Методические указания по фотометрическому измерению концентраций линкомицина в воздухе рабочей зоны
(утв. Минздравом СССР 12.12.1988 № 4852-88)
Примечание
Документ включен в Перечень основных действующих нормативно-методических документов по методам лабораторного и инструментального контроля в системе государственного санитарно-эпидемиологического нормирования (Письмо Роспотребнадзора от 02.12.2008 № 01/14262-8-32).
12 декабря 1988 г. № 4852-88
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ФОТОМЕТРИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ЛИНКОМИЦИНА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Аннотация
Методические указания по измерению концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны предназначены для работников санитарно-эпидемиологических станций и санитарных лабораторий промышленных предприятий при осуществлении контроля за содержанием вредных веществ в воздухе рабочей зоны, а также научно-исследовательских институтов системы здравоохранения России и других заинтересованных министерств и ведомств.
Методические указания разработаны и утверждены с целью обеспечения контроля соответствия фактических концентраций вредных веществ в воздухе рабочей зоны к их предельно допустимым концентрациям (ПДК) — санитарно-гигиеническим нормативам, утверждаемым Министерством здравоохранения СССР, оценки эффективности внедренных санитарно-гигиенических мероприятий, установления необходимости использования средств индивидуальной защиты органов дыхания, оценки влияния вредных веществ на состояние здоровья работающих.
Включенные в данный выпуск методические указания подготовлены в соответствии с требованиями ГОСТ 12.1.005-88 «ССБТ. Общие санитарно-гигиенические требования к воздуху рабочей зоны» и ГОСТ 12.1.016-79 «ССБТ. Воздух рабочей зоны. Требования к методикам измерения концентраций вредных веществ», одобрены Проблемной комиссией «Научные основы гигиены труда и профессиональной патологии», являются обязательными при осуществлении вышеуказанного контроля.
<pre class="legal-pre"> ┌ ┐
│ N-CH CH │
│ │ 3 │ 3 │
│ / \ HO──CH │
│ / \ │ │
│ / \ ──CO──NH──CH │ х HCl х H O М.м. 461,0.
│ │(CH ) х CH │ │ │ 2
│ │ 2 2 3│ │___O │
│ └────────────┘ OH / \ │
│ │/ \ │
│ \ OH /│ │
│ \│___/ S─CH │
│ │ 3│
│ OH │
└ ┘</pre>
Линкомицин представляет собой моногидрат гидрохлорида 6-амино-6,8-дидезокси-N-[2S,4R-1-метил-4-пропил-ролил]-1-тио-альфа-метил D-эритро-D-галакто-октопиранозида. Белый кристаллический порошок, без запаха, горького вкуса, легко растворим в воде (от 1:1 до 1:10), трудно растворим в 95-процентном спирте от (1:30 до 1:100), практически нерастворим в хлороформе. Т пл. 135 — 140 °С. Устойчив при хранении в сухом защищенном от света месте при комнатной температуре в течение 3-х лет.
В воздухе может находиться в виде аэрозоля.
Антибиотик обладает преимущественной активностью в отношении грамположительных микробов. Способен изменять состав нормальной микрофлоры макроорганизма, вызывая дисбактериоз дыхательных путей, кожи, кишечника. При длительном воздействии возможно развитие кандидомикозов. Обладает слабыми аллергическими свойствами. Общетоксическое действие выражено незначительно.
Характеристика метода
Метод основан на реакции взаимодействия линкомицина с реактивом Фолина и последующем фотометрическом измерении синего гетерополикомплекса при 660 нм. Отбор проб проводят с концентрированием на фильтр.
Нижний предел измерения содержания вещества в анализируемом объеме пробы — 10 мкг.
Нижний предел измерения вещества в воздухе — 0,16 мг/куб. м (при отборе 64 л воздуха).
Диапазон измеряемых концентраций от 0,16 до 2,7 мг/куб. м.
Определению не мешает присутствие наполнителей капсул — сахара и крахмала. Мешает присутствие восстановителей.
Суммарная погрешность измерения не превышает 15%.
Приборы, аппаратура, посуда
Спектрофотометр или фотоэлектроколориметр.
Фильтродержатели, ТУ 95.72.05-77.
Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.
Колбы мерные, ГОСТ 1770-74, вместимостью 50, 250 и 1000 мл.
Колбы круглодонные вместимостью 750 мл.
Пробирки с пришлифованными пробками, ГОСТ 10515-75.
Стаканы химические, ГОСТ 25336-82, вместимостью 50 мл.
Пипетки, ГОСТ 20292-74, вместимостью 1, 2, 5 и 10 мл.
Микропипетки, ГОСТ 1770-74, вместимостью 0,2 мл.
Воронки с пористой пластинкой № 1 и № 2.
Реактивы, растворы, материалы
Линкомицин с содержанием 875 мкг химически чистого антибиотика в 1 мг препарата.
Натрий вольфрамовокислый гидрат, МРТУ 6-09-2158-65, х.ч.
