Временные методические указания по определению триаллата методом газожидкостной хроматографии в воде, почве и зерне пшеницы

(утв. Минздравом СССР 21.11.1985 № 4032-85)

ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ОПРЕДЕЛЕНИЮ ТРИАЛЛАТА МЕТОДОМ ГАЗОЖИДКОСТНОЙ ХРОМАТОГРАФИИ В ВОДЕ, ПОЧВЕ И ЗЕРНЕ ПШЕНИЦЫ

Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.

Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.

Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками Госагропрома СССР.

Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.

1. Краткая характеристика вещества

Название по номенклатуре СЭВ, ИСО: триаллат.

Химическое название: S-(2,3,3-трихлораллил)-N,N-диизопропилтиокарбамат.

Структурная формула:

(CH ) CH
   3 2  \
         N-CO-SCH CCl=CCl
        /        2       2
(CH ) CH
   3 2

    Эмпирическая формула: C  H  NOCl S.
                           10 16    3

Молекулярная масса — 304,7.

Физико-химические свойства: светло-бурое кристаллическое вещество с неприятным запахом. Температура плавления — 29 — 30 °С; Т кип. — 165° при 6 мм рт. ст. Растворимость в воде — 4 мг/л (при 20 °С); растворяется в органических растворителях (ацетон, бензол, этанол и др.).

Применяется в качестве гербицида в посевах пшеницы, ячменя для уничтожения овсюга и в посевах льна против плевела льняного.

Малотоксичен для теплокровных, ЛД для крыс — 1340 мг/куб. м, не 50

опасен для пчел, токсичен  для  гидробионтов,  умеренно  стоек  во  внешней
среде,  в  почве  сохраняется  2  -  3 мес. Остатков в пищевых продуктах не

допускается.

2. Методика определения триаллата в воде, почве и зерне пшеницы методом газожидкостной хроматографии

2.1. Основные положения

2.1.1 Принцип метода

Метод основан на извлечении триаллата из воды и зерна пшеницы экстракцией органическими растворителями, из почвы — отгонкой с водяным паром с последующей экстракцией из водного дистиллята гексаном и газохроматографическом определении на приборе с детектором по захвату электронов. Количественное определение проводят по методу сравнения со стандартом.

2.1.2 Метрологическая характеристика метода

Диапазон определяемых концентраций для воды — 0,0001 — 0,4 мг/л, для почвы — 0,005 — 2 мг/кг, для зерна пшеницы — 0,0005 — 0,2 мг/кг.

Предел обнаружения — 0,0001 мкг.

Предел обнаружения: для воды — 0,0001 мг/л, для почвы — 0,005 мг/кг, для зерна пшеницы — 0,0005 мг/кг.

Среднее значение определения стандартных количеств триаллата в воде — 92,0%, в почве — 84,0%, в зерне пшеницы — 89%.

Число параллельных определений П = 6.

Стандартное отклонение для воды — 4,73%, для почвы — 6,36%, для зерна пшеницы — 5,5%.

Относительное стандартное отклонение для воды — 0,05, для почвы — 0,075, для зерна пшеницы — 0,062.

Доверительный интервал среднего в % при Р = 0,95 и n — 10 составляет для воды — 92,0 +/- 4,96, для почвы — 84,0 +/- 6,67; для зерна пшеницы — 89,0 +/- 5,8.

2.1.3 Избирательность метода

Определению не мешают пестициды ряда феноксиалканкарбоновых кислот (2,4-Д; 2,4-ДП; 2М-4Х и др.) и тиокарбаматы.

2.2. Реактивы и материалы

Триаллат с содержанием основного вещества не менее 98,5%.

Гексан, ч, ТУ 6-09-3375-78.

Сульфат натрия безводный, хч, ГОСТ 4166-76.

Толуол, хч, ГОСТ 5789-78.

Ацетонитрил, ч, ТУ 6-09-3534-74.

Ацетон, хч, ГОСТ 2603-79.

Оксид алюминия L 40/250 щелочной для колоночной хроматографии производства ЧССР.

Насадка для хроматографической колонки: хроматон N-AW-DMCS (фр. 0,20 — 0,25 мм) с 5% SE-30 фирмы «Хемапол».

2.3. Приборы, аппаратура и посуда

Хроматограф с детектором по захвату электронов.

Колонка стеклянная длиной 150 см, внутренним диаметром 8 мм.

Испаритель ротационный ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.

Колбы мерные, цилиндры, мензурки, ГОСТ 1770-74.

Колбы грушевидные для отгонки растворителя емкостью 100 мл.

Пипетки различной емкости, ГОСТ 20292-74.

Воронка делительная емкостью 500 — 1000 мл, ГОСТ 8613-75.

Пробирки градуированные со шлифом, ГОСТ 16515-75.

Воронки конусообразные, ГОСТ 8615-75.

Установка для отгонки с водяным паром (схема, см. рис. 1 — здесь и далее рисунки не приводятся).

Мельница лабораторная (кофемолка).

2.4. Подготовка к определению

Приготовление стандартных растворов.

Стандартный раствор триаллата № 1 с концентрацией 1 мг/мл готовят растворением навески 0,01 г в 10 мл толуола.

Стандартный раствор триаллата № 2 с концентрацией 1 нг/мкл готовят разбавлением 10 мкл раствора № 1 до 10 мл толуолом.

Стандартный раствор триаллата № 3 с концентрацией 0,1 нг/мкл готовится разбавлением 1 мл стандартного раствора № 2 до 10 мл толуолом.

