Временные методические указания по хроматографическому измерению концентраций дозанекса, 3-хлор-4-метоксианилина, 3-хлор-4-метоксинитробензола в воздухе рабочей зоны
(утв. Минздравом СССР 21.11.1985 № 4017-85)
21 ноября 1985 г. № 4017-85
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИЙ ДОЗАНЕКСА, 3-ХЛОР-4-МЕТОКСИАНИЛИНА, 3-ХЛОР-4-МЕТОКСИНИТРОБЕНЗОЛА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками Госагропрома СССР.
Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.
Cl
CH O-// \\-HCON(CH ) М.м. 228,68. 3 \ ___ / 3 2
Дозанекс, синоним: метоксурон (действующее начало N'-(3-хлор-4-метоксифенил)-N,N-диметилмочевина) — белое кристаллическое вещество, температура плавления — 126 — 127 °С. Растворим в органических растворителях. Растворимость в воде — 678 мг/л.
Применяется в качестве гербицида на овощных и зерновых культурах.
Агрегатное состояние в воздухе — аэрозоль, пары.
ОБУВ в воздухе рабочей зоны — 1 мг/куб. м.
Cl
CH O-// \\-NH М.м. 157,6. 3 \ ___ / 2 3-хлор-4-метоксианилин - кристаллическое вещество светло-коричневого цвета, температура плавления - 62 °С. Хорошо растворим в органических растворителях. Практически не растворим в воде. На воздухе быстро
-3
окисляется. Давление пара — 3,38 х 10 мм рт. ст. при 20 °С. Летучесть — 29,9 мг/куб. м.
Применяется при производстве дозанекса, а также является его возможным продуктом разрушения.
Агрегатное состояние в воздухе — аэрозоль, пары.
Предельно допустимая концентрация в воздухе рабочей зоны не установлена.
Cl
CH O-// \\-NO М.м. 187,6. 3 \ ___ / 2
3-хлор-4-метоксинитробензол — кристаллическое вещество светлого цвета, температура плавления — 97 — 98 °С. Растворим в органических растворителях, практически не растворим в воде.
Применяется при производстве дозанекса.
Агрегатное состояние в воздухе — аэрозоль, пары.
I. Характеристика метода
1. Определение основано на хроматографировании веществ в тонком слое силикагеля (пластинки «Силуфол») в подвижной фазе на основе ацетона с последующим обнаружением зон локализации по реакции азосочетания либо с помощью нингидринового реагента.
2. Отбор проб с концентрированием (фильтры АФА-ХП, АФА-ХА, этанол).
3. Метрологическая характеристика метода дана в таблице.
| № п/п | Наименование характеристик | Вещества | ||
| дозанекс | 3-хлор-4-метоксианилин | 3-хлор-4-метоксинитробензол | ||
| 1 | 2 | 3 | 4 | 5 |
| 1. | Диапазон определяемых концентраций, мг/куб. м (пары, аэрозоль) | 0,5 — 10,0 | 0,5 — 10,0 | 0,5 — 10,0 |
| 2. | Предел обнаружения в воздухе (при отборе 60 л воздуха), мг/куб. м | 0,5 | 0,5 | 0,5 |
| 3. | Предел обнаружения в анализируемом объеме, мкг | 2 | 2 | 2 |
| 4. | Среднее значение определения стандартных количеств, % | 81,0 | 83,1 | 80,2 |
| 5. | Число параллельных определений | 9 | 9 | 9 |
| 6. | Стандартное отклонение, S, % | 5,9 | 5,5 | 5,8 |
| 7. | Относительное стандартное отклонение | 0,07 | 0,07 | 0,07 |
| 8. | Доверительный интервал среднего при Р = 0,95 и n = 1, % | 81,0 +/- 4,5 | 83,1 +/- 4,0 | 80,2 +/- 4,5 |
4. Определению не мешают вещества, используемые в синтезе дозанекса, другие замещенные анилина и нитробензола, а также гербициды, относящиеся к производным фенилмочевин. Анализируемые вещества (дозанекс, 3-хлор-4-метоксианилин и 3-хлор-4-метоксинитробензол) определению друг друга не мешают.
II. Реактивы, растворы, материалы
3-Хлор-4-метоксианилин 98-процентный.
3-Хлор-4-метоксинитробензол 98-процентный.
Спирт этиловый технический, ГОСТ 18300-72.
Кислота соляная, ч, ГОСТ 3118-77.
Олово двухлористое, ч, ГОСТ 36-78.
Натрий азотистокислый, хч, ГОСТ 4197-74.
Калий гидроксид, ГОСТ 6-01-301-74.
