Временные методические указания по хроматографическому и газохроматографическому измерению концентрации лонтрела в воздухе рабочей зоны
(утв. Минздравом СССР 21.11.1985 № 4016-85)
21 ноября 1985 г. № 4016-85
ВРЕМЕННЫЕ МЕТОДИЧЕСКИЕ УКАЗАНИЯ ПО ХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ И ГАЗОХРОМАТОГРАФИЧЕСКОМУ ИЗМЕРЕНИЮ КОНЦЕНТРАЦИИ ЛОНТРЕЛА В ВОЗДУХЕ РАБОЧЕЙ ЗОНЫ
Настоящие Методические указания предназначены для санитарно-эпидемиологических станций и научно-исследовательских учреждений Минздрава СССР, а также ветеринарных, агрохимических, контрольно-токсикологических лабораторий Агропрома СССР и лабораторий других министерств и ведомств, занимающихся анализом остаточных количеств пестицидов и биопрепаратов в продуктах питания, кормах и внешней среде.
Срок действия временных методических указаний устанавливается до утверждения гигиенических регламентов.
Методические указания апробированы и рекомендованы в качестве официальных Группой экспертов при Госкомиссии по химическим средствам борьбы с вредителями, болезнями растений и сорняками Госагропрома СССР.
Методические указания согласованы и одобрены отделом перспективного планирования санэпидслужбы ИМПиТМ им. Марциновского Е.И. и Лабораторным советом при Главном санитарно-эпидемиологическом управлении Минздрава СССР.
// \ Cl
// \/
| М.м. 192,1. |
|---|
/\\ /\
Cl \\ / C-OH
| N |
|---|
O
Лонтрел, 3,6-дихлорпиколиновая кислота (синонимы - ДХПК, Дауков 290). Белое кристаллическое вещество без запаха. Растворимость в г/кг: в воде - 1, ацетоне - 250, ксилоле - 250, метаноле - 250 при 20 °С. Температура
-5
плавления 151 — 152 °С, давление пара 1,2 х 10 мм рт. ст. при 25 °С. В обычных условиях устойчиво, с органическими и неорганическими основаниями образует хорошо растворимые в воде соли.
Выпускается в виде водного раствора соли с этиламином с содержанием кислоты 100 и 300 г/л, а также в виде смесей с некоторыми пестицидами. Применяется в качестве послевсходового гербицида в посевах зерновых злаков, сахарной свеклы и др.
Расчетная предельно допустимая концентрация в воздухе рабочей зоны — 12 мг/куб. м (для 34% техн. р-ра) или 3,5 мг/куб. м по д.в. По экспериментальным данным предлагается — 2 мг/куб. м (по действ. вещ.). Агрегатное состояние технического препарата в воздухе — пары и аэрозоль.
I. Характеристика метода
1. Определение основано на: 1) газохроматографическом определении метилового эфира 3,6-ДХПК с детектором постоянной скорости рекомбинации на неподвижной фазе SE-30 (5/%) после аспирационного отбора пробы воздуха и переведении сухого остатка 3,6-ДХПК в ее метиловый эфир; 2) хроматографировании в тонком слое силикагеля с помощью подвижной фазы: гексан — бензол — уксусная кислота (10:2:3) с последующим обнаружением зоны локализации смесью растворов бромфенолового синего и азотнокислого серебра.
2. Отбор проб проводится с концентрированием (фильтр «синяя лента», ацетон).
3. <a id="p100014"></a>Предел обнаружения:
ГЖХ — 1 нг при метилировании диметилсульфатом;
0,03 нг при метилировании диазометаном в 3 мкл;
4. Предел измерения в воздухе:
ГЖХ — 0,0006 мг/куб. м (проба воздуха 3 л);
ТСХ — 0,07 мг/куб. м (проба воздуха 30 л).
5. Диапазон измеряемых концентраций:
6. Определению не мешает наполнитель технического препарата. Методы избирательны в присутствии пиклорама, ХОП (гамма-ГХЦГ), 2,4-Д; 2М-4Х и других гербицидов класса феноксиалканкарбоновых кислот.
7. <a id="p100025"></a>Граница суммарной погрешности измерения: ГЖХ - +/- 18,7%;
II. Реактивы, растворы, материалы
3,6-Дихлорпиколиновая кислота, х.ч.
Бумажный беззольный фильтр «синяя лента», ТУ-6-09-1678-77.
Диэтиловый эфир, х.ч., ГОСТ 6262-79.
Метанол, х.ч., ГОСТ 6995-77.
Метиламин хлоргидрата, ТУ 6-09-3755-74.
Мочевина, ч.д.а., ГОСТ 6691-77.
Натрий хлористый, ч.д.а., ГОСТ 4233-77.
Гидроокись калия (таблетированная).
Серная кислота, х.ч., ГОСТ 4204-77.