Натрий молибденовокислый гидрат, ГОСТ 10931-64, х.ч.
Кислота ортофосфорная, ГОСТ 6552-58, х.ч., 85-процентный раствор.
Соляная кислота, ГОСТ 3118-77, х.ч., концентрированная.
Литий сернокислый гидрат, ГОСТ 10563-63, х.ч.
Реактив Фолина: в круглодонную колбу вместимостью 750 мл вносят 50 г гидрата вольфрамовокислого натрия, 12,5 г молибденовокислого натрия, добавляют 350 мл дистиллированной воды, 25 мл 85-процентной ортофосфорной кислоты и 50 мл концентрированной соляной кислоты. Колбу соединяют с обратным холодильником и раствор кипятят в течение 10 часов. Затем добавляют 75 г гидрата сернокислого лития, 25 мл дистиллированной воды, хорошо перемешивают и добавляют 3 капли жидкого брома. Снова хорошо перемешивают. После охлаждения раствор фильтруют, доводят до 500 мл водой и хранят в склянке темного стекла на холоду. В этих условиях раствор пригоден длительное время. Реактив не должен иметь зеленого оттенка. В противном случае необходимо добавить бром и прокипятить. Перед употреблением разводят водой 1:1.
Натрий углекислый, ГОСТ 84-66, ч.д.а., раствор, насыщенный при нагревании.
Стандартный раствор № 1 с концентрацией линкомицина 100 мкг/мл готовят растворением 0,0011 г препарата в 100 мл воды. Раствор устойчив 1 неделю.
Стандартный раствор № 2 с концентрацией линкомицина 10 мкг/мл готовят путем соответствующего разбавления водой стандартного раствора № 1. Раствор устойчив 2 дня.
Отбор пробы воздуха
Воздух с объемным расходом 15 — 20 л/мин. аспирируют через фильтр АФА-ХП-20. Для измерения 1/2 ПДК следует отобрать 64 л воздуха. Срок хранения отобранных проб 10 дней.
Подготовка к измерению
Градуировочные растворы готовят согласно таблице 25, помещая их в пробирки с притертыми пробками.
| № стандарта | Стандартный раствор № 2, мл | Стандартный раствор № 1, мл | Дистиллированная вода, мл | Содержание линкомицина, мкг |
|---|---|---|---|---|
| 1 | 0 | - | 5,0 | 0 |
| 2 | 1,0 | - | 4,0 | 10 |
| 3 | 5,0 | - | - | 50 |
| 4 | - | 1,0 | 4,0 | 100 |
| 5 | - | 1,5 | 3,5 | 150 |
| 6 | - | 1,75 | 3,25 | 175 |
В пробирки с приготовленными градуировочными растворами добавляют по 0,15 мл насыщенного раствора углекислого натрия, 0,5 мл реактива Фолина, разведенного 1:1 водой, и нагревают в кипящей водяной бане 15 минут. Растворы затем охлаждают под струей водопроводной воды в течение 5 минут и хорошо перемешивают. Окрашенные в синий цвет растворы фотометрируют на спектрофотометре при длине волны 660 нм.
Измерения проводят в кюветах с толщиной поглощающего слоя по отношению к раствору сравнения, не содержащему определяемого вещества. Окраска растворов устойчива 2 часа.
Строят градуировочный график: на ось ординат наносят значения оптических плотностей градуировочных растворов, на ось абсцисс — соответствующие им величины содержания вещества в градуировочном растворе (мкг).
Проверка градуировочного графика проводится 1 раз в квартал или в случае использования новой партии реактива Фолина.
Проведение измерения
Фильтр с отобранной пробой при помощи пинцета помещают в стакан, заливают 8 мл воды, расправляют его и, периодически помешивая, оставляют на 30 минут для растворения. Раствор пробы фильтруют через воронку с пористой пластинкой № 1 или № 2.
Отбирают аликвоту фильтрата объемом 5 мл, добавляют 0,15 мл насыщенного раствора углекислого натрия, 0,5 мл разведенного реактива Фолина и далее обрабатывают аналогично градуировочным растворам. Оптическую плотность полученного синего раствора пробы измеряют по сравнению с контролем, который готовят одновременно и аналогично пробам.
Содержание линкомицина в анализируемом объеме пробы в мкг определяют по предварительно построенному градуировочному графику.
Расчет концентрации
Концентрацию в воздухе, мг/куб. м (С), вычисляют по формуле:
а — количество вещества в анализируемом объеме раствора пробы, найденное по градуировочному графику, мкг;
в — общий объем раствора пробы, мл;
б — объем раствора пробы, взятый для анализа, мл;
V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным условиям, л (см. Приложение 1).
Приложение 1
(справочное)
Приведение объема воздуха к условиям по ГОСТ 12.1.016-79 (температура 20 °С, давление 760 мм рт. ст.) проводят по следующей формуле:
V х (273 + 20) х Р
t
С = -------------------, (273 + t°) х 101,33
где:
V — объем воздуха, отобранный для анализа; t
Р — барометрическое давление, кПа; (101,33 кПа = 760 мм рт. ст.);
t° — температура воздуха в месте отбора пробы, °С.
