Методические указания по определению дифенамида в воде методом тонкослойной хроматографии
(утв. Минздравом СССР 21.11.1985 № 4033-85)
21 ноября 1985 г. № 4033-85
МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ДИФЕНАМИДА В ВОДЕ МЕТОДОМ ТОНКОСЛОЙНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками Госагропрома СССР.
Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.
1. Характеристика анализируемого пестицида
Активное вещество дифенамида (синонимы: димид, зарур, ридеон, энид) — N,N,диметил-2,2-дифенилацетамид:
___
/ \
\\ //
─── O CH
\ || / 3
CH-C-N C H NO
___ / \ 16 17
─── CH
/ \ 3
\\ //
Молекулярная масса дифенамида — 239,26.
Дифенамид — белое кристаллическое вещество с темп. пл. 134,5 — 135,5 °С. Растворимость при 25 °С (г/л): в ацетоне — 190, в ксилоле — 50, диметилформамиде — 160, в воде — 0,26.
Используется в виде 80-процентного с.п. ЛД для белых крыс 2500 мг/кг, 50 для мышей 700 мг/кг, ПДК в воде — 1,2 мг/л.
Дифенамид активен против большого числа сорняков. Применяется в качестве почвенного гербицида для борьбы с сорняками в посевах томатов, перца, земляники, картофеля, табака и некоторых других культур.
2. Методика определения дифенамида в воде
2.1. Основные положения
2.1.1 Принцип метода
Метод основан на экстракции пестицида из воды хлороформом, концентрировании экстракта и хроматографировании его в тонком слое адсорбента.
Подвижным растворителем служит смесь н-гексана, ацетона и аммиака в соотношении 10:5:0,8.
Проявление хроматограмм осуществляют 1-процентным раствором фосфорномолибденовой кислоты в этаноле с последующим облучением УФ-светом.
2.1.2 Метрологическая характеристика метода
Диапазон определяемых концентраций — 1 - 10 мкг.
Предел обнаружения — 1 мкг, для воды — 0,05 мг/л.
Среднее значение определения стандартных количеств пестицида — 74,5%.
Стандартное отклонение — 9,1%.
Доверительный интервал среднего при альфа = 0,95, n = 5, с = 74,5 +/- 6,4.
Определению дифенамида могут мешать соединения, содержащие аминогруппу и имеющие близкое значение величины R . f
2.2. Реактивы и растворы
Аммиак, 25-процентный, ГОСТ 3760-64.
н-Гексан, ч., ТУ 6-09-3375-78.
Сульфат натрия, безводный, ч., ГОСТ 4166-76.
Спирт этиловый ректификат, 96-процентный, ТУ 6-09-1710-77.
Стандартный раствор дифенамида (концентрация 500 мкг/мл).
Растворяют 0,025 г х.ч. пестицида в 50 мл ацетона. Раствор устойчив в течение 1 месяца.
Пластинки «Силуфол» (ЧССР), размер 140 х 140 мм.
Фосфорномолибденовая кислота, х.ч., ТУ 6-09-3540-78. Готовят 1-процентный раствор в этиловом спирте. Расход реактива — 1 мл на 1 пластинку.
Хлороформ, ч.д.а., ГОСТ 20015-74.
2.3. Посуда и приборы
Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.
Воронка делительная емк. 250, 500 мл, ГОСТ 10054-75.
Испаритель вакуумный ротационный ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.
Камера для опрыскивания пластинок, ТУ 25-11-430-70.
Камера для хроматографирования, ГОСТ 10565-75.
Колбы круглодонные для отгонки растворителя, ГОСТ 10394-72.
Колбы мерные емк. 50 — 100 мл, ГОСТ 1770-74.
Лампа кварцевая ПРК-4, ПРК-7, ТУ 16-535-280-74.
Микропипетка на 0,1 мл с ценой деления 0,01 мл, ГОСТ 1770-74.
Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-74.
Цилиндры мерные, ГОСТ 1770-74, емк. 10, 25, 50, 250 мл.
2.4. Проведение определения
2.4.1. Экстракция. 200 мл воды (рН = 7,5) помещают в делительную воронку и трижды экстрагируют хлороформом порциями по 50 мл в течение 5 мин. каждый раз. Экстракты объединяют, пропускают через химическую воронку, заполненную безводным сернокислым натрием, упаривают на ротационном испарителе до 0,05 — 0,1 мл и количественно наносят на пластинку «Силуфол».
2.4.2 Хроматографирование
Экстракты с помощью пипетки наносят на пластинку для хроматографирования, рядом (на расстоянии 2 см) с пробами наносят
стандартный раствор дифенамида в количестве 3, 5, 10 мкг, что соответствует
6, 10, 20 мкл. Производят хроматографирование в смеси растворителей н-гексан, ацетон, аммиак = 10:5:0,8. Когда растворитель поднимется на высоту 10 см, пластинку вынимают, сушат и опрыскивают 1-процентным
раствором фосфорномолибденовой кислоты так, чтобы фон пластинки был светло-
зеленый. Тщательно сушат пластинку и облучают УФ-светом 5 - 10 мин. При наличии дифенамида в анализируемой пробе появляется пятно синего цвета, величина R которого равняется 0,35 - 0,37.
f
2.4.3 Обработка результатов анализа
Количественное определение производится путем сравнения площади пятна пробы и того стандарта, площадь которого наиболее близка по величине к площади пятна пробы. Измерение площадей осуществляется с помощью промасленной миллиметровой бумаги. Пропорциональная зависимость между площадью пятна и концентрацией препарата наблюдается в пределах от 1,0 до 10 мкг. При большем содержании препарата на пластинку наносят часть экстракта.
Содержание препарата в анализируемой пробе в мг/л (Х) рассчитывают по формуле:
А х S
2
где:
А — количество, мкг, стандартного раствора препарата;
S — площадь пятна стандартного раствора, кв. мм; 1
S — площадь пятна пробы, кв. мм; 2
Р — количество, мл, воды, взятой на анализ.
3. Требования техники безопасности
Соблюдать требования техники безопасности, обычно рекомендуемые для работы с органическими растворителями, УФ-светом.
4. Разработчики
Д.б.н. М.А. Клисенко, к.х.н. Н.И. Киселева, С.И. Гнед (ВНИИГИНТОКС).