Натрий азотистокислый, ч.д.а., ГОСТ 4197-74.
Натрий углекислый, х.ч., ГОСТ 83-79.
Натрий сернокислый безводный, х.ч., ГОСТ 4166-76.
Нитрозометилмочевина, готовится по прописи, изложенной далее.
Носитель-хроматон N-АW-НМД, 0,200 — 0,250 мм, с 5% SE-30.
Бензол, ГОСТ 5955-75.
Спирт этиловый 96-процентный, ТУ 6-09-1710-77.
Уксусная к-та ледяная, ГОСТ 18290-72.
Бромфеноловый синий, ТУ 6-09-1058-76.
Азотнокислое серебро, ГОСТ 1277-75.
Аскорбиновая кислота, ГОСТ 4815-76.
Подвижная фаза: гексан — бензол — уксусная к-та (10:2:3).
Стандартный р-р 3,6-дихлорпиколиновой кислоты: 1, 10, 100 и 1000 мкг/мл. Срок хранения растворов — 10 суток (+4 °С).
Стандартный раствор метилового эфира: 3,6-дихлорпиколиновой к-ты, содержащий 1, 10 мкг/мл.
Диазометан газообразный или диметилсульфат, 5-процентный р-р в абсолютном метиловом спирте.
Азот газообразный особой чистоты, ГОСТ 9293-74.
Проявляющий реагент № 1: смесь 0,4% спиртного раствора бромфенолового синего и 2% водного р-ра азотнокислого серебра (1:1). Реактив должен быть свежеприготовленным.
Проявляющий реагент № 2: 2-процентный водный раствор аскорбиновой кислоты.
III. Приборы и посуда
Электроаспиратор для отбора проб воздуха, ТУ 64-1-862-77, модель 882.
Поглотительные приборы с пористой пластинкой № 1 или прибор Рыхтера, ТУ 25-11-1081-75.
Испаритель ротационный ИР-1М, ТУ 25-11-917-76.
Колбы мерные, цилиндры, ГОСТ 1770-74.
Колбы грушевидные на 50, 100 мл, ГОСТ 10394-72.
Пипетки на 1, 5, 10 мл, ГОСТ 20292-74.
Микрошприцы на 10 мкл МШ-10, ТУ 5Е-2.883.0.24.
Хроматограф с детектором постоянной скорости рекомбинации (ДПР) марки «Цвет», «Газохром» и др.
Нагреватель — электрическая плитка, ГОСТ 306-76.
Водоструйный насос стеклянный, ГОСТ 10696-75.
Холодильник шариковый, длина 300 мм.
Воронка Бюхнера РФ 3 120 мл, ГОСТ 9147-73.
Колонка стеклянная длиной 2 м, внутренний диаметр 3 мм.
Хроматографическая камера, ГОСТ 10565-75.
Пульверизатор стеклянный, ГОСТ 10391-74.
Хроматографические пластинки «Силуфол» (ЧССР), 150 x 150 мм.
IV. Условия отбора проб воздуха
Отбор проб препарата в капельно-жидком состоянии производится на фильтры «синяя лента» со скоростью протягивания воздуха 5 — 10 л/мин. Отобрать 30 — 50 л воздуха.
В парообразном состоянии воздух протягивается через 3 последовательно соединенных поглотителя, наполненных 10 — 15 мл свежеперегнанного ацетона, со скоростью 0,2 л/мин.
Для определения 1/2 ПДК 3,6-ДХПК методом ГЖХ достаточно отобрать 0,2 л воздуха, а при анализе методом ТСХ объем пробы воздуха — 30 л.
Длительность хранения сухого остатка проб воздуха — 5 - 7 суток. Хранить в холодильнике при +4 °С.
V. Условия анализа
Из фильтра "синяя лента" 3,6-дихлорпиколиновую к-ту извлекают ацетоном 2 раза по 20 мл при периодическом встряхивании в течение 10 мин., экстракт ацетона объединяют (N 1). Объединяют также экстракт и из поглотительных приборов (N 2). Экстракты сушат над б/в Na SO и упаривают досуха. 2 4
При определении 3,6-ДХПК методом ГЖХ сухой остаток метилируется диазометаном или диметилсульфатом, при методе определения ТСХ — сухие остатки растворяются в 0,1 мл этилового спирта.