Для удобства расчета V следует пользоваться таблицей коэффициентов t
(Приложение 2). Для приведения объема воздуха к температуре 20 °С и к давлению 760 мм рт. ст. надо умножить V на соответствующий коэффициент.
t
| °С | Давление Р, кПа (мм рт. ст.) | |||||||||
| 97,33 (730) | 97,86 (734) | 98,4 738) | 98,93 (742) | 99,46 (746) | 100,00 (750) | 100,53 (754) | 101,06 (758) | 101,33 (760) | 101,86 (764) | |
| -30 | 1,1582 | 1,1646 | 1,1709 | 1,1772 | 1,1836 | 1,1899 | 1,1963 | 1,2026 | 1,2058 | 1,2122 |
| -26 | 1,1393 | 1,1456 | 1,1519 | 1,1581 | 1,1644 | 1,1705 | 1,1763 | 1,1831 | 1,1862 | 1,1925 |
| -22 | 1,1212 | 1,1274 | 1,1336 | 1,1396 | 1,1458 | 1,1519 | 1,1581 | 1,1643 | 1,1673 | 1,1735 |
| -18 | 1,1036 | 1,1097 | 1,1159 | 1,1218 | 1,1278 | 1,1338 | 1,1399 | 1,1460 | 1,1490 | 1,1551 |
| -14 | 1,0866 | 1,0926 | 1,0986 | 1,1045 | 1,1105 | 1,1164 | 1,1224 | 1,1284 | 1,1313 | 1,1373 |
| -10 | 1,0701 | 1,0760 | 1,0819 | 1,0877 | 1,0986 | 1,0994 | 1,1053 | 1,1112 | 1,1141 | 1,1200 |
| -06 | 1,0640 | 1,0599 | 1,0657 | 1,0714 | 1,0772 | 1,0829 | 1,0887 | 1,0945 | 1,0974 | 1,1032 |
| -02 | 1,0385 | 1,0442 | 1,0499 | 1,0556 | 1,0613 | 1,0669 | 1,0726 | 1,0784 | 1,0812 | 1,0869 |
| 0 | 1,0309 | 1,0366 | 1,0423 | 1,0477 | 1,0535 | 1,0591 | 1,0648 | 1,0705 | 1,0733 | 1,0789 |
| +02 | 1,0234 | 1,0291 | 1,0347 | 1,0402 | 1,0459 | 1,0514 | 1,0571 | 1,0627 | 1,0655 | 1,0712 |
| +06 | 1,0087 | 1,0143 | 1,0198 | 1,0253 | 1,0309 | 1,0363 | 1,0419 | 1,0475 | 1,0502 | 1,0557 |
| +10 | 0,9944 | 0,9990 | 1,0054 | 1,0108 | 1,0162 | 1,0216 | 1,0272 | 1,0326 | 1,0353 | 1,0407 |
| +14 | 0,9806 | 0,9860 | 0,9914 | 0,9967 | 1,0027 | 1,0074 | 1,0128 | 1,0183 | 1,0209 | 1,0263 |
| +18 | 0,9671 | 0,9725 | 0,9778 | 0,9880 | 0,9884 | 0,9936 | 0,9989 | 1,0043 | 1,0069 | 1,0122 |
| +20 | 0,9605 | 0,9658 | 0,9711 | 0,9783 | 0,9816 | 0,9868 | 0,9921 | 0,9974 | 1,0000 | 1,0053 |
| +22 | 0,9539 | 0,9592 | 0,9645 | 0,9696 | 0,9749 | 0,9800 | 0,9853 | 0,9906 | 0,9932 | 0,9985 |
| +24 | 0,9475 | 0,9527 | 0,9579 | 0,9631 | 0,9683 | 0,9735 | 0,9787 | 0,9839 | 0,9865 | 0,9917 |
| +26 | 0,9412 | 0,9464 | 0,9516 | 0,9566 | 0,9618 | 0,9669 | 0,9721 | 0,9773 | 0,9755 | 0,9851 |
| +28 | 0,9349 | 0,9401 | 0,9453 | 0,9503 | 0,9955 | 0,9605 | 0,9657 | 0,9708 | 0,9734 | 0,9785 |
| +30 | 0,9288 | 0,9339 | 0,9391 | 0,9440 | 0,9432 | 0,9542 | 0,9594 | 0,9646 | 0,9670 | 0,9723 |
| +34 | 0,9167 | 0,9218 | 0,9268 | 0,9318 | 0,9368 | 0,9418 | 0,9468 | 0,9519 | 0,9544 | 0,9595 |
| +38 | 0,9049 | 0,9099 | 0,9149 | 0,9198 | 0,9248 | 0,9297 | 0,9347 | 0,9397 | 0,9421 | 0,9471 |