Методические указания по определению гетерофоса в растениях лаванды методом газожидкостной хроматографии
(утв. Минздравом СССР 14.07.1988 № 4670-88)
14 июля 1988 г. № 4670-88
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ГЕТЕРОФОСА В РАСТЕНИЯХ ЛАВАНДЫ МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ <*>
<*> Разработаны Ю.С. Барановым (ВНИИЭМК).
Краткая характеристика препарата приведена в Унифицированной методике.
Принцип метода. Метод основан на извлечении гетерофоса из измельченного растительного материала экстрагентом (смесь ацетона с 0,05 н хлоридом кальция в соотношении 1:1), перераспределении в н-гексан и определении методом ГЖХ с ТИД.
Метрологическая характеристика метода. Минимально детектируемое количество гетерофоса 0,1 нг. Нижний предел определений в растениях лаванды 0,01 мг/кг. Среднее значение определения 82,1%. Стандартное отклонение 5,7%. Доверительный интервал (p = 0,95, n = 9) +/- 4,6%.
Избирательность метода. Метод селективен в присутствии хлорорганических и фосфорорганических гербицидов, рекомендованных на лаванде.
Реактивы и растворы. Ацетон х.ч. н-Гексан ч. Сульфат натрия безводный ч. Хлорид кальция 0,05 н, ч. Хроматон N-супер (0,16 — 0,20 мм) с 5% SE-30. Хроматон N-супер (0,16 — 0,20 мм) с 5% XE-60. Стандартный раствор гетерофоса с содержанием 10 мкг/мл, срок хранения 6 мес.
Приборы и посуда. Хроматограф газовый с ТИД «Цвет-106», «Цвет-164» и др. Аппарат для встряхивания. Весы лабораторные. Ротационный вакуумный испаритель. Воронки делительные. Колбы: плоскодонные конические; грушевидные остродонные; мерные на 100 мл. Пипетки на 1 и 10 мл. Микрошприцы на 10 мкл МШ-10М.
Подготовка к определению. Органические растворители перед началом работы следует очистить по соответствующим методикам и перегнать, сульфат натрия прокалить при 300 — 400 °C. Хроматографическую колонку кондиционировать в течение 2 ч при режимных условиях.
Ход анализа. Свежесрезанные растения лаванды (50 г) гомогенизируют со 150 мл смеси ацетона с 0,05 н хлоридом кальция (1:1), встряхивают 30 — 40 мин. Смесь фильтруют через бумажный фильтр в колбу вместимостью 250 мл. Стакан гомогенизатора промывают трижды порциями по 20 мл смеси и через фильтр присоединяют смыв к основному фильтрату. Фильтрат переносят на делительную воронку вместимостью 500 мл, где экстрагируют гетерофос хлороформом (трижды порциями по 50 мл). Нижний слой собирают, высушивают, пропуская через 50 г безводного сульфата натрия, и упаривают досуха на ротационном испарителе при температуре бани 50 °C. Остаток растворяют в 1 мл ацетона и вводят в испаритель газового хроматографа.
Условия хроматографирования. Используют стеклянные колонны в форме спирали длиной 1 м с внутренним диаметром 3 мм. Расход газа-носителя 40 мл/мин., водорода — 30, воздуха — 150 мл/мин. Температура (°C): испарителя — 220, термостата колонок — 160. Хроматографируемый объем 2 мкл.
Линейный динамический диапазон 0,1 — 100 нг. Рабочая шкала -12 электрометра 100 x 10 А. Время удерживания гетерофоса на колонке с 3% SE-30 — 12 мм, с 5% XE-60 — 17 мм.
Обработка результатов анализа. Количество препарата в анализируемой пробе (X, мг/кг) рассчитывают по формуле:
HV
1
V — объем анализируемой пробы, мл; 1
V — объем инъектируемой пробы, мкл; 2
H — высота пика препарата в анализируемой пробе, мм;
K — калибровочный коэффициент, который определяют по формуле:
H H H
1 1 2 n
K = — (--- + --- + ... + ---),
n CV CV CV
1 2 n
H , H , H - высоты пиков стандартного раствора гетерофоса, 1 2 n
мм;
V , V , V - объемы стандартного раствора гетерофоса, вводимые 1 2 n
в хроматограф, мкл;
C — концентрация стандартного раствора гетерофоса, мкг/мл.
Содержание гетерофоса в пробах вычисляют как среднее из трех параллельных определений.
Требования безопасности. Следует руководствоваться правилами безопасности при работе с соединениями третьего класса токсичности и легколетучими растворителями.