Срок хранения растворов 10 дней.

2.5. Отбор пробы

Отбор пробы проводится в соответствии с «Унифицированными правилами отбора проб сельскохозяйственной продукции, продуктов питания и объектов окружающей среды для определения микроколичеств пестицидов», утвержденными Заместителем Главного государственного санитарного врача СССР за № 2051-79 от 21 августа 1979 г.

2.6. Проведение определения

Вода. Пробу воды (50 — 500 мл) помещают в делительную воронку и экстрагируют дважды гексаном порциями по 50 мл. Объединенные экстракты пропускают через коническую воронку с безводным сульфатом натрия (5 г). Фильтрат собирают в грушевидную колбу для отгонки и концентрируют с помощью ротационного испарителя (температура бани не выше 50°, остаточное давление 70 — 100 мм рт. ст.) до объема 0,5 — 1 мл, затем в токе воздуха — досуха. Остаток растворяют в 1 — 10 мл гексана и 2 мкл раствора хроматографируют.

Почва. Навеску почвы (10 — 50 г) помещают в круглодонную отгонную колбу, снабженную насадкой, добавляют 100 мл дистиллированной воды. Колбу устанавливают на нагревательный прибор и соединяют один отвод насадки с холодильником и далее с приемной колбой. Предварительно нагревают воду в парообразователе до кипения, затем соединяют парообразователь через водоотделитель с колбой для отгонки. Пар из парообразователя барботируют через суспендированную в воде почву. Триаллат извлекается водяными парами, которые конденсируются в холодильнике и поступают в приемник. Отгонку с паром прекращают, когда объем дистиллята достигнет 100 мл. Дистиллят из приемника переливают в делительную воронку и дальнейшую его обработку проводят так, как это описано выше для воды. Сконцентрированный досуха гексановый экстракт растворяют в 5 — 10 мл гексана и 2 мкл раствора хроматографируют.

Зерно пшеницы. Навеску зерна (10 — 20 г) измельчают, муку помещают в коническую колбу с притертой пробкой, заливают 20 мл ацетонитрила, встряхивают в течение 0,5 часа и отфильтровывают под вакуумом. Экстракцию повторяют свежей порцией ацетонитрила (20 мл). Экстракты после фильтрации пропускают через бумажный фильтр и концентрируют до 0,5 — 1 мл на ротационном испарителе при температуре бани не выше 50 °С, остаточном давлении 70 — 100 мм рт. ст., затем до отсутствия ацетонитрила — в токе воздуха. Маслянистый остаток очищают в стеклянной колонке диаметром 0,8 см, длиной 30 см, заполненной щелочным оксидом алюминия (высота слоя 10 см). До внесения экстракта колонку с оксидом алюминия промывают гексаном (10 мл). Остаток после концентрирования экстракта растворяют в 1 мл гексана и переносят в колонку. Колбу обмывают 3 раза 1 мл гексана и смыв также переносят в колонку. Растворитель отсасывают под вакуумом и пропускают 2 порции гексана со скоростью 100 — 120 кап./мин.: 80 мл отбрасывают, последующие 70 мл гексана собирают в отгонную колбу, элюат концентрируют до 0,5 — 10 мл и 2 — 5 мкл раствора хроматографируют.

Аликвоту полученных гексановых экстрактов хроматографируют на приборе с детектором по захвату электронов при следующих условиях: -11

рабочая шкала электрометра — 9 х 10 А;

скорость протяжки картограммы — 200 мм/ч;

колонка стеклянная длиной 150 см, диаметром 3 мм, заполненная хроматоном N-AW-DMCS (фр. 0,20 — 0,25 мм) с 5% SЕ-30;

температура термостата колонок — 170 °С, испарителя — 225 °С, детектора

• 220 °С;

расход газа-носителя через колонку — 40 мл/мин., через продувочную камеру детектора — 60 мл/мин.;

объем, вводимый в испаритель, — 2 мкл для почвы и воды, 2 — 5 мкл для зерна;

линейность детектирования — 0,0001 — 0,004 мкг;

Хроматографирование каждого экстракта проводят трижды, измеряют высоты пиков, вычисляют среднее значение высоты (рис. 2).

В этих же условиях хроматографируют 2 — 5 мкл (в зависимости от величины пика пробы) стандартного раствора триаллата № 3. Хроматографирование проводят трижды, вычисляют среднее значение высоты пика.

2.7. Обработка результатов анализа

Содержание триаллата в пробе (Х) в мг/кг (или мг/л) вычисляют по формуле:

                             А х Н   х V  х 100
                                  пр    2

Х = ------------------,

                              Н   х V  х Р х R
                               ст    1

где:

А — количество триаллата в хроматографируемом объеме стандартного раствора, нг;

    Н  ,  Н    -  средняя  высота  пика на хроматограммах растворов пробы и
     пр    ст

стандартного соответственно, мм;

V — объем аликвоты раствора пробы, вводимой в прибор, мкл; 1

V — общий объем раствора пробы, мл; 2

R — среднее значение определения стандартных количеств триаллата, найденное предварительно, %.

3. Требование безопасности

Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях, а также Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях (отделениях, отделах) санитарно-эпидемиологических учреждений системы МЗ СССР № 2455-81 от 20.10.81.

4. Разработчики

Пиленкова Инна Иосифовна

Юркова Римма Григорьевна

Всесоюзный научно-исследовательский технологический институт гербицидов и регуляторов роста растений (ВНИТИГ), г. Уфа.

---