Нингидрин, чда, ТУ 6-09-2737-73.
Кислота уксусная ледяная, ГОСТ 18290-72.
Фильтры аэрозольные АФА-ХП-20 или АФА-ХА-20.
Пластинки для хроматографии «Силуфол», размер 150 х 150 мм.
Стандартный раствор дозанекса с содержанием 1 мг/мл готовят растворением навески 0,051021 г в 50 мл этилового спирта. Раствор устойчив в течение недели.
Стандартный раствор смеси 3-хлор-4-метиланилина и 3-хлор-4-метоксинитробензола с содержанием 1 мг/мл готовят растворением навески каждого компонента 0,051021 г в колбе и 50 мл этилового спирта.
Рабочие стандартные растворы с содержанием дозанекса 10 — 120 мкг/мл и смеси 3-хлор-4-метиланилина с 3-хлор-4-метоксинитробензолом до 10 — 120 мкг/мл каждого компонента готовят для построения градуировочной шкалы на пластинках «Силуфол».
III. Приборы и посуда
Аспирационное устройство, ТУ 64-1-862-77.
Поглотительные приборы Рыхтера (средняя модель), ТУ 25-11-1081-75.
Ротационный испаритель ИР-1М, ТУ 25-11-917-74.
Камеры хроматографические стеклянные, ГОСТ 10565-75.
Камеры для опрыскивания пластинок, ТУ 25-11-430-70.
Пульверизаторы стеклянные, ГОСТ 10391-74.
Микрошприцы МШ-10, ТУ 2-833-106.
Микропипетки емкостью 0,1 мл, ГОСТ 20292-74.
Пипетки различной емкости, ГОСТ 20292-74.
Колбы мерные, ГОСТ 1770-74.
Цилиндры, мензурки, ГОСТ 1770-74.
Пробирки градуированные с притертыми пробками емкостью 5 мл, ГОСТ 10515-75.
Колбы грушевидные для отгонки растворителя, ГОСТ 10394-72.
Химические стаканы емкостью 100 мл, ГОСТ 10394-72.
Воронки химические, ГОСТ 8613-75.
Баня водяная, ТУ 64-1-2850-76.
Баня со льдом (для отбора проб воздуха).
Сушильный шкаф, ТУ 64-1-1411-76.
Подвижная фаза № 1 (для хроматографирования дозанекса): смешивают хлороформ и ацетон в соотношении 18:3.
Подвижная фаза № 2 (для хроматографирования 3-хлор-4-метоксианилина и 3-хлор-4-метоксинитробензола): смешивают гексан и ацетон в соотношении 20:6.
Подвижные фазы готовят непосредственно в хроматографических камерах за 30 мин. до хроматографирования. Высота слоя растворителя не должна превышать 0,5 см.
Проявляющий реагент № 1: к смеси 46 мл воды и 4 мл концентрированной хлористоводородной кислоты добавляют 1 г азотистокислого натрия. Раствор готовят перед употреблением.
Проявляющий реагент № 2: к раствору 2,8 г гидроксида калия в 50 мл воды добавляют 0,1 г 1-нафтола. Реактив готовят перед употреблением.
Проявляющий реагент № 3 (нингидриновый): 0,3 г нингидрина растворяют в 100 мл н-бутанола и прибавляют 3 мл ледяной уксусной кислоты. Реактив устойчив в течение двух недель.
Проявляющий реагент № 4 (восстанавливающий): 10-процентный раствор двухлористого олова в концентрированной хлористоводородной кислоте. Раствор устойчив в течение месяца.
Растворы для стандартных пятен дозанекса: в шесть градуированных пробирок с помощью микрошприца или микропипетки вносят 0; 0,03; 0,06; 0,12; 0,24; 0,36 мл стандартного раствора дозанекса и доводят объем в каждой пробирке этиловым спиртом точно до 3 мл.
Растворы для стандартных пятен 3-хлор-4-метоксианилина и 3-хлор-4-метоксинитробензола: в шесть градуированных пробирок вносят 0; 0,03; 0,06; 0,12; 0,24; 0,36 мл стандартного раствора смеси этих веществ и доводят объем в каждой пробирке этиловым спиртом точно до 3 мл.
На двух пластинках «Силуфол» на расстоянии 15 мм от края намечают на линию старта.
На линию старта пластинки № 1 справа и слева от середины на расстоянии 15 мм друг от друга наносят по 0,2 мл раствора из пробирок с растворами для стандартных пятен дозанекса в виде отдельных пятен диаметром не более 10 — 12 мл. Эти пятна соответствуют 0; 2; 4; 8; 16; 24 мкг дозанекса.