1. Условия анализа методом ГЖХ
Нитрозометилмочевину получают следующим способом: в круглодонную стеклянную колбу помещают 1,5 моля хлоргидрата метиламина, 5 молей мочевины и 400 мл дистиллированной воды. Соединяют колбу с обратным холодильником и нагревают на глицериновой бане при температуре 120 °С в течение 3 часов. Колбу отсоединяют и переносят содержимое в химический стакан емкостью 2000 мл. Добавляют 1,6 моля азотистокислого натрия. Смесь охлаждают в емкости со льдом и поваренной солью до -10 °С. Медленно при постоянном перемешивании приливают 100 г конц. серной к-ты. Выпавшие в виде сметанообразной массы нитросоединения помещают на бумажный фильтр воронки Бюхнера, фильтруют с водоструйным насосом и промывают дистиллированной ледяной водой. Полученная нитрозометилмочевина хорошо высушивается в эксикаторе над таблетированным KOH до постоянного веса и используется для получения диазометана. Вещество хранить в банке из темного стекла с притертым шлифом в холодильнике (+4 °С).
Метилирование сухого остатка 3,6-ДХПК можно проводить диазометаном и диметилсульфатом.
Методика метилирования диметилсульфатом утверждена заместителем Главного государственного санитарного врача СССР, № 1541-76 от 20.12.1976, и опубликована в сборнике «Методические указания по определению микроколичеств пестицидов в продуктах питания, кормах и внешней среде», часть VIII, М., 1977 г., с. 124.
Метилирование диазометаном: при реакции нитрозометилмочевины с гидроокисью калия полученный диазометан сразу же участвует в процессе метилирования. Для этого в реакционную емкость прибора помещают 0,5 г нитрозометилмочевины, 5 мл диэтилового эфира и 5 мл метанола. Выходную трубку реакционного прибора погружают в приемник-концентратор, где сухой остаток 3,6-ДХПК растворен в 0,5 мл метанола и 4 мл диэтилового эфира. Растворители свежеперегнанные. В реакционную емкость по каплям приливается 10 — 15 мл 40% гидроокиси калия. При реакции образующийся диазометан пропускается через раствор в приемник за 15 мин. Раствор, насыщенный диазометаном, приобретает желтый цвет. Концентратор закрывается стеклянной пробкой со шлифом и выдерживается не менее 30 мин.
Метилированную пробу испаряют досуха, растворяют сухой остаток в 1 мл ацетона или этилового спирта (в зависимости от растворителя стандартов) и хроматографируют.
Ввод пробы в хроматограф — через самоуплотняющуюся мембрану.
Объем вводимой пробы — 3 мкл. -12
Шкала электрометра — 50 — 10 А.
Хроматографические параметры на неподвижной фазе SE-30:
скорость газа-носителя — 30 мл/мин.;
скорость диаграммной ленты — 200 мм/час;
время удерживания 3,6-ДХПК — 1,1 мин.
Количественное определение проводят методом расчета по соотношению «площадь пика — концентрация» при вводе до и после анализа проб стандартного раствора.
2. Условия анализа методом ТСХ
Раствор пробы (0,1 мл) с помощью микропипетки или микрошприца наносят на пластинку "Силуфол". Рядом с пробой наносятся стандартные растворы. Стенки колбы смывают несколькими каплями растворителя, который наносят в
центр пятна. Пластинку помещают в хроматографическую камеру, предварительно
заполненную подвижной фазой. После подъема фронта на 10 см пластинку вынимают из камеры, сушат на воздухе в вытяжном шкафу, опрыскивают сначала проявляющим р-ром N 1, а затем раствором N 2. 3,6-ДХПК обнаруживается на сером фоне в виде желтого пятна, которое постепенно становится черным. Значение R = 0,3. Черная окраска пятен устойчива.
f
Количественное определение 3,6-ДХПК в анализируемой пробе проводится при сравнении площади пятен с пятнами стандарта с помощью прозрачной миллиметровой бумаги.
Линейная зависимость соблюдается в интервале от 2 до 20 мкг.
Концентрация препарата (Х) в мг/куб. м в воздухе вычисляют по формуле:
G х S х V
пр 1
S х V х V
ст 20
G — количество препарата в стандартном растворе, введенном в хроматограф, мкг;
G — количество препарата, найденное в хроматографическом объеме пробы, 1 мкг;
S — площадь пика на хроматограмме стандарта, кв. мм; ст
S — площадь пика на хроматограмме пробы, кв. мм; пр
V — хроматографируемый объем пробы, мл;
V — объем воздуха, отобранный для анализа и приведенный к стандартным 20 условиям, л.
VI. Требования безопасности
Соблюдать все необходимые требования безопасности при работе в химических лабораториях, а также Правила устройства, техники безопасности, производственной санитарии, противоэпидемического режима и личной гигиены при работе в лабораториях санитарно-эпидемиологических учреждений системы Минздрава СССР (N 2455-81, 20.10.1981).
VII. Разработчики
Баркене М.Ю., Раманаускене В.В., Вайтекунене Д.Ю. (НИИЭМГ Минздрава Литовской ССР, г. Вильнюс), Пиленкова И.И., Юркова Р.Г., Фатьянова А.Д. (Всесоюзный НИ технологический институт гербицидов и регуляторов роста растений — ВНИТИГ, г. Уфа).