятен синего цвета.
Обработка результатов анализа. Количественное определение пестицида проводят по методу абсолютной калибровки.
При определении методом ГЖХ концентрацию препарата в воздухе (X, мг/куб. м) вычисляют по формуле:
GV S
2 пр
G — количество препарата во введенном в хроматограф стандартном растворе, нг;
S — площадь пика стандартного раствора препарата, введенного ст в хроматограф, кв. мм;
S — площадь пика препарата в исследуемом растворе пробы, кв. пр мм;
V — объем экстракта, введенный в хроматограф, мкл; 1
V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к 20 стандартным условиям, л.
При использовании метода ТСХ количество препарата в пробе определяют сравнением интенсивности окраски и площади пятен пробы и стандартного раствора. Строят градуировочный график зависимости количества препарата (в мкг) от площади. Прямолинейная зависимость между площадью пятна и содержанием препарата в пятне соблюдается в интервале 1 — 10 мкг. Если содержание препарата в пробе превышает верхнюю границу диапазона (10 мкг), то для нанесения на пластинку необходимо брать аликвотную часть экстракта (0,1; 0,2 мл и т.д.) параллельной пробы.
Концентрацию препарата в воздухе (X, мг/куб. м) вычисляют по формуле:
GV
2
G — количество препарата, найденное в хроматографируемом объеме пробы, мкг;
V — объем пробы, взятый для хроматографирования, мл; 1
V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к 20 стандартным условиям, л.
Требования безопасности. Необходимо соблюдать правила безопасности при работе с органическими растворителями и токсичными веществами.