На линию старта пластинки № 2 справа и слева от середины на расстоянии 15 мм друг от друга наносят по 0,2 мм раствора из пробирок с растворами для стандартных пятен смеси 3-хлор-4-метоксианилина и 3-хлор-4-метоксинитробензола в виде пятен диаметром не более 10 — 12 мм. Эти пятна соответствуют 0; 2; 4; 8; 16; 24 мкг каждого из компонентов смеси.
IV. Условия отбора проб воздуха
Воздух со скоростью 1 — 2 л/мин. аспирируют через последовательно соединенные аэрозольный фильтр, укрепленный в фильтродержателе, и поглотительный прибор Рыхтера, установленный в ледяную баню и заполненный 10 мл этилового спирта в качестве поглотительного раствора. Для определения 1/2 ОБУВ достаточно отобрать 60 л воздуха. Пробы можно хранить в течение недели.
V. Условия анализа
Аэрозольный фильтр извлекают из фильтродержателя, помещают в химический стакан и экстрагируют этиловым спиртом четырьмя порциями по 10 мл, выдерживая каждый раз по 3 — 4 мин. Экстракты сливают в грушевидную колбу. В эту же колбу сливают этиловый спирт из поглотительного прибора. Прибор обмывают дважды этиловым спиртом порциями по 3 — 5 мл, смывы также сливают в грушевидную колбу. Отгоняют растворитель на ротационном испарителе до объема 2,5 мл. Этот раствор переносят в градуированную пробирку и доводят объем этиловым спиртом точно до 3 мл.
По 0,2 мл полученного раствора наносят на середину линий старта пластинок № 1 и № 2, на которые предварительно были нанесены соответствующие стандартные пятна (см. раздел III). Диаметр пятен не более 10 — 12 мм.
Пластину № 1 помещают в хроматографическую камеру с подвижной фазой № 1; пластину № 2 — в камеру с подвижной фазой № 2.
Хроматограммы развивают на высоту 10 см, вынимают из камер, подсушивают на воздухе в вытяжном шкафу.
Зоны локализации дозанекса на пластинке № 1 обнаруживают одним из двух способов:
а) нагревают пластину в сушильном шкафу при температуре 120 °С в течение 3 — 5 мин., охлаждают до комнатной температуры и обрабатывают из пульверизатора сначала проявляющим реагентом № 1, а затем проявляющим реагентом № 2. Дозанекс обнаруживают в виде светло-коричневого пятна на сером фоне;
б) обрабатывают пластинку проявляющим реагентом 3, а затем нагревают в сушильном шкафу при температуре 120 °С в течение 5 — 10 мин. Дозанекс обнаруживают в виде сиреневого пятна на светлом фоне.
Значение R дозанекса — 0,40. Окраска пятен устойчива. f
Зоны локализации 3-хлор-4-метоксинитробензола и 3-хлор-4-метоксианилина на пластинке N 2 обнаруживают следующим образом:
пластинку с помощью пульверизатора орошают проявляющим реагентом № 4, затем
нагревают в сушильном шкафу при температуре 120 °С в течение 20 мин., охлаждают до комнатной температуры и орошают последовательно проявляющими реагентами N 1 и N 2. 3-хлор-4-метоксианилин и 3-хлор-4-метоксинитробензол (восстановленный до соответствующего амина) обнаруживают в виде красновато-коричневых пятен с R = 0,20 и 0,40 соответственно. Окраска
f
пятен устойчива.
Для количественных расчетов из стандартных пятен на пластинах № 1 и № 2 выбирают пятна, близкие пятнам соответственно дозанекса, 3-хлор-4-метоксианилина, 3-хлор-4-метоксинитробензола по интенсивности окраски и размерам. Измеряют с помощью прозрачной миллиметровой бумаги или другим способом площади этих пятен и пятен пробы.
Концентрацию дозанекса, 3-хлор-4-метоксианилина и 3-хлор-4-метоксинитробензола (Х) в мг/куб. м вычисляют по формуле:
G х S х V
пр 1
S х V х V
ст 20
где:
G — количество вещества в стандартном растворе, мкг;
S — площадь пятна на хроматограмме пробы, кв. мм; пр
S — площадь пятна на хроматограмме стандарта, кв. мм; ст
V — объем хроматографируемой пробы, мл;
V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным 20 условиям.
VI. Требования безопасности
Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях, а также Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях санитарно-эпидемиологических учреждений системы Минздрава СССР (N 2455-81, 20.10.81).
VII. Разработчики
Пиленкова И.И., Юркова Р.Г., Фатьянова А.Д. (Всесоюзный НИ технологический институт гербицидов и регуляторов роста растений — ВНИТИГ, г. Уфа).